用于治疗病毒感染和异常细胞增殖的修饰核苷类化合物的利记博彩app

专利名称：用于治疗病毒感染和异常细胞增殖的修饰核苷类化合物的利记博彩app
技术领域：
本发明包括用于治疗黄病毒科(Flaviviridae)、正粘病毒科 (Orthomyxoviridae)、副粘病毒科(Paramyxoviridae)感染和异常细胞增殖的化合物和方法。本申请要求下列美国临时申请的优先权其中一件申请号为60/241，488，于2000 年10月18日提交；另一件申请号为60/282，156，于2001年4月6日提交。
背景技术：
黄病毒科黄病毒科是一组正单链RNA病毒，其基因组大小为9-15kb。它们是约40-50nm的 有包膜病毒。国际病毒分类学委员会给出了黄病毒科分类的概述。黄病毒科由3个属组成。1.昔病毒属.该属包括登革热病毒群(登革热病毒、1型登革热病毒、2型登革热 病毒、3型登革热病毒、4型登革热病毒)、日本脑炎病毒群(Alfuy病毒、日本脑炎病毒a、 Kookaburra病毒、Koutango病毒、Kunjin病毒、澳洲墨莱溪谷(Murray Valley)脑炎病毒、 圣路易斯脑炎病毒、Stratford病毒、Usutu病毒、西尼罗河病毒)、Modoc病毒群、Rio Bravo 病毒群(Apoi病毒、Rio Brovo病毒、Saboya病毒)、恩塔亚病毒群、蜱传脑炎群(蜱传脑炎 病毒)、Tyuleniy病毒群、乌干达S病毒群和黄热病病毒群。除了这些主要群以外，还有某 些未分类的其他黄病毒。2. Hepaciviruses.该属仅含有一类病毒，即丙型肝炎病毒(HCV)，其由多种分枝、 型和亚型组成。3.瘟病毒属.该属包括牛病毒性腹泻病毒_2 (BVDV-2)、1型瘟病毒(包括BVDV)、 2型瘟病毒(包括猪霍乱病毒)和3型瘟病毒(包括Border病病毒)。人类中最重要的黄病毒科病毒感染之一是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的。这是病 毒性肝炎的第二号主要原因，据估计全球有一亿七千万携带者(世界卫生组织；丙型肝炎 全球流行，WeeklyEpidemiological Record，1997，72，341)，其中在美国有三百九十万(疾 病控制中心；未公布的数据，http://www. cdc. gov/ncidod/diseases/hepatitis/heptab3. htm)0黄病毒科病毒的基因组结构具有很多共有特征。丙型肝炎病毒(HCV)基因组经 常被用作模型。HCV是小的有包膜的病毒，在核壳内具有、.6kb的正单链RNA基因组。该 基因组含有一个开放读框(0RF)，其编码刚好3000个以上氨基酸的多蛋白，该蛋白裂解以 产生成熟的结构和非结构病毒蛋白。0RF的旁侧是长度为几百个核苷酸的5'和3'未翻 译区域(NTRs)，该区域对于RNA翻译和复制很重要。翻译的多蛋白含有结构核(C)和在 N-末端的包膜蛋白(El、E2、p7)，之后是非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B)。 成熟的结构蛋白是通过被宿主信号肽酶裂解而产生的(参见Hijikata，M.等人.Proc.Nat. Acad. Sci.，USA,1991,88, 5547 ；Hussy, P.等人.Virology,1996,224,93 ；Lin, C.等 人 T. Virol. , 1994，68，5063 ；Mizushima, H 等人 T. Virol.，1994，68，2731 ；Mizushima, H.等人.T. Virol.，1994,68,6215 ； Santolini, E.等人.T. Virol. , 1994,68, 3631 :Selby, M. J.等人.Virology, 1994,204,114 禾口 Grakoui,A.等人.Proc. Nat. Acad. Sci. ,USA, 1993, 90,10538)。NS2与NS3之间的连接被NS2/NS3蛋白酶自催化地裂解(参见Hijikata， M.等人..T.Virol. , 1993,67,4665 和 Bartenschlager, R.等人..T.Virol.，1994，68，5045)， 而剩余的4个连接被与NS4A复合的NS3的N-末端丝氨酸蛋白酶域裂解(参见Failla， C.等人.T. Virol.，1994，68，3753 ；Lin, C.等人.T. Virol. , 1994,68,8147 :Tanii, Y.等 人.T. Virol.，1995,69,1575 和 Tai, C. L.等人 丄 Virol.，1996，70，8477)。 NS3 蛋白还 含有NTP-依赖性解旋酶活性，其在复制期间解开双螺旋RNA。NS5B蛋白具有RNA-依赖性 RNA 聚合酶(RDRP)活性(参见Behrens，S. E.等人.EMB0 T.，1996，15，12 ；Lohmann,V.等 人.T. Virol. , 1997，71，8416-8428 和 Lohmann，V.等人.Virology, 1998，249，108)，这是病 毒复制所必需的(Ferrari，E.等人..T.Virol.，1999，73，1649)。在此需要强调的是，与HBV 或HIV不同，没有DNA参与HCV的复制。最近，用鸟苷5'-—磷酸(GMP)、5' - 二磷酸(⑶P)、 5'-三磷酸(GTP)以及2'-脱氧和2' ,3' - 二脱氧鸟苷的5'-三磷酸(分别是dGTP 和ddGTP)进行了使用NS5B-HCV-RDRP的底物特异性的体外实验。该作者声称，HCV-RDRP对 核糖核苷5'-三磷酸有严格的特异性，并需要2'-和3' -0H基团(Lohmarm Virology， 108)。他们的实验表明，存在2'-和3'-取代基是核苷5'-三磷酸与HCV-RDRP相互作 用以及起底物或抑制剂作用的必要条件。已经鉴定出的具有抗丙型肝炎黄病毒活性的抗病毒剂的实例包括1.干扰素和利巴韦林(Battaglia, A.M.等人.Ann. Pharmacother. 2000,34,487 ； Berenguer, M. ^A.Antivir. Ther. 1998，3 (Suppl. 3)，125)；2.基于底物的NS3蛋白酶抑制剂(Attwood等人.PCT W0 98/22496，1998 ； Attwood ^ A ■ Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999, 10,259 ；Attwood 等人.德 国专利公开DE 19914474 ；Tung等人 PCT W098/17679)，包括a -酮基酰胺类和胼基脲类， 以及末端是亲电体例如硼酸或膦酸酯的抑制剂(Llinas Brimet等人.PCT W0 99/07734)；3.非基于底物的抑制剂例如2，4，6_三羟基-3-硝基-苯甲酰胺衍生物(Sudo K.等人 ，Biochemical and Biophysical ResearchCommunications,1997，238，643 禾口 Sudo K.等人.Antiviral Chemistryand Chemotherapy 1998，9，186)，包括 RD3-4082 和 RD3-4078，前者在酰胺上被具有14个碳的链取代，后者具有对苯氧基苯基；4.在用NS3/4A融合蛋白和NS5A/5B底物进行的反相HPLC测定中表现出相关抑制 作用的噻唑烷衍生物(Sudo K.等人，Antiviral Researchl996，32，9)，尤其是具有被长烧 基链取代的稠合肉桂酰基部分的化合物RD-1-6250、RD4 6205和RD4 6193 ；5.在 Kakiuchi N 等人.J. EBS Letters 421,217 和 Takeshita Ni 等 人.Analytical Biochemistry 1997，247，242中确定的噻唑烷类化合物和苯甲酰基苯胺化 合物；6.在SDS-PAGE和放射自显影测定中具有抗HCV蛋白酶活性的从链霉菌属发酵培 养肉汤中分离出来的菲醌化合物Sch 68631 (Chu M.等人.Tetrahedron Letters 1996，37， 7229)，和在闪烁亲近测定中表现出活性的从真菌Penicillium griscofuluum中分离出来
22的 Sch 351633 (Chu Μ.等人· ,Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 9，1949)；7.基于大分子elgin c的从水蛭中分离出来的选择性NS3抑制剂(Qasim Μ. A.等 A· Biochemistry 1997，36，1598)；8. HCV 解旋酶抑制剂(Diana G. D.等人.，U. S.专利 5，633，358 和 DianaG. D.等 人.PCT WO 97/36554)；9. HCV聚合酶抑制剂例如核苷酸类似物、胶霉毒素(Ferrari R.等人.Tournal of Virology 1999，73，1649)和天然产物浅蓝菌素(LohmannV.等人· Virology 1998,249, 108)；10.与下列序列互补的反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(S-ODN)至少一部分HCV的序 列(Anderson等人.U. S.专利6，174，868)，特别是在5'非编码区域(NCR)中延伸的序列 (Alt Μ.等人.Heoatology 1995，22，707)，或包含NCR的3 ‘末端的核苷酸326-348和位 于 HCV RNA 的核编码区域中的核苷酸 371-388 (Alt Μ.等人.Archives of Virologyl997, 142，589 和 Galderisi U.等人.，Tournal of Cellular Physiologyl999,81 :2151)；11. IRES-依赖性翻译抑制剂(Ikeda N等人·日本专利公开JP-08268890 ；Kai Y.等人·日本专利公开JP-10101591)；12.核酸酶-抗性核酶(Maccjak D. J.等人.，Hepatology 1999,30, abstract 995)；13.金刚烷胺例如金刚乙胺(Smith, Abstract from Annual Meeting oftheAmerican Gastoenterological Association and AASLD,1996)；14.喹诺酮类例如氧氟沙星、环丙沙星和左氟沙星(AASLD Abstracts, Hepatology, Oct. 1994, Program Issue, 20(4), pt. 2, abstractno. 293)；15.核苷类似物(Ismaili 等人.WO 01/60315 ；Storer WO 01/32153)，包括 2'-脱氧-L-核苷(Watanabe 等人.WO 01/34618)和 1_( β-L-呋喃核糖基)_1，2，4_ 三 唑-3-甲酰胺(levovirin ) (Tam WO 01/46212)；和16.其它各种化合物，包括1-氨基-烷基环己烷(Gold等人.U. S.专利 6，034，134)、烷基脂类(Chojkier等人.U. S.专利5，922，757)、维生素E和其它抗氧 化剂(Chojkier等人.U. S.专利5，922，757)、角鲨烯、胆汁酸(Ozeki等人.U. S.专利 5，846，964)、N-(膦酰基乙酰基)-L-天冬氨酸(Diana等人.U. S.专利5，830，905)、苯二 甲酰胺类(Diana等人.U. S.专利5，633，388)、多聚腺苷酸衍生物(Wang等人.U. S.专 利 5，496，546)、2'，3' -二脱氧肌苷(Yarchoan 等人.U. S.专利 5，026，687)、苯并咪唑 类(Colacino 等人· U. S.专利 5，891，874)、葡糖胺类(Mueller 等人· WO 01/08672)、取代 的-1,5-亚氨基-D-山梨醇化合物(Mueller等人· WO 00/47198)。ιΗ粘病毒科正粘病毒科是一组分节段的负单链RNA病毒，其基因组大小为10-13. 6kb。它们是 约80-120nm的有包膜病毒。国际病毒分类学委员会给出了正粘病毒科分类的概述。正粘 病毒科由3个属组成，这3个属是根据其核壳(NP)与基质蛋白(M)之间的抗原差异来划分 的。1.甲型流感病毒属和乙型流感病毒属.该属包括分别含有8个不同的RNA片段的 甲型流感病毒和乙型流感病毒。乙型流感病毒在其表面糖蛋白中表现出很小的变异性，并仅感染人类。另一方面，甲型流感病毒在其表面糖蛋白中有很大的变异性，并且可根据其血 凝素(HA)和神经酰胺酶(NA)糖蛋白的抗原性将它们分为亚型，其感染人以及猪、马、海豹、 家禽、鸭子和多种其它种类的鸟。2.丙型流感病毒属.该属仅包括一类病毒一丙型流感病毒，其只包含7个不同的 RNA片段。丙型流感病毒仅具有一个多功能糖蛋白，并且主要感染人类，但是在中国也从猪 中分离出了该病毒。3. 丁型流感病毒属.该属包括丁型流感病毒，其仅是蜱传病毒，在结构和基因方 面与甲型、乙型和丙型流感病毒类似。人类中最重要的正粘病毒科病毒感染之一是由甲型流感病毒引起的。这些病毒是 高度触染性的，并引起急性呼吸道疾病，从很早以前就由于流行而给人类社会带来了很大 灾难。关于甲型流感流行病的一个最早记录可追溯到公元前412年的希波克拉底。这些流 行病相当频繁，并且对于老年人经常是致命的，然而，这些流行病非常不可预测。这些病毒 是独特的呼吸道病毒，因为它们经历显著的抗原变异。血凝素(HA)和神经酰胺酶(NA)糖 蛋白都能够发生抗原漂移和转变。有14种已知的血凝素(H1-H14)糖蛋白和9种已知的神 经酰胺酶(N1-N9)糖蛋白。例如，因为最早的人流感病毒是在1933年分离出来的，所以大 部分抗原转变已发生了。在1957年，H2N2亚型(亚洲流感)代替了 Hmi亚型(西班牙流 感)。目前，流感的主要亚型是在1977年重新出现的Hmi和在1968年重新出现的H3N2。已经用甲型流感病毒进行了针对流感病毒基因表达和RNA复制的大量研究。甲型 流感病毒颗粒的最显著特征是有一层从脂质包膜向外辐射的约500个刺突(10-14nm)。这 些刺突有两种类型棒形的HA刺突和蘑菇型的NA刺突。HA与NA的比例不定，但是通常为 4-5 1。每个基因片段编码其各自的蛋白，除了第7个片段编码风和礼，第8个片段编码 NS:和NS2。每个vRNA的在3'-末端的前12个核苷酸和在5'-末端的前13个核苷酸在 所有8个RNA片段中都存在。具有其确定的核苷酸序列的第一个基因是HA。从那时以来， 已经确定了所有14种已知的HA抗原亚型和在这些亚型内的许多变种。在感染细胞中，vRNA都转录成mRNA并复制。mRNA的合成是不同的，因为RNA是以 源自新合成的宿主细胞RNA聚合酶II转录物的5'加帽的片段作为引物。mRNA链延长直 至尿苷残基长度达到在vRNA 5'-末端前面的15-22个核苷酸，在此处转录末端和聚腺苷 酸被加到mRNAs中。为了开始复制，需要导致生成vRNA的全长拷贝的另一种转录。在mRNA 合成期间，全长转录不用引物即可开始，并且在聚(A)位点不终止。复制的第二步是将模板 RNA拷贝成vRNA。该合成也不用引物即可开始，这是因为vRNA含有5'-三磷酰化末端。 所有这三类病毒特异性RNA—mRNA、模板RNA和vRNA—都是在细胞核中合成的。已经鉴定出的具有抗甲型流感病毒活性的抗病毒剂的实例包括1.放线菌素D(Barry，R. D.等人.“脱氧核糖核酸参与流感病毒增殖”Nature， 1962，194，1139-1140)；2.金刚烷胺(Van Voris,L. P.等人.“用于化学预防和治疗流感的抗病毒剂”Semin Respir Infect，1992，7，61-70)；3. 4-氨基-或4-胍基-2-脱氧_2，3_ 二去氢_D_N_酰神经氨酸_4_氨基-或 4-胍基-Neu 5 Ac2en(von Itzstein, M.等人.“流感病毒复制的基于唾液酸酶的有效抑 制剂的合理设计” Nature, 1993，363，418-423)；
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4.利巴韦林(Van Voris,L. P.等人.“用于化学预防和治疗流感的抗病毒剂”Semin Respir Infect,1992,7,61-70)；5.干扰素(Came，P.E.等人.“干扰素引起的合成聚合物的抗病毒活件"Proc Soc Exp Biol Med, 1969，131,443-446 ；Gerone, P. J.等人.“用合成双链核糖核酸的气雾剂抑 制小鼠的呼吸道病毒感染” Infect Immun, 1971,3,323-327 ；Takano, K.等人.“小鼠流感 中的被动干扰素保护” T Infect Pis, 1991，164，969-972)；6.灭活的甲型和乙型流感病毒疫苗(“流感疫苗的临床研究-1978”Rev Infect Pis, 1983, 5, 721-764 ；Galasso, G. T.等人.“流感疫苗的临床研究-1976” T Infect Pis, 1977，136 (suppl)，S341-S746 Jennings, R.等人.“志愿者对灭活的流感病毒疫苗的反 应，，T Hyr, 1981，86，1-16 ；Kilbourne, E. D. “灭活的流感疫苗” In :Plothin SA, Mortimer EA, eds. Vaccines Philadelphia :Saunders, 1988,420-434 ；Meyer, H. M. , Jr.等人.“现有 流感疫苗综沭”Am T ClinPathol, 1978,70,146-152 ；“每周死亡率和发病率报告.预防和控 制流感第 I 部分，疫苗 Recommendations of the Advisory Committeeon Immunication Practices (ACIP) ” MMWR, 1993,42 (RR-6), 1-14 :Palache, A.M.等人.“用不同剂量的疫苗 进行流感免疫接种后的抗体反应在老年疗养院和年轻志愿者中进行的双盲、安慰剂对照、 多中心、剂量反应实验”Vaccine, 1993，11,3-9 ；Potter, C. ff. “灭活的流感病毒疫苗” In Beare AS, ed. Basic and applied influezaresearch, Boca Raton, FL :CRC Press, 1982, 119-158)。副粘病毒科副粘病毒科是一组负单链RNA病毒，其基因组大小为16_20kb。它们是约 150-300nm的有包膜病毒。国际病毒分类学委员会给出了副粘病毒科分类的概述。副粘病 毒科由2个亚科组成。1.副粘病毒亚科.该亚科含有3个属a)副粘病毒属.该属的代表是仙台病毒，并包括人副流感病毒1和3 ；b)腮腺炎病毒属.该属的代表是流行性腮腺炎病毒、猴病毒5、新城病病毒和人副 流感病毒2和4 ；c)麻疮病毒属.该属的代表是麻疮病毒和2.肺病毒亚科.该亚科编码比其它亚科多的mRNA(10种，其它亚科是6种或7 种)，并且仅包括一个属a)肺病毒属.该属的最典型代表是呼吸道合胞体病毒(RSV)，但是也包括牛 RSV(BRSV)、绵羊RSV(0RSC)、山羊RSV(CRSV)、小鼠肺炎病毒(PVM)和火鸡鼻气管炎病毒 (TRTV)。人类中最主要的正粘病毒科病毒感染之一是由呼吸道合胞体病毒(RSV)引起的。 RSV是世界范围内婴儿和儿童中病毒性下呼吸道疾病的最主要原因。在大部分地区，RSV比 所有其它微生物病原体都更值得关注，因为它是不满一岁的婴儿发生肺炎和细支气管炎的 原因。还已经发现，RSV感染是免疫抑制成人和老年人的重要致病体。此外，BRSV已经在牛 中表现出给经济带来严重损失的疾病。基因组RSV RNA的3'-末端由一个44-核苷酸基因外前导区构成，据假设该前 导区包含主要的病毒启动子。该前导区后面是10个病毒基因，之后是一个155-核苷酸基因外尾随区。88%的基因组RNA通过0RF形成10种主要蛋白。每个基因都由保守的9-核 苷酸基因开始信号开始。对于每个基因，转录都是在该信号的第一个核苷酸上开始的。每 个基因都以指导转录终止和多腺苷酸化的半保守的12至13核苷酸基因末端信号终止。前 9个基因是未重叠的，并且通过大小为1-52个核苷酸的基因间区域隔开。基因间区域不含 任何保守序列基序或任何明显的二级结构特征。最后两个RSV基因通过68个核苷酸重叠。 因此，一个基因开始信号位于另一个基因内部，而不是在另一个基因后面。已经鉴定出的具有抗RSV活性的抗病毒剂的实例包括1.利巴韦林(Hruska，J. F.等人.“通过利巴韦林在体内抑制呼吸道合胞体病 毒” Antimicrob Agents Chemother, 1982, 21,125-130)；禾口2.纯化的人静脉内IgG-IVIG(Prince，G. A.等人.“在棉大鼠呼吸道合胞体病毒 感染的实验免疫治疗中局部施用的中和件抗体的有效件” T Virol, 1987,61,1851-1954 ； Prince, G. A.等人.“免疫预防和免疫治疗棉大鼠中的呼吸道合胞体病毒感染” Infect Immun,1982，42，81—87)。异常细胞增殖在多细胞生物体中，细胞的分化、生长、功能和死亡是由复杂的机制网络在分子水 平上调控的。在健康的动物或人中，这些机制让细胞进行其设计的功能，然后以程序化速度死亡。异常细胞增殖，尤其是过度增殖可由于多种因素所致，包括基因突变、感染、暴露 于毒素、自身免疫性障碍和良性或恶性肿瘤诱导。有多种与细胞过度增殖有关的皮肤病症。例如，牛皮癣是人皮肤的良性疾病，其特 征一般是被增厚的鳞屑覆盖的斑。该疾病是由未知原因的表皮细胞增殖增加引起的。在正 常细胞中，细胞从基础层移动到上颗粒层所需的时间大约是5周。在牛皮癣中，该时间仅为 6-9天，部分原因是增殖的细胞数目增加以及分裂的细胞所占的比例增加(G. Grove，Int. J. Dermatol. 18 :111，1979)。在美国，大约2 %的人患有牛皮癣，在美国白人中该比例大约 是3%，在美国黑人中该比例大约是1%，而在美国土著人当中很少有人患该疾病。慢性湿 疹也与严重的表皮过度增殖有关。由皮肤细胞过度增殖引起的其它疾病包括特应性皮炎、 扁平苔癣、疣、寻常天疱疮、光化性角化病、基底细胞癌和鳞状细胞癌。其它过度增殖性细胞病症包括血管增殖病症、纤维变性病症、自身免疫性病症、移 植物对宿主排斥、肿瘤和癌症。血管增殖性病症包括血管生成和血管发生病症。在血管组织的斑块发展过程中的 平滑肌细胞增殖引起例如再狭窄、视网膜病和动脉粥样硬化。严重的动脉粥样硬化损伤是 由于对动脉壁的内皮和平滑肌的损伤的过度炎性增殖性反应所致(Ross，R. Nature, 1993， 362 :801-809)。细胞迁移和细胞增殖都在动脉粥样硬化损伤的形成中起作用。纤维变性病症经常是由于细胞外基质的异常形成所致。纤维变性病症的实例包括 肝脏硬化和肾小球系膜增殖性细胞病症。肝脏硬化的特征是细胞外基质组分增加，从而导 致形成肝脏瘢痕。肝脏硬化可引起疾病例如肝硬化。导致肝脏瘢痕的细胞外基质增加还可 能由病毒感染例如肝炎引起。脂细胞似乎在肝脏硬化中起主要作用。肾小球系膜病症是由肾小球系膜细胞的异常增殖引起的。肾小球系膜过度增殖性 细胞病症包括各种人肾疾病例如肾小球性肾炎、糖尿病性肾病、恶性肾硬化、血栓形成性微
26血管病综合征、移植排斥和肾小球病。增殖性成分的另一种疾病是类风湿性关节炎。类风湿性关节炎一般被认为是自身 免疫性疾病，据信其与自反应性T细胞的活性有关(参见例如Harris，E. D.，Jr.，The New England Journal of Medicine，1990，322 :1277_1289)，以及由产生的抗胶原和 IgE 的自身 抗体引起。可包括异常细胞增殖成分的其它病症包括贝赫切特病、急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)、缺血性心脏病、透析后综合征、白血病、获得性免疫缺陷综合征、结节性脉管炎、脂 性组织细胞增多症、脓毒性休克和一般的炎症。也称为新生物的肿瘤是其中细胞增殖失控且进行性的组织新生长。良性肿瘤是没 有侵袭和转移性质的肿瘤，并且通常环绕着纤维性被膜。恶性肿瘤(即癌症)是既能侵袭 又能转移的肿瘤。与良性肿瘤相比，恶性肿瘤还表现出更大程度的退行发育(即失去细胞 分化及其彼此之间和对其轴构架组织的定向)。每年大约1200万美国人被诊断为癌症患者，其中8000位患者为儿童。此外，仅在 美国每年就有500000人死于癌症。前列腺癌和肺癌是男性死亡的头号原因，而乳腺癌和肺 癌是女性死亡的头号原因。据估计，在美国，涉及癌症的花费占疾病治疗总花费的大约10% (CNN. Cancer. Factshttp//www. cnn. com/HEALTH/9511/conquer_cancer/facts/index, html, page 2 of 2, July 18，1999)。增殖性病症目前是用各类化合物进行治疗，包括烷化剂、抗代谢物、天然产物、酶、 生物反应调节剂、各种其它治疗剂、放疗药物(例如标记在激素或抗体上的Y-90)、激素和 拮抗剂例如下面列出的那些。烷化剂氮芥类氮芥(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤)、环磷酰胺、异环磷酰胺(急性和慢性 淋巴细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、成神经细胞瘤、乳腺癌、卵巢 癌、肺癌、维尔姆斯瘤、子宫颈、睾丸、软组织肉瘤)、马法兰(L-苯丙氨酸氮芥)(多发性骨髓 瘤、乳腺癌、卵巢癌)、瘤可宁(慢性淋巴细胞白血病、原发性巨球蛋白血症、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤)。乙烯亚胺类和甲基蜜胺类六甲蜜胺(卵巢癌)、噻替哌(膀胱癌、乳腺癌、卵巢 癌)O烷基磺酸酯类白消安(慢性粒细胞性白血病)。亚硝基脲卡氮芥(BCNU)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、原发性脑肿瘤、多发性骨 髓瘤、恶性黑素瘤)、罗氮芥(CCNU)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、原发性脑肿瘤、小细胞肺 癌)、甲环亚硝脲(甲基-CCNU)(原发性脑肿瘤、胃癌、结肠癌)、链脲霉素(STR)(恶性胰腺 胰岛瘤、恶性类癌瘤(carcinoin))。三氮烯属达卡巴嗪(DTIC;二甲基三氮烯基咪唑甲酰胺)(恶性黑素瘤、霍奇金 病、软组织肉瘤)。抗代谢物叶酸类似物甲氨蝶呤(氨甲蝶呤)(急性淋巴细胞白血病、绒膜癌、蕈样真菌病、 乳腺癌、头颈癌、肺癌、骨原性肉瘤)。嘧啶类似物氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶；5-FU)、氟尿苷(氟脱氧尿苷；FUdR)(乳腺
27癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、头颈癌、泌尿膀胱癌、恶化恶习前皮肤损害)(局部)、阿 糖胞苷(阿糖胞苷)(急性粒细胞和急性淋巴细胞白血病)。嘌呤类似物和相关抑制剂巯基嘌呤(6-巯基嘌呤；6-MP)(急性淋巴细胞白血病、 急性粒细胞白血病和慢性粒细胞白血病)、硫鸟嘌呤(6-硫鸟嘌呤；TG)(急性粒细胞白血 病、急性淋巴细胞白血病和慢性粒细胞白血病)、喷司他丁(2' -deoxycyoformycin)(多毛 细胞白血病、蕈样真菌病、慢性淋巴细胞白血病)。长春花属生物碱长春花碱(VLB)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、乳腺癌、睾丸癌)、 长春新碱(急性淋巴细胞白血病、成神经细胞瘤、维尔姆斯瘤、横纹肌肉瘤、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤、小细胞肺癌)。表鬼臼毒素依托泊苷(睾丸癌、小细胞肺癌和其它肺癌、乳腺癌、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤、急性粒细胞白血病、卡波西肉瘤)、替尼泊苷(睾丸癌、小细胞肺癌和其它肺 癌、乳腺癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性粒细胞白血病、卡波西肉瘤)。天然产物抗生素更生霉素(放线菌素D)(绒膜癌、维尔姆斯瘤、横纹肌肉瘤、睾丸癌、卡波 西肉瘤)、柔红霉素(道诺霉素；正定霉素)(急性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病)、 阿霉素(软组织肉瘤、骨原性肉瘤骨原性肉瘤和其它肉瘤；霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急 性白血病、乳腺癌、泌尿生殖器癌、甲状腺癌、肺癌、胃癌、成神经细胞瘤)、博莱霉素(睾丸 癌、头颈癌、皮肤和食道癌、肺癌和泌尿生殖道癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤)、普卡霉素 (光辉霉素)(睾丸癌、恶性高钙血)、丝裂霉素(自力霉素C)(胃癌、子宫颈癌、结肠癌、乳 腺癌、胰腺癌、膀胱癌、头颈癌)。酶L_天冬酰胺酶(急性淋巴细胞白血病)。生物反应调节剂a-干扰素(多毛细胞白血病、卡波西肉瘤、黑素瘤、类癌瘤、 肾细胞癌、卵巢癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、蕈样真菌病，多发性骨髓瘤、慢性粒细胞白血 病)。各种其它治疗剂钼配位络合物顺钼(顺式-DDP)、卡钼(睾丸癌、卵巢癌、膀胱癌、头颈癌、肺癌、 甲状腺癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、成神经细胞瘤、骨原性肉瘤)。蒽二酮类Mixtozantrone (急性粒细胞白血病、乳腺癌)。取代的脲类羟基脲(慢性粒细胞白血病、红细胞增多症、特发性血小板增多症、 恶性黑素瘤)。甲基胼衍生物丙卡巴胼(N-甲基胼，MIH)(霍奇金病)。肾上腺皮质抑制剂米托坦(o，p' -DDD)(肾上腺皮层癌)、氨鲁米特(乳腺癌)。肾上腺类皮质激素类强的松(急性和慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍 奇金病、乳腺癌)。孕激素类己酸羟孕酮、乙酸甲羟孕酮、乙酸甲地孕酮(子宫内膜癌、乳腺癌)。抗血管生成剂Angiostatin、Endostatin。激素和拮抗剂雌激素类己烯雌酚、乙炔雌二醇(乳腺癌、前列腺癌)。
抗雌激素类他莫昔芬(乳腺癌)。雄激素类丙酸睾酮、氟甲睾酮(乳腺癌)。抗雄激素类氟他胺(前列腺癌)。促性腺素释放激素类似物亮丙瑞林(前列腺癌)。与治疗包括癌症在内的异常增殖性细胞有关的毒性部分是由于药物在疾病和正 常细胞之间缺乏选择性。为了克服该限制，现在正在探索增加治疗增殖性病症的药物的特 异性并由此减小药物毒性的治疗策略。一种正在积极研究的策略是药物靶向作用。从这些疾病的严重性以及它们在包括人在内的动物中的流行来看，本发明的目的 是提供用于治疗感染任何上述病毒，包括黄病毒或瘟病毒、流感病毒或呼吸道合胞体病毒 (“RSV”)的宿主，包括动物和尤其是人的化合物、方法和组合物。本发明的另一个目的是提供用于治疗患有异常细胞增殖的宿主，包括动物和尤其 是人的方法和组合物。本发明的另一个目的是提供用于治疗感染丙型肝炎病毒或BVDV的宿主，包括动 物和尤其是人的方法和组合物。本发明的另一个目的是提供用于治疗感染流感病毒的宿主，包括动物和尤其是人 的方法和组合物。本发明的另一个目的是提供用于治疗感染RSV的宿主，包括动物和尤其是人的方 法和组合物。本发明的另一个目的是提供用于治疗患有肿瘤，包括恶性肿瘤的宿主，包括动物 和尤其是人的方法和组合物。本发明的另一个目的是提供定量测定宿主，包括动物、尤其是人中的病毒负载量， 特别是BVDV或HCV负载量的更有效方法。发明概述本发明提供了用于治疗感染属于黄病毒科、正粘病毒科和副粘病毒科的病毒的宿 主的式(I)-(XXIII)所示的0-D或0-L核苷或其可药用盐或前药。或者，本发明0-D或 3-L核苷(I)-(XXIII)或其可药用盐或前药可用于治疗异常细胞增殖。具体来说，本发明还包括治疗或预防下列病症的方法(a)黄病毒科病毒感染，包括所有Ifepacivirus属(HCV)、瘟病毒属(BVDV、CSFV、 BDV)或黄病毒属(登革热病毒、日本脑炎病毒群(包括西尼罗河病毒)和黄热病病毒)病 毒感染；(b)正粘病毒科病毒感染，包括所有甲型流感病毒属和乙型流感病毒属，特别是甲 型流感病毒和所有相关亚型，包括Hmi和H3N2以及乙型流感病毒感染；(c)副粘病毒科病毒感染，包括呼吸道合胞体病毒(RSV)感染；和(d)异常细胞增殖，包括恶性肿瘤。在一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(I)或(II)的3-D核苷 或其可药用盐或前药，其中每个D是氢、烷基、酰基、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、 磷脂或氨基酸；每个W1和W2独立地为CH或N ；每个X1 和 X2 独立地为氢、卤素(F、CI、Br 或 I)、NH2、NHR4、NR4R4 ‘、NH0R4、 NR4NR4 ‘ R4 〃、OH、OR4、SH 或 SR4 ；每个Y1 是 0、S 或 Se;每个Z是012或冊；每个R1和R1 ‘独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、低级炔基、芳基、烷基芳基、卤 素尔、(1、81~或1)、朋2、朋1 5、殿51 5'、NHOR5、NR5NHR5'、NR5NR5' R5〃、OH、OR5、SH、SR5、NO2、 no、ch2oh、ch2or5、co2h、co2r5、conh2、conhr5、conr5r5 '或 CN ;每个R2 和 R2'独立地为氢或卤素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、 CH = CH2、CN、CH2NH2、CH20H、C02H ；每个R3 和 R3'独立地为氢或卤素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、 CH3、C2H5、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH20H、C02H ；每个R4、R4'、R4"、R5、R5'和R5"独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、芳基或芳基 烷基例如未取代或取代的苯基或苄基；条件是对于每个通式⑴或(II)的核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3 和R3'当中至少有一个是氢。在另一个本发明实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(IIII)或(IV) 的3 "L核苷 或其可药用盐或前药，其中每个口、^1、^2]1、^、？1、？、! 1、! 1'、R2、R2'、R3和 R3'的定义同前，条件是对于每个通式(III)或(IV)核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3 和R3'当中至少有一个是氢。在一个本发明实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(V)-(VII)的 3 -D-carba-糖核苷
或其可药用盐或前药，其中
每个口、^1、^2、^、^、？1、？、! 1、!^、R2、R2'、R3 和 R3'的定义同前，
条件是对于每个通式(V)或(VI)核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3和
R3'当中至少有一个是氢。在一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(VIII)-(X)的 3 -L-carba-糖核苷或其可药用盐或前药，其中
每个口、^1、^2、^、^、？1、？、! 1、!^、R2、R2'、R3 和 R3'的定义同前，
条件是对于每个通式(VIII)或(IX)核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3
和R3'当中至少有一个是氢。在另一个本发明实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L-核苷分别是通 式(XI)或(XII)核苷
的定义同前，[Xll-b]或其可药用盐或前药，其中每个口、^1、^2]1]2、？1、？、! 1、! 1'、R2、R2'、R3禾口 R3每个Z1和Z2独立地为0、S、CH2、NR6或Se ；每个R6是氢、低级烷基或低级酰基。在另一个本发明实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L-核苷，尽管优 选B-D-核苷，是通式(XIII)核苷
的定义同前； 或其可药用盐或前药，其中每个D、! 1、! 1'、R2、R2'、妒和妒每个Y2 是 0、S、NH 或 NR7 ；每个Y3 是 0、S、NH 或 NR8 ；每个X3是OR9或SR9 ；且每个R7、R8和R9是氢、CrC6低级烷基、芳基烷基或芳基；条件是对于每个通式(XIII-d)核苷，R2和R2'当中至少有-且R3和R3 ‘当中至少有一个是氢。
34
卜是氧，
或其可药用盐或前药，其中
、rtR3'的定义同前,
在一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XVI)的0-D或3-L在另一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的化合物是0-D或0-L-核苷，优选 B-D-核苷，所述核苷是这样获得的将小分子例如次氯酸烷基酯、次溴酸烷基酯、次溴酸或 酰卤加成到合适的嘧啶核苷上以形成式(XIV)核苷或其可药用盐或前药，其中每个0、父1、￥1、21、1 1、1 2、1 2'、铲和铲'的定义同前，每个L1是氢、C1或Br ；每个L2 是 OH、0CH3、0C2H5、0C3H7、0CF3、OAc 或 OBz ；每个Z3可以是0或CH2。在另一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XV) 二聚核苷(每个核 苷呈0 -D或0 -L构型)，其中这两个核苷是通过二硫键连接的
C-核苷
35 或其可药用盐或前药，其中^^D,ff\X\X2,Y\Z,R\R2,R2'每个W3独立地为N、CH或CR1 ；每个W4和W5独立地为N、CH、CX1或CR1 ‘；且每个t和Z5独立地为NH或C ( = Y1)；条件是如果Z4和Z5是通过共价键结合的，则当Z5是C( = Y1)时，Z4不是C(= Y1)；并且环氮原子不超过3个。在一个实施方案中，抗病
或抗增殖有效的核苷是通式(XVII)的3-D或
3-L-支链糖核苷 或其可药用盐或前药，其中每个0、妒、12、父1、父2、丫1、23、1 1、1 1'、R2、R2'、R3和 R3'的定义同前；每个X4 和 X5 独立地为氢、卤素(F、CI、Br 或 I)、N3、NH2、NHR8、NR8R8'、OH、OR8、SH 或SR8;且每个R8和R8'独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、芳基或芳基烷基例如未取代或 取代的苯基或苄基；条件是对于每个通式(XVII-a)或(XVII-b)核苷，X4不是0H或OR8。在一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XVIII)的a-D或 a -L-核苷 或其可药用盐或前药，其中
每个D、w’、w’、X‘、X’、Y’、R’、R真’ 、R一、R一’ 、R’和R’’ 的定义同前。
在一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的p—D或p—L核苷是式(X工X)核苷
或其可药用盐或前药，其中
每个D、R’、R‘和R‘’的定义同上；
每个R信是氢、卤素(F、Cl、Br或工)或。P‘；
每个P’是氢、低级烷基、低级链烯基、芳基、芳基烷基(例如未取代或取代的苯基或苄基)、。H、。R‘、N几、NHR‘或NR‘R“ ；和每个P’和P’独立地为氢、烷基、酰基、一MS、一TS、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷脂或氨基酸，优选为氢。
在一个本发明特别的子实施方案中，式(X工X)所示抗病毒或抗增殖有效的p—D或p—L核苷女口下
或其可药用盐或前药，其中每个D和P2的定义同前。在优选的实施方案中，D和P2独立地为氢。在另一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XX)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个口、？1、？2、？3、! 1、! 4、! 4'和R9 的定义同前。在另一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXI)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个口、？1、？2、？3、! 1、! 4*!^的定义同前。在一个本发明特别的子实施方案中，式(XXI)所示抗病毒或抗增殖有效的0 -D或 3 -L核苷如下 或其可药用盐或前药，其中每个D、P2和P3的定义同前。在优选的实施方案中，D、P2和P3独立地为氢。在另一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的3-D或0-L核苷是式 (XXII)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个D、pi和R1的定义同前。在优选的实施方案中，D和P2独立地为氢。在一个本发明特别的子实施方案中，式(XXII)所示抗病毒或抗增殖有效的3-D 或日-L核苷，优选0 -L核苷如下 或其可药用盐或前药，其中D的定义同前，且优选为H。在另一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXIII)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个口、？1、？2、？3、! 1、! 4*!^的定义同前。在一个本发明特别的子实施方案中，式(XXIII)所示抗病毒或抗增殖有效的3 -D 或3 -L核苷如下 或其可药用盐或前药，其中每个D、P2和P3的定义同前。在优选的实施方案中，D、P2和P3独立地为氢。在一个实施方案中，当在合适的基于细胞的测定中测试时，本发明核苷的EC5(I(达 到50%病毒抑制的有效浓度)小于15 u M，更特别地，小于10或5 y M。在优选的实施方案 中，核苷是对映体富集的。本发明还包括至少下述特征(a)如本文所述的式⑴-(XXIII)的3 _D核苷或3 _L核苷或其可药用盐或前药 在医疗中的应用，即作为抗病毒或抗肿瘤/抗癌剂的应用，例如在治疗或预防黄病毒科病 毒感染，包括丙型肝炎病毒感染中的应用；(b)如本文所述的式⑴-(XXIII)的3 -D核苷或3 -L核苷或其可药用盐或前药 在制备用于治疗黄病毒科病毒感染，包括丙型肝炎病毒感染的药物中的应用；(c)药物组合物，其中包含抗病毒有效量的如本文所述的式(I)-(XXIII)的3-D 核苷或3-L核苷或其可药用盐或前药和依据本发明的可药用载体或稀释剂；(d)药物组合物，其中包括如本文所述的式⑴-(XXIII)的3 -D核苷或3 -L核苷 或其可药用盐或前药与一种或多种其它能有效抗病毒的活性剂；和(e)制备如本文所述的式(I)-(XXIII)的0 _D核苷或0 _L核苷及其可药用盐和 前药的方法。本文所述的化合物的活性和毒性可依据任何已知方法评价。下文提供了使用实时 聚合酶链反应(“RT-PCR”)来定量测定宿主中病毒负载量的一种有效方法。该方法包括使用可杂交到靶病毒DNA或RNA上的猝灭荧光探针分子。经过核酸外切降解，可监测可检测 的荧光信号。使用该技术，通过监测荧光信号的存在可实时探测RT-PCR扩增的DNA或RNA。本说明书描述了 (a)如本文所述的使用RT-PCR实时定量测定病毒负载量的方法；(b)如本文所述的使用RT-PCR实时定量测定宿主中黄病毒科病毒，包括宿主中 BVDV和HCV的病毒负载量的方法；(c)如本文所述的使用RT-PCR实时定量测定MDBK细胞系或宿主样本中BVDV的病
毒负载量的方法；(d)如本文所述的设计成经过核酸外切降解发出荧光并与BVDV NADLNS5B区域互 补的探针分子；和(e)探针分子，所述探针分子具有序列 5' -6-fam-AAATCCTCCTAACAAGCGGGTTCCAG G-tamara-3‘ (Sequence ID No 1)，和引物，所述引物具有正义序列5' -AGCCTTCAGTTTCT TGCTGATGT-3‘ (Sequence ID No 2)和反义序列5, -TGTTGCGAMGCACCMCAG-3‘ (Sequen ce ID No 3)；(f)如本文所述的使用RT-PCR实时定量测定宿主衍生样本或细胞系中HCV的病毒 负载量的方法；(g)如本文所述的设计成经过核酸外切降解发出荧光并与HCV 5'-未编码区域 互补的探针分子；和(h)如本文所述的设计成经过核酸外切降解发出荧光并与HCV编码区域互补的探 针分子；和(i)如本文所述的设计成经过核酸外切降解发出荧光并与HCV 3'-未编码区域 互补的探针分子；和(j)探针分子，所述探针分子具有序列 5' -6-fam-CCTCCAGGACCCCCCCTCCC-tamar a-3' (Sequence ID No 4)，和引物，所述引物具有正义序列5‘ -AGCCATGGCGTTAGTA(T/C) GAGTGT-3‘ (Sequence ID No 5)和反义序列5' -TTCCGCAGACCACTATGG-3‘ (Sequence ID No 6)。附图概述附

图1表示的是，如实施例51所述，在细胞培养物中用增加浓度的牛病毒性腹泻 病毒(“BVDV”)使得噬斑形成单位增多。附图1表明，实施例51的方法提供了 BVDV的可 靠定量测定，其中检测灵敏度为4倍病毒的log PFU/mL。附图2表示的是，如实施例52所述，决定最佳收获时间(感染后小时数对噬斑形 成单位(“PFU”)的log)，即感染后22小时的MDBK细胞中的BVDV复制周期，最佳收获时 间大体上相当于其中所产生的病毒量等于接种到细胞内的病毒量的一个复制周期。附图3是一个柱形图表，其表明的是如实施例40所述的一些抗BVDV的测试化合 物抑制噬斑形成单位数目的能力。附图4是一个柱形图表，其表明的是可通过联合施用天然核苷，即胞嘧啶核苷和 尿嘧啶核苷来防止“carba-糖”核苷在CEM细胞(人T-细胞淋巴瘤)和SUDHL-1细胞(人 退行发育性T-细胞淋巴瘤细胞系)中的细胞毒性。附图5提供了本发明核苷的各个非限制性实例以及在本发明中用作比较实例的
