专利名称：羧甲基茯苓多糖的生产工艺的利记博彩app
技术领域：
本发明属于天然高分子多糖类领域，涉及一种将茯苓多糖(Pachymaran)进行化学修饰合成水溶性羧甲基茯苓多糖(Carboxy methyl pachymaran，CMP)的生产工艺。
背景技术：
研究报道[中华微生物学与免疫学杂志，5(5)280(1985)、食用菌学报，3(1)27(1996)、食用菌学报，5(2)18(1998)、福建中医药，33(3)38(2002)]，羧甲基茯苓多糖(CMP)对小鼠肿瘤U～14、S～180肉瘤与肝癌H22有明显的抑制作用，能增强小鼠的免疫功能，还能诱导人血淋巴细胞产生干扰素、白细胞介素、肿瘤坏死因子与粒-巨噬细胞集落刺激因子等天然的细胞活性因子。具有做为抗肿瘤生物反应调节剂的应用前景。
Hamuro等人(1971年)采用异丙醇水为介质，液固相振荡合成反应制取CMP，这仅仅是实验室工艺。工业化生产CMP不可能采用大型振荡设备，所以在技术上难以实现。Hamuro等人(1971年)对CMP产品的后处理及纯化需大量的乙醚、甲醇、丙酮、醋酸与乙醇等试剂。若进行工业化生产，则废水排放量大，会给环境造成一定的污染。
石清东等人(1996年)采用乙醇-水为介质，液固相搅拌反应制取CMP，也难于规模工业化生产。制取的CMP产品羧甲基取代度(D、S)0.92，产品含氯化钠(Nacl)(％)＜3.0，重金属(以Pb计)(％)＜0.002，产品因溶解度(与羧甲基取代度有关)较小，杂质含量较高，因此不能做为注射用药。
发明内容
本发明目的是提供一种羧甲基茯苓多糖的生产工艺。它以水为反应介质，采用液相不振荡(或不搅拌)的方法生产方法，以适应CMP的工业化生产。
合成羧甲基茯苓多糖的化学反应式如下
为了提高羧甲基取代度，氯乙酸与氢氧化钠的浓度相应提高，因此也产生了氯乙酸钠与羟乙酸钠
提高氯乙酸与氢氧化钠的浓度，碱化的茯苓多糖同氯乙酸钠的有效碰撞频率增大，可导致羧甲基化反应速率加快，羧甲基取代度(D、S)可达到1.0，因此羧甲基茯苓多糖产品的溶解度较大。
当合成反应终止，用盐酸溶液或氢氧化钠溶液调PH值6.0～8.0，这时生成物中既含有CMP，还含有低分子物质及氯化物、氯乙酸钠与羟乙酸钠等杂质。用乙醇沉析法使CMP沉析，得以分离，但沉析物仍附着少量杂质。
把干燥后的CMP沉析物溶配成3.3～5.0％的水溶液，用NaOH溶液调PH值9.0～12.0，加入H2O2溶液的量为溶配液的0.5～1.0％，经10～60℃、2～48小时脱色，去除有色物。用盐酸调PH值4.0～7.0，用超滤器(分子筛)滤除分子量0.7×104以下的CMP及残留杂质，然后用乙醇重新沉析，分离沉析物，用乙醇洗涤3次，105℃干燥至恒重，即得高纯度有活性的CMP产品，可供做CMP口服液与CMP注射液。
醇析CMP分离的液体经回收的乙醇可循环使用，回收乙醇后的废液与超滤去除的废液合并，加入适量新配制的石灰水。这时，废液中的低分子CMP、氯乙酸钠，羟乙酸钠均能与之反应生成钙盐沉淀去除，废液中仅含少量NaCl可达到环保排放要求。
本发明所提供的羧甲基茯苓多糖生产工艺方法不需要振荡和搅拌设备，液相静置进行茯苓多糖的羧甲基化，达到简化CMP生产工艺，降低生产成本的目的，提高CMP的溶解度[即羧甲基取代度(D、S)]，CMP的质量符合食品与药品的要求，可供生产CMP口服液与CMP注射液。
具体实施例方式
茯苓5.0kg粉碎，80目过筛，置1号搪玻璃反应罐(200L)中，浸泡14小时，弃水，湿茯苓粉与加入的50L的NaOH溶液(1mol/L)混匀，静置提取并碱化30分钟，3000转/分离心30分钟，分离得A液，弃渣。将A液移置2号搪玻璃反应罐(500L)中。
洗净1号搪玻璃反应罐，放进50L的CLCH2COOH溶液(2mol/L)，缓缓加入25L的NaOH溶液(4mol/L)中和，得B液。反应过程中反应罐夹层冷水冷却。
