一种阿立哌唑的药物组合物及其防治糖尿病的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药领域，涉及阿立哌唑的新用途，具体涉及一种阿立哌唑的药 物组合物及其防治糖尿病的用途。
【背景技术】
[0002] 阿立哌唑化学名称为7-{4-[4-(2,3-二氯苯基)-1_哌嗪基]丁氧基}-3,4_二氢-2 (1H)-喹啉酮。
[0003] 阿立哌唑是一种新型的非典型抗精神分裂症药物，对DA能神经系统具有双向调节 作用，是DA递质的稳定剂。与D2、D3、5-HT1A和5-HT2A受体有很高的亲和力。通过对D2和5-HT1A受体的部分激动作用及对5-HT2A受体的拮抗作用来产生抗精神分裂症作用的。本品口 服后血药浓度达峰时间为3~5小时，半衰期为48~68小时。去氢阿立哌唑为主要活性代谢 物。用于治疗各类型的精神分裂症。国外临床试验表明，本品对精神分裂症的阳性和阴性症 状均有明显疗效，也能改善伴发的情感症状，降低精神分裂症的复发率。
[0004] 目前，尚未见阿立哌唑及其药物组合物与防治糖尿病的相关报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种阿立哌唑的药物组合物，该药物组合物中含有阿立哌 唑和一种从何首乌中分离得到的结构新颖的天然产物，阿立哌唑和该天然产物可以协同防 治糖尿病。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 一种具有下述结构式的化合物（I)，
[0009] -种阿立哌唑的药物组合物，包括阿立哌唑、如上所述的化合物（I)和药学上可以 接受的载体。
[0010] 如上所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将何首乌的干燥块根 粉碎，用75%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱 和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中 正丁醇萃取物用大孔树脂除杂，先用8%乙醇洗脱10个柱体积，再用70%乙醇洗脱12个柱体 积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70%乙醇洗脱浓缩物 用正相硅胶分离，依次用体积比为40:1、20:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4 个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1、5:1和2:1的二氯 甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分 离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体积洗脱液，洗脱液减 压浓缩得到化合物(I)。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为AB-8型大孔吸附树脂。
[0012] 如上所述的化合物(I)在制备防治糖尿病的药物中的应用。
[0013] 如上所述的阿立哌唑的药物组合物在制备防治糖尿病的药物中的应用。
[0014] 本发明的优点：
[0015] 本发明提供的阿立哌唑的药物组合物中含有阿立哌唑和一种从何首乌中分离得 到的结构新颖的天然产物，阿立哌唑和该天然产物单独作用时，防治糖尿病效果一般;二者 联合作用时，防治糖尿病效果显著提高，可以开发成防治糖尿病的药物。本发明与现有技术 相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【具体实施方式】
[0016] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0017] 实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0018] 分离方法：（a)将何首乌的干燥块根（5kg)粉碎，用75 %乙醇热回流提取（20L X 3 次），合并提取液，浓缩至无醇味(4L)，依次用石油醚(4LX3次）、乙酸乙酯(4LX3次)和水饱 和的正丁醇(4LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b) 步骤(a)中正丁醇萃取物用AB-8型大孔树脂除杂，先用8%乙醇洗脱10个柱体积，再用70% 乙醇洗脱12个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中 70 %乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为40:1 (8个柱体积）、20 :1 (8个柱体 积）、10:1(8个柱体积)和5:1(10个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步 骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为8:1(8个柱体积）、5:1(10个柱体积） 和2:1(5个柱体积）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷 基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个 柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物（I) (195mg，HPLC归一化纯度大于98% )。
