白蛋白衍生物和变体的利记博彩app

专利名称：白蛋白衍生物和变体的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及白蛋白衍生物和变体和/或包含此类白蛋白衍生物和变体的融合多肽。
本发明进一步涉及白蛋白衍生物和变体和/或包含此类白蛋白衍生物和变体的融合多肽作为供药物递送、多肽稳定性和体内半寿期延长或调节的工具中的用途。
发明背景
白蛋白是天然见于哺乳动物血浆中的蛋白，在血浆中，其为最丰富的蛋白。其在维持血液理想的渗透压方面发挥重要作用，并在血流中的多种物质的转运中具有作用。
白蛋白在体内与其受体，即新生儿Fe受体(FcRn) “Brambell”结合，且已知该相互作用对于增加白蛋白的血浆半寿期是重要的。FcRn是膜结合蛋白，在多种细胞和组织类型中表达，并已发现其降低白蛋白的胞内降解的速率(Roopenian D. C.和Akilesh, S. (2007)，Nat. Rev. Immunol 7，715-725.)。FcRn有助于维持哺乳动物如人血清的高水平的IgG和白蛋白。
尽管现有技术中已表征了 FcRn-免疫球蛋白G(IgG)相互作用，对FcRn-白蛋白相互作用的表征和理解尚不充分。主要白蛋白-FcRn结合位点位于域III (DIII 381-585)内(Andersen 等(2010)Clinical Biochemistry 43,367-372)。然而，本领域已知IgG和白蛋白非协同性结合于FcRn上的不同位点(Andersen等(2006), Eur. J. Immunol 36，3044-3051;Chaudhury 等(2006), Biochemistry 45,4983-4990)。
人类血清白蛋白(HSA)已表征为585个氨基酸的多肽，其序列可见于 Peters,T. ,Jr. (1996)Al I about Albumin:Biohemistry, Genetics and Medical, Applications pplO,Academic Press, Inc. , Orlando(ISBN 0-12-552110-3)。白蛋白具有对FcRn的特征性pH-依赖性结合，其中它在酸性pH如pH 6. O结合，但在中性以上的pH如pH 7. 4不结合。
已发现HSA的血浆半寿期为大约19日(Peters, T.，Jr (1985) Adv. ProteinChem. 37, 161-245 ；Peters,Τ. , Jr. (1996)All about Albumin,Academic Press,Inc. , San Diego,CA. (page 245-246)) ；Benotti P, Blackburn GL:Crit Care Med(1979) 7:520-525)。一个天然存在的、具有取代D494N的点突变体，具有较低的血浆半寿期(Biochim Biophys Acta. 1991，1097:49-54)。该单个取代在此变体/突变体中生成 N-连接糖基化位点，该位点不存在于野生型(Wt)HSA中。不知道观察到的导致血浆半寿期的变化归因于在该位点的潜在糖基化还是氨基酸变化自身。
白蛋白是被视为具有长血浆半寿期的血浆蛋白，且因为该特性，已提出将其用于药物递送。已将白蛋白缀合于药学上有益的化合物(W00069902A)。因此，已发现所得的缀合物血衆半寿期一般显著长于有益化合物本身的血衆半寿期。
此外，已将白蛋白融合于治疗上有益的肽(W) 01/79271 A和TO03/59934 A)，这通常导致融合多肽具有所述治疗上有益的肽的活性和以及长血浆半寿期，其与所述治疗上有益的肽本身的血浆半寿期相比显著较长。
Otagiri 等(2009) ,Biol. Pharm, Bull. 32 (4)，527-534 公开了已知 77 个白蛋白变体，其中25个见于域III。已显示缺乏羧基端最后175个氨基酸的天然变体具有减少的半寿期(Andersen 等(2010), Clinical Biohemistry43, 367-372)。Iwao 等(2007)使用小鼠模型研究了天然存在的人白蛋白变体的半寿期，并发现K541E和K560E具有减少的半寿期，E501K和E570K具有增加的半寿期，而K573E对半寿期几乎无作用(Iwao等(2007)B.B. A. Proteins andProteomics 1774,1582-1590)。
Galliano 等(1993)Biochim. Biophys. Acta 1225，27-32 公开了天然变体 E505K。 Minchiotti 等(1990)公开了天然变体 K536E。Minchiotti 等(1987)Biochim. Biophys. Acta 916，411-418 公开了天然变体 K574N。Takahashi 等(1987)Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84,4413-4417 公开了天然变体 D550G。Carlson 等(1992). Proc. Nat. Acad. Sci. USA 89，8225-8229 公开了天然变体 D550A。
WO 2007112940公开了包含至少一个白蛋白域III和至少一个治疗模块的构建体，和此类构建体在药物半寿期延长中的用途。
白蛋白具有允许多种配体结合的固有能力，这些配体与白蛋白相缔合(缔合物)。 已利用该特性以延长此类前述配体的血浆半寿期，例如延长具有非共价结合于白蛋白的能力的药物的血浆半寿期。这亦可通过将几乎不具或不具白蛋白结合特性的药学上有益的化合物与具有白蛋白结合特性的模块相结合来实现。参见综述文献Kratz (2008). Journal of Controlled Release 132，171-183 及其中的参考文献。
US7，253，259公开了通过基因重组技术产生的蛋白，其包括至少一个选自血清白蛋白的域Ι、π和III的域，但与天然白蛋白具有不同结构；以及公开了产生该蛋白的方法。
白蛋白用于制备药学上有益的化合物，其中此种制备物可例如但不限于白蛋白的纳米颗粒或微米颗粒。在这些实例中，药学上有益的化合物或化合物的混合物的递送可受益于白蛋白对FcRn受体亲和力的改变，其中对于递送手段而言，已显示所述有益化合物与白蛋白相缔合。
影响形成的缀合物或融合多肽的血浆半寿期的延长的准确特性或相关性质尚不清楚(例如，但不限于I.even川Uurtzhals P 等 Biochem. J. 1995; 312:725-731)，但其似乎直接涉及其包含的白蛋白模块和选择的药学上有益的化合物/肽。会需要能够控制给定白蛋白域III衍生物，片段，或其变体，以及缀合物、融合物或缔合物的血浆半寿期，从而使得与所述缀合物/融合物的组分本身给出的血浆半寿期相比，可获得更长或更短的血浆半寿期。这会允许根据旨在治疗的适应症的详情定制设计特定药物。
已知白蛋白在肿瘤中蓄积并发生分解代谢，亦显示其在类风湿性关节炎患者的发炎的关节中蓄积。参见 Kratz (2008) Journal of Controlled Release 132，171-183 的综述文献和其中的参考文献。预计对于FcRn亲和力增加的HSA变体对于药学上有益的化合物的递送和/或靶向(如被动靶向)会是有利的。
可期望获得对FcRn几乎无或无结合的白蛋白变体，以供提供较短的半寿期或受控的血清药代动力学，如Vania Kenanova,Tove Olafsen,Felix Bergara和Anna Wu(2009)J. Nucl. Med. ; 50 (Supplement 2) : 1582)所述。发明内容
本发明的第一方面提供了白蛋白衍生物或变体，其片段，或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述白蛋白衍生物或变体或其片段包含或由如下组成白蛋白域III或衍生物或其变体，以及至少一个其它白蛋白域，片段或衍生物或其变体。优选地，第一方面并不包括野生型白蛋白自身。然而，所述第一方面可包括经修饰的野生型白蛋白，其修饰使其包含或由如下组成野生型白蛋白和改变，如添加一个或多个(几个)来自任何白蛋白的域，一个或多个(几个) 点突变，融合于有益模块，缀合于有益模块和/或与有益模块缔合。
在一个优选实施方案中，所述白蛋白衍生物或变体，其片段，或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽在对应于 SEQ ID N0:31或SEQ ID NOil(HSA)中选自下组的一个或多个(几个)位置的位置的位置中包含一个或多个(几个)取代、插入或缺失，最优选取代417，440，464，490，492，493，494， 495，496，499，500，501，503，504，505，506，510，535，536，537，538，540，541，542，550，573， 574，575，577，578，579，580，581，582和584，或由在所述位置取代、插入或缺失(最优选取代)一个或多个(几个)氨基酸的序列组成。
在第二个方面，本发明涉及分离的多核苷酸，其编码任何本发明的衍生物或变体， 例如(i)核酸，其编码白蛋白衍生物，其片段，或者包含所述白蛋白衍生物或其片段或由所述白蛋白衍生物或其片段组成的融合多肽，(ii)包含所述核酸的质粒，和(iii)包含所述质粒的宿主细胞。
根据本发明，包含白蛋白衍生物或变体，或其片段，以及至少一种治疗或诊断模块的缀合物，形成本发明的第三个方面。
本发明的第四个方面提供了融合多肽，其包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段以及至少一种治疗性蛋白或肽或者由所述物质组成。本发明的第五个方面涉及白蛋白的衍生物或变体或其片段与另一种化合物的“缔合物”，该化合物与衍生的白蛋白、变体白蛋白或其片段通过非共价结合而结合或缀合。
本发明的第六个方面涉及组合物，优选药物组合物，其包含或由如下组成与治疗性、药物性或其它有益多肽缀合、融合或缔合的白蛋白衍生物，片段，其变体，或者融合多肽 (所述融合多肽包含所述白蛋白衍生物、片段、其变体或由所述白蛋白衍生物、片段、其变体组成)。
本发明的第七个方面涉及产生所述衍生物或变体的方法。
本发明的第八个方面涉及所述衍生物和/或变体在显影中的用途，例如缀合物、 缔合物或融合多肽在动物或人类显影目的中的用途。
本发明的第九个方面涉及治疗方法和/或本发明的多肽序列或核苷酸序列在治疗方法中的用途。
第十个方面，本发明涉及组合物，其包含根据本发明的衍生的白蛋白，变体白蛋白，其缔合物或其片段，衍生的或变体白蛋白片段或其缔合物或者包含衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽。
附图简述
图I :A) shFcRn-GST 与野生型 HSA 和野生型 HSA 衍生物(2000-0. 9nM)在(A)pH6.O和(B)pH 7. 4的结合。ELISA值代表重复测量的平均值。
图2 :代表性感应谱(sensorgram),显示I μ M的野生型HSA和野生型HSA衍生物对固定化的 shFcRn-GSTC1400RU)在 pH 6. O 和 pH 7. 4 的结合。(A)DI-DII (B)DI-DIII, (C) DII-DIII，(D)DIII，(E)DIII-DIII 和(F)野生型 HSA。
图3 :将分别给出在55nM，166nM和500nM，和500nM和1500nM的最终样品浓度的野生型HSA和野生型HSA域构建体的系列稀释与shFcRn (50nM)预温育，并针对固定化的 HSA(^2600RU)进行注射。注射在25 °C以50 μ 1/min的流速在pH 6. O进行。
图4 :下述氨基酸序列的多重比对⑴全长成熟HSA(Hu_l_2_3)，(ii)白蛋白变体，其包含HSA的域I和域III(Hu_l_3)，(iii)白蛋白变体，其包含HSA的域II和域 III (Hu_2_3), (iv)全长恒河猴 / 称猴(Macaca mulatta)白蛋白(Mac_mul), (V)全长大鼠 (Rattus norvegicus)白蛋白(大鼠)和(vi)全长小鼠(Musmusculus)白蛋白(小鼠)。 位置500、550和573(相对于全长HSA)由箭头指示。在图4中，域1、11和III称作1、2和 3 (分别)。
图5:来自人、绵羊、小鼠、兔和山羊的成熟血清白蛋白和来自黑猩猩(“Chimp”)、 恒河猴/猕猴、仓鼠、豚鼠、大鼠、牛、马、驴、犬、鸡和猪的不成熟白蛋白的氨基酸序列的多重比对。域1、2和3的起始和终止氨基酸(如Dockal等，(The Journal of Biological C hemistry, 1999, Vol. 274(41) :29303-29310))所定义)针对成熟人血清白蛋白标出。
图6 :质粒pDB2305的概略图。
图7 :总结体内生成表达质粒的概略图。A.使用PCR生成两个PCR片段。片段I和 2与Acc65I/BamHI消化的pDB3936在其5’和3’端分别分享247个碱基对(bp)和217bp的同源性。片段I和2分别在其3’和5’端彼此分享27-30bp的同源性。B.将纯化的PCR片段与Acc65I/BamHI消化的pDB3936 —同用于共转化酿酒酵母(S. cerevisiae)BXP10cir°o X=前导序列。Y=白蛋白DI+DII。Z=白蛋白DIII。十字代表体内重组。
图8 :代表性感应谱，其显示10 μ M的HSA域III及其变体对固定化的 shFcRn-HIS ( 2100RU)在 pH 5. 5 的结合。图 8A :DIII 野生型和 DIII K573D，图 8B :DIII 野生型和 DIII K573H，图 8C :DIII 野生型和 DIII K573N，图 8D :DIII 野生型和 DIII K573W, 图 8E =DIII 和 DIII Q580K。
图9 :白蛋白和衍生物及其变体(一些缀合于HRP)的非还原性SDS-PAGE分析⑴ 标记(SeeBlue ), (2)HRP 标样，(3) DI+DIII+DIII :HRP (I μ g), (4)白蛋白标样(lug), (5) DI+DIII-HRP(I μ g), (6)DI+DIII K500A-HRP(I μ g)，(7)DI+DIII K573P-HRP(I μ g)，(8) DI+DIII K573Y-HRP(1μ g)，(9)DI+DIIID550N-HRP(I μ g)，(10)DIII+DI-HRP(I μ g)，(11) HRP和白蛋白标样的混合物(各I μ g)，(12) HRP+和白蛋白标样的混合物(各2 μ g)。


图10，代表性感应谱，其显示10 μ M缀合于HRP的HSA DI+III (及其变体)对固定化的 shFcRn-HISC1500RU)在 pH 5. 5 的结合。(1)DI+DIII K573P-HRP，(2)野生型 HSA，(3)DI+DIII 野生型-HRP 和(4)DI+DIII K500A-HRP。
图11:代表性感应谱，显示1(^] 融合于肥4 011+111和011+111 K573P的N端的IL-Ira对固定化的shFcRn-HIS C2100RU)在pH 5. 5的结合。
图12 :代表性感应谱，显示10 μ M DIII、融合的DIII和融合的DIII Κ573Ρ的HSA 串联重复对scFvri500RU)在pH 5. 5的结合。
图13 :代表性感应谱，显示10 μ M DIII、融合的DIII和融合的DIII D550N的HSA 串联重复对scFvri500RU)在pH 5. 5的结合。
图14 :代表性感应谱，显示10 μ M DIII、融合的DIII和融合的DIII Κ573Ρ的HSA 串联重复对IL-Ira( 1500冊)在pH 5. 5的结合。
图15 :代表性感应谱，显示10 μ M DIII、融合的DIII和融合的DIII D550N的HSA 串联重复对IL-Ira( 1500冊)在pH 5. 5的结合。
图16 :用UV光㈧和商业性蛋白质染料⑶显现融合于荧光素的DI+DIII变体蛋白。白蛋白和衍生物及其变体(一些缀合于F5M)的非还原性SDS-PAGE分析(1) 标记(SeeBlue ) (10 μ L)，(2)HSA_F5M 对照(I μ g)，(3)标记(See Blue ) (10 μ L), (4) DI+DII I+DIII-F5M (I μ g)，(5) DI+DII I 野生型 _F5M(1 μ g)，(6)DI+DIIIK500A_F5M(1 μ g)， (7)DI+DIII K573P-F5M(1μ g)，(8)DI+DIII K573Y-F5M (I μ g)，(9)DI+DIII D550N-F5M(1 μ g)，(10)DIII+DI_F5M(1 μ g), (11)标记(SeeBlue ) (10 μ L)。
图17 :代表性感应谱，显示 1(^] 野生型肥4，HSA DI+DIII K573P-F5M，HSA DI+DIII K500A-F5M 对固定化的 shFcRn-HIS ( 1500冊)在 ρΗ5· 5 的结合。
图18 :代表性感应谱，显示 10 μ M 野生型 HSA，HSA DI+DIII+DIII-F5M, HSA DI+DIII-F5M 对固定化的 shFcRn-HIS C1500RU)在 ρΗ5· 5 的结合。
发明详述
本发明的第一方面涉及白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述白蛋白衍生物或变体或其片段包含或由如下组成第一白蛋白域III，片段或衍生物或其变体，以及至少一个第二白蛋白域，片段或衍生物或其变体。优选地，所述衍生物或变体并非天然存在的衍生物或变体如来自如下之一的野生型白蛋白人；灵长类如黑猩猩、大猩猩或恒河猴/ 猕猴；兔；啮齿类如小鼠、大鼠和仓鼠；牛；马类如马或驴；山羊；绵羊；犬；豚鼠；鸡和猪。所述第一方面可以或可以不包括白蛋白衍生物或变体，其包含或由如下组成野生型白蛋白的域I、II和III (或其片段)，以及来自任何白蛋白如来自人或本文中公开的其它物种的白蛋白的一个或多个(几个)其它域(或其片段)。
根据本发明第一方面的一些白蛋白衍生物或变体，其片段或融合多肽并不包含白蛋白的域I (或其片段)。根据本发明第一方面的一些白蛋白衍生物或变体，其片段或融合多肽并不包含白蛋白的域II (或其片段)。根据本发明第一方面的其它白蛋白衍生物或变体，其片段或融合多肽包含白蛋白的域III以及白蛋白的域1(或其片段)或域11(或其片段)之一或两者。
本发明基于下述发现包含第一白蛋白域III和至少一种第二白蛋白域的多肽， 片段或衍生物或其变体，与对应的域III自身相比具有对FcRn更强的结合。这根据现有技术特别是WO 2007112940是令人意想不到的，在该文中似乎域III的氨基酸残基涉及白蛋白与FcRn受体的相互作用，其涉及延长循环中例如血浆中的白蛋白的半寿期。已知域III 负责白蛋白与FcRn的结合。根据本发明，术语“白蛋白”意指与HSA具有相同和/或非常相似三维结构，并具有长血浆半寿期的蛋白质。如SEQ ID Ν0:31或SEQ ID Ν0:1中公开的HSA或其任何天然存在的等位基因，是根据本发明的优选白蛋白。本领域技术人员亦会了解 HSA域III衍生物，片段，其变体的所述的特征对于其它依照所述的本发明的非人白蛋白亦会是可能的。
因此根据本发明的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽与白蛋白类似，具有长血浆半寿期的益处。
本发明的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽的大小可根据片段的大小，域的数量，融合多肽的非白蛋白部分的大小等而变化。原则上，其大小可在略微大于域III的大小及其之上变动，但实践中优选其大小大约为天然白蛋白的大小。不愿拘于任何理论，认为大于肾阈值的大小，如天然白蛋白的大小，对于高血浆半寿期是理想的。因此，优选本发明的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，和/或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的缀合物具有40-80kDa范围，优选50-70kDa的范围，更优选55-65kDa的范围，和最优选大约60kDa的大小。
HSA是根据本发明优选的白蛋白，并为组成为585个氨基酸残基并具有67kDa的分子量的蛋白质。在其天然形式其不受糖基化。HSA的氨基酸序列示于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I。本领域技术人员会了解可存在天然等位基因，其基本上具有与HSA相同的性质， 但与SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I相比具有一个或多个(几个)氨基酸改变，且本发明人亦涵盖了使用此类天然等位基因作为根据本发明的亲本白蛋白。
白蛋白一般具有大约20日或更长的长血浆半寿期，例如HSA具有19日的血浆半寿期。已知HSA的长血浆半寿期是通过与其受体FcRn的相互作用介导的，然而，对HSA的长血浆半寿期之后的准确机理的理解或认识对于本发明不是必需的。
根据本发明，术语“白蛋白”意指与HSA具有相同或非常类似的三维结构，并具有长血浆半寿期的蛋白质。根据本发明的白蛋白蛋白质的实例可提出人血清白蛋白(例如 AAA98797 或 P02768-1，SEQ ID NO:31 或 SEQ ID 勵1(成熟)，SEQ ID N0:4(不成熟))， 灵长类血清白蛋白(如黑猩猩血清白蛋白(例如预测的序列XP_517233. 2 SEQ ID NO:5), 大猩猩血清白蛋白或恒河猴/猕猴血清白蛋白(例如NP_001182578，SEQ ID N0:6)，啮齿类血清白蛋白(如仓鼠血清白蛋白(例如A6YF56，SEQ ID NO: 7)，豚鼠血清白蛋白(例如 Q6WDN9-1, SEQ ID N0:8)，小鼠血清白蛋白(例如 AAH49971 或 P07724-1 Version 3，SEQ ID NO:9)和大鼠血清白蛋白(例如 AAH85359 或 P02770-1 Version 2，SEQ ID NO: 10)))， 牛血清白蛋白(例如奶牛(COW)血清白蛋白P02769-1，SEQ ID NO: 11)，马类血清白蛋白如马血清白蛋白(例如P35747-1，SEQ ID NO: 12)或驴血清白蛋白(例如Q5XLE4-1，SEQ ID NO: 13)，兔血清白蛋白(例如P49065-1 Version 2，SEQ ID NO: 14)，山羊血清白蛋白(例如 ACF10391，SEQ ID NO: 15)，绵羊血清白蛋白(例如 P14639-1，SEQ ID NO: 16)，狗血清白蛋白(例如 P49822-1，SEQ ID NO: 17)，鸡血清白蛋白(例如 P19121-1 Version 2, SEQ ID NO: 18)和猪血清白蛋白(例如 P08835-1 Version2,SEQ ID NO: 19)。HSA，如 SEQ ID N0:31 或SEQ ID N0:1中所公开的，或其任何天然存在的等位基因，是根据本发明的优选的白蛋白。
