专利名称：一种苏打其亭的制备方法
技术领域：
本发明属于中药提取分离技术领域，涉及一种从苏打其柑桔中分离制备苏打其亭的方法。
背景技术：
苏打其亭(Sudachitin)黄色针晶(乙酸乙酯甲醇，I :1)，mp. 239. 5 240. 5°C。黄酮类物质，主要存在于菊科(Compositae),古堆菊sarofArae地上部分、瘤状突起向日葵Helian thus s trumosus地上部分、针状伊瓦菊Iva acerosa (Nutt.)Jackson、沙生线叶膜质菊 Tetraneuris linearifolia var. arenicola 地上部分；莎草科(Cyperaceae), Trichophorum cespitosum (L. ) Hartman subsp.莖；唇形科(Labiatae)、墨HMsjorBim Aortensis 叶； 芸香科(Rutaceae),苏打其柑桔 CYtras sudachi Hort. exShirai果实、苏打其柑桔CYtras sudachi Hort. ex Shirai果皮。分子式=C18H16O8,分子量360.32。苏打其亭在浓度为IOii M时，对大鼠、牛的晶状体醛糖还原酶具有抑制作用，抑制率分别为66%和56% ;在浓度为I U M时，其对两者的抑制率皆为19%。目前，市场上罕见苏打其亭对照品及其相关产品的出售，资源稀缺且成本较高。
发明内容
本发明的目的是提供一种苏打其亭的制备方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的
(1)取苏打其柑桔，经粉碎处理，加入适量的蒸馏水和生物酶自然酶解，得酶解原料加入至超临界CO2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，进行萃取，得到萃取物；
(2)萃取物加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；
(3)采用高速逆流色谱法分离纯化上述粗提物中的苏打其亭，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集苏打其亭组分；
(4)将苏打其亭组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入乙酸乙酯-甲醇(I:I)重结晶，过滤、洗涤干燥即得苏打其亭。所述步骤(I)中的生物酶的用量为0. 5-0. 8%。所述步骤(I)中的超临界CO2萃取参数条件为萃取温度为30_45°C，萃取压力为28-35MPa，萃取时间为I. 5-3. 5h，分离釜I温度为25_35°C，压力为8-lOMPa，分离釜II温度为 20-28°C，压力为 5-8MPa，CO2 流量为 2_4ml/g 生药 /min。所述步骤(3)中石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂系统的体积比为3~5:5~8:4~6:2~5。本方法积极效果是
(1)本方法采用超临界CO2萃取，能耗低，萃取剂CO2清洁无污染；
(2)本方法采用高速逆流色谱法，收率高、制备量大、制备周期短，解决了柱层析效率低而且污染严重的技术缺陷；
(3)本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
取Ikg苏打其柑桔，经粉碎处理，加入5g生物酶和适量的蒸馏水自然酶解，得酶解原料加入至超临界CO2萃取器中，设定萃取温度为45°C，萃取压力为28MPa，分离釜I温度为25°C，压力为lOMPa，分离釜II温度为20°C，压力为5MPa，CO2通入流量为4ml/g生药/min，通入甲醇作为夹带剂萃取3. 5h，在分离釜中得到萃取物，加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的苏打其亭，按3:8:6:2体积比量取石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，混匀静置，取上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集苏打其亭组分，真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入乙酸乙酯-甲醇(I: I)重结晶，过滤、洗涤干燥即得苏打其亭，含量96. 5%。实施例2:
取Ikg苏打其柑桔，经粉碎处理，加入Sg生物酶和适量的蒸馏水自然酶解，得酶解原料加入至超临界CO2萃取器中，设定萃取温度为30°C，萃取压力为35MPa，分离釜I温度为25°C，压力为8MPa，分离釜II温度为20°C，压力为5MPa，CO2通入流量为2ml/g生药/min，通入甲醇作为夹带剂萃取I. 5h，在分离釜中得到萃取物，加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的苏打其亭，按5:5:4:5体积比量取石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，混匀静置，取上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集苏打其亭组分，真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入乙酸乙酯-甲醇(I: I)重结晶，过滤、洗涤干燥即得苏打其亭，含量97. 8%。实施例3:
