专利名称：吲哚类钙离子荧光探针及其制备方法和用途的利记博彩app
技术领域：
本发明属于钙离子荧光指示剂的合成技术领域，特别涉及具有高量子产率及荧光 信号的钙离子荧光指示剂的合成与应用。
背景技术：
钙是生命体内重要的金属元素之一，调节生命体一系列重要的生理活动，如细胞 的胞吞、胞饮、神经递质释放、DNA合成、细胞分裂、乃至细胞死亡等细胞的代谢与功能的调 节作用，细胞钙几乎涉及到细胞的所有生理和生化过程。钙离子作为细胞内的第二信使还 参与生物信号的跨膜传递，介导细胞对外界刺激的应答反应等。细胞内钙离子的分布是极不均勻的，细胞内外之间以及胞内各个细胞器与胞质之 间存在着较大的浓度梯度，在胞质与胞内钙库、胞质与胞外Ca2+之间均存在有大的浓度梯 度，相差约;Γ4个数量级，正是由于其分布的不均一性及其时空变化构成了细胞钙离子信 号的基础。因此，实时、准确地测定静息态和激发态细胞内Ca2+的浓度、时空分布，研究其与 细胞功能的关系具有十分重要的意义。理想的胞内Ca2+测定方法须能够在亚细胞水平无损伤地、直接、迅速、实时地提供 细胞内任意部位的Ca2+的动态变化信息。细胞内游离钙Ca2+浓度测定在技术上有着如下 的要求(1)对活细胞无损伤或生理条件下研究细胞钙，不干扰细胞内正常的生理、生化过 程；(2)灵敏度高，检出限应达10_7 mol/L;(3)选择性好，由于细胞内其它一些无机离子如 Mg2+、Na+、K+和Cl—等的浓度均在10_3 mol/L水平，故要求测定方法特异性强；(4)响应速度 快，为了测定钙浓度的变化，要求测定方法对Ca2+浓度变化的响应快于细胞内Ca2+信号引起 的相关生理和生化反应；(5)时空分辨率高，能实时、原位地提供胞内各细胞区域钙信号聚 散涨落的彼此独立又相互关联的信息。人们常常要根据各种方法的特点，按照所进行实验 的具体要求而选择不同的测定方法，如生物发光蛋白法、有机显色剂法、离子传感器法、微 电极法、核磁共振法，荧光探针法等。荧光探针法是目前应用最为广泛且非常有效的一种途 径，此技术的核心是高效选择性分子探针与细胞内钙离子螯合，并在激发光下发出荧光，来 显示钙离子浓度。
发明内容
本发明的目的是提供一种新型吲哚素类钙离子探针的甲酯形式作为细胞钙识别 的探针，该探针对钙离子具有较强的选择识别性，且激发波长红移至可见光区，减少对于细 胞的损伤，便于活细胞检测。本发明提供的吲哚素类钙离子指示剂甲酯形式具有以下结构其合成路线如下
权利要求
1.结构式(I)所示吲哚素类钙离子指示剂，R为H或甲基；Rl至R7独立地选自H、卤素或甲基。
2.根据权利要求1所述的吲哚素类钙离子指示剂，其特征在于所述结构为
3.权利要求1所述的吲哚素类钙离子指示剂的制备方法，以4-甲基邻硝基苯酚为原 料，与1-溴-2-氯乙烷发生取代反应，产物再与2-硝基-5-甲基苯酚反应，经过铁还原，溴 乙酸甲酯取代，Vilsmeier反应得到类BAPTA醛，其特征在于(1)以DMF为溶剂，类BAPTA醛(f)与溴化乙醛缩乙二醇三苯基磷、氢化钠在90°C反
全文摘要
本发明公开了结构式(I)所示吲哚素类钙离子指示剂，其中 R为H或甲基；R1至R7独立地选自H、卤素或甲基。本发明在发色团结构中增加了双键，共轭效应增大，激发波长红移，处于或接近可见光区，使用过程中减少了紫外光对细胞的损害，有利于观察和检测。
文档编号C07D209/14GK102093885SQ20111005129
公开日2011年6月15日 申请日期2011年3月4日 优先权日2011年3月4日
发明者史真, 成昭, 李剑利, 第五振军, 雷磊 申请人:西北大学