根据本发明，亲本白蛋白，其片段，或包含白蛋白或其片段或由白蛋白或其片段组成的融合多肽的白蛋白部分，一般与SEQ ID NO:31或SEQ ID NO: I所示的HSA序列具有至少60%，优选至少70%，优选至少80%，优选至少85%，优选至少86%，优选至少87%，优选至少88%，优选至少89%，优选至少90%，优选至少91%，优选至少92%，优选至少93%，优选至少 94%，优选至少95%，更优选至少96%，更优选至少97%，更优选至少98%和最优选至少99%的序列同一性。
所述亲本优选包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的氨基酸序列的至少一部分或由其组成。在另一个实施方案中，所述亲本包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的至少一部分或由其组成。
在另一个实施方案中，所述亲本是SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的至少一部分的等位衍生物或变体。
术语“分离的衍生物”或“分离的变体”意指经人力修饰的衍生物或变体。在一个实施方案中，如通过SDS-PAGE或GP-HPLC确定的，该衍生物或变体为至少1%纯的，例如至少5%纯的，至少10%纯的，至少20%纯的，至少40%纯的，至少60%纯的，至少80%纯的，和至少90%纯的。
术语“基本上纯的衍生物”或“基本上纯的变体”意指一种制备物，其包含以重量计至多10%，至多8%，至多6%，至多5%，至多4%，至多3%，至多2%，至多I %，和至多O. 5%的与其天然或重组结合的其他多肽物质。优选地，所述衍生物或变体以存在于该制备物中的总多肽物质重量计是至少92%纯的，例如至少94%纯的，至少95%纯的，至少96%纯的，至少 97%纯的，至少98%纯的，至少99%纯的，至少99. 5%纯的，和100%纯的。本发明的衍生物或变体优选为基本上纯的形式。其可通过，例如，以公知的重组方法或经典的纯化方法制备该变体而达成。
术语“成熟多肽”意指经翻译和任何翻译后修饰，如N末端加工、C末端截短、糖基化、磷酸化等之后的最终形式的多肽。在一个实施方案中，所述成熟多肽是氨基酸I至585。
术语“成熟多肽编码序列”意指编码成熟多肽的多核苷酸。在一个方面，所述成熟多肽编码序列是SEQ ID NO:2的核苷酸I至1758。
术语“FcRn”意指人新生儿Fe受体(FcRn)。‘shFcRn’是FcRn的可溶性重组形式。 术语smFcRn是小鼠新生Fe受体的可溶性重组形式。
根据本发明，术语“白蛋白衍生物，其片段或包含所述白蛋白衍生物或其片段或由所述白蛋白衍生物或其片段组成的融合多肽”意指非天然的，经工程改造的分子，其包含指定的白蛋白域或由指定的白蛋白域组成。因此，该术语并不包括天然的全长白蛋白或包含全长白蛋白的融合多肽。术语“衍生物”包括在一个或多个(几个)位置包含一个或多个改变，例如取代、插入和/或缺失的白蛋白多肽。取代意指用不同氨基酸替代占据某位置的氨基酸；缺失意指去除占据某位置的氨基酸；而插入意指紧接着占据某位置的氨基酸添加 1，2或3个，或更多个氨基酸，插入可为在氨基酸的C侧或N侧，但通常是在氨基酸的C侦U。
术语“变体”包括白蛋白或白蛋白衍生物或其融合蛋白，其中所述白蛋白衍生物或融合物通过化学手段而改变，所述手段如多肽的翻译后衍生化或修饰，例如PEG化和/或将所需的模块(如治疗性模块)缀合于巯基基团，如由未配对的半胱氨酸提供的巯基基团。术语“变体”亦包括根据本发明的白蛋白衍生物的融合蛋白，其中所述衍生物并未通过化学手段改变。
术语“衍生物”和“变体”可以或可以不互换使用。
白蛋白为蛋白质，并构成哺乳动物血浆中最丰富的蛋白质，且来自大量和多样哺乳动物的白蛋白已经通过生化方法和/或序列信息表征。几种白蛋白，例如HSA，亦已通过晶体学方法表征，并确定了其结构，且已显示白蛋白组成为三个不同的域，称为域I、域II 和域III。
本发明的域可原则上来源于任何白蛋白，然而优选所述域来源于人血清白蛋白， 灵长类血清白蛋白如黑猩猩血清白蛋白、大猩猩血清白蛋白或恒河猴/猕猴血清白蛋白， 啮齿类血清白蛋白如兔血清白蛋白、小鼠白蛋白和大鼠血清白蛋白，牛血清白蛋白，马血清白蛋白，驴血清白蛋白，仓鼠血清白蛋白，山羊血清白蛋白，绵羊血清白蛋白，犬血清白蛋白，膝鼠血清白蛋白，鸡血清白蛋白和猪血清白蛋白。
根据本发明特别优选的白蛋白是具有SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I中所示序列的 HSA，且本发明优选的白蛋白域是HSA域I，其组成为SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的氨基酸残基I至194± I至15个氨基酸；HSA域II，其组成为SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的氨基酸残基192至387± I至15个氨基酸；和HSA域III，其组成为SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的氨基酸残基381至585± I至15个氨基酸，或这些域的一个或多个(几个)的组合， 例如域I和2，域2和3，或域I和3融合在一起。对于白蛋白域的准确边界并无广泛接受的惯例，且对于每个域，上述提及的范围的重叠以及在域的N端和/或C端允许加减1，2，3，4， 5，6，7，8，9，10，11，12，13，14或15个氨基酸，优选I至15个氨基酸，更优选I至10个氨基酸，最优选I至5个氨基酸的变化长度，允许长度上的总变化高至30个氨基酸，优选高至20 个氨基酸，更优选高至10个氨基酸，反映了这个事实，且对于在域之间边界上的氨基酸残基属于一个或另一个域可能有一些歧异的观点。出于相同理由，可能可以发现与上述数值不同的对白蛋白域的氨基酸残基的提及，然而，本领域技术人员会了解如何基于文献中的教导和上述教导鉴定白蛋白域。非人白蛋白的对应域可通过与HSA使用Needleman-Wunsch 算法(Needleman 和 Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48 443-453)的比对来鉴定，所述算法如 EMBOSS软件包(EMBOSS :欧洲分子生物学开放软件组(The European MolecularBiology Open Software Suite),Rice 等，2000,Trends Genet. 16:276-277)的 Needle 程序，优选为3.O. O版或之后的版本中执行的。所用的可选参数为缺口开放罚分(gap open penalty) 10， 缺口延伸罚分(gap extension penalty) O. 5，和 EBL0SUM62 (BL0SUM62 的 EMBOSS 版)取代矩阵。亦可使用其它的比对工具，例如本文中所述的MUSCLE。
所述域亦可根据Dockal 或 Kjeldsen 来定义Dockal 等(The Journal ofBiological Chemistry, 1999, Vol. 274 (41) : 29303-29310)将 HSA 的域定义为:域 I :氨基酸I至197,域II :氨基酸189至385,域III :氨基酸381至585。Kjeldsen等(Protein Expression and Purification, 1998, Vol 13:163-169)将域定义为:域 I :氨基酸 I 至 192, 域II :氨基酸193至382，域III :氨基酸383至585。
因此，在本发明中，优选下述域定义氨基酸数对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I (HSA)中的那些。然而，使用这些数，本领域技术人员可鉴定出其它白蛋白序列中的对应域。
域I可以或可以不从氨基酸I起始,且可以或可以不在任何氨基酸192，193，194，195，196或197，优选任何氨基酸192，194或197终止。
域II可以或可以不从氨基酸189，190，191，192或193，优选任何氨基酸189，192 或193起始，且可以或可以不在任何氨基酸382，383，384，385，386或387，优选任何氨基酸 382,285(385)或 387 终止。
域III可以或可以不从氨基酸381，382或383，优选氨基酸381或383起始，且可以或可以不在氨基酸585终止。
非人白蛋白中的域可具有与HSA相同或不同的氨基酸长度和/或残基数量。举例而言，可使用HSA和一个或多个(几个)其它白蛋白，片段，衍生物，变体和/或融合物准备多重比对或逐对比对以供鉴定对应于HSA的域1、2和/或3的域。合适的比对的实例在图 5中给出。图5使用MUSCLE和Boxshade以对图4所述相同的方式构建。为清楚起见，提供了 HSA、绵羊、小鼠、兔和山羊白蛋白的成熟序列(即在前导序列和原(肽)序列之后的第一个氨基酸开始编号)，而任何其它提供的白蛋白序列是不成熟序列(即包括前导序列，原肽序列(若存在)和成熟白蛋白序列)。对于人，绵羊，兔，和小鼠白蛋白的域坐标的实例在实施例中给出。可将这些坐标应用于本发明的任何方面。对于所有白蛋白的域坐标可从合适的比对,如图5，通过鉴定对应于一个或多个(几个)HSA的域坐标(如本文中所公开)的氨基酸而鉴定或外推出。通常域坐标使用成熟白蛋白的第一个氨基酸作为位置I来命名，因此前导序列和/或原肽的氨基酸序列通常在此情况下忽略。
第一白蛋白域III，片段或衍生物或其变体，可原则上为任何白蛋白域III，然而优选HSA域III (例如SEQ ID NO: 23)，片段或衍生物或其变体。
在整个说明书中，包含域I和域II的分子可称作‘DI-DII’或称作‘DI+DII’或称作‘D1+D2’或称作D1-D2’。类似地，包含域I和域III的分子可称作任何的‘DI-DIII’或称作‘DI+DIII’或称作‘D1+D3’或称作D1-D3’。因此，包含域II和域III的分子可称作 ‘DII-DIII’或称作‘DII+DIII’或称作‘D2+D3’或称作 D2-D3’。此外，如“HSA 1/2-RSA 3” 的命名意指该分子包含HSA域1，HSA域2和RSA域3，其与HSA域I，HSA域II和RSA域 III相同。
对于白蛋白域，术语“衍生物”意指多肽与所述白蛋白域在其天然形式(下文中称作亲本域)具有类似的一级和/或三级结构，但与所述亲本域在一个或多个(几个)位置相差一个或多个(几个)氨基酸残基的一个或多个(几个)取代、插入和/或缺失。所述衍生物可通过人为介入修饰编码亲本域的核酸序列并在合适的宿主生物中使用本领域已知技术表达经修饰的核酸序列来获得。
术语“片段”意指从白蛋白的氨基和/或羧基端和/或白蛋白的内部区缺失一个或多个(几个)氨基酸、保留结合于FcRn的活性的多肽。片段可包含或组成为一个不中断的来源于HSA的序列，或其可包含或组成为两个或更多个来源于HSA的序列。根据本发明的片段具有至少或多于大约20个氨基酸残基，优选至少或多于30个氨基酸残基，更优选至少或多于40个氨基酸残基，更优选至少或多于50个氨基酸残基，更优选至少或多于75个氨基酸残基，更优选至少或多于100个氨基酸残基，更优选至少或多于200个氨基酸残基， 更优选至少或多于300个氨基酸残基，甚至更优选至少或多于400个氨基酸残基且最优选至少或多于500个氨基酸残基的大小。
对于本发明的第一白蛋白域III，术语“片段”意指具体相关白蛋白域的保留了结合FcRn的能力的部分。片段可组成为一个不中断的来源于亲本域的序列，或可包含或组成为两个或更多个来源于亲本域的序列。根据本发明的片段具有至少或多于大约20个氨基酸残基，优选至少或多于30个氨基酸残基，更优选至少或多于40个氨基酸残基，更优选至少或多于50个氨基酸残基，更优选至少或多于75个氨基酸残基，且最优选至少或多于100 个氨基酸残基的大小。
所述至少一种第二白蛋白域，片段或衍生物或其变体可原则上为任何白蛋白域， 片段或衍生物或其变体。
对于本发明的第二白蛋白域，术语“变体”意指具体相关白蛋白域的一部分。片段可组成为一个不中断的来源于亲本域的序列，或可包含或组成为两个或更多个来源于亲本域的序列。根据本发明的片段具有至少或多于大约20个氨基酸残基，优选至少或多于30 个氨基酸残基，更优选至少或多于40个氨基酸残基，更优选至少或多于50个氨基酸残基， 更优选至少或多于75个氨基酸残基，且最优选至少或多于100个氨基酸残基的大小。
所述第一白蛋白域III，片段或衍生物或其变体，以及所述至少一个第二白蛋白域，片段或衍生物或其变体，可来源于相同物种，或其可来源于不同物种。举例而言，所述第一白蛋白域III，片段或衍生物或其变体可为HSA域III，而所述至少一个第二白蛋白域，片段或衍生物或其变体为小鼠血清白蛋白域II，或所述第一白蛋白域III，片段或衍生物或其变体可为兔血清白蛋白域III而所述至少一个第二白蛋白域，片段或衍生物或其变体为人血清白蛋白域I。
所述白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽包含或组成为至少两个白蛋白域或其片段，且其可包含或组成为多于两个域。原则上对于可组合于根据本发明的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽的白蛋白域或其片段的数量并无上限，然而，优选根据本发明的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽包含或组成为2或3个白蛋白域，最优选2个域。
作为根据本发明优选的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽的实例可提出白蛋白域I+白蛋白域III (例如SEQ ID N0:22)，白蛋白域11+白蛋白域III (例如SEQ ID N0:21)，白蛋白域III+白蛋白域III (例如SEQ IDN0:24)，白蛋白域III+白蛋白域I以及白蛋白域III+白蛋白域II。
优选的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，包含或组成为来源于一个物种的白蛋白域III以及来源于不同物种的白蛋白域I和II。实例包括白蛋白衍生物，其组成为来源于人血清白蛋白的域I和II以及来源于兔血清白蛋白的域III (例如SEQ ID NO:25)，衍生物，其组成为来源于兔血清白蛋白的域I和II以及来源于人血清白蛋白的域III (例如 SEQ ID N0:26)，衍生物，其组成为来源于绵羊血清白蛋白的域I和II以及来源于人血清白蛋白的域ΠΙ(例如SEQ ID Ν0:27)，以及衍生物，其组成为来源于人血清白蛋白的域I和域II以及来源于小鼠血清白蛋白的域III (例如SEQ ID Ν0:29)。这些组合物与衍生物的域 III衍生自的完整白蛋白相比，具有令人惊讶地不同的对FcRn的结合性质。
组成为来源于人血清白蛋白的域I和II以及来源于兔血清白蛋白的域III (例如 SEQ ID NO: 25)的衍生物，组成为来源于绵羊血清白蛋白的域I和II以及来源于人血清白蛋白的域III (例如SEQ ID NO:27)的衍生物，以及组成为来源于人血清白蛋白的域I和II 以及来源于小鼠血清白蛋白的域III (例如SEQ ID N0:29)的衍生物与人血清白蛋白相比具有更强的对FcRn的结合。组成为来自兔血清白蛋白的域I和II以及来自人血清白蛋白的域III (例如SEQID NO:26)的衍生物与HSA相比具有更弱的对FcRn的结合。亦考虑了衍生物的变体并包含于本发明。
在一个实施方案中白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽中的一个或多个(几个) 白蛋白域III在对应于HSA中选自下组一个或多个(几个)的位置的一个或多个位置中包含一个或多个(几个)改变如取代，缺失或插入417，440，464，490，492，493，494，495， 496，499，500，501，503，504，505，506，510，535，536，537，538，540，541，542，550，573，574， 575，577，578，579，580，581，582和584，或由在所述位置改变如取代、缺失或插入一个或多个(几个)氨基酸的序列组成。本发明人发现这些氨基酸残基对于血清白蛋白与FcRn受体的相互作用是重要的，且在这些位置的一个或多个的改变会改变根据本发明的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽对于FcRn受体的结合，并由此改变其血浆半寿期。在一个或多个(几个)位置的改变可独立地选自取代、插入和缺失。优选取代。
根据本发明，所述衍生的或变体白蛋白，其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽的白蛋白部分通常具有域III，其与HSA域III的序列(如本文中关于SEQ IDN0:31或SEQ ID N0:1定义的)具有至少60%，优选至少70%，优选至少80%，优选至少81%，82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%或 89%，优选至少90%，更优选至少95%，更优选至少96%，更优选至少97%，更优选至少98%和最优选至少99%的氨基酸序列同一性。甚至更优选地，根据本发明，所述衍生的或变体白蛋白，其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽的白蛋白部分通常具有域III，其与白蛋白如任何SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I 的氨基酸 381 至 585，或SEQ ID NO: 4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16，17，18 或19,SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I (人血清白蛋白)的一个或多个(几个)中的等同位置， 具有至少60%，优选至少70%，优选至少80%，优选至少81%，82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88% 或89%，优选至少90%，更优选至少95%，更优选至少96%，更优选至少97%，更优选至少98%和最优选至少99%的氨基酸序列同一'丨生。
在一个进一步的实施方案中，根据本发明，所述白蛋白的衍生物或变体，其片段或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽具有的血浆半寿期与亲本白蛋白其片段或包含所述亲本白蛋白或其片段或由所述亲本白蛋白或其片段组成的融合多肽的血浆半寿期相比更长。根据该实施方案的实例包括白蛋白的衍生物或变体，其片段或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽，它们包含或由如下组成在对应于HSA中下组的一个或多个(几个)位置中的一个或多个(几个)取代E492，N503, D550和K573。优选对应于HSA中E492的位置的氨基酸在用G残基取代，在对应于在HSA中的N503的位置的氨基酸用H或K残基取代，在对应于的位置的氨基酸D550在HSA中用取代E残基，而在对应于在HSA中的K573的位置的氨基酸用A或P残基取代。同样优选的是衍生物或变体，其中对应于在HSA中的E492的氨基酸用G残基取代，而对应于在HSA中的K573的氨基酸用A 或P残基取代。其它优选的衍生物或变体具有多个取代，分别对应于在HSA中的E492用H 残基，在HSA中的E501用P，在HSA中的N503用H，在HSA中的E505用D，在HSA中的T506 用S，在HSA中的T540用S，在HSA中的K541用E取代。
在一个进一步的实施方案中，根据本发明，白蛋白的衍生物或变体，其片段或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽具有的血浆半寿期与亲本白蛋白其片段或包含所述亲本白蛋白或其片段或由所述亲本白蛋白或其片段组成的融合多肽的血浆半寿期相比更短。根据该实施方案的实例包括白蛋白的衍生物或变体，其片段或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽，它们在对应于HSA中下组的一个或多个(几个)位置中包含取代Q417, H440, H464, D494, E495, T496, P499, K500, E501, H510, H535, K536, P537, K538，K541，D550N, D494+T496 或 E492+V493。优选的取代包括对应于在 HSA 中 Q417A，H440A, H464Q, D494E+Q417H, D494N, Q, A, E495Q, A, T496A, D494N+T496A 或，P499A, K500A E501A, E501Q, H510Q, H535Q, K536A, P537A, K538A, K541G, K541A K541D 或 D550N 的取代。
