从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法
从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法
【专利摘要】本发明公开一种从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，包括如下步骤：（1）准噶尔乌头根用乙醇浸提，调节浸取液pH值至4-8，再用二氯甲烷萃取；（2）步骤（1）萃取得到的二氯甲烷相过硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗脱，得到生物碱。采用本发明方法从准噶尔乌头的根分别提取分离出4种单一的生物碱，分别为乌头碱、准噶尔乌头碱、16,17-二氢-12β,16β-环氧欧乌头碱和12-表-欧乌碱。
【专利说明】从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物药有效成分提取领域，具体涉及从准噶尔乌头中提取分离生物碱 的方法。
【背景技术】
[0002] 准噶尔乌头Stapf.)为毛莫科乌头 属的多年生草本植物。在我国产于新疆伊犁地区新源、尼勒克等县，生于海拔 1800?2600米的山地和草地阳坡 [1]。其根部供药用，块根有剧毒，可散风寒、除湿、止痛。 现有报导虽对准噶尔乌头中生物总碱的组分进行了分析，但如何将分析检测到的各生物碱 成分从准噶尔乌头中提取分离出了仍是需要克服的问题。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种从准噶尔乌头中提取分离出生物碱的方法。
[0004] 从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，包括如下步骤： (1) 准噶尔乌头根用乙醇浸提，调节浸取液pH值至4-8,再用二氯甲烷萃取； (2) 步骤（1)萃取得到的二氯甲烷相过硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗 脱，得到生物碱。
[0005] 进一步，将步骤（1)浸取液pH值调至4;步骤（2)中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺 的体积比为8:2:0. 5,以每次收集1000 ml计，将第18?23次收集的洗脱液合并，结晶得到 乌头喊。
[0006] 进一步，将步骤（1)浸取液pH值调至8;步骤（2)中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺 的体积比为10:1 :〇. 5,以每次收集1000 ml计，将第6?11次收集的洗脱液合并，结晶得到 准噶尔乌头碱。
[0007] 进一步，将步骤（1)浸取液pH值调至8;步骤（2)中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺 的体积比为7:3:0. 5,以每次收集1000 ml计，将第4?9次收集的洗脱液合并，结晶得到 12-表-欧乌喊。
[0008] 进一步，将步骤（1)浸取液pH值调至8 ;步骤（2)中，石油醚-乙酸乙酯-二乙 胺的体积比为10:1:0. 5,以每次收集1000 ml计，将第1?3次收集的洗脱液合并，再过 S印hadex LH-20凝胶柱，用体积比为5:5:1的三氯甲烷-石油醚-甲醇混合液洗脱，得到 16, 17-二氢-12 β，16 β -环氧欧乌头碱。
[0009] 进一步，步骤（1)在调节浸取液pH值之前，浸取液浓缩后，先加盐酸混悬，然后用 石油醚萃取脱脂，再用氨水调节pH值。
[0010] 采用本发明方法从准噶尔乌头的根分别提取分离出4种单一的生物碱，分别为乌 头碱、准噶尔乌头碱、16, 17-二氢-12 β，16 β -环氧欧乌头碱和12-表-欧乌碱。
【具体实施方式】 toon] 以下结合实施例对本发明做进一步详细说明。
[0012] 实施例1 准噶尔乌头根（10.0 kg)，粉碎（过20目筛)，95wt%乙醇冷浸提取3次，27 L/次，提取 液经薄膜蒸发浓缩后以2wt%盐酸5500 ml混悬，使生物碱充分溶于混悬液中，再石油醚萃 取脱脂；剩余水液用氨水调PH=4,再用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷相。二氯甲烷相经硅胶 柱色谱，用石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗脱，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为 8:2:0. 5,流速为20 ml/min，每次收集1000 ml洗脱液，将第18?23次收集的洗脱液合并， 结晶，滤过，得到化合物1 (1. 5449 g)，通过TLC薄层色谱确定其为单一化合物。
