肽脱甲酰化酶抑制剂的利记博彩app

专利名称：肽脱甲酰化酶抑制剂的利记博彩app
专利说明本发明涉及某些{2-(烷基)-3-[2-(5-氟-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟 基甲酰胺化合物，包含它们的组合物，该化合物在抑制细菌的肽脱甲酰化酶(PDF)活性中 的用途，以及在治疗细菌感染中的用途。
背景技术：
细菌蛋白合成从N-甲酰基-甲硫氨酰-tRNA(f-Met-tRNAi)开始，因此，所有新 近合成的多肽含有N-甲酰基-甲硫氨酸末端(f-Met-pp)(方案I)。肽脱甲酰化酶(PDF) 是含金属酶，其除去多肽的N-甲酰基，当在延长过程中所述多肽从核糖体中生成[Adams， J.Μ. (1968)J. Mol. Biol. 33,571-589 ；Livingston,D.Μ. and Leder,P. (1969)Biochemistry 8,435-443 ；Ball, L. A. and Kaesberg, P. (1973) J. Mol. Biol. 79，531-537]。取决于它们的 第二氨基酸的性质，多肽进一步由甲硫氨酸氨肽酶(MAP)处理，得到成熟蛋白。脱甲酰化作 用在蛋白质成熟中起了必不可少的作用，因为细菌生长的必需酶MAP不能水解N-端肽。方案I.在蛋白合成中PDF的作用 迄今为止，PDF普遍存在于细菌中，其在所有已测序的细菌基因组中存在至少一个 pdf基因。PDF在真核胞质蛋白合成中不起作用，在该合成中不涉及N-甲酰化作用，但是在 寄生虫、植物和动物包括人中已识别出含有叶绿体/线粒体定位信号的核编码的PDF蛋白。 PDF在植物和寄生虫细胞器中是必需的，因为它们的基因组编码大量的蛋白，所述蛋白需要 脱甲酰化作用产生活性，但有证据表明在动物中并不是这种情况。事实上，人的线粒体PDF 的特征鉴定已表明其具有比其细菌的对应部分小得多的活性。而且，在体外对人的PDF酶 有活性的PDF抑制剂在正常的人细胞系的生长中没有作用[Nguyen，K. Τ.，Hu, X.，Colton, C. ，Chakrabarti, R. ，Zhu, Μ. X. and Pei，D. (2003)Biochemistry42,9952-9958]。因此，PDF抑制剂代表一类对广谱病原体具有新的作用模式的有希望的新的抗细 菌剂。现有技术中已经描述了 PDF抑制剂。已经提交了有关下式的胼-3-氧代丙基羟基 甲酰胺衍生物的专利申请，参见WO 03/101442和W02006/055663。
因此，现有技术中已经公开了制备抑制PDF活性的化合物以及大量的该化合物。然而，对可用于治疗细菌感染的PDF抑制剂仍存在继续的需求。发明概述本发明涉及某些{2-(烷基)-3-[2-(5-氟-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟 基甲酰胺衍生物，包含它们的组合物，该化合物在抑制细菌的肽脱甲酰化酶(PDF)活性中 的用途，以及在治疗细菌感染中的用途。特别地，本发明涉及式(I)化合物及其药学上可接 受的盐 其中R1、R2和R3如下所定义。本发明化合物为细菌的肽脱甲酰化酶抑制剂，并且 可用于治疗细菌感染。图1 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型 1的FT-IR谱图。χ-轴以CnT1为单位，并且y-轴为吸光度。图2 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型 2的FT-IR谱图。χ-轴以cnT1为单位，并且y-轴为吸光度。图3 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型 1的FT-拉曼光谱。χ-轴以cnT1为单位，并且y-轴为强度。图4 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型 2的FT-拉曼光谱。χ-轴以cnT1为单位，并且y-轴为强度。图5 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型 3的FT-拉曼光谱。χ-轴以cnT1为单位，并且y-轴为强度。图 6 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型 1的X-射线粉末衍射图。X-轴以。2 θ为单位，并且y-轴为强度。图7 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型 2的X-射线粉末衍射图。χ-轴以。2 θ为单位，并且y-轴为强度。图8 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型


183的X-射线粉末衍射图。χ-轴以。2 θ为单位，并且y-轴为强度。图9 提供了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型 1的差示扫描量热法(DSC)热分析图。χ-轴为温度CC )，并且y_轴为热流(瓦特/克)。 在132°C处的热事件相当于多晶型1至多晶型3的放热的固态形式的转化。图10提供了 [(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6_[(9aS)-六氢吡嗪并[2， l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多 晶型2的差示扫描量热法(DSC)热分析图。χ-轴为温度(°C)，并且y-轴为热流(瓦特/ 克)。图11提供了 [(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2， l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多 晶型3的差示扫描量热法(DSC)热分析图。χ-轴为温度(°C)，并且y-轴为热流(瓦特/ 克)。图12提供了 [(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2， l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多 晶型1的痕量热重量分析(TGA)。χ-轴为温度(°C )，并且y_轴为重量改变的百分比。图13提供了 [(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2， l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多 晶型2的痕量热重量分析(TGA)。χ-轴为温度(°C )，并且y_轴为重量改变的百分比。图14提供了 [(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2， l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多 晶型3的痕量热重量分析(TGA)。χ-轴为温度(°C )，并且y_轴为重量改变的百分比。发明的详细说明 在描述本发明的过程中，化学元素根据元素周期表识别。在此使用的缩写和符号 是化学和生物学领域中的熟练技术人员通常所使用的这些缩写和符号。具体地说，在实施 例和整个说明书中可使用下列缩写g(克)；mg(毫克)；
kg (千克)；Pg (微克)；
L(升)；mL (毫升)；
口！^(微升)；Psi(磅/平方英寸)
M (摩尔浓度)；mM (毫摩尔浓度)；
μ M (微摩尔浓度)；nM (纳摩尔浓度)；
PM (皮摩尔浓度)；nm (纳米)；
mm(毫米)；Wt (重量)；
N(当量浓度)；CFU (菌落形成单位)
I. V.(静脉内)；Hz (赫兹)；
MHz (兆赫)；mol (摩尔)；
mmol (毫摩尔)；RT (室温)；
min (分钟)；h (小时)；
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-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)；
FMOC (9-芴基甲氧基羰基)； CBZ (苄氧基羰基)； atm (大气压)； TMS (三甲基甲硅烷基)； TBS (叔丁基二甲基甲硅烷基) BSA(牛血清白蛋白)
BOC (叔丁氧基羰基)； DCC (二环己基碳二亚胺)； Ac (乙酰基)；
TMSE (2-(三甲基甲硅烷基)乙基)； TIPS(三异丙基甲硅烷基)； DMAP (4-二甲基氨基吡啶)； NAD (烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)； HPLC (高压液相色谱)； LC/MS (液相色谱/质谱)； BOP (双(2-氧代-3-噁唑烷基)膦酰氯)； TBAF (四正丁基氟化铵)；
HBTU (0-苯并三唑-1-基-N，N，N' ,N'-四甲基脲鐺六氟磷酸盐)； HEPES (4-(2-羟基乙基)-1_哌嗪乙烷磺酸)；
DPPA (二苯基磷酰基叠氮化物)； fHN03 (发烟 HNO3)； EDTA (乙二胺四乙酸)
TMEDA (N, N, N'，N' _ 四甲基 _1，2-乙二胺)
LAH (氢化锂铝)； NaOMe (甲氧基钠)
DIPEA( 茂铁)；和异丙基乙胺)
NBS (N-溴代琥珀酰亚胺) dppf(l,l'-双(二苯基膦基) NIS (N-碘代琥珀酰亚胺)。
所有引用醚的地方都是指乙醚，盐水是指饱和NaCl水溶液。 术语和定义
“烷基"是指具有指定成员碳原子数目的单价的饱和烃链。例如，C1-C7烷基是 1-7个成员碳原子的烷基。烷基可以任选被在此所定义的一个或多个取代基取代。
20烷基可以是直链的或支链的。代表性的支链烷基具有一个、两个或三个支链。烷基包括甲 基、乙基、丙基(正丙基和异丙基)、丁基(正丁基、异丁基和叔丁基)、戊基(正戊基、异戊 基和新戊基)和己基。“烯基"是指具有指定成员碳原子数目并且在链中具有一个或多个碳-碳双键 的不饱和烃链。例如，C2-C6烯基是指具有2-6个成员碳原子的烯基。在某些实施方案中， 烯基在链中具有一个碳_碳双键。在其它实施方案中，烯基在链中具有不止一个碳_碳双 键。烯基可以任选被如在此所定义的一个或多个取代基取代。烯基可以是直链的或支链的。 代表性的支链烯基具有一个、两个或三个支链。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基和 己火布ο“烷氧基〃是指通过氧桥连接的烷基部分(即，-0-C1-C6烷基，其中C1-C6如文 中所定义)。这种基团的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基和己氧基。“炔基"是指具有指定成员碳原子数目并且在链中具有一个或多个碳-碳三键 的不饱和烃链。例如，C2-C6炔基是指具有2-6个成员原子的炔基。在某些实施方案中，炔 基在链中具有一个碳-碳三键。在其它实施方案中，炔基在链中具有不止一个碳-碳三键。 为了清楚，在链中具有一个或多个碳-碳三键以及在链中具有一个或多个碳-碳双键的不 饱和的烃链也称为炔基。炔基可以任选被如在此所定义的一个或多个取代基取代。代表 性的支链炔基具有一个、两个或三个支链。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基和己炔 基。“芳基"是指芳香族烃环体系。芳基是单环体系或双环体系。单环芳环是指苯基。 双环芳环是指萘基以及其中苯基与具有5、6或7个成员碳原子的环烷基或环烯基环稠合的 环。芳基可以任选被在此所定义的一个或多个取代基取代。“环烷基"是指具有指定成员碳原子数目的饱和烃环。环烷基是单环体系。例如， C3-C6环烷基是指具有3-6个成员原子的环烷基。环烷基可以任选被在此所定义的一个或 多个取代基取代。环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。“环烯基"是指具有指定成员碳原子数目并且在环中具有碳-碳双键的不饱和 烃环。例如，C3-C6环烯基是指具有3-6个成员碳原子的环烯基。在某些实施方案中，环烯 基在环内具有一个碳-碳双键。在其它实施方案中，环烯基在环中具有不止一个碳-碳双 键。环烯基环不是芳香性的。环烯基是单环体系。环烯基可以任选被如在此所定义的一个 或多个取代基取代。环烯基包括环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基和环己二烯基。“对映异构体过量〃或〃ee〃是一种对映异构体相对于另一种对映异构体的过 量，以百分比表示。因此，由于两种对映异构体在外消旋混合物中以等量存在，因此，外消旋 混合物的对映异构体过量为0(0% ee)。然而，如果将一种对映异构体富集使得它占产物的 95%，那么所述的对映异构体过量将为90% ee(富集对映异构体的数量，95%，减去另一种 对映异构体的数量，5%)。“对映异构体富集的"是指对映异构体过量大于0的产物。例如，对映异构体富 集的是指对映异构体过量大于50% ee，大于75% ee或大于90% ee的产物。“对映异构体纯的〃是指对映异构体过量为99%ee或更大的产物。“卤代"是指选自氟、氯、溴和碘的卤素基团。“卤代烷基"是指烷基，其中烷基中的连接于成员原子上的至少一个氢原子用卤素代替。卤素取代基的数目包括但不限于1、2、3、4、5或6个取代基。卤代烷基包括单氟甲
基、二氟乙基和三氟甲基。“杂芳基"是指在环中含有1-5个，合适地含有1-4个，更合适地含有1或2个杂 原子作为成员原子的芳环。含有不止一个杂原子的杂芳基可以含有不同的杂原子。杂芳基 可以任选被如在此所定义的一个或多个取代基取代。杂芳基是单环体系或是稠合的双环 体系。单环杂芳基环具有5-6个成员原子。双环杂芳基环具有8-10个成员原子。双环杂 芳基环包括那些环，其中主要的杂芳基和次要的单环环烷基、环烯基、杂环烃基、芳基或杂 芳基环连接形成稠合的双环体系。杂芳基包括吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、 噁二唑基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、呋喃基、呋咱基、噻吩基、三唑基、吡啶基、嘧啶基、 哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑基、喷哚基、异吲哚基、中氮茚基、Π引唑基、嘌呤基、喹 啉基、异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、蝶啶基、噌啉基、苯并咪唑基、苯并吡喃基、苯并噁唑 基、苯并异噁唑基、苯并呋喃基、异苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、苯并噻吩基、呋 喃并吡啶基、萘啶基、吡唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、3Η-[1，2，3]三唑并[4，5-d]嘧啶基和 3H-[1，2，3]三唑并[4,5-b]吡啶基。“杂原子〃是指氮、硫或氧原子。“杂环烃基"是指在环中含有1-4个杂原子作为成员原子的饱和或不饱和环。杂 环烃基环不是芳香性的。含有不止一个杂原子的杂环烃基可以含有不同的杂原子。杂环 烃基可以任选被在此所定义的一个或多个取代基取代。杂环烃基是单环体系或稠合、螺环 或桥连双环体系。单环杂环烃基环具有4-7个成员原子。双环杂环烃基环具有7-11个成 员原子。在某些实施方案中，杂环烃基是饱和的。在其它实施方案中，杂环烃基是不饱和 的但不是芳香性的。杂环烃基包括吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、吡喃基、四氢吡喃 基、二氢吡喃基、四氢噻吩基、吡唑烷基、噁唑烷基、噻唑烷基、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基、吗 啉基、硫代吗啉基、1-吡唑烷基、氮杂革基、1，3- 二噁烷基、1，4- 二噁烷基、1，3-氧硫杂环 戊烷基(oXathiolanyl)、l，3-二噻烷基(dithianyl)、氮杂环丁烷基、异噁唑烷基、3-氮杂 二环[3. 1. 0]己基、氮杂二环[3. 2. 1]辛基、氮杂二环[3. 3. 1]壬基、氮杂二环[4. 3. 0]壬 基、2，5-二氮杂二环[2. 2.1]庚基、八氢吡咯并[l，2-a]吡嗪基、八氢吡嗪并[2，l_c][l， 4]噁嗪基、氧杂二环[2. 2.1]庚基、六氢-IH-氮杂革基、2，3，4，7-四氢-IH-氮杂革基、四 氢-5H-[1，3] 二氧杂环戊烯并[4，5-c]吡咯基、四氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡咯_(3H)_基、 六氢吡咯并[l，2-a]吡嗪-(IH)-基、八氢吡嗪并[l，2-a]氮杂革-(IH)-基、六氢吡嗪并 [2，l-c][l，4]噁嗪-(IH)-基、六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-(IH)-基、10-氧杂-4-氮杂三环 [5. 2. 1.02，6]癸基、八氢-1(2H)_喹喔啉基；八氢-IH-环戊二烯并[b]吡嗪基、六氢呋喃 并[3，4-b]吡嗪-(2H)-基、八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶基、4，7-二氮杂螺[2. 5]辛基和 5_氮杂螺[2. 4]庚基。“成员原子”是指构成链或环的一个或多个原子。如果在链和环中存在多于一个成 员原子，那么在该链或环中每个成员原子与相邻的成员原子共价结合。在链或环上构成取 代基的原子不是链或环中的成员原子。“任选取代的”表示基团，例如烷基、烯基、炔基、芳基、环烷基、环烯基、杂环烃基或 杂芳基，可以是未取代的或被一个或多个如在此所定义的取代基取代。“药学上可接受的”是指那些化合物、物质、组合物和剂型，其在合理医学判断的范
22围内，适合与人和动物组织接触使用，而没有过度的毒性、刺激性或其它问题或并发症，具 有相称的合理受益/风险比。涉及基团的“取代的”表示其中连接于成员原子的一个或多个氢原子被所限定的 取代基代替。应当理解，术语“取代的”包括隐含的规定，即这种取代遵照取代原子和取代 基的允许化合价，并且该取代生成一种稳定化合物(即不会例如通过水解、重排、环化或消 除反应而自发地进行转化的化合物，并且该化合物足够稳定可从反应混合物中分离出来)。 当说明一个基团可含有一个或多个取代基时，该基团中的一个或多个(若合适)成员原子 可被取代。此外，其中单个成员原子可以被多于一个取代基取代，只要这种取代符合该原子 允许的化合价。对于每个取代的或任选取代的基团，合适的取代基在此所定义。“烷硫基(SUlfanyl) ”是指通过硫桥连接的烷基部分(即，-S-C1-C6烷基，其中 C1-C6如文中所定义)。烷硫基的实例包括甲硫基和乙硫基。化合物本发明涉及根据式I的化合物 其中Rl 选自C2_C7 烷基和-(CH2) n_C3_C6 环烷基；R2选自C1_C3烷基；环丙基；C1-C3烷氧基；C1-C3卤代烷基；C1-C3烷硫基；5-元 杂芳基；5-元杂环烃基；卤素；羟基甲基；和-NRaRb ；R3选自_NR4R5 ；卤素；苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；和杂芳基，其任 选被一至三个R6基团所取代；R4选自H ；C1-C6烷基，其任选被一个或两个R7基团所取代；C1-C6烷氧基；C3-C6 环烷基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂环烃基，其任选被一至三个R6基团所取代； 杂芳基，其任选被一至三个R6基团所取代；和苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；R5选自H ；C1-C6烷基，其任选被一个或两个R7基团所取代；C1-C6烷氧基；C3-C6 环烷基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂环烃基，其任选被一至三个R6基团所取代； 杂芳基，其任选被一至三个R6基团所取代；和苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；或者R4和R5与同它们相连的N-原子结合到一起形成任选被一至三个R6基团所 取代的杂环烃基；每个R6独立地选自C1_C6烷基，其任选被一至三个R7基团所取代；羟基；C1-C3 烷氧基；-C (O)NRaRb ；-C(O) Rc ；-C(O) ORc ；杂环烃基；C3-C6环烷基，其任选被一个-NRaRb 或吡咯烷基所取代；氧代基；氰基；-NRaRb ；苯基；杂芳基；和卤素；每个R7独立地选自羟基；C1-C3烷氧基；卤素；苯基；氰基；-NRaRb ；-C(0) NRaRb ；-C(O)Rc ；C3-C6环烷基，其任选被一个羟基、杂环烃基或-NRaRb基团所取代；杂环 烃基；和杂芳基，其任选被一个甲基、NRaRb或羟基所取代；
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每个Ra各自独立地选自H以及任选被一个羟基、甲氧基或二甲基胺所取代的 C1-C3烷基；每个Rb独立地选自H和C1-C3烷基；每个Rc独立地选自任选被一个甲氧基所取代的C1-C3烷基；苯基；杂环烃基；以 及杂芳基；和η为0-2的整数。式I的化合物可以含有一个或多个不对称中心(也称为手性中心)，因此，其可以 以单独的对映异构体、非对映异构体或其它立体异构形式或其混合物的形式存在。手性中 心如手性碳原子还可以存在于取代基如烷基中。当手性中心的立体化学存在于式I或在此 所示的任何化学结构中时，虽然没有特定指出，但是所述的结构应该包括任何立体异构体 以及其所有的混合物。因此，含有一个或多个手性中心的式I化合物可以以外消旋混合物、 非对映异构体的混合物、对映异构体富集的混合物、非对映异构体富集的混合物或对映异 构体和非对映异构体纯的各个立体异构体的形式使用。含有一个或多个不对称中心的式I化合物的各个立体异构体可以通过本领域熟 练技术人员已知的方法拆分。例如，这种拆分可以如下方式进行(1)通过形成非对映异构 体盐、复合物或其它衍生物；(2)通过与立体异构体专一性试剂选择性反应，例如通过酶氧 化或还原反应；或(3)通过在手性环境下的气-液色谱或液相色谱，例如，在手性载体如二 氧化硅上与结合的手性配体或在手性溶剂存在下。本领域熟练技术人员将会理解，当所需 的立体异构体转化为非对映异构体的盐、复合物或衍生物时，需要另外的步骤以释放所需 的形式。或者，特定的立体异构体可以通过使用旋光的试剂、底物、催化剂或溶剂通过不对 称合成来合成，或通过不对称转化将一种对映异构体转化为另一种对映异构体。式I化合物还可以含有双键或其它几何不对称中心。当式I或在此所示的任何化 学结构中存在的几何不对称的立体化学中心没有指出时，所述的结构应该包括反式(E)几 何异构体，顺式(Z)几何异构体以及其所有的混合物。同样，所有互变异构体也将包括在式 I内，不管这些互变异构体以平衡形式存在还是以主要一种形式存在。在某些实施方案中，式I化合物可以含有酸性官能团。在其他一些实施方案中， 式I化合物可以含有碱性官能团。因此，本领域熟练技术人员将会理解，式I化合物的盐 是可以制备的。实际上，在本发明的某些实施方案中，式I化合物的盐可以优选于各自的 游离碱或游离酸，因为这些盐给予分子更大的稳定性或溶解度，由此有助于配制成剂型。因 此，本发明还涉及式I化合物的药学上可接受的盐。对于合适的盐的综述参见Berge等人， J. Pharm. Sci.，1977，66，1-19。酸加成盐(Acid salts):合适的加成盐是由形成无毒盐的酸形成的，并且该加成 盐的实例为盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、乙 酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、丙二酸盐、乳酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、甲酸盐、葡糖 酸盐、琥珀酸盐、丙酮酸盐(Piruvate)、草酸盐、草酰乙酸盐、三氟乙酸盐、蔗糖盐、苯甲酸 盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸基(methanesulphonic)、乙磺酸 基(ethanesulphonic)、对甲苯磺酸基(p-toluenesulphonic)和羟乙基磺酸盐。碱加成盐(Base salts)药学上可接受的碱加成盐包括铵盐、碱金属盐如那些钠 盐和钾盐，碱土金属盐如那些钙盐和镁盐，以及与有机碱形成的盐，包括伯、仲和叔胺如异丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二环己基胺和N-甲基-D-葡萄糖胺的盐。在此所使用的术语“药学上可接受的盐”是指保留主题化合物所需生物学活性并 且显示出极低不希望毒理学作用的盐。这些药学上可接受的盐可以在化合物的最后分离和 提纯期间在原位制备，或通过使提纯后的以其游离酸或游离碱形式存在的化合物单独地与 合适的碱或酸分别反应进行制备。