除了在对应于下组位置的一个或多个(几个)位置中的一个或多个(几个)取代、 插入或缺失(其中优选取代)之外SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的417，440，464，490， 492，493，494，495，496，499，500，501，503，504，505，506，510，535，536，537，538，540，541， 542，550，573，574，575，577，578，579，580，581，582 和 584，根据本发明的衍生的或变体白蛋白，其片段或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽可在分子的其它位置包含其它取代、缺失或插入。此类其它的取代、缺失或插入可用于改变分子的其它性质，如但不限于改变的糖基化；导入表面的反应性基团如巯基基团，去除/生成氨甲酰化位点等等。
可加以改变以在表面上提供反应性残基并可有利地应用于本发明的残基已在未公开的专利申请EP 2009 152 625 (通过提述并入本文)中披露。特别优选的残基包括对应于HSA中在与FcRn相互作用的区之外的位置的位置。
作为可在SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中或在其它白蛋白中的相应位置(如SEQ ID NO:4至19中)进行以在表面上提供反应性巯基基团的改变的实例包括L585C，DlC, A2C, D562C, A364C, A504C, E505C, T79C, E86C, D129C, D549C, A581C, D121C, E82C, S270C, A578C,L595LC,D1DC,A2AC,D562DC,A364AC,A504AC,E505EC,T79TC,E86EC,D129DC, D549DC, A581AC, A581AC, D121DC, E82EC, S270SC, A579AC,C360*，C316*，C75*，C168*，C558*，C361*， C91*，C124*，C169*和C567*。或者，可将半胱氨酸残基添加至白蛋白的N端或C端区。
在一个实施方案中，在本发明的衍生物或变体中的改变的数量为I至20个氨基酸，例如I至10和I至5，如1，2，3，4，5，6，7，8，9或10个改变。
所述衍生的或变体白蛋白，其片段或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽与亲本白蛋白域，其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白域或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白域或其片段组成的融合多肽相比具有改变的血浆半寿期。
在一个特别优选的实施方案中，亲本白蛋白域来自HSA，而衍生的或变体白蛋白， 其片段或包含所述衍生的或变体白蛋白域或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白域或其片段组成的融合多肽与HSA域，对应片段或包含HSA域或其片段或由HSA域或其片段组成的融合多肽相比具有改变的血浆半寿期。
一种确定衍生的或变体白蛋白对FcRn的亲和力与亲本白蛋白相比是更高或是更低的方法是使用如下文中所述的表面等离子共振测定法(SurfacePlasmon Resonance, SPR)。本领域技术人员会理解其它方法可用于确定衍生的或变体白蛋白对FcRn的亲和力与亲本白蛋白对FcRn的亲和力相比是更高或是更低，例如，确定并比较结合常数KD。因此， 根据本发明，具有与天然HSA的KD相比较低KD的衍生的或变体白蛋白视为与HSA相比具有更高血浆半寿期，而具有与天然HSA的KD相比较高KD的变体白蛋白视为与HSA相比具有更低血浆半寿期。
所述白蛋白的衍生物或变体或其片段或包含白蛋白或其片段或由白蛋白或其片段组成的融合多肽包含或由如下组成在对应于HSA (SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I)中选自下组的位置的一个或多个(几个)位置的一个或多个(几个)改变，如取代，缺失或插入 417，440，464，490，492，493，494，495，496，499，500，501，503，504，505，506，510，535，536， 537，538，540，541，542，550，573，574，575，577，578，579，580，581,582 和 584。所述取代可为任何取代，其中在天然白蛋白序列中的氨基酸用选自剩余19中天然存在的氨基酸的不同氨基酸取代。为了避免疑问，本领域技术人员可使用本文中使用的命名法鉴定在HSA的域中或在另一个白蛋白的白蛋白、域或片段中的位置。
在一个实施方案中，衍生物或变体在对应于SEQ IDN0:31或SEQ ID NO: I中的位置 417，440，464，490，492，493，494，495，496，499，500，501，503，504，505，506，510，535，536， 537，538，540，541，542，550，573，574，575，577，578，579，580，581,582 和 584 的一个或多个 (几个)位置包含改变。在另一个实施方案中，衍生物或变体在对应于SEQ ID N0:31或 SEQ ID NO: I 中下述任何的两个位置包含改变417，440，464，490，492，493，494，495，496， 499，500，501，503，504，505，506，510，535，536，537，538，540，541，542，550，573，574，575， 577，578，579，580，581，582和584。在另一个实施方案中，衍生物或变体在对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中下述任何位置的三个位置包含改变417，440，464，490，492，493， 494，495，496，499，500，501，503，504，505，506，510，535，536，537，538，540，541，542，550， 573，574，575，577，578，579，580，581，582和584。在另一个实施方案中，衍生物或变体在对应于 SEQ ID NO: 31 或 SEQ ID NO: I 中位置 417，440，464，490，492，493，494，495，496，499， 500，501，503，504，505，506，510，535，536，537，538，540，541，542，550，573，574，575，577， 578，579，580，581，582和584的各个位置包含改变。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ IDN0:1的成熟多肽的取代Q417A，H。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代H440Q。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代H464Q。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代A490D。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代E492G，T, P, H。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代V493P，L。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的D494N，Q，A，E，P。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代E495Q，A。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代T496A。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ IDN0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代P499A。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的K500E，G，D，A，S，C，P， H，F，N，W，T，M，Y，V，Q，L，I，R。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID NO:31 或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代E501A，P，Q。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代N503K，D，H。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代A504E。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的包含取代E505K，D。 在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQID N0:1的成熟多肽的取代T506F，S。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I 的成熟多肽的取代H510Q。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或 SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代H535Q。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代K536A。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代P537A。在另一个实施方案中， 所述衍生物或变体包含SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代K538A，H。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 T540S。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代K541A，D，G，N，E。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31 或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代E542P，D。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代D550N。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代K573Y，W，P，H，F，V，I，T， N, S, G, M，C，A，E，Q，R，L，D。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或 SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代K574N。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ IDN0:1的成熟多肽的取代Q580K。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代L575F。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代A577T，E。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代 A578R, S0在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代S579C，T。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或 SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代Q580K。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代A581D。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代A582T。在另一个实施方案中， 所述衍生物或变体包含SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代G584A。
在一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置417的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置417的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 或 His 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 Q417A, H0
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置440的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置440的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 H440Qo
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置464的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置464的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代 H464Q0
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置490的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置490的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代A490G。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置492的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置492的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Gly 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的 E492G。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置493的位置包含改变。在另一个方面，在对应于位置493的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gin, Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Pro 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的V493P。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置494的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置494的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Asn, Gln 或 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代D494N，Q, A0
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置495的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置495的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Gln 或 Ala 取代。 在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代E495Q或A。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置496的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置496的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的T496A。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置499的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置499的位置的氨基酸用Ala, Arg, Asn, Asp, Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的 P499A。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置500的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置500的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 K500E, G, D, A, S，C，P, H, F，N, ff, Τ, M, Y, V, Q, L, I, R。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置501的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置501的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val 取代，优选用 Ala 或 Gln 取代以减少亲和力而用Pro取代以增加亲和力。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代E501A，Q，P。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置503的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置503的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Asp 或 Lys 或 His 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代N503D，K, H。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置504的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置504的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代A504。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置505的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置505的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID Ν0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的E505D。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置506的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置506的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的T506S，F。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置510的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置510的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Gln 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 H510Qo
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置535的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置535的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Gln 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代 H535Q0
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置536的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置536的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的代 K536A。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置537的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置537的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 P537A。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置538的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置538的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 K538H, A0