42已知核苷利巴韦林的结构。发明详述本发明提供了用于治疗感染属于黄病毒科、正粘病毒科、或副粘病毒科病毒的宿 主的通式(I)-(XXIII)核苷或其可药用盐或前药。或者，本发明通式(I)-(XXIII)核苷或 其可药用盐或前药可用于治疗异常细胞增殖。在一个实施方案中，本发明提供了使用抗病毒剂或抗增殖剂的治疗或预防方法， 例如治疗或预防病毒感染，包括黄病毒科病毒感染，包括丙型肝炎病毒感染，流感病毒感 染，包括甲型流感病毒(例如Hmi和H3N2)与乙型流感病毒和RSV感染，以及异常细胞增 殖的方法，包括施用抗病毒或抗增殖有效量的本发明核苷或其可药用盐或前药。在另一个实施方案中，本发明提供了使用抗病毒剂或抗增殖剂的治疗或预防方 法，例如治疗或预防黄病毒科病毒感染的方法，包括在用于治疗的药物的制备中施用抗病 毒量的本发明核苷或其可药用盐或前药。在另一个实施方案中，本发明提供了使用抗病毒剂或抗增殖剂的治疗或预防方 法，例如治疗或预防流感病毒感染的方法，包括在治疗药物的制备中施用抗病毒有效量的 本发明核苷或其可药用盐或前药。在另一个实施方案中，本发明提供了使用抗病毒剂或抗增殖剂的治疗或预防方 法，例如治疗或预防RSV感染的方法，包括在治疗药物的制备中施用抗病毒有效量的本发 明核苷或其可药用盐或前药。在另一个实施方案中，本发明提供了使用抗病毒剂或抗增殖剂的治疗或预防方 法，例如治疗或预防其特征是异常细胞增殖的疾病的方法，包括施用抗增殖有效量的本发 明核苷。在另一个实施方案中，本发明提供了一种本文所述的化合物在制备用于治疗病毒 感染或异常细胞增殖的药物中的应用。在另一个实施方案中，本发明提供了一种本文所述的化合物在治疗表现出病毒感 染或异常细胞增殖的宿主中的应用。在另一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，其中包括抗病毒或抗增殖有效 量的本发明核苷或其可药用盐或前药和依据本发明的可药用载体或稀释剂。在另一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，其中包含本发明核苷或其可药 用盐或前药与一种或多种其它能有效抗病毒或抗增殖的活性剂。在另一个实施方案中，本发明提供了制备本发明核苷及其可药用盐和前药的方 法。在另一个实施方案中，本发明提供了治疗患有与病毒有关的病症的哺乳动物的方 法，包括给所述哺乳动物施用药物有效量的本发明核苷或其可药用盐或前药。在另一个实施方案中，本发明提供了治疗患有与异常细胞增殖有关的病症的哺乳 动物的方法，包括给所述哺乳动物施用药物有效量的本发明核苷或其可药用盐或前药。本发明特别包括在治疗或预防下述疾病的方法中的所述化合物，或所述化合物在 治疗或预防下述疾病中的应用，或所述化合物在制备用于治疗或预防下述疾病的药物中的 应用(a)黄病毒科病毒感染，包括所有Ifepacivirus属(HCV)、瘟病毒属(BVDV、CSFV、BDV)或黄病毒属(登革热病毒、日本脑炎病毒群(包括西尼罗河病毒)和黄热病病毒)病 毒感染；(b)正粘病毒科病毒感染，包括所有甲型流感病毒属和乙型流感病毒属，特别是甲 型流感病毒和所有相关亚型，包括Hmi和H3N2以及乙型流感病毒感染；(c)副粘病毒科病毒感染，包括呼吸道合胞体病毒(RSV)感染；和(d)异常细胞增殖，包括恶性肿瘤。I.本发明化合物在一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(I)或(II)的3-D核苷 或其可药用盐或前药，其中每个D是氢、烷基、酰基、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、 磷脂或氨基酸，优选为氢；每个W1和W2独立地为CH或N ；每个X1 和 X2 独立地为氢、卤素(F、CI、Br 或 I)、NH2、NHR4、NR4R4 ‘、NH0R4、 NR4NR4 ‘ R4 〃、OH、OR4、SH 或 SR4 ；每个Y1 是 0、S 或 Se ；每个Z 是 CH2 或 NH ；每个R1和R1 ‘独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、低级炔基、芳基、烷基芳基、卤 素尔、(1、81~或1)、朋2、朋1 5、殿51 5'、NHOR5、NR5NHR5'、NR5NR5' R5〃、oh、OR5、SH、SR5、NO2、 no、ch2oh、ch2or5、co2h、co2r5、conh2、conhr5、conr5r5 '或 CN ;每个R2 和 R2'独立地为氢或卤素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH20H、C02H ；每个R3 和 R3'独立地为氢或卤素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、 CH3、C2H5、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH20H、C02H ；每个R4、R4'、R4"、R5、R5'和R5"独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、芳基或芳基 烷基例如未取代或取代的苯基或苄基；条件是对于每个通式⑴或(II)核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3和 R3'当中至少有一个是氢。在另一个本发明实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(IIII)或(IV) 的3 "L核苷
的定义同前，
当中至少有一个是氢，且R3或其可药用盐或前药，其中每个口、^1、^2]1]2、？1、？、! 1、! 1'、R2、R2'、R3禾口 R3条件是对于每个通式(III)或(IV)核苷，R2和R2' 和R3'当中至少有一个是氢。在一个本发明实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(V)-(VII)的 3 -D-carba-糖核苷 或其可药用盐或前药，其中每个0、妒、12、父1、父2、丫1、2、1 1、1 1'、R2、R2'、R3和 R3'的定义同前，条件是对于每个通式(VIII)或(IX)核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3 和R3'当中至少有一个是氢。在另一个本发明实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L-核苷分别是通 式(XI)或(XII)核苷
Y'^^N 、R
N^V^ 人
W1
X" N
"N
R2八 R_
？1
IR 叼 :R2界
47[XII-c]
、RlPR3'的定义同前，[XII-b]或其可药用盐或前药，其中每个口、^1、^2]1]2、？1、？、! 1、! 1'、R2、]每个Z1和Z2独立地为0、S、NR6或Se ；每个R6是氢、低级烷基或低级酰基。在另一个本发明实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L-核苷，优选 B-D-核苷是通式(XIII)核苷
的定义同前；
或其可药用盐或前药，其中 每个 D、! 1、! 1'、R2、R2'、铲和铲' 每个Y2是0、S、NH或NR7 ； 每个Y3是0、S、NH或NR8 ； 每个X3是OR9或SR9;且
每个R7、R8和R9是氢、CrC6低级烷基、芳基烷基或芳基； 条件是对于每个通式(XIII-d)核苷，R2和R2'当中至少有-
卜是氢，且R3和R3
当中至少有一个是氢。
48
在另一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的化合物是0-D或0-L-核苷，优选 B-D-核苷，所述核苷是这样获得的将小分子例如次氯酸烷基酯、次溴酸烷基酯、次溴酸或 酰卤加成到合适的嘧啶核苷上以形成式(XIV)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个0、父1、￥1、21、1 1、1 2、1 2'、铲和铲'的定义同上，每个L1是氢、C1或Br ；每个L2 是 OH、0CH3、0C2H5、0C3H7、0CF3、OAc 或 OBz ；每个Z3可以是0或CH2。在另一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XV) 二聚核苷(每个核 苷呈0 -D或0 -L构型)，其中这两个核苷是通过二硫键连接的 或其可药用盐或前药，其中每个口、！1、！2]1]1、？3、! 1、! 1'、R2、R2'、妒和妒'的定义同上。在一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XVI)的0-D或3-L c-核苷 或其可药用盐或前药，其中每个口、！1、！2]1]2]1、？3、! 1、! 1'、R2、R2'、R3和 R3'的定义同上；每个X4 和 X5 独立地为氢、卤素(F、CI、Br 或 I)、N3、NH2、NHR8、NR8R8'、OH、OR8、SH 或SR8;且每个R8和R8'独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、芳基或芳基烷基例如未取代或 取代的苯基或苄基；条件是对于每个通式(XVII-a)或(XVII_b)核苷，X4不是0H或OR8。在一个实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的核苷是通式(XVIII)的a-D或 a -L-核苷 或其可药用盐或前药，其中每个D和P2的定义同上。在优选的实施方案中，D和P2独立地为氢。在另一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XX)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个口、？1』2、？3、! 1、! 4、! 4'和R9 的定义同上。在另一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXI)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个口、？1、？2、？3、! 1、! 4*! 4'的定义同上。在一个本发明特别的子实施方案中，式(XXI)所示抗病毒或抗增殖有效的0 -D或 3 -L核苷如下 或其可药用盐或前药，其中每个D、P2和P3的定义同上。在优选的实施方案中，D、P2和P3独立地为氢。在另一个实施方案中，N-羟基胞嘧啶用作为连接到本申请中所述的任何糖或 carba-糖部分上的碱基，仿若每个单独的具体实施方案都被完全描述过那样。在另一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXII)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个D、pi和R1的定义同上。在优选的实施方案中，D和P2独立地为氢。在一个本发明特别的子实施方案中，式(XXII)所示抗病毒或抗增殖有效的3-D 或日-L核苷，优选0 -L核苷如下 或其可药用盐或前药，其中D的定义同上，且优选为H。在另一个本发明子实施方案中，抗病毒或抗增殖有效的0-D或0-L核苷是式 (XXIII)核苷 或其可药用盐或前药，其中每个口、？1、？2、？3、! 1、! 4*! 4'的定义同上。在一个本发明特别的子实施方案中，式(XXIII)所示抗病毒或抗增殖有效的3 -D 或3 -L核苷如下或其可药用盐或前药，其中每个D、P2和P3的定义同上。在优选的实施方案中，D、P2和P3独立地为氢。在优选的实施方案中，通式(I-a)和(Ill-a)的3 -D和3 _L核苷由表1提供的 非限制性实例代表。表 1 在优选的实施方案中，通式(I-b)和(III-b)的3-D和f3-L核苷由表2提供的 非限制性实例代表。表2 [lll-b] 在优选的实施方案中，通式(ii-a)和(iv-a)的3 -d和3 _l核苷由表3提供的 非限制性实例代表。表3 在优选的实施方案中，通式(II-b)和(IV-b)的0 -D和0 -L核苷由表4提供的 非限制性实例代表。表4 在优选的实施方案中，通式(v-a)和(viii-a)的3 _d和3 _l核苷由表5提供的 非限制性实例代表。表 5
65 在优选的实施方案中，通式(vll-a)和(x-a)的0 -d和0 -l核苷由表6提供的 非限制性实例代表。表6 在优选的实施方案中，通式(vii-b)和(x-b)的0 -d和0 -l核苷由表7提供的 非限制性实例代表。表 7 在优选的实施方案中，通式(XI-a)或(XII-a)的0 -D或0 _L核苷由表8提供的 非限制性实例代表。表 8 在优选的实施方案中，通式(XII-b)的0-L核苷由表9提供的非限制性实例代表。表 9 [XII-b]

在优选的实施方案中，通式(Xlll-a)的3 -D核苷由表10提供的非限制性实例代表。表10 在优选的实施方案中，通式(XIII-c)的-D核苷由表11提供的非限制性实例代表。表11 在优选的实施方案中，通式(XIII-d)的3-D核苷由表12提供的非限制性实例代表。表12 在优选的实施方案中，通式(XIV)的0-D核苷由表13提供的非限制性实例代表。表 13 在优选的实施方案中，通式(XV-a)核苷由表14提供的非限制性实例代表。表 14
在优选的实施方案中，通式(XV-b)核苷由表15提供的非限制性实例代表。表 15 在优选的实施方案中，通式(XVI-a)核苷由表16提供的非限制性实例代表。表 16 在优选的实施方案中，通式(XVI-c)核苷由表17提供的非限制性实例代表。表17
在优选的实施方案中，通式(XVI-d)核苷由表18提供的非限制性实例代表, 表18 在优选的实施方案中，通式(XVI-f)核苷由表19提供的非限制性实例代表。表 19 在优选的实施方案中，通式(XVII-d)核苷由表20提供的非限制性实例代表。表 20 --- 在一个实施方案中，当在合适的基于细胞的测定中测试时，本发明核苷的EC5tl(达 到50%病毒抑制的有效浓度)小于15 μ Μ,更特别地，小于10或5 μ Μ。在优选的实施方案 中，核苷是对映体的富集。II.立体异构现象和多晶现象具有手性中心的本发明化合物可以以旋光和外消旋形式存在以及被分离出来。某 些化合物可表现出多晶现象。本发明包括具有本文所述有用性质的外消旋、旋光、多晶或立 体异构体形式的本发明化合物或其混合物。旋光形式可通过例如下述方法制得通过重结 晶技术拆分外消旋形式，由旋光性原料合成，手性合成，使用手性固定相进行色谱分离，或 酶拆分。如下所示，核苷含有至少两个关键的手性碳原子(*)。一般情况下，核苷手性碳上 的取代基[具体来说是嘌呤或嘧啶碱基(当使用糖环中间体编号方式时，称为Cl取代基) 和CH2OH (称为C4中间体)]相对于糖环系可以呈顺式(在相同一侧)或反式(在相反侧)。 顺式和反式外消旋体都由一对旋光异构体组成。因此，每个化合物具有4个独立的立体异 构体。这4个立体异构体由下述构型代表(当在水平面中确定糖部分的方向时，-0-部分 以黑色表示)(1)两个基团都“在上面”的顺式，称为0-D;(2)镜像，即两个基团都“在下 面”的顺式，镜像称为β-L; (3) C4取代基“在上面”，且Cl取代基“在下面”的反式(称为 α-D)；和(4)C4取代基“在下面”，且Cl取代基“在上面”的反式(称为α-L)。这两种顺 式对映体一起称为β -对映体的外消旋混合物，这两种反式对映体一起称为α "对映体的 外消旋混合物。 本发明化合物的4种可能的立体异构体如下所示。 顺式(旦)
HoI反式(a)III.定义除非另有说明，否则本文所用术语“烷基”是指饱和直链、支链或环状伯、仲或叔 烃，包括但不限于(；-(16烃基，并具体包括甲基、乙基、丙基、异丙基、环丙基、丁基、异丁基、 叔丁基、戊基、环戊基、异戊基、新戊基、己基、异己基、环己基、环己基甲基、3-甲基戊基、2， 2- 二甲基丁基和2，3- 二甲基丁基。烷基可任选被一个或多个选自下列基团的部分取代烷 基、卤素、商代烷基、羟基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基 氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、叠氮基、巯基、亚胺、磺酸、硫酸酯、磺酰基、硫 烷基、亚磺酰基、氨磺酰基、酯、羧酸、酰胺、膦酰基、氧膦基、磷酰基、膦、硫代酸酯、硫醚、酰 卤、酸酐、肟、hydrozine、氨基甲酸酯、膦酸、磷酸酯、膦酸酯，或不抑制该化合物药理活性的 任何可使用的其它官能团，这些取代基是未保护或按照需要保护的，这种保护是本领域技 术人员已知白勺，参见例如Greene,等人.,Protective Groups in OrRanic Synthesis, John ffileyand Sons, Second Edition，1991，其引入本文以供参考。除非另有说明，否则本文所用术语“低级烷基”是指(^-(；饱和直链、支链或如果适 当的话环状(例如环丙基)烷基，包括取代和未取代的形式。术语“亚烷基”或“链烯基”是指直链或支链构型的饱和烃二基，包括但不限于具有 1-10个碳原子的那些。包括在该术语范围内的有亚甲基、1，2-乙烷-二基、1，1-乙烷-二 基、1，3-丙烷-二基、1，2-丙烷-二基、1，3-丁烷-二基、1，4_ 丁烷-二基等。本文所公开的 亚烷基或其它二价基团可任选被一个或多个选自下列的基团取代烷基、卤素、卤代烷基、 羟基、羧基、酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、羧基衍生物、烷基氨基、叠氮基、二烷基氨基、芳基 氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巯基、亚胺、磺酰基、硫烷基、亚磺酰基、氨磺酰基、 酯、羧酸、酰胺、膦酰基、氧膦基、磷酰基、膦、硫代酸酯、硫醚、酰商、酸酐、肟、hydrozine、氨 基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或不抑制该化合物药理活性的任何可使用的其它官能团，这些取 代基是未保护或按照需要保护的，这种保护是本领域技术人员已知的，参见例如Greene，等
人.，Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley and Sons,Second Edition，
751991，其引入本文以供参考。除非另有说明，否则本文所用术语“芳基”是指苯基、联苯基或萘基，优选苯基。该 术语包括取代和未取代的基团。芳基可被一个或多个选自下列的基团取代溴、氯、氟、碘、 羟基、叠氮基、氨基、烷基氨基、芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、硫酸酯、膦酸、 磷酸酯或膦酸酯，这些取代基是未保护或按照需要保护的，这种保护是本领域技术人员已 知的，参见例如Greene,等人.，ProtectiveGroups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons， Second Edition，1991。除非另有说明，否则 本文所用术语“芳烷基”是指经由如上所定义的烷基连接在分 子上的如上所定义的芳基。除非另有说明，否则本文所用术语“烷芳基”或“烷基芳基”是 指经由如上所定义的芳基连接在分子上的如上所定义的烷基。在每个这些基团中，烷基可 任选如上所述被取代，且芳基可任选被一个或多个选自下列的基团取代烷基、卤素、卤代 焼基、轻基、幾基、 酰基、酰氧基、氨基、酰氨基、叠氮基、羧基衍生物、烷基氨基、二烷基氨基、 芳基氨基、烷氧基、芳氧基、硝基、氰基、磺酸、巯基、亚胺、磺酰基、硫烷基、亚磺酰基、氨磺酰 基、酯、羧酸、酰胺、膦酰基、氧膦基、磷酰基、膦、硫代酸酯、硫醚、酰卤、酸酐、肟、hydrozine、 氨基甲酸酯、膦酸、膦酸酯，或不抑制该化合物药理活性的任何可使用的其它官能团，这些 取代基是未保护或按照需要保护的，这种保护是本领域技术人员已知的，参见例如Greene， 等 人· ， Protective Groups in OrganicSynthesis, John Wiley and Sons， Second Edition，1991，其引入本文以供参考。具体包括在术语芳基范围内的有苯基；萘基；苯基甲 基；苯基乙基；3，4，5_三羟基苯基；3，4，5_三甲氧基苯基；3，4，5_三乙氧基苯基；4-氯苯 基；4-甲基苯基；3，5- 二叔丁基-4-羟基苯基；4-氟苯基；4-氯-1-萘基；2-甲基-1-萘 基甲基；2-萘基甲基；4-氯苯基甲基；4-叔丁基苯基；4-叔丁基苯基甲基等。术语“烷基氨基”或“芳基氨基”分别是指具有一个或两个烷基或芳基取代基的氨 基。本文所用术语“卤素”包括氟、氯、溴和碘。在本说明书中使用的术语“对映体富集的”描述的是包含至少约95%、优选至少 96 %、更优选至少97 %、甚至更优选至少98 %、甚至更优选至少约99 %或更多的核苷的单 一对映体的核苷。除非另有说明，当在本说明书中提及特定构型(D或L)的核苷时，假定该 核苷是对映体富集的核苷。本文所用术语“宿主”是指病毒可在其中复制的单细胞或多细胞生物体，包括细胞 系和动物，优选人。或者，宿主可携带其复制或功能可被本发明化合物改变的一部分病毒基 因组。术语宿主具体指感染的细胞，用所有或部分病毒基因组转染的细胞，和动物，特别是 灵长目动物(包括黑猩猩)和人。当涉及异常细胞增殖时，术语“宿主”是指可在其中模拟 异常细胞增殖的单细胞或多细胞生物体。术语宿主具体指由于自然原因或非自然原因(例 如分别由于基因突变或基因工程)而异常增殖的细胞，和动物，特别是灵长目动物(包括黑 猩猩)和人。在大多数本发明动物应用中，宿主是人患者。然而，对于某些适应症，可清楚 地预见到本发明的兽医应用(例如在牛中的牛病毒性腹泻病毒、在猪中的猪霍乱病毒和在 绵羊中的border病病毒)。在本说明书中使用的术语“可药用盐或前药”是用于描述任何可药用形式(例如 酯、磷酸酯、酯的盐或相关组)的化合物，当施用给患者后它们能提供活性化合物。可药用盐包括衍生自可药用无机或有机碱和酸的那些。合适的盐包括衍生自碱金属例如钾和钠， 碱土金属例如钙和镁，以及药物领域众所周知的多种其它酸的那些。可药用前药是指在宿 主中代谢例如水解或氧化以形成本发明化合物的化合物。前药的典型实例包括在活性化合 物的官能团上具有生物不稳定保护基的化合物。前药包括可氧化、还原、胺化、脱氨基化、羟 基化、脱羟基化、水解、脱水、烷基化、脱烷基化、酰化、脱酰化、磷酸化、脱磷酸化以生成活性 化合物的化合物。IV.可药用盐和前药当化合物的碱性或酸性足以形成稳定的无毒酸或碱加成盐时，将化合物作为可药 用盐给药可能是合适的。可药用盐包括衍生自可药用无机或有机碱和酸的那些。合适的盐 包括衍生自碱金属例如钾和钠，碱土金属例如钙和镁，以及药物领域众所周知的多种其它 酸的那些。特别是，可药用盐的实例是与形成生理可接受阴离子的酸形成的有机酸加成盐， 例如甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、丙二酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、苯甲酸盐、 抗坏血酸盐、a-酮戊二酸盐和a-甘油磷酸盐。还可以形成合适的无机盐，包括硫酸盐、 硝酸盐、碳酸氢盐和碳酸盐。可药用盐可用本领域众所周知的标准方法获得，例如通过将具有足够碱性的化合 物例如胺与能给予生理可接受阴离子的合适的酸反应来获得。还可以制得羧酸的碱金属 (例如钠、钾或锂)或碱土金属(例如钙)盐。本文所述的任何核苷都可作为核苷酸前药施用以提高活性、生物利用度、稳定性 或改变核苷的性质。已知有多种核苷酸前药配体。一般情况下，核苷的一磷酸酯、二磷酸酯 或三磷酸酯的烷基化、酰化或其它亲脂性修饰将提高核苷酸的稳定性。可代替磷酸酯基团 上的一个或多个氢的取代基的实例是烷基、芳基、留族化合物、碳水化合物，包括糖、1，2-二 酰基甘油和醇。R. Jones 和 N. Bischofberger，Antiviral Research, 27 (1995) 1-17 中描述 了多种取代基。任意这些取代基可以与本发明所公开的核苷联合使用以达到所需效果。本发明活性核苷也可以作为如在下述文献中公开的5'-磷醚(phospho ether) 脂质或5' _醚脂质提供，这些文献引入本文以供参考KuCera，L. S.，N. Iyer, E. Leake, A. Raben, Modest E. K.，D. L. ff.，和 C. Piantadosi. 1990. “抑制感染性 HIV-1 生成和引 起缺损病毒形成的新的膜相互作用醚脂质类似物.” AIDS Res. Hum. Retroviruses. 6 491-501 ；Piantadosi, C. , J. Marasco C. J. , S. L. Morris-Natschke, K. L. Meyer, F. Gumus, J. R. Surles, K. S. Ishaq, L. S. Kucera, N. Iyer, C. A. Wall en, S. Piantadosi,禾口 E. J. Modest. 1991. “合成和评价新的醚脂质核苷缀合物的抗-HIV活性 ”J. Med. Chem. 34 1408. 1414 ；Hosteller, K. Y. ， D. D. Richman, D. A. Carson, L. M. Stuhmiller, G. M. T. van Wijk，和H. van den Bosch. 1992. "3'-脱氧胸苷二磷酸酯二肉豆蔻基甘油-脱氧胸 苷的一种脂质前药大大提高了对1型人免疫缺陷病毒在CEM和HT4-6C细胞种复制的抑制 作用 "Antimicrob. Agents Chemother. 36 2025. 2029 ；Hosetler，K. Y.，L.M. Stuhmiller, H. B. Lenting, H. van den Bosch,和D. D. Richman, 1990. “叠氮胸苷和其它抗病毒核苷的磷 脂类似物的合成和抗逆转录病毒的活性.” J. Biol. Chem. 265 :61127。公开了可共价引入到核苷内、优选引入到核苷5' -0H位置上的合适的亲脂性取 代基或亲脂性制剂的u. S.专利的非限制性实例包括U. S.专利5，149，794(1992年9月22 日，Yatvin 等人.)；5，194，654 (1993 年 3 月 16 日，Hostetler 等人.)；5，223，263 (1993年 6 月 29 日，Hostetler 等人.)；5，256，641 (1993 年 10 月 26 日，Yatvin 等人.)； 5，411，947(1995年 5 月 2 日，Hostetler 等人.)；5，463，092 (1995 年 10 月 31 日，Hostetler 等人.)；5, 543，389 (1996 年 8 月 6 日，Yatvin 等人.)；5, 543，390 (1996 年 8 月 6 日，Yatvin 等人.)；5，543，391 (1996 年 8 月 6 日，Yatvin 等人.)；和 5，554，728 (1996 年 9 月 10 日； Basava等人.)，所有这些专利都引入本文以供参考。公开了可连接到本发明核苷上的亲 脂性取代基或亲脂性制剂的国外专利申请包括W089/02733、W0 90/00555、W0 91/16920、 W0 91/18914、W0 93/00910、TO 94/26273、TO 96/15132、EP 0350287、EP 93917054. 4 和 W091/19721。V.药物组合物基于式(I)-(XXIII) 3-D或0-L化合物或其可药用盐或前药的药物组合物可以 以治疗黄病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的治疗有效量制得， 并任选联合使用可药用添加剂、载体或赋形剂。治疗有效量可随所治疗的感染或病症、其严 重程度、所采用的治疗方案、所用活性剂的药动学特征以及所治疗的患者而变。在本发明的一个方面，优选将本发明化合物与可药用载体混合。一般情况下，优选 以口服给药形式施用药物组合物，但是制剂也可以通过非胃肠道、静脉内、肌内、透皮、颊、 皮下、栓剂或其它途径给药。静脉内和肌内制剂优选在无菌盐水中给药。本领域技术人员 可修饰在本说明书教导内的制剂以提供适于特定给药途径，同时不导致本发明组合物不稳 定或不破坏其治疗活性的多种制剂。特别是，为了使其更溶于水或其它载体而对所需化合 物作的修饰可通过例如常规修饰(成盐、酯化等)来容易地完成。在一些药物剂型中，前药形式的化合物，尤其包括酰化(乙酰化或其它酰化)和醚 衍生物、磷酸酯和各种盐形式的本发明化合物是优选的。本领域技术人员应当知道如何方 便地将本发明化合物修饰成前药形式以有助于将活性化合物递送到宿主生物体或患者内 的靶位点上。本领域技术人员还知道利用适用的前药形式的有利药动学参数以将所需化合 物递送到宿主生物体或患者内的靶位点上，从而实现化合物治疗黄病毒科(包括HCV)、正 粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感染或与异 常细胞增殖有关的病症的最大预期作用。包括在本发明治疗活性制剂中的化合物的量是治疗感染或病症的有效量，在优选 的实施方案中，是治疗黄病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病 毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感染或与异常细胞增殖有关的病症的有效量。一般情况 下，根据所用的化合物、所治疗的病症或感染以及给药途径，本发明化合物在药物剂型中的 治疗有效量通常为约0. lmg/kg-约100mg/kg或更多。对于本发明目的，本发明组合物的预 防有效量在上述治疗有效量的相同浓度范围内，并且通常与治疗有效量相同。本发明活性化合物的给药可以从连续给药(静脉内滴注)到每天口服给药数次 (例如Q. I.D.、B. I.D.等)不等，并且可包括口服、局部、非胃肠道、肌内、静脉内、皮下、透 皮(可包含渗透促进剂)、颊和栓剂给药以及其它给药途径。也可以使用肠包衣口服片剂来 提高通过口服途径施用的化合物的生物利用度和稳定性。最有效的剂型将取决于所选特定 治疗剂的药动学特征以及患者疾病的严重程度。由于便于给药和可预见的患者良好配合， 口服剂型是特别优选的。为了制备本发明药物组合物，优选依据常规药物混合技术将治疗有效量的一种或多种本发明化合物与可药用载体混合以制得剂型。根据给药例如口服或非胃肠道给药所需 的制剂形式，载体可呈多种形式。在制备口服剂型形式的药物组合物时，可使用任何常规药 物介质。因此，对于液体口服制剂例如悬浮液、酏剂和溶液，可使用合适的载体和添加剂，包 括水、二醇、油、醇、矫味剂、防腐剂、着色剂等。对于固体口服制剂例如粉剂、片剂、胶囊以及 固体制剂例如栓剂，可使用合适的载体和添加剂，包括淀粉，糖载体例如葡萄糖、甘露醇、乳 糖和相关载体，稀释剂、制粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。如果需要的话，可通过标准技术 给片剂或胶囊包上肠溶衣以持续释放。使用这些剂型可显著影响化合物在患者中的生物利 用度。对于非胃肠道给药制剂，载体通常包括无菌水或氯化钠水溶液，还可以包括其它 组分，包括辅助分散的组分。当使用无菌水并且保持无菌状态时，组合物和载体必须也是无 菌的。还可以制备可注射的悬浮液，其中可使用合适的液体载体、悬浮剂等。还可以通过常规方法制备脂质体悬浮液(包括以病毒抗原为靶向的脂质体)以获 得可药用载体。这可适于递送游离核苷、酰基核苷或磷酸酯前药形式的本发明核苷化合物。在特别优选的本发明实施方案中，使用本发明化合物和组合物来治疗、预防或延 迟黄病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒科 (包括RSV)病毒感染或与异常细胞增殖有关的病症的发作。优选地，为了治疗、预防或延迟 所述感染或病症的发作，将组合物在口服剂型中以每天约250微克至最高达约1克或更高 的量施用，每天给药至少一次，优选每天给药最高达4次。本发明化合物优选口服给药，但 是可以非胃肠道给药、局部给药或以栓剂形式给药。由于在一些情况下对宿主细胞的毒性很低，所以本发明化合物可有利地预防性地 使用来预防黄病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘 病毒科(包括RSV)病毒感染或与异常细胞增殖有关的病症，或者预防出现与所述病毒感染 或病症有关的临床症状。因此，本发明还包括预防性地治疗病毒感染，特别是黄病毒科(包 括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感 染或与异常细胞增殖有关的病症的方法。在本发明的该方面中，使用本发明组合物来预防 或延迟黄病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒 科(包括RSV)病毒感染或与异常细胞增殖有关的病症的发生。该预防方法包括给需要这 样的治疗的患者或有发展成所述病毒感染或病症的危险性的患者施用减轻、预防或延迟所 述病毒感染或病症发作有效量的本发明化合物。在依据本发明的预防性治疗中，所用的抗 病毒或抗增殖化合物应当具有低的毒性，并优选对患者没有毒性。在本发明该方面中特别 优选的是，所用的化合物应当最大有效地抗病毒或病症，并且应当对患者表现出最小毒性。 对于黄病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流感病毒)、副粘病毒科 (包括RSV)病毒感染或与异常细胞增殖有关的病症，可用于治疗这些疾病状态的本发明化 合物可以以与作为预防剂预防黄病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙 型流感病毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感染的增殖或与异常细胞增殖有关的病症，或延 长自身表现出临床症状的黄病毒科(包括HCV)、正粘病毒科(包括甲型流感病毒和乙型流 感病毒)、副粘病毒科(包括RSV)病毒感染或与异常细胞增殖有关的病症的发作所用治疗 性治疗相同的剂量范围施用(即对于口服剂型，每天约250微克至最多1克或更多，每天给 药1-4次)。
此外，本发明化合物可以与一种或多种抗病毒剂、抗HBV剂、抗HCV剂或抗疱疹剂 或干扰素、抗癌剂或抗菌剂，包括其它本发明化合物联合或者交替施用。一些本发明化合物 可通过降低其它化合物的代谢、异化或失活而有效地提高一些本发明活性剂的生物活性， 因此对于该预期作用可联合给药。在下述部分中进一步举例说明本发明。提供实验详述部分和包含在其中的实施例 是为了帮助理解本发明。这部分不是为了，并且也不应当理解为以任何方式限制如在其后 的权利要求书中所提出的本发明范围。VI.治疗黄病毒科病毒感染的疗法已经认识到，用抗病毒剂长期治疗后，可出现抗药性病毒变种。抗药性最通常地是 由于编码病毒复制周期所用酶一最通常地，对于HCV，是RNA-依赖性-RNA聚合酶一的基因 发生突变所致。已经证实，通过与第二种、也许是第三种诱导与主要药物所引起的突变不同 的突变的抗病毒化合物联合或交替施用本发明化合物，可延长、增强或恢复抗病毒感染药 物的效力。或者，通过这样的联合或交替疗法可改变药物的药动学、生物分布或其它参数。 一般情况下，与交替疗法相比，联合治疗是更优选的，因为其同时引起多种对病毒的抑制。已经鉴定出具有抗丙型肝炎病毒活性，并因此可以与一种或多种通式 (I)-(XXIII)核苷联合或交替使用的活性剂的实例包括(a)干扰素和利巴韦林(Battaglia，A. M.等人.Ann. Pharmacother. 2000,34,487 ； Berenguer, M. ^A.Antivir. Ther. 1998，3 (Suppl. 3)，125)；(b)基于底物的 NS3 蛋白酶抑制剂(Attwood 等人.PCT WO 98/22496,1998 ； Attwood ^ A ■ Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1999,10,259 ；Attwood 等人.德 国专利公开DE 19914474 ；Tung等人 PCT W098/17679)，包括a -酮基酰胺类和胼基脲类， 以及末端是亲电体例如硼酸或膦酸酯的抑制剂(Llinas Brimet等人.PCT W0 99/07734)；(c)非基于底物的抑制剂例如2，4，6_三羟基_3_硝基-苯甲酰胺衍生物(Sudo K.等人 ，Biochemical and Biophysical ResearchCommunications,1997，238，643 禾口 Sudo K.等人.Antiviral Chemistryand Chemotherapy 1998，9，186)，包括 RD3-4082 和 RD3-4078，前者在酰胺上被具有14个碳的链取代，后者具有对苯氧基苯基；(d)在用NS3/4A融合蛋白和NS5A/5B底物进行的反相HPLC测定中表现出相关抑 制作用的噻唑烷衍生物(Sudo K.等人，Antiviral Researchl996，32，9)，尤其是具有被长 烷基链取代的稠合肉桂酰基部分的化合物RD-1-6250、RD4 6205和RD4 6193 ；(e)在 Kakiuchi N.等人.J. EBS Letters 421,217 禾P Takeshita N.等 人.Analytical Biochemistry 1997，247，242中确定的噻唑烷类化合物和苯甲酰基苯胺类 化合物；(f)在SDS-PAGE和放射自显影测定中具有抗HCV蛋白酶活性的从链霉菌属发酵 培养肉汤中分离出来的菲醌化合物Sch 68631 (Chu M.等人.Tetrahedron Letters 1996， 37，7229)，和在闪烁亲近测定中表现出活性的从真菌？6111(^11111111 griscofuluum中分离出 来的 Sch351633(Chu M.等人.，BioorRanic and Medicinal Chemistry Letters9,1949)；(g)基于大分子elgin c的从水蛭中分离出来的选择性NS3抑制剂(Qasim M. A.等 A Biochemistry 1997，36，1598)；(h) HCV 解旋酶抑制剂(Diana G. D.等人.，U. S.专利 5，633，358 和 DianaG. D.等人.PCT W0 97/36554)；(i)HCV聚合酶抑制剂例如核苷酸类似物、胶霉毒素(Ferrari R.等人. .Tournal of Virology 1999，73，1649)和天然产物浅蓝菌素(LohmannV.等人 Virology 1998，249， 108)；(j)与下列序列互补的反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(S-0DN)至少一部分HCV的序 列(Anderson等人.U. S.专利6，174，868)，特别是在5'非编码区域(NCR)中延伸的序列 (Alt M.等人.Heoatology 1995，22，707)，或包含NCR的3 ‘末端的核苷酸326-348和位 于 HCV RNA 的核编码区域中的核苷酸 371-388 (Alt M.等人.Archives of Virologyl997, 142，589 和 Galderisi U.等人.，Tournal of Cellular Physiologyl999,81 :2151)；(k)IRES-依赖性翻译抑制剂(Ikeda N等人.日本专利公开JP-08268890 ;Kai Y.等人.日本专利公开JP-10101591)；(1)核酸酶-抗性核酶(Maccjak D.J.等人.，Hepatology 1999，30，abstract 995)；(m)金刚烧胺例如金刚乙胺(Smith, Abstract from Annual Meeting ofthe American Gastoenterological Association and AASLD,1996)；(n)喹诺酮类例如氧氟沙星、环丙沙星和左氟沙星(AASLD Abstracts, Hepatology, Oct. 1994, Program Issue, 20(4), pt. 2, abstractno. 293)；(o)核苷类似物(Ismaili 等人.TO 01/60315 ；Storer W0 01/32153)，包括 2'-脱氧-L-核苷(Watanabe 等人.TO 01/34618)和 1_( 0 _L_ 呋喃核糖基)-1，2，4_ 三 唑-3-甲酰胺(levovirin ) (Tam W0 01/46212)；和(p)其它各种化合物，包括1-氨基-烷基环己烷(Gold等人.U.S.专利 6，034，134)、烷基脂类(Chojkier等人.U. S.专利5，922，757)、维生素E和其它抗氧 化剂(Chojkier等人.U.S.专利5，922，757)、角鲨烯、胆汁酸(Ozeki等人.U. S.专利 5，846，964)、N-(膦酰基乙酰基)-L-天冬氨酸(Diana等人.U. S.专利5，830，905)、苯二 甲酰胺类(Diana等人.U.S.专利5，633，388)、多聚腺苷酸衍生物(Wang等人.U.S.专 利 5，496，546)、2'，3' -二脱氧肌苷(Yarchoan 等人.U. S.专利 5，026，687)、苯并咪唑 类(Colacino 等人 U. S.专利 5，891，874)、葡糖胺类(Mueller 等人 W0 01/08672)、取代 的-1,5-亚氨基-D-山梨醇(glucitol)化合物(Mueller 等人 W0 00/47198)。VII.治疗|H粘病毒科病毒感染的疗法已经认识到，用抗病毒剂长期治疗后，可出现流感病毒的抗药性变种。抗药性最通 常地是由于编码病毒复制周期所用酶的基因发生突变，导致抗原转变或漂移所致。已经证 实，通过与第二种、也许是第三种诱导与主要药物所引起的突变不同的突变的抗病毒化合 物联合或交替施用本发明化合物，可延长、增强或恢复抗流感病毒感染药物的效力。或者， 通过这样的联合或交替疗法可改变药物的药动学、生物分布或其它参数。一般情况下，与交 替治疗相比，联合治疗是更优选的，因为其同时引起多种对病毒的抑制。已经鉴定出具有抗流感病毒活性，并因此可以与一种或多种通式(I)-(XXIII)核 苷联合或交替使用的活性剂的实例包括(a)放线菌素D(Barry，R. D.等人.“脱氧核糖核酸参与流感病毒增殖”Nature， 1962，194，1139-1140)；
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(b)金刚烷胺(Van Voris, L. P.等人.“用于化学预防和治疗流感的抗病毒 剂” Semin Respir Infect, 1992, 7,61-70)；(c) 4-氨基-或4-胍基-2-脱氧-2，3_ 二去氢_D_N_乙酰神经氨酸_4_氨基-或 4-胍基-Neu 5 Ac2en(von Itzstein, M.等人.“流感病毒复制的基于唾液酸酶的有效抑 制剂的合理设计” Nature, 1993，363，418-423)；(d)利巴韦林(Van Voris, L. P.等人.“用于化学预防和治疗流感的抗病毒 剂” Semin Respir Infect, 1992, 7,61-70)；(e)干扰素(Came，P.E.等人.“干扰素引起的合成聚合物的抗病毒活件’ Troc Soc Exp Biol Med, 1969，131,443-446 ；Gerone, P. J.等人.“用合成双链核糖核酸的气雾剂抑 制小鼠的呼吸道病毒感染” Infect Immun, 1971,3,323-327 ；Takano, K.等人.“小鼠流感 中的被动干扰素保护” T Infect Pis, 1991，164，969-972)；(f)灭活的甲型和乙型流感病毒疫苗(“流感疫苗的临床研究-1978”Rev Infect Pis, 1983, 5, 721-764 ；Galasso, G. T.等人.“流感疫苗的临床研究-1976” T Infect Pis, 1977，136 (suppl)，S341-S746 Jennings, R.等人.“志愿者对灭活的流感病毒疫苗的反 应，，T Hyr, 1981，86，1-16 ；Kilbourne, E. D. “灭活的流感疫苗” In :Plothin SA, Mortimer EA，eds. Vaccines Philadelphia :Saunders, 1988,420-434 ；Meyer,H. M. ,Jr.等人.“现有 流感疫苗综沭”Am I ClinPathol, 1978,70,146-152 ；“每周死亡率和发病率报告.预防和控 制流感第 I 部分，疫苗 Recommendations of the Advisory Committeeon Immunication Practices (ACIP) ” MMWR, 1993,42 (RR-6), 1-14 :Palache, A.M.等人.“用不同剂量的疫苗 进行流感免疫接种后的抗体反应在老年疗养院和年轻志愿者中进行的双盲、安慰剂对照、 多中心、剂量反应实验” Vaccine，1993，11，3-9 ；Potter, C. ff. “灭活的流感病毒疫苗” In Beare AS, ed. Basic and applied influezaresearch, Boca Raton, FL :CRC Press, 1982, 119-158)。VIII.治疗副粘病毒科病毒感染的疗法已经认识到，用抗病毒剂长期治疗后，可出现RSV的抗药性变种。抗药性最通常地 是由于编码病毒复制周期所用酶的基因发生突变所致。已经证实，通过与第二种、也许是第 三种诱导与主要药物所引起的突变不同的突变的抗病毒化合物联合或交替施用本发明化 合物，可延长、增强或恢复抗RSV感染药物的效力。或者，通过这样的联合或交替疗法可改 变药物的药动学、生物分布或其它参数。一般情况下，与交替疗法相比，联合治疗一般是更 优选的，因为其同时引起多种对病毒的抑制。已经鉴定出具有抗RSV活性，并因此可以与一种或多种通式(I)-(XXIII)核苷联 合或交替使用的活性剂的实例包括(a)利巴韦林(Hruska，J. F.等人.“通过利巴韦林在体内抑制呼吸道合胞体病 毒”Antimicrob Afients Chemother, 1982,21,125-130)；禾口(b)纯化的人静脉内IgG-IVIG(Prince，G. A.等人.“在棉大鼠呼吸道合胞体病 毒感染的实验免疫治疗中局部施用的中和性抗体的有效性” J Virol，1987,61,1851-1954 ； Prince, G. A.等人.“免疫预防和免疫治疗棉大鼠中的呼吸道合胞体病毒感染” Infect Immun,1982，42，81—87)。IX.治疗异常细胞增殖的疗法