如在此所使用的，术语“本发明化合物”表示式I化合物及其盐，包括药学上可接 受的盐。术语“一种本发明的化合物”也在此使用，并指式I化合物及其盐，包括药学上可 接受的盐。本发明化合物可以固态或液态形式存在。在固态中，本发明化合物可以以结晶或 非结晶的形式或以它们的混合物的形式存在。对于结晶形式的本发明化合物，本领域技术 人员将会理解，可以形成药学上可接受的溶剂合物，其中在结晶期间溶剂分子结合到晶格 中。溶剂合物可以包括非水溶剂如乙醇、异丙醇、DMS0、乙酸、乙醇胺和乙酸乙酯，或者它们 可以包括水作为结合到晶格中的溶剂。其中水是结合到晶格中的溶剂的溶剂合物被典型地 称为"水合物"。水合物包括化学计量的水合物和含有可变量水的组合物。本发明包括所 有这些溶剂合物。本领域熟练技术人员将会进一步理解到，本发明以晶体形式存在的某些化合物， 包括其各种溶剂合物，可以表现出多晶型现象(即出现不同晶体结构的性能)。这些不同 的晶体形式典型地被称为"多晶型物"。本发明包括所有这些多晶型物。多晶型物具有相 同的化学组成，但是在晶体固态的堆积、几何排列以及其它所述性能方面有所不同。因此， 多晶型物可以具有不同的物理性质如形状、密度、硬度、可变形性、稳定性和溶解性能。多晶 型物典型地表现出不同的熔点、IR光谱和X-射线粉末衍射图，其可以被用来进行鉴定。本 领域熟练技术人员将会理解，不同的多晶型物例如可以通过改变或调节在制备化合物中所 使用的反应条件或试剂进行制备，或者通过使用不同的分离或纯化方法制备。例如，改变温 度、压力或溶剂可以产生多晶型物。此外，在某些条件下，一种多晶型物可以自发地转变成 另一种多晶型物。在本发明的一个实施方案中，Rl为-(CH2) n-C3-C6环烷基。合适地，Rl为-(CH2) n-C3-C6环烷基，其中η为1。合适地，Rl为-CH2-环戊基。在本发明的另一实施方案中，R2为C1-C3烷基；C1-C3烷氧基；C1-C3卤代烷基； C1-C3烷硫基；或卤素。合适地，R2为甲基；乙基；甲硫基；乙硫基；氟代甲基；二氟甲基； 1-氟甲基；氯；环丙基；或甲氧基。合适地，R2为甲基；乙基；甲硫基；或氯。在本发明的另一实施方案中，R3为-NR4R5 ；C1-C6烷氧基；或杂芳基，其任选被一 至三个R6基团所取代。合适地，R3为-NR4R5，其中R4为C1-C6烷基，其任选被一个或两 个R7基团所取代；或R4为C3-C6环烷基，其任选被一至三个R6基团所取代；并且R5为H、 C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。在本发明的另一实施方案中，R4为环丙基；环丁基；环戊基；四氢-2Η-吡喃基； 2_氧代-六氢-IH-氮杂革基；2-氧代-2，3，4，7-四氢-IH-氮杂革基；5-氟-吡啶 基；或C1-C6烷基，其任选被选自下列之一的R7基团所取代羟基、甲氧基、氰基、-C(O) NRaRb, -C (0) Re、吗啉基、吡啶基、1，3-噻唑基、2-氨基-1，3-噻唑基、噻吩基、呋喃基、苯基 和1-羟基-IH-咪唑基；并且R5为H ；C1-C3烷基；环丙基；或任选被一个R6基团所取代的哌嗪基。在另一实施方案中，R4为甲基；任选被一个选自下列的取代基所取代的乙基羟 基、甲氧基和-NRaRb ；丙基；异丙基；环丙基；环丁基；和环戊基。在本发明的另一实施方案中，R5选自H;C1-C6烷基；C1-C6烷氧基；和C3-C6环 烷基。合适地，R5为H;甲基；或甲氧基。合适地，R5为H;C1-C3烷基；环丙基；或任选被一 个R6基团所取代的哌嗪基。在本发明的另一实施方案中，R3为-NR4R5，其中R4和R5与同它们相连的N-原子 结合到一起形成任选被一至三个R6基团所取代的杂环烃基。合适地，R3为-NR4R5，其中R4 和R5与同它们相连的N-原子结合到一起形成氮杂环丁烷基；吡咯烷基；哌嗪基；吗啉基； 2,5- 二氢-IH-吡咯基；六氢吡嗪并[2，1-c] [1,4]噁嗪-(IH)-基；异噁唑烷基；六氢吡咯 并[l，2-a]吡嗪-(IH)-基；或2，5-二氮杂二环[2. 2. 1]庚基，其中每个基团可任选被一至 三个R6基团所取代。在本发明的另一实施方案中，R3为-NR4R5，其中R4和R5与同它们相连的N-原 子结合到一起形成1-哌啶基；4-硫代吗啉基；1-吡唑烷基；四氢-5H-[1，3] 二氧杂环 戊烯并[4，5-c]吡咯基；四氢-IH-呋喃并[3，4-c]吡咯-(3H)_基；六氢吡咯并[3， 4-c]吡咯-(IH)-基；六氢吡咯并[l，2-a]吡嗪-(IH)-基；六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-(IH)-基；六氢呋喃并[3，4-b]吡嗪-(2H)-基；八氢-2H-吡啶并[l，2_a]吡嗪基；八 氢吡嗪并[l，2-a]氮杂革-(IH)-基；八氢吡嗪并[2，l-c] [1,4]噁嗪基；八氢-IH-环戊二 烯并[b]吡嗪基；八氢-1(2H)_喹喔啉基；八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶基；3-氮杂二环 [3. 1. 0]己基；2，5- 二氮杂二环[2. 2. 1]庚基；4，7- 二氮杂螺[2. 5]辛基；5-氮杂螺[2. 4] 庚基；或10-氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. 02，6]癸基。合适地，R3为-NR4R5，其中R4和R5与同它们相连的N-原子结合到一起形成任选 被一个或两个各自独立地选自下列的R6基团所取代的氮杂环丁烷基甲基；乙基；氟；甲
氧基；轻基；羟基甲基；环丙基；二甲基氨基；乙基甲基氨基；-CH2- 二甲基氨基；吗啉基；批 咯烷基；-CH2-吡咯烷基；和吡啶基。合适地，R3为-NR4R5，其中R4和R5与同它们相连的N-原子结合到一起形成任 选被一至三个各自独立地选自下列的R6基团所取代的吡咯烷基甲基；甲氧基；-CH2-甲 氧基；羟基；羟基甲基；羟基乙基；二甲基氨基；乙基甲基氨基；-CH2-二甲基氨基；-CH2-吡 咯烷基；-CH2-吗啉基；吡啶基；2-( 二甲基氨基)-1，1_ 二甲基乙基；氟代甲基；-CH2-2-羟 基乙基甲氨基；-CH2-2-甲氧基乙氨基；氰基；-C(O)N(CH3)2；1-( 二甲基氨基)环丙 基；-CH2-乙基甲氨基；-CH2-二乙基氨基；-C(O)N(CH2CH3)2 ；-CH2-哌啶基；-CH2-异丙基甲 氨基；-CH2-丙基甲氨基；-NHCooCH3 ；-CH2-3H-[1，2，3]三唑并[4，5_d]嘧啶_3_基；和(顺 式)-10-氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2'6]癸-4-基。合适地，R3为-NR4R5，其中R4和R5与同它们相连的N-原子结合到一起形成任选 被一至三个各自独立地选自下列的R6基团所取代的哌嗪基甲基；乙基；异丙基；羟基甲 基；轻基乙基；-CH2-O-CH3 ；和-COOCH3。合适地，R3为-NR4R5，其中R4和R5与同它们相连的N-原子结合到一起形成 (9aS)_八氢吡嗪并[2,1-c] [1,4]噁嗪基。在本发明的另一实施方案中，R6为C1-C3烷基，其任选被一至三个R7基团所取代；羟基；C1-C3烷氧基；-C (O)NRaRb ；或-NRaRb。合适地，R6为甲基；乙基；异丙基；甲氧基；羟 基；二乙基氨基；或N，N- 二甲基乙酰氨基(acetamido)。在另一实施方案中，R6为杂芳基。合适地，R6为6-元杂芳基。合适地，R6为吡啶基。在本发明的另一实施方案中，R7为C1-C3烷氧基；轻基；或-NRaRb。合适地，R7为
甲氧基。在另一实施方案中，R7为杂环烃基。合适地，R7为6-元杂环烃基。合适地，R7为 吗啉基。在另一实施方案中，R7为杂芳基。合适地，R7为吡啶基；1，3-噻唑基；噻吩基；呋 喃基；咪唑基；IH-苯并咪唑基；3H-[1，2，3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基；或3H_[1，2，3]三 唑并[4，5-b]吡啶-3-基。在本发明的另一实施方案中，Ra和Rb都为甲基。在本发明的另一实施方案中，Rc为杂环烃基。合适地，Rc为吡咯烷基。本发明的另一实施方案是式(I)化合物，其中Rl 选自C2_C7 烷基和-(CH2) n_C3_C6 环烷基；R2选自C1_C3烷基；环丙基；C1-C3烷氧基；C1-C3卤代烷基；C1-C3烷硫基；5-元 杂芳基；5-元杂环烃基；卤素；羟基甲基；和-NRaRb ；R3选自_NR4R5 ；卤素；苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；和杂芳基，其任 选被一至三个R6基团所取代；R4选自H ；C1-C6烷基，其任选被一个或两个R7基团所取代；C1-C6烷氧基；C3-C6 环烷基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂环烃基，其任选被一至三个R6基团所取代； 杂芳基，其任选被一至三个R6基团所取代；和苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；R5选自H ；C1-C6烷基，其任选被一个或两个R7基团所取代；C1-C6烷氧基；C3-C6 环烷基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂环烃基，其任选被一至三个R6基团所取代； 杂芳基，其任选被一至三个R6基团所取代；和苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；或者R4和R5与同它们相连的N-原子结合到一起形成任选被一至三个R6基团所 取代的杂环烃基；每个R6独立地选自C1_C6烷基，其任选被一至三个R7基团所取代；羟基；C1-C3 烷氧基；-C (O)NRaRb ；-C (O)Rc ；杂环烃基；C3-C6环烷基；氧代基；氰基；-NRaRb ；苯基 ’杂 芳基；和卤素；每个R7独立地选自羟基；C1-C3烷氧基；卤素；苯基；氰基；-NRaRb ；-C(0) NRaRb ；-C(O)Rc ；C3-C6环烷基，其任选被一个羟基、杂环烃基或-NRaRb所取代；杂环烃基； 和杂芳基；每个Ra独立地选自H和C1-C3烷基；每个Rb独立地选自H和C1-C3烷基；每个Rc独立地选自C1_C3烷基；苯基；杂环烃基；和杂芳基；和η为0-2的整数。本发明的另一实施方案为式(I)化合物，其中Rl 为-CH2-环戊基;
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R2选自甲基；乙基；甲硫基；乙硫基；氟代甲基；二氟甲基；I-氟甲基；氯；环丙 基；或甲氧基；R3 为-NR4R5;R4选自H ；C1-C3烷基；环丙基；和任选被一个R6基团所取代的哌嗪基；R5选自H ；C1-C6烷基，其任选被一个或两个R7基团所取代；C1-C6烷氧基；C3-C6 环烷基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂环烃基，其任选被一至三个R6基团所取代； 杂芳基，其任选被一至三个R6基团所取代；和苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；或者R4和R5与同它们相连的N-原子结合到一起形成任选被一至三个R6基团所 取代的杂环烃基；每个R6独立地选自C1_C6烷基，其任选被一至三个R7基团所取代；羟基；C1-C3 烷氧基；-C (O)NRaRb ；-C(O) Rc ； C(O) ORc ；杂环烃基；C3-C6环烷基，其任选被一个-NRaRb或 吡咯烷基所取代；氧代基；氰基；-NRaRb ；苯基；杂芳基；和卤素；每个R7独立地选自羟基；C1-C3烷氧基；卤素；苯基；氰基；-NRaRb ；-C(0) NRaRb ；-C(O)Rc ；C3-C6环烷基，其任选被一个羟基、杂环烃基或-NRaRb所取代；杂环烃基； 和杂芳基，其任选被一个甲基、-NRaRb或羟基所取代；每个Ra各自独立地选自H和任选被一个羟基、甲氧基或二甲基胺所取代的C1-C3
烧基；每个Rb独立地选自H和C1-C3烷基；和每个Rc独立地选自任选被一个甲氧基所取代的C1-C3烷基；苯基；杂环烃基；和
杂芳基。本发明化合物的具体实例包括下列化合物((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_甲基_6_ (1_吡咯烷基)~4~嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；[ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_2_乙基_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-{2-[6-(l-氮杂环丁烷基)_5_氟_2_(甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基哌嗪基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- (2- {2_氯_5_氟_6_ [ (1_甲基乙基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6-(4_吗啉基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5_氟_2_甲基_6_ [甲基(甲氧基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺； ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6_ (2，5_ 二氢-IH-吡咯 基)_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺；
((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_ 氟 _2_ 甲基 _6_ (1，3_ 噻唑烷 _3_ 基)~4~ 嘧啶 基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_2_甲基_6_ [3_ (甲氧基)氮杂环丁烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3R) _3_ (甲氧基)吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3S) _3_ (甲氧基)吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基_6-[(1_甲基乙基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；{(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2_ (5_氟_2_甲基_6_ {甲基[2_ (甲氧基)乙基]氨 基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺；[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [乙基(甲基)氨基]_5_氟_2_甲基_4_嘧啶 基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(2S)-2_(羟基甲基)-1_ 吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- {2- [6-(环丁基氨基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- {2- [6-(环戊基氨基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(3R)-3_(羟基甲基)-1_ 吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(3S)-3_(羟基甲基)-1_ 吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[2-乙基_5_氟_6-(4_甲基哌嗪基)_4_嘧啶 基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；N-[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[2_乙基_5_氟_6-(2_异噁唑烷基)_4_嘧啶 基]胼基}-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3R) _3_ ( 二 甲基氨基)_1_ 吡咯烷 基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3S) _3_ ( 二 甲基氨基)_1_ 吡咯烷 基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙基 _5_ 氟 _6_ [ (3S) _3_ 羟基 吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙基 _5_ 氟-6- [ (3R) -3-羟基-1-吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺； N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [6_ (环丙基氨基)_2_乙基_5_氟_4_嘧啶基]
29胼基}-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ {2_ [2~ 乙基 _6_ (4_ 乙基 哌嗪基)_5_ 氟 _4_ 嘧 啶基]胼基}-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2_ {2-乙基 _5_ 氟 _6_ [4_ (2_ 羟基乙基)哌嗪 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；^[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[2-乙基_5_氟_6_(甲氨基)_4_嘧啶基]胼 基} -3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；^[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[2-乙基_6_(乙氨基)_5_氟_4_嘧啶基]胼 基} -3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；^[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{2-乙基_5_氟_6-[4-(1_甲基乙基)_1_哌嗪 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；1-(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基} -2-乙基-5-氟-4-嘧啶基)-N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺；N-{(2R)-2_(环戊基甲基)-3-[2-(6-{[2_( 二甲基氨基)乙基](甲基)氨 基} -2-乙基-5-氟-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基} -N-羟基甲酰胺；N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3S) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_2_ 乙 基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；N-[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(3R)-3，4- 二甲基 哌嗪基]_2_ 乙 基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺；((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-6-(4_甲基哌嗪基)_2_(甲硫 基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [6_ (乙氨基)_5_氟_2_ (甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_6_ (甲氨基)_2_ (甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟 _6_ [ (3S) _3_ 羟基 吡咯烷基]_2_ (甲硫 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_[6_ ( 二甲基氨基)_5_氟_2_ (甲硫基)_4_嘧啶 基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_ (甲硫基)_6_ (丙氨基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-6-{[2-(甲氧基)乙基]氨基}_2_(甲硫 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺；1-[6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]-N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟 _6_ [ (3R) _3_ 羟基 吡咯烷基]_2_ (甲硫 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺；((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(3R)-3_( 二甲基氨基)_1_ 吡咯烷 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺；
((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(4_乙基哌嗪基)_5_氟_2_(甲硫 基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；[ (2R) -3- {2- [2_氯_5_氟_6_ (4_吗啉基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_2_氯_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基 甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- {2- [2_氯_6_ (4_乙基哌嗪基)_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(2_羟基乙基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- (2- {2_氯_5_氟_6_ [3_ (甲氧基)氮杂环丁烷基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2幻-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{甲基[2_(甲氧基)乙基]氨基} _4_嘧啶基)胼 基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[(8aS)-六氢吡咯并[l，2_a]吡 嗪-2 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R) -3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[ (1S，4S) _5_ 甲基 _2，5- 二氮杂二环[2. 2. 1] 庚-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；1-{6-氯-2-[2_((210-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-4-嘧啶基} -N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺； [ (2R) -3- {2- [2_氯_5_氟_6_ (丙氨基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_ [ (3S) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-(2-{2-氯 _6_[ (3R) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-(2-{2-氯 _6_[ (2S) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-(2-{2-氯 _6_[ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；和[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(9aS)_ 六氢卩比嗪并[2，l_c] [1，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；或其盐。本发明的一个实施方案是化合物[(2R)-2_(环戊基甲 基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其盐。本发明另一实施方案是化合物[(2R) -3- (2- {2_氯_6_ [ (2R) _2，4_ 二甲基哌 嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其盐。本发明另一实施方案是化合物[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (2R) _2，4_ 二 甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其盐。
