肝病病情指标糖链标记物的利记博彩app

专利名称：：肝病病情指标糖链标记物的利记博彩app
技术领域：
：本发明涉及ー种以上的、具有糖链的肝病病情指标糖链标记物，具体而言，这种标记物能够通过肽和蛋白质上的糖链变化而成为肝病病情的指标。此外，本发明还涉及以下标记物该标记物根据糖链的不同检测出肝细胞癌、炎症、纤维化这些基础肝(underlyingliver)状态。
背景技术：
：肝癌大致可以分为在肝脏发生的原发性肝癌、以及转移性肝癌，一般说来，原发性肝癌的90%都是肝细胞癌。在肝细胞癌患者的基础疾病中，多数都是感染了丙型肝炎病毒或こ型肝炎病毒，并从急性病毒性肝炎转为慢性病毒性肝炎、肝硬化，一般来说，患病毒性肝炎后再经过很长一段时间才会发生癌变。在肝硬化中，由于炎症和再生会反复进行，所以正常肝细胞減少，而变为由纤维组织构成的器官。比如，丙型肝炎患者仅在日本就有300万人，在中国和非洲据说有1000多万人。在こ型和丙型肝炎患者中，从慢性肝炎转为癌症的比率如下轻度慢性肝炎(Fl)的年率为O.8%，中度慢性肝炎(F2)的年率为O.9%，而重度慢性肝炎(F3)的年率则达到了3.5%，肝硬化(F4)转为癌症的概率ー跃上升为年率7%(图2、3)。在肝病中，随着病情的发展，组织学图像会发生变化(图1)，首先在慢性肝炎时期肝功能开始消失，在肝硬化时期出现病态结构，肝脏也会逐渐纤维化等。在癌症治疗中，癌症的早期发现非常重要，肝细胞癌也是如此，癌症的早期发现对治疗和术后预后具有很大影响。进行了肝切除治疗后的5年存活率在I期为80%，在IV期中则不超过38%。迄今为止已知的肝癌标记物有甲胎蛋白(AFP)和通过维生素K缺乏或拮抗剂II诱守的S白质(PIVKA_II,proteininducedbyVitaminKabsenceorantagonist-IIバ专利文件1、2)，但其特异性和敏感性都不够。因此，现在为了早期发现肝癌，检查和诊断中使用的都是肝癌标记物、超声波检查、计算机断层摄影(CO、核磁共振成像法(MRI)等图像检查。先行技术文件专利文件专利文件I:特开平10-26622号专利文件2:特开平8-184594号。发明概要发明要解决的课题本发明的课题在于开发出能够检测肝病的糖链标记物，更具体而言，本发明的课题是开发出充当肝病病情的指标的糖链标记物。本发明的课题还在于开发出能够根据肝细胞癌的发展来区别肝病病情的糖链标记物。此外，本发明的课题在于开发出充当肝病病情指标糖链标记物的肝细胞癌糖链标记物、肝硬化糖链标记物、慢性肝炎糖链标记物、以及肝纤维化糖链标记物。以丙型肝炎为例，一般认为从肝硬化转为肝细胞癌的概率为年率7%左右，现在，为了检测出上述癌变，肝硬化患者每三个月就要接受一次检查。为了简化这种从肝硬化至癌变的检查，本发明的课题还在于提供以下能够通过如血液检查等来检测出癌变的肝细胞癌标记物。此外，关于以往的由蛋白质构成的癌标记物等，主要看的是其在癌症中的表达量的増加，但很多蛋白质在正常细胞中也会进行表达。因此，通过比较表达量的程度来判断癌变往往比较困难。因此，本发明还有如下课题提供简便的肝细胞癌标记物，且在该标记物中不仅仅比较表达量。此外，在向肝细胞癌发展的过程中，如果能够确定该发展过程中的疾病的基础的话，有望控制癌症的发展。因此，本发明还有如下课题提供能够确定肝细胞癌的基础疾病的肝病病情标记物。此外，从蛋白质组学的角度研究以前的疾病病情指标标记物时，如探索癌相关的糖链标记物等时，存在ー个问题，即没有建立在以下两种技术之上的方法技术①从细胞和病理切片中浓缩具有癌等的疾病病情特异性的糖链的蛋白质、技术②鉴别后的标记物候·补蛋白质的糖链的结构分析技木。因此，本发明的课题还在于通过以糖蛋白组学为基础的疾病标记物的探索方法，来探索肝病病情糖链标记物。此外，本发明的课题还在于开发出用于检测肝病病情的发展程度的标记物。特别是开发出以下标记物能够区分肝病中的Fl和F2组群、以及F3和F4组群的肝脏纤维化标记物、或是能够区分F1、F2、F3组群与F4的肝硬化标记物(图4)。解决课题的手段本发明人利用糖蛋白组学，从血清糖蛋白中，鉴别出在包括肝细胞癌在内的肝病中糖链结构发生特异性变化的糖蛋白群，并将此作为新的肝病病情特异性(糖肽和糖蛋白)糖链标记物。本发明人还提供了用于确定肝细胞癌的基础肝病的病情的方法及其标记物，在该方法及其标记物中，用质量分析、凝集素阵列等糖链分析方法对上述糖链标记物进行比较糖链分析，以此确定肝细胞癌的基础肝病的病情。发明的效果用本发明的肝病病情指标糖链标记物的效果卓越，它通过检查血清等血液，就能检测出肝细胞癌等的肝病病情，方法简便，可信度高。本申请中的肝病病情指标糖链标记物还能够通过比较糖链分析来确认肝细胞癌的基础病情。此外，通过本发明的肝纤维化进展监视技术进行检查时，正确诊断率比现有的血清标记物高，且用微量的血清即可进行检查，通过该肝纤维化进展监视技术，不仅能把握病情的发展，还能够对经过了干扰素等抗病毒治疗后的肝纤维化和炎症的改善情况进行评价。[图I]在丙型肝炎中，从感染起经过5年15年会转为慢性。从感染起经过20年会转为肝硬化，经过25年30年则会转为肝细胞癌。发展速度虽然因人而异，但随着时间的推移，患肝细胞癌的危险度上升；[图2]显示的是由慢性肝炎转为肝细胞癌的比率的示图。肝纤维化的程度为Ff3时归类为慢性肝炎，纤维化程度越弱，从慢性肝炎转为肝细胞癌的比率也就越低。Fl中的年率为O.8%，F2中的年率为O.9%，而F3的年率则是3.5%；[图3]显示的是肝硬化转为肝细胞癌的比率示图。通过病理组织学诊断，当肝活检标本的纤维化的程度被确认为F4时，癌症发病率的年率为7.0%；[图4]肝脏中出现的丙型肝炎病毒感染会引起受损肝细胞的再生，且会引起切ロ修复，即纤维化。随着肝脏纤维化的发展，患癌的风险也随之升高，因此，“纤维化程度”是ー项向癌症转移的指标。在产生癌的基础肝组织中，由于结构细胞会发生变化，因此，随着纤维化的发展，糖链也有望发生变化；[图5]显示的是从感染起，随着时间的变化而发展成癌症的过程。此时，观察到正常结构和功能的常规活性丧失，同时看到了以纤维化为特征的病态结构。