已经鉴定出具有抗异常细胞增殖活性，并因此可以与一种或多种通式 (I)-(XXIII)核苷联合或交替使用的活性剂的实例包括A.烷化剂氮芥类氮芥(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤)、环磷酰胺、异环磷酰胺(急性和慢性 淋巴细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、成神经细胞瘤、乳腺癌、卵巢 癌、肺癌、维尔姆斯瘤、子宫颈、睾丸、软组织肉瘤)、马法兰(L-苯丙氨酸氮芥)(多发性骨髓 瘤、乳腺癌、卵巢癌)、瘤可宁(慢性淋巴细胞白血病、原发性巨球蛋白血症、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤)。乙烯亚胺类和甲基蜜胺类六甲蜜胺(卵巢癌)、噻替哌(膀胱癌、乳腺癌、卵巢 癌)O烷基磺酸酯类白消安(慢性粒细胞性白血病)。亚硝基脲卡氮芥(BCNU)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、原发性脑肿瘤、多发性骨 髓瘤、恶性黑素瘤)、罗氮芥(CCNU)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、原发性脑肿瘤、小细胞肺 癌)、甲环亚硝脲(甲基-CCNU)(原发性脑肿瘤、胃癌、结肠癌)、链脲霉素(STR)(恶性胰腺 胰岛瘤、恶性类癌瘤)。三氮烯属达卡巴嗪(DTIC;二甲基三氮烯基咪唑甲酰胺)(恶性黑素瘤、霍奇金 病、软组织肉瘤)。B.抗代谢物叶酸类似物甲氨蝶呤(氨甲蝶呤)(急性淋巴细胞白血病、绒膜癌、蕈样真菌病、 乳腺癌、头颈癌、肺癌、骨原性肉瘤)。嘧啶类似物氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶；5-FU)、氟尿苷(氟脱氧尿苷；FUdR)(乳腺 癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、头颈癌、泌尿膀胱癌、恶化恶习前皮肤损害)(局部)、阿 糖胞苷(阿糖胞苷)(急性粒细胞和急性淋巴细胞白血病)。嘌呤类似物和相关抑制剂巯基嘌呤(6-巯基嘌呤；6-MP)(急性淋巴细胞白血病、 急性粒细胞白血病和慢性粒细胞白血病)、硫鸟嘌呤(6-硫鸟嘌呤；TG)(急性粒细胞白血 病、急性淋巴细胞白血病和慢性粒细胞白血病)、喷司他丁(2' -deoxycyoformycin)(多毛 细胞白血病、蕈样真菌病、慢性淋巴细胞白血病)。长春花属生物碱长春花碱(VLB)(霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、乳腺癌、睾丸癌)、 长春新碱(急性淋巴细胞白血病、成神经细胞瘤、维尔姆斯瘤、横纹肌肉瘤、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤、小细胞肺癌)。表鬼臼毒素依托泊苷(睾丸癌、小细胞肺癌和其它肺癌、乳腺癌、霍奇金病、非霍 奇金淋巴瘤、急性粒细胞白血病、卡波西肉瘤)、替尼泊苷(睾丸癌、小细胞肺癌和其它肺 癌、乳腺癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性粒细胞白血病、卡波西肉瘤)。C.天然产物抗生素更生霉素(放线菌素D)(绒膜癌、维尔姆斯瘤、横纹肌肉瘤、睾丸癌、卡波 西肉瘤)、柔红霉素(道诺霉素；正定霉素)(急性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病)、 阿霉素(软组织肉瘤、骨原性肉瘤和其它肉瘤；霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、急性白血病、乳 腺癌、泌尿生殖器癌、甲状腺癌、肺癌、胃癌、成神经细胞瘤)、博莱霉素(睾丸癌、头颈癌、皮 肤和食道癌、肺癌和泌尿生殖道癌、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤)、普卡霉素(光辉霉素)(睾丸癌、恶性高钙血)、丝裂霉素(自力霉素C)(胃癌、子宫颈癌、结肠癌、乳腺癌、胰腺癌、膀胱 癌、头颈癌)。酶L_天冬酰胺酶(急性淋巴细胞白血病)。生物反应调节剂a-干扰素(多毛细胞白血病、卡波西肉瘤、黑素瘤、类癌瘤、 肾细胞癌、卵巢癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤、蕈样真菌病，多发性骨髓瘤、慢性粒细胞白血 病)。D.各种治疗剂钼配位络合物顺钼(顺式-DDP)、卡钼(睾丸癌、卵巢癌、膀胱癌、头颈癌、肺癌、 甲状腺癌、子宫颈癌、子宫内膜癌、成神经细胞瘤、骨原性肉瘤)。蒽二酮类Mixtozantrone (急性粒细胞白血病、乳腺癌)。取代的脲类羟基脲(慢性粒细胞白血病、红细胞增多症、特发性血小板增多症、 恶性黑素瘤)。甲基胼衍生物丙卡巴胼(N-甲基胼，MIH)(霍奇金病)。肾上腺皮质抑制剂米托坦(o，p' -DDD)(肾上腺皮层癌)、氨鲁米特(乳腺癌)。肾上腺类皮质激素类强的松(急性和慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤、霍 奇金病、乳腺癌)。孕激素类己酸羟孕酮、乙酸甲羟孕酮、乙酸甲地孕酮(子宫内膜癌、乳腺癌)。E.抗血管牛成剂Angiostatin、Endostatin。F.激素和拮抗剂雌激素类己烯雌酚、乙炔雌二醇(乳腺癌、前列腺癌)。抗雌激素类他莫昔芬(乳腺癌)。雄激素类丙酸睾酮、氟甲睾酮(乳腺癌)。抗雄激素类氟他胺(前列腺癌)。促性腺素释放激素类似物亮丙瑞林(前列腺癌)。X.合成方案式(I)-(XXIII)化合物可通过本领域已知的任何方法合成。特别是，这些化合物 可通过3条不同途径制得(a)由预形成的核苷合成，(b)将修饰的糖或未修饰的核糖与嘌 呤或嘧啶缩合，和(c)这两条途径的联合。因为在核苷类抗生素蛹虫草菌素中发现了 3-脱 氧-D-赤呋喃戊糖结构，所以在二十世纪六十年代报道了很多有关该抗生素的全合成(参 见Lee，W. W.等人.J. Am. Chem. Soc.，1961，83，1906 ;ffalton, E.等人.J. Am. Chem. Soc.， 1964,86,2952 ；Suhadolnik, R. J.等人.Carbohydr. Res.，1968，61，545 Jkehara, M.等 人.Chem. Pharm. Bull.，1967，15,94 ；Kaneko,M.等人.Chem. Pharm. Bull. 1972,20,63)。在 优选的本发明实施方案中，由预形成的核苷类制备3'-脱氧核苷是以下述方法进行的A. Ia~c 和 Illa-c 型化合物(i)由预形成的核苷类合成按照Marumoto，R 等人，Chem. Pharm. Bull. 1974，22，128 的教导，该文献描述了用 乙酰溴处理N4-乙酰基胞苷以生成2'，5' -二-0-乙酰基-3'-溴-3'-脱氧-3-D-呋 喃木糖基_胞嘧啶(2，R = Ac),可如反应方案1所示将N4-保护的胞苷核苷类衍生化以形成嘧啶核苷类(I-a)。反应方案1 可用酰卤例如乙酰溴处理N4-保护的-D-胞苷核苷1以生成相应的3'-卤代-木 糖型-核苷2。将2去乙酰化以生成3，然后还原脱卤，获得了所需的3' _脱氧胞苷衍生 物4。用酸，优选煮沸的乙酸水溶液处理2，生成了相应的保护的尿嘧啶核苷5，可将5容易 地转化成游离3'-溴-木糖型核苷6a，通过还原脱溴可由6a获得3'-脱氧尿苷衍生物 6b。按照类似方法，由N4-保护的-L-胞苷开始可合成4和6的L-对映体(Ill-a)。在制备核苷类化合物I_a的另一个实施方案中，将核糖核苷进行2'， 5' -二-0-三苯甲基化，生成了 7(R2' =R5' =Tr)，将其转化成相应的3' _0_甲磺酸酯 8 (反应方案2)。用稀的氢氧化钾或氢氧化钠处理8，经由脱水核苷9生成了相应的木糖型 衍生物10，将其去-0-三苯甲基化后，获得了 12。将10甲磺酰化，然后去-0-三苯甲基化， 生成了 3' -0-甲磺酰基木糖型-核苷。用溴化锂或碘化钠处理8，经由9形成了相应的 3'-脱氧-3'-卤代衍生物11，将其去-0-三苯甲基化，然后氢解，将11转化成了所需 的3'-脱氧尿苷衍生物6b。按照类似方法，由L-核糖核苷开始，可合成4和6的L-核苷 (III-a)对应物。反应方案2
85 制备I-b型化合物一嘌呤核苷的一个实例是合成3'-脱氧嘌呤核苷类化合物 (反应方案3)。用2-甲氧基异丁酰卤(X = C1或Br)处理核糖核苷13，生成了 3'-卤 代-呋喃木糖基和2'-卤代-阿拉伯呋喃糖基衍生物(14和15)的混合物。氢解，然后色 谱分离，获得了相应的3'-脱氧核苷17和2'-脱氧核苷16。将17皂化，获得了获得了 所需的3'-脱氧核苷20。用碱处理14与15的反应混合物，以定量产率生成了单环氧化 物18，用碘化铵或碘化钠处理后，仅获得了 3'-木糖型碘化物19。将19氢解，获得了 20。 用还原剂例如阮内镍、氢化锂铝或硼氢化钠将18还原，也生成20。按照类似方法，由嘌呤L-核糖核苷开始，可合成属于III-b的20的L-核苷对应 物。反应方案3 为了合成式I-c化合物，原料是5-硝基嘧啶或吡啶核苷(反应方案4)。在溶剂例 如醇或二甲基甲酰胺中于20°C -100°C、优选25°C -80°C温度范围下，用叠氮化物离子处理 5_硝基尿苷(21，参见上文)。叠氮化物离子亲核攻击21的C-6，形成了酸式-硝基盐22， 盐22环合生成23。将23中和，生成了二环核苷24。
反应方案4 (ii)通过将合适的糖与碱缩合来合成
合适的糖衍生物必须通过与所选的碱缩合来制得。虽然有几种合成3-脱氧-D-赤 呋喃戊糖(3-脱氧-D-呋喃核糖)衍生物的方法(参见Lee，W. ff.等人.T. Am. Chem. Soc., 1961，83，1906 ；Walton, E.等人..T.Am. Chem. Soc.，1964，86，2952 ；Lin, T. S.等人 丄 Med. Chem. , 1991,34,693 ；Ozols, A.M.等人.Synthesis, 1980, 557),佰是本发明开发了如反应 方案5所示的新方法。反应方案5 将1，2-0-亚异丙基-5-0-甲氧基羰基-a _D_呋喃木糖(25)转化成相应的3_硫 代羰基衍生物26，然后在自由基引发剂例如2，2 ‘-偶氮二异丁腈存在下使用三烷基氢 化锡进行自由基脱氧。用乙酸、乙酸酐和硫酸的混合物将脱氧产物27酰化，生成28，然 后通过 Vorbruggen ‘ s 方法(参见Niedballa，U.等人.T. Org. Chem. , 1976,41,2084 Vorbruggen, H 等人 Chem. Ber. ,1981,114,1234 ；Kazinierczuk, Z 等人 J. Am. Chem. Soc^, 1984,106,6379)将其与甲硅烷化的碱缩合，获得了嘧啶核苷29(I_a型)或相关的嘌 呤核苷(I-b型)。或者可用其它酰基例如苯甲酰基、对硝基苯甲酰基、对氯苯甲酰基或对 甲氧基苯甲酰基以及其它甲硅烷基例如叔丁基二甲基甲硅烷基或叔丁基二苯基将5-0H保 护。类似地，可将L-木糖转化成25的L-糖对应物，之后可将其进一步衍生化以获得30的 L-核苷。或者，如反应方案6所示，可在吡啶中用甲磺酰氯、甲苯磺酰氯或三氟乙磺酰氯将 1，2-0-亚异丙基-5-0-(叔丁基二苯基甲硅烷基)_ a-D-呋喃木糖(31)磺酰化以获得32。 将32进行甲醇分解后，可用碱例如甲醇钠的甲醇溶液处理甲基木糖苷33，以获得核糖-环 氧化物34。用氢化锂铝打开环氧化物34，立体选择性地生成了 3-脱氧糖36。在丙酮或 2- 丁酮中用溴化锂或碘化钠处理34，生成了 3-卤代-3-脱氧木糖苷35。将35还原脱卤，获 得了 36。用氟离子源例如三正丁基氟化铵的四氢呋喃溶液或三乙基氟化氢铵除去5'-甲 硅烷基保护基，生成了 37。在硫酸存在下用乙酸酐和乙酸将37酰化，生成了三-0-乙酰 基-3-脱氧-D-呋喃核糖38。还可以通过氟化物处理将33转化成39，经过乙酰化后，获得 了 40。可使用Vorbrueggen' s方法将这些乙酰化的糖38和40与全三甲基甲硅烷基化的 嘧啶或嘌呤碱缩合，以生成3'-修饰的核苷。叔丁基二苯基甲硅烷基保护基可用叔丁基二甲基甲硅烷基代替。反应方案6 (iii)合成后修饰(1-6)(a)在嘧啶核苷的C-4上修饰(I-a和Ill-a)将28或38与尿嘧啶或5_取代的尿嘧啶缩合后，在吡啶中用五硫化磷或者在甲苯 中用Lawesson' s试剂处理保护的3'-脱氧尿苷衍生物(29，R5' = CH30C0,R2' = Ac或 R5' =R2' =Ac)以生成4-硫尿嘧啶核苷41，通过用氨处理将41转化成3'-脱氧胞苷 (43, Rl = R2 = H)。或者，在碱中用甲基碘或者硫酸二甲酯将41甲基化，生成了 4-S-甲基 衍生物42。用各种亲核试剂置换42的4-S-甲基，获得了相应的N4-取代的3'-脱氧胞 苷43。还可以将29转化成4-(三唑-2-基)衍生物44，可将44与氨或各种胺反应以生成 43。或者，用各种醇或苯酚处理44，以获得相应的4-0-取代的-3'-脱氧尿苷。反应方案7 或者，将尿嘧啶核苷例如糖-保护的尿苷45(R = H)转化成4_(甲基咪唑 鐺)46 (反应方案8)或4-0-(2，4，6-三异丙基苯磺酰基)中间体47，然后用亲核试剂例如 羟基胺处理，以生成相应的C-4修饰的核苷，例如N4-羟基胞苷(48，R = H)。反应方案8 按照类似方法，由L_核苷对应物开始可制得相应的Ill-a核苷。(b)在嘧啶核苷 的C-5上修饰(I-a和III-a)(i)卤化(反应方案9)可用氟化剂将3'-脱氧尿苷(6，R = H)氟化，氟化剂的某些非限制性实例包括 在乙酸中的氟、在一种或多种惰性溶剂例如四氢呋喃中的selectfluor或在醇中的氟磺酸 (fluoroxisulfate)铯(参见Stovber, S.等人.J. Chem. Soc. Chem. Commun. , 1983,563), 以生成5-氟-3'-脱氧尿苷(49)。使用合适的N-卤代琥珀酰亚胺获得5-氯、5-溴和 5_碘尿苷衍生物(50-52)。于氧化剂例如硝酸存在下在水中用溴或者在乙酸中用碘处理6， 分别获得了 5-溴-或5-碘-尿嘧啶核苷。还可以将胞嘧啶衍生物43 (R = H)转化成相应 的5-卤代衍生物(44-56)。5-氟-3 ‘-脱氧胞苷(53，R = H)是通过将28或38与5-氟 胞嘧啶缩合，然后皂化而制得的。反应方案9 按照类似方法，由L-核苷对应物开始，可制得相应的Ill-a核苷。反应方案10描 述了通过用碳酸氢钠溶液处理将溴化的化合物51转化成5-羟基-3'-脱氧尿苷(63)。 用烷基碘和碱将55烷基化，获得了 62。51与碱金属氰化物的延长反应生成了 5-氰基-尿 嘧啶衍生物57，可将其水合以生成5-羧酰胺58和5-羧酸59。将59转化成烷基酯60，然 后用硼氢化钠还原，生成了 5-羟基甲基衍生物61。或者，可用二氢吡喃和催化量的酸例如 盐酸、硫酸或对甲苯磺酸处理化合物60，以获得2' ,5' -二-0-保护的核苷64。用硼氢 化钠将64还原，获得了 65。由于65的烯丙型性质，用甲磺酰氯或甲苯磺酰氯处理生成了 5_氯甲基-尿嘧啶衍生物66。用醇化物处理66，然后脱保护，生成了相应的5-烷氧基甲 基-3'-脱氧尿苷(69)。类似地，用各种胺与66反应，获得了 67，通过弱酸性水解将其转 化成68。将66与硫脲反应，生成了相应的巯基甲基衍生物(70，R = H)，用硫醇钠处理，生 成了烷硫基衍生物70 (R=烷基)，可用过氧化氢将其氧化成相应的砜(71)。按照类似方法 由L-核苷对应物开始，制得了相应的Ill-a核苷。反应方案10 (ii)硝化(反应方案11)在环丁砜中用四氟硼酸硝鐺处理尿苷6 (参见Huang，G. _F.等人.J. 0rg. Chem.， 1977,42,3821 ；Huang, G. -F.等人.J. Carbohyd. NucleosidesNucleotides, 1978，5，317)，获得了相应的5_硝基衍生物72。将硝基-核苷72催 化氢化，生成了相应的5-氨基衍生物73。用亚硝酸将73重氮化，生成了 5-重氮基-3'-脱 氧尿苷(74)，通过水解可将其转化成1，2，3-三唑75。已报道过将5-氨基尿苷转化成核 糖甲硅烷基三唑的类似转化(参见Roberts，M.等人.J. Am Chem. Soc.，1952，74，668 ； Thurber,T. C.等人.J. Am. Chem. Soc.，1973，95，3081 ;.T. 0rg. Chem.，1976，41，1041)。将 72 与叠氮化钠在二甲基甲酰胺中反应，获得了三唑并嘧啶(8-氮杂嘌呤)核苷76。按照类似方法，由L-核苷对应物开始，可制得相应的Ill-a核苷。反应方案11
反应方案12显示了类似反应顺序，其中是由3'-脱氧胞苷4生成5-硝 基-3'-脱氧胞苷(77)，然后获得5-氨基-3'-脱氧胞苷(78)。然而，用亚硝酸处理78 导致形成另一 8-氮杂嘌呤核苷79。该相同反应顺序可适用于相应的L-核苷Ill-a。反应方案12 (iii)羟基甲基化如反应方案13所示，在碱例如氢氧化钾或氢氧化钠水溶液中用甲醛处理6 (R = H， R5' =R3' =R3" =H)，生成了 5-羟基甲基-3'-脱氧尿苷(80)，通过用氯化氢的乙醇溶 液处理将其转化成5-乙氧基甲基-3'-脱氧尿苷(81，X = 0CH2CH3)。化合物80(R5'= R3' =180 幻还可以这样制得通过光化学溴化将胸腺嘧啶衍生物6(1 = 013，1 5' =R3' =TBDPS)转化成 81 (X = Br)，然后水解(Matulic-Adamic，J.等人.Chem. Pharm. Bull., 1988，36，1554)。通过盐酸的作用将化合物80转化成5-氯甲基衍生物(81，X = C1)，或者 通过用二乙基氨基三氟化硫(DAST)处理将化合物80转化成5-氟甲基衍生物(81，X = F)。 用二氧化锰将80(R5' =R2' =TBDPS，R3" =H)氧化，获得5-甲酰基衍生物82，其是多种 反应，包括Wittig、Wittig-Horner、Grignard或Reformatsky反应的良好反应物。例如， 用乙氧基亚甲基三苯基正膦[Et0C( = 0)CH = PPh3]处理82，生成了 5-(2-乙氧基羰基) 亚乙基-3'-脱氧尿苷衍生物(83)，可经由5-(亚乙基-2-羧酸)衍生物84将其转化成5-亚乙基-、5-(2-氯亚乙基)-或5-(2-溴亚乙基)-3'-脱氧尿苷衍生物(85)。通过用 DAST处理82可获得5- 二氟甲基衍生物86。这些合成途径如反应方案13所示。该相同反应顺序可适用于相应的L-核苷Ill-a。反应方案13 (iv)金属化 在水缓冲液中，可用乙酸汞处理6或4，然后用氯化钠处理，分别以定量产率生成 了相应的5-氯汞基衍生物87或91 (反应方案14)。将87或91与碘在乙醇中反应，分别生 成了 5-碘衍生物52或56。通过在碘化亚铜和三乙胺存在下与1-炔烃和二(三苯基膦) 氯化钯(Ph3P)2PdCl2i应可将化合物52转化成5-乙炔基衍生物88。另一方面，通过用三氟 碘甲烷和铜粉处理，将52转化成5-三氟甲基-3'-脱氧尿苷89。用氯化锂钯(Li2PdCl4) 和烯丙基氯处理87，获得了 5-烯丙基-3'-脱氧尿苷(90)。在Li2PdCl2存在下将丙烯酸 甲酯与87或91反应，以分别生成5-(E)-(2-甲氧基-羰基)乙烯基-3'-脱氧尿苷(83) 或-胞苷(92)。将83皂化生成84，然后用N-卤代琥珀酰亚胺，生成了 5- (E)-卤代乙烯基 尿嘧啶核苷85 (X = Cl.Br或I)。将84热脱羧，生成了 5-乙烯基尿嘧啶衍生物85 (X = H)。 化合物85 (X = H)还可以通过在乙酸钯-三苯基膦络合物存在下用乙酸乙烯酯处理52来 制得。类似地，可将91转化成相应的丙烯酸酯衍生物92，将其水解成93后，与N-卤代琥珀 酰亚胺反应以生成5-(E)-(2-卤代乙烯基)-3'-脱氧胞苷(94)。应当注意，将5-乙烯基 衍生物催化氢化可生成相应的5-乙基-嘧啶核苷。用稀硫酸将5-乙炔基-3'-脱氧尿苷 (88，R = H)水合，以高产率生成了 5-乙酰基-3'-脱氧尿苷。按照类似方法，但是由L-核苷对应物开始，制得了相应的Ill-a核苷。反应方案14 (c)在嘧啶核苷的C-6上的修饰(I-a和Ill-a)在二甲基甲酰胺中于室温用氰化钠或氰化钾处理5-溴-3'-脱氧尿苷(51，反应 方案15)，以高产率获得了 6-氰基-3'-脱氧尿苷(95)。通过在高温下进一步处理将95转 化成5-氰基异构体59。将95水解，获得了 3'-脱氧乳清酸核苷96。将95进行甲醇分解， 生成了甲酯97，通过氨解将其转化成98，其中R'是CfC6低级烷基或苄基或苯基。用硼氢 化钠将97还原，获得了 6-羟基甲基衍生物99，通过盐酸的作用将其转化成6-氯甲基尿嘧 啶核苷100。通过与各种胺反应，将100转化成相应的6-氨基甲基-3'-脱氧尿苷(101)。 采用类似反应顺序，经由6-氰基中间体102由3'-脱氧胞苷(55)开始生成3'-脱氧胞 苷-6-基-羧酸(103)或其甲酯104。各种6-羧酰氨基胞嘧啶核苷105可通过用相应的 胺处理104来获得。使用氢硼化物将104还原，获得了 6-羟基甲基衍生物104，可通过盐酸 的作用将其转化成6-氯甲基-3'-脱氧胞苷107。通过与各种胺反应可将化合物107转 化成相应的6-氨基甲基-3'-脱氧胞苷(108)。该相同反应顺序可适用于相应的L-核苷 III-a。反应方案15 反应方案16显示了另外的衍生化。在尿嘧啶和胞嘧啶核苷的C-6位上锂化(参 见Tanaka,H.等人.Tetrahedron Lett. , 1979,4755 :SerRueeva, Z. A.等人.Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids, 2000,19，275)。因此，在_45°C用正丁基锂处理全三甲基甲硅 烷基化的3'-脱氧胞苷(109，R3' =R3" =H)，然后用甲基碘或二氧化碳处理，分别生成 了 6-甲基-3'-脱氧胞苷(110)或3'-脱氧胞苷-6-甲酸(103)。按照类似方法，但是 由L-核苷对应物开始，制得了相应的Ill-a核苷。反应方案16 在四氢呋喃中于-78°C用二异丙基氨基锂处理2 ‘，5 喃-2-基)-3'-脱氧尿苷(6，R2' =R5' =THP,R3' = R3" = H)，然后与烷基卤反应，形 成了 6-烷基-3'-脱氧尿苷(111)。用二氧化硒将111 (n = 0)氧化，生成了 3'-脱氧尿 苷-6-甲醛(112)，在碱存在下用硝基甲烷处理后生成了硝基烯烃113。将化合物112与各 种Wittig试剂反应以生成相应的烯烃114-117。用格氏试剂处理112，生成6-羟基烷基衍 生物121。将121氧化，获得了相应的6-酰基衍生物120 (R=烷基)。另一方面，将锂化的 6(R5' = R2' = THP,R3' =R3" =H)与苯甲醛反应，生成了 6-羟基苄基衍生物119，通过弱氧化将其转化成6-苯甲酰基-3'-脱氧尿苷(120，R = Ph)。如反应方案17所示，还将 锂化的6与二苯基二硫化物反应，获得了 6-苯硫基-3'-脱氧尿苷118。按照类似方法，但是由L-核苷对应物开始，制得了相应的Ill-a核苷。反应方案17 (d)在嘌呤核苷的C-6上修饰(I-b和III-b)通过用氯化氢或溴化氢在乙酸中处理或者用溴化氢在二氯甲烷中处理将化合物 28或38转化成卤化物(halogenase) 122 (反应方案18)，并通过钠方法在乙腈中与6_氯嘌 呤缩合，获得了 3'-脱氧核苷123。用氢氧化钠或氢氧化钾水溶液处理123，生成了 3'-脱 氧肌苷(124)。用甲醇钠的甲醇溶液处理123，获得了 6-0-甲基-3'-脱氧肌苷(125)。 进行弱皂化，然后将123催化氢解，生成了 3' _脱氧水松蕈素(126)。将硫脲与123反应， 生成了 6-硫嘌呤核苷127，将其S-烷基化以生成128。化合物123、127和128易于与各种 胺、羟基胺、胼和氨基醇反应以生成3'-脱氧腺苷类似物129-133。用叠氮化钠处理123， 生成了 6-叠氮基嘌呤核苷134。该相同反应顺序可适用于相应的L-核苷III-b。反应方案18 这些化合物还可以通过用亚硝酸处理6-酰胼基嘌呤核苷130来合成。将129、130 或134还原，生成了 3'-脱氧腺苷(即蛹虫草菌素)。预计在体内通过腺苷脱氨基酶的作 用化合物125或蛹虫草菌素可转化成124。在体内可将6-未取代的嘌呤核苷126氧化成 124。将122与2-取代的-6-氯嘌呤缩合，生成了 123的2_取代的类似物。通过亲核取 代反应可将6-氯官能团转化成各种官能团。因此，将2-氨基-6-氯嘌呤转化成135 (反应 方案19)，可将135转化成各种2-氨基嘌呤核苷(136-147)。应当注意，2,6- 二氨基-(141) 和2-氨基-嘌呤(138)核苷是3'-脱氧-鸟苷(136)的可能前体。按照类似方法，但是 由L-核苷对应物开始，可制得相应的III-b核苷。反应方案19
99 按照类似方法可合成2-氧代-、2_甲氧基-、2_硫代-、2_烷基巯基_、2_甲基-、 2_甲基-氨基-或2- 二甲基氨基-嘌呤核苷(148-154)(反应方案20)。而且，按照类似 方法，但是由相应的L-核苷开始，可制得III-b类型的化合物。反应方案20 (e)在嘌呤核苷的C-2上修饰(I_b和III_b)可通过用各种链烷酰氯或芳酰氯酰化将135-147的2_氨基修饰以获得155 (反应 方案21)。然后，通过用硼烷_胺络合物还原将155进一步衍生化成相应的2-烷基氨基或 2-芳基氨基衍生物 156 (Sergueeva, Z. A.等人 Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids, 2000，19，275)。或者，通过Schiemarm反应，在氟硼酸盐存在下重氮化，可将化合物135的 2-氨基取代，然后通过热分解，以生成2-氟-6-氯嘌呤核苷157。此外，可用各种如上所述 的亲核试剂置换这些核苷的6-氯取代基。应当注意，存在的2-氟取代基保护了 6-氨基不 被腺苷脱氨基酶攻击。反应方案21 (f)在嘌呤核苷的C-8上修饰(I-b)应当注意，在嘌呤核苷的8-位上修饰特别重要，因为在该位置的取代将核苷的 ^ 选构象改变为顺式。通过在乙酸钠存在下用溴在乙酸中处理，可将蛹虫草菌素(158，R3' =R3" = H)、 3'-脱氧肌苷(124，R3' =R3〃=H)和 3'-脱氧鸟苷(136，R3'=铲〃=11)在(-8位 溴化，以生成159-161 (反应方案22)。通过硫脲的作用，用硫置换159-161中的C-8溴取代 基，以获得162-164，可在碱例如碳酸钠或碳酸钾存在下，在极性溶剂例如水、醇或二甲基甲 酰胺中用烷基卤或芳烷基卤将其烷基化或芳烷基化，以生成165-167。可将甲基巯基衍生 物165-167 (R =甲基)氧化成相应的砜168-170。通过用各种胺处理这些砜，可获得相应的8-氨基衍生物171-173。通过用胺处理可直接由159-161获得多种8-氨基衍生物。而 且，通过在乙酸酐中用乙酸钠处理，然后水解，可将159转化成8-氧代衍生物174。用氟硼 酸三乙基氧鐺将174 O-烷基化，生成了 8-乙氧基蛹虫草菌素175。反应方案22 8-烷基衍生物176 (反应方案23)是这样制得的在四氢呋喃中于-70°C以下用 二异丙基氨基锂处理123(R5' =R2' = THP)，然后用烷基卤处理。该方法被成功地用于 其它核糖核苷(Tanaka, H.等人· Chem. Pharm. Bull.，1983，31，787)，但是从来没有应用于 3'-脱氧核苷。当使用二氧化碳来代替烷基卤时，获得了嘌呤核苷8-羧酸177。将其酯 化成178，然后氨解，获得了酰胺181，将其脱水以生成8-氰基嘌呤核苷182。用硼烷-二 甲基硫醚将178还原，获得了醇179。用二甲亚砜和草酸进行弱氧化，获得醛180。化合物 179和180是用于各种修饰的多用途中间体。反应方案23 B. Ila-c 和 IVa_c 型化合物(i)由由预形成的核苷合成可使用几种方法以给预形成的核苷引入2' ,3' _不饱和。反应方案24中显示了 一个实例。在碱中、优选在吡啶中，在0°C -80°C、优选在室温，优选用叔丁基二甲基甲硅烷基 卤或叔丁基二苯基甲硅烷基卤将核苷7选择性地0-甲硅烷化，然后在碱中、优选在吡啶中， 在0°C -80°C、优选在室温，优选用甲磺酰氯或甲苯磺酰氯磺酰化，以高产率生成了 8，可通 过用碱处理将8容易地转化成来苏糖酸环氧化物183。将183与卤离子、优选碘离子反应， 例如用碘化钠在丙酮或甲基乙基酮中处理，仅生成了反式-碘代醇184，X = 1)。将184甲 磺酰化，经由185以高产率生成了烯烃186。经过短的反应时间后，可以以不佳的产率分离 到化合物185。用氟化物例如四丁基氟化铵将186去-0-甲硅烷化，以高产率获得了所需烯 烃187，II-a型核苷。反应方案24
103 由2' _脱氧核苷例如188 (反应方案25)开始也可以制得II_a型烯属糖核苷。 在吡啶中，在-10°C -80°C温度范围下、优选在室温，优选用甲磺酰氯将188磺酰化，生成了 二-0-甲磺酸酯189，通过用碱水溶液例如氢氧化钠水溶液处理，生成了 3' ,5'-脱水糖 核苷190。通过用无水强碱例如叔丁醇钾的二甲亚砜溶液在-10°C -80°C温度下、优选在室 温处理10分钟至过夜、优选1. 5-3小时，可容易地将核苷190以高产率转化成所需的187。反应方案25 反应方案26显示了制备II-a型2'-取代的烯属糖核苷的一个实例。在吡啶中， 优选用三苯甲基氯或叔丁基二甲基甲硅烷基氯或叔丁基二苯基甲硅烷基氯将1_(2'-脱 氧-2'-氟-D-阿拉伯呋喃糖基)胸腺嘧啶(191)选择性地脱保护以生成192。在吡 啶中，优选用甲磺酰氯将192磺酰化，生成了甲磺酸酯193，通过在无水惰性溶剂例如二氯 甲烷中用非亲核性碱例如DBU或DBN处理，获得了 2，3'-脱水核苷194。通过用叔丁醇钾 的二甲亚砜溶液处理，可容易地将该化合物转化成2'-氟-烯属糖核苷195。将195脱保 护，生成了所需的2'-氟化II-a型核苷196。5' -0-甲硅烷基保护可获得比三苯甲基保 护更好的总产率。反应方案26
所有这些反应都可适用于相应的嘧啶L-核苷以制备IV-a型核苷。II-b型核苷可易于由197制得(反应方案27)。用例如叔丁基二甲基甲硅烷基或 叔丁基二苯基甲硅烷基将197在5' _位上选择性地保护，获得了 198。在碱中例如在吡唳 中用甲苯磺酰卤或甲磺酰卤将其磺酰化，获得了保护的烯属核苷199。用氟化物例如四丁基 氟化铵将199去-0-甲硅烷化，以高产率获得了所需烯烃200，II-b型核苷。或者，用乙酸铬处理15 (参见反应方案3)，用碱脱保护后，以良好产率生成了 200。反应方案27 通过相同方法，但是使用嘌呤L-核苷，可获得相应的IV-b型烯属糖L-核苷。(ii)通过碱和不饱和糖衍生物的缩合来合成在碱、优选在吡啶中，优选用叔丁基二甲基甲硅烷基卤将市售4-羟基甲基-2-戊 烯酮(201，反应方案28)甲硅烷化，以生成202，用硼氢化物将其还原，以获得203。乙酰化 后，将产物204与甲硅烷化的碱例如5-取代的尿嘧啶缩合。获得了复杂的混合物，其中正 位异构核苷(205)是主要组分。通过色谱法分离出正位异构体206和207，然后将每种正位 异构体去甲硅烷基化，分别获得核苷208(II-a型)和a-核苷209(XVIII-cS)。
反应方案28 反应方案29显示了另一实例。通过醛210与Ph3P = CFC02Et的Wittig缩合可制 得2-氟-内酯212。用甲硅烷基保护，并用DIBAH还原，然后将产物乙酰化，获得了 213。在 惰性溶剂例如二氯甲烷或二氯乙烷中，在路易斯酸例如三氟甲磺酸三甲基甲硅烷基酯或四 氯化锡存在下，用甲硅烷基化的嘌呤例如6-氯嘌呤与213缩合，获得了正位异构体混合物 214。使用硅胶柱分离这些正位异构体。将各种正位异构体去甲硅烷基化后，可获得相应的
核苷 215(II-b 型)和 a-核苷216(XVIII-d型)。反应方案29
106 C.合成 carba-糖核苷(V_X)迄今为止在自然界中发现的carba-核苷仅有腺嘌呤核苷，即aristeromycin和 n印lanocins，并且它们非常昂贵或者不能通过商购获得。因此，由零开始来化学合成这些 类型的核苷。首先制备carba-糖衍生物，然后在糖上构建杂环糖苷配基以制备carba-糖 核苷，或者对于嘌呤核苷，直接将该碱与carba-糖缩合。反应方案30举例说明了 5-氟-carba-胞苷(227，V-a型)的合成。carba-糖中 间体219可通过本领域已知的任何方法合成。Ali等人.(Tetrahedron Letters，1990，31， 1509)公开了将D-核糖酸内酯(ribonolaCtone)217转化成戊烯酮中间体218。然后可通过 任何已知的还原剂，优选硼氢化钠在甲醇中于0°C将酮218还原1小时，以获得醇219。在 二氯甲烷中，在三乙胺存在下，于0°C优选用甲磺酰氯将219磺酰化2小时，以生成220，然 后在DMF中于140°C用叠氮化钠将其处理过夜，以生成221。然后可通过任何已知的还原剂
例如Phgl^ (Staudinger法)或催化氢解、优选用披钯炭催化氢解将叠氮化物221容易地
还原。将所得胺222与0 -甲氧基丙烯酰基异氰酸酯在DMF中进行Warrener-Shaw反应， 然后用氢氧化铵处理，以经由直链中间体223形成保护的carba-尿苷224。通过用任何氟 化剂将224氟化可获得保护的5-氟-carba-尿苷(225)。氟化剂优选是在乙酸中的氟。用 碱、优选三乙胺中止反应后，可按照类似于反应方案7中描述的方法将尿嘧啶核苷225转 化成保护的carba-5-氟胞苷(226)。用酸，优选用三氟乙酸/水(2 lv/v)于50°C处理 3小时来除去226的保护基，以生成227。在三乙胺存在下，在二氯甲烷中用三氟甲磺酰氯将219磺酰化，生成了三氟甲磺 酸酯，与嘌呤碱例如腺嘌呤和氢化钠在惰性溶剂例如乙腈或DMF中反应后，直接获得了相 应的嘌呤核苷(V-b型)。通过使用相同方法，但是由L-核糖酸内酯开始，可获得相应的L-核苷对应物 (VIII型核苷)。
反应方案30 或者，通过用四氧化锇氧化将市售(lR)-(-)-氮杂二环[2.2. 1]庚-5-烯-3-酮 (228，反应方案31)转化成2，3-二羟基-内酰胺229。将氯化氢的甲醇溶液将229进行甲 醇分解后，用2，2_ 二甲氧基丙烷在丙酮中或者用1，1_ 二甲氧基环己烷在环己醇中处理产 物230，生成了酮缩醇例如231，用硼氢化钠将其还原成232。通过与0 -甲氧基丙烯酰基异 氰酸酯反应，然后用氨处理，将氨基醇232转化成2' ,3' -0-亚环己基-carba-尿苷。用 酸处理，优选用三氟乙酸在甲醇中处理，生成了 carba-尿苷(233)。carba-5-氟胞苷(227) 可通过本领域众所周知的方法由233容易地获得。反应方案31 按照类似方法，但是由另一旋光异构体(lR)_(+)_氮杂二环[2. 2. 1] 庚-5-烯-3-酮开始，可获得相应的L-核苷类似物(VIII型)。VI型核苷是由V型核苷制得的。反应方案32中显示了另一个实例。通过用二 甲基甲酰胺酮缩二甲醇在DMF中处理，然后三苯甲基化，将Arister0myCin(234)或任何 carba-核糖核苷转化成相应的N-[(二甲基氨基)亚甲基]_5' _0_三苯甲基衍生物235。将 235与硫代羰基二咪唑反应，生成了 2'，3' -0-硫代碳酸酯236，在2，2'-氮杂二(2-甲 基丙腈)存在下用三正丁基氢化锡进行自由基还原后，分别获得了烯烃237以及3'-脱 氧-和2'-脱氧-aristeromycine衍生物238和239。可在硅胶柱上将这些产物容易地 分离。用酸处理后，每一这些产物分别生成了相应的游离核苷，240、241和242。该方法特 别适于在短时间内制备用于筛选的少量几种核苷。通过相同方法，但是用VIII型核苷代替V型核苷，可获得相应的L-核苷，IX型。反应方案32
109 如反应方案33所示，将V型立体选择性地转化成VI型也是可能的。将 5-氟-carba-尿苷(233)转化成5‘ -0-三苯甲基-2‘ ,3' -二 -0-甲磺酰基衍生物243。 用碱的水溶液处理243，经由2，2'-脱水核苷中间体244获得了来苏糖环氧化物245。用 碘化钠在丙酮或丁酮中将环氧化物的环打开，生成了反式-碘代醇246，进行甲磺酰化，经 由247获得了烯烃248。将247去-0-三苯甲基化，获得了 249。还可以使用叔丁基二甲基 甲硅烷基或叔丁基二苯基甲硅烷基保护的甲硅烷基保护来代替5' -0-三苯甲基保护。还 可以用通过试剂例如甲苯磺酰氯、三氟甲磺酰氯或三氟甲磺酸酐进行的其它磺酰化来代替 甲磺酰化。通过相同方法，但是使用VIII型核苷代替V型核苷，可获得相应的IX型L-核苷。反应方案33 VI-b型核苷还可以由2-环戊烯-1-酮(250，反应方案34)合成。将叔丁氧基甲 基铜酸锂[(t-BuOCH2)2CuLi]与250进行迈克尔加成，生成了加合物251。依据Wilson等 人的方法(Synthesis，1995，1465)将251进行苯基硒化，该苯基硒化主要在相对于叔丁氧 基甲基呈反式的位置上发生，生成了 252。DIBAH还原以立体选择方式将羰基还原成羟基， 生成了 253。在碱中优选用三氟甲磺酰氯或三氟甲磺酸酐将其磺酰化，生成了 254，在惰性 溶剂例如乙腈中，与钠-嘌呤(由例如腺嘌呤和NaH制得的)缩合，以立体选择方式获得了 255。用过氧化氢在吡啶中将硒化物255氧化，结果顺利地将255转化成了烯烃256。用弱 酸处理256，生成了游离核苷240。或者，将253乙酰化，然后在三氟甲基磺酸三甲基甲硅烷基酯存在下与甲硅烷化 的嘧啶例如三(三甲基甲硅烷基)_5_氟胞嘧啶缩合，以高产率生成了相应的嘧啶核苷，通 过氧化并用酸除去产物的叔丁基可由其容易地制得VI-a型核苷。使用相同方法，但是用VIII型核苷代替V型核苷，可获得相应的IX型L-核苷。反应方案34 此外，2' ,3' _不饱和核苷的外消旋carba类似物可通过Shi等人的方法 (.!■ Med. Chem. , 1999，42，859)制得，其中在Shi等人的方法中，是由环戊烯_4_羧酸乙酯经 过多个步骤制得外消旋顺式_3，4-环氧-环戊烷甲醇257 (反应方案35)。用二苯基联硒化 物打开环氧化物后，获得了 258，将其乙酰化，然后用过氧化物处理，生成了二乙酸酯259。 在Pd(PPh3)4存在下，在惰性溶剂例如四氢呋喃中，用钠嘧啶(通过将尿嘧啶或胞嘧啶衍生 物与NaH在二甲亚砜中反应而制得的)处理259，将产物脱乙酰化后，以10-70%的产率获 得了 260。反应方案35 反应方案36 显示了由 Wolfe 等人(T. Org. Chem. ,1990,55,4712)用 D_ 核糖酸 内酯制得的261来合成VII型3，4-不饱和carba核苷。用亚磺酰氯中止叔丁氧基甲基 对261 (261，反应方案36)的迈克尔加成，然后将产物与碳酸钙一起加热，生成了环戊烯酮 262。用DIBAH将262还原，然后磺酰化，获得了 263。如上文所述用NaH将263 (优选R = CF3)与嘌呤碱缩合，生成了嘌呤核苷VII-b例如n印lanocin A (264)。用NaN3处理263 (优 选R = Me)，生成了 265，通过反应方案30中已描述的方法可将265容易地转化成包括266 在内的各种嘧啶核苷(Vll-a)。由L-核糖酸内酯开始，可容易地制得相应的L-核苷对应物(X-a和X_b)。反应方案36 D.合成XI和XII型核苷有几种可用于合成这些类型核苷的方法。用于本发明的一些核苷主要是以下述 方式制得的。将2，2_ 二甲氧基乙酸的1-薄荷基酯(267，反应方案37)与巯基乙酸缩合以 获得非对映体混合物268，268可易于在硅胶柱上分离。用NaBH4在乙醇中将268还原，然 后乙酰化，获得了 269，在四氯化锡存在下将其与甲硅烷化的碱缩合。主要获得了所需的保 护的核苷，通过色谱法纯化。进行去-0-乙酰化，获得了相应的未保护的核苷270。由 ^{-80(3-1^-脯氨酸的2，2-二甲氧基乙酯也获得了 270。在MgS04*CAS存在下，用3当量 的巯基乙酸在二氯甲烷中处理该化合物，获得了作为非对映体混合物的271，通过色谱法将 其分离。用Li(t-BuO)3AlH在四氢呋喃中将271的每种非对映体还原，然后乙酰化，获得了 272，将其与甲硅烷化的碱缩合，然后对产物脱保护，生成了 270。反应方案37
用于本发明的XIII型核苷是用本领域已知的方法制得的。在优选的实施方案中， XIII-a型核苷是按照所报道的一步或两步合成(Nucleic Acid Chem, 1978，1，272和343)， 通过磺酰化将5' -0H活化，然后用碱处理或用Ph3P和重氮二甲酸二乙酯直接处理未保护 的核苷。用于本发明的XIV型核苷的制备是通过有几分类似于Duschinsky等人的合成相 应的5-氟脱氧尿苷加合物的方法(J. Med. Chem.，1967，10，47)来进行合成的。反应方案38 中显示了使用5-氟尿苷(273)的几个实例。在C-5位含有强吸电子取代基的任何嘧啶核 苷经历类似加合物形成。用溴在甲醇中处理273，生成了加合物274，可通过催化氢化将其 还原成275。在水中处理，生成了溴代醇277，在乙酸酐存在下在乙酸中通过溴的作用获得 了 276。相应的其它加合物可通过使用其它次卤酸盐例如次氯酸盐来制得，生成了 278。每 一这些加合物都是非对映体混合物，并且以这样的形式用于筛选。反应方案38 E. XV-XVIII 型核苷用于本发明的核苷是通过依据本领域众所周知的方法将4-硫尿苷和6-硫肌苷衍 生物氧化而制得的。XVI型化合物是C-核苷。XVI-a核苷是通过本领域已知方法由V-尿 苷合成的(Watanabe，“C-核苷化学，，，Townsend，L. B.，Ed. , In "Chemistry of Nucleosides andNucleotides”，Plenum, Publ. , New York, Vol.，3，421，1994)，或者通过将芳族化合物与 保护的核糖酸内酯缩合，然后构建产物来合成(例如Kabat等人.，J. Med. Chem.，1987，30， 924)。核苷XVI-b和XVI-c是依据Pankiewicz等人开发的改进方法来制备的(Carbohydr. Res.，1984，127,227 ^Nucleosides Nucleotides, 1991，10，1333)。嘌呤-型 XVI_d C-核苷 是依据Chu等人报道的方法合成的(J. Heterocycl. Chem.，1980，17，1435)。用于本发明的 XVII型核苷是通过4'-甲酰基核苷与甲醛的交叉-醛醇反应或者预形成的糖与碱的缩合 来合成的。某些XVIII类型的核苷的制备已经在前面描述过。提供下述实施例是为了更好地理解本发明方法。这些实施例仅是举例说明，并不 是限制本发明的范围。在不背离本发明方法的一般范围的情况下，可用同等的、类似的或合 适的溶剂、试剂或反应条件来代替所述这些特定的溶剂、试剂或反应条件。
实施例熔点是在开口毛细管中在Electrothermal数字式熔点仪上测定的，并且没有校 正。UV吸收光谱是在Uvikon 931 (K0NTR0N)分光光度计上在乙醇中记录的。t-NMR光谱是 在室温用Varian Unity Plus 400光谱计测定的。化学位移是以相对于作为参照的内标四 甲基硅烷的低场的ppm给出的。进行氘交换、去耦实验或2D-C0SY以确定质子赋值。信号多 重性是以s(单峰)、d(双峰)、dd(双双峰)、t(三重峰)、q(四重峰)、br (宽的)、m(多重 峰)表示的。所有J-值是Hz给出的。FAB质谱是以正_(FAB>0)或负_(FAB<0)离子 模式在JE0L DX 300质谱仪上记录的。基质是3-硝基苄醇(NBA)或甘油与硫代甘油(GT) 的混合物(50 50，v/v)。比旋度是在Perkin-Elmer 241分光偏振计(路径长度lcm)上测定的，并且以K^deg cm2 g—1为单位给出。元素分析是通过Atlantic Microlab Inc. (Norcross, GA)进行的。用元素或官能团的符号表示的分析在理论值的士0.4%范围内。 薄层色谱是在Whatman PK5F硅胶板上进行的，通过UV吸收，然后用10%的硫酸乙醇溶液炭 化并加热来实现产物的显形。柱色谱法是在Silica Gel (Fisher, S733-1)上于常压下进行 的。实施例11-(2，5_ 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-D-呋喃木糖基)_N4-乙酰基胞嘧啶 (2，R = H)在回流状态下用30分钟向N4-乙酰基胞苷(5. 7g，0. 02mol)在乙腈(300mL)内的 悬浮液中加入乙酰溴(15mL，0. 2mol)。将该混合物回流4小时，然后真空浓缩至干。将残余 物溶解在二氯甲烷(150mL)中，并用水(150mL)洗涤。将有机层干燥(Na2S04)，蒸发，将残余 物从乙醇中结晶，获得了 1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-0 -D-呋喃木糖基)-N4-乙 酰基胞嘧啶(2,R = H,3. 4g,40%),mp 179_180°C。NMR(CDC13) 8 :10. 2 (bs，1H，NHAc)，8. 1 (d，1H，H_6，J5,6 = 7. 5Hz)，7. 5 (d，1H， H-5，J5,6 = 7. 5Hz) ,6. 0(d, 1H，H_1，，丄’,2’ < 1Hz) ,5. 5(d, 1H，H_2，，丄’,2’ < 1，J2’,3’ = 0Hz)， 4. 2-4. 7(m，4H，H_3，，4，，5，，5”)，2. 0-2. 4 (3s, 9H, 3Ac).按照类似方法，但是使用相应的N-乙酰化胞苷，制得了下列核苷及其L-对应物1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_氟胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_氯胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_溴胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_碘胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_甲基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_乙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-3 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_正丙 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_异丙 基胞嘧啶， 1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_乙烯 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_ (2_氯 乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_ (2_溴 乙烯基)胞嘧啶，
