丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法
【专利摘要】本发明公开了一种丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法，属于丙谷二肽原料药的生产【技术领域】。其包括下述步骤：（1）将丙谷二肽在2-10倍重量的水中溶解，在丙谷二肽料液中加入活性吸附剂，在35-50℃、pH值8-10下进行吸附20-40分钟，脱除吸附剂并过四级膜过滤除菌；（2）将吸附处理之后的料液压入结晶釜内，加入混合溶媒进行结晶；（3）过滤，洗涤，干燥。本发明采用活性吸附剂进行吸附处理，在进行脱色除杂的同时，对丙谷二肽中的内毒素进行脱除，有效脱除内毒素，进一步通过混合溶媒进行结晶，减缓结晶速率，使产品质量更稳定；此方法操作简单，可用于丙谷二肽的规模化生产。
【专利说明】丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及丙谷二肽原料药的生产。
【背景技术】
[0002]丙谷二肽又称N (2) -L-丙氨酰-L-谷氨酰胺，氨基酸类场外营养剂，对处于生命危急时刻的病人起着重要作用，其商品名有欣坤畅、仲新太、力太、重太、培尔吉、谷二安等，N (2)-L-丙氨酰-L-谷氨酰胺首先由德国费森尤斯公司研制，2004年在我国成功投产，目前国内较大的成品厂家有莱美药业、华瑞制药有限公司、科伦药业等。丙谷二肽在临床上具有其特有的医药价值，有资料显示，及时补充丙谷二肽，可以显著缩短病人住院和恢复的时间，具有医疗和经济的双重意义。丙谷二肽的药用价值的特殊性，就像生理盐水、葡萄糖一样，将成为救护病人的必需品。
[0003]丙谷二肽原料药的制备一般采用冻干法或溶媒结晶法，中国专利CN102698247A和专利CN102491918A均公开了溶媒结晶法制备丙谷二肽的方法，与冻干法相比，溶媒结晶法更具优势，具有纯度高、溶媒残留低等特点。但在溶媒结晶法制备丙谷二肽时，结晶过程中容易残留部分料液，少量的含料水溶液在长期的存放过程中极易染菌，往往造成最终产品内毒素较高。对于内毒素超标产品的处理方法有超滤法、高温法、酸碱处理法、溶媒洗涤法、活性炭吸附法、双氧水浸泡法等，由于内毒素不是蛋白质，因此耐热而稳定，活性难以破坏，上述方法难于实现内毒素的有效去除。
【发明内容】
[0004]本发明提供一 种丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法，采用活性吸附剂进行吸附处理，在进行脱色除杂的同时，对丙谷二肽中的内毒素进行脱除，使内毒素的含量降低为
0.006 EU/mg以下，有效脱除内毒素，进一步通过混合溶媒进行结晶，减缓结晶速率，使产品质量更稳定；此方法操作简单，可用于丙谷二肽的规模化生产。
[0005]本发明所采取的技术方案是:
一种丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法，包括下述步骤:
(1)将丙谷二肽在2-10倍重量的水中溶解，在丙谷二肽料液中加入活性吸附剂，在35-50°C、pH值8-10条件下进行吸附20-40分钟，脱除吸附剂并过四级膜过滤除菌；所述活性吸附剂包括下述重量配比的原料:白炭黑30-45%、黑炭黑50-65%、离子交换树脂0.5-3%,水 0.5-3% ；
(2)将吸附处理之后的料液压入结晶釜内，加入混合溶媒进行结晶；所述混合溶媒为甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃中的两种混合而成；
(3)过滤，洗涤，干燥。
[0006]优选的，活性吸附剂包括下述重量配比的原料:白炭黑38-43%、黑炭黑55-60%、离子交换树脂1.5-2%、水1.5-3%。
[0007]优选的，丙谷二肽为内毒素不合格品；优选的，活性吸附剂为丙谷二肽料液质量的0.5-3.0%。
[0008]优选的，步骤(1)中四级膜孔径为0.liim、0.22iim、0.lum.0.22 u m0
[0009]优选的，步骤(2)中两种溶媒的体积比为1:1-1:10。