在肝细胞癌中，已知从早期肝细胞癌发展到典型肝细胞癌吋，细胞的性质会发生变化，超过2cm后，早期肝细胞癌中就会出现典型肝细胞癌；[图6]对慢性肝炎进行的是聚こニ醇干扰素(peginterferon)+病毒唑(Ribavirin)并用疗法(PEG-IFN+RBV疗法)，与此相对，对早期肝细胞癌进行的是射频消融术(RadiofrequencyAblationTherapy,RFA)。对于肝硬化则没有诊断性的检查方法及有效的治疗方法。本发明中的生物标记物可以区分开慢性肝炎、肝硬化、以及肝细胞癌，因此它成为了肝硬化的新治疗方法的开发中的ー项指标。此外，将其与FitooScan(肝脏瞬时弾性探测仪)一起使用，有望能够对纤维化进行定量评价，因此，用诊断性血清标记物能够划定纤维化(F3>4)病例的范围。再加上纤维化的定量诊断，在g在抑制肝纤维化发展和抑制癌症发病的治疗中，临床导入上述本发明的标记物，有望将其作为治疗效果的血清评价标记物使用；[图7]是以凝集素微阵列(LectinMicroarray)为基础的生物标记物候补分子的验证实验战略图。肝病病情指标标记物从血清中存在的糖蛋白群中选择。因此，分析对象试样为血清。以肝炎病毒感染者的血清为对象，进行大规模分析(large-scaleanalysis),对由此鉴别出的标记物候补分子进行比较糖链分析。通过使用核心蛋白质的抗体的免疫沉淀法，能够简单地浓缩出候补分子。凝集素微阵列是高灵敏度的比较糖链分析装置，用100毫微克的蛋白质制备出的量就足够进行分析，因此，可以小规模进行上述前处理。浓缩后的候补分子迅速添加到凝集素微阵列中，反应一定时间后，通过抗体铺覆凝集素微阵列法获得候补分子的糖链特征。此时，添加到凝集素阵列中的蛋白质的量因蛋白质而不同，大约为I毫微克到数十毫微克不等。对正好足以进行统计分析的样本数进行阵列分析后，用其数据组进行T检验(Student-Τ检验)或曼-惠特尼U检验(Mann-WhitneyUtest)等ニ样本比较分析。以此，可以客观地选择出因病情变化而致使其信号中产生显著性差异(significantdifference)的凝集素；[图8]对于肝病病情指标标记物候补分子之一的羧肽酶N，多肽2(CPN2)，通过抗体铺覆凝集素微阵列(Antibody-overlayLectinMicroarray)对其进行比较糖链分析，图8是其结果图。左上图显示的是凝集素微阵列上的凝集素的配置。粗体字表示的是在本实验中获得了显著(significant)信号的凝集素。在11种凝集素中获得了信号。右上图显示的是来源于肝细胞癌、肝硬化、以及慢性肝炎患者血清、健康人血清的CPN2的典型的扫描图。下半部分的图中，通过扫描数据，用阵列分析软件对各信号进行了数值化，以图表的形式显示了11种凝集素的結果。可以看出，信号强度随着病情的严重程度而发生变化(增强或减弱);[图9-1]从健康人、手术前、手术后的肝细胞癌患者的血清中制备出肽混合物，通过该肽混合物，对于探针凝集素捕捉的糖肽进行糖肽位点特异性同位素(IGOT，isotope-codedglycosylationsite-specifictagging)标记，大致集齐所有的肽，并分别进行LC/MS分析。通过鉴别后的肽的质量电荷比(m/z)和保留时间，筛选出各标记物肽的离子，并显示出它们的谱(spectre)。图9_1到9_8显示的是手术前试样中的信号強度明显居高的例子。另外，图9-1显示的是下表I中的肽编号为26的肽的情况；[图9-2]是表I中妝编号为124的妝的例不；[图9-3]是表I中妝编号为118的妝的例不；[图9-4]是表I中妝编号为19的妝的例不；[图9-5]是表I中妝编号为130的妝的例不；[图9-6]是表I中妝编号为135的妝的例不；[图9-7]是表I中肽编号为125的肽的例示；[图9-8]是表I中妝编号为132的妝的例不；[图10]简要地显示了用凝集素连续层析(chromatography)法分配血清蛋白质的步骤，还简要地显示了用蛋白免疫印迹法对条带(band)进行的定量和分析。向各个人的血清中添加O.2%SDS，在100°C下加热15分，将该血清作为加热处理血清，并用于以后的分析。用LCA柱将其分配为LCA结合成分(LE)和LCA非结合成分(LT)。再用AAL柱将LCA非结合成分分为AAL结合成分(AE)和LCA/AAL非结合成分(LTAT)。其中，·表示GlcNAc(N_こ酰葡糖胺)；〇表示Man(甘露糖)；籲表示Gal(半乳糖)；Λ表示Fuc(岩藻糖)；[图11]是LCA-AAL凝集素柱连续层析后获得的各成分的凝集素阵列分析示图。在此，在所产生的信号中，对14种凝集素用棒状图进行了显示。纵轴表示净强度(Netintensity)。健康人混合(pool)血清(NHS)的数据用白色棒显示,HCC患者混合(pool)血清(HCC)的数据用黑色棒表示；[图12]是连续层析后的各成分中的特定糖蛋白的分析示图，具体而言，根据以往的报告，确定了在特定糖蛋白AGP、AAT、ACT中，肝纤维化和肝癌等肝病中会伴随有岩藻糖基化亢进，以上述特定糖蛋白AGP、AAT、ACT为对象，进行连续层祈，图12是连续层析后的各成分中的特定糖蛋白的分析示图。在此，图中显示的是受到了不同岩藻糖基化修饰的分子群之间的比较、即LCA结合分子(LAC洗脱(LCAelution),LE)和LCA非结合/AAL结合分子(AAL洗脱CAALelution),AE)之间的比较。量的比较采用的是蛋白免疫印迹法；[图13A]是肝癌状态指标糖链标记物候补的筛选结果示图。用实施例3和4列举的连续层析法，从健康人和肝细胞癌患者的混合血清中调制试样，对于该试样，用蛋白免疫印迹法对各分配成分中的糖蛋白(SHBG)的量进行分析；[图13B]是肝癌状态指标糖链标记物候补的筛选结果示图。用实施例3和4列举的连续层析法，从健康人和肝细胞癌患者的混合血清中调制试样，对于该试样，用蛋白免疫印迹法对各分配成分中的糖蛋白(SEPPl)的量进行分析；[图13C]是肝癌状态指标糖链标记物候补的筛选结果示图。