1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_ (2_碘 乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_ (2_甲 氧基羰基-乙烯基)-胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_ (2_羟 基羰基-乙烯基)-胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_苯基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基_5_苄基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_氟 胞嘧啶， 1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_氯 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_溴 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_碘 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_甲 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_乙 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_正 丙基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_异 丙基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_乙 烯基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰 基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰 基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5_ 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧_D_呋喃木糖基)_N4-苯甲酰 基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰 基-5-(2-甲氧基羰基-乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-苯甲酰 基-5-(2-羟基羰基-乙烯基)胞嘧啶，
1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_苯 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-苯甲酰基_5_苄 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_氟 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_氯 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_溴 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_碘 胞嘧啶， 1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_甲 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_乙 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4茴香酰基_5_正 丙基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_异 丙基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_乙 烯基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-β _D_呋喃木糖基)-N4-茴香酰 基-5- (2-羟基羰基-乙烯基)-胞嘧啶，1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_苯 基胞嘧啶，和1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-β -D-呋喃木糖基)-N4-茴香酰基_5_苄基胞嘧啶。实施例21-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-β -D-赤呋喃戊糖基)-N4-乙酰基胞嘧啶
在Parr装置内，在碳酸钙粉末(lg)和Pd-BaS04催化剂(0. 5g)存在下，将1_(2， 5- 二 -0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-0 -D-呋喃木糖基)-N4-乙酰基胞嘧啶(2. 15g，5mmol) 在50%的甲醇水溶液(100mL)中于45psi的初始压力下氢化。通过过滤除去催化剂，将滤 液真空浓缩。将残余物从乙醇中结晶，生成了 1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-0-0-赤呋 喃戊糖基)-N4-乙酰基胞嘧啶(3,R = H,1.06g,60% ),mp 174_177°C。
'HNMR^DC^) 6 10. 30 (bs, 1H, NHAc), 8. 05 (d, 1H, H_6，J5，6 = 7. 5Hz)，7. 43 (d，1H，H_5， J5，6 = 7. 5Hz)，5. 90 (d, 1H, H_l，，Jl，，2，= 1. 0Hz)，5. 46 (m, 1H, H_2，)，4. 30-4. 80 (3H, m, H-4，，5，，5”)，2. 10，2. 27(2s，9H，3Ac)，1. 60-2. 00 (m, 2H, H_3，，3”).按照类似方法，但是使用相应的3 ‘-溴-木糖核苷，制得了下列核苷及其L-对应 物1-(2，5_ 二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基_5_甲基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基_5_乙基胞 嘧啶， 1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基_5_正丙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基_5_异丙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基_5_苯基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-苯甲酰基_5_苄基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-茴香酰基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-茴香酰基_5_甲基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)-N4-茴香酰基_5_乙基胞 嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)善茴香酰基_5_正丙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 _D_赤呋喃戊糖基)善茴香酰基_5_异丙基 胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)善茴香酰基_5_苯基胞 嘧啶，和 1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)善茴香酰基_5_苄基胞 嘧啶。实施例31-(3-溴-3-脱氧-3 -D-呋喃木糖基)胞嘧啶(3，R = H)
在0°C将1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-0 _D_呋喃木糖基)-N4-乙酰基 胞嘧啶(4. 31g，0.01mol)用氨的饱和甲醇溶液(100mL)处理30分钟，然后在35°C以下真 空浓缩。从甲醇中结晶残余物，获得了 1-(3_溴-3-脱氧-3-D-呋喃木糖基)胞嘧啶(3， R = H)。UV禾口 NMR(D20)与木糖型结构一致。按照类似方法，但是使用相应的N-酰化胞苷，制得了下列核苷及其L-对应物1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-氟胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-氯胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-溴胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-碘胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-甲基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-乙基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-正丙基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-异丙基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-乙烯基胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-(2-氨基羰基乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-(2-羟基羰基乙烯基)胞嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-苯基胞嘧啶，和
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基-5-苄基胞嘧啶。
实施例43'-脱氧胞苷(4，R = H)将1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-3 _D_赤呋喃戊糖基)善乙酰基胞嘧啶(3， R = H,700mg,2mmol)溶解在氨的甲醇溶液(20mL，在0°C饱和的)中，将该溶液在室温保持 过夜。通过真空蒸发除去溶剂，将残余物溶解在乙醇(20mL)中，用2N硫酸将该溶液的pH调 节至3。收集沉淀，从水-乙醇中结晶，获得了作为半硫酸盐的3'-脱氧胞苷(4) (408mg， 74% ) 0 Mp 202-203V (分解)。NMR(D20) 8 8. 23 (d, 1H, H_6，J5,6 = 8. 0Hz) ,6. 27 (d, 1H, H_5，J5,6 = 8. 0Hz)， 5. 84 (d, 1H，H-1，，1’,2’ = 1. 0Hz), 4. 6 (m, 1H，H_2，)，3. 9 (m，3H，H_4，，5，，5”)，1. 95-2. 15 (m, 2H, H-2，，2”).按照类似方法，但是使用相应的酰化3'-脱氧核苷，制得了下列核苷及其L-对应 物3'-脱氧-5-甲基胞苷，3'-脱氧-5-乙基胞苷，3'-脱氧-5-正丙基胞苷，3'-脱 氧-5-异丙基胞苷，3'-脱氧-5-苯基胞苷和3'-脱氧-5-苄基胞苷。实施例52' ,5' -二-0-乙酰基-3'-脱氧尿苷将2' ,5' -二-0-乙酰基-3-脱氧-N4-乙酰基胞苷(1.06g，3mol)溶解在70%乙 酸中，将该溶液轻微回流过夜。将该化合物真空浓缩后，从乙醇中结晶残余物，获得了 2'， 5' -二-0-乙酰基-3'-脱氧尿苷(660mg，96% )。屮NMR光谱表明其含有两个乙酰基、两个亚甲基和两个烯属质子。按照类似方法，但是使用相应的3'-脱氧胞苷(4)，制得了下列2'， 5' -二-0-乙酰基-3'-脱氧尿苷及其L-对应物2'，5' -二-0-乙酰基-3-脱氧-5-甲 基尿苷，2' ,5' -二-0-乙酰基-3-脱氧-5-乙基尿苷，2' ,5' -二-0-乙酰基-3-脱 氧-5-正丙基尿苷，2' ,5' -二-0-乙酰基-3-脱氧-5-异丙基尿苷，2' ,5' -二-0-乙 酰基-3-脱氧-5-苯基尿苷和2'，5' -二-0-乙酰基-3-脱氧-5-苄基尿苷。按照类似方法，但是使用相应的3'-脱氧胞嘧啶核苷(2)，制得了下列尿嘧啶核 苷及其L-对应物2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧5-氟尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--氯尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--溴尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--碘尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--甲基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--乙基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5-_正丙基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5-_异丙基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--乙烯基尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--(2-氯乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--(2-溴乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--(2-碘乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5-_(2_甲氧基羰基乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5-_(2_羟基羰基乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--苯基尿苷，和
2'，5'-二 -0-乙酰基-3-脱氧-5--苄基尿苷。实施例61-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-溴_3_脱氧-3 _D_呋喃木糖基)尿嘧啶(5，R = H)将1-(2，5_ 二-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-3-D-呋喃木糖基)-N4-乙酰基胞 嘧啶(2，R = H, R' = CH3) (4. 31g,0.01mol)溶解在70 %乙酸中，将该溶液轻微回流4 小时。将该混合物真空浓缩后，将残余物从乙醇中结晶，获得了 2' ,5' -二-0-乙酰 基-3'-溴-3'-脱氧尿苷(5，2.80g，91% )。NMR光谱表明其含有两个乙酰基、两个 亚甲基和两个烯属质子。按照类似方法，但是使用相应的2'，5' -二-0-乙酰基-3'-溴-3'-脱 氧-N4-酰基胞苷⑵，制得了下列1，5- 二 -0-乙酰基-3 ‘-溴-3 ‘-脱氧尿苷及其L-对 应物1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-氟尿嘧啶，
1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-氯尿嘧啶，
1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-溴尿嘧啶，
1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-碘尿嘧啶，
1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-甲基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-D--呋喃木诗唐基)-5_乙基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-D--呋喃木诗唐基)_5_正丙基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-D--呋喃木诗唐基)-5-异丙基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-D--呋喃木诗唐基)-5_乙烯基尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基3-脱氧-旦-D-呋喃木糖丨基)-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-D--呋喃木1唐基)-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-D--呋喃木1唐基)-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二乙酰基-3-脱氧--D--呋喃木1|基)-5- (2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二乙酰基-3-脱氧--D-呋喃木_■基)-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-D--呋喃木诗唐基)-5_苯基尿嘧啶，和
1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧-D--呋喃木诗唐基)-5_苄基尿嘧啶。
实施例7
3'-脱氧尿苷(6b，R = H)
将 2' ，5'一 _-O-乙酰基-3'-脱氧尿苷(1.06g，3mol)溶解在氨的甲醇溶液
(10mL，在0°C饱和的)中，并保持过夜。将该混合物真空浓缩后，将残余物从乙醇中结晶，获 得了 3'-脱氧尿苷(6b，660mg，96% )。按照类似方法，但是使用相应的酰化3'-脱氧-尿嘧啶核苷(6b)或其L-对应 物，制得了下列核苷3_脱氧-5-甲基尿苷，3-脱氧-5-乙基尿苷，3-脱氧-5-正丙基尿苷， 3-脱氧-5-异丙基尿苷，3-脱氧-5-苯基尿苷和3-脱氧-5-苄基尿苷。实施例81-(3-溴-3-脱氧-0 -D-呋喃木糖基)尿嘧啶(6a，R = H)将1-(2' ,5' -二-0-乙酰基-3'-溴-3'-脱氧-3 _D_呋喃木糖基)尿嘧啶 (5，R = H)溶解在氨的甲醇溶液(10mL，在0°C饱和的)中。在0°C保持1小时后，将该混合 物真空浓缩，从乙醇中结晶残余物，获得了 3'-溴-3'-脱氧尿苷(6a，660mg，96%)。UV 和屮NMR与结构一致。按照类似方法，但是使用相应的酰化的3 ‘-溴-木糖基尿嘧啶，制得了下列核苷 及其L-对应物1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-氟尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-氯尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-溴尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-碘尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-甲基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-乙基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-正丙基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-异丙基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-乙烯基尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-(2-氯乙烯基)尿嘧唳，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5--(2-溴乙烯基)尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5--(2-碘乙烯基)尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-_(2_氨基羰基乙烯基)尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-_(2_羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5--苯基尿嘧啶，和
1-(3-溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-5-_苄基尿嘧啶。
实施例9
2' ,5/ _~ __-0-三三苯基甲基尿苷(7，R=H)将尿苷(24. 4g，0. lmol)和三苯基氯甲烷(83. 5g，0. 3mol)在无水吡啶(250mL)中 的混合物于室温搅拌过夜，然后回流4小时。冷却至室温后，在剧烈搅拌下将该混合物倒入 水中。通过倾析除去水，用水处理该树胶状残余物，搅拌并倾析出水。将该操作重复数次， 然后用热水(500mL)处理残余物，搅拌并倾析出水。将该操作重复2次。将残余物溶解在 二氯甲烷中，干燥(Na2S04)，并真空浓缩。将残余物溶解在最小必需量的苯中，用乙醚将该溶 液稀释至浑浊，将该混合物在15°C放置过夜。收集沉淀，从苯-乙醚中重结晶，获得了 7(R =H) (22. 8g,31%),mp 224_225°C。将合并的滤液浓缩，将残余物溶解在二氯甲烷中，通过 硅胶柱进行色谱纯化，使用二氯甲烷-乙醇(99 lv/v)、(98 2v/v)和(97 3v/v)洗 脱。首先洗脱出了化合物7(10g，14%)，之后洗脱出了 3'，5' -二-0-三苯基甲基尿苷 (31. 0g，42. 5% )。按照类似方法，但是使用相应的核苷，制得了下列2' ,5' -二-0-保护的和3'， 5' -二 -0-保护的核苷及其L-对应物2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-氟尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-氯尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-溴尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-碘尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-甲基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-正丙基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-异丙基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙烯基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙炔基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-氯乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-溴乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-碘乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿苷:
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-苯基尿苷，
2'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-苄基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-氟尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-氯尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-溴尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-碘尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-甲基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-正丙基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-异丙基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙烯基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-乙炔基尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-氯乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-溴乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-碘乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿苷，
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-苯基尿苷，和
3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-苄基尿苷。实施例103' -0-甲磺酰基-2' ,5' -二-0-三苯基甲基尿苷(8，R = H)向2'，5' -二-0-三苯基甲基尿苷(7，R = H，7.28g，l匪ol)在吡啶(100mL)内 的冷却溶液中滴加甲磺酰氯(lmL)，并将该反应在4°C保持过夜。通过加入乙醇(5mL)来中 止该反应。在室温搅拌2小时后，将该混合物真空浓缩。将残余物用乙醇(250mL)研制，收 集固体，从乙醇中重结晶，获得了 8 (R = H) (7. 45g,92% ),mp 225_226°C。按照类似方法，但是使用相应的核苷，制得了下列2',5' -二-0-三苯基甲基化和3'，5'-_ ■~-“-0-三苯基甲基化的核苷及其L-对应物
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-氟尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-氯尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-溴尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-碘尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-甲基尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙基尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-正丙基尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-异丙基尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙烯基尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙炔基尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-氯乙烯基)尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-溴乙烯基)尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-碘乙烯基)尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'--二 -0-三三苯基甲基-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-苯基尿苷，
3'-0-甲磺酰基-2'，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-苄基尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-氟尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-氯尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-溴尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-碘尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-甲基尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-乙基尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-正丙基尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-异丙基尿苷，
2'-0-甲磺酰基3'，5'-二 -0-三[苯基甲基-5-乙烯基尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-乙炔基尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-(2-氯乙烯基)尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-(2-溴乙烯基)尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-(2-碘乙烯基)尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5‘-二 -0-三苯基甲基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿甘，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-三苯基甲基-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿苷，
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-苯基尿苷，和
2'-0-甲磺酰基，5'-二 -0-—三苯基甲基-5-苄基尿苷。
实施例11
2,3/ _脱水-1-(2，5_ -~--0-三苯基甲基-0-D-呋喃木糖基)尿嘧啶(9，R = H，X'=0H)[1000]将3'--0-甲磺酰基_-2'，5' _二_0-三苯基甲基尿苷(806mg，lmmol)、苯甲酸钠(2g)在二甲基甲酰胺(40mL)中的混合物在130-140°c加热过夜。将该混合物冷却至室
温，在搅拌下倒入1升水中。通过倾析收集沉淀，并用乙醇(lOOmL)研制，获得了 3'-脱 水-1-(2，5-二-0-三苯基甲基-3-D-呋喃木糖基)尿嘧啶(9，R = H，X' = OH) (500mg, 75% ), mp 237°C。 按照类似方法，但是使用相应的5-取代的3' -0-甲磺酰基-2' ,5' -二-0-三 苯基甲基尿苷(8)，制得了下列2，3'-脱水-二 -0-三苯基甲基化的核苷及其L-对应物2,3'-脱水_-(2,5-11-0-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-氟尿嘧啶，[1003]2,3'-脱水_-(2,5-11-0-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-氯尿苷，[1004]2,3'-脱水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-溴尿苷，[1005]2,3'-脱水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-碘尿苷，[1006]2,3'-脱水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-甲基尿苷，[1007]2,3'-脱水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-乙基尿苷，[1008]2,3'-脱水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-正丙基尿苷，[1009]2,3'-脱水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-异丙基尿苷，[1010]2,3'-脱水_-(2,5-1l-o-i三苯基甲基-D-呋喃木11基)-5-乙烯基尿苷，[1011]2,3'-_脱水_-1--(2,5-二-o-二三苯基甲基-D--呋喃木糖基)-5-乙炔基尿苷，[1012]2,3'-脱水_-1--(2,5-1二-o-三三苯基甲基-旦--D-呋喃木糖基)_-5-(2-氯乙烯基)尿苷，[1013]2,3'-脱水_-1--(2,5-1二-0-三三苯基甲基-旦--D-呋喃木糖基)_-5-(2-溴乙烯基)尿苷，[1014]2,3'-脱水_-1--(2,5-1二-0-三三苯基甲基-旦--D-呋喃木糖基)_-5-(2-碘乙烯基)尿苷，[1015]2,3'-_脱水_-1--(2,5-二 -0-J三苯基甲基-D-呋喃木糖基)1-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_尿苷，[1016]2,3'-_脱水_-1--(2,5-二 -0-J三苯基甲基-D-呋喃木糖基)1-5-(2-羟基羰基乙烯基)_尿苷，[1017]2,3'-_脱水_-1--(2,5-二-0-:三苯基甲基-D--呋喃木糖基)-5-苯基尿苷，和[1018]2,3'-_脱水_-1--(2,5-二-0-:三苯基甲基-D-~呋喃木糖基)-5-苄基尿苷。[1019]按照类似方法，但是使用相应的5-取代的2'-0-甲磺酰基-3'，5 ‘ -二 -0-三苯基甲基尿苷，制得了下列2，2'-脱水-3' ，5'-._-“-0-_三苯基甲基化的核苷及其L-对应物[1020]2,2'-脱水_-1-(3,5-Z二-o-三苯基甲基_旦-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-氟尿嘧啶，[1021]2,2'-_脱水_-1--(3,5-二-0-:三苯基甲基-D--阿拉伯呋喃賴f基)_5_氯尿苷，[1022]2,2'-_脱水_-1--(3,5-二-0-:三苯基甲基-D--阿拉伯呋喃賴f基)-5-溴尿苷，[1023]2,2'-_脱水_-1--(3,5-二-0-:三苯基甲基-D--阿拉伯呋喃賴f基)-5-碘尿苷，[1024]2,2'-脱水_-1-(3,5-Z二-o-三苯基甲基_旦-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-甲基尿苷，[1025]2,2'-脱水_-1-(3,5-Z二-o-三苯基甲基_旦-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-乙基尿苷，[1026]2,2'-脱水--1--(3,5-二-0-三三苯基甲基--D-_阿拉伯呋喃糖■基)-5-正丙基尿甘， [1027]2,2'-脱水--1--(3,5-二-0-三三苯基甲基--D-_阿拉伯呋喃糖基)-5-异丙基尿甘， [1028]2,2'-脱水--1--(3,5-二-0-三三苯基甲基--D-_阿拉伯呋喃糖基)-5_乙烯基尿甘， [1029]2,2'-脱水--1--(3,5-二-0-三三苯基甲基--D-_阿拉伯呋喃糖基)-5_乙炔基尿甘， [1030]2,2'-_脱水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_氯乙烯基)尿苷，[1031]2,2'-_脱水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_溴乙烯基)尿苷，[1032]2,2'-_脱水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_碘乙烯基)尿苷，[1033]2,2'-_脱水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_甲氧基羰基乙烯基)_尿苷，[1034]2,2'-_脱水_-1--(3,5-二 -0-J三苯基甲基-D-阿拉伯呋喃1|基)-5-(2_羟基羰基乙烯基)_尿苷，2,2’ -脱水-1-(3，5-二-0-三苯基甲基-3-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-苯基尿苷， 和2,2’ -脱水-1-(3，5-二-0-三苯基甲基-3-D-阿拉伯呋喃糖基)-5-苄基尿苷。实施例123'-脱氧-3'-碘-2' ,5' -二-0-三苯基甲基尿苷(11，R = H，X = I，X'= OH)将3' -0-甲磺酰基-2' ,5' -二-0-三苯基甲基尿苷(8，1.61§，2讓01)、碘化钠 (3g,20mmol)在1，2_ 二甲氧基乙烷(40mL)中的混合物加热回流过夜。通过真空蒸发除去 溶剂，将残余物溶解在二氯甲烷中。将该溶液依次用5%硫代硫酸钠和水洗涤，用硫酸钠干 燥，真空浓缩至干。用硅胶柱对残余物进行色谱纯化，使用二氯甲烷-乙醚(3 lv/v)洗 脱，获得了 703mg(42% )3'-脱氧-碘-2' ,5' -二 _0_三苯基甲基尿苷(11，R = H，X = I，X' = 0H)。按照类似方法，但是使用相应的5-取代的3' -0-甲磺酰基-2' ,5' -二-0-三 苯基甲基尿苷(8)，制得了下列3' _碘衍生物及其L-对应物3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-氟尿苷，[1042]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-氯尿苷，[1043]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-溴尿苷，[1044]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-碘尿苷，[1045]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-甲基尿苷，[1046]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙基尿苷，[1047]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-正丙基尿苷，[1048]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-异丙基尿苷，[1049]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙烯基尿苷，[1050]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙炔基尿苷，[1051]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-氯乙烯基)尿苷，[1052]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-溴乙烯基)尿苷，[1053]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-碘乙烯基)尿苷，[1054]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'--二 -0-—三苯基甲基-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿苷，[1055]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0- J三苯基甲基-5-_(2_羟基羰基乙烯基)尿甘， [1056]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-苯基尿苷，和[1057]3'-脱氧-3'-碘-2'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-苄基尿苷。按照类似方法，但是使用相应的5-取代的2' -0-甲磺酰基-3' ,5' -二 _0_三 苯基甲基尿苷，制得了下列2' _碘衍生物及其L-对应物2'-脱氧-2'-碘-3'， 5' -二-0-三苯基甲基-5-氟尿苷，2'-脱氧-2'-碘-3' ,5' -二-0-三苯基甲基-5-氯尿苷，2'-脱氧-2'-碘-3'，5' -二-0-三苯基甲基-5-溴尿苷，[1061]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-碘尿苷，[1062]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-甲基尿苷，[1063]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙基尿苷，[1064]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-_■ _ 二苯基甲基-5-_正丙基尿苷，[1065]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-异丙基尿苷，[1066]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙烯基尿苷，[1067]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-乙炔基尿苷，[1068]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-氯乙烯基)尿苷，[1069]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-溴乙烯基)尿苷，[1070]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-(2-碘乙烯基)尿苷，[1071]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'--二 -0-三苯基甲基-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿苷，[1072]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基-5-_(2_羟基羰基乙烯基)尿甘， [1073]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-苯基尿苷，和[1074]2'-脱氧-2'-碘-3'，5'-二 -0-三苯基甲基--5-苄基尿苷。[1075]实施例13[1076]3'-碘-3/ _-脱氧尿苷将3'-脱氧-3'-碘-2' ,5' -二-0-三苯基甲基尿苷(840mg，lmmol) (11，R =H, X= I, X' = OH)溶解在二氯甲烷与三氟乙酸的10 1混合物(20mL)中，并将该混 合物保持在室温。真空除去溶剂，用乙醚(15mLX2)研制残余物。将不溶于醚的残余物从 甲醇-乙醚中结晶，获得了 3'-碘-3'-脱氧尿苷(312mg，88. 1%)。按照类似方法，但是使用相应的5-取代的3'-脱氧-3'-碘-2'，5' -二_0_三 苯基甲基尿苷，制得了下列3'-碘尿苷衍生物及其L-对应物3'-脱氧-3'-碘-5-氟 尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-氯尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-溴-尿苷，3'-脱 氧-3'-碘-5-碘尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-甲基-尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-乙 基尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-正丙基尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-异丙基尿苷， 3'-脱氧-3'-碘-5-乙烯基尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-乙炔基尿苷，3'-脱 氧-3'-碘-5-(2-氯-乙烯基)-尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-(2-溴乙烯基)尿苷，3'-脱 氧-3'-碘-5-(2-碘乙烯基)尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-(2-甲氧基羰基-乙烯基) 尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-(2-羟基-羰基-乙烯基)尿苷，3'-脱氧-3'-碘-5-苯 基尿苷和3'-脱氧-3'-碘-5-苄基-尿苷。按照类似方法，但是使用相应的5-取代的2'-脱氧-2'-碘-3'，5' -二_0_三 苯基甲基尿苷，制得了下列2'-碘尿苷衍生物及其L-对应物2'-脱氧-2'-碘-5-氟 尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-氯尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-溴-尿苷，2'-脱 氧-2'-碘-5-碘尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-甲基尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-乙 基尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-正丙基尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-异丙基-尿苷， 2'-脱氧-2'-碘-5-乙烯基尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-乙炔基尿苷，2'-脱 氧-2'-碘-5-(2-氯乙烯基)-尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-(2-溴乙烯基)尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-(2-碘乙烯基)尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿 苷，2'-脱氧-2'-碘-5-(2-羟基羰基-乙烯基)-尿苷，2'-脱氧-2'-碘-5-苯基 尿苷和2'-脱氧-2'-碘-5-苄基尿苷。实施例149-(2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-3-D-呋喃木糖基)腺嘌呤(14, R = H, X = Br, Y = NH2, Z = H)将化合物14 (R = 2，5，5-三甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-酮-2-基，X = Br,Y = NH2，Z = H,500mg, lmmol)溶解在氯化氢的甲醇溶液(通过将3滴乙酰氯加到10mL甲醇中 制得的)中。在室温保持30分钟后，加入3mL饱和碳酸氢钠溶液，将该混合物真空浓缩至 干。用乙醇研制残余物直至上清液在260nm不表现出显著的UV吸收。将乙醇提取物浓缩， 从甲醇中结晶残余物，获得了所需的14(R = H，X = Br, Y = NH2, Z = H),325g(87% )。NMR(D6-DMS0) 8 :8. 16，8. 32 (2s，H_2and H_8)，6. 10 (d, 1H, H_l，，= 3. 9Hz),5. 91(dd, lH,H-2',Jrj2,= 3.9，J2’,3’= 4. 1Hz)，5. 85 (dd，1H，H_3，，J2’,3’ = 4. 1，J3’,4’ =5. 1Hz)，4. 38 (dt, 1H，H_4，，J3’,4’ = 5. 1，J4’,5’ = J4’,5’’= 5. 0Hz)，3. 79 (dd，2H，H_5，，5”)， 2. 09(s，3H，Ac).按照类似方法，但是使用相应的嘌呤核苷，制得了下列2 ‘ -0-乙酰