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置540的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置540的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代T540S。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置541的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置541的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Gly, Asp 或 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代K541G，D, A，N。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置542的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置542的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Asp 或 Pro 取代。 在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的 E542D，P。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置550的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置550的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val 取代，优选用 Asn 取代以减少亲和力，优选用Glu取代以增加亲和力。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置573的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置573的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu,27Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Tyr, Trp, Pro, His, Phe, Val, He, Thr, Asn, Ser, Gly, Met, Cys, Ala, Glu, Gin, Arg, Leu, Asp 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含取代SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的 K573Y, W, P, H, F，V, I, T, N, S，G, M, C，A, E, Q, R, L, D。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置574的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置574的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Asn 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 K574N。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置575的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置575的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Phe 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 L575F。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置577的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置577的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Thr 或 Glu 取代。 在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 A577TE。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置578的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置578的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Arg 或 Ser 取代。 在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 A578R, S。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置579的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置579的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Cys 或 Thr 取代。 在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 S579C，T。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置580的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置580的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Lys 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 Q580K。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置581的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置581的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Asp 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代 A581D。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置582的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置582的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Thr 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含TSEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽的取代 A582T。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应于位置584的位置包含改变。在另一个实施方案中，在对应于位置584的位置的氨基酸用Ala,Arg,Asn,Asp,Cys,Gin,Glu, Gly, His, He, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr,或 Val,优选用 Ala 取代。在另一个实施方案中，所述衍生物或变体包含SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1的成熟多肽的取代 G584A。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应中的位置494和496的位置包含改变，如上述那些。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应中的位置492和493的位置包含改变，如上述那些。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应中的位置494和417的位置包含改变，如上述那些。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应中的位置492和503的位置包含改变，如上述那些。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应中的位置492和573的位置包含改变，如上述那些。
在另一个实施方案中，所述衍生物或变体在对应中的位置492，503，和573的位置包含改变，如上述那些。
在一个实施方案中，根据本发明，所述衍生的或变体白蛋白或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽在对应于HSA中选自下组的位置的位置含有一个取代SEQ ID NO: 31 或 SEQ ID NO: I 中的 417，440，464，490，492，493，494，495，496，499， 500，501，503，504，505，506，510，535，536，537，538，540，541，542，550，573，574，575，577， 578，579，580，581，582和584，条件是所述衍生的或变体白蛋白并非由具有取代D494N, E501K, K541E, D550G, A, K573E 或 K574N 的 SEQ ID NO: 31 或 SEQ ID NO: I 组成的衍生物或变体。根据本发明，所述衍生的或变体白蛋白，其片段或包含衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽在对应于在HSA中的其它位置的一个或多个(几个)位置可包含其它取代、插入或缺失。
在另一个实施方案中，根据本发明，所述衍生的或变体白蛋白或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽在对应于HSA中选自下组的位置的位置含有两个，三个，四个，五个，六个，七个，Λ个，九个，十个，i^一个，十二个，十三个,十四个,十五个，十六个，十七个，十八个，十九个，二十个或甚至更多取代SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I 的 417，440，464，490，492，493，494，495，496，499，500，501，503，504，505，506，510，535， 536，537，538，540，541，542，550，573，574，575，577，578，579，580，581，582 和 584。根据本发明，所述衍生的或变体白蛋白或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽可在对应于HSA中其它位置的位置包SEQIDN0:31或 SEQIDNO: ISEQIDN0:31或 SEQIDNO: ISEQIDN0:31或 SEQIDNO: ISEQIDN0:31或 SEQIDNO: ISEQIDN0:31或 SEQIDNO: ISEQIDN0:31或 SEQIDNO: I含其它取代、插入或缺失。
在一个进一步的实施方案中，根据本发明，所述白蛋白的衍生物或变体或其片段， 或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽具有的血浆半寿期与亲本白蛋白，其片段或包含亲本白蛋白或其片段或由亲本白蛋白或其片段组成的融合多肽的血浆半寿期相比更长。根据该实施方案的实例包括白蛋白的衍生物或变体或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽，它们在对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1中的492， 503，542，550，573，574，580，581，582或584的位置包含取代。根据本发明的该实施方案， 优选的取代包括对应于SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I中492的位置的氨基酸用G残基取代，对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中503的位置的氨基酸用H或K残基取代，对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中的位置550的氨基酸用E残基取代，在对应于SEQ ID NO: 31 或 SEQ ID NO: I 中的位置 573 的氨基酸用 Y，W, P，H, F，V, I, T，N, S，G，M, C，A, E, Q, R, L 或D残基取代，在对应于SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I中的位置574的氨基酸残基用N残基取代，或对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中的位置580的氨基酸用K残基取代。其它优选的衍生物或变体在对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中的位置492具有用G残基的取代和在对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中的位置573具有用用A或P残基的取代。其它优选的衍生物或变体具有多个取代，其对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中的位置492及在SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I中位置503用H残基的取代。
其它优选的衍生物或变体具有在对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中的位置 492用G残基的取代和在对应于SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I中的位置503用H或K的取代和在对应于SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I中的位置573用A或P残基的取代。
在一个进一步的实施方案中，根据本发明，所述白蛋白的衍生物或变体或其片段， 或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段或由所述衍生的或变体白蛋白或其片段组成的融合多肽具有的血浆半寿期与亲本白蛋白，其片段或包含亲本白蛋白或其片段的融合多肽的血浆半寿期相比更短。根据该实施方案的实例包括白蛋白的衍生物或变体或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽，它们在对应于SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I 中的 417，440，494，495，496，499，500，501，536，537，538，541，494+496 或 492+493 的位置包含取代。优选的取代包括对应于SEQ ID N0:31或SEQID勵1中的0417八，H440Q， D494E+Q417H, D494N, Q, A, E495Q, A, T496A, D494N+T496A 或，P499A, K500A, E501A, E501Q, K536A, P537A, K538A, K541G, K541A K541D 或 D550N 的取代。
在本发明的另一个实施方案中，根据本发明，所述白蛋白的衍生物或变体或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽丧失了结合FcRn的能力。与此相关，所述白蛋白的衍生物或变体或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽视为丧失结合FcRn的能力，若在下文中所述的SPR测定中对所述衍生物或变体测得的共振单位低于对于相应的亲本白蛋白或其片段测得的共振单位的10%。根据该实施方案的实例包括白蛋白的衍生物或变体或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽，它们在对应于SEQ ID NO: 31或SEQ ID NO: I中的464，500，510或535的位置包含取代。优选的取代包括对应于SEQ ID N0:31或SEQ IDN0:1中的H464Q，K500A, P, C，S，A, D, G H510Q 或 H535Q 的取代。
除了在对应于SEQID N0:31 或SEQ ID NO: I 中的位置417，464，490，492，493，494， 495，496，499，500，501，503，504，505，506，510，535，536，537，538，540，541，542，550，573， 574，580581，582和584的一个或多个(几个)位置的一个或多个(几个)取代之外，根据本发明的所述衍生的或变体白蛋白或其片段，或包含所述衍生的或变体白蛋白或其片段的融合多肽在分子的其它位置可含有其它取代、缺失或插入。此类其它的取代、缺失或插入可用于改变分子的其它性质，如但不限于改变的糖基化；导入表面的反应性基团如巯基基团， 去除/生成氨甲酰化位点等等。
可加以改变以在表面上提供反应性残基并可有利地应用于本发明的残基已在未公开的专利申请WO 2010/092135 (通过提述并入本文)中披露。特别优选的残基包括对应于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中的位置的位置。
作为可在SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中或其它白蛋白的相应位置加以改变以提供表面上的活性巯基基团的改变包括对应于SEQ ID N0:31或SEQ IDN0:1中下述改变的改变L585C, DlC, A2C, D562C, A364C, A504C, E505C, T79C, E86C, D129C, D549C, A581C, D121C, E82C, S270C, A578C, L595LC, D1DC, A2AC, D562DC, A364AC, A504AC, E505EC, T79TC, E86EC, D129DC, D549DC, A581AC, A581AC, D121DC, E82EC, S270SC, A579AC, C360*，C316*， C75*，C168*，C558氺,C361*，C91*，C124*，C169*和C567*。或者，可将半胱氨酸残基添加至白蛋白的N或C端。
在第二个方面，本发明涉及分离的多核苷酸，其编码本发明的任何多肽，例如，(I) 核酸，其编码白蛋白衍生物或变体，其片段，或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段的融合多肽，(ii)包含所述核酸的质粒，和(iii)包含所述质粒的宿主细胞。本发明亦涉及核酸构建体，其包含编码本发明的衍生物或变体的多核苷酸，所述多核苷酸可操作地连接于一个或多个(几个)调控序列，所述调控序列指导所述编码序列在合适的宿主细胞中在与所述调控序列相容的条件下表达。在本发明的该第二个方面，所述亲本优选由多核苷酸编码，所述多核苷酸在非常低严格条件，低严格条件，中等严格条件，中_高严格条件，高严格条件或非常高严格条件下与以下杂交(i) SEQ ID NO: 2的成熟多肽编码序列(SEQ IDNO: 3 NCBI Reference Sequence:NM_000477. 5, SEQ ID N0:3 为基因组 DNA) ； (ii)编码成熟多肽的 cDNA 序列(cDNA 是 SEQ ID NO: 2);或(iii)⑴或(ii)的全长互补链(J. Sambrook, E. F. Fritsch 和 T. Maniatis, 1989, Molecular Cloning, ALaboratory Manual,第 2 版，Cold Spring Harbor, New York)。
SEQ ID NO:2的多核苷酸或其亚序列，以及SEQ ID NO:2的氨基酸序列或其片段， 可用于设计核酸探针，以根据本领域内公知的方法从不同属和种的菌株鉴定和克隆编码亲本的DNA。具体而言，根据标准的Southern印迹方法，可将这些探针用于与感兴趣的属或种的基因组或cDNA杂交，以鉴定和从其中分离相应的基因。这些探针可明显短于完整序列， 但长度上应为至少14，例如至少25，至少35，或至少70个核苷酸。优选地，所述核酸探针是至少100个核苷酸长度，例如，至少200个核苷酸，至少300个核苷酸，至少400个核苷酸， 至少500个核苷酸，至少600个核苷酸，至少700个核苷酸，至少800个核苷酸，或至少900 个核苷酸的长度。DNA和RNA探针二者均可使用。通常将探针标记以检测相应的基因(例如，用32P、3H、35S、生物素或抗生物素蛋白(avidin)标记)。本发明涵盖此类探针。
