铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物的利记博彩app

专利名称：铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物的利记博彩app
铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物导言本发明涉及治疗性或诊断性/成像性的放射药物，其制备或者应用，其中所述治 疗性或者诊断性的放射药物被定义为与铃蟾肽(bombesin)受体及更特别是与胃泌素释放 肽(GRP)受体具有亲和性且能与其结合的结合部分。该结合部分标记到金属络合基团用 于发射α-、β-、γ-和正电子的同位素。所述应用包括治疗患有瘤性疾病的对象，包含对 该对象施用有效量治疗性放射药物的步骤，所述治疗性放射药物具有与螯合基团螯合的金 属，该螯合基团附着于能结合铃蟾肽受体以及更特别是在肿瘤细胞上过表达的胃泌素释放 肽(GRP)受体的部分。所述应用包括使用诊断性/成像性的放射药物来诊断患有瘤性疾病 的对象或者对其成像，所述诊断性/成像性的放射药物具有与螯合基团螯合的金属，该螯 合基团附着于能结合铃蟾肽受体以及更特别是在肿瘤细胞上过表达的胃泌素释放肽(GRP) 受体的部分。所述方法由从前体化合物形成治疗性或者诊断性的化合物所做成，所述前体 化合物由与能结合铃蟾肽受体及更特别是胃泌素释放肽(GRP)受体的部分共价连接的金 属螯合基团所组成。背景在用作诊断剂的有效放射药物的设计中，必要的是该药物具有适当的体内靶向和 药代动力学性质。Fritzberg et al. (1992，J. Nucl. Med. ,33 394)进一步指出放射性核素 化学和相关的连接强调了对生物分子载体的附着及标记化学修饰进行优化的需要。因此， 放射性核素的类型、生物分子的类型以及用于使其彼此连接的方法对于放射示踪剂的性质 可具有关键影响。肽是在许多生理学过程中起关键作用的生物分子，包括作为神经递质、激素和抗 生素的作用。研究已经表明了其在诸如神经科学、免疫学、药物学和细胞生物学等领域中的 重要性。一些肽可作为化学信使起作用。它们结合靶细胞表面上的受体并将配体的生物作 用传递至靶组织。因此，配体的特异性受体结合性质可通过用放射性核素标记该配体而进 行开发。理论上，配体对受体的高度亲和性有助于放射标记的配体在受体表达组织中的保 持。然而，仍在研究的是哪些肽可以有效地被标记以及在哪些条件下标记会发生。众所周 知的是配体肽的受体特异性可在化学反应期间被改变。因此，必须确定最佳的肽构建体。肿瘤过表达由肽特异性结合的各种受体类型。如下出版物Boerman etal., Seminar in Nuclear Medicine，2000，30 (3)，195)、Reubi et al. J. Nucl. Med.，2005，46， (suppl)67S、Reubi, J. C.，Endocrine Reviews, 2003, 24 (4), 389 提供了特异性结合瘤中细 胞表面受体的肽的非详尽的列表，即促生长素抑制素、血管活性肠肽(VIP)、结合胃泌素释 放肽(GRP)受体的铃蟾肽、胃泌素、缩胆囊素(CCK)以及降钙素。金属标记的受体特异性肽在闪烁扫描成像和放射治疗中的潜在用途由促生长 素抑制素类似物来进行例证，例如111In-DTPA缀合的Octreotide，是FDA许可的诊断性 成像齐U，Octreoscan ，在美国由 Covidien 公司上市(Lowbertz et al. , Seminars in Oncology, 1994,1),以及分别见 Reubi et al. . J. Nucl. Med.，2005，46，67S-75S 及其中的 参考文献所述。Octreotide及其类似物已被共价连接到一些成像金属同位素(99mTc、mIn、
