专利名称：一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙a单体的方法
技术领域：
本发明涉及一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，特别是一种简便易行的、适合规模化生产的，通过混合溶剂重结晶法分离精制瑞鲍迪甙A单体成分的方法。
背景技术：
甜叶菊(stevia rebaudiana Bertoni)，又称甜菊，双子叶植物纲，多年生草本植物，菊科斯台维亚属，原产于南美巴拉圭东北部与巴西接壤的阿曼拜山脉，从其叶片到茎部都能提炼出甜味物质。八十年代初引进我国种植，是新型糖源植物。甜菊糖甙fstevioside)，简称甜菊糖，是从甜叶菊叶片中提取得到的一种高甜度、 低热量的天然甜味剂121。甜菊糖甙纯品是白色、无嗅的结晶性粉末，熔点198°C，易溶于水，可溶于甲醇、乙醇、四氢呋喃，不溶于苯、醚、氯仿等有机溶剂。甜菊糖甙对酸、碱、盐稳定，有较好的耐热性和很小的吸潮性；甜菊糖甙具有非发酵性，不影响食品的凝固性、粘稠性，并且有非着色性，不会引起美拉德褐色反应；仅有少数几种酶能使其水解；在人体内大都不被代谢，基本以原来状态排出。甜菊糖甙的甜度相当于蔗糖的200 350倍，热量仅为蔗糖的200 300分之一，特别适合肥胖病、糖尿病、高血压、动脉硬化、龋齿病患者使用，是可替代蔗糖的理想的健康新糖源日1，广泛用于食品、药品等相关领域。目前为止，己从甜叶菊中分离得到8种不同甜度的糖甙。其中Mevioside是主要成分占60% 70%，甜度为蔗糖的300倍；其次是瑞鲍迪甙A (RebaudiosideA),占15% 20%，甜度为蔗糖的450倍，且甜味最接近蔗糖，无后苦味，经济利用价值最高。早期我国的甜菊糖甙提取方法主要是水浸提法，随着我国高新技术的发展，超临界流体萃取、超声波强化提取、微波提取、连续逆流提取等技术也逐步应用于糖甙的提取中，其中连续逆流提取相比于其它三种技术研究的较少，也是目前研究的热点。
发明内容
本发明的目的是提供一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法。该方法采用混合溶剂重结晶法分离精制瑞鲍迪甙A单体成分，工艺过程简便易行，适合规模化生产。本发明的技术方案概述如下
一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，包括如下步骤
1. 一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，其特征是包括如下步骤
(1)将甜叶菊提取物原料以其重量1 5倍的混合溶剂A复溶，在带有磁力搅拌装置的可控恒温结晶罐中，勻速搅拌12 48小时，缓慢重结晶；
(2)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的乙醇冲洗滤饼；
(3)得到的滤饼以原料重量2 3倍的混合溶剂B充分进行分散，静态浸泡12 M小
时；
(4)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的混合溶剂B冲洗滤饼；
(5)滤饼60°C下真空干燥24小时，粉碎过筛即得到高纯度的瑞鲍迪甙A单体产品。
所述甜叶菊提取物为市售总甜菊糖苷含量40%规格的粗品产品。所述步骤(1)混合溶剂A为(95%乙醇乙酸乙酯水=145 35 20)或(95%乙醇 丙酮水=150 25 25)。所述步骤(1)混合溶剂A的用量优选为原料重量的2 4倍。所述步骤(1)勻速搅拌的时间优选为M 48小时。所述步骤(3)混合溶剂B为无水乙醇或(95%乙醇乙酸乙酯冰=75 15 10)。本发明的优点是
1、我国是世界上最大的甜菊原料生产国，我国已有30多年的甜叶菊栽培历史，包括新云南、安徽、山东、江苏、江西等地均有种植，而产地甜菊糖生产厂家往往规模小，技术水平低，低含量粗品原料产量大、价格低，生产原料容易获得，宜形成规模化生产；
2、本发明充分利用了瑞鲍迪甙A与甜叶菊提取物中各甜甙类成分在若干混合溶剂中溶解度的差异，采用混合溶剂重结晶法分离精制瑞鲍迪甙A单体成分，工艺过程简便易行， 适合规模化生产；
3、依照本发明分离提纯得到的瑞鲍迪甙A单体含量最高可达99.5%，且产品颜色洁白。
具体实施例方式本发明采用的原料甜叶菊提取物为市售总甜菊糖苷含量40%规格的粗品产品。甜叶菊提取物总甜菊糖苷含量不得低于40%。各实施例用高效液相法分析样品中瑞鲍迪甙A的含量。实施例1
(1)将甜叶菊提取物原料以其重量4倍的混合溶剂(95%乙醇乙酸乙酯水=145 35 20)复溶，在带有磁力搅拌装置的可控恒温结晶罐中，勻速搅拌48小时，缓慢重结晶；
(2)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的乙醇冲洗滤饼；
(3)得到的滤饼以原料重量2倍的无水乙醇充分进行分散，静态浸泡12小时；
(4)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的无水乙醇冲洗滤饼；(5)滤饼60°C下真空干燥M小时，粉碎过筛即得到瑞鲍迪甙A含量96.59%。实施例2
(1)将甜叶菊提取物原料以其重量2倍的混合溶剂(95%乙醇乙酸乙酯水=145 35 20)复溶，在带有磁力搅拌装置的可控恒温结晶罐中，勻速搅拌36小时，缓慢重结晶；
(2)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的乙醇冲洗滤饼；
(3)得到的滤饼以原料重量3倍的混合溶剂(95%乙醇乙酸乙酯水=7515 10)充分进行分散，静态浸泡M小时；
