专利名称：通过马烯雌(甾)酮的酸性异构化得到马烯雌(甾)酮双键异构物的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)(亦称为8α-3-羟基雌(甾)-1，3，5(10)，9(11)四烯-17-酮)、涉及其制备方法，涉及含有所述Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)的药物组合物，以及涉及所述Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)在改变骨生成-骨吸收平衡，以及在包括人在内的宿主动物体内作为抗氧剂的应用。
背景技术：
骨质疏松症是一种骨骼疾病，已证实它是由于周身骨密度减低而产生的。实际上，无论是骨无机质(称作“羟磷灰石”的磷酸钙)还是骨基质(主要是称作“胶原蛋白”的蛋白质)都慢慢丢失。早在30岁左右的人就可开始罹患此症。一般绝经后的妇女，其病程快于男人。然而，在80岁以上的年纪，骨质疏松症的发病率就不再有性别差异。在10-20年的骨丢失进程中，可以有背痛的症状，X射线也能证实脊柱变形。在高龄，股骨近端(腕部)易发生骨折，显而易见是骨头变脆了。在45岁以上骨质疏松是骨折的最普遍的原因。
虽然对骨质疏松的起因还知之甚少，但据信和骨生成与骨吸收(骨分解)失衡有关。在动物的整个一生中，骨骼一直是一种处于动态的组织。这就是说，新骨连续地形成，而旧骨不断被吸收。然而对于罹患骨质疏松症的动物，净的骨吸收超过了骨生成。
一项调查表明，在美国有大约1500-2000万人受到骨质疏松症的折磨[W.A.Peck(主席)，NIH Osteoporosis Conscnsus Conference，J.Am.Med.Assoc.，10.，252799-802(1984)]。按照特定的条件不同，据认为各种类型的骨质疏松症是有其原因的老年性(衰老)、绝经后(妇女丧失雌激素)、废用性(慢性固定不动)和类固醇性(长期用类固醇治疗关节炎)。骨质疏松症也可表现在牙病上，因为下颌骨的骨损失比任何其它骨骼更快。因此，涉及到成牙松动的牙周病可以是骨质疏松的早期症兆。
对于骨损失的机理现在知之甚少，另外现有的治疗方法一般是不甚满意的。这包括组成代谢剂、各种含磷、维生素D、钙盐、氟化物和降钙素的药物。
雌激素替代疗法一直是绝经后妇女治疗骨质疏松症选用的疗法。
体育疗法是目前治疗骨质疏松的另一种方法，因为固定不动在任何年纪都会引起骨质疏松。所以许多医生认为体操和体育疗法的预防老年人的疾病进程。然而体育疗法可能对病人造成骨折的伤害，再有，对于严重骨质疏松症病人，过分紧张的操练会引起骨折。
其它治疗方法包括施用氟盐，比如NaF，在临床上它已表明能促进骨骼生长，这明显是由于刺激了胶原蛋白质合成。然而严重的副作用是钙化不够，使骨骼生长不规则。其它治疗方法涉及到灌输钙和维生素D，以对抗某些老年病人的常见症状钙不足或钙吸收减弱。不过还没能证实高的钙摄入将会预防骨质疏松或增加成人的骨骼量。
最有希望获得成功的治疗骨质疏松的方法是给药改变骨生成和骨吸收速度平衡的药物，使前者与后者之比增大，从而不发生净的骨丢失。在原先发生的骨损失被复原以后，由于骨生成速度和骨吸收速度相等，就达到了稳态。可以通过刺激骨沉积即骨形成的生理机制，或延迟骨吸收的机制，或二者兼而有之来实现这一改变。为实现这一目的， 目前正在使用或处于实验阶段的药物包括磷酸盐、降钙素和光辉霉素。然而，所有这些药都有严重的缺点。
光辉霉素是一种抗菌素，它在有抗肿瘤活性的同时还有低钙血活性，会引起血清钙下降，据认为这进而是骨吸收相对速度下降的指征，即表明骨吸收低于骨生成。然而，副反应包括肾毒性和肝毒性，以及恶心。与此相似，有机磷酸盐的副反应包括骨骼过度钙化，低血压及肾衰竭。降钙素有免疫学的问题，因为其一般来自非人源。因此，前述各种药物在单独用来治疗骨质疏松时目前都是不适合的。
