F]AlF标记的PET多肽探针及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于放射性标记化合物领域，具体设及一种r円A1F标记的PET多肤探针 及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 根据目前癌症的发展趋势，2020年全世界癌症发病率将比现在增加50%，全球每 年新增癌症患者人数将达到1500万人（世界卫生组织近期发表《世界癌症报告》）。对肿 瘤的早期发现、早期治疗是减少癌症患者死亡率最为有效的办法，目前在发展中国家，80% 的癌症患者都是在癌症晚期才被发现。肿瘤转移是恶性肿瘤的重要生物学特征，它是肿瘤 治疗失败的主要原因，也是肿瘤患者死亡的主因。初次确诊的肿瘤患者中，70%左右的患者 可W通过手术、辅助放疗或者化疗手段控制病情，然而有一部分病人会发生肿瘤的复发或 者转移，其5年存活率小于50%，因此对恶性肿瘤微小转移的诊断便至关重要。
[0003] 虽然肿瘤发生于转移的明确机制目前仍然不清楚，但是如果能在早期对癌症进行 诊断，并确定肿瘤的恶性程度与转移能力，然后制定相应的手术、放疗或者化疗方案，就可 W提高患者的存活率，并改善患者的生存质量。目前用于癌症诊断的成像方法主要有X-射 线（CT)，超声扣巧，核磁共振成像（MRI)W及核医学SPECT/PET。
[0004] CT、US和MRI是基于实体瘤的解剖结构分析，故他们无法在分子水平上检测肿瘤 组织的生理变化，不能确定肿瘤的恶性程度，而且对于高发性肿瘤（例如乳腺癌、肝癌、前 列腺癌等）的特异性和灵敏性较差，因此我们亟需开发一种新型可W特异性鉴别肿瘤恶性 程度的放射性示踪剂，他能够实现对恶性肿瘤的早期诊断，而且可W检测肿瘤的生长W及 肿瘤对治疗方案的反应。
[0005] 正电子发射计算机断层扫描（Positronemissiontomogra地y，阳T)由于其具有 灵敏、准确及定位精确等特点，在诊断和指导治疗肿瘤、冠屯、病和脑部疾病等方面均已显示 出独一无二的优越性。PET技术有S个要素；PET探针，信号放大，高灵敏探测器，其中PET 探针最为重要，它是实现信号放大和高灵敏探测的首要前提，目前临床上对肿瘤诊断应用 最广的是[1中]FDG，但是因为它的特异性低，容易造成假阳性等局限，它并不能完全满足临 床要求，另外r円抑G对肿瘤是否具有转移能力也无法做出准确的判断，故新型1中标记分 子影像探针仍然亟待开发。
[0006] 多肤类阳T探针的开发是一个重要的方向，目前已经有大量研究针对血管活性肠 肤（VasoactiveintestinalP巧tide,VIP)、奥曲肤、铃赡肤、RGD、VEGF、TNF、胃泌激素、生 长素抑制素等多肤进行放射性标记研究（M.Fani,H.R.Maecke,S.M.Okarvi,Radiol油eled peptides:valuabletoolsforthedetectionandtreatmentofcancer,Theranosti 〇3,2012,2(5):481-501)，但目前为止尚未有真正可^广泛应用到临床的1中标记多肤类分 子影像探针，其主要原因在于多肤拥有大量的活性官能团，对标记条件比较敏感，进行放射 性标记后的多肤活性改变比较大，标记后的探针体内的药动学性质不理想，例如肝脏摄取 偏高、体内稳定性差、肿瘤摄取值低等。
【发明内容】
[0007] 本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种r円A1F标记的阳T多肤探针。 [000引本发明的另一目的在于提供上述[叩]A1F标记的阳T多肤探针的制备方法
[0009] 本发明的具体技术方案如下；
[0010] 一种r円A1F标记的阳T多肤探针，包括连接在一起的TMTP1多肤和NOTA，其结 构式如下：
[0011]
【主权项】
1. 一种[18F]A1F标记的PET多肽探针，其特征在于：包括连接在一起的TMTPl多肽和 NOTA，其结构式如下：
