一种余甘子中单宁酸的提取方法
【专利摘要】本发明公开了一种余甘子中单宁酸的提取方法，该方法步骤如下：取余甘子洗净，干燥，粉碎，过筛后加入乙醇溶液，搅拌均匀，再加入纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶，然后进行超声辅助提取3次，过滤，合并提取液，回收乙醇，得余甘子提取液置于磁力振荡器中振荡，然后冷冻静置，分层后取清液层；将得到的澄清液通过预处理好的大孔吸附树脂柱；用去离子水清洗大孔吸附树脂柱至流出液为无色，然后再用乙醇溶液进行洗脱，收集洗脱液回收乙醇后，浓缩，冷冻干燥，即得单宁酸成品。本发明方法与传统提取方法相比，具有明显的优越性，能显著提高单宁酸的得率和纯度，且简单易操作，生产效率高，生产成本低，具有重要的经济效益。
【专利说明】一种余甘子中单宁酸的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种余甘子中单宁酸的提取方法，属于中药成分提取【技术领域】。
【背景技术】
[0002]单宁酸，又名鞣酸，是一类具有生物活性的多酚物质，它能与蛋白质、生物碱、酶、甙及重金属形成难溶于水的复合物。其11-20%软膏用于渗出性溃疡、烫伤、褥疮、痔疮、湿疹等，其15-20%甘油溶液用于口腔炎、扁桃体炎与咽喉炎等，亦用于解毒，对去水吗啡、士的年、洋地黄、铅、银、铜、锌等中毒时，可用其溶液洗胃；用于结肠造影时，于硫酸钡灌肠剂中加入本品0.25-0.5%灌肠，用以清洁结肠，便于显影。单宁酸还能抑制蛇毒蛋白的活性，对眼镜蛇等毒素有很强的解毒作用，也可用于毒蛇咬伤时的伤口清洗，广泛应用于医药领域。目前国内外主要从含有单宁酸的天然植物中采用水或其它溶剂提取。但是公开的单宁酸提取技术还存在着提取率不高，产品纯度低的缺点，无法满足市场的需求。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种从中药余甘子中提取单宁酸的方法，该方法单宁酸提取率高，产品纯度高。
[0004]为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下:
一种余甘子中单宁酸的提取方法，包括以下步骤:
(1)取原料余甘子洗 净，干燥至含水率低于3%，粉碎，过60-80目筛；
(2)取上述过筛后的余甘子粉末加入10-15倍量的浓度为70-80%乙醇溶液，搅拌均匀，再加入余甘子重量0.02-0.03%的纤维素酶、0.01-0.02%的果胶酶和0.01-0.02%的木瓜蛋白酶，然后进行超声辅助提取，超声温度为50-60°C，超声波功率为400-600W，提取时间为20-30min，过滤，按照上述方法用10-15倍量的相同溶剂超声辅助提取滤渣2次，合并提取液，回收乙醇，得余甘子提取液；
(3)将上述得到的余甘子提取液置于磁力振荡器中振荡1-2h，振动频率为2500-3000r/min，然后在0-5°C温度下冷冻静置12_24h，分层后取清液层；
(4)将AB-8大孔吸附树脂在无水乙醇中浸泡12-24h，除去树脂中的杂质，再用去离子水洗后煮沸20-30min，然后湿法上柱，以1_2 BV去离子水洗柱直至无乙醇残留，再以1-2BV5%HC溶液通过树脂柱，1-2h后用去离子水洗至中性，接着以1-2BV 5%Na0H溶液处理，l_2h后用去离子水洗至中性；
(5)将步骤(3)得到的澄清液以0.5-1.5BV/h的流速通过预处理好的AB-8大孔吸附树脂柱；
(6)用去离子水清洗AB-8大孔吸附树脂柱至流出液为无色，然后再用浓度为80-95%乙醇溶液以l_2BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液回收乙醇后，浓缩至相对密度为
1.34-1.38，冷冻干燥，即得单宁酸成品。
[0005]本发明的有益效果:本发明醇提工艺中采用超声辅助提取，可以大大提高单宁酸的提取率和减少提取时间，同时提取过程中还添加了纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶，可以破坏细胞壁的致密结构，加速余甘子有效成分单宁酸的溶出，从而提高单宁酸的提取率。本发明冷冻澄清工艺中采用磁力振荡余甘子提取液，可以促进杂质成分与单宁酸的分离，提高单宁酸产品的纯度。本发明方法与传统提取方法相比，具有明显的优越性，能显著提高单宁酸的得率和纯度，且简单易操作，生产效率高，生产成本低，具有重要的经济效益。
【具体实施方式】
[0006]下面结合实施例来进一步说明本发明，但并不作为对本发明的限定。
[0007]实施例1
(1)取500g余甘子洗净，干燥至含水率低于3%，粉碎，过60目筛；
