专利名称：新的氨基甲酸酯键降解细菌的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种新的微生物以及通过使用这种微生物进行生物处理降解聚氨酯的方法。
背景技术：
近几年，塑料废物处置成为一个问题。用于塑料废物处置的主要方法是焚化和回收。然而，焚化是有缺陷的，因为它加速地球变暖，而回收遇到了例如缺少用于回收的填埋土地等问题。例如，全世界每年消耗聚氨酯的比率约为6,000,000吨，日本每年的消耗率约550,000吨。其中，用聚氨酯制作的泡沫软垫材料作为保温材料大规模使用，例如由于其卓越的热绝缘性而用于冰箱。目前，聚氨酯废物常常作为不可燃垃圾填埋处理，但是伴随这样的处理产生了问题，例如缺少填埋土地，和环境污染。而从保护自然环境的观点看，微生物的生物降解可用做优选的处理方法，问题是聚氨酯不是可生物降解的。
聚氨酯在其分子中包含氨基甲酸酯键以及酯或醚键，通过切割这些键进行降解。据报道，多元醇单元中的酯键由真菌和/或细菌切割。Dardy等(Darby R.T.和Kaplan A.M.，聚氨酯的真菌敏感性，Appl.Microbiol.，16，900-905(1968))对多种聚氨酯进行了真菌降解试验。它们报道酯基的聚氨酯对降解的敏感性高于醚基的聚氨酯，并降解特性依赖于异氰酸酯和/或多元醇的类型而改变。Kay等(Kay，M.J.，McCabe，R.W.，Morton，L.H.G.，聚酯聚氨酯生物降解过程中发生的化学和物理变化Int.Biodeterio.Biodegrad.，31，209-225(1991)，分离了能够降解酯-基的聚氨酯的15个菌株，并报道了寻找具有强降解能力的棒状杆菌菌株降解特性的结果。
然而，几乎没有关于聚氨酯中氨基甲酸酯键降解的知识或信息。尽管一些报道表明氨基甲酸酯键在微生物降解过程中被水解，但在氨基甲酸酯键切割和微生物之间没有发现明确的因果关系(B.Jansen等，表皮葡萄球菌降解合成的聚氨酯的证据，Zentralbl Bakteriol.，276，36(1991)；Darby R.T.和Kaplan A.M.，聚氨酯的真菌敏感性，Appl.Microbiol.，16，900-905(1968))。
另一方面，已报道低分子氨基甲酸酯化合物经历微生物降解，已知这种降解由酯酶催化。然而，这些报道中的绝大部分涉及改进酒精饮料或降解/去除氨基甲酸酯杀虫剂(JP 01-300892 A，JP 01-240179 A，JP02-128689 A，JP 03-175985 A，JP 04-104784 A，JP 04-325079 A)；这些技术中没有任何一种可适用于聚氨酯的降解。真菌降解被报道为用于降解可用做聚氨酯原料的物质的技术(JP 09-192633 A)，但该技术不使用易于适应大规模培养的细菌。
关于固体聚氨酯降解细菌，已知下列菌株降解聚酯基聚氨酯解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus)株TB-13(日本专利申请2002-334162)和食酸丛毛单胞菌(Comamonas acidovorans)株TB-35(T.Nakajima-Kambe，F.Onuma，N.Kimpara和T.Nakahara，利用聚酯聚氨酯作为唯一碳和氮源的细菌分离和表征，FEMS MicrobiologyLetters，129卷，39-42，1995)。然而，虽然这些菌株降解氨基甲酸酯中的酯键，它们基本上不降解氨基甲酸酯键。因此，为了确保聚氨酯的完全细菌降解，需要能够降解氨基甲酸酯键的细菌。
发明公开本发明的目的是提供一种能够降解氨基甲酸酯化合物的新微生物和使用这种微生物降解氨基甲酸酯化合物的方法。更具体地，本发明目的在于提供能够降解用做聚氨酯原料的氨基甲酸酯化合物的微生物以及使用这种微生物降解聚氨酯的方法。
为了达到上述目的，本发明人筛选了降解用做聚氨酯合成原料的低分子量氨基甲酸酯的微生物，并发现属于红球菌属(Rhodococcus)的微生物具有降解氨基甲酸酯化合物的能力。应该注意到以前不知道属于红球菌属的微生物具有任何降解氨基甲酸酯化合物的能力。本发明人还发现使用属于红球菌属的微生物降解聚氨酯的方法。