本发明的另一实施方案是化合物[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基_4，7_ 二 氮杂螺[2. 5]辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 或其盐。本发明的另一实施方案是化合物((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲 基-6- (4-甲基-4，7- 二氮杂螺[2. 5]辛-7-基)~4~嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基 甲酰胺或其盐。化合物制备根据式I的化合物使用常规的有机合成制备。合适的合成路线描述在下面的一般 反应方案中。本领域熟练技术人员将会理解，如果在此所述的取代基不与在此所述的合成方法 相匹配，那么该取代基可以用合适的、对反应条件稳定的保护基保护。在反应工序中，所述 的保护基可以在合适的时刻除去，以便得到所需中间体或目标化合物。合适的保护基以及 使用这些合适的保护基保护和脱保护不同取代基的方法是本领域熟练技术人员公知的；其 实例可以在 T. Greene 禾口 P. Wuts, ProtectinR Groups in Chemical Synthesis (3rd ed.)， John Wiley &Sons, NY(1999)中找到。在有些情况下，可以特定地选择取代基以便在所使 用的反应条件下是活性的。在这些情况下，所述的反应条件将所选的取代基转化成另一种 取代基，该另一种取代基作为中间体化合物是有用的或者在目标化合物中是一种所需的取 代基。方案1 如方案1中所示，(11)可通过下面方法制备在碱如正丁基锂的存在下，使合适的 酰氯(2)与手性试剂如(S)-(-)-4-苄基-2-噁唑烷酮(Evans'手性噁唑烷酮)反应得到 手性中间体(3)。在螯合剂如四氯化钛存在下，在溶剂如四氢呋喃中，用碱如二异丙基乙胺 处理化合物(3)，随后加入亲电子试剂如苄氧基甲基氯，得到化合物(4)。化合物(4)向相 应的羟基酸(7)的转化可通过下列一系列的反应完成使用例如H2O2和氢氧化锂氧化裂解 手性噁唑烷酮分别得到中间体(5)，随后通过氢解得到中间体(7)。按照另一种两步的方法 也可将化合物(3)转化为中间体(7)。对于该转化，可在螯合剂如四氯化钛存在下，在溶剂 如四氢呋喃中，将(3)用碱如二异丙基乙胺处理，随后加入三噁烷或合适的另外的甲醛等 价物(alternative formaldehyde equivalent)，得到化合物(6)，然后使用例如H2O2和氢氧化锂氧化裂解手性噁唑烷酮分别得到酸(7)。在偶合剂如EDC和DMAP存在下使用苄氧基胺偶合酸(7)得到酰胺(8)。使用 Mitsunobu条件可将其环化为氮杂环丁烷-2-酮(9)。在合适的溶剂中使用例如氢氧化锂 水解氮杂环丁烷-2-酮(9)得到相应的酸(10)。化合物(10)向产物(11)的转化可使用合 适的甲酰化试剂如甲酸/乙酸酐或甲酸甲酯，在纯的反应试剂中或在合适的溶剂如二氯甲 烷中来完成。方案2 如方案2中所示，THP-保护的中间体(15)可通过下面方法制备在合适的溶剂如 乙醇中使用催化剂如10%Pd/C氢化氮杂环丁烷-2-酮(9)得到(12)。在酸催化剂如对甲 苯磺酸吡啶鐺盐下，在合适的溶剂如二氯甲烷中，用二氢吡喃处理(12)得到THP-保护的氮 杂环丁烷-2-酮(13)。使用例如氢氧化锂在合适的溶剂中水解氮杂环丁烷-2-酮(13)得 到相应的酸(14)。化合物(14)向产物(15)的转化可使用合适的甲酰化试剂如甲酸/乙酸 酐或甲酸甲酯，在纯的反应试剂中或在合适的溶剂如二氯甲烷中来完成。化合物(14)向产 物(15)的转化也可在合适的溶剂如丙酮中使用5-甲基-2-硫代-[1，3，4]噻二唑-3-甲 酸(Yazawa, Hisatoyo ；Goto, Shunsuke ；Tetrahedron Lett. 26 ；31 ； 1985 ；3703-3706)作为 甲酰化试剂来完成。中间体(15)也可根据文献方法[Bracken, Bushell, Dean, Francavi 11a, Jain, Lee, Se印ersaud，Shu, Sundram, Yuan ；PCT Int. App 1. (2006)，WO 2006127576A2]制备。方案3 如方案3中所示，使用条件如EDC-HOAt-NMM将手性酸(11或15)与嘧啶基胼(16， R2 =烷基、卤素、H)偶合得到酰胼(17或18)。最后进行脱保护基反应(当P为Bn时，使 用催化剂如10% Pd/C，在合适的溶剂如乙醇中，进行氢解；当P为THP时，在室温或40°C下 使用80%乙酸-水处理)，得到其中R2 =烷基、卤素、H的最终所需的化合物(1)。本领域一般技术人员根据文献方法可制备通式结构(16)的胼。下面的胼(16)的 具体结构的实例以及用于生成它们的合成方法只是用于解释说明并不构成对本发明范围 的限制。其中R2为烷基且R3为氨基(R4R5N)的胼(24)可由合适的前体按照方案4中所 述的方法制备。 方案4 如方案4中所示，R2为氢或烷基的胼(24)可根据下面方法制备使市售可得的氟 代丙二酸酯(19)与合适的脒(20)在碱性条件下进行缩合，得到嘧啶酮(21)。脒(20)是市 售可得的或可由本领域一般技术人员根据文献方法制备得到。使用POCl3处理嘧啶酮(21) 得到二氯嘧啶(22)。在室温下在合适的溶剂如甲醇或DMSO中使用所需的胺R4R5NH处理二 氯嘧啶(22)，随后在合适的溶剂如DMSO中，通常使用加热进一步用胼一水合物处理，然后 得到其中R2为氢或烷基的所需的产物(24)。式(30)的胼[(16)，其中R2 =氯]可按照方案5或6所示的方法制备。方案5
FFF
,0tSr0、NaOMe ΗΟ·νΛ^ΟΗ M^NPh CI-^A^CI NH2NHBoc1 DIPEA Cl^ X Jj Boc 1.97 当量(Boc)^
O O -Τι I -\\ T -—-Tl T H2.0 当"tDIPEA
(19)μθοη νγνν^,νthfν^νο,ιι ομαρ
+OHClClCH2CI2
9(25)(26)(27)
H2N NH3
F BocF BOCΡ η
R4Ft5NH-DIPEA . R广nY^VnWboc HC1/二觀她？η Κ τΝγ^γΝ、ΝΗ2 Jx Boc ~DMF, (TC至室kν' N Boc“N丫N ‘
ClClCl
(28)(29)(30)在碱性条件下使市售可得的氟代丙二酸酯(19)与脲缩合得到嘧啶酮(25)。将嘧 啶酮(25)用POCl3处理得到三氯嘧啶(26)。在室温下在合适的溶剂如THF中用Boc-保护 的胼和二异丙基乙胺处理三氯嘧啶(26)，得到中间体(27)。在二异丙基乙胺和DMAP存在 下，在合适的溶剂如二氯甲烷中，进一步用焦碳酸二叔丁酯(di-t-butyl dicarbonate)处 理，然后得到所需的三-Boc-保护的产物(28)。在合适的溶剂如DMF中使用胺R4R5NH处理 (28)，得到嘧啶(29)，并在酸性条件下对(29)进行脱保护基，随后进行碱性条件的后处理， 得到所需的胼(30)。或者，式(30)的胼可按照方案6中所示的制备。方案6
34 在室温下，在合适的溶剂如DMSO中，用所需的胺R4R5NH处理三氯嘧啶(26)，随后 进一步用胼一水合物处理并加热，得到所需的产物(30)以及区域异构(regioisomeric)产 物(32)。这两个区域异构体通常可通过色谱法如HPLC分离。
其中R2为甲硫基或甲氧基的最终化合物(1)可按照方案7中所示的制备。 方案7 在碱性条件下，将市售可得的氟代丙二酸酯(19)与O-甲基异脲半硫酸盐或S-甲 基异硫脲半硫酸盐进行缩合，得到嘧啶酮(33)，其中R2分别为甲氧基或甲硫基。用POCl3 处理嘧啶酮(33)得到二氯嘧啶(34)。在合适的溶剂如甲醇中用胼一水合物处理二氯嘧啶 (34)，得到嘧啶基胼(35)，然后使用条件如EDC-HOAt-NMM将其与酸(11)或(15)偶合，得 到中间体(36)。将R4R5NH加入到中间体(36)中，得到O-Bn-保护的或O-THP-保护的产 物(37)。当P为Bn时，最终的脱保护基的反应通过在合适的溶剂如乙醇中，使用催化剂如 10% Pd/C进行氢解；或者当P为THP时，在室温下或40°C下用80%乙酸-水处理，得到其 中R2分别为甲氧基或甲硫基的最终的所需化合物(1)。胺R4R5NH可购自商业上可获得的来源，由本领域的一般技术人员根据文献方法 制备，或按照文中实施例中所述的方法制备。使用方法本发明的化合物是细菌的肽脱甲酰化酶(PDF)的抑制剂，并因此能够抑制细菌 生长。这些化合物能用于治疗其中所述的潜在病状(至少在某种程度上)可归因于(即原因为)多种原核生物的感染性疾病。实例包括但不限于源自下列的革兰氏阳性和革 兰氏阴性需氧和厌氧细菌链球菌属(Str印tococcus)例如肺炎链球菌(S. pneumoniae) 和酿脓链球菌(S. pyogenes)，葡萄球菌属(Staphylococcus)例如金黄色葡萄球菌 (S. aureus)、表皮葡萄球菌(S. epidermidis)禾口腐生葡萄球菌(S. saprophyticus),莫拉 菌属(Moraxella)例如粘膜炎莫拉氏菌(M. catarrhal is)，嗜血杆菌属(Haemophilus)例 如流感嗜血菌(H. influenzae)，奈瑟氏菌属(Neisseria)，枝原体属(Mycoplasma)例如肺 炎枝原体(M. pneumoniae)，军团菌属(Legionella)例如嗜肺军团菌(L. pneumophila)，衣 原体属(Chlamydia)例如肺炎衣原体(C. pneumoniae)，拟杆菌属(Bacteroides)，梭菌属 (Clostridium)，梭杆菌属(Fusobacterium)，丙酸杆菌属(Propionibacterium 禾口消化链球 菌属(Peptostreptococcus)。合适地，本发明的化合物可用于治疗由链球菌属所引起的细菌感染，更合适地，本 发明的化合物可用于治疗由肺炎链球菌或酿脓链球菌所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由葡萄球菌属所引起的细菌感染，更合适地， 本发明的化合物可用于治疗由金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌或腐生葡萄球菌所引起的细 菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由莫拉菌属所引起的细菌感染，更合适地，本 发明的化合物可用于治疗由粘膜炎莫拉氏菌所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由嗜血杆菌属所引起的细菌感染，更合适地， 本发明的化合物可用于治疗由流感嗜血菌所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由奈瑟氏菌属所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由枝原体属所引起的细菌感染，更合适地，本 发明的化合物可用于治疗由肺炎枝原体所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由军团菌属所引起的感染细菌，更合适地，本 发明的化合物可用于治疗由嗜肺军团菌所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由衣原体属所引起的细菌感染，更合适地，本 发明的化合物可用于治疗由肺炎衣原体所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由拟杆菌属所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由梭菌属所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由梭杆菌属所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由丙酸杆菌属所引起的细菌感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗由消化链球菌属所引起的细菌感染。本发明的化合物也可用于治疗由对β -内酰胺、喹诺酮、大环内酯类、酮内酯类、 糖肽和噁唑烷酮类抗生素耐药的细菌所引起的细菌感染。抗细菌感染的药物包括但不限于 对青霉素、大环内酯或左氧氟沙星耐药的肺炎链球菌；对甲氧西林或大环内酯耐药、以及对 万古霉素中度耐药的金黄色葡萄球菌；对甲氧西林耐药的表皮葡萄球菌；和对噁唑烷酮耐 药的金黄色葡萄球菌。本发明的化合物可用于治疗哺乳动物特别是人中的细菌感染。这种感染包括但不 限于耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道和下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染和细菌 性心内膜炎。本发明的 合物也可用于预防哺乳动物特别是人中的细菌感染，如可能由医疗和牙科程序所引起的细菌感染。 合适地，本发明的化合物可用于治疗耳朵感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗鼻窦炎。合适地，本发明的化合物可用于治疗上呼吸道和下呼吸道感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗生殖器感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗皮肤和软组织感染。合适地，本发明的化合物可用于治疗细菌性心内膜炎。本发明的治疗方法，特别是治疗感染性疾病包括细菌感染的方法包括给药于需要 该治疗的患者有效量的式I化合物或其药学上可接受的盐。本发明的一个实施方案提供了在人中治疗细菌感染的方法，所述方法包括 将[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受 的盐给药于需要该治疗的人。本发明的另一实施方案提供了在人中治疗细菌感染的方法，所述方法包括将 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐给药于需要该治疗的人。本发明的另一实施方案提供了在人中治疗细菌感染的方法，所述方法包括将 [(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐给药于需要该治疗的人。本发明的另一实施方案提供了在人中治疗细菌感染的方法，所述方法包括将 [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基 _4，7-二氮杂螺[2. 5]辛 _7_ 基)-4-嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐给药于需要该治 疗的人。本发明的另一实施方案提供了在人中治疗细菌感染的方法，所述方法包括 将((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6-(4_甲基_4，7_ 二氮杂螺[2. 5] 辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐给药于需 要该治疗的人。如文中所用的“感染性疾病”指的是其特征在于存在有微生物感染如细菌感染的 任何疾病。在此所使用的"治疗"与疾病有关，是指(1)改善或预防疾病或疾病的一个或 多个生物学表现，(2)干涉(a)生物学级联(biological cascade)的一个或多个点，其引 起疾病或是造成疾病的原因或(b)疾病的一个或多个生物学表现，(3)减轻与疾病有关的 一个或多个症状或影响，或(4)减缓疾病的进展或疾病的一个或多个生物学表现。如上所述的疾病的"治疗"包括该疾病的预防。本领域熟练技术人员将会理 解，“预防"不是绝对的术语。在医学中，“预防"被理解为是指预防性给予药物以显著 削弱疾病或其生物学表现的可能或严重程度，或延迟这种疾病或其生物学表现的发病。在此所使用的关于本发明化合物的"有效量"是指在正确的医学判断范围内， 足以治疗患者的疾病但同时足够低以避免严重副作用(合理的益处/风险比)的化合物 数量。化合物的有效量将随所选择的具体化合物(例如考虑该化合物的药效、效力和半衰期)；所选择的给药途径；所治疗的疾病；所治疗疾病的严重程度；所治疗患者的年龄、大 小、体重和身体状态；所治疗患者的病史；治疗的持续时间；联合治疗的性质；所需的治疗 效果等因素而变化，但通常可由本领域熟练技术人员确定。在此所使用的"患者"是指人或其它动物。本发明的化合物可以通过任何合适的给药途径给予，包括全身性给药和局部给 药。全身性给药包括口服给药、肠胃外给药、经皮给药、直肠给药和吸入给药。肠胃外给药 是指除肠道给药、经皮给药或吸入给药以外的给药途径，并且典型地通过注射或输液给药。 肠胃外给药包括静脉内、肌内和皮下注射或输液。吸入给药是指通过口腔或通过鼻通道吸 入给药于患者的肺。局部给药包括施用于皮肤和眼内、阴道内和鼻内给药。本发明的化合物可以给药一次，或根据给药方案，在规定的时间内以可变的时间 间隔多次给药。例如，每日可以给药一次、二次、三次或四次。可以一直给予剂量，直到实现 所需的疗效为止，或者无期限地给药以维持所需的疗效。本发明化合物的合适的给药方案 取决于该化合物的药物动力学性质，例如吸收、分布和半衰期，其可以由本领域熟练技术人 员确定。此外，对于本发明的化合物，合适的给药方案，包括这些给药方案的持续时间，将取 决于所治疗的疾病、所治疗疾病的严重程度、所治疗患者的年龄和身体状态、所治疗患者的 病史、同步疗法(concurrent therapy)的性质、所需的疗效等因素，这些都在本领域熟练技 术人员知识和技术的范围内。本领域熟练技术人员可以进一步理解，考虑个体患者对给药 方案的反应后，合适的给药方案可能需要调整，或者随时间由于个体患者需要的改变而调
iF. ο典型的日剂量可以随所选择的具体给药途径而改变。对于口服给药来说，典型的 日剂量为对于大约70kg体重的人，每天给药50mg-3g范围内的，合适地，100mg-2g范围内的 本发明的化合物。此外，可以前药的形式给予本发明的化合物。在此所使用的本发明化合物的"前 药"是该化合物的功能衍生物，当将它给予患者时，其在体内最终释放出本发明的化合物。 以前药的形式给予本发明的化合物可以使本领域熟练技术人员去做下列一个或多个(a) 改变化合物在体内的开始；(b)改变化合物在体内的作用持续时间；(c)改变化合物在体内 的运输或分布；(d)改变化合物在体内的溶解度；以及(e)克服化合物的副作用或化合物所 遇到的其它难点。用于制备前药的典型的功能衍生物包括修饰在体内化学或酶裂解的化合 物。这些修饰，其包括磷酸酯、酰胺、酯、硫代酯、碳酸酯和氨基甲酸酯的制备，是本领域熟练 技术人员公知的。本发明还提供了在医学治疗特别是在细菌感染中使用的本发明的化合物。因此， 另一方面，本发明涉及式I的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗细菌感染的药 物中的用途。如上所述，根据式I的化合物是PDF抑制剂，并可用于治疗细菌感染。根据式I的 化合物的生物活性可使用合适的试验如那些测定PDF的酶活性的抑制作用的试验以及那 些评价本发明化合物抑制体外或在感染的动物模型中的细菌生长的能力的试验来确定。相比WO 03/101442中的实施例，本发明的某些实施例具有更高的体外抗菌活性 (MIC和/或MIC90)和/或更好的体内效力。这些实施例包括但不限于下列这些化合物[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_ [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2. 5]辛 _7_ 基)_4_ 嘧啶 基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；和((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟 _2_ 甲基 _6_ (4-甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2. 5] 辛-7-基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。PDF IC50 试验PDF的酶活性是使用甲酸脱氢酶(FDH)-偶联测定法[Lazermec and Meinnel (1997)Anal. Biochem. 244,180-182]测量的。一旦甲酸(formate)通过 PDF 从蛋 氨酸中释放出来，其被FDH氧化，从而将一分子的NAD还原为NADH，并导致在340nm处的吸 光度增加。通过将PDF加入到含有所有的其他反应组分的微量滴定板中以引发反应，并于 25°C连续监测20分钟。金黄色葡萄球菌PDF(SaPDF)测定的最终反应组合物为50mM磷酸 钾，pH 7. 6，5 单位 /mL FDH, 7mM NAD, 5% DMSO, InM SaPDF 和 2. 9mM 甲酰基-Met-Ala-Ser， 在50 μ L的总体积中。在DMSO中完成抑制剂的系列稀释。反应试剂和测定方式与流感嗜 血菌PDF相同，除了在最终反应组合物中甲酰基-Met-Ala-Ser是6mM以外。在肺炎链球菌 PDF测定中，反应条件相似，但是含有30pM酶，2mM NAD和4mM甲酰基-Met-Ala-Ser。变化 的甲酰基-Met-Ala-Ser浓度反映了使用不同的PDF同工酶的底物的Km值。通过拟合成下 面的公式来确定IC5tl: %抑制=100/1+(IC5Q/[I])S，其中s是坡度因子，I是抑制剂浓度， 并且IC5tl是引起50%抑制的化合物浓度。结果实施例1-281的化合物抑制金黄色葡萄球菌、流感嗜血菌和肺炎链球菌的PDF活 性为 IC50s ( IOOnM0抗菌活性试验使用临床实验室标准委员会(CCLS，以前称为NCCLS)推荐的方法(NCCLS文件 M7-A6, “ Methods for Dilution Susceptibility Tests for Bacteria that Grow Aerobically-Approved Standard Sixth Edition"，2003)，通过肉汤微稀释测定全细胞 抗菌活性。在从64到0.06 μ g/mL范围内的连续二倍稀释液中测试化合物。在试验中评 价了 12个菌株的组。该组含有下列实验室菌株金黄色葡萄球菌Oxford，金黄色葡萄球菌 WCUH29、粪肠球菌I、粪肠球菌7、流感嗜血菌Q1、流感嗜血菌NEMC1、粘膜炎莫拉氏菌1502、 肺炎链球菌1629、肺炎链球菌W387、肺炎链球菌Ery2、大肠杆菌7623 (AcrABEFD+)和大肠 杆菌120 (AcrAB-)。测定最小抑制浓度(MIC)作为抑制可见生长的化合物的最低浓度。使 用镜式读数器辅助确定MIC终点。结果实施例1-281中的每个化合物对至少一个上述所列出的生物具有最小抑制浓度 (MIC) < 4μ g/mL。除了粪肠球菌I和粪肠球菌7以外，对于上述所列出的所有生物的至少 一种菌株，至少一个实施例具有MIC < 4 μ g/mL ；而对于粪肠球菌I和粪肠球菌7，大多数实施例具有MIC彡16μ g/mL。