Sry基因引物对与探针的组合和sry多位点检测试剂盒的利记博彩app
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种基因引物与探针的组合W及包含该组合的试剂盒。更确切的说， 是一种SRY基因引物与探针的组合和实时英光SRY多位点基因检巧IJ试剂盒。
【背景技术】
[0002] 目前检测SRY基因一般采用PCR技术，其观察结果主要为凝胶电泳成像法，耗时， 耗力且易污染，由于其检测的高灵敏度极易产生假阳性。然而针对极少数情况会采用多重 PCR技术，但DNA浓度低时同管多条引物对相互抑制，易造成灵敏度下降，有时会产生假阴 性。W上两者，均会使测试结果造成错误，正确率难W保证。目前常规采用的方法：例如绒毛 样本检测及羊膜腔穿刺取羊水细胞等，都属于创伤性的，对母亲及胎儿均有一定的风险。
【发明内容】
[0003] 目的在于现代遗传咨询中要求做产前性别判断的越来越多，故在不刺激孕妇子宫 的情况下，就可W做染色体分析的无创伤性性别检测，还可W通过检测男性个体不同时期 SRY基因表达的量来监测个体盛衰的变化，日益引起广大医学家的关注。
[0004] 发明具体内容如下： 一种SRY基因引物对和探针的组合，包括一个探针，一对SRY基因引物，其特征在于：所 述探针为化qMan探针，所述一对SRY基因引物为一对基因序列反向的引物； 其中所述的一种关于SRY基因引物对和探针的组合，其特征在于：所述SRY基因序列号 位于YP11. 3,只含有一个外显子，没有内含子，转录单位长约1. 1邸编码一个204氨基酸的 蛋白质； 一种实时英光SRY多位点基因检测试剂盒；包括4组如权利要求1或2所述的SRY基 因引物对和探针的组合，其特征在于： 所述第一引物对中的正向引物的序列为： 5' CGAACTCTGGCACCTTTCAATT 3' 第一引物对中的反向引物的序列为： 3' CGCTTAACATAGCAGAAGCATATGA5' 第一探针的序列为： FAM-TGTCGCACTCTCCTTGTTTTTGACAATGC-TAMRA 所述第二引物对中的正向引物的序列为： 5'TCTTCCAGGAGGCACAGAAATT 3' 第二引物对中的反向引物的核巧酸序列为： 3' TTCCGACGAGGTCGATACTTATAAIV 第二探针的序列为： FAM-CAGGCCATGCACAGAGAGAAATACCCG-TAMRA 所述第H引物对中的正向引物的序列为： 5' GCCGAAGAATTGCAGTTTGC3' 第H引物对中的反向引物的序列为： 3'AGTTGCACTTCGCTGCAGAGT5' 第H探针的序列为： FAM-CCCGCAGATCCCGCTTCGG-TAMRA 所述第四引物对中的正向引物的序列为： 5' ACGAAAGCCACACACTCAAGAA3' 第四引物对中的反向引物的序列为： 3' GTGAGCTGGCTGCGTTGAT5' 第四探针的序列为： FAM-AGCACCAGCTAGGCCACTTACCGCC-TAMRA 【【附图说明】】 图1为第一引物对和探针PCR英光扩增原理图 图2为第二引物对和探针PCR英光扩增原理图 图3为第H引物对和探针PCR英光扩增原理图 图4为第四引物对和探针PCR英光扩增原理图 图5为核酸扩增英光检测结果分析阴性图 图6为核酸扩增英光检测结果分析阳性图 【具体实施例】 W下为本发明的实施例： 一种SRY基因引物对和探针的组合，包括一个探针，一对SRY基因引物，其特征在于：所 述探针为化qMan探针，所述一对SRY基因引物为一对基因序列反向的引物； 其中所述的一种关于SRY基因引物对和探针的组合，其特征在于：所述SRY基因序列号 位于YP11. 3,只含有一个外显子，没有内含子，转录单位长约1. 1邸编码一个204氨基酸的 蛋白质； 一种实时英光SRY多位点基因检测试剂盒；包括4组如权利要求1或2所述的SRY基 因引物对和探针的组合，其特征在于： 所述第一引物对中的正向引物的序列为： 5' CGAACTCTGGCACCTTTCAATT 3' 第一引物对中的反向引物的序列为： 3' CGCTTAACATAGCAGAAGCATATGA5' 第一探针的序列为： FAM-TGTCGCACTCTCCTTGTTTTTGACAATGC-TAMRA 所述第二引物对中的正向引物的序列为： 5'TCTTCCAGGAGGCACAGAAATT 3' 第二引物对中的反向引物的核巧酸序列为： 3' TTCCGACGAGGTCGATACTTATAAIV 第二探针的序列为： FAM-CAGGCCATGCACAGAGAGAAATACCCG-TAMRA 所述第H引物对中的正向引物的序列为： 5' GCCGAAGAATTGCAGTTTGC3' 第H引物对中的反向引物的序列为： 3'AGTTGCACTTCGCTGCAGAGT5' 第H探针的序列为： FAM-CCCGCAGATCCCGCTTCGG-TAMRA 所述第四引物对中的正向引物的序列为： 5' ACGAAAGCCACACACTCAAGAA3' 第四引物对中的反向引物的序列为： 3' GTGAGCTGGCTGCGTTGAT5' 第四探针的序列为： FAM-AGCACCAGCTAGGCCACTTACCGCC-TAMRA 使用该实时英光SRY多位点基因检测试剂盒，实验证明；从300名男女外周血浆中分 离 DNA,用实时英光定量聚合酶链反应（fluorescence quantitative polymerase chain reaction，FQ-PCR)的方法检测其中的 Y 性别决定区（sex-determining region Y, SRY)基 因，结果男的98名，98名SRY基因阳性，平均为（1520.00 + 80.00)拷贝/毫升，女性42名 SRY基因阳性（41名为孕早期怀男胎的，其中一位女性未孕但近期有输血史），其平均浓度 为巧6. 00 + 40. 00)拷贝/毫升，余者均为阴性，结论用实时英光定量PCR的方法最早在孕 42天的孕妇外周血浆中就可W检测到胎儿SRY基因，随孕周的增加，母血中胎儿DNA的量也 在逐渐增加，但有输血史或器官移植的女性不适宜检测SRY基因。
[0005] 样本数据显示如下：
【主权项】
1. 一种SRY基因引物对和探针的组合，包括一个探针，一对SRY基因引物，其特征在于： 所述探针为TaqMan探针，所述一对SRY基因引物为一对基因序列反向的引物。
2. 如权利要求1所述的一种关于SRY基因引物对和探针的组合，其特征在于：所述SRY 基因序列号位于YPlL 3,只含有一个外显子，没有内含子，转录单位长约I. IKB编码一个 204氨基酸的蛋白质。
3. -种实时荧光SRY多位点基因检测试剂盒：包括4组如权利要求1或2所述的SRY 基因引物对和探针的组合，其特征在于： 所述第一引物对中的正向引物的序列为： 5' CGAACTCTGGCACCTTTCAATT 3' 第一引物对中的反向引物的序列为： 3, CGCTTAACATAGCAGAAGCATATGA5， 第一探针的序列为： FAM-TGTCGCACTCTCCTTGTTTTTGACAATGC-TAMRA 所述第二引物对中的正向引物的序列为： 5'TCTTCCAGGAGGCACAGAAATT 3' 第二引物对中的反向引物的序列为： 3' TTCCGACGAGGTCGATACTTATAAT5， 第二探针的序列为： FAM-CAGGCCATGCACAGAGAGAAATACCCG-TAMRA 所述第三引物对中的正向引物的序列为： 5' GCCGAAGAATTGCAGTTTGC3' 第三引物对中的反向引物的序列为： 3' AGTTGCACTTCGCTGCAGAGT5' 第三探针的序列为： FAM-CCCGCAGATCCCGCTTCGG-TAMRA 所述第四引物对中的正向引物的序列为： 5, ACGAAAGCCACACACTCAAGAA3， 第四引物对中的反向引物的序列为： 3' GTGAGCTGGCTGCGTTGAT5' 第四探针的序列为： FAM-AGCACCAGCTAGGCCACTTACCGCC-TAMRA。
【专利摘要】本发明涉及一种用于对人类进行性别鉴定的探针与引物对组合和包含该组合的试剂盒。一种SRY基因引物对和探针的组合，包括一个探针，一对SRY基因引物，所述探针为TaqMan探针，所述一对SRY基因引物为一对基因序列反向的引物；一种实时荧光SRY多位点基因检测试剂盒：包括4组如权利要求1或2所述的SRY基因引物对和探针的组合，其中所述第一引物对中的正向引物的序列为：5'CGAACTCTGGCACCTTTCAATT3'第一引物对中的反向引物的序列为：3'CGCTTAACATAGCAGAAGCATATGA5'第一探针的序列为：FAM-TGTCGCACTCTCCTTGTTTTTGACAATGC-TAMRASRY基因引物对和探针组合能够检测人类性别，而实时荧光SRY多位点基因检测盒：涵盖了Y染色体SRY基因中的4个靶基因，灵敏度高,特异强，推荐方法中结果符合率100％。
【IPC分类】C12Q1-68, C12N15-11
【公开号】CN104630214
【申请号】CN201510028379
【发明人】胡松
【申请人】胡松
【公开日】2015年5月20日
【申请日】2015年1月20日