现有技术现有技术涉及到马烯雌(甾)酮的有BudavariS(1989)。The MerckIndex 11th ed.Merck&Co Inc，Rahway，New Jersey，p.3582而涉及其它的已知马烯雌(甾)酮异构体，3-羟基雌-1，3，5(10)，9(11)-四烯-17-酮(D9(11)-脱氢雌酮)(II)的公开在Magerlein BJ，HoggJA(1958)。11取代的1，3，5(10)-雌三烯。I的制备和反应。11氧化雌酮和雌二醇，J.Am.Chem.Soc.802220-2225。
Schering A.G.(Weiske R)(1964)Ger.Offen 1,177,636。Chem Abstr6114748h。
Collins DJ，SjovallJ(1983)。雌激素的结构和功能。IV.在C环上专门多氘化的17α-乙炔基雌二醇的合成，AustJ Chem 36339-360。
发明概述本发明的说明本发明涉及式(VI)化合物或其药物可接受的盐。 Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)本发明的化合物(VI)是式III所代表的马烯雌(甾)酮的双键异构物， 马烯雌(甾)酮(III)(Δ7-脱氢雌甾酮)它可用强酸在质子惰性介质中处理马烯雌(甾)酮而制得。本发明的化合物(VI)可用于1)治疗或预防雌激素缺乏诱发的骨损失；2)降低心血管斑形成，导致死亡率下降；3)缓解绝经后雌激素缺乏的症状，包括但不限于血管舒缩热潮红、抑郁症和失眠症；4)预防尿失禁；5)治疗牙周病；6)作为抗氧剂。
本发明的另一目的是为包括人在内的患有骨质疏松症的宿主动物提出一种治疗方法，以改变在所述宿主动物体内骨沉积和骨吸收速度的平衡，使后者与前者之比减小。
本发明还有另一个目的就是给宿主动物提出一种治疗方法，防止在所述宿主动物体内现有健康骨组织退化。这类药物也可以用来治疗恶性高钙血、变形性骨炎和关节炎性皮疹。
本发明的再一个目的是提出一种牙周病的治疗方法。
本发明的又一个目的是使用本发明的化合物(VI)作为抗氧剂。
本发明的详细说明本发明的式(VI)化合物单独使用或者和药物可接受的载体一起使用，其比例由该化合物的溶解度和化学性质，选用的给药途径及医疗实践规范来确定。比如它们可以以胶囊、片剂、悬浮液或溶液的形式口服给药，它们也可以经肠道以外注射。胶囊和片剂是优选的给药方式。对于肠道外给药，它们可以以含有其它溶质的灭菌溶液的形式使用，比如加入足够的盐或葡萄糖使溶液有等渗性。
胶囊和片剂组合物含有与已知是适合于制造胶囊和片剂的无毒药物赋形剂混合使用的活性成分。适当的药物赋形剂有比如淀粉、奶、糖、某些粘土等。片剂可不包糖衣，也可用已知技术包上糖衣，使其延缓崩解和在胃肠道中的吸收，藉此提供长周期的持续药效。
式(VI)化合物的水悬浮液含有与一种或多种已知适合制造水悬浮液的无毒药物赋形剂混合使用的活性成份。适当的赋形剂有比如，甲基纤维素、藻酸钠、阿拉伯树胶、卵磷脂等。该水悬浮液也可含有一种或多种防腐剂、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂以及一种或多种甜味剂。
可通过将活性成分悬浮在植物油，如花生油、橄榄油、芝麻油、或椰子油或矿物油，如液体石蜡中配合成非水悬浮液，该悬浮液可含有稠化剂，比如蜂蜡、硬石蜡或鲸蜡醇。这些组合物也可含有甜味剂，矫味剂和抗氧剂。
式(VI)化合物的剂量将依给药方式和所选的特定化合物不同而变化。再有，它将随着特定的宿主以及被治疗宿主的年龄、体重和疾病以及症状的性质及程度而变化。一般说来，开始治疗时使用基本小于该化合物最佳剂量的小剂量。然后一点一点增大剂量，直至达到在该情况下的最佳剂量。一般最希望以将提供有效的结果而又不引起有害的副作用的浓度来施用本发明的化合物。比如该化合物的口服有效量一般为约200-1200mg/日，通常是一次或分几次服用， 虽然如前所述会有一些变化。不过对于口服来说，为了达到有效的结果，单服或分服约500-900mg/日的剂量范围是最希望的。人服用Δ9(11)脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)的日剂量为200-1200mg。
给出如下的实施例来说明本发明化合物的制备和测试方法。这些实施例绝不会以任何方式被看成是对本发明范围的限定。在这些实施例中的温度都以摄氏度表示。