[0013] 化合物1 :无色方晶，碘化铋钾反应呈阳性，mp. 189?190°C，CmH^NOh/H NMR (400 MHz，CDC13) 5 ppm: 3· 34, 3· 75 (s，各 3H，0CH3)，4· 04 (d，/ =6. 5 Hz, 1H，6- β Η)，4· 48 (s，1H)，4· 88 (d，/ =4. 8 Hz，lH，14-aH)，8.03(d，/=7.6 Hz，2H，Ar-H)，7.66 - 7.39(m，3H，Ar-H);13C NMR (400 MHz，CDC13) 5 ppm: 13. 35 (C-21)，21. 45 (0)0?)，33. 63 (C-2)，35. 83 (C-12)，40. 90 (C-10)， 43. 14(C-4)，44. 21 (C-9)，44. 70 (C-7)，46. 85 (C-5)，46. 86 (C-19)，48. 93 (020)， 50. OO(C-ll)，55. 94(C-1，），58. 00(06,），59. 13(018,），61. 02(016,），61. 15(C-17)， 71. 55(C-3)，74. 05(C-13)，76. 69 (C-18)，78. 85(C-15)，78. 92 (C-14)，82. 38 (C-1)， 83. 38(C-6)，89. 97(C-16)，92. 06(C-8)，128. 65(C-3")，129.61 (C-2")，129.78 (C-l")， 133. 29 (C-4〃），166. 08 (Ar⑶)，172. 43 (⑶CH3)。以上数据与文献基本一致，故鉴定为乌头 碱。
[0014] 实施例2 准噶尔乌头根（10.0 kg)，粉碎（过20目筛)，95wt%乙醇冷浸提取3次，27 L/次，提取 液经薄膜蒸发浓缩后以2%盐酸5500 ml混悬，使生物碱充分溶于混悬液中，石油醚萃取脱 脂；剩余水液用氨水调PH=8,再用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷相。二氯甲烷相经硅胶柱色 谱，用体积比为10:1:0. 5的石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗脱，流速为20 ml/min，每 次收集1000 ml洗脱液，将第6?11次收集的洗脱液合并，结晶，滤过，从而得到化合物2 (1. 3345g)，通过TLC薄层色谱确定其为单一化合物。
[0015] 化合物2 :无色方晶，碘化铋钾反应呈阳性，mp. 20(T202 °C，C22H31N03, 4 NMR (400 MHz，CDC13) 5ppm:0.77(s，4H，4-CH3)，1.07(t, /=6.8 Hzd^NCH^^yd.HKd， J =2.4 Hz, 1H) ,3. 34(dd, / =17.1,11.7 Hz, 2H) , 3. 45 (s, 1H) , 3. 85 (s, 1H, 1-β H), 4.36(d，/ =8.1 Hz，lH，15-aH)，5.20,5.30(s，2H，17-CH2) ;13C NMR(400 MHz，CDC13)5 ppm: 13. 63 (NCHfA)，23. 23 (C-6)，26. 07 (C-18)，31. 66 (C-2)，32. 24 (C-3)，34. 11 (C-4)， 35. 21 (C-9)，37. 33 (C-ll)，38. 13 (C-14)，43. 51 (C-7)，49. 19 (C-5)，50. 03 (C-8)， 50. 91 (Νβ7/：Η3)，52. 42 (C-10)，53. 79 (C-13)，57. 41 (C-19)，66. 01 (C-20)，70. 37 (C-l)， 77. 22 (C-15)，11L 42 (C-17)，115. 08 (C-16)，209. 90 (C-12)。以上数据与文献基本一致，故 鉴定为准噶尔乌头碱。