也就是说，本发明提供了一种属于红球菌并具有降解氨基甲酸酯化合物能力的微生物，该氨基甲酸酯化合物特别是用做聚氨酯合成原料的低分子量氨基甲酸酯化合物，本发明还提供使用属于红球菌属的微生物降解聚氨酯的方法。
附图的简要描述
图1显示用于筛选氨基甲酸酯-键-降解细菌的合成的氨基甲酸酯化合物的结构。
图2显示包括已知菌株的基于rDNA序列的树形图。
图3显示各自培养条件下剩余的氨基甲酸酯化合物I的测定量的结果。
图4显示测定各自培养条件下产生的二胺的测定量的结果。
图5显示测定各自培养条件下细菌细胞生长的测定量的结果。
发明详述如上所述，本发明提供了属于红球菌属并具有降解氨基甲酸酯化合物能力的微生物，具体地，该氨基甲酸酯化合物是用做聚氨酯合成原料的低分子量氨基甲酸酯化合物，本发明也提供了使用属于红球菌属的微生物降解聚氨酯的方法。
属于红球菌属并具有降解氨基甲酸酯化合物能力的微生物可以是已知的或新筛选的微生物。通过举例，筛选微生物可如下完成。将从各个地区收集的土壤样品加入含有添加了用做聚氨酯合成原料的低分子量氨基甲酸酯化合物的培养基的试管中，随后30℃振动培养。每周重复传代培养后，挑选在培养液中显示浑浊或变色的那些样品，将其培养上清稀释并加到NB琼指平板上，随后在30℃培养1-3天。挑取生长的菌落并定义为氨基甲酸酯键降解细菌的候选菌株。然后在含有作为碳源的通过甲苯二异氰酸酯和丁醇之间反应获得的低分子量氨基甲酸酯化合物(氨基甲酸酯化合物I)的液体培养基中培养获得的候选菌株，随后在其培养液中挑选显示产生甲苯二胺(氨基甲酸酯化合物I的氨基甲酸酯键水解产物)的菌株。
本发明的微生物不以任何方式受到限制，只要它属于红球菌属并具有降解包含氨基甲酸酯键的化合物的能力。更具体地，典型的例子包括2004年1月24日由德国保藏机构DSMZ(德国微生物和细胞培养中心)，Mascheroder Weg 1 B，D-38124 Braunschweig，德国)国际保藏的马红球菌(Rhodococcus equi)TB-60-DSMZ 16175，它是尽管在2003年2月26日申请保藏但没有被国际专利生物保藏机构(日本先进工业科技国家机构(National Institute of Advanced Industrial Science andTechnology in Japan))接受的马红球菌菌株TB-60。红球菌菌株的真菌学特性可在伯杰氏系统细菌学手册(1卷，1984，2卷，1986，3卷，1989，4卷，1989)中找到。
此外，本发明的微生物可以是野生型或突变株，只要它是具有降解氨基甲酸酯键能力的红球菌菌株。
突变株可通过用甲磺酸乙酯(一种常规经常使用的诱变剂)诱变、用其它化学物质处理(例如亚硝基胍、甲磺酸甲酯)、紫外辐射或不使用任何诱变剂的所谓自发突变获得。
培养属于红球菌属的微生物可使用的任何培养基没有特别限制，只要它允许属于红球菌属的微生物生长。例子包括但不限于，LB培养基(1％胰蛋白胨，0.5％酵母提取物，1％NaCl)。更具体地，用于本发明微生物生长的培养基可包含可由本发明微生物同化的碳源(例如，葡萄糖)和可由本发明微生物同化的氮源。这种氮源包括有机氮源例如蛋白胨、肉提取物、酵母提取物或玉米浆，和无机氮源例如硫酸铵或氯化铵。如果需要，培养基可进一步包含由阳离子(例如钠离子、钾离子、钙离子、镁离子)和阴离子(例如硫酸根离子、氯离子、磷酸根离子)等组成的盐。此外，培养基还可添加痕量成分例如维生素和核酸。碳源的浓度范围从例如约0.1％-10％，而氮源的浓度依赖于其类型而改变，其范围从例如约0.01％-5％。无机盐的浓度范围从例如约0.001％-1％。
不以任何方式限制可在本发明中降解的氨基甲酸酯化合物，只要在其分子结构中包含氨基甲酸酯键。非限制的例子包括，甲苯-2，4-氨基甲酸二丁酯、甲苯-2，6-二氨基甲酸二丁酯、亚甲基双苯基二氨基甲酸二丁酯、亚己基-二氨基甲酸二丁酯、降冰片烯二氨基甲酸二丁酯，以及用这些物质合成的聚氨酯。