可从由这些其它生物体制备的基因组DNA或cDNA文库中筛选与上述探针杂交并编码亲本的DNA。可以通过琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳，或通过其它分离技术分离来自这些其它生物体的基因组或其它DNA。可以将来自文库的DNA或分离的DNA转移至硝化纤维素(nitrocellulose)或其它合适的载体材料并且固定于其上。为了鉴定与SEQ ID NO:2 或其亚序列同源的克隆或DNA,将所述载体材料用在Sounthern印迹中。
就本发明而言，杂交表示多核苷酸在非常低至非常高的严格条件下与标记的核苷酸探针杂交，所述核苷酸探针对应于SEQ ID NO:2中所示的多核苷酸，其互补链，或其亚序列。可使用例如X射线片(X-ray film)或任何其他本领域中已知的检测手段来检测与所述探针杂交的分子。
在一个实施方案中，所述核酸探针是SEQ ID NO:2的成熟多肽编码序列。在另一个实施方案中，所述核酸探针是SEQ ID N0:2的核苷酸I至1758。在另一个方面，所述核酸探针是编码SEQ ID NO: I的多肽或其片段的多核苷酸。在另一个方面，所述核酸探针是 SEQ ID NO:2。
对于长度至少100个核苷酸的长探针，将非常低至非常高的严格条件定义为在 42°C，在5X SSPE、0. 3% SDS,200 μ g/ml已剪切并且变性的鲑精DNA中，并且对于非常低和低严格性为25%的甲酰胺、对于中和中-高严格性为35%的甲酰胺、或对于高和非常高严格性为50%的甲酰胺,根据标准的Southern印迹法进行预杂交和杂交最佳12至24小时。使用2X SSC、0. 2%SDS在45。。(非常低严格性)，在50°C (低严格性)，在55°C (中严格性)， 在60°C (中-高严格性)，在65°C (高严格性)，或70°C (非常高严格性)将载体材料最终洗涤三次，每次15分钟。
对于长度大约15个核苷酸至大约70个核苷酸的短探针，将严格条件定义为在比使用根据 Bolton 和 McCarthy 的计算法(1962, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 48:1390)计算出的 T111 低大约 5°C至大约 10°C，在 O. 9M NaCl，O. 09MTris-HCl pH 7. 6,6mM EDTA, O. 5%NP_40, I XDenhardt 溶液，ImM 焦憐酸钠(sodium pyrophosphate), ImM 憐酸二氢钠(sodium monobasic phosphate), 0. ImM ATP 和 O. 2mg 每 ml 的酵母 RNA 中，根据标准的 Southern 印迹步骤进行预杂交和杂交最佳12至24小时。将所述载体材料在6X SSC加O. 1%SDS中最终洗涤一次15分钟，并用6XSSC在比计算的Tm低5°C至I (TC的温度洗涤两次，每次15分钟。
所述亲本可由多核苷酸编码，所述多核苷酸与SEQ ID NO:2的成熟多肽编码序列具有至少60%，例如至少65%，至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，至少99%，或100%序列同一性，并编码能够作为白蛋白起作用的多肽。在一个实施方案中，所述亲本由包含SEQ ID N0:2或由SEQ ID N0:2组成的多核苷酸编码。
根据本发明的第三个方面，根据本发明的白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段的融合蛋白可使用本领域中公知的技术缀合于第二分子。 所述第二分子可包含诊断模块或由诊断模块组成，且在该实施方案中所述缀合可用作如在显影中的诊断工具，或所述第二分子可为治疗化合物，且在该实施方案中所述缀合物可用于治疗目的，其中所述缀合物具有所述治疗化合物的治疗特性以及白蛋白的改变的血浆半寿期，这来源于其与白蛋白衍生物，片段，其变体的缀合。白蛋白和治疗分子的缀合物在本领域中是已知的，且已验证此类缀合物与未缀合的游离的治疗分子本身相比具有较长的血浆半寿期。所述缀合物可方便地通过白蛋白衍生物，片段，衍生物或其变体的表面上存在的游离巯基基团连接。该巯基基团的存在可为天然存在的(例如，所述游离巯基基团可等同于成熟HSA的氨基酸残基34)，或使用遗传工程和缀合物化学领域公知的技术工程改造入该多肽。或者，所述缀合物可通过HSA域III衍生物，片段，或其变体的表面上提供的其它游离巯基基团连接，例如如于共同未决的专利申请(EP 2009 152 625. 1，通过提述并入本文)公开的。
根据本发明的白蛋白缀合物的半寿期与缀合伴侣分子自身的半寿期相比可更长或更短。根据本发明的白蛋白缀合物的半寿期与包含天然HSA (而非根据本发明的白蛋白变体或衍生物)和该缀合分子的类似/等同的白蛋白缀合物的半寿期相比可为更长或更短。
在一个特别优选的实施方案中，将所述衍生的或变体白蛋白及其片段缀合于有益的治疗化合物，并将该缀合物用于治疗有此需要的患者中的病状，其中所述病状响应该特别选定的治疗化合物。用于将此种治疗化合物缀合于衍生的或变体白蛋白或其片段的技术在本领域中是已知的。WO 2009/019314公开了适于将治疗化合物缀合于多肽的技术的实例，且该技术亦可适用于本发明。此外，WO 2009/019314公开了可缀合于取代的转铁蛋白的化合物和模块的实例，且这些实例亦可应用于本发明。WO 2009/019314的教导通过提述并入本文。
HSA以其天然形式含有一个游离巯基基团，其可方便地用于缀合。作为该实施方案中的具体实施方案，所述衍生的或变体白蛋白或其片段可包含提供用于在其表面生成其他游离巯基基团的进一步修饰。这具有下述益处使得所述衍生的或变体白蛋白或其片段的有效负载增加，从而可将超过一个分子的治疗化合物缀合于每分子的衍生的或变体白蛋白或其片段，或可将两个或更多个不同的治疗化合物缀合于每分子的衍生的或变体白蛋白或其片段，例如，将具有靶向特性的化合物如对例如肿瘤具特异性的抗体；以及细胞毒性药物缀合于衍生的或变体白蛋白或其片段，由此构建针对肿瘤的高度特异性药物。对可修饰以在表面提供更多游离巯基基团的特定残基的教导亦可见于共同未决的专利申请WO 2010/092135，其通过提述并入本文。
根据本发明的第四个方面，根据本发明的白蛋白衍生物，片段，及其变体亦可与非白蛋白多肽融合伴侣相融合。所述融合伴侣原则上可为任何多肽，但一般优选所述融合伴侣是具有治疗或诊断特性的多肽。包含白蛋白的融合多肽在本领域中是已知的。已发现此种包含白蛋白以及融合伴侣多肽或由白蛋白以及融合伴侣多肽组成的融合多肽与未融合的融合伴侣多肽自身相比具有较长的血浆半寿期。根据本发明，可改变本发明的融合多肽相对于现有技术的相应融合多肽的血浆半寿期。关于白蛋白与融合伴侣多肽的融合的进一步教导，以及合适的融合伴侣多肽的实例可见于WO 01/79271 A和W003/59934 A。根据本发明的白蛋白融合物的半寿期与融合伴侣多肽自身的半寿期相比可更长或更短。根据本发明的白蛋白融合物的半寿期与包含天然HSA(而非根据本发明的白蛋白变体或衍生物)和该融合伴侣或由天然HSA和该融合伴侣组成的类似/等同的白蛋白融合物的半寿期相比可为更长或更短。
对于本发明的所有方面，融合伴侣多肽和/或缀合物可包含下述一种或多种(几种)4-1ΒΒ配体，5-螺旋，人C-C趋化因子，人L105趋化因子，命名为huL105_3.的人L105趋化因子，由Y-干扰素诱导的单核因子(MIG)，部分CXCR4B蛋白，血小板碱性蛋白(PBP)， α I-抗胰蛋白酶，ACRP-30类似物；补体成分ClqC，腺样-表达的趋化因子(ADEC)，aFGF ； FGF-1, AGF, AGF蛋白，白蛋白，依托泊苷(etoposide),血管他丁(angiostatin),炭疽疫苗， 对脑衰蛋白有特异性的抗体，antistasin,抗TGF β家族抗体，抗凝血酶III (antithrombin III), APM-I ；ACRP-30 ;Famoxin,载脂蛋白物种(apo-lipoprotein species),芳基硫酸酯酶 B (ArylsulfataseB)，b57 蛋白，BCMA，B-血小板球蛋白(β -TG), bFGF ;FGF2，凝血因子， BMP 加工酶 Furin，BMP-10，BMP-12，BMP-15，BMP-17，BMP-18，BMP-2B，BMP-4，BMP-5，BMP-6， BMP-9，骨形态形成蛋白-2，降钙素(calcitonin)，钙激活中性蛋白酶-10a，钙激活中性蛋白酶-10b，钙激活中性蛋白酶-10c，癌症疫苗，羧肽酶，C-C趋化因子，MCP2，CCR5变体， CCR7, CCR7, CDlla Mab, CD 137 ;4_1BB 受体蛋白，CD20 Mab, CD27, CD27L, CD30, CD30 配体， ⑶33免疫毒素，⑶40，⑶40L，⑶52 Mab, Cerebus蛋白，嗜酸细胞活化趋化因子(Chemokine Eotaxin)，趋化因子hIL_8，趋化因子hMCPl，趋化因子hMCPla，趋化因子hMCPlb，趋化因子 hMCP2,趋化因子hMCP3，趋化因子hSDFlb，趋化因子MCP-4，趋化因子TECK和TECK变体， 趋化因子样蛋白IL-8M1全长和成熟，趋化因子样蛋白IL-8M10全长和成熟，趋化因子样蛋白IL-8M3，趋化因子样蛋白IL-8M8全长和成熟，趋化因子样蛋白IL-8M9全长和成熟，趋化因子样蛋白PF4-414全长和成熟，趋化因子样蛋白PF4-426全长和成熟，趋化因子样蛋白PF4-M2全长和成熟，霍乱疫苗，Chondromodulin样蛋白，c_kit配体；SCF ;肥大细胞生长因子；MGF ;纤维肉瘤来源的干细胞因子，CNTF及其片段(如CNTFAxl5' (AxokineTM))， 前体或活性形式的凝血因子，胶原，补体C5 Mab，结缔组织活化蛋白-III，CTAA16. 88 Mab, CTAP-III, CTLA4-Ig, CTLA-8，CXC3, CXC3, CXCR3 ;CXC 趋化因子受体 3，cyanovirin-N, Darbepoetin,命名为 exodus,命名为 huL105_7.，DIL-40, DNA 酶，EDAR, EGF 受体 Mab, ENA-78,内皮他丁(Endostatin),嗜酸细胞活化趋化因子(Eotaxin),上皮嗜中性粒细胞活化蛋白-78，EPO受体；EP0R,红细胞生成素(erythropoietin) (EPO)和EPO模拟物，优托品(Eutropin)，Exodus蛋白，因子IX，因子VII，因子VIII，因子X和因子XIII，FAS配体抑制蛋白(DcR3)，FasL, FasL, FasL, FGF, FGF-12 ;成纤维细胞生长因子同源因子_1， FGF-15, FGF-16, FGF-18，FGF-3 ;INT_2，FGF-4 ;白树霉素(gelonin)，HST-I ;HBGF_4， FGF-5, FGF-6 ;肝素结合分泌的转化因子-2 (Heparinbinding secreted transforming factor-2), FGF-8, FGF-9 ;神经胶质活化因子，纤维蛋白原(fibrinogen), flt-1, flt-3 配体，促卵泡激素α亚基，促卵泡激素β亚基，促卵泡素(Follitropin), Fractalkine, 片段，肌纤维蛋白肌I丐蛋白I (Troponin I), FSH,半乳糖苷酶(Galactosidase),半乳凝素-4 (Galectin-4)，G-CSF，⑶F-I，基因疗法，神经胶质瘤-衍生的生长因子，胰高血糖素， 胰高血糖素样肽，葡糖脑苷酯酶(Glucocerebrosidase),葡糖氧化酶(glucose oxidase), 葡糖苷酶(Glucosidase), Glycodelin-A ;黄体酮相关子宫内膜蛋白，GM-CSF，促性腺素 (gonadotropin)，粒细胞趋化蛋白_2 (GCP-2)，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子，生长激素， 生长相关癌基因_ α (GR0- α ),生长相关癌基因β (GR0- β ),生长相关癌基因Y (GR0- Y ), hAPO-4 ；TR0Y, hCG，乙型肝炎表面抗原，乙型肝炎疫苗，HER2受体Mab，水蛭素(hirudin)， HIV gpl20, HIV gp41，HIV抑制肽，HIV抑制肽，HIV抑制肽，HIV蛋白酶抑制肽，HIV-I蛋白酶抑制剂，HPV疫苗，人6CKine蛋白，人Act_2蛋白，人脂肪形成抑制因子，人B细胞刺激因子-2受体，人β _趋化因子Hl305 (MCP-2)，人C-C趋化因子DGWCC，人CC趋化因子ELC蛋白，人CC型趋化因子白细胞介素C，人CCC3蛋白，人CCF18趋化因子，命名为SLC ( 二级淋巴趋化因子)的人CC-型趋化因子蛋白，人趋化因子β-8短形式(short form)，人趋化因子C10，人趋化因子CC-2，人趋化因子CC-3，人趋化因子CCR-2，人趋化因子Ck β -7，人趋化因子ΕΝΑ-78，人趋化因子嗜酸细胞活化趋化因子，人趋化因子GRO α，人趋化因子GRO α， 人趋化因子GROP，人趋化因子HCC-I，人趋化因子HCC-I，人趋化因子1-309，人趋化因子 ΙΡ-10，人趋化因子L105_3，人趋化因子L105_7，人趋化因子MIG，人趋化因子MIG- β蛋白， 人趋化因子MIP-I α，人趋化因子MIPl β，人趋化因子ΜΙΡ_3 α，人趋化因子ΜΙΡ_3 β，人趋化因子PF4，人趋化因子蛋白331D5，人趋化因子蛋白61164，人趋化因子受体CXCR3，人趋化因子SDFl α，人趋化因子SDFlP，人趋化因子ZSIG-35，人Chrl9Kine蛋白，人CKP-9， 人CK0-9，ACX3C 111氨基酸趋化因子，人DNAX白细胞介素-40，人DVic-I C-C趋化因子，人EDIRF I蛋白序列，人EDIRF II蛋白序列，人嗜曙红细胞CC型趋化因子嗜酸细胞活化趋化因子，人嗜曙红细胞-表达的趋化因子(EEC)，人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白C(Human fast twitch skeletal muscle troponinC),人快速颤搐骨骼肌肌韩蛋白I,人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白亚基C，人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白亚基I蛋白，人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白亚基T，人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白T，人胎儿脾脏表达的趋化因子，FSEC，人GM-CSF受体， 人gro-α趋化因子，人gro-β趋化因子，人gro-γ趋化因子，人IL-16蛋白，人IL-1RD10 蛋白序列，人IL-1RD9，人IL-5受体a链，人IL-6受体，人IL-8受体蛋白hIL8RA，人IL-8 受体蛋白hIL8RB，人IL-9受体蛋白，人IL-9受体蛋白变体#3，人IL-9受体蛋白变体片段， 人IL-9受体蛋白变体片段#3，人白细胞介素I δ，人白细胞介素10，人白细胞介素10，人白细胞介素18,人白细胞介素18衍生物,人白细胞介素-I β前体,人白细胞介素-I β前体, 人白细胞介素-I受体辅助蛋白，人白细胞介素-I受体拮抗剂β，人白细胞介素-I型_3受体，人白细胞介素_10(前体)，人白细胞介素-10 (前体)，人白细胞介素-11受体,人白细胞介素_1240kD亚基,人白细胞介素-12β -I受体,人白细胞介素-12β -2受体,人白细胞介素-12ρ35蛋白，人白细胞介素-12ρ40蛋白，人白细胞介素-12受体,人白细胞介素-13 a 受体，人白细胞介素-13 β受体，人白细胞介素-15，来自克隆Pl的人白细胞介素-15受体，人白细胞介素-17受体，人白细胞介素-18蛋白(IL-18),人白细胞介素-3,人白细胞介素_3受体，人白细胞介素_3变体，人白细胞介素_4受体，人白细胞介素_5，人白细胞介素-6，人白细胞介素_7，人白细胞介素-7，人白细胞介素-8(IL-8)，人胞内IL-I受体拮抗剂，人IP-10和HIV-I gpl20超变区融合蛋白，人ΙΡ-10和人Muc-I核心表位(VNT)融合多肽，人肝和活化调节趋化因子(LARC) ,ALkn-I全长和成熟蛋白，人乳腺相关趋化因子 (MACK)蛋白全长和成熟，人成熟趋化因子CkP-7，人成熟gro-a，用于治疗败血病的人成熟gro-γ多肽，人MCP-3和人Muc-I核心表位(VNT)融合蛋白，人MIlO蛋白，人MIlA蛋白， 人单核细胞化学引诱物因子hMCP-Ι，人单核细胞化学引诱物因子hMCP-3，人单核细胞趋化前蛋白(MCPP)序列，人神经趋化因子(neurotactin)趋化因子样域，人非-ELR CXC趋化因子H174，人非-ELR CXC趋化因子IP10，人非-ELR CXC趋化因子Mig，人PAI-I突变体，具有IL-16活性的人蛋白，具有IL-16活性的人蛋白，人二级淋巴样趋化因子(SLC)，人SISD 蛋白，人STCP-I，人基质细胞衍生的趋化因子，SDF-I，人T细胞混合淋巴细胞反应表达的趋化因子(TMEC)，人胸腺和活化调节细胞因子(TARC)，人胸腺表达的，人TNF- α，人TNF- α， 人TNF-β (LT-α)，人类型CC趋化因子嗜酸细胞活化趋化因子3蛋白序列，人类型II白细胞介素-I受体，人野生型白细胞介素_4 (hIL-4)蛋白，人ZCHEM0-8蛋白，人源化抗VEGF抗体，及其片段，人源化抗VEGF抗体,及其片段,透明质酸酶(Hyaluronidase), ICE IOkD亚基，ICE 20kD亚基，ICE 22kD亚基，艾杜糖醛酸2-硫酸酯酶(Iduronate-2-sulfatase)，艾杜糖苷酸酶(Iduronidase)，IL-I α，IL-I β，IL-I 抑制剂(IL-Ii)，IL-I 成熟，IL-IO 受体， IL-11，IL-11，IL-12p40 亚基，IL-13，IL-14，IL-15，IL-15 受体，IL-17，IL-17 受体，11-17 受体，11-17受体，IL-19，IL-Ii片段，ILl-受体拮抗剂，IL-21 (TIF)，含IL-3的融合多肽，IL-3 突变体蛋白，IL-3变体，IL-3变体，IL-4，IL-4突变蛋白，IL-4突变蛋白Y124G，IL-4突变蛋白Y124X，IL-4突变蛋白，11-5受体，IL_6，11-6受体，IL-7受体克隆，IL-8受体，IL-9成熟蛋白变体(Metll7型)，免疫球蛋白或基于免疫球蛋白的分子，或任一者的片段(例如Small Modular ImmunoPharmaceuticalTM(“SMIP”)或 dAb,Fab，片段，F (ab，) 2, scAb, scFv 或 scFv 片段)，包括但不限于纤溶酶原，流感疫苗，抑制素(Inhibin) α，抑制素β，胰岛素，胰岛素样生长因子，整联蛋白Mab，间-α胰蛋白酶抑制剂，间-α胰蛋白酶抑制剂，干扰素诱导蛋白(IP-IO)，干扰素(如干扰素α种和亚种，干扰素β种和亚种，干扰素Y种和亚种)，干扰素(如干扰素α种和亚种，干扰素β种和亚种，干扰素Y种和亚种)，白细胞介素6,白细胞介素8(IL-8)受体，白细胞介素8受体B,白细胞介素-I α，白细胞介素_2受体相关蛋白Ρ43，白细胞介素_3，白细胞介素_4突变蛋白，白细胞介素-8(IL-8)蛋白，白细胞介素-9，白细胞介素-9(IL-9)成熟蛋白(Thrll7型)，白细胞介素(如IL10，IL11和IL2)， 白细胞介素(如IL10，ILll和IL2)，日本脑炎疫苗，Kalikrein抑制剂，角质细胞生长因子， Kunitz域蛋白(如抑肽酶(aprotinin),淀粉状前体蛋白和WO 03/066824中所述那些,具有或不具有白蛋白融合)，Kunitz域蛋白(如抑肽酶(aprotinin),淀粉状蛋白前体蛋白和 WO 03/066824中所述那些，具有或不具有白蛋白融合)，LACI，乳铁蛋白(Iactoferrin)， 潜在的TGF-β结合蛋白II，来普汀/瘦素(I印tin)，肝表达的趋化因子-I (LVEC-I)Jf 表达的趋化因子-2(LVEC-2)，LT-α，LT-β，黄体化激素，莱姆病疫苗，淋巴细胞趋化因子 (Lymphotactin)，巨噬细胞衍生的趋化因子类似物MDC (η+1)，巨噬细胞衍生的趋化因子类似物MDC-eyfy，巨噬细胞衍生的趋化因子类似物MDC_yl，巨噬细胞衍生的趋化因子，MDC, 巨噬细胞衍生的趋化因子(MDC)，Maspin ;蛋白酶抑制剂5，MCP-I受体，MCP-la, MCP-Ib, MCP-3，MCP-4受体，M-CSF，黑素瘤抑制蛋白，膜结合蛋白，Met 117人白细胞介素9，ΜΙΡ-3 α， ΜΙΡ-3 β , MIP-Γ , MIRAP，修饰的Rantes，单克隆抗体，MP52，突变白细胞介素6 S176R，肌纤维收缩蛋白肌I丐蛋白I,利钠肽(Natriuretic Peptide),神经生长因子-β ,神经生长因子-β 2，神经菌毛素(NeuiOpilin) _1，神经菌毛素_2，神经趋化因子，神经营养因子-3， 神经营养因子_4，神经营养因子_4a，神经营养因子_4b，神经营养因子-4c，神经营养因子-4d，嗜中性粒细胞活化肽-2(NAP-2)，N0G0-66受体，NOGO-A, NOGO-B, N0G0-C，命名为 PTEC的新β -趋化因子，N-端修饰趋化因子GroHEK/hSDF-Ι α，N-端修饰趋化因子GroHEK/ hSDF-Ι β，Ν-端修饰趋化因子met-hSDF-Ι α，N-端修饰趋化因子met-hSDF-Ι β，OPGL，成骨蛋白-I ；0Ρ-1 ;ΒΜΡ-7，成骨蛋白-2，0X40 ;ACT_4，0X40L，催产素(神经垂体素运载蛋白I)， 甲状旁腺素，Patched, Patched-2, PDGF-D,百日咳类毒素(Pertussistoxoid),垂体表达的趋化因子(PGEC)，胎盘生长因子，胎盘生长因子-2，纤溶酶原活化物抑制剂-I ;PAI-1，纤溶酶原活化物抑制剂_2 ;PAI-2，纤溶酶原活化物抑制剂-2 ;PAI-2，血小板衍生的生长因子， 血小板衍生的生长因子Bv-sis，血小板衍生的生长因子前体A，血小板衍生的生长因子前体B，血小板Mab，血小板衍生的内皮细胞生长因子(I3D-ECGF)，血小板衍生的生长因子A链， 血小板衍生的生长因子B链，用于治疗败血病的多肽，前原载脂蛋白“米兰”变体(Pr印roap olipoprotein“milano”variant)，前原载脂蛋白“巴黎”变体，前凝血酶(pre-thrombin),灵长类CC趋化因子〃 ILINCK 〃，灵长类CXC趋化因子〃 IBICK 〃，胰岛素原，促乳素(Prolactin)， 促乳素2，prosaptide，蛋白酶抑制肽，蛋白C，蛋白S，凝血酶原，尿激酶原，RANTES, RANTES 8-68, RANTES 9_68，RANTES肽，RANTES受体，重组白细胞介素-16，抵抗素(Resistin)，局限曲菌素(restrictocin),逆转录病毒蛋白酶抑制剂，蓖麻毒蛋白(ricin),轮状病毒疫苗， RSV Mab,阜草素(saporin),八叠球菌(sarcin),分泌和跨膜多肽,分泌和跨膜多肽,血清胆碱酯酶，血清蛋白(如凝血因子)，可溶性BMP受体激酶蛋白-3，可溶性VEGF受体，干细胞抑制因子，葡萄球菌疫苗，基质衍生的因子-I α，基质衍生的因子-I β，物质P (速激肽)， Τ1249 肽，Τ20 肽，Τ4 内切核酸酶，TACI, Tare, TGF-β 1，TGF-β 2，Thrl 17 人白细胞介素 9， 凝血酶，促血小板生成素(thiOmbopoietin)，促血小板生成素衍生物1，促血小板生成素衍生物2，促血小板生成素衍生物3，促血小板生成素衍生物4，促血小板生成素衍生物5，促血小板生成素衍生物6，促血小板生成素衍生物7，胸腺表达的趋化因子(TECK)，促甲状腺激素(Thyroid stimulating Hormone)，蝶抗凝妝，Tim-1 蛋白，TNF-α 前体,TNF-R, TNF-RII ； TNF p75受体；死亡受体，tPA,转铁蛋白(transferrin),转化生长因子β,肌I丐蛋白肽， 截短的单核细胞趋化蛋白2(6-76)，截短的单核细胞趋化蛋白2 (6-76)，截短的RANTES蛋白(3-68),肿瘤坏死因子,尿酸氧化酶,尿激酶,加压素(Vasopressin)(神经垂体素运载蛋白(Neurophysin II))，VEGFR-3 ;flt_4，VEGF 受体；KDR ；flk-l, VEGF-110, VEGF-121, VEGF-I38,VEGF-I45,VEGF-162,VEGF-165,VEGF-182,VEGF-189,VEGF-206,VEGF-D,VEGF-E ； VEGF-X, von Willebrand因子，野生型单核细胞趋化蛋白2，野生型单核细胞趋化蛋白2， ZTGF-β9 ；
