一种木霉菌高效产孢培养基及培养方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种产孢培养基及培养方法。
【背景技术】
[0002]目前，应用发酵技术生产木霉孢子已有大量研宄，液体发酵和固体发酵是常用的两种生产方法，为了满足农业生产中作物病害的防治要求，提高木霉孢子的产量是一个非常关键指标，它直接影响到木霉制剂对作物病害防治效果的好坏，关系到该木霉菌株的生产应用价值。目前，木霉孢子产量不高是制约木霉制剂在农业生产推广应用的重要因素。
【发明内容】
[0003]本发明是要解决目前制约真菌木霉制剂生产应用的重要因素产孢量低的问题，提供一种真菌木霉高效产孢的固体培养基。
[0004]本发明木霉菌高效产孢培养基由培养基质、矿质元素和灭菌水组成，所述培养基质由玉米碎粒、稻壳和麦麸组成，所述矿质元素为MgSO4，矿质元素与培养基质的质量比为I: 80?133，培养基质的质量与灭菌水的体积比为2.86?6.67g: lmL。
[0005]所述培养基质中玉米碎粒、稻壳和麦麸的质量比为2: 3:1。
[0006]利用上述木霉菌高效产孢培养基培养木霉的方法为:在三角瓶中装入木霉菌高效产孢培养基，装入的培养基的体积为三角瓶容积的8%，然后向培养基中接种木霉菌液，接种量为35%，木霉菌液浓度为16孢子/mL，培养温度为28°C，培养时间为120?170h。
[0007]所述木霉菌为绿色木霉。
[0008]本发明的有益效果:
[0009]1、本发明的培养基成分简单，成本低，制备方法简易；本发明培养基用于绿色木霉尚效广抱。
[0010]2、使用本发明的培养基及培养方法可以显著提高绿色木霉M1M2的产孢量，可达到6.5X108?1.8X109cfu/g。使用玉米、稻壳和麦麸三种配料的单一物质产孢量约为
1.5X108?4.lX108cfu/go本发明将三种配料按比例混合后，产孢量比原单一物质产孢量相比提高了 333.3%?339%，产生了预料不到的技术效果。
【具体实施方式】
[0011]本发明技术方案不局限于以下所列举【具体实施方式】，还包括各【具体实施方式】间的任意组合。
[0012]【具体实施方式】一:本实施方式木霉菌高效产孢培养基由培养基质、矿质元素和灭菌水组成，所述培养基质由玉米碎粒、稻壳和麦麸组成，所述矿质元素为MgSO4,矿质元素与培养基质的质量比为1: 80?133，培养基质的质量与灭菌水的体积比为2.86?6.67g:1mL0
[0013]所述木霉菌为绿色木霉(Trichoderma viride)MlM2，该菌株已于申请日前在中文文献《生防绿色木霉M1M2的生物学特性及抑菌研宄》(黑龙江农业科学，2014年04期)中公开，可由文章作者处获得。
[0014]【具体实施方式】二:本实施方式与【具体实施方式】一不同的是:所述培养基质中玉米碎粒、稻壳和麦麸的质量比为2: 3:1。其它与【具体实施方式】一相同。
[0015]【具体实施方式】三:本实施方式与【具体实施方式】一或二不同的是:所述矿质元素与培养基质的质量比为1: 90?120。其它与【具体实施方式】一或二相同。
[0016]【具体实施方式】四:本实施方式与【具体实施方式】一或二不同的是:所述矿质元素与培养基质的质量比为1: 100?110。其它与【具体实施方式】一或二相同。
[0017]【具体实施方式】五:本实施方式与【具体实施方式】一至四之一不同的是:所述培养基质的质量与灭菌水的体积比为3?6g: lmL。其它与【具体实施方式】一至四之一相同。
[0018]【具体实施方式】六:本实施方式与【具体实施方式】一至四之一不同的是:所述培养基质的质量与灭菌水的体积比为4?5g: lmL。其它与【具体实施方式】一至四之一相同。
[0019]【具体实施方式】七:本实施方式与【具体实施方式】一至六之一不同的是:所述培养基在121°C高压蒸汽下灭菌，灭菌时间为30min。其它与【具体实施方式】一至六之一相同。
[0020]【具体实施方式】八:本实施方式与【具体实施方式】一至七之一不同的是:所述玉米碎粒、稻壳和麦麸取自农产品加工下脚料，玉米碎粒、稻壳和麦麸使用前需进行粉碎，然后过40目筛，备用。其它与【具体实施方式】一至七之一相同。
[0021]【具体实施方式】九:本实施方式利用木霉菌高效产孢培养基培养木霉的方法为:在三角瓶中装入木霉菌高效产孢培养基，装入的培养基的体积为三角瓶容积的8 %，然后向培养基中接种木霉菌液，接种量为35%，木霉菌液浓度为16个孢子/mL，培养温度为28°C，培养时间为120?170h。
[0022]【具体实施方式】十:本实施方式与【具体实施方式】九不同的是:所述培养时间为130?160h。其它与【具体实施方式】九相同。
[0023]【具体实施方式】十一:本实施方式与【具体实施方式】九不同的是:所述培养时间为140?150h。其它与【具体实施方式】九相同。
