肝素锂的精制工艺的利记博彩app
【专利说明】
[0001]技术领域:
本发明涉及一种肝素锂的精制工艺，属于生化技术领域。
[0002]【背景技术】:
肝素主要从牛肺或猪小肠黏膜提取，是一种由葡萄糖胺、L-艾杜糖醛苷、N-乙酰葡萄糖胺和D-葡萄糖醛酸交替组成的黏多糖硫酸脂。肝素通过与抗凝血酶III结合使其暴露精氨酸反应中心，与活化的凝血因子结合使其灭活，主要灭活Xa和IIa因子。肝素主要用于预防和治疗血栓栓塞性疾病，如心肌梗塞、肺栓塞、脑血管栓塞、外周静脉血栓等，可防止血栓的形成和扩大。还可用于DIC的早期及其它体内外的抗凝。
[0003]肝素锂在临床检验中有独特的价值，广泛用于急诊生化检查、血流变检查的血液标本的采集和抗凝。由于血液从人体抽出到凝固析出血清一般需要一小时以上的时间，严重影响急诊结果报告时间，因此临床急诊常用肝素抗凝血浆进行生化检查。当检验血标本中的钠离子时，为避免影响检测结果，常用肝素锂代替。此外，肝素锂还是红细胞渗透性试验的理想的抗凝剂。
[0004]目前，肝素锂的制备以肝素钠为原料、通过钠离子与锂离子的交换进行制备，该法需要选用精品肝素钠为原料，原料成本高造成肝素锂的价格昂贵。
[0005]
【发明内容】
:
本发明目的是，用来弥补现有技术的不足，而提供一种肝素锂的精制工艺。
[0006]为了实现上述目的，本发明的技术方案如下:
肝素锂的精制工艺，包括以下几个步骤:
(1)预处理:将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30_50min，得到反应液；
(2)酶解:向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60°C条件下酶解3-4h ;加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
(3)一次氧化:向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应l_2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
(4)二次氧化:将步骤(3)中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-lh，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
(5)沉淀:向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
[0007]所述的肝素锂的精制工艺，步骤(I)中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为 20-30%。
[0008]所述的肝素锂的精制工艺，第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50% ;第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。
[0009]所述的肝素锂的精制工艺，步骤(2)中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%O
[0010]所述的肝素锂的精制工艺，所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的
0.02-0.05%。
[0011]所述的肝素锂的精制工艺，步骤(3)中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3% ;步骤(4)中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
[0012]本发明的有益效果如下:
本发明的精制工艺，步骤简单，以粗品肝素钠为原料，通过与氯化锂进行离子交换获得肝素锂，通过酶解和加入蛋白质絮凝剂去除蛋白质，通过两次氧化脱色，最后通过无水乙醇沉淀获得精制肝素锂。酶解和加入蛋白质絮凝剂保证蛋白质去除完全，分两次氧化，可减短氧化反应的时间，从而减少过氧化氢对肝素锂活性的影响。本发明工艺得到的肝素锂单位效价为180-200U/mg，产品回收率为95-97%。
[0013]【具体实施方式】:
为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。
[0014]实施例1
本实施例中，肝素锂的精制工艺，包括以下几个步骤:
(1)预处理:将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30_50min，得到反应液；
(2)酶解:向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60°C条件下酶解3-4h ;加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
(3)一次氧化:向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应l_2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
(4)二次氧化:将步骤(3)中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-lh，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
(5)沉淀:向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
[0015]其中，步骤(I)中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50% ；第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。步骤(2)中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%。所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。步骤(3)中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3% ;步骤(4)中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
[0016]实施例2
本实施例中，肝素锂的精制工艺，包括以下几个步骤:
(1)预处理:将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30_50min，得到反应液；
(2)酶解:向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60°C条件下酶解3-4h ;加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
(3)一次氧化:向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应l_2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
(4)二次氧化:将步骤(3)中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-lh，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
(5)沉淀:向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
[0017]其中，步骤(I)中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50% ；第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。步骤(2)中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%。所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。步骤(3)中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3% ;步骤(4)中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
[0018]实施例3
本实施例中，肝素锂的精制工艺，包括以下几个步骤:
(1)预处理:将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30_50min，得到反应液；
(2)酶解:向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60°C条件下酶解3-4h ;加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液；
(3)一次氧化:向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应l_2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀；
(4)二次氧化:将步骤(3)中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-lh，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液；
(5)沉淀:向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
[0019]其中，步骤(I)中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50% ；第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。步骤(2)中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%。所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。步骤(3)中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3% ;步骤(4)中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
【主权项】
1.肝素锂的精制工艺，其特征在于，包括以下几个步骤: (1)预处理:将粗品肝素钠溶解在浓度为3-5%的氯化钠水溶液中，过滤取上清液，加入氯化锂，搅拌反应30-50min，浓缩至一半体积，再次加入氯化锂，搅拌反应30_50min，得到反应液； (2)酶解:向反应液中加入胰蛋白酶，调节PH为7-9，在温度为45-60°C条件下酶解3-4h ;加入亚硫酸氢钠，调节酶解液PH为1.5-2，过滤，得滤液，调节滤液PH为10-11，向滤液中加入蛋白质絮凝剂，静置，去除沉淀，得到清液； (3)一次氧化:向清液中加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应l_2h，；向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀； (4)二次氧化:将步骤(3)中得到的沉淀复溶于水中，再次加入过氧化氢，调节PH为8-9，搅拌反应0.5-lh，粗过滤后用超滤膜再次过滤得到氧化液； (5)沉淀:向氧化液中加入无水乙醇，静置24h，离心后得到沉淀，丙酮脱水后真空干燥得到精制肝素锂。
2.根据权利要求1所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，步骤(I)中，粗品肝素钠的重量为氯化钠水溶液的重量的为20-30%。
3.根据权利要求1或2所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，第一次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的40-50% ;第二次氯化锂的加入量为氯化钠水溶液重量的15-20%。
4.根据权利要求1所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，步骤(2)中胰蛋白酶的加入量为反应液重量的0.05-0.08%ο
5.根据权利要求1或4所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，所述蛋白质絮凝剂的加入量为滤液重量的0.02-0.05%。
6.根据权利要求1所述的肝素锂的精制工艺，其特征在于，步骤(3)中，过氧化氢的加入量为洗脱液的重量的1-3% ;步骤(4)中过氧化氢的加入量为复溶液重量的0.5-1.5%。
【专利摘要】本发明公开了肝素锂的精制工艺。工艺包括以下几个步骤：（1）预处理；（2）酶解；（3）一次氧化；（4）二次氧化；（5）沉淀。本发明的精制工艺，步骤简单，以粗品肝素钠为原料，通过与氯化锂进行离子交换获得肝素锂，通过酶解和加入蛋白质絮凝剂去除蛋白质，通过两次氧化脱色，最后通过无水乙醇沉淀获得精制肝素锂。酶解和加入蛋白质絮凝剂保证蛋白质去除完全，分两次氧化，可减短氧化反应的时间，从而减少过氧化氢对肝素锂活性的影响。
【IPC分类】C08B37-10
【公开号】CN104829750
【申请号】CN201510270912
【发明人】王芃
【申请人】苏州鸿洋医药科技有限公司
【公开日】2015年8月12日
【申请日】2015年5月26日