此外，缀合物可包含一种或多种(几种)化疗药如13_顺_视黄酸 (13-cis-Retinoic Acid),2-CdA,2-氯脱氧腺苷(2-Chlorodeoxyadenosine), 5-阿扎胞苷(5-Azacitidine), 5-氟尿卩密唳(5-Fluorouracil), 5-FU, 6-巯基嘌呤(6_Mercaptopurine),6_MP,6_TG,6_ 硫代鸟嘌呤(6-Thioguanine), A, Abraxane, Accutane !放线菌素-D(Actinomycin-D),阿霉素(Adriamycin ) AdniciI , Agvyliivi^ ·, Λ !；i-C'O Π K',阿地白介素(Aldesleukin),阿仑单抗(Alemtuzumab), ALIMTA,阿利维 A 酸(Alitretinoin)， Λ丨k;〗ban-A(:)d 爱克兰(AlkeiiinW).全反视黄酸(All-transretinoic Acid)，α 干扰素，六甲蜜胺(Altretamine),甲氨蝶呤 (Amethopterin)，氨憐汀(Amifostine)，氨鲁米特(Aminoglutethimide)，阿那格雷 (Anagrelide) , Anandron ，阿那曲唑(Anastrozole)，阿糖胞苷(Arabinosylcytosine)， Ara-C, Aranesp ，Aredia , Arimidex , Aromasin Απ^ιιοη , 二氧化二 砷(Asenic Trioxide),天冬酰胺酶(Asparaginase), ATRA, Avastin ,阿扎胞苷(Azacitidine), BCG, BCNU,贝伐单抗(Bevacizumab),贝沙罗汀(Bexarotene), BEXXAR ,比卡鲁胺(Bicalutamide), BiCNU，Blenoxane ，博来霉素(Bleomycin), Bortezomib,白消安(Busulfan)，Busuliex^ , C225,亚叶酸隹丐(CalciumLeucovorin)， CanipaUld Campiosaril11喜树喊-11 (Camptothecin-Il),卡培他滨(Capecitabine), Carac ,卡钼(Carboplatin)，卡莫司汀(Carmustine), Carmustineffafer,康士德(Casodex )，CC-5013，CCNU，CDDP，CeeNU, Cenbidine 西妥昔单抗(Cetuximab)， 苯丁酸氮芥(Chlorambucil)，顺钼(Cisplatin)，亚叶酸因子(Citrovorum Factor)， 克拉屈滨(Cladribine)，可的松(Cortisone)，Cosmegen , CPT-II,环磷酰胺 (Cyclophosphamide)， Cytadren⑩，阿糖胞苷(Cytarabine)，阿糖胞苷脂质体(Cytarabine Liposomal)，赛德萨(Cytosar)-U ，Cytoxan ，达卡巴曝(Dacarbazine)，Dacogen, 更生霉素(Dactinomycin)，Darbepoetin Alfa，Dasatinib,柔红霉素(Daunomycin)， 柔红霉素(Daunorubicin)，盐酸柔红霉素(DaunorubicinHydrochloride)，柔红霉素脂质体(Daunorubicin Liposomal)，DaunoXonie:立.,地卡特隆(Decadron)，地西他滨 (Decitabine)，Ddta-Corte 働，EMtaSOW ，地尼白介素-毒素连接物(Denileukin diftitox)，DepoCyt ，地塞米松(Dexamethasone)，醋酸地塞米松(Dexamethasone acetate)，地塞米松憐酸钠(Dexamethasone SodiumPhosphate)，地塞米松(Dexasone)， 右雷佐生(Dexrazoxane)，DHAD，DIC, Diodex,多西紫杉醇(Docetaxel)，多柔比星(Doxorubicin)，多柔比星脂质体(Doxorubicin liposomal)，Droxia ，DTIC, ) i(M)omd I)uralone^\Eligard ，Ellence ，乐沙定(Eloxatin) , Elspar ，Emcyt ，表柔比星(Epirubicin)，阿法依伯汀(Epoetin alfa)， Erbitux ，Erlotinib，欧文氏菌属 L-天冬酸胺酶(Erwinia L-asparaginase)，雌莫司汀(Estramustine)，氨磷汀(Ethyol)，Etopoplios 1 依托泊苷(Etoposide)，磷酸依托泊苷(Etoposide Phosphate)，Eulexin , Evista ，依西美坦(Exemestane)，法乐通 (Fareston) ，Fastodex /Fgmara(R)5非格司亭(Filgrastim)，氟尿苷(Floxuridine)， Iludarali ,氟达拉滨(Fludarabine)，Ftuoroplex—，氟尿啼 P定(Fluorouracil)，氟尿啼唳(Fluorouracil)(乳膏)，氟甲睾酮(Fluoxymesterone),氟他胺(Flutamide)，亚叶酸(Folinic Acid)，l.'UDR/R，氟维司群(Fulvestrant), G-CSF, Gefitinib,吉西他滨(Gemcitabine)，吉姆单抗(Gemtuzumab)奥佐米星(ozogamicin)，健择(Geinzar) ， Gleevec , GHadel Wafer, GM-CSF，戈舍瑞林(Goserelin)，粒细胞集落剌激因子，粒细胞巨噬细胞集落剌激因子，Halotestin ，Herceptin ，地塞米松(Hexadrol)，克瘤灵(Hexalen) ，六甲蜜胺(Hexamethylmelamine)，HMM,和美新(HyCMTltin) ，轻基服 (Hydrea) ，醋酸氢化可的松(Hydrocort Acetate)⑩，氧化可的松(Hydrocorti sone)， 氢化可的松磷酸钠(Hydrocortisone Sodium Phosphate)，氢化可的松琥拍酸钠 (Hydrocortisone Sodium Succinate)，氢化可的松憐酸(HydrocortonePhosphate)，轻服(Hydroxyurea)，替伊莫单抗(Ibritumomab)，替伊莫单抗(Ibritumomab Tiuxetan)， Idamycill 4尹达比星(Idarubicin)，Ifex ，IFN- α，异环憐酉先胺(Ifosfamide)，IL-11， IL-2，甲横酸伊马替尼(Imatinib mesylate)，咪唑羧酸胺(Imidazole Carboxamide)，干扰素alfa，干扰素Alfa-2b(PEG缀合物)，白细胞介素_2，白细胞介素-11，Intron A (干扰素 alfa-2b)，IreSSa⑩，伊立替康(Irinotecan)，异维 A 酸(Isotretinoin)， Kidrolase⑩ LanaC0lt 5 Lapatinib, L-天冬酉先胺酶，LCR, Lenalidomide,来曲唑 (Letrozole)，亚叶酸妈(Leucovorin)，苯丁酸氮芥(Leukeran)，Leukine ，亮丙瑞林 (Leuprolide)，长春新减(Leurocristine), Leustatin ，脂质体 Ara_C，Liquid PredKs 洛莫司汀(Lomustine)，L-PAM, L-沙可来新(L-Sarcolysin)，Lupron⑩，Lupron DepoKd:, M, Matulane⑩，Maxidex，氮芥(Mechlorethamine)，盐酸氮芥(MechlorethamineHydrochloride)，Medralone s 美卓乐(Med ι I) ，梅格施(Megace) ，甲地孕酮(Megestrol)，醋酸甲地孕酮(Megestrol Acetate)，美法仑(Melphalan),疏嘌呤 (Mercaptopurine),美司钠(Mesna), Mesnex ,甲氨蝶呤(Methotrexate),甲氨蝶呤钠(Methotrexate Sodium),甲泼尼龙(Methylprednisolone), Metic.Olten ，丝裂霉素 (Mitomycin)，丝裂霉素 _C (Mitomycin-C)，米托蒽醌(Mitoxantrone), M-Prednisol , MTC，MTX，Μ-ustargen ，氮芥(Mustine)，Mutamycin ,马利兰(Myleran) , Mylocel , Mylolarg ,诺维本(Navelbine) ，萘拉滨(Nelarabine), 'Neosar , Neulasta , Neimiega ，优保津(Neupogen) ，Nexavar , Nilandron ，尼鲁米特(Nilutamide), Nipeni ,氮芥(Nitrogen Mustard), Novaldex ,能灭瘤(Novantrone) ,奥曲肽 (Octreotide)，醋酸奥曲肢(Octreotide acetate) , OflCOSpar 安可平(Oncovin) , Ontak , Onxal , Oprevelkin, Orapred ，Orasone⑩I奥沙利钼(Oxaliplatin)，紫杉醇(Paclitaxel),蛋白结合紫杉醇，帕米磷酸(Pamidronate), Panitumumab,Pam'etin. ,伯尔定(ParapliUin)息-Pediapred 8 , PEG 干扰素，培门冬酶(Pegaspargase), PEG 菲格司亭(Pegfilgrastim)，PEG-INTRON , PEG-L-天冬酰胺酶，培美曲塞(PEMETREXED)，喷司他丁(Pentostatin),苯丙氨酸氮芥(Phenylalanine Mustard),丨Maiiriol1H iJiai'ino!-AQ 5 泼尼松龙(Prednisolone)，泼尼松(Prednisone), Prelone ，丙卡巴肼(Procarbazine)， I5ROCRΓ!' , Proleukin ，具有卡莫司汀(Carmustine)植入物的 Prolifeprospan 20, Purinethol ) K 雷洛昔芬(Raloxifene), Revlimid Rheumatrex ，Wtuxan , 利妥昔单抗(Rituximab)，RofeiOn-A (干扰素Alfa-2a), .Rubex ，柔红霉素盐酸盐(Rubidomycinhydrochloride)，善得定(SMrKloslaliis)-R: Sandostatin LAR 3沙格司亭(Sargramostim)，Solll-Corte Solll-Medrol ，Sorafenib，SPRYCEL , STI-571,链佐星(Streptozocin)，SU11248，Sun itinib,S UtCllt ，他莫昔芬(Tamoxifen)， Tarceva , Targretin ^ 泰素(Taxol) ，泰索帝(Taxotere) ，Temodai#，替莫唑胺(Temozolomide)，替尼泊苷(Teniposide)，TESPA，沙利度胺(Thalidomide)， Thaloillid ，TheraCys 硫鸟卩票呤(Thioguanine)，Thioguanine Tabloid 3 Thiophosphoamide， Thioplex ’ 塞替派(Thiotepa), TICE , Toposar ,托泊替康(Topotecan),托瑞米芬(Toremifene),托西莫单抗(Tosisumomab),曲妥单抗 (Trastuzumab)，维 A 酸(Tretinoin)，Trexall , Trisenox ，TSPA, TYKERB , VCR, Vectibix TM，Velban ，Velcade ，凡毕士(VePesid) ，Vesanoid ，Viadur , vidaza· ， 长春碱(Vinblastine),硫酸长春碱(Vinblastine Sulfate), Vincasar Pfs ,长春新碱 (Vincristine),长春瑞滨(Vinorelbine),酒石酸长春瑞滨(Vinorelbinetartrate), VLB, VM-26, Vorinostat, VP-16,威猛(Vl丨mon) ,希罗达((Xeloda) ，Zanosar ，Zevalin , Zineeard⑩I诺雷德(Zoladex) ，卩坐来膦酸(Zoledronic acid), Zolinza, Zometa ;放射性药品如碳-11，碳-14，铬-51，钴-57，钴-58，铒-169，氟-18，镓-67，金-198，铟-111， 铟-113m，碘-123，碘-125，碘-131，铁-59，氪-81m，氮-13，氧-15，磷-32，铼-186，铷-82， 钐-153，硒-75，锶-89，锝-99m,铊-201，氚，氙-127，氙-133，钇-90 ;显像剂如钆，磁铁矿 / 磁石(magnetite)，锰，锝，1125，1131，P32，T1201，碘帕醇(Iopamidol), PET-FDG0
此类多肽和化学化合物可称作诊断模块，治疗模块或有益模块。
可将一种或多种治疗多肽融合于白蛋白的N端，C端，插入白蛋白结构中的环 (loop)，或其任意组合。其可包含或其可不包含将融合多肽多种组分分开的接头序列。
涉及白蛋白或其片段的融合的教导在本领域是已知的，且本领域技术人员会知道此类教导亦可适用于本发明。WO 2001/79271 A和WO 2003/59934 A亦包含可融合于白蛋白或其片段的治疗多肽的实例，且这些实例亦适用于本发明。
根据本发明的融合或缀合多肽的白蛋白衍生物，片段，或其变体部分一般而言与其亲本白蛋白的对应部分的序列具有至少60%，优选至少70%，优选至少80%，优选至少81%， 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%,或 94%,更优选至少 95%,更优选至少96%，更优选至少97%，更优选至少98%和最优选至少99%的序列同一性。
在一个优选实施方案中，根据本发明的融合或缀合多肽的白蛋白衍生物，片段，或其变体部分一般而言与SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中所示的HSA的对应部分的序列具有至少60%，优选至少70%，优选至少80%，优选至少85%，优选至少90%，更优选至少95%，更优选至少96%，更优选至少97%，更优选至少98%和最优选至少99%的序列同一性。
两个氨基酸序列间或两个核苷酸序列间的相关性由参数“序列同一性”描述。
就本发明而言，两个氨基酸序列之间的同一性程度使用如EMBOSS软件包 (EMBOSS The European Molecular Biology Open Software Suite, Rice 等，2000， Trends in Genetics 16:276-277)的Needle程序,优选为3. 0. 0版或之后的版本中执行的 Needleman-Wunsch 算法(Needleman 和 Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48 443-453)确定。 所用的可选参数为缺口开放罚分(gap open penalty) 10,缺口延伸罚分(gap extension penalty) 0. 5，和EBL0SUM62 (BL0SUM62的EMBOSS版)取代矩阵。使用标记为“最长同一性” 的Needle输出(使用-nobrief选项获得)作为百分比同一'I"生并如下计算
(相同的残基X100)/(比对长度-比对中缺口总数)。
在描述本发明的多种衍生物或变体中，为了方便参照，采用下文所述的命名法。在所有情况下，使用通用的IUPAC单字母或三字母氨基酸缩写。
就本发明而言，两个脱氧核糖核苷酸序列之间的序列同一性程度使用如EMBOSS 软件包(EMBOSS :The European Molecular Biology Open SoftwareSuite, Rice 等，2000, 见上)的Needle程序，优选为3. 0. O版或之后的版本中执行的Needleman-Wunsch算法 (Needleman和Wunsch，1970，见上)确定。所用的可选参数为缺口开放罚分10，缺口延伸罚分0. 5，和EDNAFULL (NCBINUC4. 4的EMBOSS版)取代矩阵。使用标记为”最长同一性”的 Needle输出(使用-nobrief选项获得)作为百分比同一'I"生并如下计算
(相同的脱氧核糖核苷酸X100)/(比对长度_比对中缺口总数)
就本发明而言，将公开于SEQ ID N0:31或SEQ ID N0:1中的成熟多肽用于确定在其他白蛋白中对应的氨基酸残基。将其他白蛋白的氨基酸序列与公开于SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I中的成熟多肽进行比对，并基于该比对，使用如EMBOSS包 (EMBOSS:The European Molecular Biology OpenSoftware Suite, Rice 等，2000，Trends Genet. 16:276-277)的 Needle 程序(优选版本 3. 0. 0 或更新)中执行的 Needleman-Wunsch 算法(Needleman 和 Wunsch, 1970，J. Mol. Biol. 48:443-453)确定了对应于 SEQ ID N0:31 或SEQ ID NO: I所公开的成熟多肽中任何氨基酸残基的氨基酸位置编号。
在其他白蛋白中鉴定对应的氨基酸残基可通过使用“ClustalW” (Larkin等，2007，Bioinformatics 23:2947-2948)比对多个多肽序列来确认。
当其他多肽(或蛋白)从SEQ ID N0:31或SEQ ID NO: I的成熟多肽分歧到传统的基于序列的比较无法检测出其关系的程度时(Lindahl和Elofsson, 2000，J. Mol. Biol. 295:613-615)，可使用其他逐对序列比较算法。在基于序列的搜索中较高的敏感度可使用采用多肽家族的概率表现(probabilistic representation)(序型)来搜索数据库的搜索程序获得。举例而言，PSI-BLAST程序通过迭代的(iterative)数据库搜索过程来产生序型，并能够检测出较远的同源物(Atschul等，1997, Nucleic Acids Res. 25:3389-3402)。 当多肽的家族或超家族在蛋白质结构数据库中具有一个或多个代表时，甚至可达成更高的敏感度。程序如 GenTHREADER(Jones 1999, J. Mol. Biol. 287:797-815;McGuffin 和 Jones, 2003, Bioinformatics 19:874-881)使用来自多个来源(PSI-BLAST、二级结构预 则(secondary structureprediction)、结构 I匕对序型(stuctural alignment profile) 以及溶解势(solvationpotential))的信息作为向预测查询序列(query sequence) 的结构折叠(stuctural fold)的神经网络的输入。类似地，Gough等，2000，J. Mol. Biol. 313:903-919的方法可用于将未知结构的序列在存在于SCOP数据库中的超家族模型内进行比对。这些比对继而能够用于生成多肽的同源性模型，且上述模型可就准确度使用多种为此目的开发的工具加以评价。