实施例1通用方法用Thomas-Hoover毛细管熔点测定仪测量熔点，且未加校正。在室温下用Perkin-Elmer 241型旋光计和微型槽得到旋光度[α]D。除非另有说明，在二噁烷中的浓度约为1％。用Hewlett Packard 8452型二极管阵列分光光度计在USP醇中得到紫外光谱(UV)。用Nicolet 20DX FTIR分光计，使用KBr片得到红外光谱。除非另有说明，都是用Bruker AM400型分光计得到氘代氯仿中1H核磁共振波谱(NMR)，报告出从四甲基硅烷低磁场的ppm数。使用Finnigan-MAT8230型双聚焦磁扇形仪或Hewlett Packard 5995型单四极仪，用电子冲击离子化来得到质谱(MS)。
制备Δ8(9)-脱氢雌甾酮(I)(3-羟基雌-1，3，5(10)，8(9)四烯-17-酮)在搅拌下的，装有125ml-50℃液体氟化氢的500ml聚乙烯反应容器中加入5g(18.7mmol)马烯雌(甾)酮(III)，在-50℃将混合物搅拌24hr，然后倒入2L冰水中。过滤出得到的固体，用水洗涤并用P2O5在真空中干燥。用气相色谱测定粗产物(4.8g，96％产率)是90％的3-羟基雌-1，3，5(10)，8(9)-四烯-17-酮(I)和10％的其它产物(VI)(色谱使用The United States Pharmacopeia 22nd ed.Suppl(1990)。Mack，Easton，Pennsylvania，p 2127的方法)。由热的苯-己烷(1∶1)进行重结晶未能除去(VI)。在SephadexLH-20柱(5×50cm载柱到高度为47cm)上用环己烷/苯/甲醇(500∶150∶75)洗脱，将500mg粗产物混合物色谱分离为两部分(色谱分离使用Krol GJ.Masserono RP.Carney JF，KhoBT(1970)的方法。J Pharm.Sci 59∶1483-1487的液相分配色谱定量分离出游离雌激素)。流速为4ml/min，在270nm监测洗脱。用气相色谱收集及分析几个级份。在大约2350ml处洗脱出含有(I)的级份。合并组成及纯度相似的级份，蒸发至干，得到350mg不含其它产物(VI)的(I)。将此经过色谱提纯的物质先溶于热苯，然后加入己烷到雾点来进一步提纯。让溶液冷至室温，然后在4℃保持24小时。过滤产物并用空气干燥，再溶于热乙醇中。向热溶液中加入炭，过滤，并加入热水至雾点。冷至室温并在4℃保持60hr后，过滤并用空气干燥得到300mg纯(I)，mp 229-230℃，同时分解(熔融前呈紫色)。光谱和其它数据见表1。
保留含有产物(VI)的级分用于进一步处理。
制备Δ9(11)-脱氢雌甾酮(II)(3羟基雌-1，3，5(10)，9(11)四烯-17-酮)向在搅拌下装有0℃150ml液体氟化氢的500ml聚乙烯反应容器中加入6g(22.4mmol)马烯雌酮(III)。在0℃搅拌该混合物0.5hr，取出一部分50ml，倒入1L冰水中。过滤得到的固体，用水洗涤并在真空下用P2O5干燥。用气相色谱(使用The United States Pharmacopeia 22nded.Suppl 1(1990)。Mack，Easton，Pennsylvania，p 2127的方法)分离粗产物，显示有3个组分38％的3-羟基雌-1，3，5(10)，9(11)-四烯-17-酮(II)、55％的3-羟基雌-1，3，5(10)，8(9)-四烯-17-酮(I)和7％的如在合成(I)时一样的产物(VI)。其余的反应混合物在0℃再搅拌1小时，再取出一份50ml。如上面所述将其处理，气相色谱显示同样3个组份，其比例为55％的3-羟基雌-11，3，5(10)，9(11)-四烯-17-酮(II)、40％的3-羟基雌-1，3，5(10)，8(9)-四烯-17-酮(I)和5％的与合成(I)时生成的相同的产物(VI)。剩下的50ml混合物在0℃再搅拌2小时，如上所述处理此反应混合物，气相色谱表明粗产物是100％的3-羟基雌-1，3，5(10)，9(11)-四烯-17-酮(II)。将此物质(1.6g，80％产率)溶于60ml的沸腾甲醇/丙酮(2∶1)中，再加入炭。乘热过滤溶液除去炭，在沸腾的溶液中加入10ml蒸馏水。将溶液冷至室温，并在4℃保持48hr。过滤该产物，用空气干燥，得到1.2g纯3-羟基雌-1，3，5(10)，9(11)四烯-17-酮(II)，mp 255-257℃，同时分解，光谱及其它数据见表1。