(2)取上述过筛后的余甘子粉末加入10倍量的浓度为80%乙醇溶液，搅拌均匀，再加入余甘子重量0.02%的纤维素酶、0.01%的果胶酶和0.01%的木瓜蛋白酶，然后进行超声辅助提取，超声温度为50°C，超声波功率为400W，提取时间为30min，过滤，按照上述方法用10倍量的相同溶剂超声辅助提取滤渣2次，合并提取液，回收乙醇，得余甘子提取液；
(3)将上述得到的余甘子提取液置于磁力振荡器中振荡2h，振动频率为2500r/min，然后在0°C温度下冷冻静置24h，分层后取清液层；
(4)将AB-8大孔吸附树脂在无水乙醇中浸泡24h，除去树脂中的杂质，再用去离子水洗后煮沸20min，然后湿法上柱，以I BV去离子水洗柱直至无乙醇残留，再以IBV 5%HC溶液通过树脂柱，Ih后用去离子水洗至中性，接着以IBV 5%Na0H溶液处理，Ih后用去离子水洗至中性；
(5)将步骤(3)得到的澄清`液以lBV/h的流速通过预处理好的AB-8大孔吸附树脂柱；
(6)用去离子水清洗AB-8大孔吸附树脂柱至流出液为无色，然后再用浓度为90%乙醇溶液以lBV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液回收乙醇后，浓缩至相对密度为1.36，冷冻干燥，即得单宁酸成品65.37g，纯度为99.28%,单宁酸收率为92.71%。
[0008]实施例2
(1)取500g余甘子洗净，干燥至含水率低于3%，粉碎，过80目筛；
(2)取上述过筛后的余甘子粉末加入15倍量的浓度为70%乙醇溶液，搅拌均匀，再加入余甘子重量0.03%的纤维素酶、0.02%的果胶酶和0.02%的木瓜蛋白酶，然后进行超声辅助提取，超声温度为60°C，超声波功率为600W，提取时间为20min，过滤，按照上述方法用15倍量的相同溶剂超声辅助提取滤渣2次，合并提取液，回收乙醇，得余甘子提取液；
(3)将上述得到的余甘子提取液置于磁力振荡器中振荡lh，振动频率为3000r/min，然后在2°C温度下冷冻静置24h，分层后取清液层；
(4)将AB-8大孔吸附树脂在无水乙醇中浸泡24h，除去树脂中的杂质，再用去离子水洗后煮沸30min，然后湿法上柱，以2 BV去离子水洗柱直至无乙醇残留，再以2BV 5%HC溶液通过树脂柱，2h后用去离子水洗至中性，接着以2BV 5%Na0H溶液处理，2h后用去离子水洗至中性；
(5)将步骤(3)得到的澄清液以1.5BV/h的流速通过预处理好的AB-8大孔吸附树脂
柱；(6)用去离子水清洗AB-8大孔吸附树脂柱至流出液为无色，然后再用浓度为95%乙醇溶液以2BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液回收乙醇后，浓缩至相对密度为1.38，冷冻干燥，即得单宁酸成品66.18g，纯度为99.22%,单宁酸收率为93.81%。
【权利要求】
1.一种余甘子中单宁酸的提取方法，其特征在于包括以下步骤: (1)取原料余甘子洗净，干燥至含水率低于3%，粉碎，过60-80目筛； (2)取上述过筛后的余甘子粉末加入10-15倍量的浓度为70-80%乙醇溶液，搅拌均匀，再加入余甘子重量0.02-0.03%的纤维素酶、0.01-0.02%的果胶酶和0.01-0.02%的木瓜蛋白酶，然后进行超声辅助提取，超声温度为50-60°C，超声波功率为400-600W，提取时间为20-30min,过滤，按照上述方法用10-15倍量的相同溶剂超声辅助提取滤渣2次，合并提取液，回收乙醇，得余甘子提取液； (3)将上述得到的余甘子提取液置于磁力振荡器中振荡l_2h，振动频率为2500-3000r/min，然后在0-5°C温度下冷冻静置12_24h，分层后取清液层； (4)将AB-8大孔吸附树脂在无水乙醇中浸泡12-24h，除去树脂中的杂质，再用去离子水洗后煮沸20-30min，然后湿法上柱，以1_2 BV去离子水洗柱直至无乙醇残留，再以1-2BV5%HC溶液通过树脂柱，1-2h后用去离子水洗至中性，接着以1-2BV 5%NaOH溶液处理，l_2h后用去离子水洗至中性； (5)将步骤(3)得到的澄清液以0.5-1.5BV/h的流速通过预处理好的AB-8大孔吸附树脂柱； (6)用去离子水清洗AB-8大孔吸附树脂柱至流出液为无色，然后再用浓度为80-95%乙醇溶液以l_2BV/h的流速进行洗脱，收集洗脱液回收乙醇后，浓缩至相对密度为·1.34-1.38，冷冻 干燥，即得单宁酸成品。
【文档编号】C07H1/08GK103772452SQ201410007979
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2014年1月8日 优先权日:2014年1月8日
【发明者】陈杏爱 申请人:合肥康龄养生科技有限公司