具体实施例的抗菌活性数据(MIC以μ g/mL为单位)在表2中给出。表2 *MIC数据以所获得的所有结果的中值表示。感染的动物模型所有的操作根据GSK动物管理和使用委员会(Institutional Animal Care andUse Committee)批准的试验设计进行，并且符合或超出了美国实验动物管理与评估协会 (American Association for the Accreditation of Laboratory Animal Care) (AMLAC)、 美国卫生及公共月艮务部(United States Department of Health and Human Services)禾口 所有的地方和联邦的动物福利法的标准。具有流感嗜血菌或肺炎链球菌的大鼠呼吸道感染(RTI)模型在该模型中，通过将在100 μ L琼脂中的2-3xl06细菌CFU/大鼠直接支气管内滴 注到肺部[G. Smith(1991)Lab Animals vol 25，46-49]来将麻醉的大鼠(雄性 Sprague Dawley [Crl :CD(SD]100g) (Charles River)感染。从感染后1小时开始，通过每天两次共4 天经口灌胃(oral gavage)不同量的化合物(范围为37. 5至300mg/kg的2-倍稀释液)来 给药于动物(每组η = 6)。按照相同的方案以稀释液给药于对照动物。在感染后96小时使 大鼠安乐死，并无菌移出肺，并将肺在ImL的无菌盐水中使用stomacher仪器勻浆。在无菌 盐水中制备10倍连续稀释液以计算存活的细菌数。已经显示该大鼠肺感染模型能够预测 人中的由肺炎链球菌所引起的社会获得性肺炎(CAP)的效力[Hoover J. L.，C. Mininger, R.Page, R. Straub, S. Rittenhouse, and D. Payne. (2007). AbstractA-17. Proceedings of the 47th ICAAC, Chicago, Illinois]。皮肤和软组织感染(SSTI)的鼠腹股沟金黄色葡萄球菌脓肿模型在该模型中，通过皮下方式在腹股沟区域使麻醉的小鼠(雄性⑶l，20g) (Charles River)感染半固态琼脂中的金黄色葡萄球菌(IxlO6CFU/小鼠)(Jarvest, R. L.，Berge, J. Μ. , Berry, V. , Boyd, H. F. , Brown, Μ. J. , Elder, J. S. , Forrest, A. K. , Fosberry, A. P., Gentry, D. R. , Hibbs, M. J. , Jaworski, D. D. , 0，HanIon, P. J. , Pope, A. J. , Rittenhouse, S. Sheppard, R. J.，Slater-Radosti，C. andfforby, A. (2002) J. Med Chem.，45，1959-1962)。 从感染后1小时开始，通过每天两次经口灌胃(oral gavage)不同量的化合物(范围为 37. 5至300mg/kg的2-倍稀释液)来给药于动物(每组η = 6)。按照相同的方案以稀释 液给药于对照动物。在感染后96小时使小鼠安乐死，无菌移出脓肿并勻浆。在无菌盐水中 制备10倍连续稀释液以计算存活的细菌数。结果已经证明了文中所述的一些实施例化合物在一个或多个上述感染的动物模型中 经口给药的效果，相对于未处理的对照动物，实施例化合物将从肺或脓肿中回收的细菌数 减少彡 31og1(lCFU/mL。组合物在给药于患者之前，通常将本发明的化合物，但不是必须，配制成药物组合物。因 此，在另一方面中，本发明涉及包含本发明化合物及一种或多种药学上可接受的赋形剂的 药物组合物。本发明的药物组合物可以以成批形式制备和包装，其中可以提取安全和有效量 的本发明化合物，然后以粉剂或糖浆的形式给予患者。或者，本发明的药物组合物可以以 单位剂型的形式制备和包装，其中每个物理上分开的单元含有安全和有效量的本发明化合 物。当以单位剂型制备时，本发明的药物组合物典型地可以含有，例如，25mg-l. 5g，合适地， 100mg-500mg的本发明化合物。本发明的药物组合物典型地含有一种本发明化合物。然而，在某些实施方案中，本
43发明的药物组合物可含有不止一种本发明化合物。例如，在某些实施方案中，本发明的药物 组合物可含有两种本发明的化合物。此外，本发明的药物组合物可以任选进一步包含一种 或多种其它的药学活性化合物。在此所使用的"药学上可接受的赋形剂"是指药学上可接受的物质、组合物或载 体(vehicle)，例如它们用于产生药物组合物的形状或一致性。当混入时，每种赋形剂必须 与药物组合物中的其它组分相容，这样将避免当给药于患者时显著降低本发明化合物效力 以及导致不是药学上可接受的药物组合物的相互作用。此外，每种赋形剂当然必须具有足 够高的纯度，以使得它是药学上可接受的。典型地，将本发明化合物和药学上可接受的一种或多种赋形剂配制成一种剂型， 该剂型适合通过所需的给药途径给药于所述患者。例如，剂型包括适合于(1) 口服给药例 如片剂、胶囊、小胶囊、丸剂、锭剂、粉剂、糖浆、酏剂、悬浮液、溶液、乳剂、囊剂和扁囊剂；(2) 肠胃外给药例如无菌溶液、悬浮液和重构(reconstitution)的粉剂；(3)经皮给药例如经 皮贴片；(4)直肠给药例如栓剂；(5)吸入给药例如干粉、气雾剂、悬浮液和溶液；以及(6) 局部给药例如乳剂、膏剂、洗液、溶液、糊剂、喷雾剂、泡沫和凝胶剂的那些剂型。合适的药学上可接受的赋形剂将随所选择的具体剂型而改变。此外，可以选择合 适的药学上可接受的赋形剂，以便它们在组合物中可起特定的作用。例如，可以选择某些药 学上可接受的赋形剂，这些赋型剂能够促进生成均勻的剂型。可以选择某些药学上可接受 的赋形剂，这些赋型剂能够促进生成稳定的剂型。可以选择某些药学上可接受的赋形剂，一 旦给予患者，它们能够促进本发明的一个或多个化合物从一种器官或身体的一部分携带或 输送到另一器官或身体的另一部分。可以选择某些药学上可接受的赋形剂，它们能够增强 患者的顺应性。合适的药学上可接受的赋形剂包括下列类型的赋形剂稀释剂、填料、粘合剂、崩 解剂、润滑剂、助流剂、成粒剂、包衣剂、润湿剂、溶剂、共溶剂、助悬剂、乳化剂、甜味剂、调味 剂、味道掩蔽剂、着色剂、抗结块剂、hemectants、螯合剂、增塑剂、增粘剂、抗氧化剂、防腐 剂、稳定剂、表面活性剂和缓冲剂。本领域熟练技术人员将会理解，某些药学上可接受的赋 形剂可以起不止一种作用，并且根据制剂中赋形剂量的多少以及制剂中存在的其它组分， 可以起可供选择的作用。本领域熟练技术人员能够选择合适的药学上可接受的赋形剂以合适的量用于本 发明中。此外，本领域熟练技术人员可以从许多描述药学上可接受的赋形剂的地方获得资 源并可用于选择合适的药学上可接受的赋形剂。实例包括Remington' s Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives(Gower Publishing Limited)禾口 The Handbook of Pharmaceutical Excipients(the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press)0本发明的药物组合物使用本领域熟练技术人员已知的工艺和方法进行制备。在 本领域中使用的一些通用方法描述在ReminRton' s Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company)中。一方面，本发明涉及固体口服剂型如片剂或胶囊，其包含安全和有效量的本发明 化合物和稀释剂或填料。合适的稀释剂和填料包括乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、山梨糖醇、淀粉(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶凝化的淀粉)、纤维素及其衍生物(例如微晶纤维 素)、硫酸钙和磷酸氢钙。所述的口服固体剂型可以进一步包含粘合剂。合适的粘合剂包括 淀粉(例如玉米淀粉、马铃薯淀粉和预胶凝淀粉)、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸、西黄 蓍胶、瓜尔胶、聚维酮和纤维素及其衍生物(例如微晶纤维素)。所述的口服固体剂型可以 进一步包含崩解剂。合适的崩解剂包括交聚维酮、淀粉羟基乙酸钠、交联甲羧纤维素、海藻 酸和羧甲基纤维素钠。所述的口服固体剂型可以进一步包含润滑剂。合适的润滑剂包括硬 脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙和滑石粉。如果合适的话，可以对口服给药的剂量单位制剂进行微胶囊化。例如，通过将粒状 物质包衣或包埋在聚合物、蜡等中，可以延长或维持该组合物的释放。本发明化合物还可以与作为靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。这些聚合物 可以包括聚维酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或 被棕榈酰残基取代的聚氧化乙烯多聚赖氨酸。此外，本发明的化合物可以与在获得控制 释放药物中使用的一类可生物降解的聚合物偶合，例如，聚乳酸、聚己内酯(pol印silon caprolactone)、多羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的 交联或两亲嵌段共聚物。在另一方面中，本发明涉及液体口服剂型。口服液体如溶液、糖浆和酏剂可以以剂 量单位形式制得，这样给定的数量中含有预定量的本发明化合物。糖浆可以通过将本发明 化合物溶解在适当调味的水溶液中制得，而酏剂通过使用无毒性醇赋形剂制得。悬浮液可 以通过将本发明化合物分散在无毒性赋形剂中进行配制。还可以加入增溶剂和乳化剂如乙 氧基化异硬脂醇和聚氧乙烯山梨糖醇醚、防腐剂、调味添加剂如薄荷油或天然甜味料或糖 精或其他人工甜味料等。另一方面，本发明涉及肠胃外给药。适合于肠胃外给药的药物组合物包括含水和 无水无菌注射液，其可以含有抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂和溶质，其使得所述制剂与所指定 的接受者的血液等渗；并且含水和无水无菌悬浮液可以包括助悬剂和增稠剂。所述的组合 物可以在单位_剂量或多剂量容器，例如密封的安瓿和药瓶中存在，并且可以在冻干(冷冻 干燥)条件下存储，其仅需要在使用前立即加入无菌液体载体，例如注射用水。临时注射溶 液和悬浮液可以由无菌粉剂、粒剂和片剂制备。另一方面，本发明涉及药物组合物，其含有[(2R)-2_(环戊基甲 基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形 剂。合适地，可将[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学 上可接受的盐配制为用于口服给药，合适地，配制为液体或片剂形式，或者配制为用于肠胃 外给药。另一方面，本发明涉及药物组合物，其含有[(2R) -3- (2- {2_氯_6_ [ (2R) _2， 4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙 基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。合适地，可将 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐配制为用于口服给药，合适地，配制为液体或片剂形式，或者配制为用于肠胃外给药。另一方面，本发明涉及药物组合物，其含有[(2R)-2_(环戊基甲 基)-3-(2-{6-[(2R)-2，4- 二甲基-1-哌嗪基]_5_氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)_3_氧 代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。合适地，可将 [(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐配制为用于口服给药，合适 地，配制为液体或片剂形式，或者配制为用于肠胃外给药。另一方面，本发明涉及药物组合物，其含有[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲 基-4，7-二氮杂螺[2. 5]辛-7-基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代 丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。合适地，可将 [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基-4，7-二氮杂螺[2. 5]辛 _7_ 基)-4-嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐配制为用于口服 给药，合适地，配制为液体或片剂形式，或者配制为用于肠胃外给药。另一方面，本发明涉及药物组合物，其含有((2R)-2_(环戊基甲 基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-(4-甲基_4，7-二氮杂螺[2. 5]辛_7_基)-4-嘧啶基]胼 基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的赋形剂。合适 地，可将((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6- (4-甲基-4，7- 二氮杂螺[2. 5] 辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐配制为用 于口服给药，合适地，配制为液体或片剂形式，或者配制为用于肠胃外给药。多晶型已发现3个具有特征的并可再制的[(2R)-2_(环戊基甲 基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的固态多晶型。这三种多晶型为多晶型1、多晶型 2和多晶型3。多晶型1是可由[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并 [2，l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺 在醚、乙酸酯、酮、长链醇和其他溶剂系统(例如硝基甲烷、乙腈、2-丁酮、乙酸甲酯、乙酸乙 酯、乙醚、庚烷、碳酸二甲酯、叔丁基乙基醚、1-甲氧基-2-丙醇、2-甲氧基乙基醚、氯仿、氯 代苯、四氢呋喃、甲苯、环己烷和环己酮)中的淤浆制备得到的晶型。分析发现了 [(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2， l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺在乙 酸乙酯中的溶剂合物形式。乙酸乙酯溶剂合物的去溶剂化作用可通过真空过滤完成，并得 到多晶型1。多晶型2是可由[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2， l-c][l，4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺在水 中的淤浆制备得到的晶型。多晶型3是可由[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并 [2，l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺 在纯净的小分子醇系统如甲醇、1-丙醇和1-丁醇中的淤浆制备得到的晶型。虽然确切的水含量的阀值没有确定，但这些醇必须几乎不含或完全不含有水含量以避免生成多晶型2。 将多晶型1加热至高于132°C (但不高于 185°C，其将导致化合物分解)会引起由多晶型 1向多晶型3的放热的固体形式的转化。本发明提供了基本上为纯的形式的[(2R)-2_(环戊基甲 基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型1、多晶型2或多晶型3。本发明还提 供 了 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2-{5-氟-6- [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [ 1，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的混合物，其包括 多晶型1、多晶型2和多晶型3中的两种或更多种。在一个实施方案中，该混合物可包括多 晶型 1 和多晶型 2。该混合物可包括 1、2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、70、 75、80、85、90、95、97或大于约99%的多晶型1或多晶型2。在另一实施方案中，该混合物 可包括多晶型2和多晶型3。该混合物可包括1、2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、 55、60、70、75、80、85、90、95、97或大于约99%的多晶型2或多晶型3。在另一实施方案中， 该混合物可包括多晶型1和多晶型3。在另一实施方案中，该混合物可包括1、2、3、4、5、10、 15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、70、75、80、85、90、95、97 或大于约 99% 的多晶型 1 或多 晶型3。在本发明的一个实施方案中，组合物可含有1、2、3、4、5、10、15、20、25、30、35、40、 45、50、55、60、70、75、80、85、90、95、97或大于约99%的单个多晶型，其可为多晶型1、多晶
型2或多晶型3。本发明的另一实施方案为基本上纯的晶体形式的多晶型1、多晶型2或多晶型3。众所周知，化合物的晶体状态可通过不同的结晶学参数描述晶胞大小、空间群和 相对于其晶胞的原点位置的化合物中原子的原子位置。这些参数是通过晶体X-射线分析 实验确定的。有可能化合物形成不止一种类型的晶体。这些不同的晶型被称为多晶型。多晶型1、多晶型2和多晶型3可通过固态形式的X-射线粉末衍射(XRPD)区分， 正如文中的图6至8中分别示出了多晶型1至3。FT-IR、FT-拉曼、差示扫描量热法(DSC) 和热重量分析(TGA)数据也可用于帮助区分文中所示和所述的固态多晶型。多晶型的粉末X-射线衍射图的特征峰位置以角位置(2Θ)记录，并具有通常约 0.1+/-° 2-θ的容许偏差。由于校正、设置的差异和其它仪器之间的变化以及不同操作者 之间的操作，整个图形峰或大多数图形峰也可移位约0. 1+/-°。使用文中所述的方法,在Bruker AXS PXRD General Area Detector Diffraction system上获得文中所述的XRPD数据。特征的XRPD角和d_间距记录在下表1中。因此，多晶型1的特征在于可能存在任何一个、任何两个、任何三个、任何四个或 任何五个或更多个2-θ角峰。因此，多晶型2的特征在于可能存在任何一个、任何两个、任何三个、任何四个或 任何五个或更多个2-θ角峰。因此，多晶型3的特征在于可能存在任何一个、任何两个、任何三个、任何四个或 任何五个或更多个2-θ角峰。任何一个、任何两个、任何三个、任何四个或任何五个或更多个的类似特征也可归 因于下表1所示的d-间距/埃。
表1 使用文中所述的方法，使用Thermo Magna MidIR系统记录固体形式的多晶型的 FT-IR谱图。由于所用的特定的光谱仪和分析者的样品制备技术，可以预料到所观察的峰会 有少许的偏差。下面记录的每个峰归属中显示了一些误差范围。在峰归属中的误差范围为 大约 +/-lcnT1。在1035+/-lcnr1、1059+/-lcnf1、1114+/-lcnr1、1155+/-lcnr1、1173+/-lcnr1、 1347+/-lcnT1、1416+/-lcnT1、1443+/-lcnr1、1603+/-lcnr1 和 1656+/-1CHT1 处观察到多晶型 1 的IR峰。合适地，多晶型1显示出这些特征峰中的任何一个、任何两个、任何三个、任何四 个或任何五个或更多个峰。在1036+/-lcnr1、1114+/-lcnf1、1152+/-lcnr1、1172+/-lcnr1、1310+/-lcnr1、 1414+/-1CHT1、1441+/-1CHT1、1570+/-1CHT1、1601+/-1CHT1 和 1662+/-1CHT1 处观察到多晶型 2 的IR峰。合适地，多晶型2显示出这些特征峰中的任何一个、任何两个、任何三个、任何四 个或任何五个或更多个峰。图1和2分别图解了多晶型1和多晶型2的IR数据。使用文中所述的方法，使用Thermo FT-Raman System 960光谱仪记录固体多晶型 的FT-拉曼光谱。由于所用的特定的光谱仪和分析者的样品制备技术，可以预料到所观察 的峰会有少许的偏差。下面记录的每个峰归属中显示了一些误差范围。在峰归属中的误差 范围为大约+/-IcnT1。在506+/-lcnT1、760 + /-lcnT1、796+/-lcnf1、884+/-lcnr1、1180+/-1CHT1、 1305+/-lcnT1、1449+/-lcnT1、1606+/-lcnr1、1674+/-lcnr1 和 2935+/-1CHT1 处观察到多晶型 1 的拉曼峰。合适地，多晶型1显示出这些特征峰中的任何一个、任何两个、任何三个、任何四 个或任何五个或更多个峰。
在273 + /-lcnf1、483 + /-lcnf1、507 + /-lcnf1、764 + /-lcnf1、847 + /-lcnf1、 1179+/-lcnT1、1228+/-lcnT1、1446+/-lcnr1、1673+/-lcnr1 和 2932+/-1CHT1 处观察到多晶型 2 的拉曼峰。合适地，多晶型2显示出这些特征峰中的任何一个、任何两个、任何三个、任何四 个或任何五个或更多个峰。在273+/-lcnT1、506 + /-lcnT1、766+/-lcnf1、797+/-lcnr1、1176+/-1CHT1、 1228+/-lcnT1、1302+/-lcnT1、1446+/-lcnr1、1672+/-lcnr1 和 2934+/-1CHT1 处观察到多晶型 3 的拉曼峰。合适地，多晶型3显示出这些特征峰中的任何一个、任何两个、任何三个、任何四 个或任何五个或更多个峰。图3-5分别图解了多晶型1至多晶型3的拉曼数据。使用文中所述的方法,使用 TA Instruments Thermal Analysis System, Model DSC QlOO获得多晶型的DSC热分析图。图9-11分别图解了多晶型1至多晶型3的数据。通过DSC测定，在大约187°C、185°C和190°C多晶型1、2和3分别开始熔化。对于 多晶型1 (图9)，在132°C处的热事件相当于多晶型1至多晶型3的放热的固态形式的转化。使用文中所述的方法,使用 TA Instruments Thermal Analysis System, Model TGA Q500获得多晶型的痕量TGA图。图12-14分别图解了多晶型1至多晶型3的数据。
本发明的一个实施方案为多晶型1，其具有基本上如图6所示的X-射线粉末衍射 图、图1的FT-IR谱图、图3的FT-拉曼光谱、图9的DSC热分析图以及图12的痕量TGA图。本发明的另一实施方案为多晶型1，其特征在于X-射线衍射图包括以2 θ角 表示的峰，其中所述X-射线衍射图包括在4. 1+/-0. 1°、6. 1+/-0. 1°、6.9+/-0. 1°、
8.1+/-0. 1° >9. 5+/-0. 1° >11. 2+/-0. 1°、12·9+/_0·1°、13. 8+/-0. 1°、15. 6+/-0. 1° 和 18.3+/-0. 1°处的峰。合适地，多晶型1的特征在于X-射线衍射图包括在8. 1+/-0. 1°、