基-3'-溴-3'_脱氧--D-木浪1核苷(14)及其L-对应物[1085]9-(2-0-乙酰基-3--溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)鸟嘌呤，[1086]9-(2-0-乙酰基-3--溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)-6-氯嘌呤，[1087]9-(2-0-乙酰基-3--溴-3-脱氧-D-呋喃木1|基)-2，6-二氯嘌呤，[1088]9-(2-0-乙酰基-3--溴-3-脱氧-D-呋喃木11基)_2_氨基-6-氯嘌呤，[1089]9-(2-0-乙酰基-3--溴-3-脱氧-D-呋喃木1|基)-6_甲基硫嘌呤，和[1090]9-(2-0-乙酰基-3--溴-3-脱氧-D-呋喃木1|基)-6_甲氧基嘌呤。[1091]实施例159-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-5_0-(2，5，5-三甲基_1，3_ 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基呋喃木糖基]腺嘌呤(14，R= 2，5，5-三甲基-1，3-二氧杂环戊 烷-2-酮-2-基，X = Br，Y = NH2, Z = H)将腺苷(13，Y= NH2，Z = H，10g，0.037mol)与 a -乙酰氧基-异丁酰溴(24g， 0. 117mol)在乙腈(120mL)中的混合物于室温搅拌45分钟。真空除去溶剂，将残余物溶解 在乙酸乙酯中，用碳酸氢钠溶液和水洗涤，用硫酸钠干燥，并真空浓缩。从甲醇中结晶出残 余物，获得了 6. 5g(35% ) 14(X = Br, Y = NH2, Z = H)，mp 169_170°C。NMR(D6-DMS0) 8 :8. 17，8. 26 (2s，各 1H，H_2 和 H-6)，6. 16 (d, 1H，H-1，，1’,2’= 3. 5Hz)，5. 94 (dd, 1H, H-2', Jr = 3. 5Hz，J2’，3’= 3. 0Hz)， 4. 92 (dd, 1H，H_3，，J2’,3’= 3. 0Hz，J3’,4’= 4. 8Hz)，4. 54 (m, 1H，H_4，)，3. 94 (m，2H，H_5，，5”)， 2. 10(s，3H，Ac)，1. 73，1. 58，1. 47 (3s，各 3H，在 5 ‘上的 CH3)、如通过屮NMR所确定的那样，14结晶的母液含有2'-溴_2'-脱氧_D_阿拉伯 糖基异构体15的混合物。按照类似方法，但是使用相应的嘌呤核苷，制得了下列3'-溴-3'-脱氧衍生物 (14)及其L-对应物
129[1097]9-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-5_0-(2，5，5-三甲基_1，3_ 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-鸟嘌呤，9-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-5_0-(2，5，5-三甲基_1，3_ 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-6-氯嘌呤，9-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-5_0-(2，5，5-三甲基_1，3_ 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-2，6- 二氯嘌呤，9-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-2-氨基-6-氯嘌呤，9-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3-二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-呋喃木糖基]-6-甲基硫嘌呤，9-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基-D-呋喃木糖基]-6-甲氧基嘌呤，9-[3-0-乙酰基-2-溴-2-脱氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-阿拉伯呋喃糖基]鸟嘌呤，9-[3-0-乙酰基-2-溴-2-脱氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基-D-阿拉伯呋喃糖基]-6-氯嘌呤，9-[3-0-乙酰基-2-溴-2-脱氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基-D-阿拉伯呋喃糖基]_2，6- 二氯嘌呤，9-[3-0-乙酰基-2-溴-2-脱氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基-D-阿拉伯呋喃糖基]-2-氨基-6-氯嘌呤，9-[3-0-乙酰基-2-溴-2-脱氧-5-0-(2，5，5-三甲基_1，3- 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基)-0 -D-阿拉伯呋喃糖基]-6-甲基硫嘌呤，和⑴9-[3-0-乙酰基-2-溴-2-脱氧-5-0- (2，5，5_三甲基-1，3_ 二氧杂环戊 烷-4-酮-2-基-D-阿拉伯呋喃糖基]-6-甲氧基嘌呤。实施例162' ,3'-脱水腺苷(18，Y = NH2，Z = H)在室温将9-[2-0-乙酰基-3-溴-3-脱氧-5-0- (2，5，5-三甲基-1，3- 二氧杂环 戊烷-4-酮-2-基呋喃木糖基]腺嘌呤14(5. 0g,0.01mol)用1M甲醇钠的甲醇溶 液(20mL)处理1小时。用冰醋酸将该混合物中和，并在冰箱中保持过夜。通过过滤收集沉 积的结晶18，2. lg(84% )。该样本的1H NMR光谱与通过Mendez，E.等人.J. Virol. 1998， 72,4737的方法制得的样本相同。按照类似方法，但是使用相应的嘌呤核苷，制得了下列2' ,3'-脱水-D-核糖衍 生物(18)及其L-对应物2'，3'-脱水鸟苷，9-(2，3-脱水-3-D-呋喃核糖基]-6-甲 基巯基嘌呤和9-(2，3-脱水-D-呋喃核糖基]-2-氨基-6-甲氧基嘌呤。实施例179-(3-脱氧-3-碘-3-D-呋喃木糖基)腺嘌呤(19，X = I，Y = NH2，Z = H)将18(Y = NH2，Z = H，lg，4mmol)、碘化钠(1. 5g，lOmmol)、乙酸钠(lOOmg)和乙酸 (5mL)在丁酮(30mL)中的混合物轻微回流3小时。将溶剂真空蒸发，用水研制残余物，获得 了 19(X = I，Y = NH2, Z = H)，1. 2g(80% )。[1116]1H NMR(D6-DMSO) δ 8. 24,8. 34 (2s, IH each, H-2and H_8)，5. 90 (d, 1H, H_l，，Jl，，2，= 4. 7Hz) ,4. 96 (dd, 1H, H_2，，Jl，，2，=4. 7，J2，， 3，= 4. 9Hz)，4. 60 (dd, 1H, H_3，，J2，，3，= 4. 9，J3，，4，= 4. 7Hz)，4. 80(d，2H，H_5，，5”)， 4. 40 (m, 1H, H-4，).按照类似方法，但是使用相应的2' ,3'-脱水-D-核糖嘌呤核苷(14)，制得了下 列3'-脱氧-3'-碘-D-木糖核苷及其L-对应物9-(3-脱氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)鸟嘌呤，9-(3-脱氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)-6_甲基巯基嘌呤，9-(3-脱氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)-6_甲氧基嘌呤，9-(3-脱氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)-2_氨基-6-甲基巯基嘌呤，和9-(3-脱氧-3-碘-β-D-呋喃木糖基)-2_氨基-6-甲氧基嘌呤。实施例183'-脱氧腺苷(20，Y = NH2, Z = H)在5% Pd/BaS04 催化剂(IOOmg)和三乙胺(ImL)存在下，将 19 (Y = NH2, Z = H, 380mg, lmmol)在甲醇(75mL)中的溶液以3atm的初始压力在氢气氛下振摇过夜。除去催化 剂之后，将溶剂真空蒸发，将残余物从甲醇中结晶，获得了 3'-脱氧腺苷20 (Y = NH2, Z = H),200mg(80% )。该样本的1H NMR光谱与蛹虫草菌素的相同。按照类似方法，但是使用相应的3'-碘-D-木糖嘌呤核苷(19)，制得了下列 3'-脱氧-核苷及其L-对应物9-(3_脱氧-0-0-赤呋喃戊糖基)鸟嘌呤，9-(3_脱 氧-0-0-赤呋喃戊糖基)-嘌呤，9-(3-脱氧-0-0-赤呋喃戊糖基)-6_甲氧基嘌呤， 9- (3-脱氧-β -D-赤呋喃戊糖基)-2-氨基-嘌呤和9- (3-脱氧-β -D-赤呋喃戊糖 基)-2_氨基-6-甲氧基嘌呤。实施例193-(β-D-呋喃核糖基)-8-氮杂黄嘌呤(24，X = 0Η，Y = N)向5-硝基尿苷(300mg)在DMF(60mL)内的溶液中加入叠氮化钠(IOOmg)，将该混 合物在室温搅拌过夜。真空除去溶剂，将残余物溶解在最小必需量的热水中，用稀盐酸将PH 调节至3-4。将沉淀从水中重结晶，164-166°C (分解)。元素分析=C9H11N5O6H2O的计算值 C, 35. 64 ；H, 4. 29 ；N, 23. 1。实测值-.C, 35. 96 ；H, 4. 01 ；N, 23. 43。实施例201，2-0-亚异丙基-5-0-甲氧基羰基-3-0-苯氧基硫代羰基-a-D-呋喃木糖(26， R = Ph)向1，2-0-亚异丙基-5-0-甲氧基羰基-a-D-呋喃木糖(25,25. Og, 0. Imol)和 4_ 二甲基氨基吡啶(25g，0.2mol)在无水吡啶(250mL)内的溶液中滴加氯硫代甲酸苯酯 (50g，0. 3mol)在乙腈(IOOmL)中的溶液，并将该反应混合物在50_60°C搅拌24小时。将 该溶液真空浓缩，将残余物在二氯甲烷与水之间分配。将有机层依次用水、0. IN氢氧化钠、 水、0. IN盐酸和水洗涤，用硫酸钠干燥，真空浓缩，以定量产率获得了 26 (R = Ph)，为浆状物 (38. 2g)。将该浆状物 直接用于下一步骤。实施例213-脱氧-1，2-0-亚异丙基-5-0-甲氧基羰基-α -D-赤呋喃戊糖(27)[1135]用3小时将三正丁基氢化锡(58g，0. 2mol)在甲苯(300mL)中的溶液加到上 述化合物 26(R = Ph) (19. 2g，50mmol)和 2，2' _ 偶氮二异丁腈(2. 5g，15mmol)在甲苯 (400mL)内的回流溶液中。将该混合物真空浓缩，将残余物溶解在乙腈(300mL)中，用石油 醚(4X100mL)萃取该该溶液以除去三正丁基锡衍生物。将乙腈层浓缩。残余物的薄层色 谱显示了一个主要点，1H NMR光谱表明存在3个甲基，没有任何芳族质子，但是掺杂有少量 丁基锡衍生物。该产物不用进一步纯化直接用于下一步骤。实施例221，2- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖(28)在冷却下以将温度保持在15-25°C的速度向23(2. 32g，0.01mol)在乙酸(60mL)与 乙酸酐(6mL)的混合物内的搅拌溶液中滴加浓硫酸(3mL)。在室温静置过夜后，向该溶液中 加入冰(250g)，然后用二氯甲烷(3X50mL)萃取该混合物。用饱和碳酸氢钠溶液(3X30mL) 洗涤合并的萃取液，用硫酸钠干燥，并真空浓缩，获得了 28(2. 8g，100% )，为正位异构体混 合物。该化合物的纯度足以不用进一步纯化而用于下一步骤。实施例231-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-氟尿嘧啶 (29，X = OH, Z = F)将5-氟尿嘧啶(2.6g，0.02mol)、硫酸铵(约30mg)在六甲基乙硅氮烷(15mL)中的 混合物回流直至获得澄清溶液。真空除去溶剂，将残余物溶解在1，2_ 二氯乙烷(20mL)中， 加入在1，2_ 二氯乙烷(20mL)中的1，2_ 二 -0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤 呋喃戊糖(28，5. 5g，0. 02mol)。向该溶液中加入四氯化锡(5. 2g，0. 02mol)，并将该混合物 在室温搅拌过夜，然后在40-50°C加热3小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(40mL)，搅拌直至不 再有二氧化碳释放出来。经由硅藻土垫过滤该混合物。分离出有机层，用饱和碳酸氢钠溶 液(20mLX2)和水(20mLX2)小心地洗涤，用硫酸钠干燥，并真空浓缩至干。将残余物从乙 醇中结晶，获得了 29(4. 3g，62% )。按照类似方法，但是使用相应的嘧啶碱，制得了下列2' ,5' _保护的3'-脱 氧-核苷及其L-对应物1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_氯尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_溴尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_碘尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_氰基尿嘧 啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_乙氧基羰 基-尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_氨基羰 基-尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_乙酰基尿 嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-甲基尿嘧 啶，[1151]l-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-乙基尿嘧 啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_正丙基尿 嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_异丙基尿 嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_乙烯基尿 嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_烯丙基尿 嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_乙炔基尿 嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_氯乙烯 基)_尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_溴乙烯 基)_尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_碘乙烯 基)_尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5- (2-甲氧基 羰基-乙烯基)尿嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5- (2-羟基羰
基-乙烯基)尿嘧啶，[1162] 口空1--(2--0-乙酰基-3--脱氧-5-0--甲氧基羰基-D--赤呋喃戊1唐基)_5_-苯基尿嘧呢， [1163] 口空1--(2--0-乙酰基-3--脱氧-5-0--甲氧基羰基-D--赤呋喃戊1唐基)_5_-苄基尿嘧呢， [1164]1--(2--0-乙酰基--3-脱氧--5--0-甲氧基羰基_旦--D-赤呋喃戊賴氟胞嘧啶，[1165]1--(2--0-乙酰基--3-脱氧--5--0-甲氧基羰基_旦--D-赤呋喃戊賴■ )-5-氯胞嘧啶，[1166]1--(2--0-乙酰基--3-脱氧--5--0-甲氧基羰基_旦--D-赤呋喃戊賴■ )-5-溴胞嘧啶，[1167]1--(2--0-乙酰基--3-脱氧--5--0-甲氧基羰基_旦--D-赤呋喃戊賴碘胞嘧啶，[1168]1--(2--0-乙酰基-3--脱氧-5-0--甲氧基羰基-D--赤呋喃戊1唐基)_5_-氰基胞嘧
啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)_5_乙氧基羰 基-胞嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-氨基羰 基-胞嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤呋喃戊糖基)-5-乙酰基胞 嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_甲基胞嘧1- (2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙基胞嘧 1- (2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-正丙基胞 1- (2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-异丙基胞 1- (2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙烯基胞 1- (2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-烯丙基胞 1- (2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙炔基胞
啶，
啶，
嘧啶，
嘧啶，
嘧啶，
嘧啶，
嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_氯乙烯 基)_胞嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5- (2_溴乙烯 基)_胞嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5- (2-碘乙烯 基)_胞嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-3-D-赤呋喃戊糖基)-5-(2_甲氧 基-羰基乙烯基)胞嘧啶，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_羟基羰 基乙烯基)胞嘧啶，
啶，和啶。
1- (2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-苯基胞嘧 1- (2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-苄基胞嘧 按照类似方法，但是使用相应的嘧啶和嘌呤碱，制得了下列2' ,5' -二-0-乙酰
基3'--脱氧-核苷及其L-对应物[1187]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-氯尿嘧啶，[1188]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-溴尿嘧啶，[1189]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-碘尿嘧啶，[1190]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-氰基尿嘧啶，[1191]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1192]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-氨基羰基尿嘧啶，[1193]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-乙酰基尿嘧啶，[1194]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-甲基尿嘧啶，[1195]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-乙基尿嘧啶，[1196]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-正丙基尿嘧啶，[1197]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-异丙基尿嘧啶，[1198]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙烯基尿嘧啶，[1199]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-烯丙基尿嘧啶，[1200]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙炔基尿嘧啶，[1201] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-氯乙烯基)尿嘧呢， [1202] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-溴乙烯基)尿嘧呢， [1203] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-碘乙烯基)尿嘧呢， [1204]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基)-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1205]1-(2,5-1二-0-乙酰基--3-脱氧--D-赤呋喃戊_,基)-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1206]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-苯基尿嘧啶，[1207]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-苄基尿嘧啶，[1208]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-氟胞嘧啶，[1209]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-氯胞嘧啶，[1210]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-溴胞嘧啶，[1211]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-碘胞嘧啶，[1212]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-氰基胞嘧啶，[1213]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1214]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-氨基羰基胞嘧啶，[1215]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙酰基胞嘧啶，[1216]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-甲基胞嘧啶，[1217]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙基胞嘧啶，[1218]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-正丙基胞嘧啶，[1219]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-异丙基胞嘧啶，[1220]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙烯基胞嘧啶，[1221]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-烯丙基胞嘧啶，[1222]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊f！基)--5-乙炔基胞嘧啶，[1223] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-氯乙烯基)胞嘧呢， [1224] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-溴乙烯基)胞嘧呢， [1225] 口空1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊唐基)-5--(2-碘乙烯基)胞嘧呢， [1226]1-(2,5-1二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基)-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1227]1-(2，5-二-0-乙酰基-3-脱氧--3-0-赤呋喃戊$害基)-5-(2-羟基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1228]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脱氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-5_苯基胞嘧啶，[1229]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脱氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-5_苄基胞嘧啶，[1230]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脱氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-N6-苯甲酰基腺嘌呤，[1231]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脱氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-6-氯嘌呤，[1232]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脱氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-2，6-二氯嘌呤，[1233]1-(2，5_ 二-0-乙酰基-3-脱氧_-3-D-赤呋喃戊擴复基)-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1234]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脱氧-3-D-赤呋喃戊1瘡基)-2_乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1235]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脱氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-6_甲氧基嘌呤，和[1236]1-(2，5-二-0-乙酰基-3--脱氧-3-D-赤呋喃戊^瞎基)-6_甲基巯基嘌呤。[1237]实施例24[1238]1-(2-0-乙酰基-3-脱氧--5-0-甲氧基羰基D-赤呋喃戊糖基)-6-氯嘌呤(30，X =Cl, Y = H)[1239]将6-氯嘌呤(3. lg，0. 02mol)、硫酸铵(约30mg)在六甲基乙硅氮烷(25mL)中的
混合物回流直至获得澄清溶液。真空除去溶剂，将残余物溶解在1，2_ 二氯乙烷(30mL)中， 加入在1，2-二氯乙烷(20mL)中的1，2-二-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-D-赤 呋喃戊糖(28，5. 5g，0. 02mol)。向该溶液中加入四氯化锡(5. 2g，0. 02mol)，并将该混合物 在室温搅拌过夜，然后在40-50°C加热3小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)，搅拌直至不 再有二氧化碳释放出来。经由硅藻土垫过滤该混合物。分离出有机层，用饱和碳酸氢钠溶 液(30mLX2)和水(30mLX2)小心地洗涤，用硫酸钠干燥，并真空浓缩至干。将残余物从乙 醇中结晶，获得了 30(4. 3g，62% )。按照类似方法，但是使用相应的嘌呤碱，制得了下列2' ,5' _保护的3'-脱 氧-核苷及其L-对应物1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-3-D-赤呋喃戊糖基)-N6-苯甲酰基 腺嘌呤，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基_D_赤呋喃戊糖基)_6_氯嘌呤，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基_D_赤呋喃戊糖基)_2，6_ 二氯嘌 呤，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 _D_赤呋喃戊糖基)_2_乙酰氨 基-6-氯嘌呤，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基-0 -D-赤呋喃戊糖基)_2_乙酰氨基_6-甲氧基嘌呤，1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基_D_赤呋喃戊糖基)_6_甲氧基嘌 呤，和1-(2-0-乙酰基-3-脱氧-5-0-甲氧基羰基_D_赤呋喃戊糖基)_6_甲基巯 基-嘌呤。实施例25[1250]1，2-0-亚异丙基-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-a-D-呋喃木糖(31)将1，2-0-亚异丙基-a-D-呋喃木糖(38. 0g，0. 2mol)、叔丁基二苯基氯甲硅烷 (70g，0. 25mol)和咪唑(21. 5g，0. 4mol)在N，N-二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物于室温 搅拌1小时。真空除去溶剂，将残余物溶解在乙酸乙酯(1L)中，用水(300mLX2)和盐水 (300mL)萃取，用硫酸钠干燥，真空浓缩至干，获得了粗产物31(86g，100% )，其不用进一步 纯化直接用于下一步骤。实施例261,2-0-亚异丙基-3-0-甲磺酰基-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-a _D_呋喃木糖 (32，R = Ms)将甲磺酰氯(17g，0. 15mol)滴加到粗产物31(43g，0. lmol)在吡啶(100mL) 内的溶液中，将该混合物在室温静置过夜。向该混合物中加入碎冰(1L)，用二氯甲烷 (300mLX3)萃取该产物。将萃取液合并，用水(300mLX2)和盐水(300mL)洗涤，用硫酸钠 干燥，并真空浓缩至干。通过与甲苯反复共沸蒸馏除去微量吡啶。将残余物溶解在二氯甲 烷(500mL)中，用0. IN盐酸(250mLX2)和水洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩至干，获得了粗产物 32(R = Ms),50. lg(99%)0该物质的1H NMR光谱表明其纯度足以直接用于下-步骤。实施例27甲基3-0-甲磺酰基-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-呋喃木糖苷(33，R = Ms)将粗产物32(50g，0. lmol)在氯化氢的无水甲醇溶液(1L)中的溶液在室温保 持过夜，然后真空蒸发至获得了浆状物，将其在水(100mL)与二氯甲烷(150mL)之间分配。 分离出有机层，用水(100mL)洗涤，用硫酸钠干燥，并真空浓缩，获得了粗产物33，为浆状 物，重量为48g(100% )。该产物不用进一步纯化而直接用于下一步骤。实施例28甲基2，3-脱水-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-呋喃核糖苷(34)将粗产物33(48g，0. lmol)溶解在二氯甲烷(100mL)中，并用2M甲醇钠的甲醇溶 液(60mL)处理，并回流2小时。通过过滤除去不溶性盐，将滤液真空浓缩至干。将残余物 溶解在二氯甲烷(150mL)中，用水(100mLX2)洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩至干，获得了粗产 物30(38g，100% )，该产物可不用纯化直接用于下一步骤。实施例29甲基3-脱氧-3-碘-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-呋喃核糖苷(35，X = I)将34(38g，0. lmol)、碘化钠(60g，0. 4mol)、乙酸钠(0. 6g)和乙酸(70mL)在丙酮 (500mL)中的混合物加热回流8小时。真空除去丙酮，将残余物在二氯甲烷(500mL)与水 (250mL)之间分配。分离出有机层，用分别是250mL的水、0. 1M硫代硫酸钠溶液和水洗涤， 并用硫酸钠干燥。真空除去溶剂后，将残余物从乙醇中结晶，获得了 31g(60.5% )35(X = I)。实施例30甲基3-脱氧-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-赤呋喃戊糖苷(37，由35制得)用5%披钯炭(2g)将化合物35(X= I，25.6g，0.05mol)在乙酸乙酯(250mL)中氢 化。不再消耗氢气后，将该混合物过滤，将滤液用水(150mLX2)洗涤，用硫酸钠干燥，浓缩 至干，获得了粗产物37 (19g，定量产率)，其纯度足以直接用于下一步骤。[1267]实施例31甲基3-脱氧-5-0-叔丁基二苯基甲硅烷基-D-赤呋喃戊糖苷(36，由34制得)将氢化锂铝(8.4g，0.2mol)在无水乙醚(220mL)中的悬浮液于氮气氛下搅拌，并 在冰浴中冷却。以使得温度保持25°C以下的速度向该悬浮液中滴加34(19g，0. 05mol)在无 水四氢呋喃(250mL)中的溶液。2小时后，再加入lg氢化锂铝，将该混合物在室温搅拌过 夜。将该搅拌的混合物在冰浴中冷却，滴加异丙醇(lOOmL)，然后加入丙酮(50mL)。将该混 合物真空浓缩，将残余物在乙醚(250mL)与水(150mL)之间分配。经由硅藻土垫过滤除去 不溶物，用乙醚洗涤。分离出乙醚层，依次用0.2N盐酸(150mLX2)和水(150mLX2)洗涤， 用硫酸钠干燥，然后浓缩至干，获得了粗产物36(16. 5g,87% )。实施例32甲基3-脱氧-D-赤呋喃戊糖苷(38)向粗产物36(13g，0.03mol)在四氢呋喃(320mL)内的溶液中滴加1M三乙基氟 化氢铵溶液(lOOmL)，将该混合物搅拌24小时。将该混合物真空浓缩，将残余物溶解在水 (200mL)中。加入碳酸钙粉末(20g)，将该混合物在室温搅拌过夜，然后过滤。将滤液真空浓 缩至浆状物，将其溶解在氯仿(200mL)中，过滤，真空蒸发，获得了粗产物38(4. 5g,100%)o实施例331，2，5-三-0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊糖(38)向粗产物甲基3-脱氧-D-赤呋喃戊糖苷37(4. 5g，0.03mol)和乙酸(80mL)的 剧烈搅拌着的混合物中加入乙酸酐(40mL)，然后加入硫酸(4mL)，将该反应混合物在室温 搅拌过夜。将该混合物在二氯甲烷(150mL)与冰-水(400mL)之间分配。用二氯甲烷 (100mLX2)萃取水层。将合并的有机层用等体积的饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次，用水洗涤 一次，用硫酸钠干燥，并真空浓缩至干。通过与甲苯共沸蒸馏数次来除去微量乙酸，获得了 粗产物38(5. lg，66% )。NMR光谱表明产物的主要成分含有3个乙酰基，并且是正 位异构体。实施例341-(3_脱氧-3-D-赤呋喃戊糖基)_5_氟尿嘧啶(3'-脱氧_5_氟尿苷，6b，X = OH, R = F)将39的乙酰基衍生物(X = OH, Z = F，3. 3g，0. Olmol)与三乙胺(3mL)在甲醇 (lOOmL)中的混合物于室温搅拌过夜。将该混合物真空浓缩至干，将残余物从乙醇中结晶， 获得了 3'-脱氧-5-氟尿苷(2. 0g，83% )，mp 169_171°C。NMR(D6-DMS0) 8 :11.7(bs，lH， N3-H,可交换的)，8. 44 (d，1H，H-6，J6,F = 7. 1Hz)，5. 7 (d，1H，2，-OH,可交换的)，5. 5 (窄 m， 1H, H-1' )，5. 3(t，1H，5，-OH,可交换的)，4. 1-4. 5(m，2H，H_2，和 H_4，)，3. 5-3. 9 (m，2H， H-5，，5”)，1. 6-2. 2(m，2H，H_3，，3”).按照类似方法，但是使用相应的2' ,5' -二-0-乙酰基嘧啶和嘌呤核苷，制得了 下列3 ‘-脱氧-核苷及其L-对应物1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基).-5-氯尿嘧啶，[1282]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基).-5-溴尿嘧啶，[1283]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基).