专利名称：一种提取人绒毛膜促性腺激素的吸附剂和方法
技术领域：
本发明涉及一种高效的促性腺发育激素的提取方法，特别是涉及提取这种促性腺发育激素的吸附洗脱法以及所使用的吸附剂。
人绒毛膜促性腺激素是由妊娠妇女胎盘滋养层组织产生的一种糖蛋白激素。滋养层组织又称绒毛组织，承担着胎儿-母体间物质交换的功能，除了一般的营养代谢物交换外，更重要的是一些信息分子激素、生长因子及免疫调节物质的交换，从而对母体的生理状态及胎儿生长进行调节。人绒毛膜促性腺激素就是一种对维持早期妊娠必需的糖蛋白激素。人绒毛膜促性腺激素的提取一般分为两个阶段，首先是从激素来源-妊娠妇女尿中浓缩并提取粗制品，然后是粗制品的进一步纯化。现已报道的人绒毛膜促性腺激素提取方法(几乎均从妊娠妇女尿液中提取)一般亦较为简单。粗品的提取，目前已有多种吸附剂方法，如酒精直接沉淀法，Aschheim。Setal(1982)Klin.Wochenschr.7;831.苯甲酸吸附洗脱法，Katzman.P.Aet(1943)JBC148∶501.高岭土吸附洗脱法，Loraine.J.AandBrownJB(1954)Acta.Endocrimol17∶250、超滤法，Bahl.O.Petal(1969)JBC224∶567。电泳法，Manjunath.P.etal(1982)JBC257∶7109。这一系列方法，仅能得到粗品，若要得到精品，必须进一步提纯。
本发明的目的在于提出了使用一种新的吸附剂，以及使用这种吸附剂提取人绒毛膜促性腺激素的吸附洗脱法，使用该法后所得到的人绒毛膜促性腺激素成品接近精品。
本发明采用硅藻土作为吸附剂来吸附孕妇尿液。取早、中期(2～6个月)孕妇的新鲜尿液，在37℃以下，用浓度为1～6当量的酸，调制孕妇尿液的PH值。在每1万个国际单位(IU)内加5～100克硅藻土吸附，取硅藻土装柱，用洗脱液洗脱。取收集液加酒精沉淀，采用离心或过滤等方法取出沉淀，再经脱水干燥即得成品。
本发明在提取人绒毛膜促性腺激素方面提出了使用一种与酒精沉淀，苯甲酸或高岭土吸附和超滤方法所不同的吸附剂，以及如何使用该吸附剂来提取人绒毛膜促性腺激素，使用本发明所提取的人绒毛膜促性腺激素成品已接近精品，比酒精沉淀，苯甲酸或高岭土吸附和超滤方法所提取的人绒毛膜促性腺激素提高10倍左右而不增加成本。具有工艺简单，效率高，等特点，且可直接应用于生产。现在人绒毛膜促性腺激素可广泛用于临床治疗原发性不孕和习惯性流产，同时，作为一种高效的促性腺发育激素，人绒毛膜促性腺激素在农牧渔业的人工繁殖技术中很有用处，最近，由人绒毛膜促性腺激素制成的避孕疫苗也进入了临床试验阶段，这一课题的进展将开辟更为广泛的应用前景。由于人绒毛膜促性腺激素是从正常人体中分泌的物质，临床应用没有负作用，所以很安全，目前国际市场需求量很大。
本发明的实施如下取早、中期孕妇的新鲜尿液，在37℃以下，用浓度为1～6当量的硫酸，或盐酸，或硝酸，将孕妇尿液调至PH为1.5～6。在1万个国际单位(IU)内加5～100克硅藻土搅拌吸附，取吸附后的硅藻土装柱，用0.05～0.5M磷酸氢二钠溶液洗脱，或者用0.005～0.5M醋酸铵溶液洗脱，或者用酒精和醋酸铵溶液的混合液洗脱。取收集液加1～5倍酒精沉淀，然后采用离心或过滤等方法取出沉淀，再分别用酒精、丙酮、乙醚脱水干燥即得成品。
权利要求
1.一种提取人绒毛膜促性腺激素的吸附剂，其特征在于使用硅藻土作为吸附剂从早、中期(2～6个月)孕妇新鲜尿液中，在37℃以下提取人绒毛膜促性腺激素。
2.一种使用硅藻土作为吸附剂提取人绒毛膜促性腺激素的方法，其特征在于用酸调制孕妇尿液PH值，加硅藻土吸附，取硅藻土装柱，用洗脱液洗脱，加酒精沉淀，经脱水干燥制得人绒毛膜促性腺激素。
3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于浓度为1～6当量的硫酸、或盐酸、或硝酸调制早、中期(2～6个月)孕妇新鲜尿液，使其PH值为1.5～6。
4.根据权利要求1或2所述的提取方法，其特征在于在调制后的尿液中约每1万个国际单位加5～100克硅藻土搅拌吸附。
5.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于取吸附后的硅藻土装柱，用0.05～0.5M氯化钠溶液洗脱，或用0.01～0.5M磷酸氢二钠溶液洗脱，或用0.005～0.5M醋酸铵溶液洗脱，或用酒精和醋酸铵溶液的混合液洗脱。
6.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于取洗脱后的收集液加1～5倍酒精，使其沉淀。
7.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于取过滤后的沉淀，分别用酒精、丙酮、乙醚干燥。
全文摘要
一种提取人绒毛膜促性腺激素的提取方法，使用了一种不同于酒精直接沉淀法和苯甲酸或高岭土吸附和超滤方法的吸附剂，使用本发明所制得的人绒毛膜促性腺激素成品已接近精品，比现有技术方法提高了多倍。具有工艺简单，成本低，效率高等特点。人绒毛膜促性腺激素可广泛用于临床不孕症和习惯性流产的治疗，并在农牧渔业的人工繁殖技术中很有用处，由于它是从正常人体中分泌的物质，临床应用没有副作用，很安全。
文档编号C07K7/04GK1047507SQ89102408
公开日1990年12月5日 申请日期1989年5月24日 优先权日1989年5月24日
发明者张运栋, 高翔, 张其双 申请人:东南大学