968Ga)以及治疗性金属同位素(1(ι5Κ1ι、186Λ88Ι^、1535πι、9°Υ、166Η0、177Ιλι)。经金属标记的缀合物特 异性地结合受体，并且在与受体结合后，该构建体被受体内在化，而所述经金属标记的受体 特异性肽或者其代谢物在靶细胞中被捕获。前述原理被进一步扩展至GRP受体亲合(avid)肽(与受体具有高度亲和性的 肽)，其中金属缀合的铃蟾肽 MM用于闪烁扫描成像和放射治疗(Smith et al., Anticancer Res,，23(2003)，63—70 ；Baidoo et al.，Bioconjug. Chem.，9(1998)，218-225 ； Gali et al. , Bioconjug. Chem. , 12 (2001), 354-363 ；Smith et al. , Bioconjug. Chem., 14(2003),93-102, Cancer Res. ,63(2003),4082-4088 ；Rogers et al. ， In, Μ. Nicolini and U. Mazzi, Editors, Technetium, rhenium and other metals in chemistry and nuclear medicine,SGE Editoriali,Italy(1999),519-525 ；Zhang et al. ,Cancer Res., 64(2004) ,6707-6715 ；Lantryet al.，EANM, Helsinki(Finland)(2004) ；Linder et al.， J. Nuc 1. Med.，45，(2004) (5)，169P [abstract 482] · Chen et al.，J. Nuc 1. Med.，45 (2004)， 1390-1397 ；Johnson et al. , Cancer Biother Radiopharm. 2006,21(2), 155-66, Smith et al.，Nuc 1. Med. Biol.，2005，32733—40)。在 Chen et al. (Appl. Radiat. Isot. ,2007, (In Press) )、Waser et al. (Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 200734,95-100)禾口 Lantry et al. (J. Nucl. Med. ,2006,47, 1144-52)中描述了铃蟾肽激动剂，即与-NH-CH2-CO-[4-氨基苯甲酰基]-QWAVGHLM-NH2)偶 联的mLu-DOTA(mLu-AMBA)，的成像与放射治疗。一些专利和专利申请提及了金属标记的铃蟾肽激动剂。Volkert etal. (US 2007/0065362A)要求保护通用结构(金属标记部分-间隔区团-铃蟾肽激动剂，用于成 像和治疗用途)的金属标记的铃蟾肽激动剂。相同发明人的其它专利和专利申请包括US 6，921，526B(2005)、US 7，060，247B、US7, 147，838B (2006)和 WO 2002/087631A1。
现有技术在所有上述出版物中选择激动剂作为放射药物的潜在原理是其通过相互作用产 生或者诱发GRP受体的应答，其中所述放射药物随后通过胞吞作用而被内在化。GRP拮抗物 抵消激动剂的作用且不被内在化到细胞内，因此据推测拮抗物可能不太适用于放射性闪烁 扫描成像和放射治疗目的。迄今为止，一致认为应开发具有良好放射配体内在化性质的化 合物，其导致放射配体在肿瘤内高度的体内积聚，这看来是最佳的体内可视化和放射性核 素治疗所需要的。从分子-药理学研究可知有效内在化通常主要由激动剂提供(Bodei et al.，J. Nucl. Med.，2006 ；47，375—377 ；Koenig et al.，TrendsPharmacol. Sci.，1997 ； 18， 276-287，Cescato et al.，J. Nucl. Med.，2006 ；47，502-511. Ginj et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2006 ；103,16436-16441)；近来已证明，在促生长素抑制素受体的情况中，与大量 进行内在化的相应激动剂相比，高亲和性金属标记的促生长素抑制素受体拮抗物在肿瘤细 胞中内在化很差，而在动物肿瘤模型中体内吸收进肿瘤中的方面其表现相同或者甚至更 好。GRP受体在一些瘤中过表达(Cornelio et al,Ann. Onco.，2007，18，1457-1466及其参考 文献)，如前列腺癌及癌转移、乳腺癌及癌转移、胃肠道基质肿瘤、小细胞肺癌、肾细胞癌、胃 肠胰腺神经内分泌肿瘤、头颈部鳞状细胞癌、成神经细胞瘤以及食管鳞状细胞癌。GRP受体 也在人卵巢、子宫内膜和胰腺癌的肿瘤相关血管中表达(Fleischmarm et al. ,Cell One.,