-5-碘尿嘧啶，[1284l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氰基尿嘧啶，[1285l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1286l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氨基羰基尿嘧啶，[1287l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙酰基尿嘧啶，[1288l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-甲基尿嘧啶，[1289l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙基尿嘧啶，[1290l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-正丙基尿嘧啶，[1291l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-异丙基尿嘧啶，[1292l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙烯基尿嘧啶，[1293l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-烯丙基尿嘧啶，[1294l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙炔基尿嘧啶，[1295l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1296l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[1297l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1298l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1299l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1300l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-苯基尿嘧啶，[1301l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-苄基尿嘧啶，[1302l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基胞嘧啶，[1303l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氟胞嘧啶，[1304l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氯胞嘧啶，[1305l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-溴胞嘧啶，[1306l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-碘胞嘧啶，[1307l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氰基胞嘧啶，[1308l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1309l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-氨基羰基胞嘧啶，[1310l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙酰基胞嘧啶，[1311l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-甲基胞嘧啶，[1312l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙基胞嘧啶，[1313l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-正丙基胞嘧啶，[1314l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-异丙基胞嘧啶，[1315l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙烯基胞嘧啶，[1316l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-烯丙基胞嘧啶，[1317l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-乙炔基胞嘧啶，[1318l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1319l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1320l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1321l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1322l-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1唐基-5-(2-羟基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1323]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-苯基胞嘧啶，[1324]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-5-苄基胞嘧啶，[1325]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-2-氯腺嘌呤，[1326]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-6-氯嘌呤，[1327]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-2，6_ 二氯嘌呤，[1328]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1329]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-2-乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1330]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-6-甲氧基嘌呤，和[1331]1-(3-脱氧-D-赤呋喃戊1套基)-6-甲基巯基嘌呤。实施例351-(2，5_ 二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基_D_呋喃木糖基)_5_氟尿嘧啶将5-氟尿嘧啶(0. 02mol)、硫酸铵(约30mg)在六甲基乙硅氮烷(15mL)中的混合 物回流直至获得澄清溶液。真空除去溶剂，将残余物溶解在1，2_ 二氯乙烷(20mL)中，加入 在1，2-二氯乙烷(20mL)中的1，2，5-三-0_乙酰基-3-0-甲磺酰基_D_呋喃木糖(5. 5g， 0.02mol)。向该溶液中加入四氯化锡(5.2g，0.02mol)，并将该混合物在室温搅拌过夜，然 后在40-50°C加热3小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(40mL)，搅拌直至不再有二氧化碳释放 出来。经由硅藻土垫过滤该混合物。分离出有机层，用饱和碳酸氢钠溶液(20mLX2)和水 (20mLX2)小心地洗涤，用硫酸钠干燥，并真空浓缩至干。将残余物从乙醇中结晶，获得了标 题产物(62% )。该样本的屮NMR光谱与所指出的结构一致。按照类似方法，但是使用相应的嘧啶和嘌呤碱，制得了下列2,5' -二-0-乙酰基3'-取代的木11核苷及其L-对应物[1336]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--氯尿嘧啶，[1337]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--溴尿嘧啶，[1338]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--碘尿嘧啶，[1339]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-_氰基尿嘧啶，[1340] 口空1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--乙氧基羰基尿嘧呢， [1341]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3-0-甲磺酰基_-D-呋喃木_,基)_5-氨基羰基尿嘧啶，[1342]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--乙酰基尿嘧啶，[1343]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--甲基尿嘧啶，[1344]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--乙基尿嘧啶，[1345]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--正丙基尿嘧啶，[1346]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--异丙基尿嘧啶，[1347]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--乙烯基尿嘧啶，[1348]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--烯丙基尿嘧啶，[1349]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5--乙炔基尿嘧啶，[1350]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3-0-甲磺酰基_-D-呋喃木糖■基)_5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1351]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3-0-甲磺酰基_-D-呋喃木糖1基)_5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，1-(2，5-二1-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基-1-D-呋喃木II！基)--5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1353]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基--D-呋喃木糖■基)-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1354]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基--D-呋喃木糖■基)-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1355]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-苯基尿嘧啶，[1356]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-苄基尿嘧啶，[1357]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-氟胞嘧啶，[1358]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-氯胞嘧啶，[1359]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-溴胞嘧啶，[1360]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-碘胞嘧啶，[1361]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-氰基胞嘧啶，[1362] 口空1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木诗唐基)-5-乙氧基羰基胞嘧呢， [1363]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基--D-呋喃木糖■基)-5-氨基羰基胞嘧啶，[1364]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-乙酰基胞嘧啶，[1365]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-甲基胞嘧啶，[1366]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-乙基胞嘧啶，[1367]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-正丙基胞嘧啶，[1368]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-异丙基胞嘧啶，[1369]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-乙烯基胞嘧啶，[1370]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-烯丙基胞嘧啶，[1371]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-乙炔基胞嘧啶，[1372]1-(2，5-二1-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基--D-呋喃木II！基)--5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1373]1-(2，5-二1-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基--D-呋喃木II！基)--5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1374]1-(2，5-二1-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基--D-呋喃木II！基)--5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1375]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基--D-呋喃木糖■基)-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1376]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3--0-甲磺酰基--D-呋喃木糖■基)-5-(2-羟基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1377]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-苯基胞嘧啶，[1378]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-5-苄基胞嘧啶，[1379]1-(2，5_ 二二-0-乙酰基--3-0-甲磺酰基-旦-D-咲喃木糖基)-N6-苯甲酰基腺嘌呤，[1380]1-(2，5-二二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D--呋喃木1唐基)-6-氯嘌呤，[1381]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-2，6-二氯嘌呤，[1382]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1383]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-2-乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1384]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-6-甲氧基嘌呤，[1385]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-6-甲基巯基嘌呤，[1386]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-氯尿嘧啶，[1387]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-溴尿嘧啶，[1388]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-碘尿嘧啶，[1389]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-氰基尿嘧啶，[1390]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木1瘡基)-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1391] 口空1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木1瘡基)-5-氨基羰基尿嘧呢， [1392]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5-乙酰基尿嘧啶，[1393]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-甲基尿嘧啶，[1394]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-乙基尿嘧啶，[1395]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5_正丙基尿嘧啶，[1396]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5_异丙基尿嘧啶，[1397]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5-乙烯基尿嘧啶，[1398]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5_烯丙基尿嘧啶，[1399]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5-乙炔基尿嘧啶，[1400]1--(2,5-11-0-乙酰基_-3--0-甲苯磺酰基--D-呋喃木|唐基)--5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1401]1--(2,5-11-0-乙酰基_-3--0-甲苯磺酰基--D-呋喃木|唐基)--5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[1402]1--(2,5-11-0-乙酰基_-3--0-甲苯磺酰基--D-呋喃木|唐基)--5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1403]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5_ (2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1404]1--(2,5-1二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基-D-呋喃木H！基)-5_ (2-羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1405]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-苯基尿嘧啶，[1406]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-苄基尿嘧啶，[1407]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-氟胞嘧啶，[1408]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-氯胞嘧啶，[1409]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-溴胞嘧啶，[1410]1--(2,5-1二 -0-乙酰基-3--0--甲苯磺酰基--D-呋喃木^瞎基)-5-碘胞嘧啶，
142[1411]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_5_氰基胞嘧啶，[1412]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木M唐基)_5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1413] 口空1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木M唐基)_5_氨基羰基胞嘧呢， [1414]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_乙酰基胞嘧啶，[1415]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_5-甲基胞嘧啶，[1416]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_5-乙基胞嘧啶，[1417]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_正丙基胞嘧啶，[1418]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_异丙基胞嘧啶，[1419]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_乙烯基胞嘧啶，[1420]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_烯丙基胞嘧啶，[1421]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_乙炔基胞嘧啶，[1422]1-(2，5-二-0-乙酰基_-3--0-_甲苯磺酰基--D--呋喃木$害基)_5_-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1423]1-(2，5-二-0-乙酰基_-3--0-_甲苯磺酰基--D--呋喃木$害基)_5_-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1424]1-(2，5-二-0-乙酰基_-3--0-_甲苯磺酰基--D--呋喃木$害基)_5_-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1425]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1426]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-5_(2-羟基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1427]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_5_苯基胞嘧啶，[1428]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_5_苄基胞嘧啶，[1429] nA1-(2，5-二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基--D--呋喃木1_-N6_苯甲酰基腺嘌吟， [1430]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)_6-氯嘌呤，[1431]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--呋喃木1瘡基)-2，6-二氯嘌呤，[1432]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3-0-甲苯磺酰基_旦-D-呋喃木糖基)_2_乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1433]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--木糖型呋喃戊糖:基)-2_乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1434]1-(2，5-二.-0--乙酰基-3--0--甲苯磺酰基-D--木糖型呋喃戊糖基)-6-甲氧基嘌呤，和[1435]1-(2，5_ 二-0-乙酰基--3--0-甲苯磺酰基_-D-呋喃木_！基)-6-甲基巯基嘌呤。[1436]实施例36[1437]1-(2,3,5-~'-—0-乙酰基--D-呋喃木_基)胸腺嘧啶[1438]将胸腺嘧啶(0. 02mol)、硫酸铵(约30mg)在六甲基乙硅氮烷(15mL)中的混合物回流直至获得澄清溶液。真空除去溶剂，将残余物溶解在1，2_ 二氯乙烷(20mL)中，加入在 1，2_ 二氯乙烷(20mL)中的1，2，3，5_三-0-乙酰基-D-呋喃木糖(5. 5g，0. 02mol)。向该溶 液中加入四氯化锡(5. 2g，0. 02mol)，并将该混合物在室温搅拌过夜，然后在40_50°C加热3 小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(40mL)，搅拌直至不再有二氧化碳释放出来。经由硅藻土垫 过滤该混合物。分离出有机层，用饱和碳酸氢钠溶液(20mLX2)和水(20mLX2)小心地洗 涤，用硫酸钠干燥，并真空浓缩至干。将残余物从乙醇中结晶，获得了产物(4. 3g,62% )。该 样本的屮NMR光谱与所指出的结构-致。 按照类似方法，但是使用相应的嘧啶和嘌呤碱，制得了下列2' ,5' -二-0-乙酰 基3'-取代的木糖型核苷及其L-对应物1-(2，3，5_ 三三-0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-氟尿嘧啶，[1441]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-氯尿嘧啶，[1442]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-溴尿嘧啶，[1443]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-碘尿嘧啶，[1444]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-氰基尿嘧啶，[1445]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1446]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-氨基羰基尿嘧啶，[1447]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-乙酰基尿嘧啶，[1448]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-甲基尿嘧啶，[1449]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-乙基尿嘧啶，[1450]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-正丙基尿嘧啶，[1451]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-异丙基尿嘧啶，[1452]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-乙烯基尿嘧啶，[1453]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-烯丙基尿嘧啶，[1454]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-乙炔基尿嘧啶，[1455]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1456]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[1457]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1458] 口空1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1唐基:-5--(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧呢， [1459]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木f！基)-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1460]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-苯基尿嘧啶，[1461]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-苄基尿嘧啶，[1462]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-氟胞嘧啶，[1463]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-氯胞嘧啶，[1464]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-溴胞嘧啶，[1465]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-碘胞嘧啶，[1466]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-氰基胞嘧啶，[1467]1-(2，3，5_ 三二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1_-5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1468]1-(2，3，5_ 三1 -0-乙酰基-D-呋喃木1睡)-5-氨基羰基胞嘧啶，[1469] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5-“乙酰基胞嘧啶，[1470] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5-“甲基胞嘧啶，[1471] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5-“乙基胞嘧啶，[1472] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--正丙基胞嘧啶，[1473] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--异丙基胞嘧啶，[1474] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5-“乙烯基胞嘧啶，[1475] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--烯丙基胞嘧啶，[1476] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5-“乙炔基胞嘧啶，[1477] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1478] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1479] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5--(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1480] 1- 口空2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木1睡)-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧呢， [1481] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-5-_苯基胞嘧啶，[1482] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-N6-苯甲酰基腺嘌呤，[1483] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-6--氯嘌呤，[1484] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-26_ 二氯嘌呤，[1485] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴f基)_-2--乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1486] 1- nA2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-木糖型呋喃戊糖基)-2-乙酰氨基-6-甲氧基嘌吟， [1487] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-木糖型呋喃戊糖基)-6_甲氧基嘌呤，和[1488] 1-2,3,5-E二一 -0-乙酰基-D-呋喃木賴,基)_-6--甲基巯基嘌呤。实施例371-(3-脱氧-3-0-甲磺酰基-0 -D-呋喃木糖基)-5-氟尿嘧啶将1-(2，5_ 二-0-乙酰基-3-0-甲磺酰基-3-D-呋喃木糖基)_5_氟尿嘧啶 (4. 24g,0.01mol)在氨的甲醇溶液(100mL)中的混合物在0°C搅拌30分钟，真空浓缩至干， 将残余物从乙醇中结晶，获得了 1-(3_脱氧-3-0-甲磺酰基-3-D-呋喃木糖基)-5_氟尿 嘧啶(2.82g，83%)。1HNMR(D6-DMS0)表明分子中没有任何乙酰基，但是有-个甲磺酰基。按照类似方法，但是使用相应的2' ,5' -二-0-乙酰基嘧啶和嘌呤核苷，制得了 下列3丨-0-甲磺酰基-核苷及其L-对应物1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-氯尿嘧啶，[1494]1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-溴尿嘧啶，[1495]1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-碘尿嘧啶，[1496]1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-氰基尿嘧啶，[1497]1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1498]1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-氨基羰基尿嘧啶，[1499]1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-乙酰基尿嘧啶，[1500]1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-甲基尿嘧啶，[1501]1-(3--0-甲磺酰基-D-呋喃木11基)-5-乙基尿嘧啶，[15023--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-正丙基尿嘧啶，[15033--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-异丙基尿嘧啶，[15043--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-乙烯基尿嘧啶，[15053--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-烯丙基尿嘧啶，[15063--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-乙炔基尿嘧啶，[15073--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[15083--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[15093--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[15103--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[15113--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，[15123--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-苯基尿嘧啶，[15133--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-苄基尿嘧啶，[15143--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基胞嘧啶，[15153--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-氟胞嘧啶，[15163--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-氯胞嘧啶，[15173--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-溴胞嘧啶，[15183--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-碘胞嘧啶，[15193--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-氰基胞嘧啶，[15203--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-乙氧基羰基胞嘧啶，[15213--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-氨基羰基胞嘧啶，[15223--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-乙酰基胞嘧啶，[15233--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-甲基胞嘧啶，[15243--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-乙基胞嘧啶，[15253--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-正丙基胞嘧啶，[15263--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-异丙基胞嘧啶，[15273--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-乙烯基胞嘧啶，[15283--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-烯丙基胞嘧啶，[15293--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-乙炔基胞嘧啶，[15303--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[15313--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[15323--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[15333--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[15343--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-(2-羟基羰基乙烯基)胞嘧啶，[15353--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-苯基胞嘧啶，[15363--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-5-苄基胞嘧啶，[15373--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-2-氯腺嘌呤，[15383--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-6-氯嘌呤，[15393--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-2，6_ 二氯嘌呤，[15403--o-甲磺酰基-D-呋喃木禾唐基-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1541]l-(3-0-甲磺酰基-D-呋喃木糖基)_2_乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，1-(3-0-甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-6-甲氧基嘌呤，和1-(3-0-甲磺酰基-D-呋喃木糖基)-6-甲基巯基嘌呤。实施例381-(0_0-呋喃木糖基)-5-氟尿嘧啶将1-(2，3，5-三-0_乙酰基-3-D-呋喃木糖基)-5-氟尿嘧啶(3. 88g,0. Olmol) 与三乙胺(3mL)在甲醇(100mL)中的混合物于室温搅拌过夜。将混合物真空浓缩至干，从 乙醇中结晶残余物，获得了 1-W-D-呋喃木糖基)_5_氟尿嘧啶(2.0g，76%)。该样本的 UV和咕NMR(Me2S0-d6)光谱与产物结构一致。按照类似方法，但是使用相应的2' ,5' -二-0-乙酰基嘧啶和嘌呤碱，制得了下
列木_1型_核苷及其L-对应物[1548]-D-呋喃木11基-5-氯尿嘧啶，[1549]-D-呋喃木11基-5-溴尿嘧啶，[1550]-D-呋喃木11基-5-碘尿嘧啶，[1551]-D-呋喃木11基-5-氰基尿嘧啶，[1552]-D-呋喃木11基-5-乙氧基羰基尿嘧啶，[1553]-D-呋喃木11基-5-氨基羰基尿嘧啶，[1554]-D-呋喃木11基-5-乙酰基尿嘧啶，[1555]-D-呋喃木11基-5-甲基尿嘧啶，[1556]-D-呋喃木11基-5-乙基尿嘧啶，[1557]-D-呋喃木11基-5-正丙基尿嘧啶，[1558]-D-呋喃木11基-5-异丙基尿嘧啶，[1559]-D-呋喃木11基-5-乙烯基尿嘧啶，[1560]-D-呋喃木11基-5-烯丙基尿嘧啶，[1561]-D-呋喃木11基-5-乙炔基尿嘧啶，[1562]-D-呋喃木11基-5-(2-氯乙烯基)尿嘧啶，[1563]-D-呋喃木11基-5-(2-溴乙烯基)尿嘧啶，[1564]-D-呋喃木11基-5-(2-碘乙烯基)尿嘧啶，[1565]-D-呋喃木11基-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1566]-D-呋喃木11基-5-(2-羟基羰基乙烯基)尿嘧啶，[1567]-D-呋喃木11基-5-苯基尿嘧啶，[1568]-D-呋喃木11基-5-苄基尿嘧啶，[1569]-D-呋喃木11基胞嘧啶，[1570]-D-呋喃木11基-5-氟胞嘧啶，[1571]-D-呋喃木11基-5-氯胞嘧啶，[1572]-D-呋喃木11基-5-溴胞嘧啶，[1573]-D-呋喃木11基-5-碘胞嘧啶，[1574]-D-呋喃木11基-5-氰基胞嘧啶，[1575]-D-呋喃木11基-5-乙氧基羰基胞嘧啶，[1576]-D-呋喃木|唐基)-5-氨基羰基胞嘧啶，[1577]D-呋喃木糖卜基)_5-乙酰基胞嘧啶，[1578]-D-呋喃木|唐基)-5-甲基胞嘧啶，[1579]-D-呋喃木|唐基)-5-乙基胞嘧啶，[1580]-D-呋喃木|唐基)-5-正丙基胞嘧啶，[1581]-D-呋喃木|唐基)-5-异丙基胞嘧啶，[1582]-D-呋喃木|唐基)-5-乙烯基胞嘧啶，[1583]-D-呋喃木|唐基)-5-烯丙基胞嘧啶，[1584]-D-呋喃木|唐基)-5-乙炔基胞嘧啶，[1585]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-氯乙烯基)胞嘧啶，[1586]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-溴乙烯基)胞嘧啶，[1587]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-碘乙烯基)胞嘧啶，[1588]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1589]-D-呋喃木|唐基)-5-(2-羟基羰基乙烯基)胞嘧啶，[1590]-D-呋喃木|唐基)-5-苯基胞嘧啶，[1591]-D-呋喃木|唐基)-5-苄基胞嘧啶，[1592]-D-呋喃木|唐基)-2-氯腺嘌呤，[1593]-D-呋喃木|唐基)-6-氯嘌呤，[1594]-D-呋喃木|唐基)-2，6-二氯嘌呤，[1595]-D-呋喃木|唐基)-2-乙酰氨基-6-氯嘌呤，[1596]-D-呋喃木|唐基)-2-乙酰氨基-6-甲氧基嘌呤，[1597]-D-呋喃木|唐基)-6-甲氧基嘌呤，和[1598]-D-呋喃木|唐基)-6-甲基巯基嘌呤。[1599]实施例39[1600]2' ,3’ -0-亚异丙基--5' -0-三苯基甲基-N4-羟基胞苷[1601]在 0 °C，向 2 ‘，3‘-0--亚异丙基-5-0-三苯基甲基尿苷(lg)在50mL腈和三乙胺(0.76g)内的搅拌着的溶液中加入2，4，6_三异丙基苯磺酰氯(1.
