一种淡水养殖用微生态净水剂及制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种淡水养殖用微生态净水剂及制备方法，属于水产养殖中的生物技术领域。
【背景技术】
[0002]水产微生态制剂，是利用鱼虾蟹等动物体内或养殖水体中的有益微生物或促进物质经特殊加工工艺而形成的活菌制剂。可用于水体中微生态调控、净化水质，能产生生物效应或生态效应，也可用于调整或维持动物肠道内微生态平衡，达到预防疾病、促进水产动物健康生长的目的。自二十世纪中叶以来，随着养殖业的发展，抗生素、喹乙醇、喹若酮等药物饲料添加剂在世界范围内得到广泛应用。该药物饲料添加剂在防治疾病、促进动物生长等方面作用十分明显，但由此产生的副作用以及引起病原菌产生抗药性、毒性、“三致”(致畸、致癌、致突变)等弊端也逐渐显露出来。残毒、污染环境、威胁人类健康的问题现已成为世界各国养殖工作者和卫生工作者十分关注的热点。随着动物微生态制剂在畜牧等方面上的广泛应用，在水产业上的应用也越来越引起人们的重视，其良好的效果已被大量的实验和生产实践所证实。微生态制剂具有投入小、收益大、无残毒、无抗药性、不污染环境等优点，充分显示了利用微生态防治技术的优越性，它必然成为二十一世纪水产养殖业的发展方向。
[0003]关于淡水养殖用微生态制剂的研宄和应用，国内外已进行了大量的研宄工作，概括起来主要集中在利用单一菌剂或复合菌剂改善养殖水体水质，或防止水产动物的某些疾病。国内专利 CN101717724 A，CN101735951 A，CN101878858 A，CN1498865A，CNlOl 147529A，CN1594551A，CN101376877A，CN101629157A等分别公开了用于水产养殖水体净化、修复养殖水环境修复、净化水质的复合微生态制剂及制备方法，虽然这些方法除了具有可以降低养殖水体中的有机污染物、氨氮、亚硝酸盐、COD、BOD含量等，还具有可以促进有益藻类繁殖、提高养殖体的抗病能力的功效，但这些专利产品存在生产工艺复杂、产品菌种存活率低、能耗和成本高、使用效果不稳定等缺点。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是:针对上述现有技术的不足，提供一种淡水养殖用微生态净水剂及制备方法，该产品能有效分解淡水养殖水体中的大分子有机物，降低水体中氨氮、硝态氮含量，且具有生产工艺简单、成本和能耗低、有效活菌数高、适应性强、易于批量生产的特点，解决了目前市场上水产用微生态制剂存在的产品质量不稳定、使用效果不理想、有效活菌数存活率低及生产成本高等问题。
[0005]为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是:一种淡水养殖用微生态净水剂及制备方法，该方法包括以下几个步骤:
(O摇瓶种子制备:将枯草芽孢杆菌I株接种一环斜面菌种细胞于液体扩大肉汤营养培养基中，在30°C -37°c，180r/min-220r/min条件下，摇床振荡培养16_24h，使该种子培养液中菌体浓度达到108-109cfU/mL ;将侧胞芽孢杆菌I株接种一环斜面菌种细胞于侧胞芽孢杆菌液体培养基中，35 °C -37 °C，180r/min-220r/min条件下，摇床振荡培养24_36h，使该种子培养液中菌体浓度达到107-108cfu/mL ;将嗜酸乳杆菌I株接种一环斜面菌种细胞于嗜酸乳杆菌液体培养基中，35°C _37°C，静置培养20-30h，使该种子培养液中菌体浓度达到17-1O8CfVmL ;将酿酒酵母I株接种一环斜面菌种细胞于酵母液体培养基中，在280C -30°C，180r/min-220r/min条件下，摇床振荡培养24_36h，使该种子培养液中菌体浓度达到 108-109cfu/mL ；