用实施例3和4列举的连续层析法，从健康人和肝细胞癌患者的混合血清中调制试样，对于该试样，用蛋白免疫印迹法对各分配成分中的糖蛋白(PlgR)的量进行分析；[图13D]是肝癌状态指标糖链标记物候补的筛选结果示图。用实施例3和4列举的连续层析法，从健康人和肝细胞癌患者的混合血清中调制试样，对于该试样，用蛋白免疫印迹法对各分配成分中的糖蛋白(SPARCL1)的量进行分析；[图13E]是肝癌状态指标糖链标记物候补的筛选结果示图。用实施例3和4列举的连续层析法，从健康人和肝细胞癌患者的混合血清中调制试样，对于该试样，用蛋白免疫印迹法对各分配成分中的糖蛋白(CSFlR)的量进行分析；[图13F]是肝癌状态指标糖链标记物候补的筛选结果示图。用实施例3和4列举的连续层析法，从健康人和肝细胞癌患者的混合血清中调制试样，对于该试样，用蛋白免疫印迹法对各分配成分中的糖蛋白(SERPINA7)的量进行分析；[图14]从健康人、肝硬化患者、以及肝细胞癌患者各取三例样本，并对样本中的各糖蛋白进行了凝集素连续层析和蛋白免疫印迹分析，分析了其在血清各凝集素成分中的含量。在本图中，棒状图显示的是糖蛋白的含量有差异的凝集素成分中的各种糖蛋白的含量。纵轴的AAL%含义如下将层析处理前的血清中所含靶分子A的蛋白质的量定为100%，AAL%表示AAL柱层析处理后结合成分中所含靶分子A的蛋白质量的比例。LCA%也同样。所得到的结果是，在肝癌患者中，CPB2在AAL结合成分(AE)中的含量、plgR在LCA结合成分(LE)中的含量、PlgR在AAL结合成分(AE)中的含量、CSFlR在LCA结合成分(LE)中的含量、以及CSFlR在AAL结合成分(AE)中的含量等,都出现了显著高(significantly-high)的结果。通过定量、比较这些分子(分子复合物)上的糖链变化，特别是通过定量、比较LCA或AAL结合性糖链，就可以预测肝脏的疾病状态，特别是肝细胞癌；[图15]从健康人、慢性肝炎、肝硬化患者、以及肝细胞癌患者中各取五例样本，并对样本中的各种糖蛋白进行了凝集素连续层析和蛋白免疫印迹分析，分析了各糖蛋白在血清各凝集素成分中的含量。在本图中，棒状图显示的是各种糖蛋白在LCA结合成分和AAL结合成分中的含量。所得到的结果是，关于PlgR在LCA结合成分(LE)中的含量、以及plgR在AAL结合成分(AE)中，肝硬化和肝癌患者中的含量比例(含量)比健康人高。另ー方面，关于CSFlR在LCA结合成分(LE冲的含量比例，与健康人进行比较，只有肝癌患者中出现了显著高(significantly-high)的结果。关于CSFlR在AAL结合成分(AE)中的含量比例(含量)，与健康人和慢性肝炎患者相比较，肝硬化中的结果增高，肝癌患者的结果更高；[图16]进行了凝集素连续层析和蛋白免疫印迹分析，图16显示的是在该分析中获得的分配成分中，PlgR含量比例(含量)与肝脏纤维化进展之间的相关性。在此显示，当纤维化进展到F3或F4(特别是F4)吋，plgR的AAL结合成分(AE)上升。这说明随着上述纤维化的进展，癌细胞可能已经开始生成；[图17]进行了凝集素连续层析和蛋白免疫印迹分析，图17显示的是在该分析中获得的分配成分中，CSFlR的含量比例(含量)与肝脏的纤维化进展之间的相关性。可以看出，CSFlR的LCA结合成分(LE)与纤维化的发展(FfF4)成正比上升。同时可以看出，当纤维化发展到F3或F4(特别是F4)吋，CSFlR的AAL结合成分(AE)急剧上升。这说明随着纤维化的进展，癌细胞可能已经开始生成；[图18]用抗体铺覆凝集素微阵列，对肝病病情指标标记物候补分子之一的PlgR进行了比较糖链分析，图18显示的是该分析的結果。通过免疫沉淀法，用从血清中浓缩提纯出的plgR(IOng)进行了分析。凝集素微阵列上的凝集素配置如左图。在本实验中，获得了显著(significant)信号的凝集素用粗体字表示。在19种凝集素中获得了信号。右图显示的是来源于肝细胞癌患者血清、健康人血清的PlgR的典型的扫描图。其结果是，与来源于健康人血清的PlgR相比，在来源于肝细胞癌患者血清的PlgR中，有7种凝集素(AOL、AAL、SNA、SSA、TJA-I，BPL,ΑΒΑ)的信号増加，而5种凝集素(MAL，DSA,EEL,WA,ΗΡΑ)的信号減少；[图19]用抗体铺覆凝集素微阵列，对肝病病情指标标记物候补分子之一的PlgR进行了比较糖链分析，图19显示的是该分析的结果。使用了健康人(NHS:14人的分量)的混合血清和多个肝细胞癌患者的混合血清(HCC5人的分量、HCC-Kl2人的分量、HCC-K26人的分量、HCC-K3:2人的分量)。通过免疫沉淀法，用从上述血清中浓缩提纯出的plgR(IOng)进行了分析。与来源于健康人血清的PlgR相比，在来源于肝细胞癌患者血清的PlgR中，有7种凝集素(AOL，AAL,SNA,SSA,TJA-I,BPL,ΑΒΑ)的信号増加，而5种凝集素(MAL，DSA,EEL,WFA,HPA)的信号减少；[图20]用抗体铺覆凝集素微阵列，对肝病病情指标标记物候补分子之一的CSFlR进行·了比较糖链分析，图20显示的是该分析的結果。通过免疫沉淀法，用从血清中浓缩提纯出的CSFlR(2ng)进行了分析。凝集素微阵列上的凝集素配置如左图。在本实验中，获得了显著(significant)信号的凝集素用粗体字表示。在20种凝集素中获得了信号。右图显示的是来源于肝细胞癌患者血清、以及来源于健康人血清的CSFlR的典型的扫描图。其结果是，与来源于健康人血清的CSFlR相比，在来源于肝细胞癌患者血清的CSFlR中，有5种凝集素(AOL、AAL、ECA、ABA、WFA)的信号增加；[图21-1]用抗体铺覆凝集素微阵列，对肝病病情指标标记物候补分子之一的CSFlR进行了比较糖链分析，图21-1显示的是该分析的結果。通过免疫沉淀法，用从血清中浓缩提纯出的CSFlR(2ng)进行了分析。