制备Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)(8α-3-羟基雌-1，3，5(10)，9(11)-四烯-17-酮)
将合成(I)时得到的含有(VI)的级份合并，用同样的柱子和洗脱溶剂再次进行色谱提纯。收集各级份并用气相色谱检验。合并纯的(VI)级份，蒸发至干，用乙醇/水重结晶，得到120mg产物，mp 243.5-244.5℃，同时分解。光谱和其它数据见表1。
结果和讨论Jacquesy指出(见Jacquesy JC，Joly G，Gesson JP(1972)《超酸性介质中的反应，在酸性或超酸性介质中马烯雌酮的选择性异构化》Comptrend Acad 274969-971)，在0℃时(II)是唯一的产物， Δ9(11)-脱氢雌甾酮(II)在-30℃时(I)是唯一的产物。由于设备的限制，(I)的合成是在-50℃进行的。对-50℃的反应粗产物进行分析表明，(I)与未知物(VI)的比例为9∶1，后者既不是原料(II)，也不是(IV)。再有，如果0℃的反应在完成前就中止，会发现不同的(I)∶(II)∶(VI)的比值。在大SephadexLH 20柱上，进行液相分配色谱可分离出化合物(VI)(用Krol GJ.Messeran.RP.Carney JF.Kho BT(1970)中的方法。通过液相分配色谱定量分离游离的雌激素J.Pharm Scl 591483-1487)。对化合物(VI)进行质谱、红外光谱、紫外光谱和1H核磁共振分析可以得出它是马烯雌酮的一种异构体这样的结论。在Jacquesy对此异构化反应的理论处理的基础上，可认为(VI)就是3-羟基雌-1，3，5(10)，8(14)-四烯-17-酮(Δ8(14)脱氢雌甾酮)(V)。
然而，(VI)的核磁共振波谱显示，在600ppmδ(CDCl3)的乙烯基质子表征处有一个质子多重谱线。此外，(VI)的1H NMR与(II)的相似。在靠近6ppmδ(CDCl3)处都有一个乙烯基质子多重谱线，也都有相近的芳香分裂谱型。(I)的芳香分裂谱型与(VI)有很大不同。由于8-14双键异构体没有乙烯基质子，就排除了(V)而倾向于在8和/或14位上与(II)有相反的质子取向的9-11双键异构体(见结构(VI)、(VII)和(VIII)中的9(11)双键异构体，它们仅仅在8和14位有变化)。
Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)正如进一步表明的该双键在9-11位，(VI)的紫外光谱与(II)很相近。
高场强1H NMR研究表明，在氯仿溶液中(VI)自发地复原为(I)，这表明，像在所有其它甾类雌激素中一样，14位是α构形，它是复原的8位。在此基础上，我们认为其结构为Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)。
(VI)以及马烯雌(甾)酮和马烯雌(甾)酮的(I)、(II)及(IV)异构体的分析和谱图数据列在表1中。
表1 a乙醇b氯仿表1(续) a乙醇；bDMSO-d6
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使用标准的药理学试验，比如骨吸收实验由鼠肢骨释放45Ca的试验可以显示出式(VI)化合物的有用的对骨质疏松的活性。
此试验的目的是鉴别对处于培养中的基础骨吸收或被刺激骨吸收有抑制作用的化合物。
基本上可如LG.Raisz在《组织培养中的骨吸收，影响对甲状旁腺应答的因素》，J.Clin.Invest.44103-116，(1965)和P.H.Stern等人在《胎鼠肢骨和新生鼠颅骨盖骨的比较甲状旁腺激素的作用和1，25-二羟基维生素D3》，Calcif.TissueInt.35172-176(1983)中所叙述的方法来评价Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)改变骨吸收进程的能力。