(2 )发酵料制备:按重量百分比取麦麸80%-85%、玉米粉10%-18%、葡萄糖1%_2%、(NH4) 2S041.5%-2%、KH2PO40.1-0.3%、MgSO4.7H20 0.05-0.15%，混合均匀，调节含水重量为50%-55%，于121°C条件下灭菌60min，冷却至室温后，得到固体培养基；
(3)于上述固体培养基中分别按15-20%接种重量接入液体种子，充分混合，置于消毒的发酵浅盘中，上盖塑料薄膜，28-30°C发酵2-3d，再于45-60°C干燥6_8h，粉碎而成；
(4)取枯草芽孢杆菌发酵料3-5份、侧胞芽孢杆菌发酵料3-5份、酵母菌发酵料2-4份、嗜酸乳杆菌发酵料6-10份、净水促进剂50-80份，充分混合均匀，即得成品。
[0006]本发明中用到的菌种均为现有技术，保藏号分别为:枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis):ACCC11062、CGMCC2548、或 CGMCC1222 ;侧胞芽孢杆菌(BaciIIus Iateraporus):CGMCC1755 或 CGMCC9701 ;嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus):CICC6074、ACCC11073 或 CGMCC 1.2467 ;酵母属酵母菌(Saccharomyces SP.):CGMCC 1147、CGMCC 0702 或CGMCC 0133ο
[0007]与现有技术相比，本发明具有以下优点:
(1)本发明的淡水养殖用微生态净水剂及制备方法能持久使淡水养殖水体中的有机污染物、氨氮、硝态氮、COD和BOD的含量明显降低；
(2)本发明方法所使用的菌种包括了好养菌和厌氧菌，既可降低好氧水体环境中各种有害物质的含量，也可降降解如底泥等厌氧环境中残留的饲料及水产动物的粪便，从而改善水质；
(3)本发明方法与现有生产工艺相比，具有生产工艺简单、能耗低、产品质量稳定、无三废和易于规模化生产等特点；
(4)本发明方法使用的净水促进剂一草炭或聚丙烯酰胺或沸石粉，可以有效的去除养殖水体中各种悬浮物、COD和BOD等，有利于微生物对养殖水体的快速净化。
【具体实施方式】
[0008]以下实施例对本发明作进一步说明。
[0009]实施例1
本实施例1所用的菌种为枯草芽孢杆菌I株、侧胞芽孢杆菌I株、嗜酸乳杆菌I株以及酵母属酵母菌I株:
(I)摇瓶种子制备:将枯草芽孢杆菌I株接种一环斜面菌种细胞于液体扩大肉汤营养培养基中，在32°c，180r/min条件下，摇床振荡培养20h，使该种子培养液中菌体浓度达到2X109cfu/mL ;将侧胞芽孢杆菌I株接种一环斜面菌种细胞于侧胞芽孢杆菌液体培养基中，35°C，200r/min条件下，摇床振荡培养24h，使该种子培养液中菌体浓度达到1.7 X 18Cfu/mL ;将嗜酸乳杆菌I株接种一环斜面菌种细胞于嗜酸乳杆菌液体培养基中，37°C，静置培养30h，使该种子培养液中菌体浓度达到3.2X108cfu/mL ;将酿酒酵母I株接种一环斜面菌种细胞于酵母液体培养基中，在28°C，220r/min条件下，摇床振荡培养24h，使该种子培养液中菌体浓度达到4.1 X 109cfu/mL ；
(2)发酵料制备:按重量百分比取麦麸85%、玉米粉11.2%、葡萄糖2%、(NH4) 2S041.5%、KH2PO40.15%、MgSO4.7H20 0.15%，混合均匀，调节含水重量为52%，于121 °C条件下灭菌60min，冷却至室温后，得到固体培养基；
(3)于上述固体培养基中分别按15%接种重量接入液体种子，充分混合，置于消毒的发酵浅盘中，上盖塑料薄膜，30°C发酵3d，再于50°C干燥8h，粉碎而成；
(4)取枯草芽孢杆菌发酵料5份、侧胞芽孢杆菌