使用健康人(NHS:14人的分量)、比较高龄的健康人(GP:5人的分量)、(病毒性)肝炎患者(CH5人的分量)、肝硬化患者(LC5人的分量)、肝细胞癌患者(HCC5人的分量、Kl2人的分量、K26人的分量、K32人的分量)的混合血清，用同样的方法提纯、浓缩CSFlR蛋白质，并对CSFlR蛋白质(抗CSFlR抗体沉淀物)的糖链特征进行了分析。在分析中得知，在AOL、AAL、ECA、ABA、WFA的凝集素中，与健康人(NHS)相比，肝细胞癌患者(HCC)中的信号亢进。特别是在WFA信号中，在健康人(NHS)、比较高龄的健康人(GP)、(病毒性)肝炎患者(CH)、肝硬化患者(LC)中几乎未检出WFA信号，而在来源于肝细胞癌患者(HCC)的HCC、K1、K2、K3中却观察到了显著(significant)的信号；[图21-2]续图21-1；[图22](A)显示的是在血清中用WFA进行批量分配的方法的简要流程。(B)用WFA凝集素，对健康人(NHS)和肝细胞癌患者(HCC)的混合血清进行免疫沉淀，并用抗CSFlR抗体进行蛋白免疫印迹分析。以此定量血清中有WFA结合性糖链的CSFlR的含量。其结果是，在来源于肝细胞癌患者(HCC)的CSFRl等中，WFA凝集素的信号表现出显著(significant)的亢进。几乎未检出来源于NHS的WFA结合性CSFRl。(C)分别取健康人(正常，Nomal)、(病毒性)肝炎患者(CHC)、肝硬化患者(LC)、以及肝细胞癌患者(HCC)的血清各5例，并将其作为样本组使用，就血清中的WFA结合性CSFlR的含量进行了研究。根据其結果，定量了在蛋白免疫印迹中获得的条带(band)的強度，并以棒状图的形式进行了显示。各种疾病的平均值显示在各疾病的最左边。结果表明，与健康人(正常，Nomal)和(病毒性)肝炎患者(CHC)相比较，肝硬化患者(LC)中的WFA结合性CSFlR的含量亢进。与健康人(正常，Nomal)、(病毒性)肝炎患者(CHC)、及肝硬化患者(LC)相比，肝细胞癌患者(HCC)的WFA结合性CSFlR的量也有显著(significant)亢进。(D)为了研究与纤维化发展之间的关联，用上述方法，将轻度慢性肝炎(Fl)、中度慢性肝炎(F2)、重度慢性肝炎(F3)、肝硬化(F4)患者的血清作为样本组使用，先用未进行分配的未处理血清，分析了血清中的WFA结合性CSFlR的量。关于WFA分配成分的CSF1R，在FfF3中基本上都未检出，在F4患者的血清中却检测到了。对在蛋白免疫印迹中获得的WFA结合性CSFlR的强度进行定量，用棒状图显示。优选实施方式I.慢性肝病的现状1-1.肝病的病情感染こ型肝炎病毒或丙型肝炎病毒后，从急性炎症起，经过5—15年会发展为慢性炎症。特别是在转为慢性后的丙型肝炎中，自愈的例子很少，一般肝功能会逐渐降低，直至肝硬化。为了定义性慢性肝炎到肝硬化之间的病情，从病理形态学的角度捕捉肝脏的格利森区域(Glisson)和肝小叶中出现的的纤维性变化，并将其分类为轻度(F1)、中度(F2)、重度(F3)和肝硬化期(F4)。纤维化的发展、以及肝细胞癌的患癌风险的上升之间有相关性，Fl或2中的年率为1%以下，与此相対，F3中的年率则上升到3-4%。若纤维化程度进ー步发展，通过组织学图像诊断为肝硬化(F4)时，肝细胞癌出现的概率为年率7%。因此，为了有效地发现并治疗肝细胞癌，需要简便地甄别处于F3及F4状态的患者，并将其作为精密检查的对象进行跟踪。在日本的こ型肝炎和丙型肝炎患者医疗补助事业中，主要针对的对象是在肝活检样本的病理组织学诊断中，确定了其纤维化的程度为Ff3的患者。当诊断为F4时，患者被归类为肝硬化，在干扰素治疗的こ型肝炎和丙型肝炎患者医疗补助事业中，仅有其中的一部分成为补助对象，无法取得满意的治疗成绩。1-2.用抗病毒疗法控制纤维化的评估慢性丙型肝炎适用于PEG-IFN+RBV疗法，而丙型肝炎硬化代偿期则适合单独用干扰素治疗。另ー方面，在こ型肝炎(慢性肝炎、肝硬化)的治疗中主要用的是核酸类似物，因此必须有炎症和纤维化评估标记物。尤其是血清生物标记物有望广泛应用于临床诊断和评估。1-3.肝细胞癌一般认为，患肝细胞癌是由于以下两种因子活跃地交互作用所致こ型肝炎病毒或丙型肝炎病毒感染产生的微生物学因子、以及环境因子。在日本，已知肝细胞癌患者的约9成曾经感染过こ型肝炎或丙型肝炎病毒，且发展为了慢性肝炎和肝硬化患者。据认为，肝细胞癌的癌变危险因子中，除病毒以外还有男性、高龄、大量饮酒、抽烟、以及毒枝菌素中的黄曲霉毒素等(肝癌诊疗指南，(财)国际医学情报中心)。1-4.肝细胞癌的早期诊断目前，肝细胞癌的发现主要靠以下方法測定受检者血清样本中的AFP和PIVKA-II等的肝癌标记物、以及以超声波检查(回声检查)为中心的图像诊断。在图像诊断中，一般初检中进行超声波检查或CT，在这些检查中发现某种异常时，再做MRI和血管造影。1-5.从预防肝细胞癌的观点出发，筛查癌症高危人群在日本，肝细胞癌患者的约9成是感染了こ型肝炎病毒或丙型肝炎病毒的肝炎患者，以病毒感染和肝功能下降为指标，就能够筛查成为精密检查的对象的患者。然而，即使是肝细胞癌以年率7%的概率出现的肝硬化(F4)患者，为了及早发现并治疗癌症，每隔三个月便需要进行一次高額、高侵袭性的精密检查，不得不说这对患者的经济和身体都是很大的负担。毎年癌变率为3-4%的F3更是如此。考虑到通过干扰素治疗丙型肝炎病毒的成功率只是5成左右，就更需要对干扰素治疗未奏效的众多慢性肝炎患者进行临床跟踪，明确其处于肝硬化和肝细胞癌进程中的哪个阶段。即，在目前的肝炎肝细胞癌的疾病的治疗中，需要通过血液检查等简易的检查，对肝炎肝硬化患者的癌变风险进行评估，并进行与之相应的肝细胞癌的诊治。在临床病理学上，纤维化的程度与肝硬化和肝细胞癌的风险之间存在着相关性，从这一点入手，我们发现，开发出ー种能够以血清学方式对纤维化进展进行定量測定的检查技术，就有可能解决这ー问题。2.获取新肝细胞癌糖链标记物等的新肝病病情指标糖链标记物2-1.包括肝细胞癌糖链标记物在内的新肝病病情指标糖链标记物本发明中的肝细胞癌糖链标记物有时也表述为糖链相关肿瘤标记物或肿瘤特异性糖链标记物，但都是指糖蛋白中的肝细胞癌特异性糖链结构，包含具有这种糖链的糖蛋白。