一种纯化a-亚麻酸的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于化学领域，尤其涉及一种纯化a-亚麻酸的方法。
【背景技术】
[0002]a-亚麻酸是人体必需的脂肪酸之一，具有抗癌、降血脂预防和治疗冠心病、清除体内自由基等许多生物活性。
[0003]高纯a-亚麻酸的制备通常采用吸附分离法(色谱法)，报道最多的是银离子柱层析法，该方法分离成本高，引入银离子容易产生重金属污染，对药品原料制备不适用。我们按文献报道的方法采用银离子硅胶柱对a-亚麻酸进行了分离，发现层析过程中a-亚麻酸被严重氧化分解，形成大量气泡，得不到任何产品；使用硅胶薄层板对a-亚麻酸进行薄层层析分离效果不错，可是采用硅胶柱层析时却发现样品同样被氧化；采用白色粘土(硅酸盐)做填料，柱层析a-亚麻酸氧化程度略有减轻，但是氧化依旧很严重，并且以上各方法分离出的a-亚麻酸纯度较低。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对上述技术问题，提供一种纯化a-亚麻酸的方法，通过此方法能够获得纯真较高的a-亚麻酸。
[0005]本发明的纯化a-亚麻酸的方法，以石油醚乙醇溶液为流动相，采用聚酰胺层析柱层析纯化；在流动相石油醚乙醇溶液中加入维生素E作为抗氧化剂，以便防止a-亚麻酸在纯化过程中发生氧化。
[0006]优选的，为了更好的防止a-亚麻酸在纯化过程中发生氧化，所述流动相石油醚乙醇溶液中维生素E含量为每10ml流动相中含维生素E0.001?0.0lgo
[0007]优选的，所述聚酰胺层析柱的制备包括以下步骤:
[0008]S10、聚酰胺填料预处理:将聚酰胺粉末加入到乙醇中，浸泡后，减压过滤除去乙醇；然后加入到氢氧化钠水溶液中搅拌均匀，减压过滤，水洗至PH7左右得聚酰胺湿粉；将聚酰胺湿粉加入到醋酸水溶液中搅拌均匀，水洗至PH7左右，然后70?100°C干燥5?10小时至恒重；
[0009]S20、聚酰胺层析柱填装:将步骤SlO中预处理后的聚酰胺粉末加入到2?5倍重量的石油醚中，浸泡4?12小时后，倒入装有预定量石油醚的层析柱内，让聚酰胺粉末自然沉降，待聚酰胺粉末沉降致密后，打开层析柱下活塞，让石油醚缓慢流出，直至液面在聚酰胺填料之上0.2?0.5cm，关闭活塞即制得聚酰胺层析柱。
[0010]优选的，为了能够对a-亚麻酸进行更好的纯化，所述步骤SlO中，聚酰胺粉末的粒度为100?400目；
[0011]和/或，为了对聚酰胺粉末进行更好的纯化，所述乙醇的质量浓度为90?98% ;
[0012]和/或，为了对聚酰胺粉末进行更好的纯化，所述到氢氧化钠水溶液的质量浓度为4?6% ；
[0013]和/或，为了对聚酰胺粉末进行更好的纯化，所述醋酸水溶液的质量浓度为8?12%。
[0014]优选的，步骤S20中，所述预定量为40?100ml。
[0015]优选的，流动相的制备包括以下步骤:
[0016]S30、向石油醚中加入乙醇维生素E溶液，然后补加乙醇至乙醇/石油醚体积比为2: (80?400)制得流动相。
[0017]优选的，a-亚麻酸的纯化包括以下步骤:
[0018]S40、用流动相将a-亚麻酸配成质量百分含量40% -60%的a_亚麻酸溶液，沿聚酰胺层析柱内壁加入a-亚麻酸溶液，然后加入流动相；
[0019]S50、打开层析柱下活塞，流动相流出，流速Iml?3ml/min ；