2. -种权利要求1所述的[18F]A1F标记的PET多肽探针的制备方法，其特征在于：包 括如下步骤： (1) 将G-TMTPl溶于DMF中，力P入NOTA-NHS ester，然后加入DIEA将pH调节 到8. 0-8. 5,室温搅拌过夜，经HPLC分离纯化，收集目标产物的馏分，合并后冻干，得 N0TA-G-TMTP1 ； (2) 在回旋加速器上用核反应180(p，n) 18F制得[18F]r，然后富集在S印-Park light QMA柱上，用去离子水淋洗以除去吸附在QMA柱上的金属杂质离子，用生理盐水洗脱，得到 925~1850MBq(25~150mCi)的 18F生理盐水溶液； (3) 向反应容器中加入AlCljP pH = 4. 0的醋酸钠缓冲液，然后加入步骤（2)制得的 18卩_的生理盐水溶液，均匀混合，再加入N0TA-G-TMTP1的去离子水溶液，混合物摇匀后在 80~110°C反应10~30min，冷却至常温，用HPLC测定其标记率，得[ 18F] A1F-N0TA-G-TMTP1 反应液； (4) 将步骤（3)制备的[18F]A1F-N0TA-G-TMTP1反应液缓慢注入事先活化过的S印-Pak C18柱，再用蒸馏水淋洗除去水溶性杂质，吹干后用乙醇淋洗，所得淋洗液用生理盐水稀释 至乙醇含量小于10%，用HPLC测定其保留时间和放化纯，观察其外观性状是否为无色澄清 透明液体，即得所述[ 18F]A1F标记的PET多肽探针。
3. 如权利要求2所述的一种权利要求1所述的[18F] AlF标记的PET多肽探针的制备方 法，其特征在于：所述步骤（1)为：将IOmg G-TMTPl溶于ImL DMF中，加入15mg NOTA-NHS ester，然后加入DIEA将pH调节到8. 0-8. 5,室温搅拌过夜，经HPLC分离纯化，收集目标产 物的馏分，合并后冻干，得N0TA-G-TMTP1。
4. 如权利要求3所述的一种权利要求1所述的[18F] AlF标记的PET多肽探针的制备方 法，其特征在于：所述步骤（I)HPLC分离纯化中第一流动相为0. 1%三氟乙酸水溶液，第二 流动相为〇. 1%三氟乙酸乙腈，梯度洗脱条件，〇~l〇min，95%的第一流动相；10~25min， 95%~15%的第一流动相；25~40min，15%的第一流动相；流动相的流速为5mL/min，检 测波长为220nm〇
5. 如权利要求2所述的一种权利要求1所述的[18F]A1F标记的PET多肽探针的制备 方法，其特征在于：所述步骤（2)为：在回旋加速器上用核反应 180(p，n) 18F制得[18F]r，然 后富集在S印-Park light QMA柱上，用5mL去离子水淋洗以除去吸附在QMA柱上的金属杂 质离子，用〇. 2~ImL生理盐水洗脱，得到925~1850MBq (25~150mCi)的18F生理盐水溶 液。
6. 如权利要求2所述的一种权利要求1所述的[18F]A1F标记的PET多肽探针的制备 方法，其特征在于：所述步骤⑶为：向反应容器中加入10 μ L2nmol/L的AlClJP 300 μ L 0. lmol/L pH = 4. 0的醋酸钠缓冲液，然后加入100 μ L步骤⑵制得的18F_的生理盐水 溶液，均匀混合3min，再加入1000 μ L lmg/mL的N0TA-G-TMTP1的去离子水溶液，混合 物摇匀后在80~110°C反应10~30min，冷却至常温，用HPLC测定其标记率，得[ 18F] A1F-N0TA-G-TMTP1 反应液。
7. 如权利要求2所述的一种权利要求1所述的[18F] AlF标记的PET多肽探针的制备方 法，其特征在于：所述步骤（4)为：将步骤（3)制备的[18F]A1F-N0TA-G-TMTP1反应液缓慢注 入事先活化过的S印-Pak C18柱，再用20mL蒸馏水淋洗除去水溶性杂质，吹干后用800 μ L 乙醇淋洗，所得淋洗液用生理盐水稀释至乙醇含量小于10%，用HPLC测定其保留时间和放 化纯，观察其外观性状是否为无色澄清透明液体，即得所述[ 18F]AlF标记的PET多肽探针。
【专利摘要】本发明公开了一种[18F]AlF标记的PET多肽探针及其制备方法，包括连接在一起的TMTP1多肽和NOTA，其结构式如下：。本发明通过对TMTP1增加一个甘氨酸，设计G-TMTP1多肽，使其在经过放射性标记后，不影响其生物活性，并采用18F为放射性核素，利用[18F]AlF-NOTA的方法标记G-TMTP1多肽，所获得的[18F]AlF标记的PET多肽探针具有优异的药动学性质，其本底清除速率快，肝脏摄取低，体内稳定性好，肿瘤部位摄取高，可以特异性的诊断高转移的肿瘤，可以用于高转移的恶性肿瘤的诊断或疗效评价。
【IPC分类】C07K7-06, C07K1-13, C07K1-20
【公开号】CN104725473
【申请号】CN201410460832
【发明人】李业森, 吴华, 张现忠, 宋曼莉, 郭志德
【申请人】厦门大学附属第一医院, 厦门大学
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2014年9月11日