操作程序肢骨制备在怀孕第18天经皮下给定时怀孕的Sprague-Dawley CD鼠(Charles河)注射在100μL 0.9％盐水中的100μCi45CaCl2(NEN钙-45NEZ-013)。第二天用CO2窒息法杀死小鼠。取出胎鼠，切下右前肢，放入装有冰冷移植介质的Petri盘中，此介质由调节pH到7.3，其中加入10mM TES，改性的B G Jb-Fitton Jackson介质(定制配方，GibcoNo.78-0088)组成。不加盐、葡萄糖或碳酸氢盐来得到改性的B G Jb介质，在使用前补充加入0.1mM MgCl2、1.25mM CaCl2、5.3mM KCl、0.7mM MgSO4、130mM NaCl、1.0mM NaH2PO4、1g/L葡萄糖、50mg/L醋酸钠和100U/ml的青霉素G。介质通过一个0.2μM过滤器(Nalge)灭菌。在解剖显微镜下小心清除附在骨上的组织；并除去软骨终端。
培养和药物处理把骨中体单个地放在3×3mm的方形滤纸(Gelman GN-6 metricell滤纸；孔径0.45μM)上，滤纸则在装有0.5ml预培养介质的24池培养板的池中的不锈钢筛网上。在转移骨之前，将预培养介质温至37℃。预培养介质由pH值为7.3，含有29mM NaHCO3的改性B G Jb介质(如上所述含有盐和葡萄糖)组成。在37℃和5％的CO2的条件下培养18-24hr后，将在其筛网/滤纸支撑体上的骨头转移到一个含有总容积为每池0.5ml(37℃)的稀释测试化合物的新培养板上，被测的化合物稀释在用15％的热失活马血清(Gibco No.230-6050)补充的预培养介质中，pH值为7.3，可加入或也可不加入骨吸收刺激剂(比如甲状旁腺激素[PTH]或白细胞介素-1[1L-1]。对于需要非水溶剂的化合物，用介质从适当的母溶液进行稀释。在这些情况下，包括了基本的和暴露于等当量浓度载体下的骨吸收刺激的对照组。使用附加的一组经受煮沸1小时(杀伤对照组)的骨头来建立没有细胞介导的进行45Ca交换的背景。使用由每个胎鼠得到的右尺骨和挠骨，两种骨头受同样的处理，每个处理组由从4只或4只以上的胎鼠取到的骨头构成。用临床前期统计程序(PS-ALLOC)使处理随机化。在37℃于5％CO2进行48小时培养后，从介质中取出骨头，浸于0.5mL 0.1N HCl中1天或几天。重复配制150μL一份的培养介质，在5ml液体闪烁合剂中分析骨浸出液的45Ca放射性。
计算用如下公式确定释放到介质中的骨45Ca百分数 结果一般表示为实验组的百分45Ca释放值与适当载体对照组的比。
通过实验基础骨吸收试验从鼠肢骨释放45Ca可进一步证明，式(VI)的化合物具有有用的对骨质疏松症的活性。
本试验的目的是体外测试骨吸收刺激剂和抑制剂。取活体外的标记鼠骨移出体向培养介质中释放的45Ca作为骨吸收的指数。
骨的标记方法在体外通过用100μCi45Ca注射怀孕雌鼠(18天)来标记幼鼠移出体制备开始标记两天之后，用卤代烷麻醉母鼠，用颈离位的手法杀死母鼠。取出幼鼠并很快将其断头。取出颅盖骨(前叶和顶叶骨)、前肢(包括挠骨和尺骨)和后肢(胫骨)放入Petri平碟上的对照介质中。结合使用钝器解剖及在高吸水纸上轻轻滚动的方法清除掉骨上的软组织，小心不要损坏骨膜。切掉长骨的软骨端。顺着中线骨缝将颅盖骨切成两半。这样就将骨分为3类半颅盖骨、胫骨和尺/挠骨。每8个一组随机放入24池培养板上，池中装有0.5mL对照组介质。在37℃和95％空气/5％CO2下在加湿培养器中保温培养。
将这些骨头培养24hr，从骨上抽去介质，并用含有被测物的新鲜介质置换。每组骨头有8个一组的对照组和8个一组的死骨组。在55℃的介质中加热60分钟就得到了失活培养物。在37℃将骨培养72hr。在此期限结束时，将100μL一份的介质取出，放入闪烁瓶中。加入10mlAquasol，用闪烁光度计给45Ca定量。用盐水漂洗骨头，放在闪烁瓶中，在室温在0.75ml的6N HCl中水解过夜。加入2.25ml的2N NaOH中和水解骨溶液，再加入10ml的Aquasol，用闪烁光度计测定45Ca含量。