102007，29，421-33)。因此，特别希望设计具有拮抗物性质的有效的放射药物以用于成像和放
射治疗。Jensen et al. (Pharma. Reviews, 2008 (in Press))近来综述了三种不同的铃蟾 肽受体亚型的受体药理学，GRP受体属于其亚型2。在最近的出版物中，Cescatoet al. (J. Nucl. Med.，2008，49，318-26)证明了 99mTc-N4-标记的铃蟾肽拮抗物可在肿瘤靶向中比激动剂优选。GRP受体靶向化合物领域中的较早的发明在WO 2007/109475A2、 W02007/095443A2.US 2008/0008649A1 和 US 7，226，577B2 中描述，具有金属螯合的-连接
体_铃蟾肽，其具有如下的通式金属-螯合剂-连接体-铃蟾肽类似物根据TO 2007/095443A2所述，具有特定序列mLu-D0TA_Gly-4-氨基苯甲酰基-Gl n-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2的L70样品起激动剂作用，其中测量了在1和24小 时的吸收。所述吸收对于治疗目的不是最佳的，需要改良。除了这些专利和专利申请之外，出版物中也包括临床前和临床的研究(Waser et al.，Eur. J. Nucl. Medicine, 2007，34，95-100 J. Nucl. Med.，2006，47，1144-52)。通过对在不同位点以高亲和性靶向GRP受体的拮抗物进行筛选的优点，本发明显 示出间隔区策略的组合导致出乎预料地高且持久的肿瘤吸收并且在非靶器官中具有低吸 收和快速清除。在对比研究中，当使用相似的连接体时观测到肿瘤中显著较高的吸收(> 2X)。从确认铃蟾肽类似物的拮抗性质的体外测定开始，发现即使在N末端加入间隔区、 螯合剂和金属之后，这些拮抗作用仍被保留并且转化为关于体内肿瘤-背景比率的极佳行 为。因此，本发明的一个目的是提供示出高吸收率和高体内稳定性(人血清和组织) 的新的铃蟾肽肽拮抗物缀合物。概述发明描述在第一方面，本发明涉及铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其选择性结合铃蟾肽受体 及更特别地选择性结合GRP受体，而在拮抗这两个系统中激动剂诱导的作用时并不触发进 入细胞的内在化以及不通过钙转移而传导信号，其中所述铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物具有 通式(I)(I) [AD1Jx-C其中χ是从1至3的整数，η是从1至6的整数，A是包含至少一种放射性核素金属的金属螯合剂，优选适用于诊断或者治疗性用 途，更优选适用于成像或者放射治疗，B是与C的N末端连接的间隔区或者是共价键，C是序列C-I至C-4的铃蟾肽类似肽拮抗物，其中C-I :Xaa16-Gln7-Trp8-Ala9-Val10-Xaa211-His12-Xaa313-Xaa414-ZH,其中
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Xaa1是D_Phe，D-Cpa, D-Tyr, D-Trp或者具有下述任一结构式的残基
权利要求
具有如下通式(I)的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物(II)[A (B)n]x C其中x是从1至3的整数，n是从1至6的整数，A是包含至少一种放射性核素金属的金属螯合剂，B是连接至C的N末端的间隔区或者是共价键，C是序列C 1至C 4的铃蟾肽类似肽拮抗物，其中C 1Xaa16 Gln7 Trp8 Ala9 Val10 Xaa211 His12 Xaa313 Xaa414 ZH，其中Xaa1是D Phe、D Cpa、D Tyr、D Trp或者具有如下所述任一结构式的残基K是F、Cl、I或者NO2，Xaa2是Gly或者β Ala，Xaa3是抑胃酶氨酸、抑胃酶氨酸类似物和异构体、4 Am，5 MeHpA、4 Am，5 MeHxA或者α 取代的氨基酸，Xaa4是Leu、Cpa、Cba、CpnA、Cha、t