9.5+/-0. 1° >11. 2+/-0. 1°、12·9+/-0·1°、13. 8+/-0. 1° 和 15. 6+/-0. 1° 处的峰。本发明的另一实施方案为[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_6_ [ (9aS)-六氢 吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基 甲酰胺的多晶型1，其中所述多晶型的特征在于X-射线衍射图包括下列以2 θ角表示的峰， 其中a.所述X-射线衍射图包括在4. 1+/-0. 1 °处的峰；或b.所述X-射线衍射图包括在4. 1+/-0. 1°和6. 1+/-0. 1°处的峰；或c.所述X-射线衍射图包括在4. 1+/-0. 1°、6· 1+/-0. 1°和6. 9+/-0. 1°处的峰； 或d.所述 X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1 °、6· 1+/-0. 1 °、6· 9+/-0. 1 ° 和 8. 1+/-0. 1°处的峰；或e.所述 X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1 °、6. 1+/-0. 1 °、6. 9+/-0. 1 °、 8. 1+/-0. 1° 和 9. 5+/-0. 1° 处的峰；或f.所述 X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1 °、6. 1+/-0. 1 °、6. 9+/-0. 1 °、 8. 1+/-0. 1°、9· 5+/-0. 1° 和 11. 2+/-0. 1° 处的峰；或g.所述 X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1 °、6. 1+/-0. 1 °、6. 9+/-0. 1 °、 8. 1+/-0. 1°、9. 5+/-0. 1° ,11. 2+/-0. 1° 和 12. 9+/-0. 1° 处的峰；或h.所述 X-射线衍射图包括在 4. !+/"O. 1 °、6. !+/"O. 1 °、6. 9+/-0. 1 °、8. 1+/-0. 1°、9. 5+/-0. 1°、11·2+/-0·1°、12. 9+/-0. 1° 和 13. 8+/-0. 1° 处的峰；或i.所述 X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1 °、6. 1+/-0. 1 °、6. 9+/-0. 1 °、 8. 1+/-0. 1 ° >9. 5+/-0. 1° >11. 2+/-0. 1°、12·9+/_0·1°、13. 8+/-0. 1° 和 15. 6+/-0. 1 ° 处的峰；或j.所述 X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1 °、6. 1+/-0. 1 °、6. 9+/-0. 1 °、
8.1+/-0. 1° >9. 5+/-0. 1° >11. 2+/-0. 1°、12·9+/_0·1°、13. 8+/-0. 1°、15. 6+/-0. 1° 和 18. 3+/-0. 1° 处的峰。本发明的另一实施方案为药物组合物，其含有多晶型1以及药学上可接受的赋形 剂。本发明的另一实施方案为多晶型2，其具有基本上如图7所示的X-射线粉末衍射 图、图2的FT-IR谱图、图4的FT-拉曼光谱、图10的DSC热分析图以及图13的痕量TGA 图。本发明的另一实施方案为多晶型2，其特征在于X-射线衍射图包括以2 θ角 表示的峰，其中所述X-射线衍射图包括在7.8+/-0. 1°、9.5+/-0. 1°、12.3+/-0. 1°、 13. 2+/-0. 1°、15. 6+/-0. 1°、18. 3+/-0. 1°、19. 0+/-0. 1°、20. 6+/-0. 1°、21. 4+/-0. 1° 和26. 7+/-0. 1°处的峰。合适地，多晶型2的特征在于X-射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1°、
9.5+/-0. 1° >12. 3+/-0. 1°、13·2+/-0·1°、15. 6+/-0. 1°、18·3+/_0·1° 和 19. 0+/-0. 1° 处的峰。本发明的另一实施方案为[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_6_ [ (9aS)-六氢 吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基 甲酰胺的多晶型2，其中所述多晶型的特征在于X-射线衍射图包括以2 θ角表示的峰，其 中a.所述X-射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1 °处的峰；或b.所述X-射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1°和9. 5+/-0. 1°处的峰；或c.所述X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1°、9· 5+/-0. 1° 和 12. 3+/-0. 1° 处的峰； 或d.所述 X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1 °、9· 5+/-0. 1 °、12. 3+/-0. 1 ° 和 13. 2+/-0. 1°处的峰；或e.所述 X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1 °、9. 5+/-0. 1 °、12. 3+/-0. 1 °、 13. 2+/-0. 1° 和 15. 6+/-0. 1° 处的峰；或f.所述 X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1 °、9. 5+/-0. 1 °、12. 3+/-0. 1 °、 13. 2+/-0. 1° ,15. 6+/-0. 1° 和 18. 3+/-0. 1° 处的峰；或g.所述 X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1 °、9. 5+/-0. 1 °、12. 3+/-0. 1 °、 13. 2+/-0. 1° >15. 6+/-0. 1°、18. 3+/-0. 1° 和 19. 0+/-0. 1° 处的峰；或h.所述 X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1 °、9. 5+/-0. 1 °、12. 3+/-0. 1 °、 13. 2+/-0. 1° >15. 6+/-0. 1°、18. 3+/-0. 1°、19. 0+/-0. 1° 和 20. 6+/-0. 1° 处的峰；或i.所述 X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1 °、9. 5+/-0. 1 °、12. 3+/-0. 1 °、 13. 2+/-0. 1 °、15·6+/-0·1 °、18·3+/_0·1 °、19·0+/_0·1 °、20· 6+/-0. 1 ° 和 21.4+/-0. 1°处的峰；或
j.所述 X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1 °、9. 5+/-0. 1 °、12. 3+/-0. 1 °、 13. 2+/-0. 1°、15. 6+/-0. 1°、18. 3+/-0. 1°、19. 0+/-0. 1°、20. 6+/-0. 1°、21. 4+/-0. 1° 和26. 7+/-0. 1°处的峰。本发明的另一实施方案为药物组合物，其含有多晶型2以及药学上可接受的赋形 剂。本发明的另一实施方案为多晶型3，其具有基本上如图8所示的X-射线粉末衍射 图、图5的FT-拉曼光谱、图11的DSC热分析图以及图14的痕量TGA图。本发明的另一实施方案为多晶型3，其特征在于X-射线衍射图包括以2 θ 角表示的峰，其中χ-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1°、7.5+/-0. 1°、8.2+/-0. 1°、 9. 1+/-0. 1°、12. 0+/-0. 1°、12. 8+/-0. 1°、13. 4+/-0. 1°、16. 0+/-0. 1°、23. 3+/-0. 1 ° 和27. 6+/-0. 1°处的峰。合适地，多晶型3的特征在于X-射线衍射图包括在7. 5+/-0. 1°、 8. 2+/-0. 1°、9. 1+/-0. 1°、12. 8+/-0. 1°、13. 4+/-0. 1° 和 16. 0+/-0. 1° 处的峰。 本发明的另一实施方案为[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_6_ [ (9aS)-六氢 吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基 甲酰胺的多晶型3，其中所述多晶型的特征在于X-射线衍射图包括以2 θ角表示的峰，其 中a.所述X-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1 °处的峰；或b.所述X-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1°和7. 5+/-0. 1°处的峰；或c.所述X-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°和8. 2+/-0. 1°处的峰； 或d.所述X-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1 °、7· 5+/-0. 1 °、8· 2+/-0. 1 °9. 1+/--0.1°处的峰；或
e.所述X-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1 °、8· 2+/-0. 19. 1+/--0.1°和 12. 0+/-0. 1°处的峰；或
f.所述χ-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1 °、8· 2+/-0. 19. 1+/--0.1°、12· 0+/-0.1°和12. 8+/-0. 1°处的峰；或
g·所述χ-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1 °、8· 2+/-0. 19. 1+/--0.1°、12· 0+/-0.1° ,12. 8+/-0. 1° 和 13. 4+/-0. 1°处的峰；或
h.所述χ-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1 °、8· 2+/-0. 19. 1+/--0.1°、12· 0+/-0.1°、12. 8+/-0. 1°、13. 4+/-0. 1°和 16. 0+/-0. 13处的峰；或
i.所述χ-射线衍射图包括在6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1 °、8· 2+/-0. 19. 1+/--0.1°、12· 0+/-0.1°、12. 8+/-0. 1°、13. 4+/-0. 1°、16·0+/-0. 1°和 23. 3+/-0.
处的峰；或j.所述 X-射线衍射图包括在 6. 1+/-0. 1 °、7. 5+/-0. 1 °、8. 2+/-0. 1 °、 9. 1+/-0. 1°、12. 0+/-0. 1°、12. 8+/-0. 1°、13. 4+/-0. 1°、16. 0+/-0. 1°、23. 3+/-0. 1 ° 和27. 6+/-0. 1°处的峰。本发明的另一实施方案为药物组合物，其含有晶型3以及药学上可接受的赋形 剂。实施例下面的实施例对本发明进行解释。这些实施例不是用于限制本发明的范围，而是 指导本领域熟练技术人员制备和使用本发明的化合物、组合物和方法。虽然描述了本发明 的具体实施方案，但是本领域熟练技术人员将会理解，在不脱离本发明的精神和范围的情 况下，可以进行各种改变和改进。如文中这些方法、方案和实施例中所用的符号以及常规术语都是与同期的科学文
献例如 the Journal of the American Chemical Society 或 the Journal ofBiological
Chemistry中所用的相一致。标准的单字母或三字母缩写通常用于命名氨基酸残基，除非另 外指出，假定其为L-构型。除非另外指出，所有的起始物料可由工业的供应厂商获得并不 需进一步纯化即可使用。所有有关的醚指的是乙醚；盐水指的是饱和的NaCl水溶液。除非另外指出，所有 的温度以。C (摄氏度数)表示。除非另外指出，所有的反应都是在惰性气氛下于室温条件 下进行，并且除非另外指出，所有溶剂为能得到的最高纯度。在Varian VXR-300、Varian Unity-300、Varian Unity-400 仪器、 BruckerAVANCE-400,General Electric QE-300 或 Bruker AM 400 谱仪上记录1HNMR(后文 中也称为"NMR")谱。化学位移以百万分之几(ppm，δ单位)表示。偶合常数是以赫兹 (Hz)为单位。分裂模式描述了表观的多重性，并以如下表示s(单峰)、d(双峰)、t(三重 峰)、q (四重峰)、quint (五重峰)、m(多重峰)、br (宽峰)。质谱使用电喷雾电离，运行于开放入口的LC-MS系统。LC条件10%至80%的 CH3CN(0. 018% TFA) 3. 0分钟，其中1. 25分钟的保持，0. 5分钟的再平衡；通过质谱、214nm处 的紫外和散射光监测器(ELS)检测。柱2. lX50mm Zorbax SB-C8。对于制备型(pr印)HPLC，将在1000 μ L MeOH,DMSO或DMF中的约IOOmg终产物以 35mL/min的速度，注射到SunFire Prep C18 OBD 5um 30x75mm柱中，在10分钟内梯度从 5% CH3CN的水溶液至95% CH3CN的水溶液，随后为90% CH3CN的水溶液保持1. 9分钟。在 Merck 硅胶 60 (230-400 目)上，或使用正相的 Teledyne Isco Combiflash Companion，可 弃去的Redi-Sep快速柱进行快速色谱法纯化。中间体A(2R) -3-环戊基-2- ({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸 部分A (4S)-苄基-3- (3-环戊基丙酰基)噁唑烷_2_酮在-78°C下，向(S)-(-)-4-苄基-2-噁唑烷(25g，141mmol)的THF(350mL)溶液 中滴加n-BuLi (56. 4mL, 2. 5M的己烷溶液，141mmol)。在相同温度下搅拌60分钟后，将反应 混合物用3-环戊基丙酰氯(21. 6mL, 141mmol)处理0. 25小时。将反应混合物温热至室温， 并搅拌过夜。将该反应用饱和的NH4Cl水溶液(320mL)终止。将水层用EtOAc (3x200mL) 萃取。将合并的有机层干燥(MgSO4)并蒸发，得到(4S)-苄基-3-(3-环戊基丙酰基)噁唑烷-2-酮，为白色固体(42. 4g, 100% )。LCMS (M+H) + :302. 3。部分B (4S)-3-((2R)_3-环戊基_2-{[(苯基甲基)氧基]甲基}丙酰基)_4_(苯基甲 基)-1，3_噁唑烷-2-酮在0°C下，在氮气下，向(4S)-苄基-3-(3-环戊基丙酰基)噁唑烷_2_酮(42. 4g， 141mmol)的二氯甲烷(500mL)溶液中以缓慢平稳的流量加入氯化钛(IV)(1M的DCM溶 液，155mL，155mmol)。5分钟后，滴加二异丙基乙胺(27mL，155mmol)。于0°C搅拌1小时 后，以缓慢平稳的流量将苄氧基甲基氯(TCI-America) (39mL, 280mmol)加入到生成的烯醇 钛(titanium enolate)中，并将混合物于0°C下保持3. 5小时。然后将反应混合物用水 (400mL)终止。将水层用二氯甲烷(150mLx2)萃取。将有机萃取物用饱和的NaHC03洗涤， 干燥(MgS04)，并蒸发。将残余物用乙醚(2x)洗涤，并然后用己烷/乙醚研磨，得到2批量 的(4S)-3-((2R)-3-环戊基-2-{[(苯基甲基)氧基]甲基}丙酰基)-4-(苯基甲基)-1， 3-噁唑烷-2-酮，为淡黄色固体(42. 7g,72% ) LCMS (M+H) + 422. 2。部分C (4S)-3-[(2R)_3-环戊基_2-(羟基甲基)丙酰基]-4-(苯基甲基)_1，3_噁唑 烷-2-酮将(4S)-3-((2R)_3-环戊基_2-{[(苯基甲基)氧基]甲基}丙酰基)_4_(苯基 甲基)-1，3_噁唑烷-2-酮(42. 7g，0. lmol)在乙醇(800mL)和DMF(180mL)中的溶液使用 10%Pd/C(4g)和氢气球催化氢化。24小时后通过LCMS测得该反应50%完成。将该反应用 氮气吹扫，并通入新鲜的氢气球。再60小时后，将该反应再次用氮气吹扫，过滤，并除去滤 液溶剂，得到(4S)-3-[(2R)-3-环戊基-2-(羟基甲基)丙酰基]-4-(苯基甲基)-1，3_噁 唑烷-2-酮(33. lg, 100% )。LCMS (M+H)+ 332. 3。部分D (2R) -3-环戊基-2-(羟基甲基)丙酸将(4幻-3-[(21 )-3-环戊基-2-(羟基甲基)丙酰基]_4_ (苯基甲基)_1，3_噁唑 烷-2-酮(33. lg，0. lmol)在THF(330mL)和水(55mL)的混合物中搅拌，并冷却至0°C。加 入30%过氧化氢(96mL，lmol)，随后加入氢氧化锂一水合物(8. 4g，0. 2mol)。将该反应温 热至室温，并然后搅拌过夜。通过旋转蒸发除去THF。将含水残余物用二氯甲烷(3xl00mL) 洗涤，用6N HC1酸化，并用乙酸乙酯(4xl00mL)萃取。将有机萃取物干燥(MgS04)，并蒸 发，得到(2R)-3-环戊基-2-(羟基甲基)丙酸，为澄清的无色油状物(18. 5g，> 100%)。 LCMS (M+H) + 未检测。NMR(400MHz, CDC13) 6 7. 3 (br s，1H)，3. 79 (d，J = 5. 83Hz，2H)， 2. 64-2. 71 (m, 1H)，1. 45-1. 87 (m, 9H)，1. 05- 14 (m, 2H)。部分E (2R)-3_环戊基-2_(羟基甲基)-N-[(苯基甲基)氧基]丙酰胺在0°C下，向(2R)-3-环戊基-2-(羟基甲基)丙酸(18. 3g，106mmol)、0_苄基羟 基胺盐酸盐(18. 62g，117mmol)和4_( 二甲基氨基)吡啶(28. 5g，233mmol)在二氯甲烷 (llOmL)中的混合物中加入1-[3- (二甲基氨基)丙基]-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(22. 3g， 117mmol)。将混合物于0°C保持3小时。此后，加入500mL的1N冷的HC1水溶液，并将混合 物再搅拌30分钟。将生成的白色固体沉淀通过过滤收集。将该沉淀用IN HC1、用水和用冷的DCM洗涤。在真空干燥器中干燥过夜，得到(2R)-3-环戊基-2-(羟基甲基)-N-[(苯基 甲基)氧基]丙酰胺(19. lg,65% )。LCMS :(M+H)+ 278. 1。部分F (3R)-3_(环戊基甲基)-1_[(苯基甲基)氧基]-2-氮杂环丁酮在0°C下，向(2R)-3_环戊基_2-(羟基甲基)-N-[(苯基甲基)氧基]丙酰胺 (22. 5g,81mmol)和三苯基膦(22. 5g,97mmol)在THF(800mL)中的混合物中滴加偶氮二甲酸 二异丙酯(18.9mL，97mmol)。将反应混合物于0°C保持45分钟，并然后蒸发。通过硅胶色 谱法，使用己烷/Et0Ac(95 5)洗脱系统进行纯化，得到(3R)-3-(环戊基甲基)-1_[(苯 基甲基)氧基]-2-氮杂环丁酮(16. 9g,81% )0 LCMS :(M+H)+260. 1。部分G (2R)-3_环戊基-2_({[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸将(3R)-3_(环戊基甲基)-1_[(苯基甲基)氧基]-2-氮杂环丁酮(20g，77. lmmol) 和Li0H*H20(32. 4g，0. 77mol)在THF/水(500mL/170mL)中的混合物在室温下搅拌36小时。 向该反应混合物中加入6M HCl(130mL)，并然后加入IN NaOH直至获得中性的pH。分离各 层，并将水层用EtOAc萃取一次。将合并的有机物干燥(MgS04)，并浓缩，得到(2R)-3-环戊 基-2-({[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(22.85g，> 100%)，为透明无色油状物。 LCMS _)+ 277. 9。部分H (2R) -3-环戊基-2- ({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸在氮气氛下，将甲酸(192mL，5mol)溶于CH2Cl2(450mL)中，并冷却至0°C。然 后加入乙酸酐(73mL，0.77mol)，并将反应混合物搅拌45分钟。此后，加入(2R)_3_环戊 基-2-({[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(22. 85g粗物质，推测(assumed) 77. lmmol) 的CH2C12 (450mL)溶液，并将生成的混合物在0°C下搅拌1. 5小时。然后除去挥发物，将粗的 残余物溶于EtOAc (500mL)中，并将混合物用盐水(4X100mL)洗涤。将有机物干燥(MgS04)， 并浓缩，得到(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(23. 5g， 100% ),为粘稠的浆状物。LCMS (M+H)+ 306. 1。(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸，二异丙基 乙胺盐，异丙醇溶剂合物可按照下面的方法制备向(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(25. 9h， 85mmol)的乙醚(85mL)溶液中加入二异丙基乙胺(19. 7mL，113mmol)，并将混合物在室温下 搅拌大约3小时。然后将反应混合物用另外的乙醚(85mL)和水(400mL)稀释。分离各层， 并将有机层用水/盐水混合物(250mL水中加入30mL盐水，以及200mL水中加入30mL盐 水)萃取两次以上。然后将合并的水层用40%异丙醇的氯仿溶液(3x300mL)萃取。将合并 的异丙醇/氯仿层干燥(Na2S04)，过滤并蒸发，得到2(R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基 甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸，二异丙基乙胺盐，异丙醇溶剂合物(30.29g)，为透明的米 黄色油状物。LCMS (M+H)+ 306. 2。中间体B(2R) -3-环戊基-2- {[甲酰基(四氢_2H_吡喃_2_基氧基)氨基]甲基}丙酸 部分A (3R) -3-(环戊基甲基)-1-(四氢-2H-吡喃_2_基氧基)_2_氮杂环丁酮将(3R)-3_(环戊基甲基)-1_[(苯基甲基)氧基]-2-氮杂环丁酮(100g，386mmol) 溶于乙醇(1.2L)中，并将该溶液除气。加入Pd/C(10%，干燥的，8g)，并将悬浮液用氢气吹 扫，并在氢气氛(气球)下搅拌直至通过LC-MS表明反应完成(大约6小时)。然后将悬 浮液用氮气鼓泡，通过Celite硅藻土过滤，并蒸发至干。将生成的固体再溶于CH2C12(1L) 中，并加入二氢吡喃(70mL，767mmol)，随后加入对甲苯磺酸吡啶鐺盐(pyridinium p-甲 苯sulfonate) (PPTS,5%,4. 85g)。将反应混合物在室温下搅拌3天，然后浓缩，并在硅胶 上，使用10-20%乙酸乙酯的己烷溶液进行色谱纯化，得到(3R)-3-(环戊基甲基)-1-(四 氢-2H-吡喃-2-基氧基)-2-氮杂环丁酮，为无色液体(100% )。部分B (2R) -3-环戊基-2- {[(四氢_2H_吡喃_2_基氧基)氨基]甲基}丙酸将(3R) -3-(环戊基甲基)-1-(四氢-2H-吡喃_2_基氧基)_2_氮杂环丁酮(68g， 268mmol)溶于THF(IL)中，并置于装有内部热电偶、回流冷凝器和机械搅拌器的3-颈3L圆 底烧瓶中。制备氢氧化锂一水合物(56. 3g，1. 34mol)的400mL H20溶液，并通过加料漏斗 滴加，同时剧烈搅拌。将反应混合物在室温下搅拌36小时，随后用H20(350mL)稀释，并用 己烷(300mL)洗涤。将有机层用H20(100mL)萃取，并将合并的水层冷却至0°C，并用90分 钟的时间小心地滴加2M柠檬酸( 525mL)进行酸化，同时保持内部温度低于10°C。将酸 化的物质用乙酸乙酯(3x250mL)萃取，并将合并的有机层用水(2x)洗涤，经MgS04干燥，过 滤，并蒸发。加入苯(500mL)并蒸发，并将残余物真空干燥，得到(2R)-3-环戊基-2-{[(四 氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸(70.9g，98%)，为无色液体。部分C (2R) 3-环戊基-2- {[甲酰基(四氢_2H_吡喃_2_基氧基)氨基]甲基}丙酸在室温下，向(2R)-3_环戊基_2-{[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙 酸(97. 05g,358mmol)的丙酮(1. 1L)溶液中加入5-甲基_2_硫代-[1，3，4]噻二唑-3-甲 酸(57. 3g,358mmol) (Tetrahedron Lett. 1985，26，3703-3706)。当认为该反应完成时，真 空除去丙酮。将残余物悬浮于己烷(320mL)和甲基-叔丁基醚(180mL)的混合物中，然后 超声处理。10分钟后，滤除白色固体(可能为5-甲基-3H-[1，3，4]噻二唑-2-硫酮)，并 将滤液真空蒸发，得到(2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基] 甲基}丙酸，为淡黄色树胶状物质(124g，> 100% ) NMR表明产物中含有少量的MTBE和 5-甲基-3H-[1，3，4]噻二唑-2-硫酮。(2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸 也可根据文献的方法[Bracken, Bushell, Dean, Francavilla, Jain, Lee, Seepersaud, Shu, Sundram, Yuan ；PCT Int. Appl. (2006), WO 2006127576 A2]制备。(2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸， 二异丙基乙胺盐可按照下面的方法制备