[0016] 实施例3 准噶尔乌头根（10.0 kg)，粉碎（过20目筛)，95wt%乙醇冷浸提取3次，27 L/次，提取 液经薄膜蒸发浓缩后以2%盐酸5500 ml混悬，使生物碱充分溶于混悬液中，石油醚萃取脱 脂；剩余水液用氨水调PH=8,再用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷相。二氯甲烷相经硅胶柱色 谱，用体积比为10:1:0. 5的石油醚-乙酸乙酯-二乙胺洗脱，流速为20 ml/min，以每次收 集1000 ml计，将第1?3次收集的洗脱液合并，合并的洗脱液再过Sephadex LH-20凝胶 柱，再用体积比为5:5:1的三氯甲烷-石油醚-甲醇混合液洗脱，流速为5 ml/min，洗脱液 按15 ml/次收集，将第7次收集的洗脱液结晶，滤过，用丙酮重结晶，从而得到化合物3( 100 mg),通过TLC薄层色谱确定为单一化合物。
[0017] 化合物3 :白色无定型粉末，碘化铋钾反应呈阳性，mp. 23(T232 °C， NMR (400 MHz，CDC13) δ ppm:0. 74 (3H, s, 18-H), 1. 04 (3H, t, J =8Hz,22-H), 1. 38 (3H, s, 17-H), 1. 78(1H, d, / =6Hz, 14 a-H), 2. 71 (1H, dd, / =4,8Hz, 13-H), 3. 42 (1H, brs,2〇-H), 3. 47(1H，s，15-H)，3. 88(1H，dd，/ =16. 3,9. 4Hz，1-H)，4. 83(1H，dd，/ =7. 7,3. 9Hz，12-H)。 13CNMR (400 MHz，CDC13) 5 ppm:13.61(C-22)，21.84(C-17)，22.52(C-6)，26.00(C-18) ，26. 00 (C-ll) ,28.76 (C-14)，31.97 (C-2) ,33.88 (C-4) ,38.03 (C-3) ,38.22 (C-9)， 38.55 (C-13) ,43.39 (C-7) ,49.22 (C-8) ,50.79 (C-21)，51.29 (C-10)，51.53 (C-5)， 57. 28 (C-19) ,66.54 (C-20) ,70.86 (C-l) ,77.51 (C-12) ,79.73 (C-15) ,89.33 (C-16)。 以上数据与基本一致，故鉴定为16, 17-二氢-12 β，16 β -环氧欧乌头碱。
[0018] 实施例4 准噶尔乌头根（10.0 kg)，粉碎（过20目筛)，95wt%乙醇冷浸提取3次，27 L/次，提取 液经薄膜蒸发浓缩后以2%盐酸5500 ml混悬，使生物碱充分溶于混悬液中，石油醚萃取脱 脂；剩余水液用氨水调PH=8,再用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷相。二氯甲烷相经硅胶柱色 谱，用体积比为7:3:0. 5的石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗脱，流速为20 ml/min，每次 收集1000 ml洗脱液，将第4?9次收集的洗脱液合并，结晶，滤过，得到化合物4 (1. 2910 g)，通过TLC薄层色谱确定其为单一化合物。
[0019] 化合物4 :白色无定型粉末，碘化铋钾反应呈阳性，NMR (400 MHz， CDC13) 5 ppm:0.77(3H，s，4-CH3)，1.09(3H，t，/=4 4.20(1!1，(1(1，/=15.9,7.2泡，12-〇!1)，5.13,5.34(2!1，8，17-〇12)。 13〇 NMR (400 MHz，CDC13) δ ppm: 13. 47 (NCH2^), 23. 58 (C-6), 26. 40 (C-18),29. 57 (C-2),31.60 (C-3), 32. 64 (C-ll)，33. 77 (C-4) ,36.05 (C-14) ,37.02 (C-9) ,43.84 (C-7) ,43.88 (C-13) ,48.58 (C-5)，50. 93 (NQ^CH3)，51. 04 (C-8)，52. 54 (C-10)，58. 29 (C-19)，66. 33 (C-20)，67. 10 (C-l)，69. 89 (C-12) ,77.23 (C-15) ,111.55 (C-17)，155.00(016)。以上数据与文献基本 一致，故鉴定为12-表-欧乌碱。
【权利要求】
1. 从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，包括如下步骤： (1) 准噶尔乌头根用乙醇浸提，调节浸取液pH值至4-8,再用二氯甲烷萃取； (2) 步骤（1)萃取得到的二氯甲烷相过硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗 脱，得到生物碱。