根据数百种糖链相关基因的表达平衡(expressionbalance),细胞分泌的蛋白质上的糖链的成分和结构的多祥性受到控制，且该糖链的成分和结构的多祥性会随着细胞的分化、癌的进展程度而变化。这种糖链结构会发生变化的糖蛋白可以用作疾病病情指标标记物，该疾病病情指标标记物中也包括肿瘤标记物在内。因此，人们对以蛋白质组学为基础的糖链相关肿瘤标记物进行了研究探索。在以蛋白质组学为基础的标记物的探索途径中，在第一阶段中，通过大規模分析，鉴别候补分子。第二阶段中，通过定量分析，验证并锁定候补分子。第三阶段中，进行验证试验。在以糖蛋白组学为基础的糖链相关标记物的探索中，也同样以上述途径为基础进行探索。此外，本发明中还包括新肝病病情指标糖链标记物。在上述肝细胞癌糖链标记物中，检测出赋予下述疾病以特征的糖链变化，并将其作为标记物候补其中上述疾病为病毒感染引起的疾病在发病与发展中生成的慢性肝炎、肝硬化和肝细胞癌。如上所述，我们将以下标记物称为肝病病情指标糖链标记物以病毒性肝病的病情发展中所伴随的糖链变化为指标，能够判断肝病病情的标记物。本发明的新肝病病情指标糖链标记物对病毒性肝病的各种病情表现出不同特征，对鉴别各种疾病均有效果，其中上述病毒性肝病的各种病情是指肝细胞癌、肝硬化、肝纤维化(F3和F4标记物)或慢性肝炎。此外，本发明的新肝病病情指标糖链标记物中包括肝病病情指标糖链标记物糖肽、以及肝病病情指标糖链标记物糖蛋白。比如，可以使用肝细胞癌患者或肝病患者的样本或癌细胞株、以及健康人样本，通过凝集素捕获IGOT法，特异性地鉴别前者中的糖肽，并将该糖肽作为肝细胞癌标记物或肝病病情指标糖链标记物候补糖肽。使用100例患者样本(或不同病期的患者样本各20例)以及100例健康者样本，通过包括稳定性同位素导入糖肽的比较糖蛋白组学技术方法在内的糖肽的比较糖链分析技木，对该糖肽进行验证，可以将表现出有用性的糖肽作为确定的标记物糖肽。此外，还可以如下以含有肝病病情指标糖链标记物候补糖肽的序列的糖蛋白为对象，使用包括抗体铺覆凝集素微阵列法在内的比较糖链分析技术，对上述对象进行验证，将表现出有用性的糖蛋白作为确定的标记物糖蛋白。2-2.肝病病情指标糖链标记物的获取方法2-2-1.糖蛋白的大規模鉴别糖肽的大規模选择性捕获、浓缩大体来说可以使用以下方法中的某ー种方法(i)使用与糖链具有亲和性的探针；方法(ii)利用与糖链的化学反应(ZhangH.等，《自然生物技术》21、660-666(2003));方法(iii)向糖链导入亲和性标签(tag)等。最好使用探针。下面就使用探针的方法进行详细阐述。(I)用探针进行捕获探针可以使用凝集素或抗糖链抗体。具体而言，首先，使用探针凝集素或抗体探针，从来源于肝细胞癌的细胞株的培养基上清中捕获糖蛋白，然后，再使用探针凝集素或抗体探针，从健康人的血清中捕获糖蛋白，与此同时，用探针凝集素以外的凝集素全面地捕获糖蛋白。(2)选择探针凝集素时，可以主要通过上述凝集素微阵列进行糖链特征统计分析，以此选出。此外，也可以參考糖链基因的表达特征(实时定量的PCR的結果)和文献信息(如癌变中伴随的岩藻糖基化亢进等，有时可以想象出应该使用的探针凝集素)来选择探针。基本上是根据特征的统计分析来进行选择，再根据所选凝集的结合特异性来判断选择是否妥当。当以肝细胞癌为靶时，比如可以使用以下凝集素从能够检出岩藻糖基化的橙黄网孢盘菌(Aleuriaaurantia)中获得的凝集素(AAL)、或是从能够检出糖链的超支化的蔓陀罗(Daturastramonium)中获得的凝集素(DSA)等。抗体探针可以在弄清抗原(糖链)的结构之后再制作，但这不是必须条件，也可以在不知道抗原糖链(或糖肽)结构的情况下制作。(3)在确定生物标记物时，全面捕获中所用的凝集素会根据对照试样中的糖链结构的分布而发生变化。比如，已知将血清作为对照吋，已知血清糖蛋白上的糖链几乎全部为唾液酸化双糖链，因此，经唾液酸酶处理的话，通过从蓖麻(Ricinuscommunis)中获得的凝集素(RCA120)，能够对血清糖蛋白(肽)中的绝大部分进行全面捕获，因此，可以使用RCA120。不用识别唾液酸的凝集素是为了避免以下情况因人为操作和试样因时间的劣化而造成唾液酸脱落，并因此受到影响。当用于对照的试样不是血清时，比如是其他体液吋，可以选择其他凝集素。也可以不使用凝集素，而是通过亲水性相互作用层析或凝胶过滤来进行全面捕获。2-2-2.糖肽或糖蛋白的鉴别对于捕获的糖蛋白，可以采用下述文献中的Lec-IGOT-LC/MS法来对候补(糖肽)进行分析特开2004-233303号公报(特许第4220257号)、或是KajiH,等人所著的“用凝集素亲合捕获的N-结合的糖肽的质谱鉴别以及糖基化位点的稳定同位素标记”，《自然-实验手■〉〉(MassspectrometricidentificationofN-Iinkedglycopeptidesusing丄ectin—mediatedafnnitycaptureandglycosylationsite—speciiicstableisotopetagging.《NatureProtocols)))1，3019-3027(2006)。(I)糖链切除以及糖基化位点的稳定同位素标记用蛋白酶消化探针捕获的糖蛋白群，从如此获得的肽群中，用同样的探针重新捕获充当试样的糖肽群。或者也可以不分离试样粗蛋白质混合物，用蛋白酶进行消化，并在如此获得的粗肽群中直接用探针进行捕获。在用同位素氧标记过(label)的水中，用糖肽酶等酶对获得的糖肽群进行处理，以此离解糖链。于是，糖基化部分的天冬酰胺转为天冬氨酸，此时，水中的同位素氧(18O)被摄入肽中。如此，将用同位素标记糖基化位点的行为称为糖基化位点的特异性同位素标记(isotope-codedglycosylationsite-specifictagging,IGOT)。(2)标记肽的LC-MS鸟枪法分析通过LC分离，对IGOT法标记的肽进行分离，导入MS，通过串联质谱法全面鉴别肽的序列。