[0019] 结构确证:无色结晶，册431-1^显示[1?1]+为111/2 333.2027，结合核磁特征可得 分子式为〇2〇1128〇4，不饱和度为7。核磁共振氢谱数据5[1(口口11145^1(1；[116-(15,500102):11-2& (3.66，dd，J=16.4，11.2Hz)，H-2b(3.33，ddd，J=16.4,5.5，l. 1Hz)，H-3(6.99，m)，H-5a (3.23，d，J= 15.6Hz)，H-5b(2.98，dd，J=15.6,9.3Hz)，H-6(5.06，dd，J = 9.3，1.4Hz)，H-7 (1.89，m)，H-8(1.48，m)，H-9a(2.26，dd，J=16.5,2.4Hz)，H-9b(1.58，ddd，J=16.5,7.6， 4.2Hz)，H-10(3.16，m)，H-ll(1.80，m)，H-12(0.93，d，J = 5.7Hz)，H-13(1.07，d，J = 6.6Hz)， H-14(l .13，d，J = 5.7Hz)，H-3'（7.01，m)，H-4'（l .65，d，J = 7.3Hz)，H-5'（1.84，s);核磁共 振碳谱数据 Sc(ppm，pyridine-d5，125MHz): 207.8(C，1-C)，42.6(CH2,2-C) 130.9(CH，3-C)， 132.4(C，4-C)，28.3(CH2,5-C)，77.4(CH，6-C)，52.7(CH，7-C)，22.4(CH，8-C)，34.8(CH 2,9-C)，59.9(CH，10-C)，26.4(CH，11-C)，22.1(CH3，12-C)，23.8(CH 3，13-C)，18.4(CH3，14-C)， 171.2(C，15-C)，200.1(C，1'-C)，129.3(C，2'-C)，138.2(CH，3'-C)，14.5(CH3,4'-C)，13.1 (CH 3，5 ' -C)。红外波谱中的1756cm-1吸收带与UV谱中的236nm吸收带表明该化合物含有a，f3-不饱和内酯结构，红外波谱中的1715CHT 1与1680CHT1吸收带表明结构中存在酮基与双键片 段。13C-匪R、DEPT和HSQC谱中显示有20个碳信号，包括五个甲基，三个亚甲基，七个次甲基 (一个连氧碳和两个烯烃碳），以及五个季碳(三个羰基碳和两个烯烃碳），以上功能结构再 结合不饱和数表明该化合物为双环结构。匪R谱结合HSQC谱显示五个甲基质子信号S H 0.93(3H，d，J = 5.7Hz)、1.07(3H，d，J = 6.6Hz)、l. 13(3H，d，J = 5.7Hz)、l .65(3H，d，J = 7.3他）、1.84(311，8)，两个烯烃质子信号知6.99(111，111)与7.01(111，111)，一个连氧次甲基质 子信号知5.06(111，(1(1，1 = 9.3，1.4泡），三组亚甲基质子信号知3.33(111，(1(1(1，1=16.4， 5.5，1.1他）与3.66(111，(1(1，了=16.4，11.2他）、3.23(111，(1，了=15.61^)与2.98(111，(1(1，了 = 15.6,9.3泡）、2.26(111，(1(1，了=16.5,2.41^)与1.58(111，(1(1(1，了=16.5,7.6,4.2抱），四个次 甲基质子信号Sh COSY谱中存在 H2-2/H-3、H2-5/H-6/H-7/H-8/H2-9/H-10、H-7/H-ll/H3-12 以及 H-ll/H3-13、H-8/H3-14 相关 信号，结合HMBC谱中显示的H2-2、H2-9和H-10与C-1以及H2-2、H 2-5和H-6与C-4相关信号可以 构建吉马烷型倍半萜骨架。而1H-咕⑶SY谱中H 3-5 '/H-3 '/H3-4'相关信号以及HMBC谱中H-3'与C-2'、C-4'和C-5'相关信号可以构建另一部分片段，同时HMBC谱中H-10与C-1'的相关 性表明这一片段与吉马烷型倍半萜骨架连接的位置。另外HMBC谱中H-3、H 2-5和H-6与C-15 相关信号暗示C-6与C-15之间存在一个内酯环结构。N0ESY谱中，假设H-8为0构型，那么H-8 与H-10的相关性表明H-10也为树勾型，因此，0-2'-甲基_2'_丁烯酮基应该为a构型。此外，H-9b与H-8存在相关信号，所以H_9a与H_2a以及H_9a与H_5a的相关性表明H-2a、H-5a、H_9a皆 为a构型，同时H_2a与H_5a的相关信号表明A 3(4)双键为E构型。综合氢谱、碳谱、HMBC谱和 N0ESY谱，以及文献关于相关类型核磁数据，可基本确定该化合物如下所示，立体构型进一 步通过ECD试验确定，理论值与实验值基本一致。该化合物化学结构式及碳原子编号如下：
[0021 ]实施例2:对2型糖尿病大鼠血糖的影响 [0022] 1、材料与方法
[0023] 1.1动物
[0024] 选用健康清洁级雄性Wistar大鼠100只，约2月龄，体重150~180g(湖北省防疫 站），标准饲料(华中科技大学同济医学院实验动物中心）。
[0025] 1.2试剂及仪器
[0026] 阿立哌唑购自中国药品生物制品检定所。化合物（I)自制，制备方法见实例1。二甲 双胍(常州亚邦生物试剂公司，纯度99.3% );链脲佐菌素(STZ，Sigma公司），血糖试剂盒(南 京建成生物有限公司），血脂试剂盒(浙江东瓯生物工程有限公司）。血清胰岛素（INS)放免 试剂盒（中国人民解放军总医院科技开发中心放免研究所）。检测仪器为中国山东彩虹分析 仪器厂GF-D 800型半自动化生化分析仪;美国ELx800酶标仪。
