专利名称：三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法
技术领域：
本发明涉及天然药物中间体的分离提纯方法，尤其是一种利用三带模拟移动床色谱分离芍药苷的方法。
背景技术：
芍药苷具有镇静、扩张血管、抗血栓形成及解痉的药理作用，它是白芍总苷提取物中的主要成分，是从中药白芍中提取得到的。但是，由于在白芍总苷提取物中，除了有芍药苷以外，还有芍药内酯苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷等多种苷类组分，以及如苯甲酸、儿茶素等其他多种组分，因此在芍药苷的制备过程中，关键的步骤就是对其分离提纯，目前对芍药苷的分离提纯方法主要是大孔吸附树脂法、硅胶柱层析法及凝胶柱层析等方法，以上这些方法不但生产效率低、成本高、产量低，而且都无法进行高纯度的规模化分离，无法满足实际生产的需求。采用模拟移动床色谱分离药物中间体的方法，近年来已有很多报道。查阅专利文献，与本发明相关的是宁波立华植物提取技术有限公司申请的中国专利，名称为“模拟移动床色谱法分离制备芍药内酯苷的方法”，公开(公告)号CN101607975。该申请采用白芍总苷为原料，应用模拟移动床色谱法分离制备芍药内酯苷，流动相采用甲醇或乙腈与水、甲酸、异丙醇的混合溶液。芍药内酯苷产品的纯度达到90%以上。采用的是四带的模拟移动床色谱，为了调整峰型，流动相中加入了甲酸和异丙醇。萃余液出口可获得较高纯度得芍药苷。该申请由于添加了甲酸和异丙醇，造成了溶剂回收利用较难，浪费了溶剂，并且没有具体指出得到的芍药苷的纯度。另外，四带模拟移动床色谱各流量之间的牵引作用较大，流量不易控制，同时四带模拟移动床色谱冲洗液和流动相一致，冲洗液流量无法根据吸附组分的情况而变化，灵活性较差。
发明内容
本发明提供了一种三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，解决芍药苷的分离提取纯度低，无法规模化生产的问题。本发明采用的技术方案如下三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，该方法采用白芍总苷提取物为原料，应用三带模拟移动床色谱系统分离提纯，三带模拟移动床色谱系统由4 8根色谱柱组成，色谱柱分为三个带解吸带；精制带；吸附带，每个带由1 4根相同的色谱柱串联构成，系统工作条件是进样液流速Uf为0. 1 2. 5mL/min ；洗脱液流速Ud为5 40mL/min ； 萃取液流速Ue为2 20mL/min ；萃余液流速Uk为2 20mL/min ；固定相采用十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇与水的混合溶液；切换时间Ts为15 30min ；操作温度为15 40 "C。上述流动相甲醇与水的混合溶液体积比比例为25 75。上述的白芍总苷提取物采用纯化手段从白芍药材中提取得到，白芍总苷提取物中的芍药苷和芍药内酯苷的总含量的质量百分比大于95%，其中芍药苷的含量的质量百分比大于45%。上述进入三带模拟移动床色谱分离提纯的白芍总苷提取物原料采用纯甲醇溶解， 溶解后白芍总苷提取物的浓度为30 300mg/mL。本发明与现有技术相比，其显著的有益效果体现在采用三带模拟移动床色谱系统分离提纯的芍药苷产品的质量百分比纯度达到 95%以上，同时获得的芍药内酯苷的质量百分比纯度达到90%以上。由于三带模拟移动床系统分离过程是连续分离过程，生产的自动化程度高，生产效率高，且溶剂只使用了甲醇和水，可以回收利用，节约资源，分离过程中不接触有毒溶剂，真正实现了清洁生产。
图1为本发明三带模拟移动床色谱系统的流路图；图2为本发明芍药苷产品的HPLC图谱。