2. 根据权利要求1所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于，将步骤 ⑴浸取液pH值调至4;步骤⑵中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为8:2:0.5,以 每次收集1000 ml计，将第18?23次收集的洗脱液合并，结晶得到乌头碱。
3. 根据权利要求1所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于，将步骤 ⑴浸取液pH值调至8 ;步骤⑵中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为10:1:0. 5,以 每次收集1000 ml计，将第6?11次收集的洗脱液合并，结晶得到准噶尔乌头碱。
4. 根据权利要求1所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于，将步骤 ⑴浸取液pH值调至8;步骤⑵中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为7:3:0.5,以 每次收集1000 ml计，将第4?9次收集的洗脱液合并，结晶得到12-表-欧乌碱。
5. 根据权利要求1所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于，将步骤 ⑴浸取液pH值调至8 ;步骤⑵中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为10:1:0. 5,以 每次收集1000 ml计，将第1?3次收集的洗脱液合并，再过Sephadex LH-20凝胶柱，用体 积比为5:5:1的三氯甲烷-石油醚-甲醇混合液洗脱，得到16, 17-二氢-12 β，16 β-环氧 欧乌头喊。
6. 根据权利要求1至5任一所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于， 步骤（1)在调节浸取液pH值之前，浸取液先加盐酸，然后用石油醚萃取脱脂，再用氨水调节 pH值。
【文档编号】C07D491/08GK104193679SQ201410425142
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年8月27日 优先权日:2014年8月27日
【发明者】赵翡翠, 赵军, 聂继红, 汪芳, 杨俊玲 申请人:新疆医科大学附属中医医院
【专利摘要】本发明公开一种从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，包括如下步骤：（1）准噶尔乌头根用乙醇浸提，调节浸取液pH值至4-8，再用二氯甲烷萃取；（2）步骤（1）萃取得到的二氯甲烷相过硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗脱，得到生物碱。采用本发明方法从准噶尔乌头的根分别提取分离出4种单一的生物碱，分别为乌头碱、准噶尔乌头碱、16,17-二氢-12β,16β-环氧欧乌头碱和12-表-欧乌碱。
【专利说明】从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于植物药有效成分提取领域，具体涉及从准噶尔乌头中提取分离生物碱 的方法。
【背景技术】
[0002] 准噶尔乌头Stapf.)为毛莫科乌头 属的多年生草本植物。在我国产于新疆伊犁地区新源、尼勒克等县，生于海拔 1800?2600米的山地和草地阳坡 [1]。其根部供药用，块根有剧毒，可散风寒、除湿、止痛。 现有报导虽对准噶尔乌头中生物总碱的组分进行了分析，但如何将分析检测到的各生物碱 成分从准噶尔乌头中提取分离出了仍是需要克服的问题。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种从准噶尔乌头中提取分离出生物碱的方法。
[0004] 从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，包括如下步骤： (1) 准噶尔乌头根用乙醇浸提，调节浸取液pH值至4-8,再用二氯甲烷萃取； (2) 步骤（1)萃取得到的二氯甲烷相过硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗 脱，得到生物碱。
[0005] 进一步，将步骤（1)浸取液pH值调至4;步骤（2)中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺 的体积比为8:2:0. 5,以每次收集1000 ml计，将第18?23次收集的洗脱液合并，结晶得到 乌头喊。