术语“聚氨酯”是在其分子中具有氨基甲酸酯键(-NHCOO-)的高分子化合物的总称，其是指具有例如酯、醚、酰胺、脲和/或氨基甲酸酯等基团的聚合物，其可通过多官能异氰酸酯和含羟基化合物之间的反应获得。当改变羟基或异氰酸酯基团的官能性时，可制备各种分支的或交联的聚合体。根据使用的多元醇的类型可将它们大致分为酯基和醚基的聚氨酯。由于它们良好的特性例如易加工性、抗腐败、抗酸败和低密度，聚氨酯具有广泛的用途，包括弹性材料、泡沫材料、粘合剂、包装材料、纤维和合成革，还可广泛地用做汽车元件。对可通过本发明降解方法处理的聚氨酯树脂的数均分子量没有具体限制。
另外，本发明提供通过微生物的作用降解含氨基甲酸酯键的化合物的方法。该方法基于在微生物生长过程中氨基甲酸酯键作为营养源被降解和消耗的现象，或基于微生物酶降解氨基甲酸酯键的作用，也就是基于成熟的微生物细胞(例如静止细胞)的使用。换句话说，准备处理氨基甲酸酯化合物前，这些细胞可以常规方式冻干得到细胞干粉，并可进一步与各种维生素、矿物质和必需的营养源(例如酵母提取物、酪蛋白氨基酸、蛋白胨)混合配制形成包括片剂的固体制剂。另外，菌株本身也可用做活化的污泥和肥料的成分。
待降解的氨基甲酸酯化合物可以乳剂或粉末形式加入液体培养基或可以块状形式例如薄膜或颗粒加入。应当注意，加入培养基的氨基甲酸酯化合物的量优选地为重量的0.01％-10％。微生物可以很少的量加入；考虑到降解效率，优选地以相对于氨基甲酸酯化合物重量的0.1％或更多(湿重)的量使用微生物。被降解的氨基乙酸乙酯化合物可单独或组合提供。
在基于微生物生长过程中氨基甲酸酯键作为营养源被降解和消耗的现象的实施方案中，氨基甲酸酯化合物可作为唯一碳源或作为唯一的碳和氮源，或与其它碳和/或氮源一起提供。适于使用的培养基可包含氨基甲酸酯化合物或葡萄糖等作为碳源，以及可由本发明的微生物同化的氮源，包括有机氮源(例如蛋白胨、肉提取物、酵母提取物、玉米浆)或无机氮源(例如硫酸铵、氯化铵)。如果需要，培养基可进一步包含由阳离子(例如钠离子、钾离子、钙离子、镁离子)和阴离子(例如硫酸根离子、氯离子、磷酸根离子)等组成的盐。此外，培养基还可添加痕量成分例如维生素和核酸。碳源的浓度范围从例如约0.1％-10％，而氮源的浓度依赖于其类型而改变，其范围从例如约0.01％-5％。无机盐的浓度范围从例如约0.001％-1％。
在使用微生物酶的作用降解氨基甲酸酯键的实施方案中，即在使用成熟的微生物细胞例如静止细胞的实施方案中，既然在氨基甲酸酯键降解过程中不需要微生物生长，那么培养基可以是包含氨基甲酸酯化合物的缓冲液，它可进一步添加氮源、无机盐、维生素等。缓冲液的例子包括磷酸缓冲液。
降解氨基甲酸酯化合物所需的时间依赖于待降解的氨基甲酸酯化合物的类型、组成、形状和量、使用的微生物的类型和量(相对于氨基甲酸酯化合物)、以及各种培养条件等而变化。
本发明中，当在需氧条件下对上述微生物进行静置培养、摇床培养或通气培养时可观察到氨基甲酸酯化合物的降解。优选的是回转式摇床培养，其转速范围可以是每分钟30-250转。关于培养条件，培养温度可以是10℃-50℃，特别优选30℃左右。培养基的pH范围可以是4-10，优选7左右。
例如通过测定降解造成的氨基甲酸酯化合物的重量损失、通过使用高效液相层析(HPLC)测定剩余的氨基甲酸酯化合物的量、或通过测定二胺化合物的产生(氨基甲酸酯键水解产物)可证实培养基中氨基甲酸酯化合物的降解。例如使用预测将要产生的二胺化合物作为标准物质，通过薄层层析、或通过气相层析可证实二胺化合物的产生。
在降解固体聚氨酯的方法的实施方案中，可通过使用已知降解聚酯基聚氨酯中酯键的解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus)菌株TB-13(保藏号FERM P-19104，见日本专利申请2002-334162)和/或食酸丛毛单胞菌(Comamonas acidovorans)菌株TB-35，结合本发明具有降解氨基甲酸酯键能力的微生物，完成聚氨酯的降解。
实施例本发明将通过下列实施例进一步详细描述，这不意味着限制本发明的范围。
