专利名称：一种从浆果苋中制备普曲诺苷a的方法
技术领域：
本发明属于天 然药物分离领域，特别是涉及一种从浆果苋中制备普曲诺苷A的方法。
背景技术：
衆果觅为觅科植物衆果觅amaranthoides L. Merrill的果实,又名地苓苋、野苋菜藤，产于四川、云南、西藏、贵州、广东、广西、台湾等地，生于海拔100-2200米山坡林下或灌丛中，印度、中南半岛、印度尼西亚、马来西亚及大洋洲均有分布。全株供药用，具有祛风除湿、痛经活络的功效，用于治疗风湿性关节炎、风湿腰腿痛等症。普曲诺苷A (Putranoside A)是从衆果觅中分离得到的一种三職苷类化合物，白色无定形粉末，mp. 261-272°C，分子式C42H66O13，分子量778. 98。药理实验研究表明，普曲诺苷A具有杀软体动物作用、杀精子作用，另外还具有溶血作用。经检索，尚未见大量制备普曲诺苷A的方法报道。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种从浆果苋中制备普曲诺苷A的方法。为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的
一种从浆果苋中制备普曲诺苷A的方法，其特征在于取浆果苋使用组织捣碎机捣成浆状，加5-10倍(W/W)的水加热至60-80°C保温提取，过滤提取液，然后加入超滤膜系统超滤，透过液再加入纳滤膜系统纳滤，将浓缩液加乙酸乙酯萃取，萃取液过氧化铝柱后再浓缩下注液，浓缩液采用高速逆流色谱分离，流分减压干燥即得普曲诺苷A。所述的超滤膜为截留分子量4000-10000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量不大于500的中空纤维素膜。所述的氧化铝为100-200目中性氧化铝或酸性氧化铝。所述的高速逆流色谱分离条件为溶剂系统选用石油醚-乙酸乙酯-水，比例3 7 :4，下相为流动相,流速 I. 2-3. 5ml/min,转速 800-1000r/min。本发明的有益效果是采用膜分离技术，物理除杂，能耗低，污染小，温度低；高速逆流色谱分离是一种液液分配色谱，产品分离无损失，溶剂可以回收再利用；整个工艺操作简单，易于放大生产。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
取2kg浆果苋使用组织捣碎机捣成浆状，加10倍量(W/W)水加热60°C保温提取2小时，过滤液体，再加5倍水加热至70°C提取2小时，合并提取液冷至常温，滤过，加入截留分子量8000的中空纤维素膜系统超滤，加适量水透析，收集透过液加入截留分子量500的中空纤维素膜系统浓缩，浓缩液加等体积的乙酸乙酯萃取2次，萃取液过中性氧化铝(粒度100-200目)短柱，柱通过液回收乙酸乙酯至小体积。取石油醚、乙酸乙酯、水,按3:7:4混合，取上相注入色谱柱，开启高速逆流色谱仪，调整转速800r/min，注入流动相，平衡后，调整流动相流速2. Oml/min,同时注入流动相，收集普曲诺苷A流分，连续分离，合并流分浓缩，减压干燥，得白色普曲诺苷A，含量94. 4% (高效液相检测)，收率72. 4%。实施例2:
取2kg浆果苋使用组织捣碎机捣成浆状，加5倍量(W/W)水加热65°C保温提取2. 5小时，提取三次，合并提取液冷至常温，滤过，加入截留分子量10000的中空纤维素膜系统超滤，加适量水透析，收集透过液加入截留分子量500的中空纤维素膜系统浓缩，浓缩液加等体积的乙酸乙酯萃取3次，萃取液过中性氧化铝(粒度100-200目)短柱，柱通过液回收乙酸乙酯至小体积。取石油醚、乙酸乙酯、水，按3:7:4混合，取上相注入色谱柱，开启高速逆流色谱仪，调整转速900r/min，注入流动相，平衡后，调整流动相流速I. 2ml/min,同时注入流动相，收集普曲诺苷A流分，连续分离，合并流分浓缩，减压干燥，得白色普曲诺苷A，含量