分析通过Dunnett＇s试验逐个将在24-96hr期间释放到培养基中的45Ca与在对照培养组及与失活骨的45Ca释放进行比较。
通过实验去神经诱发鼠骨质疏松可进一步证明式(VI)化合物有用的对骨质疏松的活性。
本试验的目的是评价通过坐骨神经手术切断(去神经)造成的固定不动而诱发的骨质减少(即骨质疏松)在鼠体内所受药剂的影响。
使用由Charles River得到的体重225-250g的切除卵巢或未受损Sprague Dawley CD雌鼠。用食物(Purina 500鼠食)和水在塑料养箱自由喂养此小鼠，每箱4只或5只，昼夜循环周期14/10天。
在适应生活一周以后，将此动物随机分成6-10只一组的组。每只鼠称体重，经腹膜内给药100mg/Kg氯胺酮(Bristol Laboratories，Syracuse，NY)和0.75mg/Kg乙酰丙嗪(Ave-co，Ft.Dodge1A)麻醉。通过平行于股骨进行外侧切开，再通过手术除去半厘米的靠近尾骨间肌和短内收肌的坐骨神经，使左后肢被削去薄薄一层并去神经。用创口钳闭合切口。手术后将鼠养在有吸收床的养箱中以尽量减少对固定肢体再产生创伤。让其有24hr的术后恢复期，然后开始给药治疗。
以0.1ml/100g体重的体积计算出要给药的药母液浓度。在含有1％的Tween 80的标准盐水中制备药物溶液或均一的悬浮液。通过口服或非肠道途径，每天(每周5次)给药4周。
使用连续三次标记的无机化组织来测定骨变化(特别是骨生成)和无机化的速度。每只动物经皮下给药给入90mg/Kg二甲酚橙(FisherScientific Company)、皮下给入15mg/Kg降钙素(Sigma ChemicalCompany)、和腹膜内给药15mg/Kg去甲金霉素(Sigma ChemicalCompany)，给药时间分别为终止研究前的大约21天、10天和2天。
在第4周结束时，给每只鼠称重，通过腹膜给药给入100mg/Kg氯胺酮和0.75mg/Kg乙酰丙嗪麻醉，然后经心脏穿刺采集大约4ml血。将麻醉的鼠暴露在CO2中平稳地杀死，从两肢上仔细分离出股骨和胫骨，使之不带软组织。
(i)使用Muffle炉在～1100℃下16hr使股骨灰化。(ii)在甲基丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸乙二醇酯混合物中将近端胫骨固定、脱水及未脱钙包埋。在PolycutS型切片机(Reichert)上制备纵向组织切片(10μm)。用改性Goldner染剂使自由浮动的切片染色，然后将其制成标本并盖上盖玻片。
使用形象分析处理法装置(Drexel大学开发的软件)定量计算近端胫骨中的海绵状骨含量(作为二维骨矿物区[B.Ar])。
选择用来进行海绵状骨含量评价的胫骨区是初级和次级的海绵质。为了选择此评价区并使之标准化，骺生长板-千骺端接合的方向应平行于数字化屏幕的横座标。然后如前面所述对取自生长板并与侧皮质单元等距的骨单元1.7mm(次级海绵质)和0.2mm(初级海绵质)进行定量。总的评价区宽2.30mm，深1.45mm，面积为3.34mm2。
测定体重、股骨质量(干的或灰化的)以及小梁(网状)骨无机区(B.Ar)。
比较未受损伤组(对照组)和处理组的去神经肢体之间在股骨质量和骨无机区之间的差别(绝对值差和百分比变化两者)，对于载体组使用对Dunnett＇s试验方差的单程分析，或者其它的多重比较法。
在骨吸收的过程中骨被分解，这导致随后产生骨质疏松。本发明提出一种治疗宿主动物的方法，使得改变所述宿主动物体内骨吸收速度与骨沉积速度之间的平衡，使所述骨吸收与所述骨沉积的速度比下降，这个方法包括给所述宿主动物施用足以改变所述平衡并降低所述比例量的Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)。