[0027] 1.3动物模型的建立和分组
[0028] 大鼠标准饲料适应性喂养2周后，随机选出10只大鼠标准饲料喂养，自由进食、进 水作为正常组。剩下的90只大鼠给予高脂、高糖饮食(蔗糖-猪油-奶粉-鸡蛋-普通饲料=30 :20:4: 2: 63)喂养8周之后，大鼠按25mg ? kg<剂量尾静脉注射链脲佐菌素，喂养2周后作 0GTT实验，筛选糖耐量异常者50只进行随机分组：模型对照组、阳性对照组（二甲双胍组， 50mg ? kg-3、阿立哌唑组（280mg ? kg-3、化合物（I)组（280mg ? kg-4、阿立哌唑与化合物 (I)组合物组，总共5组，每组10只。
[0029] 1.4动物处理
[0030] 阿立哌唑组每日以280mg ? kg-1阿立哌唑灌胃；化合物（I)组每日以280mg ? kg-1化 合物（I)灌胃；阿立哌唑与化合物（I)组合物组每日以140mg ? kg-1阿立哌唑+140mg ? kg-1化 合物（I)灌胃；阳性对照组每日以50mg ? kg^1二甲双胍灌胃；正常对照组和模型对照组每日 以等量0.9 %生理盐水灌胃。
[0031] 1.50GIT 实验
[0032]大鼠模型筛选及治疗6周后均实行0GTT实验。动物禁食12h后，以25%葡萄糖水按 2.5g ? kg^1剂量灌胃。分别于灌胃前及灌胃后60、120min剪尾取血，采用葡萄糖氧化酶法测 定各时间点血糖(BG)。
[0033] 1.6指标测定
[0034]大鼠治疗6周后，动物禁食12h后用水合氯醛腹腔注射麻醉，腹主动脉取血并处死 动物，按试剂盒上的说明加样检测。血糖值用葡萄糖氧化酶法测定。
[0035] 1.7统计学方法
[0036]计量资料用x±s表示，采用SPSS19.0软件，多组间比较用方差分析，两两间比较用 q检验，治疗前后比较采用配对t检验，P〈0.05为有显著性差异。
[0037] 2、实验结果
[0038]药物干预6周后各组血糖水平的比较
[0039]与正常对照组比较，模型对照组血糖显著升高(P〈0.05)，证明造模成功;与模型对 照组比较，阿立哌唑组、化合物（I)组血糖显著降低(P〈〇. 05);与模型对照组比较，阿立哌唑 与化合物（I)组合物组血糖显著降低(P〈〇.01)，接近于阳性药降糖效果。结果见表1。
[0040] 表1药物干预后各组血糖水平比较.mmol ? 土s
[0042]上述结果表明，阿立哌唑和本发明提供的化合物（I)单独作用时，对糖尿病大鼠的 血糖具有降低作用;阿立哌唑和本发明提供的化合物(I)联合作用时，对糖尿病大鼠的降血 糖作用更为明显，比阿立哌唑或化合物（I)单独作用时效果更好，可以开发成防治糖尿病的 药物。
[0043]上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种具有下述结构式的化合物α)，2. -种阿立哌唑的药物组合物，其特征在于:包括阿立哌唑、如权利要求1所述的化合 物(I)和药学上可以接受的载体。3. 权利要求1所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于，包含以下操作步骤：（a)将何 首乌的干燥块根粉碎，用75%乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、 乙酸乙酯和水饱和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取 物；（b)步骤(a)中正丁醇萃取物用大孔树脂除杂，先用8%乙醇洗脱10个柱体积，再用70% 乙醇洗脱12个柱体积，收集70%洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中 70 %乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为40:1、20:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到4个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为 8:1、5:1和2:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅 烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为75 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~14个柱体 积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到化合物(I)。4. 根据权利要求3所述的化合物（I)的制备方法，其特征在于:所述大孔树脂为AB-8型 大孔吸附树脂。5. 权利要求1所述的化合物（I)在制备防治糖尿病的药物中的应用。6. 权利要求2所述的阿立哌唑的药物组合物在制备防治糖尿病的药物中的应用。
【专利摘要】本发明公开了一种阿立哌唑的药物组合物及其防治糖尿病的用途，本发明提供的阿立哌唑的药物组合物中含有阿立哌唑和一种从何首乌的干燥块根中分离得到的结构新颖的天然产物化合物(Ⅰ)，阿立哌唑和该天然产物单独作用时，防治糖尿病效果一般；二者联合作用时，防治糖尿病效果显著提高，可以开发成防治糖尿病的药物。本发明与现有技术相比具有突出的实质性特点和显著的进步。
【IPC分类】A61K31/343, C07D307/00, A61P3/10, A61K31/496
【公开号】CN105712957
【申请号】CN201610167477
【发明人】李晨露
【申请人】李晨露