专利名称：从小球藻中提取叶绿素铜钠盐的方法
技术领域：
本发明属于生物技术领域，涉及一种从小球藻中提取叶绿素铜钠盐的方法。
背景技术：
叶绿素是脂溶性色素，存在于一切绿色植物中，目前广泛应用于医药、食品、日用化工等领域，其降解产物和衍生物在医药上具有广阔的应用前景，其中叶绿素铜钠盐最为重要，可治疗传染性肝炎、胃和十二指肠溃疡、慢性肾炎、胰腺炎、白血病等疾病。一般绿色植物中叶绿素含量较低，含量为0.2%，绿藻中的小球藻叶绿素含量是自然界中最高的生物，含量为4% 6%。但小球藻为单细胞微藻，有坚固的纤维素胞壁，常规的有机溶剂提取法并不能有效地将叶绿素提取出来。叶绿素铜钠盐的分子式为:C34H29CuN4Na306，结构如下所示:
权利要求
1.一种从小球藻中提取叶绿素铜钠盐的方法，其特征在于，有以下步骤: 1)取小球藻菌种，接种于SE固体培养基上活化，用SE液体培养基扩大培养，浓度为IO7个/mL，得到小球藻液体； 2)取步骤I)所述的小球藻液200mL，离心，用50-65%乙醇作浸提剂，得到小球藻固体，小球藻固体与乙醇的固液比g/mL为1:10，超声波萃取破细胞壁，65°C下，用5%的NaOH溶液调至小球藻破碎液PH为11 12，用5%Na0H皂化30_50min，溶液蒸发浓缩； 3)将步骤2)所得到的浓缩液用IOmL蒸馏水、IOmL石油醚、10mL50%的乙醇溶液连续洗涤； 4)用盐酸(1:1)调节步骤3)所得溶液的PH为2 3，然后加入2mL质量分数为20%的CuSO4溶液铜化叶绿素，60°C铜化40min.，用少量蒸馏水溶解后，加入5mL质量分数为2%的NaOH-乙醇溶液；再 用Imol/mL的NaOH溶液溶液调节混合液的pH为11 12 ;抽滤，干燥，得到叶绿素铜钠盐。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:步骤2)所述乙醇浓度为60%。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:步骤2)所述超声波时间为17min，强度为600wo
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:步骤2)所述皂化时间为42min。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:步骤2)所述离心的时间为5min，离心的速度为 3000r/min。
全文摘要
本发明涉及一种从小球藻中提取叶绿素铜钠盐的方法，该方法采用将小球藻菌种经活化、扩大培养，得到的小球藻液体经浸提，得到的小球藻固体，经超声波萃取破细胞壁，皂化后，用蒸馏水、石油醚、乙醇溶液连续洗涤，以除去未被皂化的叶绿素和叶黄素等其他色素杂质，浓缩，加入CuSO4溶液铜化叶绿素，用少量水溶解后，加入NaOH-乙醇溶液,沉淀生成，控制溶液pH11～12；经抽滤，干燥，得到叶绿素铜钠盐。该方法为藻类植物的叶绿素测量、微藻中油脂的提取提供实验依据，为叶绿素盐的工业化生产提供试验数据。
文档编号C07D487/22GK103145718SQ201310094739
公开日2013年6月12日 申请日期2013年3月22日 优先权日2013年3月22日
发明者王万能 申请人:重庆理工大学