DMAP(232mg)，将该反应混合物在室温搅拌1天。然后加入羟基胺盐酸盐(263mg)，并将该 混合物在室温再搅拌1天。通过加入水来中止该反应，用氯仿(200mL)萃取产物。将有机 层用盐水洗涤，用MgS04干燥，并真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化残余物(5% MeOH在CHC13 中的混合物)，获得了 2'，3' -0-亚异丙基-5' -0-三苯甲基-N4-羟基-胞苷(723mg， 70%)，为白色固体。Mp :99-101oCo匪R(CDC13) S 1. 34(s，3H)，1. 56(s，3H)， 3. 40-3. 73 (m, 2H)，4. 26 (br s, 1H)，4. 79-4. 81 (m, 2H)，5. 34 (d, J = 8. 12Hz, 1H)，5. 88 (br s, 1H)，6. 88m (d, J = 8. 12Hz，lH)，7. 22-7. 41 (m, 15H).按照类似方法，但是使用相应的5-取代的尿嘧啶核苷，合成了下列N4-羟基-2'， 3' -0-亚异丙基-5' -0-三苯基甲基胞苷衍生物2' ,3' -0-亚异丙基-5' -0-三苯基甲基-5-氟-N4-羟基胞苷，2' ,3' -0-亚异丙基-5' -0-三苯基甲基-5-氯-N4-羟基胞苷，[1606]2'，3'-0-亚异丙基-5'-0-i三苯基甲基-5--溴-N4-羟基胞苷，[1607]2'，3'-0-亚异丙基-5'-0-i三苯基甲基-5--碘-N4-羟基胞苷，[1608]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--甲基-N4-羟基胞苷，[1609]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--乙基-N4-羟基胞苷，[1610]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--正丙基-N4-羟基胞苷，[1611]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5-_异丙基-N4-羟基胞苷，[1612]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--乙烯基-N4-羟基胞苷，[1613]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5-_乙炔基-N4-羟基胞苷，[1614]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--(2-氯乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1615]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--(2-溴乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1616]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--(2-碘乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1617]2'，3'-0-亚异丙基_-5'-o-三三苯基甲基--5-(2-甲氧基羰基乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1618]2'，3'-0-亚异丙基_-5'-o-三三苯基甲基--5-(2-羟基羰基乙烯基)-N4-羟基胞甘， [1619]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--苯基-N4-羟基胞苷，和[1620]2'，3'-0-亚异丙基-5'-o-i三苯基甲基-5--苄基-N4-羟基胞苷。 按照类似方法，但是使用相应的5-取代的2'，5' -二-0-乙酰基-3'-脱氧尿
苷，合成了下列N4-羟基-2' ，5'-二 -0--乙酰基-3'-脱氧胞苷衍生物[1622]1-(2，5-—二 -0-乙酰基-3--脱氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-N4-羟基胞嘧啶，[1623]1-(2，5-—二 -0-乙酰基-3--脱氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-5-氟-N4-羟基胞嘧啶，[1624]1-(2，5-—二 -0-乙酰基-3--脱氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-5-氯-N4-羟基胞嘧啶，[1625]1-(2，5-—二 -0-乙酰基-3--脱氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-5-溴-N4-羟基胞嘧啶，[1626]1-(2，5-—二 -0-乙酰基-3--脱氧-D-赤呋喃戊)|唐基)-5-碘-N4-羟基胞嘧啶，[1627]1-(2，5-—二-0-乙酰基--3-脱氧_D-赤呋喃戊_〖基)_5_氰基-N4-羟基胞嘧啶，[1628]1-(2，5-—二-0-乙酰基-3--脱氧_-D-赤呋喃戊|1基)-5_乙氧基羰基-N4-羟基
胞嘧啶，
嘧啶，
啶，
啶，
啶，
啶，
-(2,5-
-(2,5-
-(2,5-. -(2,5-. -(2,5-
-(2,5-
-(2,5-
.-0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-氨基羰基-N4-羟基胞
.-0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙酰基-N4-羟基胞嘧
-0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-甲基-N4-羟基胞嘧啶， -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙基-N4-羟基胞嘧啶， .-0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-正丙基-N4-羟基胞嘧
.-0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-异丙基-N4-羟基胞嘧
.-0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)-5-乙烯基-N4-羟基胞嘧
149[1636]1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_烯丙基-N4-羟基胞嘧 啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_乙炔基-N4-羟基胞嘧 啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2-氯乙烯基)-N4-羟 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2-溴乙烯基)-N4-羟 基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2-碘乙烯基)-N4-羟 基胞嘧啶，1-(2，5_ 二-0-乙酰基-3-脱氧-3-D-赤呋喃戊糖基)-5-(2-甲氧基羰基乙烯 基)-N4-羟基胞嘧啶，1- (2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧_ 0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_ (2_羟基羰基乙烯 基)-N4-羟基胞嘧啶，1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_苯基-N4-羟基胞嘧啶， 和1-(2，5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-0 -D-赤呋喃戊糖基)_5_苄基-N4-羟基胞嘧啶，按照类似方法，但是使用相应的5-取代的3'，5' -二-0-乙酰基-2'-脱氧尿
苷，合成了下列N4--羟基-3' ,5'-0-乙酰基-N4-羟基-2'-脱氧胞苷衍生物[1646]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-N4--羟基胞苷，[1647]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-氟-N4-羟基胞苷，[1648]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-氯-N4-羟基胞苷，[1649]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-溴-N4-羟基胞苷，[1650]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-碘-N4-羟基胞嘧啶，[1651]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-氰基-N4-羟基胞苷，[1652]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-乙氧基羰基-N4-羟基胞苷，[1653]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-氨基羰基-N4-羟基胞苷，[1654]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-乙酰基-N4-羟基胞苷，[1655]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-甲基-N4-羟基胞苷，[1656]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-乙基-N4-羟基胞嘧啶，[1657]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-正丙基-N4-羟基胞苷，[1658]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-异丙基-N4-羟基胞苷，[1659]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-乙烯基-N4-羟基胞苷，[1660]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-烯丙基-N4-羟基胞苷，[1661]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-乙炔基-N4-羟基胞苷，[1662]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-(2-氯乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1663]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-(2-溴乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1664]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-(2-碘乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1665]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_N4-羟基胞苷，[1666]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-(2-羟基羰基乙烯基)-N4-羟基胞嘧啶，[1667]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-苯基-N4-羟基胞苷，和[1668]3'，5'-二 -0-乙酰基-2'-脱氧-5-苄基-N4-羟基胞苷。实施例40N4-羟基胞苷将2' ,3' -0-亚异丙基-5' -0-三苯甲基-N4-羟基胞苷(500mg，0. 92mmol)溶 解在50mL三氟乙酸与水(2 1，v/v)的混合物中，将该溶液在50°C搅拌3小时。冷却至 室温后，通过蒸发除去溶剂，与乙醇(3X20mL)共蒸发。通过硅胶色谱柱纯化残余物(20% MeOH在CHC13中的混合物)，获得了 N4-羟基胞苷(215mg)，为白色固体，将其从热的乙醇中 重结晶；mp. 173-176°C。NMR (DMS0-d6) 8 3. 66-3. 71 (m, 2H) , 3. 93 (br s, 1H) ,4. 08-4. 15(m,2H), 5. 17-5. 23(m，2H，D20 可交换的)，5. 43 (d，J = 6. 00Hz，lH，D20 可交换的)，5. 73 (d，J = 8. 16Hz, 1H)，5. 90 (d, J = 8. 12Hz, 1H)，7. 28 (d, J = 8. 40Hz, 1H)，9. 65 (s, 1H, D20可交换的)，
0. 15(s，lH，D20 可交换的)
1673]元素分析:C9H13N306 的计算值:C,41. 70 ；H,5. 05 ；N, 16. 21.实测值:C，41. 85 ；H, 14；N,16. 34。
亚异丙基-5-0-三苯基甲按照类似方法，但是使用相应的5-取代的2' ,3'-基-N4-羟基胞苷核苷，合成了下列N4-羟基-5-取代的胞苷[1675]5-氟-N4-羟基胞苷，[1676]5-氯-N4-羟基胞苷，[1677]5-溴-N4-羟基胞苷，[1678]5-碘-N4-羟基胞苷，[1679]5-甲基-N4-羟基胞苷，[1680]5-乙基-N4-羟基胞苷，[1681]5-正丙基-N4-羟基胞苷，[1682]5-异丙基-N4-羟基胞苷，[1683]5-乙烯基-N4-羟基胞苷，[1684]5-乙炔基-N4-羟基胞苷，[1685]5-(2-氯乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1686]5-(2-溴乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1687]5-(2-碘乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1688]5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_N4-羟基胞苷，[1689]5-(2-羟基羰基乙烯基)-N4-羟基胞苷，[1690]5-苯基-N4-羟基胞苷，和[1691]5-苄基-N4-羟基胞苷。[1692]按照类似方法，但是使用氨的甲醇溶液代替三氟乙
-(2,5- 二 -0-乙酰基-3-脱氧-D-赤呋喃戊糖基)-N4-羟基胞嘧啶核苷，合成了下列 N4-羟基-5-取代的3'-脱氧胞苷 [1693] 5-氟-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，[1694]5-氯-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5-溴-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5-碘-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5-甲基-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5-乙基-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5-正丙基-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5-异丙基-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5-乙烯基-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5-乙炔基-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5- (2-氯乙烯基)-3 ‘-脱氧-N4-羟基胞苷，5- (2-溴乙烯基)-3 ‘-脱氧-N4-羟基胞苷，5- (2-碘乙烯基)-3 ‘-脱氧-N4-羟基胞苷，5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_3'-脱氧-N4-羟基胞苷，5- (2-羟基羰基乙烯基)_3 ‘-脱氧-N4-羟基胞苷，5-苯基-3'-脱氧-N4-羟基胞苷，和5-苄基-3'-脱氧-N4-羟基胞苷。按照类似方法，但是使用氨的甲醇溶液代替三氟乙酸，并使用相应的5-取代的 3' ,5'-二-0-乙酰基-2'-脱氧-N4-羟基胞嘧啶核苷，合成了下列N4-羟基-5-取代
的2'“脱氧胞苷[1711]5-氟-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，[1712]5-氯-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，[1713]5-溴-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，[1714]5-碘-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，[1715]5-甲基-2_脱氧--N4-羟基胞苷，[1716]5-乙基-2_脱氧--N4-羟基胞苷，
1717]5-正丙基-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，
1718]5-异丙基-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，
1719]5-乙烯基-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，
1720]5-乙炔基-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，
1721]5_(2_氯乙烯基)_2'-脱氧-N4-羟基胞苷，
1722]5_(2_溴乙烯基)_2'-脱氧-N4-羟基胞苷，
1723]5_(2_碘乙烯基)_2'-脱氧-N4-羟基胞苷，
1724]5-(2-甲氧基羰基乙烯基)_2'-脱氧-N4-羟基胞苷，
1725]5-(2-羟基羰基乙烯基)_2 ‘-脱氧-N4-羟基胞苷，
1726]5-苯基-2'-脱氧-N4-羟基胞苷，和
1727]5-苄基-2 ‘-脱氧-N4-羟基胞苷。
1728]实施例41
1729]2,3'-脱水-1-(2-脱氧-2-氟-5-0-三苯甲基-3-D-呋喃来苏糖基)胸腺嘧 啶(194，R = Tr)[1730]将1-(2_脱氧-2-氟-3-0-甲磺酰基-5-0-三苯基甲基-0 -D-阿拉伯呋喃糖基) 胸腺嘧啶(193，R = Tr，6. 0g)和DBU(3. OmL)在二氯甲烷(50mL)中的溶液加热回流16小 时。将该混合物真空浓缩后，在硅胶柱上对残余物进行色谱纯化，用氯仿洗脱，从甲醇中重 结晶后，获得了 4.4g 2，3'-脱水-1-(2'-脱氧-2'-氟-5-0-三苯甲基-3-D-呋喃来 苏糖基)胸腺嘧啶(194，R = Tr)，mp 252_255°C。NMR(DMS0-d6) ； 8 1. 80(s,3H, Me), 4. 61 (1H, m)，5. 40 (dm, 1H)，5. 89 (1H, ddd)，5. 96 (1H, dd, H_1，)，7. 30 (15H, Tr)，7. 66 (s, 1H, H-6).实施例42l-(2，3_ 二脱氧-2 ‘-氟-5' _0_ 三苯甲基-0 _D_ 甘油(glycero)-戊 (pento)-2-烯呋喃糖基(enofuranosyl))-胸腺嘧啶(195，R = Tr)将194(646mg)和t_Bu0K (270mg)在DMSO(lOmL)中的悬浮液于室温搅拌2小时，然 后过滤。将滤液真空浓缩，在硅胶柱上对残余物进行色谱纯化(CHCl3/Me0H，49 1 v/v), 获得了 600mg 195，mp. 176_180°C (从 EtOH 中结晶)。匪R(DMS0-d6) 8 1. 27(s,3H, Me), 3. 21(m,2H, H-5，5”)，4. 98(m，1H，H_4，)，6. 17 (t, 1H, H_l，，Jl，，2，= Jl，，F = 1. 5Hz)，6. 81 (m，1H， H-3，) ,7. 32 (m, 16H, H-6, Tr)，11. 52 (s, 1H, NH 可交换的)，实施例43l-(2，3- 二脱氧-2-氟-D-甘油_2_烯呋喃糖基)胸腺嘧啶(196)将195(600mg)在80%乙酸水溶液(10mL)中的溶液加热回流20分钟，然后真空浓 缩至干。在硅胶柱上对残余物进行色谱纯化(CHCl3/Me0H，9 1 v/v)，获得了 100mg 196， mp 154-159°C (从 Et0H_H20 中结晶)。匪R(DMS0-d6) S 1.76(s，3H，Me)，3. 61(m，2H，H-5，，5”)， 4. 79 (m, 1H, H-4，)，5. 15 (t，1H，5，_0H，可交换的)，5. 99 (m, 1H, H_l，) ,6. 76 (m, 1H, H_3，)， 7. 88 (s, 1H, H-6)，11. 43 (s，1H, NH,可交换的) 实施例44(15，25，3札41 )-4-(叔丁氧基甲基)-2，3-(亚异丙二氧基)环戊+醇(219)在0°C，向 4_(叔丁氧基甲基)环戊烷-2，3_ 二醇(218, 5g)和 CeCl3 *7H20(7. 69g) 在甲醇(80mL)内的溶液中加入NaBH4(1.01g)，并将该混合物在0°C搅拌1小时。通过加 入冷水来中止该反应，用乙酸乙酯(2X300mL)萃取。将合并的有机萃取液用盐水洗涤 (2X200mL)，用硫酸钠干燥，然后真空浓缩。在硅胶柱上对残余物进行色谱纯化(30%乙酸 乙酯在正己烷中的混合物)，获得了 219(4. 8g,95% )，为浆状物。'H-NMR(CDC13) 6 1. 13(s，9H，t_Bu)，1. 34(s，3H，Me)，1. 48(s，3H，Me)， 1. 83(m，2H，5a，b_H)，2. 19 (m，1H，4_H)，2. 44(d, 0H，可交换的)，3. 20 (dd, J = 4. 5,8. 8Hz, 1H, 6a-H)，3. 31 (dd, J = 4. 5，8. 8Hz，1H, 6b_H)，4. 23 (m, 1H, 1_H)，4. 44 (m, 2H, 2_H，3_H).元素分析:C13H2404的计算值C，63. 91 ；H，9. 90。实测值C，64. 09 ；H，9. 87。实施例45(IS, 2S，3R，4R) ~4~ (叔丁氧基甲基)_2，3_ (亚异丙二氧基)甲磺酰氧基环戊烷 (220)[1747]在0°C，向219(6. 50g)和三乙胺(7. 3g)在二氯甲烷(170mL)内的溶液中滴加甲磺 酰氯(4. 73g)。45分钟后，加入水(270mL)。用二氯甲烷(3X200mL)萃取水层。合并有机 相，用盐水(2X200mL)洗涤，用硫酸钠干燥，并真空浓缩，获得了粗产物220，其纯度足以直 接用于下一步骤。实施例46(1R，2S，3R，4R)-1-叠氮基_4-(叔丁氧基甲基)-2，3_(亚异丙二氧基)环戊烷 (221)将上面获得的220与叠氮化钠(17. 3g)在DMF(300mL)中的混合物在140°C搅拌下 加热过夜。将该混合物过滤，将滤液真空浓缩。将残余物在乙酸乙酯(150mL)与水(50mL) 之间分配。用硫酸钠干燥有机层，真空浓缩，在硅胶柱上对残余物进行色谱纯化(1-4%梯度 的乙酸乙酯在正己烷中的混合物)，获得了 221 (5. 9g)，为油状物。NMR(CDC13) 6 1. 18(s，9H，t_Bu)，1. 30(s，3H，Me)，1. 46 (s, 3H, Me)，1. 71 (m, 1H，5a_H)，2. 29 (m，2H，4_H，5b_H)，3. 29 (dd, J = 6. 7,8. 8Hz, lH，6a_H)，
3.37 (dd, J = 7. 0,8. 8Hz, lH，6b_H)，3. 96 (m, 1H, 1_H)，4. 40 (dd, J = 2. 3,6. 1Hz, 1H，3_H)，
4.48 (dd, J = 2. 0,6. 1Hz, 1H，2_H) 元素分析:C13H23N303 0. 13Et0Ac 的计算值C，57. 95 ；H，8. 65，N，14. 99.实测值 C，58. 25 ；H，8. 71 ；N, 14. 76。实施例47(1札25，3札41 )-4-(叔丁氧基甲基)-2，3-(亚异丙二氧基)-1-环戊基胺(222)将221 (4. Og)与10% Pd/C(l. Og)在无水乙醇(140mL)中的悬浮液于20psi的H2 下振摇5小时。将该混合物过滤，将滤液真空浓缩，获得了粗产物222(3. 6g，定量产率)，其 不用进一步纯化直接用于下一步骤。匪 R(CDC13) 8 1. 18(s,9H, t_Bu)，1. 28 (s，3H，Me)， 1. 36 (m, lH，5a-H)，1. 45(s，3H，Me)，1. 89 (br s，2H，NH2)，2. 24-2. 36 (m，2H，4_H，5b_H)， 3. 34-3. 43(m，3H，1-H，6a，b_H)，4. 21 (dd，J = 2. 6，6. 2Hz，1H，3_H)，4. 48 (dd，J = 2.8， 6. 2Hz,1H,2-H).元素分析:C13H26N03 0. 16H20 的计算值:C，63. 41 ；H, 10. 37，N, 5. 69.实测值C， 63. 09 ；H, 10. 16 ；N，5. 59。实施例48N-{[lR，2S，3R，4R)-4_(叔丁氧基甲基)-2，3_(亚异丙二氧基)环戊基]氨基羰 基]-3-甲氧基-2-丙烯酰胺(223)将氰酸银(7. 60g，用五氧化二磷在黑暗中于100°C真空干燥3小时)、3 -甲氧基 丙烯酰氯(2. 64g)在无水苯(30mL)中的混合物加热回流30分钟，然后冷却至室温。沉淀沉 降后，在-15至_20°C、氮气氛下，用15分钟将含有0 -甲氧基丙烯酰基异氰酸酯的22. 5mL 上清液加到222(3. Og)在无水DMF(50mL)内的溶液中。在氮气氛下，将该混合物在_15°C搅 拌2小时，然后在室温搅拌10小时以上。真空浓缩并与甲苯(2X20mL)共蒸发，产物223 固化(4. Og)。屮腿_13) 8 1. 17(s，9H，t-Bu)，1. 28(s，3H，Me)，1. 47(s，3H，Me)，1. 58 (m, 1H，5，a_H)，2. 28 (m, 1H,4-H), 2. 36-2. 43 (m, 1H，5，b_H)，3. 33-3. 42(m，2H，6，a, b_H)，3. 73(s，3H，OMe)，4. 20 (m, 1H, 3，-H)，4. 45(m，2H，1，_H，2，_H)，5. 35 (d, J = 12. 3Hz, 1H，5_H)，7. 67 (d, J = 12. 3Hz, 1H, 6-H)，8. 72 (br s, 1H, NH)，9. 35 (br s, 1H, NH).元素分析:C18H30N206的计算值C，58. 36 ；H，8. 16，N, 7. 56.实测值C，58. 28 ；H, 8. 16 ；N，7. 60。实施例49(1 ‘ R,2' S,3' R,4' R)-1_[4_ (叔丁氧基甲基)_2，3_ 亚异丙 二氧基)环 戊-1-基]尿嘧啶(5‘-叔丁基-2' ,3' -0-亚异丙基-carba-尿苷，224)将223(4. 2g)在乙醇(25mL)和氢氧化铵(30%，llmL)中的溶液在不锈钢弹中于 100°C加热12小时。除去溶剂后，在硅胶柱上对残余物进行色谱纯化(乙酸乙酯-正己烧， 1 1 v/v)，获得了 224 (3.21 g)，为白色泡沫状物。匪R(CDC13) 8 1. 19(s，9H，t_Bu)， 1.30(s，3H，Me)，1. 54(s，3H，Me)，1. 97 (m，1H，5，a_H)，2. 32-2. 41 (m，2H，4，_H，5，b_H)， 3. 43-3. 50 (m, 2H，6，a，b_H)，4. 48 (dd，J = 4. 1，6. 5Hz，1H，3，_H)，4. 65-4. 75 (m, 2H, 1，_H， 2，-H), 5. 72 (d, J = 8. 0Hz, 1H，5_H)，7. 35 (d, J = 8. 0Hz, 1H，6_H)，8. 63 (br s, 1H, NH).元素分析:C17H26N205的计算值:C,60. 34 ；H，7. 74，N，8. 28.实测值:C，60. 06 ；H, 7. 70 ；N，8. 14。实施例50(1 ‘ R,2' S,3' R,4' R)-1_[4_ (叔丁氧基甲基)_2，3_ 亚异丙 二氧基)环 戊-1-基]-5-氟尿嘧啶(5‘ -0-叔丁基-2' ,3' -0-亚异丙基-carba-5-氟尿苷，225)在室温向224(2. 50g)在乙酸(600mL)内的溶液中小心地鼓入含有5%氟的氟-氮 混合物30分钟。将该混合物搅拌直至在TLC板上不能检测到任何UV吸收。真空除去溶 剂，将残余物与乙酸(20mL)共蒸发至干燥。在50°C用三乙胺将残余物处理1.5小时，然 后真空浓缩至干。通过硅胶柱色谱纯化残余物(乙酸乙酯-正己烷，1 1 v/v)，获得了 225(1.31g)，为白色泡沫状物。匪R(CDC13) 8 1.22(s，9H，t_Bu)，1. 31 (s，3H，Me)，1. 55 (s，3H，Me)，1. 85 (m，1H， 5，a-H), 2. 38-2. 51(m，2H，4，_H，5，b_H)，3. 44—3. 52(m，2H，6，a, b_H)，4. 47 (dd，J = 3. 4，
6.2Hz，1H，3，-H)，4. 58(t，J = 6. 0Hz，1H，1，_H)，4. 87 (dd，J = 8. 9，14. 5Hz，1H，2，_H)，
7.61 (d, J = 6. 1Hz, 1H,6-H) ,8. 77 (br s，lH，NH).元素分析:C17H25FN205 0. 25H20 的计算值:C，56. 58 ；H,7. 12，N, 7. 76.实测值C， 56. 20 ；H，7. 02 ；N, 7. 50。实施例51(1 ‘ R,2' S,3' R,4' R)-1_[4_ (叔丁氧基甲基)_2，3_ 亚异丙 二氧基)环 戊-1-基]-5-氟胞嘧啶(226). (5 ‘ -0-叔丁基-2'，3' -0-亚异丙基-carba-5-氟胞 苷)将225(350mg)、三乙胺(190mg)、2，4，6_三异丙基苯磺酰氯(590mg)和 DMAP(230mg)在乙腈(50mL)中的混合物在室温搅拌1天。加入氢氧化铵溶液(30%，15mL)， 将该混合物再搅拌5小时。通过加入氯仿(250mL)和水(10mL)来中止该反应。用盐水洗 涤有机层，用硫酸钠干燥，并真空浓缩。通过硅胶柱色谱纯化残余物(5%Me0H在01(13中的混合物，v/v)，获得了 226 (205mg)，mp 128_130°C。UV(MeOH)入 max 286. 5nm. 1HNMR(CDC13) 8 1. 19(s,9H, t_Bu)，1. 29 (s，3H，Me)， 1. 53(s，3H，Me)，2. 02 (dt, J = 10. 2，12. 8Hz, 1H，5，a_H)，2. 32 (m, 1H，4，_H)，2. 42 (dt, J = 8. 0，12. 7Hz, 1H，5，b_H)，3. 42 (dd, J = 6. 1,8. 7Hz, 1H，6，a_H)，3. 52 (dd, J = 4. 1,8. 8Hz, 1H，6，b-H)，4. 49(dd，J = 5. 1，6. 3Hz，1H，3，_H)，4. 60 (m，1H，1，_H)，4. 79 (dd，J = 5.0，
6.4Hz，1H，2，-H)，7. 49(d，J = 6.1Hz，1H，6-H). HR-FAB MS Obsd ；m/z 356.1981.Calcdfor C17H26FN304 :m/z 356. 1986(M+1)+.实施例52(1' R，2' S，3' R，4' R) _1_[2，3_ 二羟基 _4_(羟基甲基)环戊 基]_5_ 氟 胞嘧啶(carba-5-氟胞苷，227)将226 (180mg)在三氟乙酸与水的混合物2 1 (v/v) (40mL)中的溶液在50°C搅拌 3小时。真空除去溶剂，将残余物与乙醇(2X30mL)共蒸发，在硅胶柱上纯化(MeOH_CHCl3， 1 5 v/v)，获得了 227 (47. 5mg)，为泡沫状物。UV (H20)入 max 284nm (e5，876，pH7)， 293. 5nm( e 7，440，pH2)，2845nm( e 5，883，pHll). 匪R(DMS0_d6) 8 1. 19 (m, 1H，5，a_H)， 1. 92 (m, 1H，4，a-H), 2. 00 (ddd, J = 8. 3,8. 7，12. 5Hz, 1H，5，b_H)，3. 42(m，2H，6，ab_H)，
3.70(dd, J = 2. 9,5. 3Hz, lH，3，b_H)，3. 98(dd, J = 5. 2,9. 0Hz, 1H，2，_H)，4. 10(d, J = 4. 5， 1H, 0H，可交换的)，4. 51(br s，1H，0H，可交换的)，4. 60 (dd，J = 9. 0，18. 2Hz，1H，1，_H)，
4.73 (d，J = 6. 1Hz，1H，0H，可交换的)，7. 33 (bs，1H，可交换的)，7. 55 (bs，1H，可交换的)，