[0010]进一步优选的，步骤(2)中溶媒结晶为:15_18°C下加入料液体积1-1.5倍的混合溶媒，搅拌20-30分钟，然后升温35-65°C，加入料液体积3_5倍的混合溶媒，搅拌20-40分钟。
[0011]更进一步优选的，步骤(3)中采用三合一抽滤机进行过滤、洗涤、干燥，采用料液体积0.5-1倍的混合溶媒进行洗涤，冷抽2-3小时，85°C干燥2-3小时。
[0012]本发明将物料的温度控制35_50°C，物料pH值控制在8-10，加入活性吸附剂进行处理，处理完成后经过多级过滤可达到原料药结晶要求，经过结晶、晶体洗涤二次处理后，可使最终产品合格。
[0013]单一的黑炭黑仅能起到脱色、除杂、去除内毒素的作用，本发明的活性吸附剂中添加白炭黑和离子交换树脂。其中，白炭黑由于粒径较细、强度高、具有很强的吸湿性，能够覆盖在黑炭黑表面起到润滑作用，能够作为抗结剂、助流剂，抵抗黑炭黑滤饼压实产生的阻尼作用，抗流挂、改善过滤效果、有助于缩短过滤工时、同时减少了固体垃圾的处理量。白炭黑的加入可以改善过滤效果，使过滤时间缩短为原来的1/3。
[0014]离子交换树脂具有良好的吸附性能，可以去除物料中的杂质及由菌体产生了带有助色基团的极性小分子。
[0015]采用在微观结构上可以与水形成缔合物，从而改善溶媒结晶体系中水-溶媒极性及粘性，减缓结晶速率，弥补在单一混媒中饱和度不宜控制的现象。
[0016]采用上述技术方案所产生的有益效果在于:
本发明采用活性吸附剂进行吸附处理，在进行脱色除杂的同时，对丙谷二肽中的内毒素进行脱除，使内毒素的含量降低为0.006 EU/mg以下，有效脱除内毒素，进一步通过混合溶媒进行结晶，减缓结晶速率，使产品质量更稳定；此方法操作简单，可用于丙谷二肽的规模化生产。
【具体实施方式】
[0017]实施例1
本实施例中，活性吸附剂中原料的重量配比为:白炭黑30%、黑炭黑65%、离子交换树脂3%、水2%。混合溶媒采用体积比为1:1的甲醇和二氯甲烷混合而成。
[0018](I)将15Kg内毒素不合格的丙谷二肽在75Kg的水中溶解，在丙谷二肽料液中加入
2.7Kg活性吸附剂，在45°C、pH值8-10条件下进行吸附40分钟，脱除吸附剂并过四级膜过滤除菌；四级膜孔径为0.1 u m、0.22 u m、0.1 u m、0.22 u m。
[0019](2)将吸附处理之后的料液压入结晶釜内，15°C下加入料液体积1.3倍的混合溶媒，搅拌30分钟，升温至45°C后加入料液体积4.5倍的混合溶媒，搅拌30分钟。
[0020](3)采用三合一抽滤机进行过滤、洗涤、干燥，采用料液体积0.5-1倍的混合溶媒进行洗涤，冷抽2小时，85°C干燥3小时，得成品共计13.93Kg，收率92.9%，取样检测内毒素〈0.006EU/mg。
[0021]实施例2本实施例中，活性吸附剂中原料的重量配比为:白炭黑38%、黑炭黑60%、离子交换树脂
.0.5%、水1.5% ;混合溶媒采用体积比为1:8的乙醇和乙酸乙酯混合而成。
[0022](1)将1OKg丙谷二肽在IOOKg的水中溶解，在丙谷二肽料液中加入1.1Kg活性吸附剂，在50°C、pH值8-10条件下进行吸附20分钟，脱除吸附剂并过四级膜过滤除菌；四级膜孔径为 0.1 μ m、0.22 μ m、0.1 μ m、0.22 μ m。
[0023](2)将吸附处理之后的料液压入结晶釜内，18°C加入料液体积1.2倍的混合溶媒，搅拌20分钟，升温至35°C后加入料液体积4倍的混合溶媒，搅拌20分钟。
[0024](3)采用三合一抽滤机进行过滤、洗涤、干燥，采用料液体积0.5-1倍的混合溶媒进行洗涤，冷抽2.5小时，85°C干燥2小时，得成品，8.91Kg，收率89.1%，取样检测内毒素〈0.006EU/mg。
[0025]实施例3
本实施例中，活性吸附剂中原料的重量配比为:白炭黑43%、黑炭黑55%、离子交换树脂
.1.5%、水0.5% ;混合溶媒采用体积比为1:5的异丙醇和乙酸乙酯混合而成。
[0026](I)将15Kg内毒素不合格的丙谷二肽在30Kg水中溶解，在丙谷二肽料液中加入
.0.45Kg活性吸附剂，在40°C、pH值8-10条件下进行吸附25分钟，脱除吸附剂并过四级膜过滤除菌；四级膜孔径为0.1 μ m、0.22 μ m、0.1 μ m、0.22 μ m。
