一种气道粘液模型的制备方法
【专利摘要】本发明的目的在于提供一种气道粘液模型的制备方法，该粘液模型的化学组分和物理性质与人气道粘液相匹配。所述模型的配方为：二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)+羟乙基纤维素(HEC)+血清蛋(BSA)+戊二醛(GA)+磷酸盐缓冲液(PBS)。制备方法为：(1)按照要求配置磷酸盐缓冲液；(2)将DPPC溶解在步骤(1)制备好的磷酸盐缓冲液中，磁力搅拌2小时；(3)将BSA、HEC加入到搅拌好的溶液中用垂直混合仪混合数天；(4)将GA加入步骤(3)制得溶液中在一定温度范围内进行交联反应，收集交联后的溶液进行冷冻干燥。本发明工艺简单，成本低廉，无毒害，该粘液模型生物、物理、化学性质与人气道粘液模型匹配，在粘液的保护机制、病理分析、药物输送、基因载体治疗方面至关重要。
【专利说明】一种气道粘液模型的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及合成气道粘液模型合成技术，特别是一种用于生物医学领域的气道粘 液及其合成方法。
【背景技术】
[0002] 呼吸道粘液是气道防御屏障的重要组成部分，粘液层可粘附吸人气体中含有的病 原微生物和有害物质的颗粒，并通过纤毛运动和咳嗽将其排除。此外，还在维持气道湿化、 协助上皮细胞功能等方而起着重要作用。但是如果粘液分泌异常，长期和过度粘液分泌 (又称为慢性粘液高分泌）积聚，可导致呼吸道疾病。所以了解气道粘液的生理、化学物理 性质至关重要。现有的研究中，气道粘液的收集困难重重。患有呼吸道疾病的患者的粘液 具有各种病菌，而且个体差异很大，不足以做系统的统计分析。另一个途径是培养人气道上 皮细胞，让其自然分泌气道粘液然后收集，由于样品容量太少，不能满足实验研究需求。因 此，气道粘液模型的建立提供了一种便捷有效的途径。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种气道粘液模型的制备方法，该方法具有安全、高效、简 单的特点，弥补气道粘液研究的一些缺陷。
[0004] 本发明是按下述方法实现的：（1)配制含有钠离子、钙离子、磷酸根离子的磷酸盐 缓冲液；(2)将DPPC溶解在步骤（1)制备好的磷酸盐缓冲液中，磁力搅拌数小时；（3)将 BSA、HEC加入到搅拌好的溶液中用垂直混合仪混合数天；(4)将GA加入步骤（3)制得溶液 中在4°C?25°C进行交联反应，收集交联后的溶液进行冷冻干燥。
[0005] 本发明制备的气道粘液模型的理化性质可通过调整HEC含量进行改变。该气道粘 液模型可以被广泛的应用于药物输入、基因载体治疗、粘液保护机制等生物医学领域。
【具体实施方式】
[0006] 下面对本发明的实施例做详细的说明，本实施例在以本发明技术方案的前提下进 行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实 施案例。
[0007] 实例 1
[0008] 1.在10ml的去离子水中加入氯化钙、氯化钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠配制缓冲液。
[0009] 2.将0· lg DPPC加入上述配制好的磷酸盐缓冲溶液中，磁力搅拌2小时。
[0010] 3.将0. 12g HEC、0. llgBSA加入反应液中用垂直混合仪混合5天。
[0011] 4.将lmlGA溶液交联剂加入混合均匀的溶液中在4°C诱发交联反应。
[0012] 5.收集交联反应后的溶液并冷冻干燥。
[0013] 实例 2·
[0014] 1.在10ml的去离子水中加入氯化钙、氯化钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠配制缓冲液。
[0015] 2.将0· lg DPPC加入上述配制好的磷酸盐缓冲溶液中，磁力搅拌2小时。
[0016] 3.将0. 24g HEC、0. llgBSA加入反应液中用垂直混合仪混合5天。
[0017] 4.将lmlGA溶液交联剂加入混合均匀的溶液中在4°C诱发交联反应。
[0018] 5.收集交联反应后的溶液并冷冻干燥。
[0019] 实例 3·
[0020] 1.在10ml的去离子水中加入氯化钙、氯化钠、磷酸氢钠、磷酸二氢钠配制缓冲液。
[0021] 2.将0· lg DPPC加入上述配制好的磷酸盐缓冲溶液中，磁力搅拌2小时。
[0022] 3.将0. 68g HEC、0. llgBSA加入反应液中用垂直混合仪混合5天。
[0023] 4.将lmlGA溶液交联剂加入混合均匀的溶液中在4°C诱发交联反应。
[0024] 5.收集交联反应后的溶液并冷冻干燥。
【权利要求】
1. 一种气道粘液模型的制备方法，其特征在于：该气道粘液模型在生物、物理、化学性 质方面与人气道粘液相匹配。
2. 根据权利要求1所述的气道粘液模型的制备方法，其特征在于：所述气道粘液模型 在粘液的保护机制、病理分析、药物输送、基因载体治疗等生物医学领域至关重要。
3. 根据权利要求1所述的气道粘液模型的制备方法，其特征在于：所述气道粘液模型 的配方为 DPPC+HEC+BSA+GA+PBS。
4. 根据权利要求1所述的气道粘液模型制备方法，其特征在于：所述的表面活性剂为 DPPC，将其溶于磷酸盐缓冲液中，用磁力搅拌器搅拌1小时。
5. 根据权利要求1所述的气道粘液模型的制备方法，其特征在于：将BSA、HEC溶解在 搅拌之后的缓冲液中在垂直混合仪上混合数天，将GA交联剂诱发交联反应，收集交联后的 溶液进行冷冻干燥。
【文档编号】C08J3/24GK104151573SQ201410328382
【公开日】2014年11月19日 申请日期:2014年7月11日 优先权日:2014年7月11日
【发明者】刘志伟, 邓林红, 周欢, 赵宏博, 刘磊 申请人:常州大学