[0024]实施例1:
[0025]本实施例木霉菌高效产孢培养基由20g培养基质、0.2gMgSOjP 5mL灭菌水组成，所述培养基质中玉米碎粒、稻壳和麦麸的质量比为2: 3:1。
[0026]所述培养基在121°C高压蒸汽下灭菌，灭菌时间为30min。
[0027]所述玉米碎粒、稻壳和麦麸取自农产品加工下脚料，玉米碎粒、稻壳和麦麸使用前需进行粉碎，然后过40目筛，备用。
[0028]利用上述木霉菌高效产孢的固体培养基培养木霉的方法为:在250mL三角瓶中装入20g木霉菌高效产孢的固体培养基，然后向培养基中接种木霉菌液，接种量为35 %，木霉菌液浓度为16个孢子/mL。培养温度为28°C，培养时间为150h。
[0029]所述木霉菌为绿色木霉(Trichoderma viride)MlM2，该菌株已于申请日前在中文文献《生防绿色木霉M1M2的生物学特性及抑菌研宄》(黑龙江农业科学，2014年04期)中公开，可由文章作者处获得。
[0030]本实施例的培养基成分简单，成本低，制备方法简易；使用本实施例的培养基及培养方法可以显著提高绿色木霉M1M2的产孢量，可达到1.2X109cfu/g。
【主权项】
1.一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于该产孢培养基由培养基质、矿质元素和灭菌水组成，所述培养基质由玉米碎粒、稻壳和麦麸组成，所述矿质元素为MgSO4,矿质元素与培养基质的质量比为1: 80?133，培养基质的质量与灭菌水的体积比为2.86?6.67g:1mL0
2.根据权利要求1所述的一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于所述木霉菌为绿色木霉O
3.根据权利要求1或2所述的一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于所述培养基质中玉米碎粒、稻壳和麦麸的质量比为2: 3:1。
4.根据权利要求3所述的一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于所述矿质元素与培养基质的质量比为1: 90?120。
5.根据权利要求3所述的一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于所述矿质元素与培养基质的质量比为1: 100?110。
6.根据权利要求4所述的一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于所述培养基质的质量与灭菌水的体积比为3?6g: lmL。
7.根据权利要求4所述的一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于所述培养基质的质量与灭菌水的体积比为4?5g: lmL。
8.根据权利要求6所述的一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于所述培养基在121°C高压蒸汽下灭菌，灭菌时间为30min。
9.根据权利要求8所述的一种木霉菌高效产孢培养基，其特征在于所述玉米碎粒、稻壳和麦麸取自农产品加工下脚料，玉米碎粒、稻壳和麦麸使用前需进行粉碎，然后过40目筛，备用。
10.利用权利要求1所述的木霉菌高效产孢培养基培养木霉的方法，其特征在于该方法为:在三角瓶中装入木霉菌高效产孢培养基，装入的培养基的体积为三角瓶容积的8%，然后向培养基中接种木霉菌液，接种量为35%，木霉菌液浓度为16个孢子/mL，培养温度为28°C，培养时间为120?170ho
【专利摘要】一种木霉菌高效产孢培养基及培养方法，涉及一种产孢培养基及培养方法。本发明是要解决目前制约真菌木霉制剂生产应用的重要因素产孢量低的问题。该产孢培养基由培养基质、矿质元素和灭菌水组成，所述培养基质由玉米碎粒、稻壳和麦麸组成。培养木霉的方法为：在三角瓶中装入木霉菌高效产孢培养基，装入的培养基的体积为三角瓶容积的8％，然后向培养基中接种木霉菌液，接种量为35％，木霉菌液浓度为106个孢子/mL，培养温度为28℃。本发明的培养基成分简单，成本低，制备方法简易，可以显著提高绿色木霉M1M2的产孢量，可达到6.5×108～1.8×109cfu/g。本发明用于绿色木霉高效产孢。
【IPC分类】C12N1-14, C12R1-885
【公开号】CN104830700
【申请号】CN201510226581
【发明人】王芊, 王春, 曹旭, 孟庆林, 石凤梅, 马立功, 刘佳, 李易初, 张匀华, 刘宇, 苏保华, 罗婵, 徐充
【申请人】黑龙江省农业科学院植物保护研究所
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年5月6日