埃博拉病毒核蛋白的泛MHCI优势表位肽、其编码基因及其应用

本发明属于病原微生物免疫学，具体涉及埃博拉病毒核蛋白的泛mhc i优势表位肽、其编码基因及其应用。

背景技术：

1、埃博拉病毒(ebov)为丝状病毒科的烈性病原体，感染病毒会导致严重的急性疾病，即埃博拉出血热，表现为多器官衰竭和休克，死亡率高达80％。病原体埃博拉病毒(ebov)包含五种亚型：扎伊尔、本迪布约、苏丹、莱斯顿和泰森。其中扎伊尔埃博拉病毒于1976年被发现，是最为致命的一种。

2、ebov是一种单股负链rna病毒，属于丝状病毒科，其基因组有7个基因，分别编码核蛋白(np)、病毒蛋白(vp)35、vp40、vp24、vp30、聚合酶(l基因)和糖蛋白(gp)。np在埃博拉病毒复制中起着关键作用，是病毒生命周期的必需组成部分。有研究指出ebov np中的某些区段是cd8+t细胞攻击的偏好靶点，并且ebov-np疫苗能够迅速诱导产生干扰素-γ(interferon-γ，ifn-γ)的np特异性cd8+t细胞。此外，相较于其他ebov蛋白，np更为保守，被认为更适合作为ctl疫苗的靶标。

3、病毒特异性cd8+效应t细胞的激活，需要抗原提呈细胞(apc)通过主要组织相容性复合体(mhc)i类分子提呈病毒抗原。只有与mhc i类分子高亲和力、紧密结合的多肽才能表达在apc细胞表面，提呈给cd8+t细胞识别，同时具有免疫原性的多肽可以引发后续的免疫反应。因此，免疫反应性和免疫原性对阐明抗病毒免疫至关重要。同时，进化保守的表位通常对于病毒生存至关重要，因此，接种包含保守表位的疫苗对提供广泛且持久的免疫保护具有重要作用。

4、最近，基于表位的疫苗已成为疫苗设计和抗病毒免疫治疗的重要方向。通过合理设计的表位疫苗，不仅能够减少不良反应以提高安全性，还可使受益人群更广泛，最终提高疫苗的免疫效率。目前已知的能有效激活机体免疫应答的ebov np抗原肽不多，且免疫应答反应性较低，因此亟需筛选鉴定新的免疫应答高反应性的ebov np的优势表位肽。

技术实现思路

1、针对上述技术问题，本发明的目的之一是提供埃博拉病毒核蛋白的泛mhc i优势表位肽，所述优势表位肽的氨基酸序列为seq id no.1～4所示之一。所述泛mhc i优势表位肽具有高亲和力、高免疫原性及种间种内保守性，能有效刺激机体细胞免疫应答，可以在未来帮助完善针对埃博拉病毒的表位疫苗设计。

2、本发明的目的之二是提供编码所述优势表位肽的基因。

3、本发明的目的之三是提供所述优势表位肽在制备用于诱导或增强埃博拉病毒特异性免疫应答的药物中的应用。

4、本发明的目的之四是提供所述优势表位肽在制备用于预防和/或治疗埃博拉病毒感染所致疾病的产品中的应用。

5、本发明的目的之五是提供所述基因在制备用于诱导或增强ebov特异性免疫应答的产品中的应用。

6、本发明的目的之六是提供所述基因在制备用于预防和/或治疗埃博拉病毒感染所致疾病的产品中的应用。

7、进一步的，上述应用中，所述产品为表位疫苗。

8、本发明的目的之七是提供一种埃博拉病毒表位疫苗，其免疫原来自于所述优势表位肽。

9、进一步的，所述疫苗还包括药学上可接受的载体。

10、进一步的，所述疫苗包含或不包含佐剂。

11、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

12、本发明预测了ebov makona np(基因号：mg572234.1)的潜在表位，包括这些表位与泛mhc i类分子的结合亲和力、免疫原性和种间种内保守性，这将有助于理解ebov np的免疫生物学，并在未来帮助完善针对埃博拉病毒的表位疫苗设计。本发明的优势表位肽可视为能有效刺激机体细胞免疫应答的病毒亚单位，即病毒体功能所需的高度保守区。可使用该表位设计多肽疫苗，该策略的目的是接种“由明确抗原组成的最小结构”激发有效的特异性细胞免疫应答，并在理论上克服个体差异及民族地区分布特征对疫苗应用效果的影响，具备传统疫苗不可比拟的优点，而且使用安全方便，在抗病毒过程中有着广泛的应用前景。

技术特征：

1.埃博拉病毒核蛋白的泛mhc i优势表位肽，其特征在于，所述优势表位肽的氨基酸序列为seq id no.1～4所示之一。

2.编码权利要求1所述优势表位肽的基因。

3.权利要求1所述优势表位肽在制备用于诱导或增强埃博拉病毒特异性免疫应答的药物中的应用。

4.权利要求1所述优势表位肽在制备用于预防和/或治疗埃博拉病毒感染所致疾病的产品中的应用。

5.权利要求2所述基因在制备用于诱导或增强ebov特异性免疫应答的产品中的应用。

6.权利要求2所述基因在制备用于预防和/或治疗埃博拉病毒感染所致疾病的产品中的应用。

7.根据权利要求4或权利要求5或权利要求6所述的应用，其特征在于，所述产品为表位疫苗。

8.一种埃博拉病毒表位疫苗，其特征在于，其免疫原来自于权利要求1所述优势表位肽。

9.根据权利要求8所述的埃博拉病毒表位疫苗，其特征在于，所述疫苗还包括药学上可接受的载体。

10.根据权利要求9所述的埃博拉病毒表位疫苗，其特征在于，所述疫苗包含或不包含佐剂。

技术总结
本发明属于病原微生物免疫学技术领域，具体涉及埃博拉病毒核蛋白的泛MHC I优势表位肽、其编码基因及其应用。所述优势表位肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.1～4所示之一。本发明通过对埃博拉病毒核蛋白(EBOV NP)进行泛MHC I类抗原特异性优势表位预测、筛选与鉴定，获得并验证得到了12条候选表位，并选择4条代表进行了实验验证。总之，本发明全面评估了EBOV NP的泛MHC‑I免疫反应性，将有助于理解EBOV NP的免疫学特性，并为未来EBOV表位疫苗研制提供指导。

技术研发人员：姜东伯,杨琨,张俊琦,孙煜博,孙报增,王静,张佳幸,王越越,蔡思睿,孙元杰,杨舒雅,胡尘辰,胡飞明,王萌,贺元利,李爽莹
受保护的技术使用者：中国人民解放军空军军医大学
技术研发日：
技术公布日：2024/12/10