[0006] 进一步，将步骤（1)浸取液pH值调至8;步骤（2)中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺 的体积比为10:1 :〇. 5,以每次收集1000 ml计，将第6?11次收集的洗脱液合并，结晶得到 准噶尔乌头碱。
[0007] 进一步，将步骤（1)浸取液pH值调至8;步骤（2)中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺 的体积比为7:3:0. 5,以每次收集1000 ml计，将第4?9次收集的洗脱液合并，结晶得到 12-表-欧乌喊。
[0008] 进一步，将步骤（1)浸取液pH值调至8 ;步骤（2)中，石油醚-乙酸乙酯-二乙 胺的体积比为10:1:0. 5,以每次收集1000 ml计，将第1?3次收集的洗脱液合并，再过 S印hadex LH-20凝胶柱，用体积比为5:5:1的三氯甲烷-石油醚-甲醇混合液洗脱，得到 16, 17-二氢-12 β，16 β -环氧欧乌头碱。
[0009] 进一步，步骤（1)在调节浸取液pH值之前，浸取液浓缩后，先加盐酸混悬，然后用 石油醚萃取脱脂，再用氨水调节pH值。
[0010] 采用本发明方法从准噶尔乌头的根分别提取分离出4种单一的生物碱，分别为乌 头碱、准噶尔乌头碱、16, 17-二氢-12 β，16 β -环氧欧乌头碱和12-表-欧乌碱。
【具体实施方式】 toon] 以下结合实施例对本发明做进一步详细说明。
[0012] 实施例1 准噶尔乌头根（10.0 kg)，粉碎（过20目筛)，95wt%乙醇冷浸提取3次，27 L/次，提取 液经薄膜蒸发浓缩后以2wt%盐酸5500 ml混悬，使生物碱充分溶于混悬液中，再石油醚萃 取脱脂；剩余水液用氨水调PH=4,再用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷相。二氯甲烷相经硅胶 柱色谱，用石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗脱，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为 8:2:0. 5,流速为20 ml/min，每次收集1000 ml洗脱液，将第18?23次收集的洗脱液合并， 结晶，滤过，得到化合物1 (1. 5449 g)，通过TLC薄层色谱确定其为单一化合物。
[0013] 化合物1 :无色方晶，碘化铋钾反应呈阳性，mp. 189?190°C，CmH^NOh/H NMR (400 MHz，CDC13) 5 ppm: 3· 34, 3· 75 (s，各 3H，0CH3)，4· 04 (d，/ =6. 5 Hz, 1H，6- β Η)，4· 48 (s，1H)，4· 88 (d，/ =4. 8 Hz，lH，14-aH)，8.03(d，/=7.6 Hz，2H，Ar-H)，7.66 - 7.39(m，3H，Ar-H);13C NMR (400 MHz，CDC13) 5 ppm: 13. 35 (C-21)，21. 45 (0)0?)，33. 63 (C-2)，35. 83 (C-12)，40. 90 (C-10)， 43. 14(C-4)，44. 21 (C-9)，44. 70 (C-7)，46. 85 (C-5)，46. 86 (C-19)，48. 93 (020)， 50. OO(C-ll)，55. 94(C-1，），58. 00(06,），59. 13(018,），61. 02(016,），61. 15(C-17)， 71. 55(C-3)，74. 05(C-13)，76. 69 (C-18)，78. 85(C-15)，78. 92 (C-14)，82. 38 (C-1)， 83. 38(C-6)，89. 97(C-16)，92. 06(C-8)，128. 65(C-3")，129.61 (C-2")，129.78 (C-l")， 133. 29 (C-4〃），166. 08 (Ar⑶)，172. 43 (⑶CH3)。以上数据与文献基本一致，故鉴定为乌头 碱。
[0014] 实施例2 准噶尔乌头根（10.0 kg)，粉碎（过20目筛)，95wt%乙醇冷浸提取3次，27 L/次，提取 液经薄膜蒸发浓缩后以2%盐酸5500 ml混悬，使生物碱充分溶于混悬液中，石油醚萃取脱 脂；剩余水液用氨水调PH=8,再用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷相。二氯甲烷相经硅胶柱色 谱，用体积比为10:1:0. 5的石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗脱，流速为20 ml/min，每 次收集1000 ml洗脱液，将第6?11次收集的洗脱液合并，结晶，滤过，从而得到化合物2 (1. 3345g)，通过TLC薄层色谱确定其为单一化合物。