对于已知结构的蛋白质，可用数种工具和资源以供找回(retrieve)和生成结构比对。举例而言，已将SCOP超家族的蛋白质进行了结构比对，且这些比对是可获取并可下载的。两个或更多蛋白质结构可使用多种算法，如距离比对矩阵(distance alignment matrix)(Holm 和 Sander,1998，Proteins 33:88-96)或组合延伸(combinatorial extension) (Shindyalov 和 Bourne, 1998, ProteinEngineering 11:739-747)进行比对， 且这些算法的执行可另外用于查询具有目标结构的结构数据库，以发现可能的结构同源物 (例如 Holm 和 Park, 2000, Bioinformatics 16:566-567)。另一种比对程序是 MUSCLE (通过 log-期待的多重序列比较(Multiple sequence comparison by log-expectation, RobertC.Edgar,版本 3. 6, http://www. drive5. com/muscle;Edgar(2004)Nucleic Acids Research32 (5)，1792-97 和 Edgar (2004) BMC Bioinformatics, 5 ⑴113))，其可以以用户说明(版本3. 6，2005年7月)中所述的缺省设定使用。比3. 6更迟的MUSCLE版本亦可用于本发明的任何方面。
在描述本发明的白蛋白衍生物或变体时，为了参照方便起见，采用了下述的命名法。使用通用的IUPAC单字母缩写或三字母氨基酸缩写。
取代。对于氨基酸取代，使用下述命名法初始氨基酸，位置，取代氨基酸。相应地， 在226位用丙氨酸取代苏氨酸命名为“Thr226Ala”或“T226A”。多重突变用加号(“ + ”) 分开，例如，“Gly205Arg+Ser411Phe”或“G205R+S411F”，代表在205和411位分别用精氨酸 (R)取代甘氨酸(G)，以及用苯丙氨酸(F)取代丝氨酸(S)的突变。附图亦使用(“/”)，例如“E492T/N503D”，这应视作可与(“ +，，)互换。
逾失。对于氨基酸缺失，使用了如下命名法初始氨基酸，位置*。相应地，在位置195缺失甘氨酸命名为“Glyl95*”或“G195*”。多个缺失由加号(“ + ”)分开，例如 “Glyl95*+Ser411*，，或 “G195*+S411*，，。
通入。对于氨基酸插入，使用了如下的命名法初始氨基酸，位置，初始氨基酸，新插入的氨基酸。因此，在位置195的甘氨酸之后插入赖氨酸命名为“Glyl95GlyLys”或 “G195GK”。多个氨基酸的插入命名为[初始氨基酸，位置，初始氨基酸，新插入的氨基酸 #1，新插入的氨基酸#2 ;等等]。例如，在位置195的甘氨酸之后插入赖氨酸和丙氨酸记为 “Glyl95GlyLysAla” 或 “G195GKA”。
在此情况下，通过在插入的氨基酸残基前的氨基酸残基的位置号添加小写字母而对插入的氨基酸残基进行编号。因此，在上一例子中序列为
亲本变体
权利要求
1.一种白蛋白衍生物或变体，其片段或包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段的融合多肽，其中所述白蛋白衍生物或变体或其片段包含或由如下组成白蛋白域III或衍生物或其变体，和至少一个其它白蛋白域，片段或衍生物或其变体，其中所述衍生物或变体并非天然存在的白蛋白衍生物或变体。
2.权利要求I的白蛋白衍生物或变体，其片段或融合多肽，其中所述天然存在的衍生物或变体是来自下述之一的野生型白蛋白人；灵长类，如黑猩猩，大猩猩或恒河猴/猕猴 (macaque);兔;啮齿类如小鼠，大鼠和仓鼠;牛;马类如马或驴;山羊；绵羊；犬；豚鼠；鸡和猪。
3.权利要求I或2的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述白蛋白域III 或衍生物或其变体来源于人血清白蛋白；灵长类血清白蛋白，如黑猩猩血清白蛋白，大猩猩血清白蛋白或恒河猴/猕猴血清白蛋白；兔血清白蛋白；啮齿类血清白蛋白如小鼠白蛋白， 大鼠血清白蛋白和仓鼠血清白蛋白；牛血清白蛋白；马类血清白蛋白如马血清白蛋白或驴血清白蛋白；山羊血清白蛋白；绵羊血清白蛋白；犬血清白蛋白；豚鼠血清白蛋白；鸡血清白蛋白和猪血清白蛋白。
4.权利要求I至3任一项的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述白蛋白域III或衍生物或其变体与SEQ ID NO: 31或SEQID NO: I的域III具有至少80%序列同一性，优选至少85%序列同一性，更优选至少90%序列同一性，甚至更优选至少90%序列同一性和最优选至少98%序列同一'丨生。
5.权利要求4的白蛋白衍生物或变体，其中所述域III或衍生物或其变体与SEQID NO: 31或SEQ ID NO: I的氨基酸381至585具有至少80%序列同一性，优选至少85%序列同一性，更优选至少90%序列同一性，甚至更优选至少90%序列同一性和最优选至少98%序列同一I"生。
6.权利要求I至5任一项的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述至少一种其它白蛋白域，片段或衍生物或其变体选自域I，域II和域III。
7.权利要求6的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述至少一种其它白蛋白域，片段或衍生物或其变体来源于人血清白蛋白；灵长类血清白蛋白，如黑猩猩血清白蛋白，大猩猩血清白蛋白或恒河猴/猕猴血清白蛋白；啮齿类血清白蛋白如兔血清白蛋白，小鼠白蛋白和大鼠血清白蛋白；牛血清白蛋白；马类血清白蛋白；驴血清白蛋白；仓鼠血清白蛋白；山羊血清白蛋白；绵羊血清白蛋白；犬血清白蛋白；豚鼠血清白蛋白；鸡血清白蛋白和猪血清白蛋白。
8.权利要求7的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述白蛋白衍生物或变体由如下组成来源于人血清白蛋白的域I和II和来源于兔血清白蛋白的域III (例如SEQ ID NO:25)，来源于兔血清白蛋白的域I和II和来源于人血清白蛋白的域III (例如SEQ ID NO:26)，来源于绵羊血清白蛋白的域I和II和来源于人血清白蛋白的域III (例如SEQ IDNO:27)，来源于人血清白蛋白的域I和II和来源于小鼠血清白蛋白的域III (例如SEQ ID NO:29)，来源于人血清白蛋白的域I和II和来源于绵羊血清白蛋白的域III (例如SEQ ID NO: 28)，或来源于小鼠血清白蛋白的域I和II和来源于人血清白蛋白的域III (例如SEQ ID NO:30)。
9.权利要求7的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述至少一种其它白蛋白域，片段或衍生物或其变体与它的亲本白蛋白的对应域具有至少80%序列同一性，优选至少85%序列同一性，更优选至少90%序列同一性，甚至更优选至少90%序列同一性和最优选至少98%序列同一性。
10.权利要求8的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述至少一种其它白蛋白域，片段或衍生物或其变体与具有SEQ IDN0:31或SEQ ID NO: I的HSA的对应域具有至少80%序列同一性，优选至少85%序列同一性，更优选至少90%序列同一性，甚至更优选至少90%序列同一性和最优选至少98%序列同一性。
11.前述任一项权利要求的白蛋白衍生物或变体，其片段或融合多肽，其中所述白蛋白衍生物或变体，其片段或融合多肽包含选自下组的氨基酸序列或由选自下组的氨基酸序列组成(i)由人血清白蛋白域I和人血清白蛋白域II组成的分子(例如SEQ ID NO:20)( )由人血清白蛋白域II和人血清白蛋白域III组成的分子(例如SEQ ID N0:21),(iii)由人血清白蛋白域I和人血清白蛋白域III组成的分子(例如SEQID NO:22),和(iv)由人血清白蛋白域III的两个拷贝组成的分子(例如SEQID N0:24)。
12.权利要求I至11任一项的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中至少一个域III在对应于SEQ ID NO: 31或SEQ ID NOil(HSA)中选自下组的位置的位置包含一个或多个取代573, 500，550，417，440，464，490，492，493，494，495，496，499，501，503，504，505， 506，510，535，536，537，538，540，541，542，574，575，577，578，579，580，581,582 和 584。
13.权利要求12的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其中所述在对应于SEQ ID NOil(HSA)中的位置的位置的一个或多个取代选自K573Y, W, P，H，F，V，I, Τ, N, S, G, Μ, C，A, E, Q, R, L, D, K500E, G, D, A, S, C, P, H, F, N, ff, T, M, Y, V, Q, L, I, R, Q417A, H440A, H464Q, E492G, D494N, Q, A, E495Q, A, T496A, D494E+Q417H, D494N+T496A, E492G+V493P, P499A, E501A, Q, N503H, K, H510Q, H535Q, K536A, P537A, K538A, K541G, D, D550E, N, E492G+K573P, A,或 E492G/N503H/K573P。
14.前述任一项权利要求的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其包含一个或多个其它突变，所述突变在分子表面构筑一个或多个巯基基团。
15.权利要求14的白蛋白衍生物或变体，其片段或者包含所述白蛋白衍生物或变体或其片段或由所述白蛋白衍生物或变体或其片段组成的融合多肽，其具有选自对应于如下的取代的组的取代SEQ ID N0:31 或SEQ ID NO: I 中的 L585C，D1C，A2C，D562C，A364C，A504C， E505C, T79C, E86C, D129C, D549C, A581C, D121C, E82C, S270C, A578C, L595LC, D1DC, A2AC, D562DC, A364AC, A504AC, E505EC, T79TC, E86EC, D129DC, D549DC, A581AC, A581AC, D121DC, E82EC, S270SC, A579AC, C360*，C316*，C75*，C168*，C558*，C361*，C91*，C124*，C169* 和 C567*。
16.一种缀合物，其包含根据权利要求I至15任一项的白蛋白衍生物或变体或其片段， 和结合于白蛋白部分的治疗性或诊断性或其它有益模块。
17.一种核酸，其编码权利要求I至15任一项的白蛋白衍生物，其片段或包含所述白蛋白衍生物或其片段或由所述白蛋白衍生物或其片段组成的融合多肽，优选包含于质粒或表达构建体中。
18.—种宿主细胞，其包含权利要求17的核酸。
19.一种组合物，优选药物组合物，其包含权利要求I至15的白蛋白衍生物，其片段或融合多肽或包含所述白蛋白衍生物或其片段的缔合物。
20.前述任一项权利要求的白蛋白变体或衍生物或其融合物、缀合物、缔合物、组合物， 编码所述变体，衍生物或融合物的核酸或宿主细胞，所述白蛋白变体，衍生物，或其衍生物、 缀合物、缔合物或组合物具有(i)与天然HSA和/或包含天然HSA的融合物或缀合物，缔合物或组合物相比较长的血浆半寿期，或(ii)与天然HSA和/或包含天然HSA的融合物或缀合物，缔合物或组合物相比较短的血浆半寿期。
21.前述任一项权利要求的白蛋白变体或衍生物，其缀合物，缔合物，组合物，编码前述任一项权利要求的融合物的核酸或宿主细胞，所述融合物、缀合物、缔合物或组合物具有 (i)与包含天然HSA的白蛋白融合物，缀合物，缔合物或组合物相比较长的血浆半寿期，或 ( )与包含天然HSA的融合物，缀合物，缔合物或组合物相比较短的血浆半寿期。
22.前述任一项权利要求的白蛋白变体或衍生物的融合物，或其缀合物或缔合物或组合物，其中所述融合物或缀合物或缔合物包含一个或多个选自如下的模块(i)4-lBB配体，5-螺旋，人C-C趋化因子，人L105趋化因子，命名为huL105_3.的人 L105趋化因子，由Y-干扰素诱导的单核因子(MIG)，部分CXCR4B蛋白，血小板碱性蛋白 (PBP)，α I-抗胰蛋白酶，ACRP-30同源物;补体成分Clq C，腺样-表达的趋化因子(ADEC)， aFGF ；FGF-1, AGF, AGF 蛋白，白蛋白，依托泊苷(etoposide),血管他丁(angiostatin), 炭疽疫苗，对脑衰蛋白有特异性的抗体，antistasin,抗TGF β家族抗体，抗凝血酶 III (anti thrombin III), APM-I ;ACRP_30 ；Famoxin,载脂蛋白物种(apo-lipoprotein species),芳基硫酸酯酶B (Arylsulfatase B), b57蛋白，BCMA, β-血小板球蛋白蛋白(β-TG)，bFGF ;FGF2，凝血因子，BMP 加工酶 Furin，BMP-10，BMP-12，BMP-15，BMP-17， BMP-18, BMP-2B, BMP-4，BMP-5，BMP-6，BMP-9，骨形态形成蛋白-2，降钙素(calcitonin)， 钙激活中性蛋白酶-10a，钙激活中性蛋白酶-10b，钙激活中性蛋白酶-10c，癌症疫苗，羧肽酶，C-C 趋化因子，MCP2, CCR5 变体，CCR7, CCR7, CDlla Mab, CD 137受体蛋白，CD20 Mab, CD27, CD27L, CD30, CD30 配体，CD33 免疫毒素，CD40, CD40L, CD52 Mab, Cerebus 蛋白，嗜酸细胞活化趋化因子(Chemokine Eotaxin)，趋化因子hIL_8，趋化因子hMCPl， 趋化因子hMCPla，趋化因子hMCPlb，趋化因子hMCP2，趋化因子hMCP3，趋化因子hSDFlb， 趋化因子MCP-4，趋化因子TECK和TECK变体，趋化因子样蛋白IL-8M1全长和成熟，趋化因子样蛋白IL-8M10全长和成熟，趋化因子样蛋白IL-8M3，趋化因子样蛋白IL-8M8全长和成熟，趋化因子样蛋白IL-8M9全长和成熟，趋化因子样蛋白PF4-414全长和成熟， 趋化因子样蛋白PF4-426全长和成熟，趋化因子样蛋白PF4-M2全长和成熟，霍乱疫苗， Chondromodulin样蛋白，c_kit配体；SCF ;肥大细胞生长因子；MGF ;纤维肉瘤来源的干细胞因子，CNTF及其片段(如CNTFAxl5' (Axokine ))，前或活性形式的凝血因子，胶原，补体 C5 Mab，结缔组织活化蛋白-III，CTAA16. 88 Mab, CTAP-III, CTLA4_Ig，CTLA-8，CXC3, CXC3, CXCR3 ;CXC 趋化因子受体 3，cyanovirin-N，Darb印oetin，命名为 exodus，命名为 huL105_7.，DIL-40, DNA 酶，EDAR, EGF 受体 Mab，ENA-78，内皮他丁(Endostatin)，嗜酸细胞活化趋化因子(Eotaxin)，上皮嗜中性粒细胞活化蛋白-78，EPO受体；EP0R，红细胞生成素(erythropoietin) (EPO)和 EPO 模拟物，优托品(Eutropin), Exodus 蛋白，因子 IX,因子 VII，因子 VIII，因子 X 和因子 XIII，FAS 配体抑制蛋白(DcR3)，FasL, FasL, FasL, FGF, FGF-12 ;成纤维细胞生长因子同源因子-1，FGF-15, FGF-16，FGF-18，FGF-3 ；INT-2, FGF-4 ； 白树霉素(gelonin)，HST-I ;HBGF_4，FGF-5，FGF-6 ;肝素结合分泌的转化因子_2 Ofeparin binding secreted transformingfactor-2), FGF-8, FGF-9 ;神经胶质活化因子，纤维蛋白原(fibrinogen), flt-1, flt_3配体,促卵泡激素α亚基,促卵泡激素β亚基,促卵泡素 (Follitropin), Fractalkine,片段,肌纤维蛋白肌I丐蛋白I (Troponin I), FSH，半乳糖苷酶(Galactosidase),半乳凝素-4 (Galectin-4), G-CSF, GDF-1,基因疗法,神经胶质瘤衍生生长因子，胰高血糖素，胰高血糖素样肽，葡糖脑苷酯酶(Glucocerebrosidase),葡糖氧化酶(glucose oxidase),葡糖苷酶(Glucosidase), Glycodelin-A ;黄体酮相关子宫内膜蛋白，GM-CSF，促性腺素(gonadotropin)，粒细胞趋化蛋白_2 (GCP-2)，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子，生长激素，生长相关癌基因a (Growth related oncogene-α ) (GR0-α ), 生长相关癌基因β (Growthrelated oncogene-β (GRO-β )),生长相关癌基因Y (Growth related oncogene- y (GROi))，hAPO-4 ；TR0Y, hCG，乙型肝炎表面抗原，乙型肝炎疫苗， HER2 受体 Mab，水蛭素(hirudin), HIV gpl20, HIV gp41，HIV 抑制肽，HIV 抑制肽，HIV 抑制肽，HIV蛋白酶抑制肽，HIV-I蛋白酶抑制剂，HPV疫苗，人6CKine蛋白，人Act-2蛋白， 人脂肪形成抑制因子，人B细胞刺激因子_2受体，人β -趋化因子Η1305 (MCP-2)，人C-C 趋化因子DGWCC，人CC趋化因子ELC蛋白，人CC型趋化因子白细胞介素C，人CCC3蛋白， 人CCF18趋化因子，命名为SLC ( 二级淋巴样趋化因子)的人CC-型趋化因子蛋白，人趋化因子β -8短形式(short form)，人趋化因子C10，人趋化因子CC-2，人趋化因子CC-3，人趋化因子CCR-2，人趋化因子Ck β -7，人趋化因子ΕΝΑ-78，人趋化因子嗜酸细胞活化趋化因子，人趋化因子GROa，人趋化因子GROa，人趋化因子GROP，人趋化因子HCC-1，人趋化因子HCC-1，人趋化因子1-309，人趋化因子ΙΡ-10，人趋化因子L105_3，人趋化因子L105_7， 人趋化因子MIG，人趋化因子MIG-β蛋白，人趋化因子MIP-I a，人趋化因子MIPl β，人趋化因子MIP-3 a，人趋化因子ΜΙΡ-3 β，人趋化因子PF4，人趋化因子蛋白331D5，人趋化因子蛋白61164，人趋化因子受体CXCR3，人趋化因子SDFl a，人趋化因子SDFlP，人趋化因子 ZSIG-35，人Chrl9Kine蛋白，人CK β-9，人CK β-9，人CX3C 111氨基酸趋化因子，人DNAX 白细胞介素-40，人DVic-IC-C趋化因子，人EDIRF I蛋白序列，人EDIRF II蛋白序列，人嗜曙红细胞CC型趋化因子嗜酸细胞活化趋化因子，人嗜曙红细胞-表达的趋化因子(EEC)，人快速颤搐骨豁肌肌韩蛋白C (Human fast twitch skeletal muscle troponin C),人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白I，人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白亚基C，人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白亚基 I蛋白，人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白亚基T，人快速颤搐骨骼肌肌钙蛋白T，人胎儿脾脏表达的趋化因子，FSEC，人GM-CSF受体，人gro-α趋化因子，人gro-β趋化因子，人gro-γ趋化因子，人IL-16蛋白，人IL-1RD10蛋白序列，人IL-1RD9，人IL-5受体α链，人IL-6受体，人IL-8受体蛋白hIL8RA，人IL-8受体蛋白hIL8RB，人IL-9受体蛋白，人IL-9受体蛋白变体#3，人IL-9受体蛋白变体片段，人IL-9受体蛋白变体片段#3，人白细胞介素I δ，人白细胞介素10，人白细胞介素10，人白细胞介素18，人白细胞介素18衍生物，人白细胞介素-1β前体,人白细胞介素-1β前体，人白细胞介素-I受体辅助蛋白，人白细胞介素-I受体拮抗剂β，人白细胞介素-I型-3受体，人白细胞介素-10 (前体)，人白细胞介素-10 (前体)，人白细胞介素-11受体，人白细胞介素-1240kD亚基,人白细胞介素-12 β -I受体,人白细胞介素_12β -2受体，人白细胞介素_12ρ35蛋白，人白细胞介素_12ρ40蛋白，人白细胞介素-12受体,人白细胞介素-13 α受体,人白细胞介素-13 β受体,人白细胞介素_15， 来自克隆Pl的人白细胞介素-15受体，人白细胞介素-17受体,人白细胞介素-18蛋白 (IL-18)，人白细胞介素_3，人白细胞介素-3受体，人白细胞介素_3变体，人白细胞介素_4 受体，人白细胞介素_5，人白细胞介素_6，人白细胞介素-7，人白细胞介素-7，人白细胞介素-8 (IL-8)，人胞内IL-I受体拮抗剂，人ΙΡ-10和HIV-1 gpl20超变区融合蛋白，人IP-10 和人Muc-I核心表位(VNT)融合多肽，人肝和活化调节趋化因子(LARC)，人Lkn-I全长和成熟蛋白，人乳腺相关趋化因子(MACK)蛋白全长和成熟，人成熟趋化因子Cki3-7，人成熟 