部分A 2-乙基-5-氟-6-羟基-4 (1H)-嘧啶酮将(2R)-3_环戊基_2-{[(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸(39. 45g， 145mmol)在甲酸甲酯(300mL)和二异丙基乙胺(27. 9mL, 160mmol)中的溶液置于封闭管中， 并于50°C加热4天。冷却至室温后，真空除去甲酸甲酯，并将剩余的残余物溶于乙醚中。将 该乙醚溶液用水萃取，并分离各层。然后将水层用40%异丙醇的氯仿溶液反萃取(2X)。然 后将合并的异丙醇/氯仿层真空浓缩，得到(2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-批 喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸，二异丙基乙胺盐(28g，含有残余量的氯仿和异丙醇)。中间体C4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶 部分A 5-氟-4，6- 二羟基-2-甲基嘧啶将200mL的25% wt甲氧基钠的甲醇溶液(0. 84mol)用另外的200mL甲醇稀释。 将乙脒-HC1 (40g, 0. 42mol)加入到该甲氧基钠溶液中(形成白色沉淀)，随后加入氟代丙二 酸二甲酯(70g，0. 46mol)。将内容物在室温下搅拌过夜，然后真空浓缩至干。将生成的残余 物再溶于热的水(300mL)中。将水溶液冷却至室温后，慢慢加入浓HC1直至在pH约为5下 形成结晶(细的白色棱晶(prisms))。滴加浓HC1直至pH为3，并然后将内容物过滤。将分 离的晶体用1M HC1洗涤，并在真空下干燥，得到5-氟-4，6-二羟基-2-甲基嘧啶(65. 5g， > 100% ) o LCMS (M+H)+ :145。部分B 4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶在120°C下，将5-氟-4，6-二羟基-2-甲基嘧啶(推测60g，0. 42mol)用300mL的 P0C13处理3小时。然后将反应混合物冷却至室温，并真空浓缩直至溶剂去除的速率慢慢达 到小于1滴/秒的下降率(drop rate)。产物稍具有挥发性，并且过度的真空浓缩将减少产 率。将粗的残余物倒入到粉碎的冰上，并将生成的浆料搅拌1小时，期间将溶液变为室温。 滤出生成的黄色固体，用水洗涤，并进行短暂的空气干燥直至成为散粒(free flowing)。收 集该固体，并置于覆盖有P205的水提取器中直至干燥，得到纯的4，6- 二氯-5-氟-2-甲基 嘧啶(59g,79% )。LCMS (M+H)+ :181/183。中间体D4，6- 二氯-2-乙基-5-氟嘧啶 在室温下，将丙酰胺盐酸盐(30.0g，276. 3mmol)和氟代丙二酸二甲酯(41. 4g， 276. 3mmol)的无水甲醇(400mL)溶液分批用固体NaOMe (45g，829mmol)处理。加入后，将白 色悬浮液加热至85°C，并搅拌2小时。然后将溶剂蒸发至干。在剧烈搅拌下向该残余物中 加入70mL的6N HC1溶液。将悬浮液搅拌10分钟直至残余物完全中和。将该白色沉淀通过 过滤收集，并真空干燥，得到2-乙基-5-氟-6-羟基-4 (1H)-嘧啶酮，为白色固体。LCMS (M+H)+:159.0 ;(M+Na)+:181. 1。在一些情况下，该产物可含有共同沉淀出来的NaCl，其使 得产率超过理论值。在此情况下，将该含有NaCl的产物用于下一步骤中。部分B 4，6- 二氯-2-乙基-5-氟嘧啶将2-乙基-5-氟-6-羟基-4 (1H)-嘧啶酮(20g, 126. 6mmol)在 P0C13 (58mL, 633mmol)中于125°C (油浴)加热2小时。将另外的68mL新制的P0C13加入到该热的溶 液中。将生成的溶液再加热2小时，直至所有的原料耗尽。真空蒸馏(62°C-68°C)过量的 P0C13，得到淡褐色的残余物。冷却至室温后，将残余物用50mL的CH2C12稀释，然后倒入到 冰水(200mL)中。向该混合物中加入200mL的CH2C12，随后将混合物搅拌10分钟。分离两 层后，将水层进一步用100mL的CH2C12萃取。将合并的有机层经Na2S04干燥，然后通过浅薄 的硅胶填料(pad)过滤，然后将其用150mL的1 % MeOH的CH2C12溶液洗涤。蒸发溶剂，得 到4,6- 二氯-2-乙基-5-氟嘧啶(21g,85% )，为淡黄色液体。LCMS _)+ 未检测。中间体E[ (2R) -3- {2- [6_氯_5_氟_2_ (甲硫基)~4~嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲基)3_氧 代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺 部分A 5-氟-6-羟基-2-甲硫基-4 (1H)-嘧啶酮在0°C (冰浴)下，向 2-甲基-2-异硫脲硫酸盐(thiopseudourea sulfate) (41. 7g,0. 15mol)和氟代丙二酸二甲酯(45g,0. 30mol)在Me0H(600mL)中的搅拌溶液中分 批加入NaOMe (48. 6g,0. 90mol)。加入完成后，去除冰浴，并将反应混合物在室温下搅拌过 夜。LCMS显示形成了所需的嘧啶酮产物。在真空下将反应混合物浓缩至接近干燥，用水 (50mL)稀释，并用6N HC1 ( 150mL)酸化至 pH 2以沉淀产物。过滤后，将该固体用1N HC1 (2xl0mL)洗涤，并真空干燥，得到5-氟-6-羟基-2-甲硫基_4(1H)-嘧啶酮(35. 7g， 68%)，为白色固体。LCMS _)+:177. 3。部分B 4，6- 二氯-5-氟-2-(甲硫基)嘧啶将5-氟-6-羟基-2-(甲硫基)-4 (1H)-嘧啶酮(35. 7g，0. 20mol)在 P0C13 (150mL) 中的混合物于115°C加热3小时。冷却至室温后，将反应混合物慢慢倒入到冰水混合物 (1500mL)中，并搅拌20分钟。将产物萃取到乙酸乙酯(3x800mL)中，并将合并的有机萃取物用水(2xl000mL)、盐水(lOOOmL)洗涤，并干燥(Na2S04)。蒸发溶剂，得到4，6-二 氯-5-氟-2-(甲硫基)嘧啶，为淡黄色固体(37. 8g,89% )。LCMS (M+H)+ 未检测。部分C 4-氯-5-氟-6-胼基-2-(甲硫基)嘧啶将4,6- 二氯-5-氟-2-(甲硫基)嘧啶(16. 8g，78. 85mmol)和三乙胺(16. 49mL， 118. 3mmol)溶于DMS0(200mL)中并搅拌。将混合物用冰水浴冷却至 5°C。向该溶液中 缓慢地加入胼一水合物(4. 59mL，94. 62mmol)。加入完成后，将反应混合物温热至室温，并 继续搅拌1小时。将反应混合物用水(500mL)稀释，并将水溶液用CH2Cl2(3x300mL)萃取。 将合并的有机溶液用水(3x250mL)和盐水(250mL)洗涤，然后干燥(Na2S04)，并真空浓缩， 得到4-氯-5-氟-6-胼基-2-(甲硫基)嘧啶，为红色泡沫状固体(9. 70g, 59% ) LCMS (M+H)+208. 9。部分D [(2R)-3-{2_[6-氯-5-氟-2_(甲硫基)_4_嘧啶基]胼基}_2_(环戊基甲 基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将4-氯-5-氟-6-胼基-2-(甲硫基)嘧啶(9. 70g，46. 5mmol)、(2R)_3_ 环戊 基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸(19.9g，46.5mmol)、 HOAt (6. 96g, 51. 2mmol)、EDCI (9. 82g, 51. 2mmol)和 N_ 甲基吗啉(25. 6mL, 232. 5mmol)在 DMF(300mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物用乙酸乙酯/己烷(3 2，1L) 稀释，并用水(3X500mL)洗涤，并将有机物干燥(Na2S04)，并真空浓缩。将残余物通过Gil son RP-HPLC(35-95%乙腈/水，8分钟梯度时间)纯化，得到[(2R)-3-{2_[6_氯-5-氟-2-(甲 硫基)_4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基) 甲酰胺，为红色玻璃状物(12. 89g，56. 0% )0 LCMS (M+H)+ 490. 4。中间体F2，4，6-三氯-5-氟嘧啶 部分A 5-氟-6-羟基-2，4 (1H，3H)-嘧啶二酮将机械搅拌的脲(60. 06g，lmol)和氟代丙二酸二甲酯(150. llg，lmol)的甲醇 (1L)溶液用25wt% NaOMe的甲醇溶液( 4. 6M，435mL, 2mol)处理。将混合物回流3小时， 并然后冷却至室温。将混合物过滤，将湿的滤饼溶于温暖的水( 1.2L)中，并将生成的水 溶液用浓HC1水溶液( 160mL)酸化至pH = 2，同时搅拌超过1小时。将混合物冷却至室 温，并将产物过滤，并用水彻底洗涤，然后真空干燥，得到5-氟-6-羟基-2，4 (1H，3H)-嘧啶 二酮(80g，55% )，为白色固体。LCMS :_)+ 147.0。部分B 2，4，6-三氯-5-氟嘧啶用30分钟的时间，在搅拌下将精细粉末状的5-氟-6-羟基_2，4 (1H，3H)-嘧啶二酮(74g,0. 507mol)分批加入到P0C13(232mL，2. 5mol)中(放热)。加入完成后，将混合物 保持在60°C下，同时通过注射器滴加N，N, -二甲基苯胺(65mL)。加入后，将混合物加热至 100-110°c (内部温度)，直至判断该反应完成，通常为4-8小时。将混合物冷却，并通过在 80-90°C下小心地真空蒸馏将大部分剩余的P0C13除去(在P0C13馏出物中可检测出一些产 物)。将剩余的残余物倒入冰( 1L)中，并搅拌30分钟，然后用乙醚(lx400mL,2xl50mL) 萃取。将合并的萃取物用水和盐水洗涤，然后干燥(MgS04)。过滤并常压蒸馏乙醚，得到粗 产物，将其减压下蒸馏，得到产物(28. 8g，28%)，为低熔点的白色结晶固体(b.p. 80-85 12mm) o LCMS : (M+H)+未检测。中间体G2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)_1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯 部分A 2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)胼甲酸1，1_ 二甲基乙基酯在室温下，将2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(20. 92g, 104. 1讓ol)溶于THF(300mL)中并 搅拌。向该搅拌溶液中加入胼基甲酸叔丁基酯(carbazate) (13. 74g，104. lmmol)，随后加 入二异丙基乙胺(19. OmL，109. 3mmol)。反应混合物变为淡黄色，并且几分钟后，形成沉淀。 1. 5小时后通过TLC(10% EtOAc/Hex)监测反应完成。将反应混合物真空浓缩以除去大部 分的THF，并将残余物溶于CH2C12 ( 400mL)中。将该溶液用 400mL饱和的NH4C1水溶液 洗涤。将有机物干燥并浓缩，得到淡黄色固体(31.37g)。LCMS :(M+H+2Na-B0C)+:241。部分B 2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)_1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯将2_(2，6_ 二氯-5-氟-4-嘧啶基)胼甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(31.37g，推测 104. lmmol)悬浮于 CH2C12 (400mL)中。将焦碳酸二叔丁酯(44. 75g,205. Ommol)加入到该 溶液中，随后加入二异丙基乙胺(36.3mL，208.2mmol)。当每个物料几乎都溶解时，缓慢地 加入DMAP (1. 27g，10. 4mmol)。反应混合物变为淡红色， 5分钟后，观察到缓慢产生气泡。 45分钟后，通过LCMS表明反应完成，并且混合物变成淡橙色。将反应混合物用 300mL饱 和的NH4C1洗涤，并弃去有机物。使用 1800mL Florsil在CH2C12中制备浆料，将其倒入 到大的多孔漏斗上。然后将全部有机溶液倒出通过Florsil填料(pad)，用2L的CH2C12洗 涤。在Florsil上留下红色的带，并且TLC表明产物已经从填料上洗脱完毕。将滤液浓缩 成泡沫状无色油状物，将其在冰箱中结晶过夜(37. 87g，73%，从2，4，6-三氯-5-氟嘧啶开 始)。LCMS(M+3H+2Na-3Boc)+241。中间体H4，6- 二氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶 部分A 5-氟-2-(氟甲基)-6-羟基-4 (1H)-嘧啶酮将2-氟-乙脒盐酸盐(11. 2g，100mmol)和氟代丙二酸二甲酯(15g，lOOmmol)在无 水甲醇(300mL)中用固体Na0Me(16. 2g，300mmol)处理，并在搅拌下加热至50°C。当LCMS 显示形成了所需的产物后，将溶剂蒸发至干，并将残余物用浓HCl(20mL)中和。通过过滤 收集白色沉淀物，得到5-氟-2-(氟甲基)-6_羟基-4(1H)_嘧啶酮(100%产率)。LCMS (M+H)+163. 1。部分B 4，6_ 二氯-5-氟_2-(氟甲基)嘧啶将5-氟-2-(氟甲基)-6-羟基-4 (1H)-嘧啶酮(6g，37mmol)悬浮于 P0C13 (20mL, 222mmol)中，并于120°C搅拌2小时。蒸发过量的P0C13后，将残余物倒在冰上，并将生成 的混合物用CH2C12萃取。将CH2C12溶液通过硅胶填料，并将生成的滤液浓缩，得到纯的4， 6-二氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶(6g，81% )，为无色液体。LCMS:(M+H)+:未检测。中间体I4，6-二氯-2-( 二氟甲基)-5-氟嘧啶 部分A2，2_二氟乙脒.11(1在0°C下，向搅拌的氯化铵(5. lg,95mmol)在甲苯(150mL)中的悬浮液中加入三 甲基铝(46mL，2M，92mmol)，搅拌直至停止冒泡。加入二氟乙酸甲酯(2. 38mL，27mmol)，并将 生成的混合物于80°C搅拌过夜。冷却至0°C时，缓慢地加入甲醇，并将生成的溶液在低温下 搅拌90分钟，形成固体。将其通过Celite硅藻土过滤，并将滤液蒸发，得到2，2_ 二氟乙 脒.此1(1.78，485%)，为淡黄色固体。部分B2- (二氟甲基)-5-氟-6-羟基-4 (1H)-嘧啶酮将金属钠(0. 91g，40mmol)溶于MeOH(lOOmL)中以形成甲氧基钠。加入2，2-二氟 乙脒 HC1 (1. 73g，13mmol)，随后加入氟代丙二酸二甲酯(2. 0g, 13mmol)。将生成的溶液于 80°C搅拌3小时，然后冷却至室温。加入HC1水溶液(6mL，6M，36mmol)，并将生成的混合物真 空浓缩。将剩余的固体用冷水洗涤，并过滤得到2- (二氟甲基)-5-氟-6-羟基-4 (1H)-嘧 啶酮(1.43g，61% )。部分C
4，6-二氯-2-( 二氟甲基)-5-氟嘧啶将2- ( 二氟甲基)-5-氟-6-羟基-4 (1H)-嘧啶酮(1. 43g, 8. Ommol)和 P0C13 (6mL) 的混合物于110°C加热2. 5小时。冷却至室温后，将反应混合物倒在冰上，并搅拌30分钟。 将产物萃取到DCM中，并将合并的有机物用饱和的碳酸氢钠水溶液洗涤一次。将合并的有 机物经硫酸钠干燥并真空浓缩。得到4，6-二氯-2-( 二氟甲基)-5-氟嘧啶(460mg，27%)， 为黄色油状物。一般方法A实施例1((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_甲基_6_ (1_吡咯烷基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 部分A 5-氟-4-胼基-2-甲基-6- (1-吡咯烷基)嘧啶将4，6-二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(100mg，0. 55mmol)溶于2mL的DMS0中，并在室 温下搅拌。加入吡咯烷(501^，0.61讓01)，随后加入01卩￡六(2101^，1.21讓01)。将生成的 反应混合物搅拌2小时，并然后加入胼(l.OmL)，并将内容物于80°C加热1小时。然后将反 应混合物冷却至室温，并通过RP-HPLC纯化，得到5-氟-4-胼基-2-甲基-6-(l-吡咯烷 基)嘧啶(69mg,59% )。部分B ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_甲基_6_ (1_吡咯烷基)_4_嘧啶基]胼 基}_3_氧代丙基)[(苯基甲基)氧基]甲酰胺将5-氟-4-胼基-2-甲基-6-(1-吡咯烷基)嘧啶(69mg，0. 33mmol)、(2R)_3_环戊 基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(110mg，0.36mmol)和H0At(49mg， 0. 36mmol)溶于 2mL 的 DMF 中。力卩入 NMM(0. 18mL, 1. 65mmol)，随后加入 EDC(69mg， 0.36mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到((2R)_2_(环戊 基甲基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6- (1-吡咯烷基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)[(苯 基甲基)氧基]甲酰胺(90mg，55%)。部分C ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_甲基_6_ (1_吡咯烷基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺将((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基-6-(1_吡咯烷基)_4_嘧啶 基]胼基}-3-氧代丙基)[(苯基甲基)氧基]甲酰胺(90mg，0. 18mmol)溶于3mL的MeOH 中，除气，并置于氩气下。加入10 % Pd/C(18mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下 放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填 料(pad)用DCM和MeOH洗涤。将生成的滤液真空浓缩，得到纯的((2R)-2-(环戊基甲 基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6- (1-吡咯烷基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺(42mg,57% )。LCMS (M+H)+ 407. 6。一般方法B实施例2[ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_2_乙基_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 6-氮杂环丁烷基-2-乙基-5-氟-4-胼基嘧啶将4，6- 二氯-2-乙基-5-氟嘧啶(195mg，1. Ommol)溶于3mL的MeOH中，并在室温 下搅拌。加入氮杂环丁烷(74iiL，l. lmmol)，随后加入DIPEA(383iiL，2. 2mmol)。将生成的 反应混合物在室温下搅拌，直至通过LCMS监测氮杂环丁烷取代了一个氯。然后，真空除去 MeOH,并将剩余的残余物溶于2mLDMS0和lmL胼的混合物中。将生成的溶液于40°C加热1 小时，直至通过LCMS认为该反应完成。将粗的反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到4- (1-氮 杂环丁烷基)-2-乙基-5-氟-6-胼基嘧啶(136mg,64% ) LCMS (M+H) + :212. 1。部分B [ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_2_乙基_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将4- (1-氮杂环丁烷基)-2-乙基-5-氟-6-胼基嘧啶(88mg，0. 42mmol)、 (2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(140mg，0.46mmol) 和 H0At(56mg，0. 42mmol)溶于中 3mL 的 DMF 中。然后，加入 NMM(71 u L，0. 65mmol)，随后 加入EDC(75mg，0. 40mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得 到[(2R) -3- {2- [6- (1-氮杂环丁烷基)-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲 基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(160mg，76% )。LCMS _)+:499. 4。部分C [ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_2_乙基_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_2_乙基_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(160mg，0.32mmol)溶于10mL的 MeOH中，除气，并置于氩气下。加入5% Pd/C(40mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气 球下搅拌，直至通过LCMS认为该反应完成。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过 滤，并将Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。将生成的滤液真空浓缩，得到 [(2R) -3- {2- [6- (1-氮杂环丁烷基)-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)_3_ 氧代丙基]羟基甲酰胺(100mg,76% )。LCMS _)+ 409. 2。一般方法C实施例3[(2R)-3-{2-[6-(l-氮杂环丁烷基)_5_氟_2_(甲硫基)_4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺

