一种甾体皂苷化合物及其制备方法和用图
【技术领域】
[0001] 本发明涉及天然产物化学领域，具体地说，涉及一种新的C21留体化合物的分离制 备方法，以及单体化合物或者含有它们的药物组合物作为抗肿瘤药物的用途。
【背景技术】
[0002] 傣百解为萝摩科南山藤属植物苦绳DregeasinensisHemsl.的干燥根。全年可 采，除去杂质，切片，晒干，生于海拔500-3000m的山地疏林中或灌木丛中。在我国西双版 纳、德宏、西盟、孟连、新平、元江等地，以及老挝、缅甸等国家的傣族居住区使用极其广泛。 傣百解以根入药，性凉、味苦，入火、土、风塔，具有清火解毒、消肿止痛之功效，药用于治疗 风湿痹痛，咳嗽痰喘，跌打骨折，痈疮疖肿、乳汁不通等症。随着傣药研宄的深入，已经有很 多的科研工作者研宄傣百解的化合物成分和药物机理研宄。
[0003] 目前已有多位科研工作者对其含有的化学成分进行了研宄，对于傣百解提取分离 的研宄已经比较成熟，已经分离提取出多种的化合物，如，留体皂苷类，苯丙素类，糖类等活 性成分。从傣百解中分离的得到的甾体皂苷类化合物主要是C21甾体类，C21甾体衍生物是 植物中一类重要的生物活性物质。
【发明内容】
[0004] 本发明首次从傣百解（苦绳根茎）中分离、纯化、鉴定出一种具有抗肿瘤的生物活 性和药理作用的新型C21甾体化合物。
[0005] 本发明的第一个目的是提供一种甾体皂苷化合物。
[0006] 本发明的第二个目的是提供上述留体皂苷化合物的制备方法。
[0007] 本发明的第三个目的是提供上述留体皂苷化合物的用途，所述用途为在制备用于 治疗肿瘤细胞疾病的药物中的应用。
[0008] 本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
[0009] -种留体皂苷化合物，具有式（I)所示的结构：
【主权项】
1. 一种留体皂苷化合物，其特征在于：所述留体皂苷化合物具有式（I)所示的结构：
其中札为
2. 根据权利要求1所述的留体皂苷化合物，其特征在于：所述化合物提取自傣百解。
3. 根据权利要求2所述的留体皂苷化合物，其特征在于：所述提取方法包括如下步 骤： (1) 傣百解用70% -100%乙醇加热回流提取，再依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水 萃取，收集乙酸乙酯萃取部分； (2) 乙酸乙酯萃取部分溶于氯仿中，过160-200目的硅胶柱色谱，采用氯仿-甲醇系统 以体积比100:1、50:1、15:1、7 :1、4:1、纯甲醇系统梯度洗脱，收集7:1的洗脱部分； (3) 7:1的洗脱部分溶于氯仿中，过200-300目的硅胶柱色谱，采用氯仿-甲醇系统以 体积比60:1等度洗脱；待有样品洗脱下来，每个馏分收集20ml，并依次将其命名为1#，2#，3#，4#......并将含有相似组分的馏分旋转蒸发，得到待分离的洗脱馏分2-6#合并液； (4) 将待分离的洗脱馏分2-6#合并液溶于氯仿中，过200-300目的硅胶柱色谱，采用石 油醚-乙酸乙酯系统以体积比2:1等度洗脱；待有样品洗脱下来，每个馏分收集20ml，并依 次将其命名为1#，2#，3#，4#……并将含有相似组分的馏分旋转蒸发，得到待分离的洗脱馏 分8-15#合并液； (5) 将待分离的洗脱馏分8-15#合并液溶于甲醇中，过ODS反相色谱柱，采用78%甲 醇系统等度洗脱；待有样品洗脱下来，每个馏分收集l〇ml，并依次将其命名为1#，2#，3#， 4#……并将含有相似组分的馏分旋转蒸发，得到待分离的洗脱馏分11-32#合并液； (6) 将待分离的洗脱馏分11-32#合并液溶于甲醇中，采用反相C18柱经行73%甲醇的 等度洗脱，紫外检测器的检测波长为230-280nm，收集141-146min出现的化合物吸收峰；此 馏分即为权利要求1所述的化合物。
4. 根据权利要求3所述的留体皂苷化合物，其特征在于：所述步骤（1)为：取傣百解 15kg，粉碎成粗粉，用9倍量95 %乙醇加热回流提取3次，每次lh，过滤，合并滤液，减压浓 缩除去乙醇，搅拌加水稀释至40L，静置过夜，过滤；所得沉淀干燥、粉碎后，依次用石油醚、 乙酸乙酯、正丁醇和水萃取；收集萃取液，旋转蒸发，得到乙酸乙酯萃取部分。
5. 根据权利要求4所述的留体皂苷化合物，其特征在于：所述步骤（2)-(6)中萃取部 分或洗脱馏分溶于溶剂的浓度为30-80mg/ml。
6. 根据权利要求3所述的留体皂苷化合物，其特征在于：所述步骤（2)中梯度洗脱的 方法如下：1-2个柱体积采用氯仿-甲醇100:1洗脱；3-4个柱体积采用氯仿-甲醇50:1洗 脱；5-6个柱体积采用氯仿-甲醇15:1洗脱；7-8个柱体积采用氯仿-甲醇7:1洗脱；8-9 个柱体积采用氯仿-甲醇4:1洗脱；最后纯甲醇冲洗残余样品。
7. -种具有抗人类肿瘤细胞活性的药物，其特征在于：含有权利要求1-6任意一项所 述的留体皂苷化合物，或其溶剂化物、立体异构体、互变异构体及前药。
8. 根据权利要求7所述的药物，其特征在于：所述肿瘤细胞包括H460人类肺癌细胞， AGS人类胃癌细胞，MNA-MB-468人类乳腺癌细胞，Hela人类子宫颈癌细胞。
9. 根据权利要求7所述的药物，其特征在于：所述的留体皂苷化合物、其溶剂化物、互 变异构体、立体异构体及前药单独使用或为其他临床可用的不同剂型的药物，剂型包括散 剂、注射剂、胶囊剂、丸剂、微胶囊、片剂、膜剂、软胶囊剂、膏剂、栓剂、气雾剂、酊剂、口服液、 颗粒剂。
10. 权利要求1-6任意一项所述的留体皂苷化合物在制备用于治疗肿瘤细胞疾病的药 物中的应用。
【专利摘要】本发明提供一种甾体皂苷化合物，该甾体皂苷化合物具有式(I)所示的结构。本发明所述的甾体皂苷化合物对人类肿瘤细胞包括H460人类肺癌细胞，AGS人类胃癌细胞，MNA-MB-468人类乳腺癌细胞，Hela人类子宫颈癌细胞等均具有不同程度的抑制作用，可应用于防治肿瘤疾病。临床可单独使用或制成其他临床可用的不同剂型的药物，剂型包括散剂、注射剂、胶囊剂、丸剂、微胶囊、片剂、膜剂、软胶囊剂、膏剂、栓剂、气雾剂、酊剂、口服液、颗粒剂。
【IPC分类】A61P35-00, A61K31-7048, C07J71-00
【公开号】CN104558092
【申请号】CN201410836713
【发明人】吕芳, 刘秀洁, 邓玉林, 戴荣继, 贾少华, 孟薇薇, 陈艳
【申请人】北京理工大学
【公开日】2015年4月29日
【申请日】2014年12月29日