buGly、tBuAla、Met、Nle或者异 Bu Gly，以及Z是NH、O；C 2Xaa16 Gln7 Trp8 Ala9 Val10 Xaa211 His12 Leuψ(CHOH CH2) (CH2)2 CH3，其中Leuψ(CHOH CH2) (CH2)2 CH3是Xaa1是D Phe、D Cpa、D Tyr、D Trp或者具有如下所述任一结构式的残基K是F、Cl、I或者NO2，Xaa2是Gly或者β Ala；C 3Xaa16 Gln7 Trp8 Ala9 Val10 Xaa211 His12 Xaa513 Xaa614 ZH，其中Xaa1是D Phe、D Cpa、D Tyr、D Trp或者具有如下所述任一结构式的残基K是F、Cl、I或者NO2，Xaa2是Gly或者β Ala，Xaa5是Leuψ CH2NH ，Xaa6是Cys、Phe、Trp、Tpi或者Tac，其中Tpi和Tac具有如下含义以及Z是NH或者O；C 4Xaa16 Gln7 Trp8 Ala9 Val10 Xaa211 His12 Xaa7，其中Xaa1是D Phe、D Cpa、D Tyr、D Trp或者具有如下所述任一结构式的残基K是F、Cl、I或者NO2，Xaa2是Gly或者β Ala，Xaa7是Leu O 烷基，或者Leu NH 烷基，以及其药物可接受的无机酸盐或者有机酸盐、水合物、络合物、酯、酰胺、溶剂化物和前体药物。FPA00001214556300011.tif,FPA00001214556300021.tif,FPA00001214556300022.tif,FPA00001214556300031.tif,FPA00001214556300032.tif,FPA00001214556300041.tif
2.权利要求1的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其中所述金属螯合剂(A)是用于三价金 属或者用于五价金属的金属螯合剂及其密切相关的类似物。
3.权利要求2的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其中所述用于三价金属的金属螯合剂选 自包含如下的组基于 DOTA-、NODASA-, NODAGA-, ΝΟΤΑ-、DTPA-, EDTA-, TETA-及 TRITA-的 螯合剂及其密切相关的类似物。
4.权利要求2的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其中所述用于五价金属的金属螯合剂选 自包含如下的组
5.权利要求1的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其中用于成像的放射性核素金属选自包 含如下的组133mIn、99mTC、67Ga、52Fe、68Ga、72AS、mIn、97RU、203Pb、62CU、64CU、51Cr、52mMn、157Gd、123I、 124K131IJ5BrJ6BrJ7Br 和 82Br。
6.权利要求1的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其中为了放射治疗所用的放射性核素 金属选自 186Re、9°Y、67CU、69Er、121Sn、127Te、142Pr、143Pr、198AU、199AU、161Tb、1Q9Pd、188Rd、186Re、188Re、 77AS、166Dy、166HO、149Pm、151Pm、153Sm、159Gd、172Tm、90Y、mIn、169Yb、175Yb、177LU、1(l5Rh、mAg、125I、123I、 213Bi^225Ac,129I ancTmSn。
7.权利要求1的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其中与C的N-末端连接的间隔区B具有 通式II II B1-B9其中B1是共价键或者天然氨基酸或者非天然氨基酸或者线型二胺或者环状二胺， B2是共价键或者天然氨基酸或者非天然氨基酸或者线型羧酸或者环状羧酸， 附带条件是B1和B2不能同时均是共价键，以及当B1是二胺时，B2是羧酸。
8.权利要求7的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其中非天然氨基酸是具有通式III、IV、 V或者VI中任一结构式的化合物 其中 III