(3)肽的鉴别比如，可以使用标准技术集(特许厅编)、质量分析3-6-2-2氨基酸序列分析中介绍的MS/MS离子检索法，对于所得肽混合物的MS/MS肽测定結果，将其与数据库中登录的MS/MS特征进行比较，以此进行检索。在检索中，需要考虑以下氨基酸的修饰(蛋氨酸残基侧链氧化、氨基末端谷氨酰胺焦化(脱酰氨基化、环化)、氨基末端去氨基化(脲甲基半胱氨酸)、天冬酰胺残基侧链去酰氨基化(摄入了稳定性同位素氧的部分))。(4)糖基化位置的鉴别在用MS/MS离子检索法鉴别出的肽中，天冬酰胺残基侧链中发生了脱酰氨基化(摄入稳定同位素)、且含有N结合型糖基化共有序列(Asn-Xaa-[Ser/Thr]、但Xaa非Pro)的肽用于充当候补糖肽(当Xaa是Lys/Arg,且鉴别的肽序列在此位点被切断时,在參照全部蛋白质的氨基酸序列，如果能确认Xaa的下ー个残基是[Ser/Thr]的情况下，也包含此肽)，将该糖肽的共有序列天冬酰胺残基作为糖基化位点。当有数个共有序列，且脱酰氨基化(标记)天冬酰胺残基的数少于共有序列、且通过MS/MS谱无法确定标记位点吋，同时记录这些标记位点(糖基化位点)，以表示无法区别。(5)糖肽的表示方法关于权利要求中的表I和以下表I所列举的肽，以IG0T-LC/MS法中鉴别出的结果为基础，在用该方法进行鉴别的过程中，要考虑到有无上述(3)所述的修饰。因此，该标记物糖肽不仅是由氨基酸序列所规定的，还包含肽中所含官能基的实际的修饰情況。对实际的修饰情况，通过数列进行如下表述。(I)肽部分的氨基酸序列用以下列来表示有氨基酸的一个文字的列。(2)修饰位置和修饰的种类以数列表示。数列的开头表示肽的末端氨基，最后表示末端羧基，中间的数字表示构成的各氨基酸残基侧链的位置。数值表示修饰的种类。“O”表示未修饰，“I”表示氨基末端谷氨酰胺残基焦化(脱酰氨基化、环化)、“2”表示蛋氨酸残基侧链氧化，“3”表示氨基末端脲甲基化半胱氨酸残基的焦化(脱酰氨基化、环化)，”4”表示天冬酰胺的脱酰氨基化(IGOT标记)、即糖基化位点。序列表根据以下表I绘制。2-2-3.肝病病情指标糖链标记物候补糖肽的锁定通过癌探针(凝集素)，从(i)来源于肝细胞癌的细胞株培养液、及(ii)肝细胞癌患者血清(采集于癌切除手术前和手术后)中捕获肝病病情指标糖链标记物候补糖肽，可以用上述2-2-1,2-2-2中的糖肽大量鉴别法进行鉴别。鉴别后的糖肽即可作为该糖链标记物的初期候补。接着，按照同样的步骤，使用探针凝集素和能够进行全面鉴别的其他凝集素，从(iii)健康人血清中捕获糖肽，在锁定标记物候补糖肽时，可以如上获得的该糖肽用作參考。即，在候补糖肽中，用癌探针鉴别的肽，其候补顺序在健康人血清后面，相反，使用了全面的凝集素鉴别出的肽在血清中的量比较高，可以将其评价为易检测候补。此外，同样地，使用探针凝集素和其他凝集素，从(iv)癌切除手术后的肝细胞癌患者的血清中捕获并鉴别糖肽，以该糖肽为參照，可以分别锁定与每种适用的肝病病情相应的标记物。即，从癌切除手术前的试样鉴别糖肽，从手术后患者和健康人血清中不鉴别糖肽，则该糖肽可以视为以下标记物暗示有肝细胞癌存在的标记物；从手术前手术后的患者血清中进行鉴别糖肽，而不从健康人血清鉴别糖肽，则该糖肽可视为以下标记物候补用于反映肝细胞癌的基础(肝炎和向肝硬化转化的纤维化)的标记物候补。此时，通过比较LC/MS分析中的标记肽的信号強度，可以估算出血清中的该糖肽的大致含量或变化。经验证实验后，如此锁定的标记物候补糖肽可以用作以下标记物以各种病情为对象的肝病病情指标糖链标记物。包含该肽序列的糖蛋白也同样，在蛋白质的状态下经过验证实验后，可以作为各种病情的肝病病情指标糖链标记物使用。2-2-4.肝病病情指标糖链标记物候补糖肽经过上述步骤选出的肝病病情指标糖链标记物候补糖肽群见以下表I。表I.....................................................................................I—丽丽丽S..E漏..............................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................................K序列与修tti信息*编号数列的汗头省Jiifi中W表示a基·ts键κι修饰情O太德饰；丨N*端Gln的焦化，2IvktMatt親3N宋端騰￥基化Cysft焦化，4糖.位点(Asn0gJIFNSS\1级nxom湖M職職職》7vsKvsrQ.vsvsR(mmmitm3CfTAGXMAHXfASQIΛ!Ul:Xto0X)(UWjau0XXMUU4n\iiiinmixrrcirt(^miimmmnmm5IRili'l(imii,KCi(TCKKiRUmwWW(l)tIttXWi6VNFTEiOM職腳7[L\lGSNM:m!ffiUrQM.级ακ職職.Χ麗^^^^8GlNVH5STGRX^mXXWX)9MixivsKvicixsRiamwmTOiοirnHGivui.xc—tvRiOGmumxtMmwrnII$Η^ΙΑΓΓ8(L.VYSXA沾TDSAKVYRTG謂MMMOOMOMMMBmm13GMmNfSMrvmKmMmamm14GMmNFSMrvmKmmmmmm15GmM16L(;A('Niynw*-、_通雙SEw.m繼卿細郎17IjaiummmmmmBCXPOMmmmmmmmmitQvmmKmMmmjmmjKmamMmmmam9TljrNASKETONTrm￡3MMmui21MMMMGWIGKiMMMOOe22(ΧΝΧ^；!11Κ)α3!