实施例1筛选氨基甲酸酯键降解细菌氨基甲酸酯化合物合成步骤合成的氨基甲酸酯化合物(图1)用于筛选氨基甲酸酯键降解细菌。这些化合物是通过将丁醇与用做聚氨酯的工业原料的5种典型的异氰酸酯反应制备的氨基甲酸酯化的产物，这5种典型的异氰酸酯包括甲苯二异氰酸酯(TDI)、亚甲基双苯基二异氰酸酯(MDI)、亚己基二异氰酸酯(HDI)和降冰片烯异氰酸酯(NBDI)。这些化合物(氨基甲酸酯化合物I-V，见图1)是在其分子中各个都具有氨基甲酸酯键的物质，它在室温下是固体并不溶于水。
培养基用于筛选氨基甲酸酯键降解细菌的筛选培养基如下制备。配制10ml显示于表1中的无机盐培养基，加入内径为22mm的大试管中，然后分别添加氨基甲酸酯化合物I-V(约0.1g)作为碳源，随后在121℃灭菌20分钟。用于制备培养基的所有试剂都是具有试剂级别或同等质量的，从Wake Pure Chemical Industries，Ltd.，日本购买。
表1 筛选培养基
PH7.0
筛选将从日本的各个地区收集的土壤样品(350个样品)用做筛选源。50个试管用于各个氨基甲酸酯化合物I-V(共250个试管)。这些土壤样品以20个样品每组混合物在一起，并以每试管0.2g的量加入包含上述筛选培养基的试管中。各个试管在30℃、125osc/分用摇床培养，每周将各个试管的上清液(0.5ml)转移到新鲜的筛选培养基中。重复这一步骤3次后，选择培养液中显示浑浊或变色的26个试管的样品，其培养上清用生理盐水稀释并加到NB琼脂平板上，随后在30℃培养1-3天。一个一个地收集长成的菌落并用做氨基甲酸酯键降解细菌的候选菌株。在NB琼脂平板上30℃培养后，细菌细胞悬浮于20％的甘油溶液中并在-80℃贮存。
这样获得的候选菌株在含有氨基甲酸酯化合物I作为碳源的液体筛选培养基中以30℃、125osc/分培养，然后通过薄层层析证实其培养液中甲苯二胺(氨基甲酸酯化合物I的氨基甲酸酯键水解产物)的产生。用等量的乙酸乙酯提取各个培养上清(0.5ml)，获得的乙酸乙酯层(60μl)在薄层平板上(Merck，Kieselgel 60F254)打点。将乙酸乙酯、甲醇和水的比为80∶35∶3的混合物用做展开剂。由于在UV辐射下吸收产生黑点，甲苯二胺作为标准物质也被打点并用于Rf值的确认。结果，获得了显示甲苯二胺(氨基甲酸酯键水解产物)产生的一个菌株。该菌株被定义为菌株TB-60并贮存于-80℃。应该注意该菌株从使用化合物I的筛选系统获得。
实施例2鉴别氨基甲酸酯键降解菌株TB-60依据标准步骤进行生理试验。通过参考伯杰氏系统细菌学手册(Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology，BaltimoreWILLIAMS& WILKINS Co.，(1984))，连同使用微生物鉴定系统(Microlog 3，BIOLOG，USA)完成鉴别。通过使用能够扩增几乎全长的真细菌16SrDNA的引物组27F和1492R的直接PCR进行16srDNA的测序和分析。
形态学和生理学特性试验表2显示了检验菌株TB-60各种形态学和生理学特性的结果。该菌株是革兰氏阳性棒状细菌并显示即无游动性又无孢子形成。此外，该菌株形成极其富含水的白色半液体菌落。该菌株在氧化酶试验中呈阴性，在过氧化氢酶试验中呈阳性，在OF试验中呈阴性。
表2氨基甲酸酯降解菌株TB-60的真菌学特性
用BIOLOG鉴别系统鉴别作为使用BIOLOG细菌鉴别系统鉴别试验的结果，该菌株以95％的概率被鉴定为马红球菌(Rhodococcus equi)。没有发现其它菌株具有50％或更多的相似性。
表3使用BIOLOG鉴定菌株TB-60的结果
16SrDNA核苷酸序列几乎全长的16SrDNA通过集落直接PCR从这一菌株扩增，并测定535bp上游区域(SEQ ID NO1)和497bp下游区域(SEQ ID NO2)的序列。
当基于得到的序列进行BLAST同源性检索时，该菌株被认为是具有在上游区域98％匹配和在下游区域100％匹配的马红球菌。图2显示了以序列为基础的包括已知菌株的树形图。
这些结果鉴定该菌株为马红球菌。
实施例3使用马红球菌菌株TB-60对氨基甲酸酯化合物进行降解试验试验菌株使用作为氨基甲酸酯化合物降解细菌获得的马红球菌菌株TB-60。
培养基和试剂除上述筛选培养基外，实验中使用包含除氮源外相同成分的培养基，以在氨基甲酸酯化合物I作为碳源或作为碳/氮源存在的情况下培养菌株。试验中使用的所有试剂都具有试剂级别或同等质量，购自WakoPure Chemical Industries，Ltd.，日本。