gro-a，用于治疗败血病的人成熟gro-Y多肽，人MCP-3和人Muc-I核心表位(VNT)融合蛋白，人MI10蛋白，人MIIA蛋白，人单核细胞化学引诱物因子hMCP-Ι，人单核细胞化学引诱物因子hMCP-3,人单核细胞趋化前蛋白(MCPP)序列,人神经趋化因子(neurotactin)趋化因子样域，人非-ELRCXC趋化因子Hl74，人非-ELR CXC趋化因子IP10，人非-ELR CXC趋化因子Mig，人PAI-I突变体，具有IL-16活性的人蛋白，具有IL-16活性的人蛋白，人二级淋巴样趋化因子(SLC)，人SISD蛋白，人STCP-1，人基质细胞衍生的趋化因子，SDF-1，人T 细胞混合淋巴细胞反应表达的趋化因子(TMEC)，人胸腺和活化调节细胞因子(TARC)，人胸腺表达的，人TNF- α，人TNF- α，人TNF- β (LT- α )，人类型CC趋化因子嗜酸细胞活化趋化因子3蛋白序列，人类型II白细胞介素-I受体，人野生型白细胞介素_4(hIL-4)蛋白，人 ZCHEM0-8蛋白，人源化抗VEGF抗体，及其片段，人源化抗VEGF抗体，及其片段，透明质酸酶 (Hyaluronidase), ICE IOkD 亚基，ICE 20kD 亚基，ICE 22kD 亚基，艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(Iduronate-2-sulfatase)，艾杜糖苷酸酶(Iduronidase)，IL-1 α，IL-1 β，IL-1 抑制剂 (IL-Ii)，IL-I 成熟，IL-10 受体，IL-11，IL-11，IL_12p40 亚基，IL-13，IL-14，IL-15，IL-15 受体，IL-17, IL-17受体，11-17受体，11-17受体，IL-19, IL-Ii片段，ILl-受体拮抗剂， IL-21 (TIF)，含IL-3的融合多肽，IL-3突变体蛋白，IL-3变体，IL-3变体，IL_4，IL-4突变蛋白，IL-4突变蛋白Y124G，IL-4突变蛋白Y124X，IL-4突变蛋白，11-5受体，IL-6，11-6 受体，IL-7受体克隆，IL-8受体，IL-9成熟蛋白变体(Metll7型)，免疫球蛋白或基于免疫球蛋白的分子，或任一者的片段(例如 Small Modular ImmunoPharmaceutical ( “SMIP”) 或dAb，Fab’片段，F(ab’)2，scAb，scFv或scFv片段)，包括但不限于纤溶酶原，流感疫苗， 抑制素(Inhibin) α，抑制素β，胰岛素，胰岛素样生长因子，整联蛋白Mab，间-α胰蛋白酶抑制剂，间-α胰蛋白酶抑制剂，干扰素Y-诱导蛋白(ΙΡ-10)，干扰素(如干扰素α种和亚种，干扰素β种和亚种，干扰素Y种和亚种)，干扰素(如干扰素α种和亚种，干扰素β种和亚种，干扰素Y种和亚种)，白细胞介素6，白细胞介素8(IL-8)受体，白细胞介素8受体B,白细胞介素-I α，白细胞介素-2受体相关蛋白ρ43,白细胞介素_3，白细胞介素-4突变蛋白，白细胞介素_8(IL-8)蛋白，白细胞介素_9，白细胞介素-9(IL-9)成熟蛋白 (Thrll7型)，白细胞介素(如IL10，IL11和IL2)，白细胞介素(如IL10，ILll和IL2)，日本脑炎疫苗，Kalikrein抑制剂,角质细胞生长因子,Kunitz域蛋白(如抑肽酶(aprotinin), 淀粉状前体蛋白和WO 03/066824中所述那些，具有或不具有白蛋白融合)，Kunitz域蛋白 (如抑肽酶(aprotinin)，淀粉状蛋白前体蛋白和WO 03/066824中所述那些，具有或不具有白蛋白融合)，LACI，乳铁蛋白(Iactoferrin)，潜在的TGF-β结合蛋白II，来普汀/瘦素 (Ieptin)，肝表达的趋化因子-I (LVEC-I)，肝表达的趋化因子-2 (LVEC-2)，LT-α，LT-β， 黄体化激素，莱姆病疫苗，淋巴细胞趋化因子(Lymphotactin)，巨噬细胞衍生的趋化因子类似物MDC (η+1)，巨噬细胞衍生的趋化因子类似物MDC-eyfy，巨噬细胞衍生的趋化因子类似物MDC-yl，巨噬细胞衍生的趋化因子，MDC,巨噬细胞衍生的趋化因子(MDC)，Maspin ;蛋白酶抑制剂5，MCP-I受体，MCP-la, MCP-lb, MCP-3，MCP-4受体，M-CSF，黑素瘤抑制蛋白，膜结合蛋白，Metll7人白细胞介素9，ΜΙΡ-3α，ΜΙΡ-3 β，MIP-Y，MIRAP，修饰的Rantes，单克隆抗体，MP52，突变白细胞介素6 S176R，肌纤维收缩蛋白肌钙蛋白I，利钠肽(Natriuretic Peptide),神经生长因子-β，神经生长因子_β 2,神经菌毛素(Neuropilin)-I,神经菌毛素_2，神经趋化因子，神经营养因子_3，神经营养因子-4，神经营养因子_4a，神经营养因子_4b，神经营养因子-4c，神经营养因子-4d，嗜中性粒细胞活化肽-2 (NAP-2) ,N0G0-66受体，NOGO-A, NOGO-B, N0G0-C，命名为PTEC的新β -趋化因子，N-端修饰趋化因子GroHEK/ hSDF-Ι α，N-端修饰趋化因子GroHEK/hSDF-Ι β，N-端修饰趋化因子met-hSDF-Ι α，N-端修饰趋化因子 met-hSDF-Ιβ，0PGL，成骨蛋白-I ;0Ρ_1 ;ΒΜΡ_7，成骨蛋白-2，0X40 ;ACT_4， 0X40L，催产素(神经垂体素运载蛋白I)，甲状旁腺素，Patched, Patched-2，PDGF-D，百日咳类毒素(Pertussistoxoid)，垂体表达的趋化因子(PGEC)，胎盘生长因子，胎盘生长因子_2，纤溶酶原活化物抑制剂-I ;PAI-1，纤溶酶原活化物抑制剂-2 ;PAI-2，纤溶酶原活化物抑制剂_2 ；PAI-2，血小板衍生的生长因子，血小板衍生的生长因子Bv-sis，血小板衍生的生长因子前体A，血小板衍生的生长因子前体B，血小板Mab，血小板衍生的内皮细胞生长因子(H)-ECGF)，血小板衍生的生长因子A链，血小板衍生的生长因子B链，用于治疗败血病的多肽，前原载脂蛋白“米兰”变体(Preproapolipoprotein “miIano” variant),前原载脂蛋白“巴黎”变体，前凝血酶(pre-thrombin)，灵长类CC趋化因子"ILINCK"，灵长类CXC趋化因子〃IBICK 〃，胰岛素原，促乳素(Prolactin)，促乳素2，prosaptide，蛋白酶抑制肽，蛋白C，蛋白S，凝血酶原，尿激酶原，RANTES, RANTES 8-68, RANTES 9-68, RANTES肽， RANTES受体,重组白细胞介素-16,抵抗素(Resistin),局限曲菌素(restrictocin),逆转录病毒蛋白酶抑制剂，蓖麻毒蛋白(ricin),轮状病毒疫苗，RSV Mab,阜草素(saporin), 八叠球菌(sarcin)，分泌和跨膜多肽，分泌和跨膜多肽，血清胆碱酯酶，血清蛋白(如凝血因子)，可溶性BMP受体激酶蛋白-3，可溶性VEGF受体，干细胞抑制因子，葡萄球菌疫苗， 基质衍生的因子-I α，基质衍生的因子-I β，物质P (速激肽)，Τ1249肽，Τ20肽，Τ4内切核酸酶，TACI, Tare, TGF-β 1，TGF-β 2，Thrll7人白细胞介素9，凝血酶，促血小板生成素 (thrombopoietin)，促血小板生成素衍生物1，促血小板生成素衍生物2，促血小板生成素衍生物3，促血小板生成素衍生物4，促血小板生成素衍生物5，促血小板生成素衍生物6，促血小板生成素衍生物7,胸腺表达的趋化因子(TECK),促甲状腺激素(Thyroid stimulating Hormone)，蜱抗凝肽，Tim-I 蛋白，TNF-α 前体，TNF-R, TNF-RII ；TNF p75 受体；死亡受体， tPA,转铁蛋白(transferrin),转化生长因子β ,肌I丐蛋白肽,截短的单核细胞趋化蛋白 2(6-76)，截短的单核细胞趋化蛋白2 (6-76)，截短的RANTES蛋白(3_68)，肿瘤坏死因子， 尿酸氧化酶，尿激酶，加压素(Vasopressin)(神经垂体素运载蛋白II), VEGF R-3 VEGF 受体；KDR ；flk-l, VEGF-110, VEGF-121, VEGF-138, VEGF-145, VEGF-162, VEGF-165, VEGF-182, VEGF-189, VEGF-206，VEGF-D, VEGF-E ；VEGF-X, von Willebrand 因子，野生型单核细胞趋化蛋白2，野生型单核细胞趋化蛋白2，ZTGF-β 9 ；(ii)化疗药如13_ 顺-视黄酸(13-cis-Retinoic Acid), 2_CdA, 2-氯脱氧腺苷(2-Chlorodeoxyadenosine),5_ 阿扎胞苷(5-Azacitidine),5_ 氟尿卩密 P定 (5-Fluorouracil), 5-FU, 6-疏基嘌呤(6_Mercaptopurine), 6-MP, 6-TG, 6-硫代鸟嘌呤(6-Thioguanine)，A, Abraxane, Acc.utane ，放线菌素 _D (Actinomycin-D)，阿霉素 (AdriamyciiT!-!')- Aiinicii^i, Agryiin^i, Ah-Cort电、阿地白介素(Aldesleukin),阿仑单抗 (Alemtuzumab),ALIMTA,阿利维 A 酸(Alitretinoin)，爱克兰(Alkenui.叫, 全反视黄酸(All-transretinoic Acid), α干扰素，六甲蜜胺(Altretamine),甲氨蝶呤(Amethopterin),氨憐汀(Amifostine),氨鲁米特(Aminoglutethimide),阿那格雷 (Anagrelide) , Anandron ，阿那曲唑(Anastrozole),阿糖胞苷(Arabinosylcytosine)， Ara-c, Aranesp ，Aredia Arimidex ，Aromasin > Arranon ，三氧化二 砷(Arsenic Trioxide)，天冬酰胺酶(Asparaginase)，ATRA, Avastin ,阿扎胞苷(Azacitidine), BCG, BCNU,贝伐单抗(Bevacizumab),贝沙罗汀(Bexarotene), BEXXAR⑩，比卡鲁胺(Bicalutamide), BiCNU,博来霉素(Bleomycin),Bortezomib,白消安(Busulfan), BusuIfbxH C225,亚叶酸隹丐(Calcium Leucovorin), Campaill , C'ainpiOSarj_C:’喜树喊-Il (Camptothecin-11)，卡培他滨(Capecitabine)， Carac ,卡钼(Carboplatin)，卡莫司汀(Carmustine)，Carmustine Wafer,康士德 (Casodex^·), CC-5013, CCNU, CDDP，CeeNU, Cenibiiiine^,西妥昔单抗(Cetuximab)， 苯丁酸氮芥(Chlorambucil)，顺钼(Cisplatin)，亚叶酸因子(Citrovorum Factor)， 克拉屈滨(Cladribine),可的松(Cortisone), Cosmcgcivli - CPT-II,环憐酸胺 (Cyclophosphamide), Cytadien.+ ，阿糖胞苷(Cytarabine)，阿糖胞苷脂质体(Cytarabine Liposomal)，赛德萨(C ytosar)-!丨 C ytoxan:-^;n 达卡巴曝(Dacarbazine)，Dacogen, 更生霉素(Dactinomycin)，Darbepoetin Alfa，Dasatinib,柔红霉素(Daunomycin)， 柔红霉素(Daunorubicin)，盐酸柔红霉素(DaunorubicinHydrochloride)，柔红霉素脂质体(Daunorubicin Liposomal)，DaunoXome ，地卡特隆(Decadron)，地西他滨 (Decitabine)，Delta-Cortef 5 DdtoSOne ，地尼白介素-毒素连接物(Denileukin diftitox)，DepoCyt ，地塞米松(Dexamethasone)，醋酸地塞米松(Dexamethasone acetate)，地塞米松憐酸钠(Dexamethasone SodiumPhosphate)，地塞米松(Dexasone)， 右雷佐生(Dexrazoxane)，DHAD, DIC, Diodex,多西紫杉醇(Docetaxel)，:Doxii:K，多柔比星(Doxorubicin)，多柔比星脂质体(Doxorubicin liposomal)，Droxia ，DTIC， DTIC-Dome , Duralone , Efildex , Eligard , Ellence ，乐沙定(Eloxatin) , Elspar $ Emcyt 3 表柔比星(Epirubicin)，阿法依伯汀(Epoetin alfa)， Erbitux ，Erlotinib，欧文氏菌属 L-天冬酸胺酶(Erwinia L-asparaginase)，雌莫司汀(Estramustine)，氨憐汀(Ethyol)，Etopoplios ，依托泊苷(Etoposide)，憐酸依托泊苷(Etoposide Phosphate)，Eulexifl ，Evista ,依西美坦(Exemestane)，法乐通 (FarestOfl) , Faslodex ,Femara ，非格司亭(Filgrastim)，氟尿苷(Floxuridine)， Hudara⑩，氟达拉滨(Fludarabine)，Fluoroplex ，氟尿啼 P定(Fluorouracil)，氟尿啼 P定(Fluorouracil)(乳膏)，氟甲睾酮(Fluoxymesterone)，氟他胺(Flutamide)，亚叶酸(Folinic Acid)，HDRt氟维司群(Fulvestrant), G-C SF, Gefitinib,吉西他滨(Gemcitabine)，吉姆单抗(Gemtuzumab)奥佐米星(ozogamicin)，健择(Geilizar) ， Gleevec m, GliadelGM-CSF，戈舍瑞林(Goserelin)，粒细胞集落剌激因子，粒细胞巨噬细胞集落剌激因子，Halotestin 5 Hereeptin ，地塞米松(Hexadrol)，克瘤灵(HeMlen)(I)3 六甲蜜胺(Hexamethylmelamine)，HMM,和美新(Hycamtill) 5 轻基服 (Hydrea) ，醋酸氢化可的松(Hydrocort Acetate) ，氢化可的松(Hydrocortisone)， 氢化可的松磷酸钠(Hydrocortisone Sodium Phosphate)，氢化可的松琥拍酸钠 (Hydrocortisone Sodium Succinate)，氢化可的松憐酸(HydrocortonePhosphate)，轻服(Hydroxyurea)，替伊莫单抗(Ibritumomab)，替伊莫单抗(Ibritumomab Tiuxetan)， Idamycine^伊达比星(Idarubicin)，Ifex 3 IFN- α，异环磷酰胺(Ifosfamide)，IL-11， IL-2，甲横酸伊马替尼(Imatinib mesylate)，咪唑羧酸胺(Imidazole Carboxamide)，干扰素alfa,干扰素Alfa-2b (PEG缀合物)，白细胞介素_2，白细胞介素-11，Intron A (干扰素 alfa-2b)，Iressa 伊立替康(Irinotecan)，异维 A 酸(Isotretinoin)， Kidroiasc^ l.aimori私 Lapatinib, L-天冬酰胺酶，LCR, Lenalidomide,来曲唑 (Letrozole)，亚叶酸妈(Leucovorin)，苯丁酸氮芥(Leukeran)，Leukine ，亮丙瑞林 (Leuprolide)，长春新减(Leurocristine)，Leustatin ，脂质体 Ara_C，Liquid Pred 3 洛莫司汀(Lomustine)，L-PAM, L-沙可来新(L-Sarcolysin)，Lupron 5 Lupron Depot ， M，M a TH lane:H i Max i dex,氮芥(Mechlorethamine)，盐酸氮芥(Mechlorethamine Hydrochloride)，Medraloiie .美卓乐(Medrol)·，梅格施(Megaee) 5 甲地孕酮 (Megestrol)，醋酸甲地孕酮(Megestrol Acetate)，美法仑(Melphalan)，疏卩票呤 (Mercaptopurine)，美司钠(Mesna)，Mesnex ，甲氨蝶呤(Methotrexate)，甲氨蝶呤钠(Methotrexate Sodium)，甲泼尼龙(Methylprednisolone)，丝裂霉素 (Mitomycin)，丝裂霉素-C (Mitomycin-C)，米托蒽醌(Mitoxantrone)，M-Prednisol , MTC，MTX，Mustargen⑩，氮芥(Mustine)，Mutamycin⑩，马利兰(Myleran)⑩,Mylocel , Mylotarg ，诺维本(Navdbine) ’ 萘拉滨(Nelarabine)，Neosar ^ Neulasta , Neumega 5优保津《Neupogen) ，Nexavar , Nilandron ，尼鲁米特(Nilutamide)， Nipent ，氮芥(Nitrogen Mustard)，Novaldex ，能灭瘤(Novantrone) i 奥曲肽 (Octreotide)，醋酸奥曲月太(Octreotide acetate)，OllCOSpar ，安可平(Oncovin) , Ontak 5 Onxal ，Oprevelkin，Orapred_, 0_Olie 5奥沙利钼(Oxaliplatin)，紫杉醇(Paclitaxel)，蛋白结合紫杉醇，帕米磷酸(Pamidronate)，Panitumumab,panretin^；1 J白尔定(Paraplatin)⑩，Pediapred ,PEG 干扰素，培门冬酶(Pegaspargase)，PEG 菲格司亭(Pegfilgrastim)，PEG-INTRON ，PEG-L-天冬酰胺酶，培美曲塞(PEMETREXED)，喷司他丁(Pentostatin)，苯丙氨酸氮芥(Phenylalanine Mustard), !iIatinoI^'- Phitinol-AQ 泼尼松龙(Prednisolone)，泼尼松(Prednisone)，Preloiie ，丙卡巴肼(Procarbazine), PROCRin 丨h.olcukinK、具有卡莫司汀(Carmustine)植入物的 Prolifeprospan 20， Purinethol ，R，雷洛昔芬(Raloxifene)，Revlimid . Rheumatrex , Ritiixan , 利妥昔单抗(Rituximab)，Roferon-A (干扰素Alfa_2a)，Rubex ，柔红霉素盐酸盐(Rubidomycinhydrochloride)，善得定(Sandostatin) 3 Sandostatin LAR , 沙格司亭(Sargramostim)，Sok卜Corte働，Solll-Medrol 5 Sorafenib, SPRYCEL , STI-571，链佐星(Streptozocin)，SU11248，Sunitinib, Slltent 5他莫昔芬(Tamoxifen)， Tarceva , Targrctin 5 泰素(Taxol) ，泰索帝(Taxotere) ，Temodar ,替莫唑胺(Temozolomide)，替尼泊苷(Teniposide)，TESPA，沙利度胺(Thalidomide)， Thalomid ，TheraCys ，硫鸟卩票呤(Thioguanine)，Thioguanine Tabloid , Thiophosphoamide， Thioplex⑩，塞替派(Thiotepa)，TICE , Toposar ，托泊替康(Topotecan)，托瑞米芬(Toremifene)，托西莫单抗(Tositumomab)，曲妥单抗 (Trastuzumab),维 A酸(Tretinoin)，Trexall , Tris€I10X TSPA, TYKERB ，VCR， Vectibix ，Vdban⑩，Veleade⑩，凡毕士(VePeski) ，Vesanoid , Viadur , Vidaa , 长春碱(Vinblastine)，硫酸长春碱(Vinblastine Sulfate)，Vincasar PfggJ5长春新碱 (Vincristine)，长春瑞滨(Vinorelbine)，酒石酸长春瑞滨(Vinorelbinetartrate), VLB, vm-26, Vorinostat, VP-16，威猛(Vumoii) ，希罗达((Xdoda) ^Zanosar 5Zevalin , Zinecard ，诺雷德(Zoladex) ，P坐来膦酸(Zoledronic acid) , Zolinza, Zometa ;放射性药品如碳-11，碳-14，铬-51，钴-57，钴-58，铒-169，氟-18，镓-67，金-198，铟-111， 铟-113m，碘-123，碘-125，碘-131，铁-59，氪-81m，氮-13，氧-15，磷-32，铼-186，铷-82， 衫-153,砸-75,银-89,得-99m, 它-201,氣,氣 _127，氣 _133，宇乙-90 ;和 / 或(iii)显像剂如礼，磁铁矿/磁石(magnetite),猛,锝，1125, 1131, P32, T1201,碘帕醇 (Iopamidol), PET-FDG0
全文摘要
本发明公开了包含或组成为域III和至少一种其它域的白蛋白衍生物，其中所述衍生物或变体并非天然存在的白蛋白衍生物或变体。所述衍生物可用于缀合物和融合物多肽。
文档编号C07K14/765GK102939304SQ201180028537
公开日2013年2月20日 申请日期2011年4月8日 优先权日2010年4月9日
发明者A·普鲁姆里奇, D·斯里普, I·桑德利, J·T·安德森, J·卡梅隆, L·伊万斯, G·S·阿思瓦尔, E·阿伦, E·P·弗里斯 申请人:诺维信生物制药丹麦公司