^'ΚΜΜωΙΟ23rmwQmcMmhTmj^^^mxmmmmmrn24AXiXKsnmmmumnnm25[AEEDIMETLKDMY￥NDSMGSH￥WMMIBM0lM00(MWM0ra26l·"讲AUTMJBLHNISVMSAHYSCVYVDIMfCKS^ESlSmraiMMMIMmiOTOBMiaQnmwYnBBYhmqmm^m^m2h^MMNGSGmMQmmmmmmmh29AHLNVSatrcSVLLMWlDUQQQiSKDT^HyxaHCOQOOOOGGOOOOOGOOOOGOOCOCOGDDM>vmx^nvMMmmxmmスIMiEmHmMcrcFGqGmxmommmxm:'iDmixxsDHKGHimi)(mmnmmmmm51’ΠΛ’Κ·Π·ΛΒΤΙ)^Μ8Λ\ΚιΠΙΛ!_)Φ.UlKXIVKtlYI.WORΚΚ0ΜΕΧ*0Ι)35QiKKira-iTLNVQKiiXim.sRKiiirittiiriuiWiiiiii36λu^mm^^i^XSSiVXKummmimmtmMinxmi^yKAnYSASiKammimiumvJosi^\i\\simsnuyix>ynmmmmimnmim4i>IΧΛ('ΝΙ3IWlAlliNVKJi^HSIΚαΛΗ-ΜΛ.ΜΛΠ->4Vl'iiNAS.\l.FiIJsIXiDKXIIiAI-.VNII.1.Η；Π.ΚΚΙΜΙΧΙΙ(ΙΠΙ.ΙΠΗΙΙ.ΙΚ0.ΙΙ42VI；Π.NiJX^Vni'OHAUXVSlΛΛΗ\Λ\Η'*Κ4Ι)ΚΜχα)431-；ΙΚΑΧ*Κl^!XLUAVi-l-i'KK'l.R4WI(TOQHllUHlli.X^44TLNcmsrmuiしSMGX人難)a*miiisu>jm>45(xnAimMiK\i<K%DSiimwACAii\\A\\%Kmmmxnmximmmmmmi4hνΓ{ΝΛΗ,\Ι,·'1!.!ΧΜ)Κλ1ΚΗ\Κν\ΙΙ.ΙΒ-ΓΙΚΚ)Ι*ΗΗΙΜαακΠ0ΠΚ)47Nisixnix;iprmTxvy.yj>yis\miR!iiniunninininiHmiii4HiiQiQYfKSNrQmHii-MixvxKwmxmmimiimmm49sHiamiiiSfivsHixxnixvsfwuxwffnittwxwttX)50ΝΡΙ^ΚΚΝΛ'\1Ι')1ΛΙΧ(.)-Ι·.η<ΧΒ(Κ0Ι1αΗΧΧΧΧΙΙΙΧΙ.ΧΠΧ>Π)51υκ}λΛXimSGYX^iySYnmmmmimnXmmm5253LSX'DKl^Q^^'miNlllCX-TOGVGN^'Gi^SITC'SCiXRiKJKttMnaX^IUXOXItaMXWXWMMtX)54CxiiAmi^-NYxKsDxT1IayiHiAini7AWWNK(im*u0wwxinxiwmnx55CHici-NLnrrsivliailQsixilllj-RftHlMiiilI(HKlKIIXHin)56siXiN\'Ki'iTSAi'；^MSQVirGTVx\>s\mKMmimmBmtmmmnmmmi57DivhYYKD^KQmxiK^mmmMxxmxxm58EII&\QSKASIl)\Tl.XilfI^"EEL%lKXXiiMXWirttWrttXMrt)59DVQirafDGHffiトへ7F腳腳腳XttX麵》60\\細IVtCQM卿)ρ.ω桃{mmwmmxmt61[λo-Af^Ii,SCima3GKimmmmum权利要求1.一种肝病病情指标糖链标记物糖肽，其特征在于该糖肽具有表I所列糖链，[表I]2.表2所列肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，其特征在于该糖蛋白含有选自权利要求1所述的(1)至(157冲的任意的、一种以上的糖肽序列(但是，以下表2中的蛋白质编号为97和98(AGP)以及65(M2BP)的蛋白质除外)，[表2]3.选自以下(1)至(8)中的一种以上的肝病病情指标糖链标记物糖肽或其组合(1)一种肝病病情指标糖链标记物糖肽，即表1中的肽编号19所表示的多肽；(2)一种肝病病情指标糖链标记物糖肽，即表1中的肽编号26所表示的多肽；(3)一种肝病病情指标糖链标记物糖肽，即表1中的肽编号118所表示的多肽(4)一种肝病病情指标糖链标记物糖肽，即表1中的肽编号124所表示的多肽(5)一种肝病病情指标糖链标记物糖肽，即表1中的肽编号125所表示的多肽(6)—种肝病病情指标糖链标记物糖肽,即表1中的肽编号130所表不的多肽(7)一种肝病病情指标糖链标记物糖肽，即表1中的肽编号132所表示的多肽(8)一种肝病病情指标糖链标记物糖肽，即表1中的肽编号135所表示的多肽。4.选自以下(1)至(14)中的一种以上的肝病病情指标糖链标记物糖蛋白或其组合(1)一种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即表2中的蛋白质编号22所表示的含多肽的糖蛋白，其特征为该糖蛋白具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(2)—种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即表2中的蛋白质编号89或90所表不的含多肽的糖蛋白，其特征为该糖蛋白具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(3)—种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即表2中的蛋白质编号145-LR所表不的含多肽的糖蛋白，其特征为该糖蛋白具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(4)一种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即表2中的蛋白质编号9所表示的含多肽的糖蛋白，其特征为该糖蛋白具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(5)—种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即表2中的蛋白质编号8所表不的含多肽的糖蛋白，其特征为该糖蛋白具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