取IOkg苏打其柑桔，经粉碎处理，加入60g生物酶和适量的蒸馏水自然酶解，得酶解原料加入至超临界CO2萃取器中，设定萃取温度为35°C，萃取压力为35MPa，分离釜I温度为35°C，压力为lOMPa，分离釜II温度为28°C，压力为7MPa，CO2通入流量为3ml/g生药/min，通入甲醇作为夹带剂萃取3h，在分离釜中得到萃取物，加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的苏打其亭，按4:7:5:3体积比量取石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，混匀静置，取上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集苏打其亭组分，真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入乙酸乙酯-甲醇(I: I)重结晶，过滤、洗涤干燥即得苏打其亭，含量97. 3%。 实施例4:
取IOkg苏打其柑桔，经粉碎处理，加入70g生物酶和适量的蒸馏水自然酶解，得酶解原料加入至超临界CO2萃取器中，设定萃取温度为38°C，萃取压力为30MPa，分离釜I温度为28°C，压力为lOMPa，分离釜II温度为25°C，压力为7MPa，CO2通入流量为4ml/g生药/min，通入甲醇作为夹带剂萃取2h，在分离釜中得到萃取物，加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的苏打其亭，按4:7:5:3体积比量取石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，混匀静置，取上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集苏打其亭组分，真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入乙酸乙酯-甲醇(I: I)重结晶，过滤、洗涤干燥即得苏打其亭，含量98. 1%
权利要求
1.ー种苏打其亭的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)取苏打其柑桔，经粉碎处理，加入适量的蒸馏水和生物酶自然酶解，得酶解原料加入至超临界CO2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，进行萃取，得到萃取物； (2)萃取物加入こ酸こ酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物； (3)上述粗提物采用高速逆流色谱法分离纯化，其两相溶剂系统为石油醚-こ酸こ酷-甲醇-水，上相注满高速逆流色谱柱为固定相，转动主机，泵入下相做流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，收集苏打其亭组分； (4)将苏打其亭组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入こ酸こ酷-甲醇(I:I)重结晶，过滤、洗涤干燥即得苏打其亭。
2.根据权利要求I所述的ー种苏打其亭的制备方法，其特征在于所述步骤(I)中的生物酶的用量为0. 5-0. 8%。
3.根据权利要求I所述的ー种苏打其亭的制备方法，其特征在于所述步骤(I)中的超临界CO2萃取參数条件为萃取温度为30-45°C，萃取压カ为28-35MPa，萃取时间为I.5-3. 5h，分离釜I温度为25-35°C，压カ为8-10MPa，分离釜II温度为20-28°C，压カ为5-8MPa, CO2 流量为 2_4ml/g 生药 /min。
4.根据权利要求I所述的ー种苏打其亭的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中石油醚-こ酸こ酷-甲醇-水溶剂系统的体积比为3-5:5-8:4-6:2-5。
全文摘要
本发明涉及一种操作简单、污染少的苏打其亭的制备方法，工艺步骤为(1)取苏打其柑桔，经粉碎处理，加入适量的蒸馏水和生物酶自然酶解，得酶解原料加入至超临界CO2萃取器中，用甲醇作为夹带剂，进行萃取，得到萃取物；(2)萃取物加入乙酸乙酯搅拌使溶解，过滤，滤液浓缩干燥，得粗提物；(3)采用高速逆流色谱法分离纯化粗提物中的苏打其亭，其两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水，上相为固定相，下相为流动相，收集苏打其亭组分；(4)将苏打其亭组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，加入乙酸乙酯-甲醇重结晶。本发明制备苏打其亭，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07D311/40GK102659736SQ20121011590
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月19日 优先权日2012年4月19日
发明者刘东锋, 吴艳波 申请人:南京泽朗医药科技有限公司