具体实施例方式下面结合附图用实施例对本发明作具体说明1.原料溶液的配制通过乙醇回流提取和大孔吸附树脂层析分离，从白芍饮片中制得芍药苷和芍药内酯苷质量百分比总含量大于95%，其中芍药苷的质量百分比含量大于45%的白芍总苷提取物。将得到的提取物溶解于纯甲醇中，沉降，经0.45μπι滤膜过滤得到浓度为lOOmg/mL 的溶液，作为三带模拟移动床色谱系统的进样溶液。此过程可以去除大部分杂质，减少了三带模拟移动床色谱系统设备中色谱柱的污染，延长了色谱柱的使用寿命。2.色谱柱的装填与流动相的组成使用勻浆法填装8根色谱柱，色谱柱规格50mmX 100mm，填料为十八烷基硅烷键合硅胶，粒径为20 40 μ m。经过勻浆法装填后的色谱柱对称性要求一致，以萘和尿嘧啶为考察物柱效为800以上。流动相为甲醇和水的混合溶液，甲醇与水的体积比比例为25 75。3.模拟移动床色谱系统及操作参数模拟移动床系统包括洗脱泵、进样泵、萃取泵、流量计、色谱柱、高压力电磁阀、单向阀和单片机控制器及计算机组成。洗脱泵流量O SOmL/min，压力O 30Mpa ；进样泵流量O 10mL/min，压力O 40Mpa ；萃取泵流量O 80mL/min，压力O 30Mpa ；色谱柱工作温度15 40°C。如图1所示，三带模拟移动床色谱系统由8根色谱柱组成，分为三个带 解吸带有1根色谱柱；精制带由4根色谱柱组成；吸附带由3根色谱柱组成，通过三带模拟移动床色谱控制系统，定时控制电磁阀的开闭，使进样口，进流动相口，萃取液出口，萃余液出口沿流动相的方向定时变换，高纯度的芍药苷产品从萃余液出口获得，高纯度的芍药内酯苷产品从萃取液出口获得。三带模拟移动床色谱系统具体操作参数为进样液流速Uf为2. OmL/min ；洗脱液流速Ud为40mL/min ；萃取液流速Ue为19mL/min ；萃余液流速Ur为23mL/min ；切换时间Ts 为 26min。
4.产品浓缩将萃取液(E)和萃余液(R)分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至近干，用乙醇洗出后在真空冷冻干燥箱冻干至恒重。控制浓缩温度小于或等于40°C。5.产品检验采用日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器，Agilent色谱柱， 色谱柱规格4. 6 X 150mm, ODS填料，粒径5 μ m,流动相为甲醇和水，体积比为30 70，流速 1. OmL/min，检测波长230nm，产品检测谱图见图2。通过外标法测定产品中芍药苷的质量百分比纯度为95%以上。
权利要求
1.一种三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，其特征在于该方法的技术方案如下采用白芍总苷提取物为原料，应用三带模拟移动床色谱系统分离提纯，三带模拟移动床色谱系统由4 8根色谱柱组成，色谱柱分为三个带解吸带；精制带；吸附带，每个带由 1 4根相同的色谱柱串联构成，系统工作条件是固定相采用十八烷基硅烷键合硅胶，进样液流速Uf为0. 1 2. 5mL/min ；洗脱液流速Ud为5 40mL/min ；萃取液流速Ue为2 20mL/min ；萃余液流速Ur为2 20mL/min ；切换时间Ts为15 30min ；流动相为甲醇与水的混合溶液；模拟移动床操作温度为15 40°C。
2.根据权利要求1所述的三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，其特征在于所说的流动相甲醇与水的混合溶液体积比比例为25 75。
3.根据权利要求1所述的三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，其特征在于所说的白芍总苷提取物采用纯化手段从白芍药材中提取，白芍总苷提取物中的芍药苷和芍药内酯苷的总含量的质量百分比大于95%，其中芍药苷的含量的质量百分比大于45%。
4.根据权利要求1所述的三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，其特征在于所说的白芍总苷提取物原料采用纯甲醇溶解，溶解后白芍总苷提取物的浓度为30 300mg/mLo
全文摘要
本发明公开了一种三带模拟移动床色谱分离提纯芍药苷的方法，解决芍药苷的分离提取纯度低，无法规模化生产的问题。本发明采用白芍总苷提取物为原料，应用三带模拟移动床色谱系统分离提纯。本发明分离提纯的芍药苷产品的质量百分比纯度达到95％以上，同时获得的芍药内酯苷的质量百分比纯度达到90％以上。由于三带模拟移动床系统分离过程是连续分离，生产的自动化程度高，生产效率高，且溶剂只使用了甲醇和水，可以回收利用，节约资源，分离过程中不接触有毒溶剂，真正实现了清洁生产。
文档编号C07H17/04GK102336792SQ20101023366
公开日2012年2月1日 申请日期2010年7月22日 优先权日2010年7月22日
发明者丛景香, 唐晓丹, 张伟, 李芊, 王绍艳 申请人:辽宁科技大学