9.权利要求1-8中任一项的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，附带条件是所述铃蟾肽类似 肽拮抗物缀合物具有通式(I’)，(Γ)[Α，_ ⑶丄-C 其中包括了 Α’来代替Α，且除了其是没有放射性核素金属的金属螯合剂之外，其具有与A相 同含义。
10.包含权利要求1-9任一项的任一铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物的药物组合物。
11.权利要求1-9任一项的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物在用于结合铃蟾肽受体、优选 结合胃泌素释放肽受体(GRP)和/或用于抑制铃蟾肽受体、优选抑制胃泌素释放肽受体 (GRP)时的用途。
12.制备权利要求1的任一铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物的方法，包括如下步骤 -用合适的放射性核素金属或者金属原子对具有如上述梭定义的通式(I’ )的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物进行放射性螯合。
13.用于对患者中的表达铃蟾肽受体优选GRP受体的肿瘤细胞和/或肿瘤及肿瘤周围 血管进行成像的方法，包括如下步骤-对患者施用放射药物有效量的权利要求1-8任一项的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物； -对患者中的放射性核素金属进行成像。
14.放射药物有效量的权利要求1-8中任一项的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物在生产成 像剂中的用途，所述成像剂用于对表达铃蟾肽受体优选GRP受体的肿瘤细胞和/或肿瘤及 肿瘤周围血管进行成像。
15.权利要求14的用途，其中所述肿瘤细胞是指选自包含如下的组的癌 -前列腺癌，包括癌转移_乳腺癌，包括癌转移 -胃肠道基质肿瘤 -小细胞肺癌 -肾细胞癌-胃肠胰腺神经内分泌肿瘤 -头颈部鳞状细胞癌 -成神经细胞瘤，以及 -食管鳞状细胞癌 并且其中所述肿瘤及肿瘤周围血管是指选自包含如下的组的癌 -卵巢癌-子宫内膜癌，及 -胰腺癌。
16.用于治疗或者预防肿瘤细胞和/或肿瘤及肿瘤周围血管相关疾病的方法，包括如 下步骤_施用治疗有效量的权利要求1-8任一项的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物。
17.治疗有效量的权利要求1-8任一项的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物在生产用于治疗 或者预防肿瘤细胞和/或肿瘤及肿瘤周围血管相关疾病的药物中的用途。
18.权利要求17的用途，其中所述肿瘤细胞相关疾病选自包含如下的组 -前列腺癌，包括癌转移_乳腺癌，包括癌转移 -胃肠道基质肿瘤 -小细胞肺癌 -肾细胞癌-胃肠胰腺神经内分泌肿瘤 -头颈部鳞状细胞癌 -成神经细胞瘤，以及 -食管鳞状细胞癌 并且其中所述肿瘤和肿瘤周围血管相关疾病选自包含如下的组 -前列腺癌，包括癌转移，及 -乳腺癌，包括癌转移。
19.用于制备放射治疗剂或者放射性药物成像剂的试剂盒，其包含含有预定量的权利 要求9的铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物的小瓶，以及用于对金属螯合剂进行放射标记的可接 受的载体、稀释剂、赋形剂或者佐剂。
全文摘要
为了提供诊断和治疗性药物，本发明提供了铃蟾肽类似肽拮抗物缀合物，其具有如下通式(I)，其中A是金属螯合剂，包含至少一种放射性核素金属，B是连接C的N-末端的间隔区或者共价键，以及C是具有如权利要求的序列的铃蟾肽类似肽拮抗物，另外其中x是从1至3的整数，并且n是从1至6的整数。(I)[A-(B)n]x-C。
文档编号C07K7/08GK101965358SQ200980107992
公开日2011年2月2日 申请日期2009年2月27日 优先权日2008年3月7日
发明者H·梅克, J·C·鲁比, R·曼西 申请人:巴塞尔大学医院;伯尔尼大学