培养条件以2％溶解于乙醚的氨基甲酸酯化合物I配制成0.1ml，加入内径为16mm的小试管中，放置于通风室中使乙醚充分挥发，然后加入2ml培养基后，在高压灭菌器中120℃灭菌20分钟。马红球菌菌株TB-60悬浮于O.D.660＝0.2的无菌生理盐水中，并以100μl的体积接种到各个试管中，随后在30℃以300rpm用回转式摇床培养0-10天。使用未接种的试管作为对照对于各种情况进行三次重复试验。
测定长成的细菌细胞量通过用吸光计测定培养液的O.D.660确定长成的细菌细胞量。使用吸光计V-550(JASCO Engineering Co.Ltd.，日本)测定吸光度。
测定氨基甲酸酯降解的程度残余的氨基甲酸酯化合物I的量通过高效液相层析(HPLC)测定。加入2ml乙腈后，将各个培养液搅匀，并放置20分钟。将上清液转移到微试管中并在4℃下以12,000rpm离心。获得的上清液进一步转移到2ml的小管中，并作为样品以10μl的体积用于HPLC。使用的层析柱是TSK-GEL ODS-80TM(4.6mm×15cm，Tosoh Corporation，日本)，并使用70％的乙腈作为流动相以0.6ml/分的流速进行分析。UV检波器(240nm)用做检测器。
测定产生的二胺的量氨基甲酸酯键降解产生的甲苯二胺的量通过气相层析(GC)定量。完成培养后，各个培养上清(0.5ml)转移到微管中，补加包含100ppm二苯胺作为内标物质的乙酸乙酯溶液(0.5ml)，然后搅拌10分钟。4℃下，12,000rpm离心后，将上层溶液转移到新的微管中，用无水硫酸钠(约80mg)脱水，并作为样品以2μl的体积用于GC。用GC-2010(Shimadzu Corporation，Japan)进行GC分析，且二苯胺用做浓度计算的内标。使用的层析柱是DB-1(0.25mm×30m，J&W)。层析柱温度设定为180℃，注入器温度设定为300℃。FID检测器用于检测。
结果图3显示各个培养条件下测定残余氨基甲酸酯化合物I的量的结果。接受氨基甲酸酯化合物I作为碳源的系统显示培养开始后10天氨基甲酸酯化合物I的量下降约60％。相反，在补加了氨基甲酸酯化合物I作为碳/氮源的培养基中，氨基甲酸酯化合物I的量仅非常少量地下降。
产生的二胺的量图4显示测定产生的二胺的量的结果。接受氨基甲酸酯化合物I作为碳源的系统显示在10天的培养过程中产生约150ppm的甲苯二胺。相反，在补加了氨基甲酸酯化合物I作为碳/氮源的培养基中，在培养开始时明显产生了二胺，但随后仅少量产生。
长成的细菌细胞数量图5显示测定长成的细菌细胞量的结果。接受氨基甲酸酯化合物I作为碳源的系统显示在培养开始时显著生长。相反，在补加了氨基甲酸酯化合物I作为碳/氮源的培养基中，3天后继续温和生长。
工业适用性可预期本发明中获得的菌株适合于氨基甲酸酯化合物(特别是聚氨酯)的各种处理，包括使用该菌株的纯培养系统进行集约降解、在土壤或肥料中降解、作为肥料再循环等。此外，该菌株是细菌菌株，因此就成本来说用于微生物降解也是优选的，因为通常细菌比其它微生物更易于适合大规模培养。当本发明的微生物与能够降解氨基甲酸酯中的酯键的细菌例如解淀粉类芽孢杆菌菌株TB-13和食酸丛毛单胞菌菌株TB-35结合使用时，能够完成聚氨酯的细菌降解。
序列表<110>Japan Science and Technology Agency<120>新的氨基甲酸酯键降解细菌<130>022987<160>2<210>1<211>535<212>DNA<213>马红球菌TB-60<400>1tagagtttga tcctggctca ggacgaacgc tggcggcgtg cttaacacat gcaagtcgag 60cggtaaggcc cttcggggta cacgagcggc gaacgggtga gtaacacgtg ggtgatctgc 120cctgcactct gggataagcc tgggaaactg ggtctaatac cggatatgag ctcctgtcgc 180atggcggggg