部分A [(2R)-3-{2-[6-(l-氮杂环丁烷基)_5_氟_2_(甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺向加压管中加入[(2R)-3-{2_[6-氯_5_氟_2_(甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)_3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 100g, 0. 204mmol)、氮杂环丁烷盐酸盐(19. lmg，0. 204mmol)、DIPEA (71. 2 u L, 0. 408mmol)和 DMSO (2mL)。将该管密封，并加热至65-70°C，同时搅拌3天。然后将反应混合物冷却至室温， 并通过RP-HPLC纯化，得到[(2 -3-{2-[6-(1-氮杂环丁烷基)-5-氟-2-(甲硫基)_4_嘧 啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(68mg， 65% )。LCMS (M+H)+ 511. 2。部分B [(2R)-3-{2-[6-(l-氮杂环丁烷基)_5_氟_2_(甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-{2-[6_(l-氮杂环丁烷基)_5_氟_2-(甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)_3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(68mg，0. 13mmol) 溶于Ac0H/H20(20mL，4 1)混合物中，并在RT下搅拌，直至LCMS表明脱保护基完成(过 夜)。将反应混合物在真空下浓缩至干，并通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-3-{2-[6-(l-氮 杂环丁烷基)-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟 基甲酰胺(25mg,44% )。LCMS (M+H)+ 427. 2。一般方法D实施例4[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基哌嗪基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 2-氯-5-氟-4-胼基-6- (4-甲基哌嗪基)嘧啶向2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(402mg，2. (kimol)的 DMS0(3mL)溶液中加入 DIPEA(0. 52mL,3. Ommol),随后加入N-甲基哌嗪(0. 24mL，2. 2mmol)。将该溶液在室温 下搅拌。30min后，加入无水胼(1.29mL，99mmol)，并将生成的混合物于80°C加热30分 钟。冷却至室温后，真空除去过量的胼，并将残余的溶液通过RP-HPLC纯化，得到推测为2_氯-5-氟-4-胼基-6-(4-甲基-1-哌嗪基)嘧啶(第一次的洗脱液，44mg)以及推测 为6-氯-5-氟-2-胼基-4-(4-甲基-1-哌嗪基)嘧啶(第二次的洗脱液，30mg)。LCMS (M+H)+ 261. 1。部分B [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基哌嗪基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将2-氯-5-氟-4-胼基-6-(4-甲基-1-哌嗪基)嘧啶(31mg，0. 12mmol)、 (2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸(36mg， 0. 12mmol)、H0At(20mg，0. 144mmol)、EDC(28mg，0. 144mmol)和 NMM(26uL,0. 144mmol)在 DMF(2mL)中的混合物搅拌直至反应完成(2h)。然后将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得 到[(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (4-甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基 甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(30mg，46% )。LCMS (M+H)+ 542. 3 ； (M+Na)+ 564. 3。部分C [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基哌嗪基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环 戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(30mg)在4 1 AcOH 水(4mL)中的溶液在室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，并将生成的粗产物通过RP-HPLC纯 化，得到[(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (4-甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(12mg,47% )0 LCMS:(M+H)+:458. 3。一般方法E实施例5[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1-甲基乙基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_(环
戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 2_{2_氯-5-氟-6-[(1_甲基乙基)氨基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼三甲酸三(1， 1-二甲基乙基)酯在0 °C下，向剧烈搅拌的异丙胺(83 u L，1. 21mmol)的DMF (6mL)溶液中加入 DIPEA(0. 24mL, 1. 33mmol)，随后立即加入 2-(2，6- 二氯 ~5~ 氟 ~4~ 嘧啶基)_1，1,2-胼三 甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(600mg，1.21mmOl)。当通过LCMS确定该反应完成时，将反 应混合物用乙醚( 40mL)稀释，并用水(3x40mL)洗涤。将合并的三个水层用乙醚反萃 取一次，并然后将合并的有机物干燥(Na2S04)，并真空浓缩。将该粗产物通过快速色谱法 (CombiflaSh，5-60%乙酸乙酯/己烷，三乙胺)纯化，得到2-{2-氯-5-氟-6-[(1-甲 基乙基)氨基]-4-嘧啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(597mg，95% )。 部分B 2-氯-5-氟-6-胼基-N_(l-甲基乙基)-4-嘧啶胺将2-{2-氯-5-氟-6-[(1-甲基乙基)氨基]-4-嘧啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1， 1-二甲基乙基)酯(597mg，l. 15mmol)的Me0H(5mL)溶液和4. 0M HC1的二噁烷溶液(5mL) 在室温下搅拌过夜。滤除沉淀后，真空除去溶剂，得到粗的2-氯-5-氟-6-胼基-N-(l-甲 基乙基)-4_嘧啶胺，推测为三-HC1盐。LCMS _)+ 219. 9。部分C [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1-甲基乙基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_(环 戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(268mg， 0. 88mmol)、2_氯-5-氟-6-胼基-N_(l-甲基乙基)_4_嘧啶胺(推测253mg的游离碱， 0. 97mmol)、EDC(186mg,0. 97mmol)、HOAt (132mg, 0. 97mmol)禾口 NMM(0. 64mL, 5. 82mmol) 在DMF中的混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物通过反相HPLC纯化，得到 [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1-甲基乙基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)_2_(环戊基甲 基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(74mg，17% )。LCMS (M+H) + 507. 1。部分D [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1-甲基乙基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_(环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6_[(1-甲基乙基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_(环 戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(74mg，0.15mmol)溶于5mL的 MeOH中。加入Pd(0H)2(30mg)，并将内容物在氢气球下搅拌大约90分钟。然后将内容 物过滤以除去催化剂，并将滤液真空浓缩。将生成的粗产物通过反相HPLC纯化，得到 [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1-甲基乙基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)_2_(环戊基甲 基)_3_ 氧代丙基]羟基甲酰胺(32mg,51% )0 LCMS: (M+H)+:417.0。一般方法F实施例6((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [6_ (2，5_ 二氢-1H-吡咯 基)_5_ 氟 _2_ 甲
基-4-嘧啶基]胼基}_3_氧代丙基)羟基甲酰胺部分A 4-(2，5-二氢_111-吡咯-1-基)-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶将4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(181mg，1. Ommol)溶于4mL的DMS0中，并在室 温下搅拌。加入3-吡咯啉(71mg, 1. 05mmol)，随后加入DIPEA(244uL, 1. 4mmol)。将生成 的反应混合物搅拌，直至第一个氯被取代，然后将胼(350 yL)和MeOH( 2mL)加入到该反 应混合物中。然后将内容物于70°C加热 2小时，直至第二个氯被取代。然后将反应混合物冷却至室温，并通过RP-HPLC纯化，得到4-(2，5- 二氢-1H-吡咯基)_5_氟-6-胼 基-2-甲基嘧啶(142mg,68% )。部分B ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [6_ (2，5_ 二氢-1H-吡咯 基)_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将4-(2，5- 二 氢-1H-吡咯 基)_5_ 氟 _6_ 胼基-2-甲基嘧啶(142mg， 0.68mmol)、(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙 酸(242mg，0. 81mmol)和 HOAt (llOmg，0. 81mmol)溶于 4mL 的 DMF 中。力卩入 NMM(370 ii L， 3. 4mmol)，随后加入EDC(155mg，0. 81mmol)。当原料耗尽时，将反应混合物通过RP-HPLC纯 化，得到((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- (2，5- 二氢-1H-吡咯-1-基)_5_氟-2-甲 基-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(140mg，55% )0部分C ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- (2，5- 二氢-1H-吡咯 基)_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基]胼基}_3_氧代丙基)羟基甲酰胺将((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(2，5-二氢-111-吡咯-1-基)-5-氟-2-甲 基-4-嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(140mg)的 4 lAcOH 水(2mL)溶液在室温下搅拌，直至完成了脱保护基。真空除去溶剂，并将生成 的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(2，5_ 二氢-1H-吡 咯-1-基)-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺(68mg，58% )0 LCMS (M+H)+407. 3。一般方法G实施例7[(2R) -3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[ (1S，4S) _5_ 甲基 _2，5- 二氮杂二环[2. 2. 1]
庚-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (lS，4S)-2_(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)_5_ 甲基-2，5_二氮杂二环[2. 2. 1] 庚烷将2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(2. Olg，lOmmol)溶于30mL的DMS0中，并在室温下搅 拌。加入市售可得的(lS，4S)-2-甲基_2，5-二氮杂二环[2. 2. 1]庚烷二氢溴酸盐(2. 74g， lOmmol)，随后加入DIPEA(5. 51mL, 32mmol)。将生成的反应混合物搅拌2. 5h，并然后加入胼 (3. OmL)，并将内容物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到推测 为(13，45)-2-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-5_甲基_2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚 烷(第一次的洗脱液)以及推测为4-氯-5-氟-6-[(lS，4S)-5-甲基-2，5-二氮杂二环 [2. 2. 1]庚-2-基]-2 (1H)-嘧啶酮腙(第二次的洗脱液)。
部分B [(2R) -3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[ (1S，4S) _5_ 甲基 _2，5- 二氮杂二环[2. 2. 1] 庚-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺将(lS，4S)-2_(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)_5_甲基-2，5_ 二氮杂二环 [2. 2. 1]庚烷(170mg，0.62mmol)、(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨 基}甲基)丙酸(190mg，0. 62mmol)和 HOAt (93mg, 0. 68mmol)溶于 4mL 的 DMF 中。力口入 NMM(0. 27mL，2. 5mmol)，随后加入EDC(131mg，0. 36mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混 合物通过 RP-HPLC 纯化，得到[(2R) -3- (2- {2-氯 _5_ 氟-6- [ (1S，4S) -5-甲基-2，5- 二氮 杂二环[2. 2. 1]庚-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲 基)氧基]甲酰胺(90mg，55% )。部分C [(2R) -3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[ (1S，4S) _5_ 甲基 _2，5- 二氮杂二环[2. 2. 1] 庚-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(15，45)-5-甲基_2，5-二氮杂二环[2. 2. 1] 庚-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺(90mg，0. 18mmol)溶于3mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10 % Pd/C (18mg)，并 将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite 硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。将生成的滤液真空浓 缩，得到纯的[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(15，45)-5-甲基 _2，5_ 二氮杂二环[2. 2. 1] 庚-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(42mg，57% )0 LCMS (M+H)+ 429. 4。实施例7也可根据下面的方法制备根据一般方法D，使用市售可得的(lS，4S)-2_甲基-2，5_ 二氮杂二环[2.2.1] 庚烷二氢溴酸盐代替部分A中的N-甲基哌嗪，并使用3当量的部分A中的DIPEA，制备 [(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(lS，4S)-5-甲基-2，5-二氮杂二环[2. 2. 1]庚_2_基]-4-嘧 啶基}胼基)-2_(环戊基甲基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺。一般方法H实施例8((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [2- ( 二氟甲基)_5_ 氟 _6_ (4-甲基 哌嗪
基)_4_嘧啶基]胼基}_3_氧代丙基)羟基甲酰胺 部分A 2- (二氟甲基)-5-氟-4-胼基-6- (4-甲基哌嗪基)嘧啶将4，6-二氯-2-( 二氟甲基)-5-氟嘧啶(200mg，0. 92mmol)溶于DMS0(5mL)中，并 在室温下搅拌。加入N-甲基哌嗪(1101^，0.96讓01)，随后加入01卩￡六(5001^，2.9讓01)。将生成的混合物在室温下搅拌1小时，直至通过LCMS确定N-甲基哌嗪取代了一个氯。加 入胼(lmL，31mmol)，并将该反应在室温下搅拌过夜。将粗的反应混合物通过RP-HPLC纯化， 得到2-( 二氟甲基)-5-氟-4-胼基-6-(4-甲基-1-哌嗪基)嘧啶(142mg,56% )0 LCMS _)+ 277. 0。部分B ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [2- ( 二氟甲基)_5_ 氟 _6_ (4-甲基 哌嗪 基)_4_嘧啶基]胼基}_3_氧代丙基)羟基甲酰胺将2-(二氟甲基)-5_氟-4-胼基-6-(4-甲基-1-哌嗪基)嘧啶(142mg，0.51mmol) 加入到(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(156mg， 0. 51mmol)的 DMF(5mL)溶液中。向该混合物中加入 HOAt (83mg，6. lmmol)、EDC(117mg， 6. lmmol)和NMM(0. 28mL，2. 6mmol)。将该反应搅拌过夜，并通过RP-HPLC分离生成的苄基 保护的中间体。然后将该物质溶于除气的Me0H(5mL)中，并加入10 % Pd/C(占中间体的 20% w/w)0将生成的悬浮液在氢气球下搅拌3小时，随后过滤除去催化剂。真空浓缩，得 到((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[2- ( 二氟甲基)-5-氟-6- (4-甲基-1-哌嗪基)-4-嘧 啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺(78mg,32% )。LCMS _)+ 474. 1。实施例9[ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 4-氮杂环丁基-6-胼基-5-氟-2-甲基嘧啶将4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(6g，33mmol)溶于50mL的iPrOH中，并在室温下 搅拌。加入氮杂环丁烷-HC1 (3. 25g，35mmol)，随后加入14. 4mL的DIPEA。将生成的反应混 合物搅拌3h，并然后加入胼一水合物(4. 0mL,82. 5mmol)，并将内容物于80°C加热过夜。然 后将反应混合物冷却至室温，并形成沉淀。将该沉淀过滤，用iPrOH洗涤，并干燥。将剩余的 滤液倒入到250mL的水中，并用Et0AC(5xl00mL)萃取。将合并的有机部分用水(2xl00mL) 和盐水(2X100mL)洗涤。将有机物经硫酸钠干燥，过滤，并真空浓缩。将该粗产物通过硅胶 快速色谱法纯化，使用97. 5/2. 5/0. 25DCM/Me0H/NH40H作为洗脱剂。4-氮杂环丁基_6_胼 基-5-氟-2-甲基嘧啶(沉淀+色谱分离的产物)全部合并的产量为3.6g(55%)。LCMS (M+H)+:198。部分B [ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将4-氮杂环丁基-6-胼基-5-氟-2-甲基嘧啶(2. 3g，11. 6mmol)、(2R)_3_环戊 基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(3.54g，11.6mm0l)和H0At(1.9g， 13. 9mmol)溶于 25mL 的 DMF 中。加入 DIPEA (6mL，34. 8mmol)，随后加入 EDC(2. 75g,13. 9mmol)。在室温下搅拌过夜后，将内容物倒入到400mL的水中(形成沉淀)，并用乙酸乙 酯(4x200mL)萃取。将合并的有机级分用水(2x200mL)和盐水(3x200mL)洗涤，并然后经硫 酸钠干燥，过滤并浓缩至干。将粗物质通过硅胶快速色谱法纯化，使用3% MeOH/DCM作为洗 脱剂，得到[(2R) -3- {2- [6- (1-氮杂环丁烷基)-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(2.5g，44% )。LCMS:(M+H)+:485。部分C [ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(3.9g，8.0mmol)溶于50mL的MeOH 中，并用氩气除气。加入10 % Pd/C (400mg)，并将内容物在氢气球下放置4. 5小时。然后将内 容物用氩气除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH 洗涤。将生成的滤液真空浓缩，得到纯的[(2 -3-{2-[6-(1-氮杂环丁烷基)-5-氟-2-甲 基-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(3. lg，98 % )。LCMS (M+H)+:395。实施例10((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6-(4_吗啉基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的吗啉代替部分A中的吡咯烷制备((2R)-2_(环戊 基甲基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-(4-吗啉基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲 酰胺。LCMS :(M+H)+:425. 4。实施例11[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_2_甲基_6_ [甲基(甲氧基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的N，0_ 二甲基羟基胺盐酸盐代替部分A中的吡咯 烷制备[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基-6-[甲基(甲氧基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 399. 2。实施例12((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟 _2_ 甲基 _6_ (1，3_ 噻唑烷 _3_ 基)_4_ 嘧啶 基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺
根据一般方法A，使用市售可得的噻唑烷代替部分A中的吡咯烷制备((2R)-2_(环 戊基甲基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6- (1，3-噻唑烷-3-基)~4~嘧啶基]胼基} -3-氧代丙 基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 427. 4。实施例13[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_2_甲基_6_ [3_ (甲氧基)氮杂环丁烷
基]-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的3-甲氧基氮杂环丁烷盐酸盐代替部分A中的吡 咯烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [3-(甲氧基)氮杂环丁烷 基]-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 425. 2。实施例14[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3R) _3_ (甲氧基)吡咯烷
基]-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的(R)-3-羟基吡咯烷盐酸盐代替部分A中的吡咯 烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [ (3R) -3-(甲氧基)吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 439. 2。实施例15 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3S) _3_ (甲氧基)吡咯烷
基]-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺
根据一般方法A，使用市售可得的(S)-3-羟基吡咯烷盐酸盐代替部分A中的吡咯 烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [ (3S) -3-(甲氧基)吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 439. 2。实施例16[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基_6-[(1_甲基乙基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的异丙胺代替部分A中的吡咯烷制备[(2R) _2_ (环 戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [ (1-甲基乙基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代 丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 397. 4。实施例17{(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2_ (5_氟_2_甲基_6_ {甲基[2_ (甲氧基)乙基]氨
基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的N-(2_甲氧基乙基)甲胺代替部分A中的吡咯 烷制备{(2幻-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5-氟-2-甲基-6-{甲基[2_(甲氧基)乙基]氨 基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:427.2。实施例18[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [乙基(甲基)氨基]_5_氟_2_甲基~4~嘧啶
基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的N-乙基甲胺代替部分A中的吡咯烷制备 [(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[乙基(甲基)氨基]-5-氟-2-甲基_4_嘧啶基}胼 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 397. 4。实施例19[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5-氟 _6_ [ (2S) _2_ (羟基甲基)吡咯烷
基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的环戊胺代替部分A中的吡咯烷制备 [(2R) -3- {2- [6-(环戊基氨基)-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧 代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 423. 1。实施例22[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(3R)-3_(羟基甲基)-1_ 吡咯烧
基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法 Α，使用 3(R)_ 吡咯烷甲醇(J. of Med. Chem. 1987，30，1711-1715) 根据一般方法A，使用市售可得的(S)-(+)-2_(羟基甲基)吡咯烷代替部分A中 的吡咯烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6-[ (2S) -2-(羟基甲基)吡咯烧 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 440. 2。实施例20[ (2R) -3- {2- [6-(环丁基氨基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用市售可得的环丁基胺代替部分A中的吡咯烷制备 [(2R) -3- {2- [6-(环丁基氨基)-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧 代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 409. 4。实施例21[ (2R) -3- {2- [6_ (环戊基氨基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
代替部分A中的吡咯烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (3R) -3-(羟基甲 基)"I"吡咯烷基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 439.2。实施例23[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5-氟 _6_ [ (3S) _3_ (羟基甲基)吡咯烷
基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用 3(S)_ 吡咯烷甲醇(J. of Med. Chem. 1987，30，1711-1715) 代替部分A中的吡咯烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (3S) -3-(羟基甲 基)-1_吡咯烷基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+ 439.2。实施例24[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺部分A N-(苯基甲基)-D-丝氨酸根据W02005058245的方法，将D-丝氨酸甲酯盐酸盐(98. 84g，635. 3mmol) 在MeOH (280mL)中的混合物冷却至10°C。向该混合物中缓慢地加入三乙胺(88. 5mL, 635.0mmol)。将混合物温热至室温，并将生成的溶液冷却至10°C。向该溶液中加入苯甲醛 (64mL,630. 2mmol)，并将该溶液搅拌30分钟。用30min的时间，向该溶液中分批加入硼氢 化钠(24. 03g，635. 2mmol)，并将混合物再搅拌30分钟。在单独的烧瓶中，将MeOH(IHmL) 加入水(170mL)中，并向该溶液中加入Na0H(77. 25g，1931mmol)的水(155mL)溶液。将该 溶液冷却至15°C，并用15分钟的时间将还原胺化的混合物缓慢地加入到NaOH-水-MeOH溶 液中。将该溶液搅拌，并用30min的时间温热至室温，并加入水(170mL)，随后加入足量的 6N的HCl水溶液以调节pH至9. 5。将该溶液用EtOAc (2x60mL)洗涤，并加入足量的6N的 HCl水溶液以调节pH至6. 5。将混合物冷却至0°C并保持过夜。将生成的固体通过真空过 滤收集，并用水(2x200mL)随后用庚烷(2x200mL)洗涤。将白色固体在高真空下于40°C干 燥 3 天，得到 N-(苯基甲基)-D-丝氨酸(79. 51g，64% )。LCMS (M+H) + 196. 1。部分B
(3R)-5_氧代-4-(苯基甲基)-3-吗啉甲酸根据W02005058245 的方法，将 N-(苯基甲基)-D-丝氨酸(79. 51g，407. 3mmol)在 THF(485mL)中的溶液冷却至0°C，并加入预先冷却至0°C的K2CO3 (168. 87g，1222mmol)的水 (485mL)溶液。向该充分搅拌的混合物中缓慢地加入氯乙酰氯(45.4mL，570.0mmol)，同时 保持内部温度低于5°C。将混合物于0°C剧烈搅拌30min，并然后缓慢地加入另一批的氯乙 酰氯(4. 54mL, 57. Ommol)。将混合物于0°C再搅拌30分钟。向该混合物中加入足量的预先 冷却至0°C的NaOH水溶液(50% w/w)以调节pH > 13. 5，同时保持内部温度在5°C至10°C 之间。将混合物于0°C搅拌2h，并然后温热至20°C。将混合物用庚烷(165mL)随后用第二 批新制的庚烷(240mL)洗涤。将水相冷却至0°C，并用浓HCl水溶液调节至pH < 2，同时保 持内部温度低于10°C。将混合物置于0°C的冰箱中过夜，并将该固体通过真空过滤收集。将 该固体用水(2x300mL)洗涤，并于42°C真空干燥过夜。分离生成的(3R)-5-氧代-4-(苯基 甲基)-3_吗啉甲酸(72. 20g,75% )，为白色固体。LCMS :_)+ 236. 1。部分C (3R)-5-氧代-N，4-双(苯基甲基)_3_吗啉甲酰胺将(3R)-5-氧代-4-(苯基甲基)-3_吗啉甲酸(69. 67g,296. 2mmol)和1_羟基 苯并三唑(48. 01g，355. 4mmol)在DCM(990mL)中的混合物冷却至0°C。向该混合物中加入 4-甲基吗啉(163mL, 1483mmol)、苄基胺(35. 6mL，325. 9mmol)和 EDC(62. 46g，325. 8mmol)。 将该黄色溶液在室温下搅拌过夜，并然后用水(500mL)、6N的HCl水溶液(300mL)和水 (200mL)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的(3R)_5_氧代-N， 4-双(苯基甲基)-3_吗啉甲酰胺(97.05g，> 100%粗产物的产率)，为黄色泡沫状物。 LCMS (M+H)+325. 2。部分D 1-苯基4-{[(3幻-4-(苯基甲基)-3-吗啉基]甲基}甲胺通过加料漏斗向0°C的(3R)-5-氧代-N，4-双(苯基甲基)_3_吗啉甲酰胺(推测 96. 07g，296. 2mmol)的 PhMe (750mL)溶液中加入 Red-Al (65% w/w 的 PhMe，645mL)。在加 入大约50mL的Re-Al后，将生成的混合物温热至室温，并然后用30分钟的时间加入剩余的 Red-Al。然后将混合物于50°C加热，并搅拌过夜。将该溶液冷却至0°C，并将该反应通过缓 慢地滴加IN的NaOH水溶液(50mL)来终止。然后加入另一批的IN的NaOH水溶液(500mL)， 随后加入Et20(200mL 分离各相，并将有机相用新制的IN的NaOH水溶液(400mL)洗涤。 将合并的水相用新制的4 lPhMe-Et20(250mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干 燥，过滤，并真空浓缩，得到黄色油状的I-苯基-N- {[ (3S) -4-(苯基甲基)-3-吗啉基]甲 基}甲胺，其不需进一步纯化而使用。LCMS (M+H)+297. 1。部分E 氧代((苯基甲基){[(3S)-4_(苯基甲基)-3_吗啉基]甲基}氨基)乙酸乙酯将1-苯基-N-{[(3S)-4_(苯基甲基)-3_吗啉基]甲基}甲胺(推测87.79g， 296. 2mmol)和 N，N- 二异丙基乙胺(67. ImL, 385. 2mmol)的 THF(IOOOmL)溶液冷却至 0°C。 向该溶液中通过加料漏斗滴加氯代(氧代)乙酸乙酯(36.3mL，326.2mmol)。将生成的 混合物搅拌并温热至室温1小时。然后将溶剂真空除去至大约20%体积，并将残余物在 Et0Ac(600mL)、水(IOOmL)和饱和的NaHCO3水溶液(500mL)之间分配。将水相用新制的EtOAc (200mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。然后将残余 物与EtOH(IOOmL)共沸，得到黄色油状的氧代((苯基甲基){[ (3S)-4-(苯基甲基)-3-吗 啉基]甲基}氨基)乙酸乙酯，其不需进一步纯化而使用。LCMS :(Μ+Η)+:397.2。部分F (9aS)-8_(苯基甲基)六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪_6，7_ 二酮向氧代((苯基甲基){[(3S)-4_(苯基甲基)-3_吗啉基]甲基}氨基)乙酸乙酯 (推测117. 43g，296. 2mmol)的EtOH(IOOOmL)溶液中加入10%Pd/C(23g)。将生成的混合物 在气球压力下氢化5天，并然后用EtOH洗涤液通过玻璃纤维滤器过滤。然后将该溶液真空 浓缩，并由EtOH-EtOAc结晶，得到大约15g的白色固体。然后将Pd/C滤饼用Me0H(600mL) 浆化，并将混合物用MeOH洗涤液通过玻璃纤维滤器过滤。然后将该溶液真空浓缩，并由 EtOH-EtOAc结晶，得到白色固体，将其与开始的一批固体合并。然后将合并的母液真空浓 缩，并由EtOH-EtOAc结晶，得到白色固体，将其与前两批的固体合并，得到(9aS)-8-(苯基 甲基)六氢吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪-6，7-二酮(39. 97g，52%产率，4 步)。LCMS (M+H) + 261. 1。部分G (9aS)-8_(苯基甲基)八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪用40分钟的时间，向0°C下的两批合并的(9aS)-8_(苯基甲基)六氢吡嗪并[2， 1-c] [1,4]噁嗪-6，7-二酮(合并的总量为42. 29g，162. 5mmol)在Et20(406mL)中的混合物 中通过滴液漏斗加入IM LiAlH4的Et2O溶液(406mL，406mmol)。然后将混合物温热至35°C， 并搅拌6天。然后将混合物冷却至0°C，并缓慢地加入EtOAc (IOOmL)，随后加入水(20mL)、 15% NaOH水溶液(20mL)和水(60mL)。将混合物剧烈搅拌lh，并然后用EtOAc (500mL)稀释。 将混合物过滤，并将滤饼用IN NaOH水溶液(500mL)稀释，并用Et2O(2x200mL)萃取。将合 并的有机相(滤液和Et2O萃取液)经无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，与MeOH(IOOmL)共 沸，并在高真空下干燥过夜。将生成的无色油状物与通过相同方法由(9aS)-8-(苯基甲基) 六氢吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪-6，7-二酮(0. 3047g，l. lmmol)制备的第二批产物合并，得 到粗的(9aS)-8-(苯基甲基)八氢吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪(合并的总量为38. 59g，> 100%粗产物的产率)。LCMS (M+H)+ 233. 1。部分H (9aS)_八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪二盐酸盐向(9aS)-8_(苯基甲基)八氢吡嗪并[2，1-c] [1，4]噁嗪(推测38. 02g, 163. 6mmol)的 Me0H(330mL)溶液中加入 6N HCl 水溶液(55mL, 330mmol)禾口 10 % Pd/ C(3.80g)。将混合物氢化过夜，并然后通过玻璃纤维滤器过滤。将滤饼用MeOH洗涤，并将 合并的溶液真空浓缩，并与MeOH(4xl50mL)共沸，得到(9aS)_八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁 嗪二盐酸盐(34. 78g，99%, 2步的产率)，为红色油状物，其在高真空下固化。LCMS (M+H) + 142. 9。部分I (9aS)-8-(6-氯_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基)八氢吡嗪并[2，1-c] [1,4]噁嗪向(9aS)_八氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪二盐酸盐(23. 28g, 108. 2mmol)在 DCM(360mL)中的混合物中加入4,6- 二氯~5~氟-2-甲基嘧啶(19. 59g，108. 2mmol)和N，N- 二异丙基乙胺(68mL，390. 4mmol)。将混合物搅拌2h，并将生成的溶液用DCM(IOOmL)稀 释，并用饱和的NaHCO3水溶液(200mL)洗涤。将水相用新制的一批DCM(IOOmL)萃取，并将 该有机相用饱和的NaHCO3水溶液(50mL)洗涤。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤， 并真空浓缩，得到(9aS)-8-(6-氯-5-氟-2-甲基_4_嘧啶基)八氢吡嗪并[2，l_c][l，4] 噁嗪，为淡黄色油状物，其不需进一步纯化而使用。LCMS :(M+H)+ 287. 1。部分T (9aS)-8-(5-氟_6_胼基_2_甲基_4_嘧啶基)八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪向(9aS)-8-(6-氯_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基)八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪 (推测31.03g，108. 2mmol)的二噁烷(430mL)溶液中加入胼一水合物(3ImL) 0将混合物加 热并于80°C搅拌过夜，并然后于85°C搅拌7h。将混合物冷却至室温，并真空浓缩。将残余物 溶于DCM(500mL)中，并用饱和的NaHCO3水溶液(200mL)洗涤。将水相用新制的DCM(IOOmL) 萃取，并将该有机相用饱和的NaHCO3水溶液(IOOmL)洗涤。将合并的有机相经无水Na2SO4干 燥，过滤，真空浓缩，并在高真空下干燥过夜，得到(9aS)-8-(5-氟-6-胼基-2-甲基-4-嘧 啶基)八氢吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪(27.988，92%产率，2步)，为淡黄色固体。LCMS (M+H)+ 283. 3。部分K [(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺向(2R)-3_环戊基_2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸，N， N-二异丙基乙胺盐，异丙醇溶剂合物(33.64g，68.0mmol)的DMF(230mL)溶液中加入 (9aS)-8-(5-氟-6-胼基-2-甲基-4-嘧啶基)八氢吡嗪并[2，1-c] [1,4]噁嗪(20. 16g， 71. 4mmol)、N-甲基吗啉(30mL，273mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(11. 10g，81. 6mmol) 和EDC(15.64g，81.6mm0l)。将溶液搅拌过夜，并然后用Et2O(500mL)稀释。将混合物用 水(2x200mL)洗涤，并将合并的水相用新制的Et2O(IOOmL)萃取。然后将该Et2O相用水 (50mL)洗涤。将该萃取-洗涤步骤重复6次，并然后将全部合并的有机相用DCM(250mL) 稀释。然后将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的[(2R)-2-(环戊基甲 基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(42. 32g，> 100%粗产物的产率)， 为淡黄色泡沫状物质。LCMS (M+H)+ 570. 3。部分L [(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6_[(9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4] 噁嗪-8(1H)_基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺 (推测38. 74g，68. Ommol)的甲醇(225mL)溶液中加入10% Pd/C(5. 81g)。将混合物在气球 压力下氢化4h，并然后用MeOH洗涤液通过玻璃纤维滤器过滤。将生成的溶液真空浓缩至大 约10%体积，用Et0Ac(400mL)稀释，并真空浓缩至大约30%体积。将生成的固体通过真空 过滤收集，并用EtOAc洗涤。将母液和EtOAc洗涤液真空浓缩至大约10%体积，并将生成 的固体通过真空过滤收集，并用EtOAc洗涤。将两批固体合并，并于50°C在高真空下干燥16h，得到[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺(25.48g，78%产 率，2 步)，为白色固体。LCMS :(M+H)+480. 1。另一种方法向粗的[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l， 4]噁嗪-8(1H)_基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺(推测 39. 73g，69. 74mmol)的 Me0H(350mL)溶液中加入 10% