一种枯草芽孢杆菌富集培养基及其使用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种菌种富集培养基及其使用，特别涉及一种枯草芽孢杆菌培养基及 其使用。
【背景技术】
[0002] 木薯渣是木薯在经过淀粉厂榨取淀粉或是酒精厂制取酒精之后所留下的废弃物， 但是依然含有丰富的纤维素、半纤维素、淀粉和无机盐等物质，是一种非常有用的生物质资 源。我国木薯主要种植区在广西、广东、海南、云南、福建等地，全国年产木薯1000多万吨。 木薯渣的产生量与淀粉之比为1:2 (以干物质计），木薯渣产量非常庞大。我国木薯酒精加 工业发展始于20世纪90年代前后，主要以鲜木薯和木薯干片为原料生产食用酒精及工业 酒精。目前我国酒精产量的1/3是以木薯为原料。随着中国对淀粉需求的增加及木薯制取 燃料乙醇、木薯深加工产业的发展，对于木薯的需求也随之增加，目前国内木薯产量已无法 满足需求，每年需从国外进口大量的木薯。在木薯使用量增加的同时，产生的废渣一一木薯 渣也不断增加。
[0003] 就目前而言，木薯渣的处理有以下几种：（1)厌氧发酵生产沼气；（2)发酵生产酒 精；（3)生产饲料；（4)生产有机肥。目前虽然有几种木薯渣的处理方法，但由于种种原因未 普及应用，大量的木薯渣还处于废弃状态。枯草芽孢杆菌的常用碳源为葡萄糖、蔗糖等，成 本较高。
[0004] 公开于该【背景技术】部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应 当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种利用木薯渣制作枯草芽孢杆菌富集培养基及其使用，旨 在提高枯草芽孢杆菌产量的同时降低生产枯草芽孢杆菌的成本。
[0006] 为实现上述目的，本发明技术方案如下：
[0007] -种枯草芽孢杆菌富集培养基，按质量比包含以下组分原料：木薯渣18?22g，酵 母膏0. 8?I. 2g，磷酸二氢钾0. 8?I. 2g，7水硫酸镁0. 15?0. 22g，蒸馏水或去离子水 IOOOml0
[0008] 其中，按质量比计，所述的木薯渣为含水量为70%的木薯渣。
[0009] 其中，所述含水量为70 %的木薯渣为将木薯加工后的新鲜木薯渣在自然光照下干 燥至含水量为70%。
[0010] 一种枯草芽孢杆菌富集培养基的使用，包含以下操作步骤：
[0011] (1)称取所需的各组分原料，将木薯渣粉碎到木薯渣长度为0.5?2mm，然后在 121°C 灭菌 20min ;
[0012] (2)向步骤（1)中灭菌后所得木薯渣加入酵母膏，磷酸二氢钾，7水硫酸镁，蒸馏水 或去离子水形成培养基，接种菌种，保持温度为30?35°C培养16?24h，即可。
[0013] 其中，步骤（2)中培养菌种期间每隔5?7h搅动一次。
[0014] 其中，步骤（2)中接种菌种的量随菌种来源不同而有所差异。
[0015] 与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
[0016] 本发明利用木薯渣做成的培养基能大量提供枯草芽孢杆菌所需的碳源，用本发明 培养基培养枯草芽孢杆菌的产量明显比如蛋白胨、葡萄糖、蔗糖等常规碳源要高；进一步 的，本发明增加木薯渣多元化回收利用的方式，增加了木暑加工的附加值，减少了该工业对 环境的污染；更进一步的，木薯渣比葡萄糖、蔗糖廉价，大大的降低了生产成本，因此本发明 为实现枯草芽孢杆菌的高产化、规模化生产奠定了基础。
【具体实施方式】
[0017] 下面对本发明的【具体实施方式】进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不 受【具体实施方式】的限制。
[0018] 实施例1
[0019] 将木薯加工后的新鲜木薯渣放在太阳光下干燥至木薯渣含水量为70%即可，然后 粉碎木薯渣至长度为0. 5?2mm，备用；称取各组分原料：上述处理好的木薯渣18g，酵母膏 〇. 8g，磷酸二氢钾0. 8g，7水硫酸镁0. 15g，蒸馏水1000ml，然后向木薯渣中加入酵母膏，磷 酸二氢钾，7水硫酸镁，蒸馏水形成培养基，备用。
[0020] 按下列步骤对4°C条件下保存1个月的枯草芽孢杆菌进行规模化培养测试，取Iml 该枯草芽孢杆菌悬浮液接种于250ml按上述配制好的培养基中，于30°C下恒温培养，隔7h 摇动一次，培养16h。吸取Iml液体生产培养基菌液，梯度稀释为107、108、10 9,吸取适量上 述各梯度稀释液于血球计数板上在生物显微镜下计数，设3个平行组。具体结果见表1 :
[0021] 表 1
[0022]
【主权项】
1. 一种枯草芽孢杆菌富集培养基，其特征在于，按质量比包含以下组分原料：木薯渣 18?22g，酵母膏0. 8?I. 2g，磷酸二氢钾0. 8?I. 2g，7水硫酸镁0. 15?0. 22g，蒸馏水 或去离子水1000ml。
2. 根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌富集培养基，其特征在于：按质量比计，所述的 木薯渣为含水量为70 %的木薯渣。
3. 根据权利要求1所述的枯草芽孢杆菌富集培养基，其特征在于：所述含水量为70% 的木薯渣为将木薯加工后的新鲜木薯渣在自然光照下干燥至含水量为70 %。
4. 一种如权利要求1所述的枯草芽孢杆菌富集培养基的使用，其特征在于，包含以下 操作步骤： (1) 称取所需的各组分原料，将木薯渣粉碎到木薯渣长度为〇. 5?2mm，然后在121 °C灭 菌 20min ; (2) 向步骤（1)中灭菌后所得木薯渣加入酵母膏，磷酸二氢钾，7水硫酸镁，蒸馏水或去 离子水，接种菌种，保持温度为30?35°C培养16?24h，即可。
5. 根据权利要求4所述枯草芽孢杆菌富集培养基的使用，其特征在于：步骤（2)中培 养菌种期间每隔5?7h搅动一次。
6. 根据权利要求4所述枯草芽孢杆菌富集培养基的使用，其特征在于：步骤（2)中接 种菌种的量随菌种来源不同而有所差异。
【专利摘要】一种枯草芽孢杆菌富集培养基含有木薯渣，酵母膏，磷酸二氢钾，7水硫酸镁，蒸馏水或去离子水。一种枯草芽孢杆菌富集培养基的使用，包含以下操作步骤：(1)将木薯渣粉碎到木薯渣长度为0.5～2mm，然后在121℃灭菌20min；(2)加入酵母膏，磷酸二氢钾，7水硫酸镁，蒸馏水或去离子水，接种菌种，保持温度为30～35℃培养16～24h。用本发明培养基培养枯草芽孢杆菌的产量明显比如蛋白胨、葡萄糖、蔗糖等常规碳源要高；本发明增加了木暑加工的附加值，减少了该工业对环境的污染；更进一步的，木薯渣比葡萄糖、蔗糖廉价，大大降低了生产成本，因此本发明为实现枯草芽孢杆菌的高产化、规模化生产奠定了基础。
【IPC分类】C12R1-125, C12N1-20
【公开号】CN104560783
【申请号】CN201410735138
【发明人】王英辉, 陈倩伶, 张瑞杰, 尚谦, 陈建华, 许道全, 余克服
【申请人】广西大学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月5日