(4)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的混合溶剂(95%乙醇乙酸乙酯水=75 :15:10)冲洗滤饼；
(5)滤饼60°C下真空干燥M小时，粉碎过筛即得到瑞鲍迪甙A含量95.44%。实施例3
(1)将甜叶菊提取物原料以其重量3倍的混合溶剂(95%乙醇丙酮水=150 25 25) 复溶，在带有磁力搅拌装置的可控恒温结晶罐中，勻速搅拌M小时，缓慢重结晶； (2)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的乙醇冲洗滤饼；(3)得到的滤饼以原料重量3倍的无水乙醇充分进行分散，静态浸泡M小时；
(4)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的无水乙醇冲洗滤饼；
(5)滤饼60°C下真空干燥M小时，粉碎过筛即得到瑞鲍迪甙A含量99.63%。实施例4
(1)将甜叶菊提取物原料以其重量3倍的混合溶剂(95%乙醇丙酮水=150 25 25) 复溶，在带有磁力搅拌装置的可控恒温结晶罐中，勻速搅拌48小时，缓慢重结晶；
(2)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的乙醇冲洗滤饼；
(3)得到的滤饼以原料重量3倍的混合溶剂(95%乙醇乙酸乙酯水=7515 10)充分进行分散，静态浸泡M小时；
(4)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的混合溶剂(95%乙醇乙酸乙酯水=75 :15:10)冲洗滤饼；
(5)滤饼60°C下真空干燥M小时，粉碎过筛即得到瑞鲍迪甙A含量97.53%。实施例5
(1)将甜叶菊提取物原料以其重量1.5倍的混合溶剂(95%乙醇乙酸乙酯水=145 35 20)和1. 5倍的混合溶剂(95%乙醇丙酮水=150 25 25)复溶，在带有磁力搅拌装置的可控恒温结晶罐中，勻速搅拌48小时，缓慢重结晶；
(2)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的乙醇冲洗滤饼；
(3)得到的滤饼以原料重量3倍的无水乙醇充分进行分散，静态浸泡M小时；
(4)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的无水乙醇冲洗滤饼；
(5)滤饼60°C下真空干燥M小时，粉碎过筛即得到瑞鲍迪甙A含量98.35%。
权利要求
1.一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，其特征是包括如下步骤(1)将甜叶菊提取物原料以其重量1 5倍的混合溶剂A复溶，在带有磁力搅拌装置的可控恒温结晶罐中，勻速搅拌12 48小时，缓慢重结晶；(2)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的乙醇冲洗滤饼；(3)得到的滤饼以原料重量2 3倍的混合溶剂B充分进行分散，静态浸泡12 M小时；(4)以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以原料重量相等的混合溶剂B冲洗滤饼；(5)滤饼60°C下真空干燥M小时，粉碎过筛即得到高纯度的瑞鲍迪甙A单体产品。
2.根据权利要求1所述的一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，其特征是所述甜叶菊提取物为市售总甜菊糖苷含量40%规格的粗品产品。
3.根据权利要求1所述的一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，其特征是所述步骤(1)混合溶剂A为(95%乙醇乙酸乙酯水=145 35 20)或(95%乙醇丙酮 水=150 25 :25)。
4.根据权利要求1所述的一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，其特征是所述步骤(1)混合溶剂A的用量为原料重量的2 4倍。
5.根据权利要求1所述的一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，其特征是所述步骤(1)勻速搅拌的时间为M 48小时。
6.根据权利要求1所述的一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，其特征是所述步骤(3)混合溶剂B为无水乙醇或(95%乙醇乙酸乙酯水=75 15 10)。
全文摘要
本发明公开了一种从甜叶菊提取物中分离瑞鲍迪甙A单体的方法，步骤为将甜叶菊提取物原料以其重量1～8倍的混合溶剂A复溶，在带有磁力搅拌装置的可控恒温结晶罐中，匀速搅拌24～48小时，缓慢重结晶。以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以乙醇冲洗滤饼；得到的滤饼以混合溶剂B充分进行分散，浸泡12～24小时；以滤纸抽滤方式进行固液分离，同时以混合溶剂B冲洗滤饼。滤饼60℃下真空干燥24小时，粉碎过筛即得到高纯度的瑞鲍迪甙A单体产品。本发明的方法，充分利用了瑞鲍迪甙A与甜叶菊提取物中各甜甙类成分在若干混合溶剂中溶解度的差异，采用混合溶剂重结晶法分离精制瑞鲍迪甙A单体成分，工艺过程简便易行，适合规模化生产。
文档编号C07H1/08GK102351925SQ20111028720
公开日2012年2月15日 申请日期2011年9月26日 优先权日2011年9月26日
发明者孙华庚 申请人:天津市尖峰天然产物研究开发有限公司