[0015] 化合物2 :无色方晶，碘化铋钾反应呈阳性，mp. 20(T202 °C，C22H31N03, 4 NMR (400 MHz，CDC13) 5ppm:0.77(s，4H，4-CH3)，1.07(t, /=6.8 Hzd^NCH^^yd.HKd， J =2.4 Hz, 1H) ,3. 34(dd, / =17.1,11.7 Hz, 2H) , 3. 45 (s, 1H) , 3. 85 (s, 1H, 1-β H), 4.36(d，/ =8.1 Hz，lH，15-aH)，5.20,5.30(s，2H，17-CH2) ;13C NMR(400 MHz，CDC13)5 ppm: 13. 63 (NCHfA)，23. 23 (C-6)，26. 07 (C-18)，31. 66 (C-2)，32. 24 (C-3)，34. 11 (C-4)， 35. 21 (C-9)，37. 33 (C-ll)，38. 13 (C-14)，43. 51 (C-7)，49. 19 (C-5)，50. 03 (C-8)， 50. 91 (Νβ7/：Η3)，52. 42 (C-10)，53. 79 (C-13)，57. 41 (C-19)，66. 01 (C-20)，70. 37 (C-l)， 77. 22 (C-15)，11L 42 (C-17)，115. 08 (C-16)，209. 90 (C-12)。以上数据与文献基本一致，故 鉴定为准噶尔乌头碱。
[0016] 实施例3 准噶尔乌头根（10.0 kg)，粉碎（过20目筛)，95wt%乙醇冷浸提取3次，27 L/次，提取 液经薄膜蒸发浓缩后以2%盐酸5500 ml混悬，使生物碱充分溶于混悬液中，石油醚萃取脱 脂；剩余水液用氨水调PH=8,再用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷相。二氯甲烷相经硅胶柱色 谱，用体积比为10:1:0. 5的石油醚-乙酸乙酯-二乙胺洗脱，流速为20 ml/min，以每次收 集1000 ml计，将第1?3次收集的洗脱液合并，合并的洗脱液再过Sephadex LH-20凝胶 柱，再用体积比为5:5:1的三氯甲烷-石油醚-甲醇混合液洗脱，流速为5 ml/min，洗脱液 按15 ml/次收集，将第7次收集的洗脱液结晶，滤过，用丙酮重结晶，从而得到化合物3( 100 mg),通过TLC薄层色谱确定为单一化合物。
[0017] 化合物3 :白色无定型粉末，碘化铋钾反应呈阳性，mp. 23(T232 °C， NMR (400 MHz，CDC13) δ ppm:0. 74 (3H, s, 18-H), 1. 04 (3H, t, J =8Hz,22-H), 1. 38 (3H, s, 17-H), 1. 78(1H, d, / =6Hz, 14 a-H), 2. 71 (1H, dd, / =4,8Hz, 13-H), 3. 42 (1H, brs,2〇-H), 3. 47(1H，s，15-H)，3. 88(1H，dd，/ =16. 3,9. 4Hz，1-H)，4. 83(1H，dd，/ =7. 7,3. 9Hz，12-H)。 13CNMR (400 MHz，CDC13) 5 ppm:13.61(C-22)，21.84(C-17)，22.52(C-6)，26.00(C-18) ，26. 00 (C-ll) ,28.76 (C-14)，31.97 (C-2) ,33.88 (C-4) ,38.03 (C-3) ,38.22 (C-9)， 38.55 (C-13) ,43.39 (C-7) ,49.22 (C-8) ,50.79 (C-21)，51.29 (C-10)，51.53 (C-5)， 57. 28 (C-19) ,66.54 (C-20) ,70.86 (C-l) ,77.51 (C-12) ,79.73 (C-15) ,89.33 (C-16)。 以上数据与基本一致，故鉴定为16, 17-二氢-12 β，16 β -环氧欧乌头碱。
[0018] 实施例4 准噶尔乌头根（10.0 kg)，粉碎（过20目筛)，95wt%乙醇冷浸提取3次，27 L/次，提取 液经薄膜蒸发浓缩后以2%盐酸5500 ml混悬，使生物碱充分溶于混悬液中，石油醚萃取脱 脂；剩余水液用氨水调PH=8,再用二氯甲烷萃取，得到二氯甲烷相。二氯甲烷相经硅胶柱色 谱，用体积比为7:3:0. 5的石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗脱，流速为20 ml/min，每次 收集1000 ml洗脱液，将第4?9次收集的洗脱液合并，结晶，滤过，得到化合物4 (1. 2910 g)，通过TLC薄层色谱确定其为单一化合物。