(6)—种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即表2中的蛋白质编号103或104所表不的含多肽的糖蛋白，其特征为该糖蛋白具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(7)—种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即表2中的蛋白质编号47所表不的含多肽的糖蛋白，其特征为该糖蛋白具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(8)—种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即上述表2中的蛋白质编号105所表不的含多肽的蛋白质plgR，其特征为该蛋白质具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(9)一种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即上述表2中的蛋白质编号32所表不的含多肽的蛋白质CSF1R，其特征为该蛋白质具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(10)一种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即上述表2中的蛋白质编号129所表不的含多肽的蛋白质SHBG，其特征为该蛋白质具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(11)一种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即上述表2中的蛋白质编号122或123所表示的含多肽的蛋白质SEPP1，其特征为该蛋白质具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(12)—种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即上述表2中的蛋白质编号130所表的含多肽的蛋白质SPARCL1，其特征为该蛋白质具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(13)一种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即上述表2中的蛋白质编号126所表示的含多肽的蛋白质SERPINA7，其特征为该蛋白质具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化；(14)一种肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，即上述表2中的蛋白质编号92所表不的含多肽的蛋白质MANA2，其特征为该蛋白质具有伴随有岩藻糖修饰的糖链变化。5.一种纤维化进展的判断方法，其特征在干，使用采自受检者的试样，分析选自权利要求3所述(I)至(8)中的ー种以上的肝病病情指标糖链标记物糖肽，以此判断纤维化的进展。6.一种纤维化进展的判断方法，其特征在干，使用采自受检者的试样，分析选自权利要求4所述(I)至(14)中的ー种以上的肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，以此判断纤维化的进展。7.ー种肝硬化的检测方法，其特征在干，使用采自受检者的试样，分析选自权利要求3所述(I)至(8)中的ー种以上的肝病病情指标糖链标记物糖肽，以此检测肝硬化。8.ー种肝硬化的检测方法，其特征在干，使用采自受检者的试样，分析选自权利要求4所述(I)至(14)中的ー种以上的肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，以此检测肝硬化。9.ー种肝细胞癌的检测方法，其特征在干，使用采自受检者的试样，分析选自权利要求3所述(I)至(8)中的ー种以上的肝病病情指标糖链标记物糖肽，以此检测肝细胞癌。10.ー种肝细胞癌的检测方法，其特征在干，使用采自受检者的试样，分析选自权利要求4所述(I)至(14)中的ー种以上的肝病病情指标糖链标记物糖蛋白，以此检测肝细胞癌。11.一种对肝细胞癌的发病和复发进行早期预测的方法，其特征在于，使用采自受检者的试样，就权利要求4所述(9)的CSF1R，测定AOL、AAL、ECA、ABA及WFA分别对应的结合性CSFlR的量，以此对肝细胞癌的发病和复发进行早期预测。12.—种对肝细胞癌的发病和复发进行早期预测的方法，其特征在于，使用采自受检者的试样，就权利要求4所述(8)的plgR，测定AOL、ML、SNA、SSA,TJA-I,BPL、ABA、MAL、DSA、EEL、WFA、及HPA分别对应的结合性plgR的量，以此对肝细胞癌的发病和复发进行早期预测。全文摘要本发明的课题在于提供一种能够检测出肝病的糖链标记物。具体而言，本发明的课题在于开发出一种能充当肝病病情指标的糖链标记物。此外，本发明的课题还在于开发出一种能够随着肝细胞癌的进展区分出肝病病情的糖链标记物。对于血清糖蛋白，本申请的发明人鉴别出了在包括肝细胞癌在内的肝病中，其糖链结构发生特异性变化的糖肽和糖蛋白质的群，并将其作为新肝病病情特异性(糖肽和糖蛋白质)糖链标记物。文档编号C07K9/00GK102695716SQ20108004097公开日2012年9月26日申请日期2010年7月12日优先权日2009年7月14日发明者久野敦,大仓隆司,安形高志,平林淳,成松久,曾我部万纪,栂谷内晶,梶裕之,池原让,沟上雅史,田中靖人,雄长诚,鹿内俊秀申请人:公立大学法人名古屋市立大学,独立行政法人产业技术综合研究所,独立行政法人国立国际医疗研究中心