一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物医药材料领域，具体涉及一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽及其制 备方法和应用。
【背景技术】
[0002] Judah folkman于1971年提出肿瘤的生长依赖于血管新生的理论，从而开创了肿 瘤依赖性血管新生治疗的新纪元。越来越多的证据表明，肿瘤生长依赖于血管新生，以血管 相关抗原为靶点的疫苗可以引发机体产生特异性细胞或体液免疫反应，抑制血管的形成， 从而起到阻止肿瘤细胞生长和转移的作用。
[0003] 血管内皮细胞生长因子（VEGF)、血小板衍生生长因子（PDGF)和刺激促红细胞生 成素（EPO)是促进肿瘤血管生长作用的关键因子，是诱导血管生成的重要调节因素。在肿 瘤的发生和发展过程中，肿瘤组织的缺氧环境会诱导VEGF和TOGF的表达，释放的VEGF和 I3DGF等血管生成刺激因子反过来刺激血管生成并为肿瘤组织供氧，其中，I3DGF与其受体结 合后，又可刺激EPO的分泌，EPO可促进红细胞生成，从而进一步为肿瘤的生长及转移提供 足够的氧气。
[0004] 目前，同时针对VEGF、TOGF和EPO三种靶点的疫苗还未见报道，因此，有必要提供 一种能同时针对VEGF、TOGF和EPO三种靶点的疫苗及治疗方法。
【发明内容】
[0005] 为解决上述问题，本发明提供了一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，该抗肿瘤血管 生成免疫复合肽包括血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子 I3DGF的免疫原性表位和促红细胞生成素 EPO的免疫原性表位，具有靶向VEGF、TOGF和EPO 三种靶向位点的能力，从而更有效地抑制肿瘤生长；此外，该抗肿瘤血管生成免疫复合肽能 作为主动免疫疫苗,能有效降低抗体药物免疫原性反应；本发明还提供了一种抗肿瘤血管 生成免疫复合肽的制备方法和应用。
[0006] 第一方面，本发明提供了一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，所述抗肿瘤血管生成 免疫复合肽包括血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子TOGF 的免疫原性表位和促红细胞生成素 EPO的免疫原性表位。
[0007] 优选地，所述血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示，所述血小板衍生生长因子TOGF的免疫原性表位选自如SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3和SEQ ID NO:4所示氨基酸序列中的至少一种，所述促红细胞生成素 EPO的免疫原性 表位选自如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示氨基酸序列中的至少一种。
[0008] 优选地，所述血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子 I3DGF的免疫原性表位和促红细胞生成素 EPO的免疫原性表位之间通过连接肽连接。
[0009] 进一步优选地，所述连接肽的氨基酸序列为GGGGS或GGGGSCGGGGS。
[0010] 优选地，本发明提供的抗肿瘤血管生成免疫复合肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:7 所示。
[0011] 具体地，SEQ ID N0:7 为：
[0012] MLSDHSIRSGGGGSQVRKIEIVRKKPIFKKATGGGGSRTVRVRRPPKGKHRKFKGGGGSCGGGGSPLGL PVLGAPPRLICDGGGGSPKKDRARQEKKSVRGKGGGGSNITVPDTKVNF。
[0013] 该序列组成分别标示如下：
[0014]
【主权项】
1. 一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，其特征在于，所述抗肿瘤血管生成免疫复合肽包 括血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子TOGF的免疫原性表 位和促红细胞生成素EPO的免疫原性表位。
2. 如权利要求1所述的一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，其特征在于，所述血管内皮 细胞生长因子VEGF的免疫原性表位的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示，所述血小板衍生生 长因子I3DGF的免疫原性表位选自如SEQ ID NO: 2、SEQ ID NO: 3和SEQ ID NO:4所示氨基 酸序列中的至少一种，所述促红细胞生成素EPO的免疫原性表位选自如SEQ ID NO: 5和SEQ ID N0:6所示氨基酸序列中的至少一种。
3. 如权利要求1所述的一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，其特征在于，所述血管内皮 细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子TOGF的免疫原性表位和促红细 胞生成素EPO的免疫原性表位之间通过连接肽连接。
4. 如权利要求3所述的一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，其特征在于，所述连接肽的 氣!基Ife序列为 GGGGS 或 GGGGSCGGGGS。
5. 如权利要求1所述的一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，其特征在于，所述抗肿瘤血 管生成免疫复合肽的氨基酸序列如SEQ ID N0:7所示。
6. -种抗肿瘤血管生成免疫复合肽的制备方法，其特征在于，所述制备抗肿瘤血管生 成免疫复合肽的方法为如下所述方法中的任--种： a. 采用固相合成法合成复合肽，所述复合肽包括血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫 原性表位、至少一种血小板衍生生长因子I3DGF的免疫原性表位和至少一种促红细胞生成 素EPO的免疫原性表位，得到所述抗肿瘤血管生成免疫复合肽； b. 采用原核表达载体或真核表达载体表达具有编码抗肿瘤血管生成免疫复合肽的目 的基因，经蛋白质纯化后，得到抗肿瘤血管生成免疫复合肽，所述抗肿瘤血管生成免疫复合 肽包括血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子TOGF的免疫原 性表位和促红细胞生成素EPO的免疫原性表位。
7. 如权利要求6所述的一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽的制备方法，其特征在于，所 述血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位的氨基酸序列如SEQ ID NO: 1所示，所述血 小板衍生生长因子I3DGF的免疫原性表位的氨基酸序列如SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:3或SEQ ID NO:4所示，所述促红细胞生成素EPO的免疫原性表位的氨基酸序列如SEQ ID NO: 5或 SEQ ID NO:6 所示。
8. 如权利要求6所述的一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽的制备方法，其特征在于，所 述血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子TOGF的免疫原性表 位和促红细胞生成素EPO的免疫原性表位之间通过连接肽连接。
9. 如权利要求8所述的一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽的制备方法，其特征在于，所 述连接肽的氨基酸序列为GGGGS或GGGGSCGGGGS。
10. 如权利要求1所述的抗肿瘤血管生成免疫复合肽在制备预防或治疗癌症的药物中 的应用。
【专利摘要】本发明提供了一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽，所述抗肿瘤血管生成免疫复合肽包括血管内皮细胞生长因子VEGF的免疫原性表位、血小板衍生生长因子PDGF的免疫原性表位和促红细胞生成素EPO的免疫原性表位。该抗肿瘤血管生成免疫复合肽具有靶向VEGF、PDGF和EPO三种靶向位点的能力，从而更有效地抑制肿瘤生长；此外，该抗肿瘤血管生成免疫复合肽能作为主动免疫疫苗，能有效降低抗体药物免疫原性反应；本发明还提供了一种抗肿瘤血管生成免疫复合肽的制备方法和应用。
【IPC分类】C12N15-12, C07K1-06, C12N15-63, A61P35-00, A61K38-18, C07K19-00
【公开号】CN104744593
【申请号】CN201310726540
【发明人】万晓春, 吕卫东
【申请人】深圳先进技术研究院
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2013年12月25日