[0020]S60、样品分段采集，通过薄层层析法跟踪流出液中杂质和样品的变化，第一段为杂质，第二段杂质与样品共存，第三段样品段；
[0021]S70、取第三段流分，经甲醇洗涤，乙醇洗涤，水洗后，加入干燥剂干燥后，减压蒸出石油醚溶剂，得到高纯a-亚麻酸纯度。
[0022]优选的，所述步骤S70具有为:取第三段流分，经I?3体积倍体积浓度60%?80 %甲醇洗涤一次，I?3体积倍体积浓度50 %?80 %乙醇洗涤一次，与第三流分等体积水洗三次，加入干燥剂干燥后，减压蒸出石油醚溶剂，得到高纯a-亚麻酸纯度。
[0023]本发明的纯化a-亚麻酸的方法，以石油醚乙醇溶液为流动相，采用聚酰胺层析柱层析纯化，并且流动相中加入维生素E作为抗氧化剂，能够对a-亚麻酸进行更好的纯化，使纯化后的a-亚麻酸纯度在95%以上。
【具体实施方式】
[0024]下面结合具体实施例来描述本发明，应该指出的是，这些实施例仅用于说明本发明不应理解为对本发明的限制。
[0025]实施例1
[0026](I)聚酰胺填料预处理:将聚酰胺粉末(100-400目，聚酰胺生产厂家:国药集团化学试剂有限公司，下同)90g加入到95% (体积百分含量，下同)乙醇中，浸泡过液后，减压过滤除去乙醇；然后加入到300ml 5% (质量百分含量)氢氧化钠水溶液中搅拌均匀，减压过滤，水洗至PH7左右得聚酰胺湿粉；将聚酰胺湿粉加入到醋酸水溶液中搅拌均匀，水洗至PH7左右，然后100°C干燥5小时至恒重；
[0027](2)聚酰胺层析柱填装:将步骤SlO中预处理后的聚酰胺粉末加入到400ml的石油醚(沸点30?60°C )中，浸泡12小时后，倒入装有60ml石油醚的层析柱内，让聚酰胺粉末自然沉降，待聚酰胺粉末沉降致密后，打开层析柱下活塞，让石油醚缓慢流出，直至液面在聚酰胺填料之上0.5cm，关闭活塞即制得聚酰胺层析柱。
[0028](3)向石油醚中加入I % (质量百分含量)乙醇维生素E溶液，使维生素E含量为每10ml流动相中含维生素E0.004g，然后补加乙醇至乙醇石油醚体积比为2:100制得流动相。
[0029](4)将2.6g(质量含量87.2% ) a-亚麻酸加入到流动相中制成质量百分含量60%的a-亚麻酸溶液，沿聚酰胺层析柱内壁加入a-亚麻酸溶液，然后加入500ml流动相。
[0030](5)打开层析柱下活塞，流动相流出，流速2ml/min ;
[0031](6)样品分段采集，通过薄层层析法跟踪流出液中杂质和样品的变化，第一段为杂质60ml，第二段杂质与样品共存160ml，第三段样品段380ml ；
[0032](7)取第三段流分，经380ml 80% (体积百分含量)甲醇洗涤一次，380ml 60%乙醇(体积百分含量)洗涤一次，每次380ml水洗三次，加入干燥剂硫酸镁3g干燥后，减压蒸出石油醚溶剂，得到高纯a-亚麻酸0.53g，经高压液相色谱测定a-亚麻酸纯度为97.6%(质量百分数)。
[0033]实施例2
[0034](I)聚酰胺填料预处理:将聚酰胺粉末90g加入到90%乙醇中，浸泡过液后，减压过滤除去乙醇；然后加入到300ml 4% (质量百分含量)氢氧化钠水溶液中搅拌均匀，减压过滤，水洗至PH7左右得聚酰胺湿粉；将聚酰胺湿粉加入到醋酸水溶液中搅拌均匀，水洗至PH7左右，然后70°C干燥10小时至恒重；
[0035](2)聚酰胺层析柱填装:将步骤SlO中预处理后的聚酰胺粉末加入到500ml的石油醚(沸点30?60°C )中，浸泡12小时后，倒入装