ttggaaaggt ttactggtgc aggatgggcc cgcggcctat cagcttgttg 240gtggggtaat ggcctaccaa ggcgacgacg ggtagccggc ctgagagggc gaccggccac 300actgggactg agacacggcc cagactccta cgggaggcag cagtggggaa tattgcacaa 360tgggcgaaag cctgatgcag cgacgccgcg tgagggatga cggccttcgg gttgtaaacc 420tctttcagca gggacgaagc gaaagtgacg gtacctgcag aagaagcacc ggccaactac 480gtgccagcag cccgcggtaa tacgtagggt gcgagcgttg tccggaatta ctggg 535<210>2<211>497<212>DNA<213>马红球菌TB-60<400>2ccttgtggtc ggtatacagg tggtgcatgg ctgtcgtcag ctcgtgtcgt gagatgttgg 60gttaagtccc gcaacgagcg caacccttgt cctgtgttgc cagcgcgtaa tggcggggac 120tcgcaggaga ctgccggggt caactcggag gaaggtgggg acgacgtcaa gtcatcatgc 180cccttatgtc cagggcttca cacatgctac aatggccggt acagagggct gcgataccgt 240gaggtggagc gaatccctta aagccggtct cagttcggat cggggtctgc aactcgaccc 300cgtgaagtcg gagtcgctag taatcgcaga tcagcaacgc tgcggtgaat acgttcccgg 360gccttgtaca caccgcccgt cacgtcatga aagtcggtaa cacccgaagc cggtggccta 420acccttgtgg agggagccgt cgaaggtggg atcggcgatt gggacgaagt cgtaacaagg 480tagcctcagt cagtcaa49权利要求
1.一种属于红球菌属(Rhodococcus)并具有降解氨基甲酸酯键能力的微生物，或其突变株。
2.根据权利要求1所述的微生物，其中属于红球菌属的微生物是马红球菌(Rhodococcus equi)。
3.根据权利要求2所述的微生物，其中属于马红球菌的微生物是马红球菌菌株TB-60。
4.一种降解氨基甲酸酯化合物的方法，包括使氨基甲酸酯化合物与根据权利要求1-3中任何一项所述的微生物接触的步骤。
5.根据权利要求4所述的方法，其中所述氨基甲酸酯化合物是用做聚氨酯生产原料的化合物。
6.根据权利要求4所述的方法，其中所述氨基甲酸酯化合物是聚氨酯。
7.一种降解聚氨酯的方法，包括如下步骤使聚氨酯与根据权利要求1-3中任何一项所述的微生物接触；和使聚氨酯与具有降解聚氨酯中酯键能力的微生物接触。
8.根据权利要求7所述的方法，其中所述具有降解聚氨酯中酯键能力的微生物是解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus)菌株TB-13和食酸丛毛单胞菌(Comamonas acidovorans)菌株TB-35。
全文摘要
从自然环境的观点来看优选的塑料处理方法包括利用微生物的生物降解方法。在此方面，存在的问题是塑料通常是不可生物降解的。本发明提供了能够降解氨基甲酸酯化合物的微生物以及使用所述微生物降解氨基甲酸酯化合物的方法。更具体地，本发明提供了能够降解用做聚氨酯原料的氨基甲酸酯化合物的微生物，以及使用所述微生物降解聚氨酯的方法。
文档编号C08J11/10GK1723276SQ20048000186
公开日2006年1月18日 申请日期2004年3月3日 优先权日2003年3月3日
发明者神户敏明, 茂野雪枝 申请人:独立行政法人科学技术振兴机构