专利名称：一种提纯橄榄多酚粗品中酪醇的方法
技术领域：
本发明涉及一种提纯橄榄多酚粗品中酪醇的方法，属天然植物有效成 分分离纯化领域。
背景技术：
酪醇是橄榄多酚中的一种强抗氧化剂并具有抗炎症作用。经实验证明， 橄榄多酚能减轻低密度脂蛋白的氧化程度，预防冠心病，动脉粥样硬化的 发生，也有舒缓血管平滑肌，降低血压的能力。另外，酪醇能有力清除多 余自由基，起到美容保健和杀菌的功效，对被动吸烟造成的氧化压力有缓 解的效果，而且还可作为营养补充品和机能性食品食用，安全无副作用。
目前国外关于橄榄多酚中酪醇研究较为广泛，主要研究从植物(主要是 欧橄榄树)各个部位如果实、叶、茎和皮中提取分离橄榄多酚物质，并进行
实验室中的定性定量研究(Danielle Ryan等，Journal of Chromatography A, 832(1999)87-96);也有从橄榄油和制橄榄油的工业废水中提取其中的橄榄 多酴，有时酪醇含量也较高(M.Murkovic等J.Biochem. Biophys. Methods 61(2004)155—160; H.K.Obied等Food and Chemical Toxicology 45 (2007) 1238-1248)。国内对于橄榄中的酪醇研究较少，主要是从红景天中提取酪 醇，如中国专利申请200610096054.8公开了一种酪醇植物提取物，它从红 景天的根或根茎，或者从女贞子的成熟果实或花或者发酵后的豆酱、醋渣 中提取，该方法是用有机溶剂乙醇初提后再用大孔树脂和硅胶层析柱提纯。 何志勇等研究了中国南方所产橄榄中的橄榄多酚的提取检测方法，提供了 定性定量的方法和依据(Food Chemistry, 2007,105 (3 ): 1307-1311 );另 外专利CN 1665764提供了生产及提纯羟基酪醇的方法，但分离时所用设备 为超临界萃取设备，投资较大。
发明内容
本发明的目的是提供一种将橄榄多酚粗品中的酪醇纯度进一步提高的 方法，工艺较为简单。
本发明实现过程如下
一种提纯橄榄多酚粗品中酪醇的方法，包括
(a) 将橄榄多酚粗粉用盐酸水溶液溶解，溶解橄榄多酚粗粉所用的溶 液为5 7M的盐酸，然后用碱调节橄榄多酚溶液pH至2左右；
(b) 将氯化钠加入上述橄榄多酚溶液中，制得食盐饱和的橄榄多酴溶 液； '
(c) 用乙酸乙酯萃取食盐饱和的橄榄多酴溶液中的酪醇；
(d) 除去乙酸乙酯萃取相中水分。
上述制备方法中，橄榄多酚粗粉和6M的盐酸的料液比为lg-. (20~30ml)，且盐酸溶解橄榄多酴粗粉的时间为15h 20h。
上述制备方法中，加入氯化钠时需轻轻搅拌溶液，直至容器底部有不 溶氯化钠沉积停止加入。
上述制备方法中，所用乙酸乙酯体积与溶解橄榄多酴粗粉6 M盐酸体 积的比例为l: (0.4-0.5),且萃取时间为6 10min,共萃取2 4次。
上述制备方法中，无水硫酸钠脱水所用柱子直径为2 3cm,装柱高度 与乙酸乙酯萃取相体积比例为lcm: (1(M5ml)。
本发明提供了一种可以有效提高橄榄多酚中酪醇纯度的方法，具有明 显的技术优点和优势。该方法简便，易于实施，按本工艺操作最后乙酸乙 酯相中酪醇纯度能够得到较大幅度提高，能够达到70%~90%。 说明书附图
图1为酪醇标准品高效液相色谱图2为乙酸乙酯萃取物高效液相色谱图。
具体实施方式
下面通过具体实施实例对本发明作进一步说明。
本发明中橄榄多酚粗品为法国La Gardonnenque集团生产，上海崴侨商 贸有限公司提供，按说明书其成分主要为酪醇及羟基酪醇且两者总含量约 为45%。
实施例1:
将橄榄多酚样品lg溶于20ml 6M盐酸，待溶解15小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2,再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用40ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为6min，萃取2次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约8cm,将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。
图1 、 2为溶于甲醇的酪醇标准品与最后工艺操作得到的乙酸乙酯相 在同一流速、流动相配比等洗脱条件下的高效液相色谱图，其中两图中的 主峰均为酪醇。图1为lmg/mL酪醇标准品进样10nL的图谱，主峰位于保 留时间1.962,图2为乙酸乙酯按工艺萃取三次后乙酸乙酯相进样20nL的 图谱，主峰位于保留时间1.948,在两图中，在RT二13.152左右有一相同杂 峰，属于高效液相色谱系统误差，若不记该杂峰，则应用分析软件按照面 积归一化法，酪醇标准品主峰面积为100%,乙酸乙酯相中酪醇主峰面积即 酪醇在乙酸乙酯中的纯度则达到89.78%。
实施例2:
将橄榄多酚样品lg溶于25ml 6M盐酸，待溶解15小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2,再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用50ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为6min,萃取2次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约10cm,将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。高效液相 色谱分析酪醇在乙酸乙酯中的纯度则达到88.35%。
实施例3:
5将橄榄多酚样品lg溶于30ml 6M盐酸，待溶解15小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2,再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用60ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为6min,萃取2次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约12cm，将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。高效液相 色谱分析酪醇在乙酸乙酯中的纯度则达到89.68%。
实施例4:
