一种鳄鱼卵磷脂的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种鳄鱼卵磷脂的制备方法，包括酶解、第一次、第二次和第三次粗提、减压除溶剂和干燥压缩步骤。本发明旨在提供一种效率高的鳄鱼卵磷脂的制备方法。
【专利说明】一种鳄鱼卵磷脂的制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及鳄鱼制品领域，特别是一种鳄鱼卵磷脂的制备方法。
【背景技术】
[0002] 鳄鱼是一种古老的爬行动物，《本草纲目》等古代医学典籍中均有关于鳄鱼药用价 值的记载。早在南北朝时期的《本草经集注》就有对鳄鱼甲的记载："味辛，微温。主心腹癥 瘕、伏坚、积聚、寒热。"《本草拾遗》称鼍甲"主恶疮，腹内癥瘕"。明代李时珍的《本草纲目》 "鳞部"第四十三卷则详细记载了 ："鼍（即鳄）甲主治心腹症瘕；伏坚积聚；肉：主治少气吸 吸，足不立地；别录湿气邪气、诸蛊内症瘕、恶疱。脂：主治摩风及恶疮。"在现代医学中，鳄 鱼肉、鳄鱼胆和鳄鱼蛋已广泛用于保健和医疗领域。
[0003] 根据中国专利201210384071. 7的《一种蛋黄卵磷脂的提取方法》记载，其通过蛋 黄粉经超临界C02流体萃取脱去蛋黄油，得到脱油蛋黄粉；其次将脱油蛋黄粉经乙醇提取， 过滤，得乙醇提取液；测定乙醇提取液的酸值，根据酸值结果加入氧化铝对乙醇提取液进行 吸附处理；最后乙醇吸附液经过滤、干燥得到成品蛋黄卵磷脂，但是在将该方法应用到鳄鱼 蛋的卵磷脂的提取中却发现卵凝脂提取物少，采用超临界C0 2流体萃取还只能在实验室进 行，工业化应用设备费用高昂等问题，因此需要在现有的设备的基层上开发出一种提取效 率高的鳄鱼卵磷脂的制备方法。
【发明内容】
[0004] 本发明提供一种效率高的鳄鱼卵磷脂的制备方法。
[0005] 本发明提供的技术方案为：一种鳄鱼卵磷脂的制备方法，包括以下步骤：
[0006] 步骤1 :酶解，取鳄鱼蛋蛋黄100重量份置于50?100重量份的水中，加入0. 1? 1. 0重量份的蛋白酶，搅拌酶解3?8小时，温度控制为15?25°C ;
[0007] 步骤2 :第一次粗提，向步骤1所得到的混合物中加入200?300份的乙醇以及 100?200份二氯甲烷，搅拌10?30分钟，过滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离出油 层；
[0008] 步骤3 :第二次粗提，向步骤2所得到的滤渣中加入200?300份的乙醇以及70? 150份二氯甲烷，搅拌8?25分钟，过滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离出油层；
[0009] 步骤4 :第三次粗提，向步骤3所得到的滤渣中加入200?300份的乙醇以及50? 100份二氯甲烷，搅拌6?20分钟，过滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离出油层； [0010] 步骤5 :减压除溶剂，将步骤2、3和4所获得的油层混合在一起进行减压蒸馏，直 至无流动液体存在；
[0011] 步骤6 :向步骤5获得的减压蒸馏的产物中加入80?150重量份的丙酮，搅拌 30?60分钟后过滤，将过滤所得到的的滤渣减压干燥获得干燥的滤渣，减压干燥结束后在 惰性气体的保护下将干燥的滤渣压缩成滤饼。
[0012] 在上述的鳄鱼卵磷脂的制备方法中，所述的步骤2、3、4中所述的乙醇的浓度为 92%?99. 9%。
[0013] 在上述的鳄鱼卵磷脂的制备方法中，所述的二氯甲烷的浓度为分析纯。
[0014] 在上述的鳄鱼卵磷脂的制备方法中，所述的步骤5中减压蒸馏的压力为5? 10kPa，加热方式为水浴加热，加热温度为30?50°C，优选为35?45°C。
[0015] 在上述的鳄鱼卵磷脂的制备方法中，所述的步骤6中减压干燥的压力为5? 10kPa，加热方式为水浴加热，加热温度为20?25°C，优选为21?23°C，减压干燥的时间为 2?3小时。
[0016] 在上述的鳄鱼卵磷脂的制备方法中，所述的惰性气体为氮气。
[0017] 在上述的鳄鱼卵磷脂的制备方法中，所述的步骤2、3、4、6中的过滤均采用抽滤的 方式过滤。