将冷却的B液移入2号搪玻璃反应罐中与A液合并，再加入NaOH溶液(4mol/L)16.9L，混匀。反应罐夹层蒸汽加热，使合成反应液的温度升至70℃，保温3小时。反应终止后用NaOH溶液(4mol/L)或盐酸溶液(4mol/L)调PH值6.0～8.0，加入相当于反应液2倍体积的乙醇，进行沉析，分离沉析物，沉析物置干燥房80℃干燥2小时，105℃干燥4小时，得羧甲基茯苓多糖粗制品2.5kg。
将2.5kg的羧甲基茯苓多糖粗制品溶解于60L的蒸馏水中，用NaOH溶液(4mol/L)调PH值9.0～12.0。然后加入30％的H2O2溶液0.45L，室温脱色40小时，去除有色杂质，脱色反应终止后用盐酸溶液(4mol/L)调PH值6.0，3000转/分离心30分钟。所得滤液用DH～UF中空纤维超滤器(分子筛)滤除分子量0.7×104以下的羧甲基茯苓多糖及低分子物质。滤液移入洗净的2号搪玻璃反应罐中，加入相当滤液3倍体积的乙醇，进行醇析，分离沉析物。沉析物用适量的乙醇洗涤3次，沥干，置干燥房80℃干燥2小时，105℃干燥4小时，粉碎，得羧甲基茯苓多糖纯品2.0kg。羧甲基茯苓多糖的羧甲基取代度1.0。滤液收集，经蒸留，回收的乙醇可以循环使用。
羧甲基茯苓多糖，白色类粉末或絮状物，无臭。
IR[KBr](cm-1)3700～3000，2900，1600.7，1425.2，1324.9，1078.0，891.0。
UV(0.1mol/LHCl、H2O、0.1mol/LNaOH)无吸收峰。
13C-NMR[H2D](ppm) 180.078、104.870、87.697、86.667、84.935、83.145、77.851、76.490、75.669、73.273、72.296、70.345、62.975。
D20-1.70～1.90，(c＝5，H2O) PH值4.0～7.0水份(％)＜8.0 氯化物(氯化纳)(％)＜0.01重金属(以Pb计)(％)＜0.001砷(As)(％)＜0.0001。
权利要求
1.一种羧甲基茯苓多糖的生产工艺，其特征在于是采用水为反应介质，用氢氧化钠溶液从湿的茯苓粉中提取并碱化茯苓多糖做A液，用氢氧化钠溶液中和氯乙酸溶液做B液，将A、B液混合，另加适量的氢氧化钠溶液，控制反应条件，静置反应合成羧甲基茯苓多糖，其过程中氢氧化钠与茯苓干粉的重量比为0.35～0.45∶1.0；氢氧化钠与氯乙酸的重量比为0.7～0.8∶1.0，茯苓粉、氢氧化钠、氯乙酸重量之和与水的重量比为1∶5～6。
2.按照权利要求1所述的羧甲基茯苓多糖生产工艺，其特征在于提取并碱化茯苓多糖的时间0.5～1.0小时，羧甲基化温度61～74℃；羧甲基化时间3～4小时。
3.按照权利要求1所述的羧甲基茯苓多糖生产工艺，其特征在于合成反应终止后，用盐酸或氛氧化钠溶液调PH值6.0～8.0，生成的羧甲基茯苓多糖用乙醉沉析，乙醇量与水量的体积比为2～3∶1。
4.按照权利要求1所述的羧甲基茯苓多糖生产工艺，其特征在于所述的羧甲基茯苓多糖的纯化方法是干燥后的羧甲基茯苓多糖醇析物与水按1∶20～30进行溶配，用氢氧化钠溶液调溶配液的PH值9.0～12.0，用过氧化氢溶液做脱色剂，过氧化氢溶液与溶配液的体积比为1∶100～200，脱色反应温度10～60℃，时间2～48小时；反应终止后用盐酸调PH值4.0～7.0，用超滤器(分子筛)去除分子量0.7×104以下的羧甲基茯苓多糖及其他低分子物质，用乙醇重新沉析，乙醇量与水量的体积比为2～3∶1。
全文摘要
本发明提供一种采用水为反应介质进行工业化合成羧甲基茯苓多糖的生产工艺。其主要过程是用氢氧化钠溶液从湿的茯苓粉中提取并碱化茯苓多糖做A液，用氢氧化钠溶液中和氯乙酸溶液做B液，将A、B液混合，另加适量的氢氧化钠溶液，控制反应条件，静置反应合成羧甲基茯苓多糖，该方法不需要振荡和搅拌设备，液相静置进行茯苓多糖的羧甲基化，达到简化CMP生产工艺，降低生产成本的目的，提高CMP的溶解度[即羧甲基取代度(D、S)]，CMP的质量符合食品与药品的要求，可供生产CMP口服液与CMP注射液。
文档编号C08B37/00GK1554667SQ20031011166
公开日2004年12月15日 申请日期2003年12月26日 优先权日2003年12月26日
发明者陈春霞, 林志彬 申请人:三明市真菌研究所