将橄榄多酚样品lg溶于20ml 6M盐酸，待溶解20小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2,再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用50ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为10min，萃取2次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约10cm,将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。
实施例5:
将橄榄多酚样品lg溶于25ml 6M盐酸，待溶解20小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2，再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用62.5ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为10min,萃取2次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约12cm，将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。
实施例6:
将橄榄多酚样品lg溶于30ml 6M盐酸，待溶解20小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2，再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用75ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为10min，萃取2次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约15cm,将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。
实施例7:
将橄榄多酚样品lg溶于20ml 6M盐酸，待溶解18小时后，用4M氢氧化钠调pH为2，再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用48ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为8min,萃取2次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约10cm，将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。
实施例8:
将橄榄多酚样品lg溶于20ml 6M盐酸，待溶解18小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2,再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用40ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为6min,萃取3次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约12cm，将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。
实施例9:
将橄榄多酚样品lg溶于25ml 6M盐酸，待溶解18小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2,再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用50ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为6min,萃取3次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约15cm,将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。
实施例10:
将橄榄多酚样品lg溶于25ml 6M盐酸，待溶解20小时后，用4M氢 氧化钠调pH为2,再向烧杯中加入适量氯化钠至饱和为止，用50ml乙酸 乙酯萃取，振摇萃取时间为6min,萃取4次，收集所有有机相，用无水硫 酸钠装柱，装柱高度约20cm，将乙酸乙酯相过柱除去其中水分。
权利要求
1.一种提纯橄榄多酚粗品中酪醇的方法，包括(a)将橄榄多酚粗粉用盐酸水溶液溶解；(b)将氯化钠加入上述橄榄多酚溶液中，制得食盐饱和的橄榄多酚溶液；(c)用乙酸乙酯萃取食盐饱和的橄榄多酚溶液中的酪醇；(d)除去乙酸乙酯萃取相中水分。
2. 根据权利要求l所述的提纯橄榄多酴粗品中酪醇的方法，其特征 在于溶解橄榄多酚粗粉所用的溶液为5 7M的盐酸，然后用碱调节橄 榄多酴溶液pH至2左右。
3. 根据权利要求2所述的提纯橄榄多酴粗品中酪醇的方法，其特征在于橄榄多酚粗粉与盐酸的料液比为lg: (20 30ml)。
4. 根据权利要求l所述的提纯橄榄多酴粗品中酪醇的方法，其特征 在于所用乙酸乙酯体积与溶解橄榄多酚粗粉盐酸的体积比为1:(0.5~0.6 )。
5. 根据权利要求l所述的提纯橄榄多酴粗品中酪醇的方法，其特征 在于所用乙酸乙酯萃取时间为6 10min,萃取次数为2 4次。
6. 根据权利要求l所述的提纯橄榄多酴粗品中酪醇的方法，其特征 在于使用无水硫酸钠除去乙酸乙酯萃取相中水分。
7. 根据权利要求6所述的提纯橄榄多酴粗品中酪醇的方法，其特征 在于无水硫酸钠脱水所用柱子直径为2 3cm,装柱高度与乙酸乙酯萃 取相体积比例为lcm: (10 15ml)。
8. 根据权利要求l所述的提纯橄榄多酚粗品中酪醇的方法，其特征 在于脱水后的乙酸乙酯萃取相中酪醇的纯度为70% 90%。
全文摘要
本发明公开了一种提纯橄榄多酚粗品中酪醇的方法，包括(a)将橄榄多酚粗粉用盐酸水溶液溶解；(b)将氯化钠加入上述橄榄多酚溶液中，制得食盐饱和的橄榄多酚溶液；(c)用乙酸乙酯萃取食盐饱和的橄榄多酚溶液中的酪醇；(d)除去乙酸乙酯萃取相中水分。本发明方法简便，易于实施，按本工艺操作最后乙酸乙酯相中酪醇纯度能够得到较大幅度提高，能够达到70％～90％。
文档编号C07C37/72GK101575268SQ20091002299
公开日2009年11月11日 申请日期2009年6月22日 优先权日2009年6月22日
发明者刘博文, 惠俊峰, 朱晓丽, 朱晨辉, 钰 米, 范代娣, 薛文娇, 沛 马, 马晓轩, 骆艳娥 申请人:西北大学