[0018] 在本发明中，采用多次提取的方法对卵磷脂等油脂类物质进行提取，提高提取效 率，针对于鳄鱼蛋，通过测试发现鳄鱼蛋的蛋黄中的蛋白质的含量（21. 1% )高于鸡蛋中蛋 白质的含量，并且鳄鱼蛋的孵化环境使卵磷脂和蛋白质的结合更加牢固，如果通过传统的 方法，无法有效破坏鳄鱼蛋的蛋黄中卵磷脂和蛋白质的连接，卵磷脂的提取效率往往低于 9%。本方案预先采用蛋白酶进行酶解，使部分蛋白酶成为多肽，破坏卵磷脂和蛋白质之间 的氢键，后续采用乙醇和二氯甲烷混合溶剂进行多次粗提，粗提时乙醇是破坏卵磷脂和蛋 白质之间剩余氢键的主要成分，乙醇的水溶液浓度越高越有利于卵磷脂和蛋白质分离，从 经济的角度，同时在酶解的前提下，通过本方案的浓度额乙醇即可以规模化的提取卵凝脂。 更为重要的是，研究人员惊奇的发现采用二氯甲烷和乙醇以及在水存在的条件下可以有效 的提取卵凝脂，二氯甲烷为极性溶剂，但是其极性远远低于乙醇，卵凝脂在乙醇水溶液和二 氯甲烷中的分配比例为1 :99,同时弱极性的二氯甲烷与乙醇同时存在的情况下，可以提高 卵磷脂和蛋白质的分离效率，提高卵磷脂的提取量。
[0019] 在本发明中，需要严格控制各步骤中的温度，一般情况下，物料温度应该控制在 30°C的条件下。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合【具体实施方式】，对本发明的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对 本发明的任何限制。
[0021] 实施例1
[0022] 步骤1 :取100g泰鳄的鳄鱼蛋的蛋黄，加入到80g水中，加入0. 6g的胃蛋白酶和 胰蛋白酶的混合物，搅拌酶解4小时，温度控制为20 土 1°C ;
[0023] 步骤2 :第一次粗提，向步骤1所得到的混合物中加入250g的体积百分比为96% 的乙醇以及120g分析纯二氯甲烷，搅拌25分钟，抽滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离 出油层；
[0024] 步骤3 :第二次粗提，向步骤2所得到的滤渣中加入250g的体积百分比为97%的 乙醇以及90g分析纯二氯甲烷，搅拌15分钟，抽滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离出 油层；
[0025] 步骤4 :第三次粗提，向步骤3所得到的滤渣中加入250g体积百分比为98%的的 乙醇以及70g二氯甲烷，搅拌10分钟，抽滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离出油层；
【权利要求】
1. 一种鳄鱼卵磷脂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1 :酶解，取鳄鱼蛋蛋黄100重量份置于50?100重量份的水中，加入0. 1?1. 0 重量份的蛋白酶，搅拌酶解3?8小时，温度控制为15?25°C ; 步骤2 :第一次粗提，向步骤1所得到的混合物中加入200?300份的乙醇以及100? 200份二氯甲烷，搅拌10?30分钟，过滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离出油层； 步骤3 :第二次粗提，向步骤2所得到的滤渣中加入200?300份的乙醇以及70?150 份二氯甲烷，搅拌8?25分钟，过滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离出油层； 步骤4 :第三次粗提，向步骤3所得到的滤渣中加入200?300份的乙醇以及50?100 份二氯甲烷，搅拌6?20分钟，过滤，收集滤渣和滤液，滤液静置分层分离出油层； 步骤5 :减压除溶剂，将步骤2、3和4所获得的油层混合在一起进行减压蒸馏，直至无 流动液体存在； 步骤6 :向步骤5获得的减压蒸馏的产物中加入80?150重量份的丙酮，搅拌30?60 分钟后过滤，将过滤所得到的的滤渣减压干燥获得干燥的滤渣，减压干燥结束后在惰性气 体的保护下将干燥的滤渣压缩成滤饼。
2. 根据权利要求1所述的鳄鱼卵磷脂的制备方法，其特征在于，所述的步骤2、3、4中所 述的乙醇的浓度为92%?99. 9%。
3. 根据权利要求1所述的鳄鱼卵磷脂的制备方法，其特征在于，所述的二氯甲烷的浓 度为分析纯。
4. 根据权利要求1所述的鳄鱼卵磷脂的制备方法，其特征在于，所述的步骤5中减压蒸 馏的压力为5?10kPa，加热方式为水浴加热，加热温度为30?50°C。
5. 根据权利要求1所述的鳄鱼卵磷脂的制备方法，其特征在于，所述的步骤6中减压 干燥的压力为5?10kPa，加热方式为水浴加热，加热温度为20?25°C，减压干燥的时间为 2?3小时。
6. 根据权利要求1所述的鳄鱼卵磷脂的制备方法，其特征在于，所述的惰性气体为氮 气。
7. 根据权利要求1所述的鳄鱼卵磷脂的制备方法，其特征在于，所述的步骤2、3、4、6中 的过滤均采用抽滤的方式过滤。
【文档编号】C07F9/10GK104098600SQ201410323562
【公开日】2014年10月15日 申请日期:2014年7月8日 优先权日:2014年7月8日
【发明者】汪华东 申请人:汪华东