施用按照本发明的Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)可以是对治疗骨质疏松或牙周炎的其它方法的补充。比如，可以在每日摄取600mg-1200mg的钙如磷酸钙或碳酸钙的基础上，再施用Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)作为补充。另外，也可以对雌激素替代疗法，如每天施用0.625mg配合马雌激素的基础上，给药Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)作为补充。
本发明的化合物(VI)也可用作抗氧剂，由于有此用途，化合物(VI)可用于治疗、抑制或改善动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、心血管疾病、再狭窄症(特别是由于气囊植入血管造型术)、皮肤老化症和皱纹症，以及早老性痴呆症。由于此抗氧化性能，本发明化合物(VI)也可用于治疗癌症。由于其抗氧化性质，本发明化合物(VI)也可用于预防游离基产生，由此可用于预防和妨碍由自由基引起的细胞损害。
权利要求
1.化合物Δ9(11)-脱氢-8-雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐。 Δ9(11)-脱氢-8-雌甾酮(VI)
2.用来改变宿主动物体内骨吸收速度和骨生成速度之间平衡，藉此降低所述骨吸收速度与骨生成速度之比的药物组合物，它含有Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐以及药物可接受的载体。
3.治疗宿主动物，以改变所述宿主动物体内的骨吸收速度及骨生成速度之间的平衡，藉此降低所述骨吸收速度与骨生成速度之比的方法，这包括给所述宿主动物施用一些量的Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐。
4.治疗或改善哺乳动物动脉粥样硬化的方法，它包括施用有效量的Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐。
5.治疗或改善哺乳动物冠状动脉疾病的方法，它包括施用有效量的Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐。
6.治疗或改善哺乳动物早老性痴呆的方法，它包括施用有效量的Δ9(11)-脱氢-8-雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐。
7.Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐在制造用来改变骨吸收速度与骨生成速度之间的平衡，并减小所述骨吸收速度与所述骨生成速度比的药物方面的应用。
8.Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐在制备用于治疗或改善动脉粥样硬化的药物方面的应用。
9.Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐在制备用于治疗或改善冠状动脉疾病的药物方面的应用。
10.Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)或其药物可接受的盐在制备用于治疗或改善早老痴呆症的药物方面的应用。
全文摘要
本发明涉及式(VI)的Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮、其制备方法、含有所述Δ9(11)-脱氢-8-异雌(甾)酮(VI)的药物组合物，以及所述Δ9(11)-脱氢-8-雌(甾)酮在包括人在内的宿主动物体内改变骨生成和骨吸收平衡，以及作为抗氧剂的应用。
文档编号C07J1/00GK1149298SQ95193322
公开日1997年5月7日 申请日期1995年4月6日 优先权日1994年4月8日
发明者小F·Q·吉米尔, C·E·奥切希, S·J·阿德曼 申请人:美国家用产品公司