一种脑靶向肽与抗肿瘤药偶联物的制备及应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及肿瘤相关的药物领域，具体而言，本发明设及一种多肤与抗肿瘤药偶 联形成一种新药物，该多肤本身不具有生理活性，但是具有透过血脑屏障的作用，本发明还 设及该多肤的制备方法及其应用。
【背景技术】
[0002] 脑瘤及脑转移瘤的发病率逐年上升。在对其治疗方面，血脑屏障被认为是阻止化 疗药物进入脑组织进而影响疗效的主要原因。血脑屏障是机体参与固有免疫的内部屏障之 一，由介于血循环与脑实质间的软脑膜、脉络丛的脑毛细血管壁和包于壁外的胶质膜所组 成，能阻挡病原生物和其他大分子物质由血循环进入脑组织和脑室。基本上100%的大分子 药物，包括多肤、重组蛋白、单克隆抗体、基于RNA干扰技术的药物、基因治疗相关药物等都 无法穿越血脑屏障，且大于98%的小分子药物也无法穿过血脑屏障。目前，放射性治疗与 化学疗法只能延长患者生命4个月，因此本发明致力于研究使现有药物更好的透过血脑屏 障。
[0003]多肤由于其具有极性末端和非极性末端，因此在体内有较高的利用度，由于本身 是内源性物质所W毒性小，但是多肤直接作为药物受到较大的限制，例如其稳定性差，不能 口服。近年来，多肤作为药物辅助功能的应用逐渐成为了新药研制的热点之一。细胞穿膜 肤是20世纪中期开始认识到的一类具特殊功能的多肤分子，英文学术名称一般写为cell 2-penetrating-peptides(CPPs)。它们通常由5~30个氨基酸组成，典型的一般由8~16 个氨基酸构成，具有生物膜穿透功能，还可携带其它分子甚至超分子颗粒进入细胞中。正是 因为该种特殊的功能，它们被看作生物活性分子有效的细胞内转运工具，具有广泛的应用 前景。
[0004] 近些年来多肤和药物通过共价方式形成组合物的例子很多，例如：多肤 化netratin和阿霉素共价禪合用于治疗乳腺癌；多肤TAT和药物P53共价禪合用于治疗眼 癌转移；多肤YTA4与甲氨蝶岭共价禪合治疗乳腺癌。
【发明内容】
[0005]W下是本发明的详细描述：
[0006] (1)本发明所述的脑祀向肤
[0007] 本发明所述的脑祀向肤，由7个氨基酸组成，氨基酸序列为SEQIDNO;1。
[000引 （2)本发明所述的脑祀向肤的制备方法
[0009] 本发明所需多肤是采用固相的方法制备的，固相合成是W固相载体树脂为载体， 从C端即駿基端向N端即氨基端逐渐添加氨基酸的过程。
[0010] 本发明中优选树脂；Fmoc-wang树脂、2-d-trt树脂，树脂取代度0. 24~0. 4。
[0011] 本发明所使用的保护氨基酸为；Fmoc-Phe-OH，Fmoc-leu(tBu)-〇H， Fmoc-Arg(pbf) -〇H，Fmoc-Pr〇-〇H，Fmoc-Asn(t;rt) -〇H，反应过程中保护氨基酸 3 ~5 倍过 量。
[0012] 本发明所使用的脱保护试剂为：嗽晚/N，N-二甲基甲酯胺，比例为10:90~ 30:70。
[0013] 本发明所使用的偶联试剂为；①苯并S氮挫-N，N，N'，N' -四甲基脈六氣磯酸盐 /I-哲基苯并S挫（H0BT)，②2-(7-偶氮苯并S氮挫）-N，N，N'，N' -四甲基脈六氣磯酸醋 /I-哲基苯并S挫（H0BT)，⑨N，N' -二异丙基碳二亚胺/I-哲基苯并S挫（H0BT)。
[0014] 本发明中，若使用第①或者第②种偶联试剂，那么反应中过程中应添加缚酸剂： WEA/NMP。
[00巧]本发明中所使用的切割试剂为；TFA/茵香硫離/水/苯酪/I，2-己二硫醇，比例 为；82. 5:5:5:5:2. 5。
[0016] 本发明中所使用MS-口-T0F确定分子量，使用HPLC纯化粗肤。
[0017] (3)本发明所述脑祀向肤与抗肿瘤药物阿霉素的偶联方法
[0018]
【主权项】
1. 一种脑靶向肽，其特征在于，所述靶向肽是由7个氨基酸组成，其氨基酸序列是序列 表中SEQIDNO:1。
2. -种偶联物，为权利要求1所述的脑靶向肽与抗肿瘤药物通过化学键偶联形成。
3. -种如权利要求2所述的偶联物的制备方法，具体步骤如下： A. 使用Fmoc策略的固相多肽合成方法合成靶向肽； B. 将抗肿瘤药物与酸酐反应，在药物分子上构建羧基； C. 将多肽片段的末端氨基与抗肿瘤药物分子上的羧基反应，构建酰胺键； D. 偶联物的分离纯化。
4. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤B中所述抗肿瘤药物选自阿霉素 和紫杉醇。
5. 根据权利要求2所述的偶联物，其特征在于偶联物在制备治疗脑瘤药物中的应用。
【专利摘要】一种脑靶向肽与抗肿瘤药偶联物的制备及应用。本发明所述的脑靶向肽，由7个氨基酸组成，序列为FLFRPRN。本发明通过固相合成的方法得到所需多肽，并与抗肿瘤药物通过化学合成的方法得到偶联物。本发明还提供了偶联物在制备治疗脑瘤药物中的应用。
【IPC分类】A61K47-48, A61P35-00, C07K1-06, C07K7-06, C07K1-04
【公开号】CN104774245
【申请号】CN201410417617
【发明人】孔维苓, 郑学敏, 龚珉, 黄长江, 袁静, 徐为人
【申请人】天津药物研究院
【公开日】2015年7月15日
【申请日】2014年8月22日