91.7% (高效液相检测)，收率 . 5%。实施例3
取3kg浆果苋使用组织捣碎机捣成浆状，加7倍量(W/W)水加热70°C保温提取2小时，提取三次，合并提取液冷至常温，滤过，加入截留分子量4000的中空纤维素膜系统超滤，力口适量水透析，收集透过液加入截留分子量500的中空纤维素膜系统浓缩，浓缩液加等体积的乙酸乙酯萃取2次，萃取液过酸性氧化铝(粒度100-200目)短柱，柱通过液回收乙酸乙酯至小体积。取石油醚、乙酸乙酯、水，按3:7:4混合，取上相注入色谱柱，开启高速逆流色谱仪，调整转速1000r/min，注入流动相，平衡后，调整流动相流速3ml/min，同时注入流动相，收集普曲诺苷A流分，连续分离，合并流分浓缩，减压干燥，得白色普曲诺苷A，含量93. 6%(高效液相检测)，收率73. 8%。实施例4:
取5kg浆果苋使用组织捣碎机捣成浆状，加8倍量(W/W)水加热80°C保温提取I. 5小时，提取2次，合并提取液冷至常温，滤过，加入截留分子量5000的中空纤维素膜系统超滤，加适量水透析，收集透过液加入截留分子量500的中空纤维素膜系统浓缩，浓缩液加等体积的乙酸乙酯萃取3次，萃取液过酸性氧化铝(粒度100-200目)短柱，柱通过液回收乙酸乙酯至小体积。取石油醚、乙酸乙酯、水，按3:7:4混合，取上相注入色谱柱，开启高速逆流色谱仪，调整转速950r/min，注入流动相，平衡后，调整流动相流速3. 5ml/min，同时注入流动相，收集普曲诺苷A流分，连续分离，合并流分浓缩，减压干燥，得白色普曲诺苷A，含量95. 2% (高效液相检测)，收率71. 2%。
权利要求
1.一种从浆果苋中制备普曲诺苷A的方法，其特征在于取浆果苋使用组织捣碎机捣成浆状，加5-10倍(W/W)的水加热至60-80°C保温提取，过滤提取液，然后加入超滤膜系统超滤，透过液再加入纳滤膜系统纳滤，将浓缩液加乙酸乙酯萃取，萃取液过氧化铝柱后再浓缩下注液，浓缩液采用高速逆流色谱分离，流分减压干燥即得普曲诺苷A。
2.根据权利要求I所述从浆果苋中制备普曲诺苷A的方法，其特征在于所述的超滤膜为截留分子量4000-10000的中空纤维素膜，纳滤膜为截留分子量不大于500的中空纤维素膜。
3.根据权利要求I所述从浆果苋中制备普曲诺苷A的方法，其特征在于所述的氧化铝为100-200目中性氧化铝或酸性氧化铝。
4.根据权利要求I所述从浆果苋中制备普曲诺苷A的方法，其特征在于所述的高速逆流色谱分离条件为溶剂系统选用石油醚-乙酸乙酯-水，比例3 :7 :4，下相为流动相，流速I. 2-3. 5ml/min，转速 800_1000r/min。
全文摘要
本发明涉及一种从浆果苋中制备普曲诺苷A的方法，方法是取浆果苋使用组织捣碎机捣成浆状，加5-10倍(W/W)水加热至60-80℃保温提取，过滤提取液，加入超滤膜系统超滤，透过液再加入纳滤膜系统纳滤，浓缩液加乙酸乙酯萃取，萃取液过氧化铝柱除杂后再浓缩下注液，浓缩液采用高速逆流色谱分离，流分减压干燥即得普曲诺苷A。本发明运用膜分离和高速逆流色谱分离技术制备普曲诺苷A是一种高收率、低污染的制备方法。
文档编号C07H1/08GK102863500SQ20121036000
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月25日 优先权日2012年9月25日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司