7.98 (d, J = 7. 3Hz，1H，6-H). HR-FAB MSObsd ；m/z 260. 1054. Calcd for C17H26FN304 :m/z 260. 1047(M+1)+.按照类似方法，但是使用相应的5-取代的衍生物，制得了下列5-取代的 carba- ^"^f 5- it -carba-5-溴-carba-尿苷，5-碘-carba-尿苷，5-氰基-carba-尿苷，cara-尿苷 _5_ 甲酸，5-乙氧基羰基-carba-尿苷，carba-尿苷 _5_ 甲酰胺，5-羟基甲基-carba-尿苷，5-硝基-carba-尿苷， [1791 ] 5-氨基-carba-尿苷，5-氯-carba-胞苷，5-溴-carba-胞苷，5-碘-carba-胞苷，5-氰基-carba-胞苷，cara-胞苷 _5_ 甲酸，5-乙氧基羰基-carba-胞苷，[1798]carba-胞苷 _5_ 甲酰胺，5-羟基甲基-carba-胞苷，5-硝基-carba-胞苷，和5-氨基-carba-胞苷。XI.牛物学方法本发明还提供了使用实时逆转录聚合酶链反应(“Q-RT-PCR”)来定量测定宿主中 病毒负载量的一种有效方法。该方法包括使用可杂交到靶病毒DNA或RNA上的猝灭荧光探 针分子。经过核酸外切降解，可监测可检测的荧光信号。因此，使用该技术，通过监测荧光 信号的存在可实时探测RT-PCR扩增的DNA或RNA。在一个具体的本发明实施方案中，提供了 RT-PCR在定量测定黄病毒科病毒的病 毒负载量中的应用。在一个更具体的本发明实施方案中，提供了 RT-PCR在定量测定MDBK细胞系或宿 主样本中BVDV的病毒负载量中的应用。在另一个本发明实施方案中，提供了设计成经过核酸外切降解发出荧光并与BVDV NADL NS5B区域互补的探针分子。在一个更具体的本发明实施方案中，提供了探针分子，所述探针分子具有序列5 ‘ 6-fam-AMTCCTCCTAACAAGCGGGTTCCAGG-tamara-3' (Sequence ID No 1)，和引物，所述引物 具有正义序列5' -AGCCTTCAGTTTCTTGCTGATGT-3‘ (Sequence ID No 2)和反义序列5' -TGTTGCGAAAGCACCAACAG-3‘ (Sequence ID No 3)。在一个具体的本发明实施方案中，提供了 RT-PCR在实时定量测定宿主衍生样本 或细胞系中的HCV的病毒负载量中的应用。在一个具体的本发明实施方案中，提供了 RT-PCR的应用，设计成经过核酸外切降 解发出荧光并与HCV基因组互补的探针分子。在一个更具体的本发明实施方案中，提供了 RT-PCR的应用，设计成经过核酸外切 降解发出荧光并与HCV 5'-未翻译区域互补的探针分子。在一个更具体的本发明实施方案中，提供了探针分子，所述探针分子具有序列5 ‘ 6-fam-CCTCCAGGACCCCCCCTCCC-tamara-3‘ (SequenceID No 4)，和引物，所述引物具有正义 序列5' -AGCCATGGCGTTAGTA(T/C)GAGTGT-3‘ (Sequence ID No 5)和反义序列5‘ -TTC CGCAGACCACTATGG-3‘ (Sequence ID No 6)。A. RNA分离和定量RT-PCR分析本发明提供了称为实时聚合酶链反应(“RT-PCR”)的定量测定宿主中病毒负载 量的有效方法。该方法包括使用可杂交到病毒DNA或RNA上的猝灭荧光探针分子。因此， 经过核酸外切降解，可监测可检测的荧光信号。因此，通过监测荧光信号的存在可实时探测 RT-PCR 扩增的 DNA 或 RNA。作为该方法的一个实例，对于MDBK细胞中的BVDV，在第一个步骤中，通过市售柱 (Viral RNA extraction kit，QiaGen，CA)从140 ii L细胞培养物上清液中分离出病毒RNA。 然后将病毒RNA从柱上洗脱下来以获得60 y L的总体积，然后通过使用适于BVDV NADL株 的引物的定量RT-PCR方法扩增。将猝灭荧光探针分子杂交到BVDV DNA上，之后经过核酸 外切降解，生成可检测到的荧光信号。因此，通过监测荧光信号的存在来实时探测RT-PCR扩增的 DNA。借助于来 Primer Express 软件(PE-Applied Biosystems)来设计 Ta#an 探 针分子(5' -6-fam-AAATCCTCCTAACAAGCGGGTTCCAGG-tamara 3' [Sequence ID No 1]和 引物(正义5' -AGCCTTCAGTTTCTTGCTGATGT-3‘ [Sequence ID No 2]；和反义5' -TGT TGCGAAAGCACCAACAG-3' [Sequence ID No 3])以与 BVDVNADL NS5B 区域互补。在 50 ii L RT-PCR混合物中分析总共10 ii L RNA。用于定量测定PCR的试剂和条件购自PE Applied Biosystems。使用浓度为6000噬斑形成单位(PFU) -0. 6PFU/份RT-PCR混合物的未稀释接 种病毒来产生标准曲线。通常获得超过4-log的线性范围。可采用比较方法来测定其它黄病毒科病毒(主要是HCV、YFV、登革热病毒、西尼罗 河病毒等)在临床样本或组织培养样本中的量。例如，HCV RNA纯化与使用下述引物(5' -TTCCGCAGACCACTATGG-3‘ [Sequence ID No. 4]和5' -AGCCATGGCGTTAGTATGAGTGT-3‘ [Se quencelD No. 5])和探针(5' -6-fam-CCTCCAGGACCCCCCCTCCC-tamara-3' [Sequence ID No. 6])的实时RT-PCR的组合可获得7-log线性范围的病毒负载量检测。B.细胞/病毒材料其特征被最好地确定的一个瘟病毒属成员是BVDV。BVDV与HCV具有至少3个下 列所述的共有特征⑴它们都经历IRES-介导的翻译；⑵NS4A辅因子是其NS3丝氨酸蛋 白酶所必需的；(3)它们经历在非结构区域，尤其是在NS5A和NS5B接合位点的类似多蛋白加工。使用BVDV复制系统来发现抗黄病毒科化合物。本发明所述化合物具有抗瘟病毒 属、H印aciviruse和/或黄病毒属的活性。将Mai din-Darby牛肾(MDBK)细胞在补充10%热灭活马血清的改进的eagle培养 基(DMEM/F12 ；GibcoBRL)中于37°C在湿润的5% C02培养箱中生长和保持。牛病毒性腹泻病毒(BVDV)株NADL在感染这些细胞后引起致细胞病变作用(CPE)。C.抗病毒测定使用胰蛋白酶-EDTA，通过标准技术分离出在DMEM/F12_10%马血清(HS)中生长 的MDBK细胞。将细胞以5X104个细胞/孔的浓度与测试化合物(20微摩尔(y M)浓度)接 种到96-孔平板中以给出100微升(yL)的总体积。1小时后，除去培养基，将细胞在50 yL 的总体积中以0. 02或0. 002的感染复数(M0I)感染45分钟。然后除去病毒，并用100 u L 测定培养基洗涤2次。最后，将感染的细胞以含有浓度为10、40或lOOyM的测试化合物的 100 yL总体积接种。22小时后，通过经由低速离心除去细胞碎屑来收集细胞上清液，然后 以定量方式测定病毒的存在。D.测试抗黄病毒科化合物的细胞毒件该实施例所进行的细胞毒性测试是标准技术。简言之，在递增浓度的测试化合物 (0、1、3、10、33和100 iiM)存在下，将细胞以不同浓度(取决于细胞类型、测定持续时间)， 典型地是以5 X 103个细胞/孔的浓度接种到96-孔平板中。培养3天后，通过加入MTS-染 料(Promega)，然后培养3小时来测定细胞存活力和线粒体活动。然后在490nm读取含有染 料的平板。制造商(Promega)很好地描述并提供了这样的操作方法。实施例53BVDV RT-PCR定量标准曲线如通过常规噬斑分析(Mendez，E.等人.J. Virol. 1998，72，4737)所测定的那样，
158标准BVDV病毒贮备液含有2 X 106PFU/mL。从140 ii L该接种材料中提取病毒RNA，使用60 ii L 洗脱缓冲液洗脱。然后将该纯化的RNA材料从10—1逐步稀释到10_5。使用实时RT-PCR扩 增技术，测试10 y L每一稀释液。该连续稀释的结果在附图1中绘图表示，该图将PFU与标 准物的浓度联系起来。从该实验可以清楚地看出，该技术给出了超过4-log的病毒可靠定 量测定(在扩增混合物中从6000至0. 6PFU/输入)。在该实验中，检测的下限是0. 6PFU 或-0.221og PFU。因此，低于该检测限的测试样本的实时RT-PCR定量测定值视为不可靠。实施例54MDBK细胞中的BVDV复制周期为了测定MDBK细胞中的BVDV产生以及测定在一定时间内的最近收获时间，将细 胞以5X104个细胞/孔的浓度接种，并以M0I = 0.02或M0I = 0.002接种。感染后，除去 接种物，并用培养基将细胞洗涤2次。在不同时间点收获细胞上清液；测定病毒的量，并与 初始接种物和细胞洗涤液比较。如附图2所示，至少需要2个洗涤步骤来除去接种的病毒。 感染22小时后所产生的病毒的量大约等于接种细胞所用的病毒的量。根据这些结果，MDBK 细胞中一个BVDV复制周期为22小时。注意，在这些实验中设定的检测水平是基于通过标 准曲线确定的检测下限。实施例55使用RT-PCR评价抗病毒化合物将MDBK细胞以5 X104个细胞/孔的浓度接种，用BVDV以0.02的感染复数(M0I) 感染，并在测试化合物存在下生长22小时。将未用测试化合物处理的细胞作为阴性对照， 利巴韦林用作阳性对照。提取病毒RNA，并通过实时RT-PCR进行分析。附图3所示的典型 实验证实了阴性对照和大部分处理的细胞产生了相差不大的病毒(1. 5-21ogPFU/输入)， 这有效地表明了测试化合物是没有活性的。然而，用阳性对照利巴韦林(RIB)或用5-羟基 尿苷(0-D-CL)处理的细胞表现出几乎完全不存在病毒RNA。在22小时的繁殖期间，RIB 和3-D-CL将病毒产量减少了大约21og PFU或99%。从该种实验中不能推断出这些化合 物的精确效力，因为该实验中的检测限设定为-0. 221og PFU，并且在所述实验条件下仅进 行了一个病毒复制周期。在一组类似实验中，加大测试化合物的浓度范围(0、1、3、10、33、10011|1)，来测定 抗BVDV化合物的效力或者将病毒产量抑制50%或90%时化合物的有效浓度(分别是EC5Q 或EC9(1值)。EC9(1值是指在22小时期间内获得病毒产量的1-log减少所必需的浓度。表 21列出了表现出有效抗病毒活性的化合物。该表给出了在感染22小时后以给定浓度观察 到的最大病毒负载量减少。表21 感染22小时后的BVDV病毒负载量
159[1836] 实施例56测定抗病毒活性的另一细胞培养系统可通过改变细胞系统和病毒病原体来使上述测定适于黄病毒科的其它成员。测 定这些抗病毒化合物的效力的方法包括如在下列文献中描述的标准技术的改进形式 Holbrook, MR 等人.Virus Res. 2000,69 (1) ,31 ；Markland, ff 等人.Antimicrob. Afients. Chemother. 2000,44 (4)，859 ；Diamond, MS 等人，J. Virol. 2000，74 (17)，7814 Jordan,I.等人，T. Infect. Pis. 2000,182，1214 :Sreenivasan, V.等人.T. Virol. Methods 1993， 45(1)，1 ；或 Baginski，SG 等人.Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. .2000，97 (14)，7981，或实时 RT-PCR技术。具体来说，可使用在HuH7细胞中的HCV复制子系统(Lohmarm，V等人Science, 1999，285 (5424)，110)或其改进形式(Rice 等人.2000，abstract Xth International Symposium for ViralHepatitis and Liver Disease, Atlanta, GA) 0实施例57测试候选化合物的细胞毒性该实施例所进行的细胞毒性测试是标准技术。简言之，在递增浓度的测试化合物 (0、1、3、10、33和100 iiM)存在下，将细胞以不同浓度(取决于细胞类型、测定持续时间)， 典型地是以5X 103个细胞/孔的浓度接种到96-孔平板中。培养3天(Vero细胞)、4天 (CEM细胞)或5天(PBM细胞)后，通过加入MTT-染料(Promega)，然后培养8小时来测定 细胞存活力和线粒体活性。之后通过加入停止溶液后再进行8小时培养，来固定含有涂料 的诸板。最后在570nm读取吸收度。制造商(Promega)很好地描述并提供了这样的操作方 法。表22中列出了在该方法中测试的化合物的相关目录。虽然测试化合物一般没有 细胞毒性，但是化合物0 "D-GA表现出对CEM细胞的选择性细胞毒害作用。表22 :V-a和Villa的细胞毒性*
1848]*IC5QiiM(在 lOOiiM 的％抑制)
1849]实施例58
1850]测试候选化合物对呼吸系统病毒的抗病毒作用
1851]在这些实验期间，测试了通式(I)化合物抗感染上呼吸道的一组病毒的抗病毒活 、生。用于这些目的的方法已很好地描述过。下列方案是得自Virology Branch, Division of Microbiology and InfectiousDiseases, NIAID, NIH 的标准操作方法。
1852]A.用于初次筛选的病毒和细胞系
1853](i)甲型和乙型流感病毒
1854]病毒株A/Beijing/262/95 (H1N1) (SourceCDC) ；A/Sydney/05/97 (H3N2) (source CDC) ；B/Beijing/184/93(source :CDC)。
1855]细胞系MaldinDarby Canine Kidney (MDCK)
1856](ii)呼吸道合胞体病毒(RSV)
1857]病毒株 A2 (source :ATCC)。
1858]细胞系:African Green Monkey kidney (MA-104)细胞
1859](iii)3型副流感病毒
1860]病毒株14702 (source :isolate 5/95Boivin, Montreal Canada)
1861]细胞系:African Green Monkey kidney (MA-104)细胞
1862]B.测定抗病毒活件的方法
1863](i)抑制病毒致细胞病变作用(CPE)
163[1864]该测试是在96-孔微量滴定板中进行的。在该CPE抑制测试中，将每一测试化合 物的41og1(l稀释液加到3个含有单层细胞的杯子中，在5分钟内，加入病毒并将平板密封， 在37°C培养，当未处理的感染对照达到3-4+CPE时(约72-120小时)，用显微镜读取CPE。 在各个测试中，以与测试药物平行的方式评价已知的阳性对照药物。对于流感病毒、麻疹病 毒、RSV和副流感病毒，该药物是利巴韦林。(ii)增加中件红(NR)染料摄取进行该测试是为了确认在初始测试中观察到的CPE抑制，并且在CPE已经变为红 色后使用同一 96-孔微平板。将中性红加到培养基中；没有被病毒破坏的细胞摄取更大量 的染料，在使电脑化微平板读数器上读取。使用McManus描述的方法(Appl. Environment. Microbiol. 31 :35-38，1976)。从该染料摄取中确定 EC5(1。(iii)证实测试CPE_视觉和病毒产量测定使用CPE抑制和减少病毒产量作用的试验再测试通过CPE抑制和NR染料摄取证 实有活性的化合物。通过系列稀释到单层易感细胞上来测定从初始测试中收集的洗脱物的 病毒效价。CPE在这些细胞中的发展是存在感染性病毒的指示。由这些数据确定EC9(i，EC9(i 是将病毒产量抑制1-log的药物浓度。表23总结了部分抗病毒测试的结果。0 -D-BS具有有效的抗黄病毒科活性，并且 具有抗甲型和乙型流感病毒的有效体外抗病毒能力，以及抗RSV的某些活性。没有抗3型 副流感病毒的活性，这表明该化合物具有抗一些种类但不是全部RNA病毒的特异性抗病毒 作用。此外，化合物0 -D-CL是有效的体外抗RSV化合物，选择性指数为150。表23 对呼吸系统病毒的抗病毒作用初始测试，通过CPE抑制(视觉观察)用呼吸系统病毒进行抗病毒筛选 初始测试，通过中性红用呼吸系统病毒进行抗病毒筛选 初始测试，通过中性红用呼吸系统病毒进行抗病毒筛选 证实测试，通过视觉观察用呼吸系统病毒进行抗病毒筛选(EC5Q)
p-d-bs
甲型流感病喜ec5g(|im) 1.3 (hin1) sp*> 246甲难流威病喜ECsgGiM) 0.5 证实测试，通过产量用呼吸系统病毒进行抗病毒筛选(EC9Q) *RSV 呼吸道合胞体病毒A**SI 选择性指数(IC5。/EC90)实施例59测定候选化合物抗黄病毒科的抗病毒测试A.在Huh7细胞中的HCV复制子系统可在含有10%胎牛血清、IX非必需氨基酸Pen-Str印-Glu(分别是100单位/升， 100微克/升，和2. 92mg/升)和500-1000微克/毫升G418的DMEM培养基(高葡萄糖，不 含丙酮酸盐)中培养含有HCV复制子的HuH7细胞。可如下所述在不含G418的相同培养基中 进行抗病毒筛选测定为了将细胞保持在对数生长期，以低密度例如1000个细胞/孔将细 胞接种到96孔中。接种细胞后立即加入测试化合物，在培养箱中于37°C培养3-7天。然后 除去培养基，制备细胞以提取总的核酸(包括复制子RNA和宿主RNA)。然后在Q-RT-PCR方 案中扩增复制子RNA，并因此定量测定。在复制子RNA定量测定中观察到的差异是表示测试 化合物抗病毒效力的一个方法。典型实验证实了，在阴性对照和没有活性的化合物组中产 生了相差不大的复制子的量。这可以推断出来，因为在两组中测定的HCV RT-PCR的阈-周 期彼此接近。在这样的实验中，表示化合物抗病毒有效性的一个方法是从测试化合物的阈 RT-PCR周期减去阴性对照的平均阈RT-PCR周期。该值称为S Ct ( A Ct或DCt)。在复制子 产生中，3.3的ACt等于1-log减少(等于ECJ。导致HCV复制子RNA水平减少程度大 于2 △ Ct (复制子RNA减少75% )的化合物是抗病毒治疗的候选化合物。这样的候选化合 物属于通式(I)-(XXIII)结构。表24给出了如果目标化合物以所述方式培养96小时可获 得的平均ACt值(N=测试的时间)。至于阳性对照，使用重组干扰素a-2a(R0fer0n-A， Hoffmann-Roche, New Jersey, USA)作为阳性对照。然而，该HCV ACt值不包括编码病毒RNA-依赖性RNA聚合酶的复制子的任何特异 性参数。在典型的组中，化合物既可以降低宿主RNA聚合酶活性，也可以降低复制子-编码 的聚合酶活性。因此，rRNA (或任何其它宿主RNA聚合酶I产物)或0 -肌动蛋白mRNA (或任何其它宿主RNA聚合酶II)的定量测定以及与未使用药物的对照的RNA水平比较是确定 测试化合物对宿主RNA聚合酶的作用的有关测定。表24还给出了测试化合物对于rRNA的 ACt 值。通过获得HCV ACt数据和rRNA A Ct，可引入特异性参数。该参数是通过从彼此 中减去两个ACt值而获得的。这样获得了 S-SCT值(A ACt或DDCt) ；0以上的值表示 对复制子编码的聚合酶的抑制作用更强，0以下的△ ACt值表示对宿主rRNA水平的影响大 于对复制子水平的影响。表24中给出了以△ ACt值表示的测试化合物的抗病毒活性。一 般情况下，超过2的△ ACt值被认为与未使用药物处理的对照有显著差异，并因此表现出 显著的抗病毒活性。然而，A ACt值小于2，但是表现出有限分子细胞毒性数据(rRNA ACT 为0-2)的化合物也有可能是活性化合物。在另一个典型的组中，化合物可能降低宿主RNA聚合酶活性，但是不降低宿主DNA 聚合酶活性。因此，rDNA或肌动蛋白DNA(或任何其它宿主DNA片断)的定量测定以 及与未使用药物的对照的DNA水平比较是确定测试化合物对细胞DNA聚合酶的作用的有关 测定。表25给出了测试化合物对于rDNA的A Ct值。通过获得HCV ACt数据和rDNA A Ct，可引入特异性参数。该参数是通过从彼此 中减去两个ACt值而获得的。这样获得了 △ ACt值；0以上的值表示对复制子编码的聚 合酶的抑制作用更强，0以下的△ ACt值表示对宿主rDNA水平的影响大于对复制子水平 的影响。表25中给出了以△ ACt值表示的测试化合物的抗病毒活性。一般情况下，超过 2的A ACt值被认为与未使用药物处理的对照有显著差异，并因此是进一步评估的有意义 的化合物。然而，A ACt值小于2，但是表现出有限分子细胞毒性(rDNA A CT为0_2)的化 合物也可能是想要的化合物。导致HCV复制子RNA水平特异性降低，但是使得细胞RNA和/或DNA水平发生有 限降低的化合物是抗病毒治疗的候选化合物。评价了属于通式⑴-(XXIII)的候选化合物 降低黄病毒科病毒RNA(包括BVDV和HCV)的特异性能力，并检测了有效的化合物(表21、 24 和 25)。
168
平均HCVRNA 平均rRNA
平均 实施例600-D-GA的毒性特性该实施例所进行的细胞毒性测试是标准技术。简言之，在递增浓度的测试化合物 (0、1、3、10、33和100 iiM)存在下，将细胞以不同浓度(取决于细胞类型、测定持续时间)， 典型地是以5X103个细胞/孔的浓度接种到96-孔平板中。根据细胞类型，与测试化合物 培养的时间可以改变，但是一般为3-5天。通过加入MTT-染料(Promega)，然后培养8小时 来测定细胞存活力和线粒体活性。之后通过加入停止溶液，然后再培养8小时将含有染料 的平板固定。最后在570nm读取吸收度。制造商(Promega)很好地描述并提供了这样的操作方法。虽然测试化合物一般没有细胞毒性，但是令人惊奇的是，充足的0 -D-GA表现出 对于CEM细胞的选择性细胞毒害作用(表21)。为了探究该化合物的完全潜力，将一组人 恶性T和B细胞和不同的肿瘤细胞系与不同浓度的0 -D-GA培养，读取吸收度后，计算IC5(1 值。使用Ara-G、5FU和放线菌酮作为对照(表26)。0 -D-GA在人恶性T和B细胞中有有效毒性，但是在人PBM细胞和非_T或B肿瘤 细胞中没有毒性。与Ara-C和5-FU相比，0 -D-GA的抗癌活性对于T和B细胞有高度选择 性。表26 0 -D-GA抗不同肿瘤细胞系的毒性特性(IC5Q，uM)* *MTT测定(3-5天的培养时间)PBM 人外周血液单核细胞Vero 非洲绿猴肾细胞系CEM:人T-细胞淋巴瘤细胞系SUDHL-1 人退行发育大T-细胞淋巴瘤细胞系SupTI 人T-细胞成淋巴细胞的细胞系H9 人T-细胞成淋巴细胞的细胞系JY:人B-细胞成淋巴细胞的细胞系(用EBV转化的)BL41 人B-细胞成淋巴细胞的细胞系LNCap 人前列腺腺癌细胞系SK-MES-1 人肺鳞状癌细胞系SK-MEL-28 人黑素瘤细胞系HEPG2 人肝脏癌细胞系MCF-7 人乳腺癌细胞系通过加入天然核苷来测定对于CEM细胞(人T-细胞淋巴瘤)和SUDHL-1细胞(人 退行发育大T-细胞淋巴瘤细胞系)中的0-D-GA相关细胞毒性的防止作用。通过向培养 基中加入50 y M天然核苷和递增浓度的0 -D-GA来开始该实验。将CEM细胞以2500个细 胞/孔的浓度接种，并培养3天(=快生长性细胞系，倍增时间为约1.3天)。将SUDHL-1 细胞以10000个细胞/孔的浓度接种，并培养4天(=慢生长性细胞系，倍增时间为约3 天)。附图4中绘图表示了该实验的结果。该附图表明，胞苷和尿苷显著防止了 0-D-GA在 SUDHL-1细胞和CEM细胞(类似的图，未显示)中的毒性。2'-脱氧胞苷具有中等预防活 性作用。从这些数据可以推断出，0-D-GA同等有效地抗慢生长性SUDHL-1细胞和快生长 性CEM细胞，并且胞苷和尿苷在这两种细胞系中都防止了与该化合物有关的毒性。0-D-GA 的作用可与宿主RNA分子的合成和功能有关，但是与DNA分子的合成和功能无关。已经用各种具体和优选的实施方案和技术来描述了本发明。然而应当理解，通过 本发明的上面详细描述，多种改变和变型对于本领域技术人员来说是显而易见的，并且可 在仍然在本发明的实质和范围内的情况下作出。
权利要求
式I-b、I-c、II-a、II-b或II-c的化合物或其β-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出黄病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途其中每个D是氢、烷基、酰基、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷脂或氨基酸；每个W1和W2独立地为CH或N；每个X1和X2独立地为氢、卤素(F、Cl、Br或I)、NH2、NHR4、NR4R4′、NHOR4、NR4NR4′R4″、OH、OR4、SH或SR4；每个Y1是O、S或Se；每个Z是CH2或NH；每个R1和R1′独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、低级炔基、芳基、烷基芳基、卤素(F、Cl、Br或I)、NH2、NHR5、NR5R5′、NHOR5、NR5NHR5′、NR5NR5′R5″、OH、OR5、SH、SR5、NO2、NO、CH2OH、CH2OR5、CO2H、CO2R5、CONH2、CONHR5、CONR5R5′或CN；每个R2和R2′独立地为氢或卤素(F、Cl、Br或I)、OH、SH、OCH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH＝CH2、CN、CH2NH2、CH2OH、CO2H；每个R3和R3′独立地为氢或卤素(F、Cl、Br或I)、OH、SH、OCH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH3、C2H5、CH＝CH2、CN、CH2NH2、CH2OH、CO2H；每个R4、R4′、R4″、R5、R5′和R5″独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、芳基或芳基烷基例如未取代或取代的苯基或苄基；条件是对于式I-b和I-c的核苷，R2和R2′当中至少有一个是氢，且R3和R3′当中至少有一个是氢。FSA00000131012000011.tif
2.
3.权利要求1的用途，其中式(I-b)的3-D核苷选自一种下列化合物或其0-L对映 体或其可药用盐
4.权利要求1的用途，其中式(II-b)的 体或其可药用盐_D核苷选自一-种下列化合物或其0-L对映
5.通式(V)、(VI)或(VII)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或 预防表现出黄病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方 面的用途 每个口、^1、^2、^、^、？1、？、! 1、!^、R2、R2'、铲和铲'的定义同前，条件是对于通式 (V)或(VII)的核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3和R3'当中至少有一个是氢。
6.权利要求5的用途，其中式(V-a)的3-D核苷选自一种下列化合物或其0-L对映 体或其可药用盐
7.
8.
9.通式(XI)化合物或其H -L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出黄病 譯斗、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中 每个口 每个Z1和Z2独立地为0、S、NR6或Se ；r3和r3'的定义同前，每个R3是氢、低级烷基或低级酰基。
10.权利要求9的用途，其中式(XI-a)的3-D核苷选自一种下列化合物或其0-L对 映体或其可药用盐
11.权利要求9的用途，其中式(XI-b)的3-D核苷选自一种下列化合物或其0-L对 映体或其可药用盐
12.通式(XIII)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出 黄病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 [xin-c]、R2、R2'、rtR3'的定义同前；[XIII-a]其中每个dU 每个Y2是0、S、NH或NR7 ； 每个Y3是0、S、NH或NR8 ； 每个X3是OR9或SR9 ；且每个R7、R8和R9是氢、CrC3低级烷基、芳基烷基或芳基；条件是对于通式(XIII-d)核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3和R3'当中至 少有一个是氢。
13.权利要求12的用途，其中式(XIII-a)的3-D核苷选自一种下列化合物或其3-L 对映体或其可药用盐
14.权利要求12的用途，其中式(XIII-c)的3-D核苷选自 对映体或其可药用盐o 一种下列化合物或其3 -L
15.权利要求12的用途，其中式(XIII-d)的3-D核苷选自下述化合物或其0-L对映 体或其可药用盐
16.通式(XIV)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出黄 病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中^Da\Y\Z\R\R\R2'、铲和铲'的定义同前， 每个L1是氢、C1或Br ；每个 L2 是 OH、OCH3、OC2H5、OC3H7、OCF3、OAc 或 OBz ；每个Z3可以是0或CH2。
17.权利要求16的用途，其中式(XIV)的3-D核苷选自一种下列化合物或其0-L对 映体或其可药用盐
18.通式(XV)化合物或其P-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出黄 病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 [XV-a][XV-b]其中每个D.w'.W2^X1^1^3^1^1'、R2、R2'、R3和R3'的定义同前。
19.权利要求18的用途，其中式(XV-a)的3-D核苷是定义如下的化合物或其L对 映体或其可药用盐
20.权利要求18的用途，其中式(XV-b)的3-D核苷是定义如下的化合物或其L对 映体或其可药用盐
21.通式(XVI)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出黄 病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中每个口^、^、^、？、! 1、! 2、! 2'、R3 和 R3'的定义同前； 每个W3独立地为N、CH或CR1 ； 每个W4和W5独立地为N、CH、CX1或CR1 ‘；且 每个t和Z5独立地为NH或C (二 Y1)；条件是如果Z4和Z5是通过共价键结合的，则当Z5是C( = Y1)时，Z4不是C( = Y0 ； 并且环氮原子不超过3个。
22.权利要求21的用途，其中式(XVI-a)的3-D核苷选自一种下列化合物或其3 _L 对映体或其可药用盐
23.权利要求21的用途，其中式(XVI-c)的3-D核苷是定义如下的化合物或其3-L对映体或其可药用盐
24.权利要求21的用途，其中式(XVI-d)的3-D核苷是定义如下的化合物或其3-L 对映体或其可药用盐
25.权利要求21的用途，其中式(XVI-f)的3-D核苷是定义如下的化合物或其3-L 对映体或其可药用盐
26.通式(XVII)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出 黄病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中^D.ffM^X1^2^1^3^1^1'、R2、R2'、R3 和 R3'的定义同前；每个 X4 和 X5 独立地为氢、卤素(F、CI、Br 或 I)、N3、NH2、NHRs、NR8R8'、OH、OR8、SH 或SR8;且每个R8和R8'独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、芳基或芳基烷基例如未取代或取代 的苯基或苄基；条件是对于通式(XVII-a)或(XVII-b)核苷，X4不是0H或OR8。
27.权利要求26的用途，其中式(XVII-d)的3-D核苷是定义如下的化合物或其3-L 对映体或其可药用盐
28.通式(XVIII)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出 黄病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 每个口、！1、！2]1、^、？1、! 1、! 1'、R2、R2'和 R3 的定义同前。
29.通式(XXIII)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出 黄病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 [XXIII]其中每个口、？1、^、？3、! 1、! 4*!^的定义同前。
30.下述通式所示的化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表 现出黄病毒科、正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用 途 其中每个D、P2和P3的定义同前。
31.下述通式所示的化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出黄病毒科、正 粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途
32.下述通式所示的化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出黄病毒科、正 粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途
33.权利要求1-28中任一项所述的化合物用于治疗或预防宿主中丙型肝炎病毒感染 的用途。
34.通式(XXIII)的3-D核苷化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗 或预防宿主中丙型肝炎病毒感染的药物方面的用途 其中每个口、？1、^、？3、! 1、! 4*!^的定义同前； 所述化合物任选在可药用载体中。
35.通式(XXIII)的3-D核苷化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗 或预防宿主中丙型肝炎病毒感染的药物方面的用途其中 每个D、P2和P3的定义同前; 所述化合物任选在可药用载体中。
36.下式化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防宿主中丙型肝炎病毒感染的药物 方面的用途 所述化合物任选在可药用载体中。
37.下式化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防宿主中丙型肝炎病毒感染的药物 方面的用途所述化合物任选在可药用载体中。
38.式I_a的化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出正粘 病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中D是氢、烷基、酰基、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷酸酯、三磷酸酯、磷脂或氨 基酸；X1 独立地为氢、卤素(F、CI、Br 或 I)、NH2、NHR4、NR4R4‘、NHOR4、NR4NR4' R4〃、OH、OR4、 SH 或 SR4 ；Y1 是 0、S 或 Se ;每个R1和R1'独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、低级炔基、芳基、烷基芳基、卤素(F、 (1、81~或1)、朋2、朋1 5、殿51 5'、NHOR5、NR5NHR5'、NR5NR5' R5"、OH、OR5、SH、SR5、N02、NO、 CH20H、CH20R5、C02H、C02R5、C0NH2、CONHR5、C0NR5R5 '或 CN ;每个 R2 和 R2'独立地为氢或卤素(F、Cl、Br 或 I)、0H、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH2OH、C02H ；每个 R3 和 R3'独立地为氢或卤素(F、CI、Br 或 I)、OH、SH、0CH3、SCH3、NH2、NHCH3、CH3、 C2H5、CH = CH2、CN、CH2NH2、CH2OH、C02H ；每个R4、R4'、R4"、R5、R5'和R5〃独立地为氢、低级烷基、低级链烯基、芳基或芳基烷基 例如未取代或取代的苯基或苄基；条件是对于式I_a的核苷，R2和R2'当中至少有一个是氢，且R3和R3'当中至少有一 个是氢。
39.权利要求38的用途，其中式(I-a)的3-D核苷选自一种下列化合物或其0-L对 映体或其可药用盐
40.式(XIX)化合物或其0 -L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出正粘 病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 [XIX]其中每个D、Ri、R4和R4'的定义同前； 每个R9是氢、卤素尔、(1、81~或1)或0P3;每个P1是氢、低级烷基、低级链烯基、芳基、芳基烷基(例如未取代或取代的苯基或苄 基)、OH、OR4、NH2、NHR4 或 NR4R4 ‘；禾口每个P2和P3独立地为氢、烷基、酰基、_Ms、Ts、一磷酸、二磷酸、三磷酸、一磷酸酯、二磷 酸酯、三磷酸酯、磷脂或氨基酸。
41.下述通式所示的化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表 现出正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途， 其中每个D和P2的定义同前。
42.通式(XX)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出正 粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中每个口卞、？2、？3、! 1、! 4、! 4'和R9的定义同前。
43.通式(XXI)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出正 粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中每个口、？1、^、？3、! 1、! 4*!^的定义同前。
44.下述通式所示的化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表 现出正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中每个D、P2和P3的定义同前。
45.通式(XXII)化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出 正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 其中每个D、pi和R1的定义同前。
46.下述通式所示的化合物或其0-L对映体或其可药用盐在制备用于治疗或预防表 现出正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途 [XXII]19 其中D的定义同前。
47.下述通式所示的化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出正粘病毒科或副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途
48.下述通式所示的化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出正粘病毒科或 副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途
49.下述通式所示的化合物或其可药用盐在制备用于治疗或预防表现出正粘病毒科或 副粘病毒科病毒感染或异常细胞增殖的宿主的药物方面的用途
全文摘要
本发明公开了用于治疗病毒感染和异常细胞增殖的修饰核苷类化合物。本发明公开了用于治疗宿主，包括动物，尤其是人中黄病毒科(包括BVDV和HCV)、正粘病毒科(包括甲型和乙型流感病毒)或副粘病毒科(包括RSV)感染或涉及异常细胞增殖的病症的组合物和方法，所述组合物和方法使用的是通式(I)-(XXIII)核苷或其可药用盐或前药。本发明还提供了使用实时聚合酶链反应(“TR-PCR”)来定量测定宿主中病毒负载量，特别是BVDV、HCV或西尼罗河病毒的病毒负载量的有效方法。此外，本发明还公开了可发出与样本中存在的病毒量成比例的荧光的探针分子。
文档编号C07D473/18GK101862345SQ20101019290
公开日2010年10月20日 申请日期2001年10月18日 优先权日2000年10月18日
发明者L·斯图伊维尔, 渡边恭一 申请人:法玛塞特公司