[0019] 化合物4 :白色无定型粉末，碘化铋钾反应呈阳性，NMR (400 MHz， CDC13) 5 ppm:0.77(3H，s，4-CH3)，1.09(3H，t，/=4 4.20(1!1，(1(1，/=15.9,7.2泡，12-〇!1)，5.13,5.34(2!1，8，17-〇12)。 13〇 NMR (400 MHz，CDC13) δ ppm: 13. 47 (NCH2^), 23. 58 (C-6), 26. 40 (C-18),29. 57 (C-2),31.60 (C-3), 32. 64 (C-ll)，33. 77 (C-4) ,36.05 (C-14) ,37.02 (C-9) ,43.84 (C-7) ,43.88 (C-13) ,48.58 (C-5)，50. 93 (NQ^CH3)，51. 04 (C-8)，52. 54 (C-10)，58. 29 (C-19)，66. 33 (C-20)，67. 10 (C-l)，69. 89 (C-12) ,77.23 (C-15) ,111.55 (C-17)，155.00(016)。以上数据与文献基本 一致，故鉴定为12-表-欧乌碱。
【权利要求】
1. 从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，包括如下步骤： (1) 准噶尔乌头根用乙醇浸提，调节浸取液pH值至4-8,再用二氯甲烷萃取； (2) 步骤（1)萃取得到的二氯甲烷相过硅胶柱，用石油醚-乙酸乙酯-二乙胺混合液洗 脱，得到生物碱。
2. 根据权利要求1所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于，将步骤 ⑴浸取液pH值调至4;步骤⑵中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为8:2:0.5,以 每次收集1000 ml计，将第18?23次收集的洗脱液合并，结晶得到乌头碱。
3. 根据权利要求1所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于，将步骤 ⑴浸取液pH值调至8 ;步骤⑵中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为10:1:0. 5,以 每次收集1000 ml计，将第6?11次收集的洗脱液合并，结晶得到准噶尔乌头碱。
4. 根据权利要求1所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于，将步骤 ⑴浸取液pH值调至8;步骤⑵中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为7:3:0.5,以 每次收集1000 ml计，将第4?9次收集的洗脱液合并，结晶得到12-表-欧乌碱。
5. 根据权利要求1所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于，将步骤 ⑴浸取液pH值调至8 ;步骤⑵中，石油醚-乙酸乙酯-二乙胺的体积比为10:1:0. 5,以 每次收集1000 ml计，将第1?3次收集的洗脱液合并，再过Sephadex LH-20凝胶柱，用体 积比为5:5:1的三氯甲烷-石油醚-甲醇混合液洗脱，得到16, 17-二氢-12 β，16 β-环氧 欧乌头喊。
6. 根据权利要求1至5任一所述从准噶尔乌头中提取分离生物碱的方法，其特征在于， 步骤（1)在调节浸取液pH值之前，浸取液先加盐酸，然后用石油醚萃取脱脂，再用氨水调节 pH值。
【文档编号】C07D491/08GK104193679SQ201410425142
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年8月27日 优先权日:2014年8月27日
【发明者】赵翡翠, 赵军, 聂继红, 汪芳, 杨俊玲 申请人:新疆医科大学附属中医医院
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0访客 来自[中国] 2023年04月11日 17:48真的是服了 不给看就不要发
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