[0027](2)将吸附处理之后的料液压入结晶釜内，17°C加入料液体积1.5倍的混合溶媒，搅拌25分钟，升温至65°C后加入料液体积3倍的混合溶媒，搅拌40分钟。
[0028](3)采用三合一抽滤机进行过滤、洗涤、干燥，采用料液体积0.5-1倍的混合溶媒进行洗涤，冷抽3小时，85°C干燥2小时，得成品13.74Kg，收率91.6%，取样检测内毒素〈0.006EU/mg。
[0029]实施例4
本实施例中，活性吸附剂中原料的重量配比为:白炭黑45%、黑炭黑50%、离子交换树脂2%、水3% ;混合溶媒采用体积比为1:10的甲醇和四氢呋喃混合而成。
[0030](1)将12Kg内毒素不合格的丙谷二肽在96Kg水中溶解，在丙谷二肽料液中加入
2.16Kg活性吸附剂，在35°C、pH值8-10条件下进行吸附30分钟，脱除吸附剂并过四级膜过滤除菌；四级膜孔径为0.1 μ m、0.22 μ m、0.1 μ m、0.22 μ m。
[0031](2)将吸附处理之后的料液压入结晶釜内，16°C加入料液体积I倍的混合溶媒，搅拌28分钟，升温至55°C后加入料液体积5倍的混合溶媒，搅拌25分钟。
[0032](3)采用三合一抽滤机进行过滤、洗涤、干燥，采用料液体积0.5-1倍的混合溶媒进行洗涤，冷抽2小时，85°C干燥2.5小时，得成品10.5公斤，收率87.5%，取样检测内毒素〈0.006EU/mg。
【权利要求】
1.一种丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法，其特征在于其包括下述步骤: (1)将丙谷二肽在2-10倍重量的水中溶解，在丙谷二肽料液中加入活性吸附剂，在35-500C、pH值8-10条件下进行吸附20-40分钟，脱除吸附剂并过四级膜过滤除菌；所述活性吸附剂包括下述重量配比的原料:白炭黑30-45%、黑炭黑50-65%、离子交换树脂0.5-3%,水 0.5-3% ； (2)将吸附处理之后的料液压入结晶釜内，加入混合溶媒进行结晶；所述混合溶媒为甲醇、乙醇、异丙醇、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃中的两种混合而成； (3)过滤，洗涤，干燥。
2.根据权利要求1所述的丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法，其特征在于所述活性吸附剂包括下述重量配比的原料:白炭黑38-43%、黑炭黑55-60%、离子交换树脂1.5_2%、水1.5-3%。
3.根据权利要求1所述的丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法，其特征在于所述丙谷二肽为内毒素不合格品。
4.根据权利要求1所述的丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法，其特征在于所述活性吸附剂为丙谷二肽料液质量的0.5-3.0%。
5.根据权利要求1所述的活性吸附剂及其在丙谷二肽生产中的应用，其特征在于所述步骤(1)中四级膜孔径为 0.liim、0.22iim、0.lum.0.22 u m0
6.根据权利要求1所述的丙谷二肽原料药中内毒素的去除方法，其特征在于所述步骤(2)中两种溶媒的体积比为1:1-1:10。
7.根据权利要求1所述的活性吸附剂及其在丙谷二肽生产中的应用，其特征在于所述步骤(2)中溶媒结晶为:15-18°C下加入料液体积1-1.5倍的混合溶媒，搅拌20-30分钟，然后升温35-65°C，加入料液体积3-5倍的混合溶媒，搅拌20-40分钟。
8.根据权利要求1所述的活性吸附剂及其在丙谷二肽生产中的应用，其特征在于所述步骤(3)中采用三合一抽滤机进行过滤、洗涤、干燥，采用料液体积0.5-1倍的混合溶媒进行洗涤，冷抽2-3小时，85°C干燥2-3小时。
【文档编号】C07K1/14GK103626838SQ201310605516
【公开日】2014年3月12日 申请日期:2013年11月26日 优先权日:2013年11月26日
【发明者】李斌水, 徐浙龙, 张庆斌, 何连顺 申请人:精晶药业股份有限公司