一种用于保护游离dna的血液抗凝剂及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种保护血液样品的抗凝剂，具体是一种用于保护游离DNA的血液抗 凝剂。
【背景技术】
[0002] 不同用途的采血管中含有不同的添加剂或附加物。主要包括抗凝剂和促凝剂等， 添加剂可以是液体状态、溶液干燥物、冷冻干燥物、粉状等。
[0003] 在临床中，由于肝素会抑制PCR过程，所以一般使用EDTA(包括乙二胺四乙酸二 钾、乙二胺四乙酸三钾、乙二胺四乙酸二钠）、枸橼酸钠进行血液的抗凝，抗凝血经过离心 后，获得的血浆再进行后续研宄。
[0004] 抗凝后的血液通过离心，可获得血浆。血浆DNA已经成为临床上重要的样本。主 要用于两方面的研宄，一是产前诊断，二是肿瘤相关标志物、特异性靶标的检测。
[0005] 在产前诊断中通过对男胎孕妇血细胞、血衆和血清中Y-chromosomal的检测， 80%的孕妇的血浆和血清中能检测到胎儿源性的DNAi，且血浆DNA的灵敏度和准确性更 高。而在未怀孕的女性中，均不能检测出Y-chromosomal基因，三者的特异性一致。
[0006] 北京肿瘤医院王洁教授2009年的一项研宄iimiv分析血浆DNA样本EGFR19外 显子和21外显子的突变状态，比较了血浆样本和肿瘤组织的突变状态，并确定了EGFR突变 情况和病人临床预期结果的关联性。肿瘤患者的血浆样本与肿瘤组织的突变状态的一致性 为87%，明确了如果无法获得患者的肿瘤组织的情况下，血浆样本可用于临床肿瘤突变状 态分析。
[0007] 虽然血浆DNA可用于临床的预后及检测等方面，但是在临床过程中，由于实验条 件的限制或实验时间的限制，无法在得到血液后第一时间分离血浆，血液中的细胞破裂、血 浆中的DNA降解，造成无法进行后续实验或实验结果的假阴性，从而无法为临床提供有价 值的信息。
[0008] 有鉴于此，确有必要提供一种可有效防止细胞破裂，血浆游离DNA降解，为血浆提 供稳定的环境，延长血液的保质期的血液抗凝剂，以减少对后续检验检测的干扰检测。
【发明内容】
[0009] 本发明的目的在于提供一种可有效防止细胞破裂，血浆游离DNA降解，为血浆提 供稳定的环境，延长血液的保质期，避免游离DNA降解的血液抗凝剂。
[0010] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0011] 一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，按重量体积比（w/v)计，包括以下组分：
[0012]
【主权项】
1. 一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，其特征在于，所述抗凝剂按重量体积比包 括：甲醛释放剂0. 1~1. 5%，抗凝剂0. 15~0. 22%，嘌呤0. 014~0. 035g/l，磷酸二氢盐 0.01%~0· 15%，氯化盐0.4%~0· 10%，核酸酶抑制剂0.3~L4%。
2. 如权利要求1所述的一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，其特征在于：所述甲醛 释放剂为1，3-二羟甲基-5, 5-二甲基海因，羟甲基甘氨酸钠，尼泊金甲酯钠，尼泊金乙酯钠 或尼泊金丙酯钠中的至少一种。
3. 如权利要求1所述的一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，其特征在于：所述抗凝 剂为乙二胺四乙酸二钾、乙二胺四乙酸三钾、乙二胺四乙酸二钠或枸橼酸钠中的至少一种。
4. 如权利要求1所述的一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，其特征在于：所述嘌呤 为腺嘌呤、鸟嘌呤中的至少一种。
5. 如权利要求1所述的一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，其特征在于：所述磷酸 二氢盐为磷酸二氢钠。
6. 如权利要求1所述的一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，其特征在于：所述氯化 盐为氯化钠、氯化钾或氯化铵中的至少一种。
7. 如权利要求1所述的一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，其特征在于：所述核酸 酶抑制剂为尿素、DEPC、SDS或异硫氰酸胍的至少一种。
8. -种用于保护游离DNA的血液抗凝剂，其特征在于：按重量体积比计，包括以下组 分： 1，3-二羟甲基-5, 5-二甲基海因0. 8%，乙二胺四乙酸二钾0. 18%，腺嘌呤0. 027g/l， 磷酸二氢钠〇. 090 %，氯化钠0. 498 %，尿素0. 7 %。
【专利摘要】本发明公开了一种用于保护游离DNA的血液抗凝剂。所述抗凝剂按重量体积比(W/V)包括：甲醛释放剂占0.1～1.5％，抗凝剂占1.5～2.2g/L，嘌呤占0.014～0.035g/L，磷酸二氢盐占0.01％～0.15％，氯化盐占0.4％～1.0％，核酸酶抑制剂占0.3～1.4％。本发明是一种可有效防止细胞破裂，并减缓血浆中游离DNA的降解，为血浆提供稳定的环境，延长血液的稳定性的血液保护剂，避免由于血液变质、DNA降解而影响后续的检测。
【IPC分类】C12N15-10
【公开号】CN104830830
【申请号】CN201510132774
【发明人】刘云芬, 林清华, 蔡阿莎, 宋庆涛, 郑立谋
【申请人】厦门艾德生物医药科技有限公司
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年3月25日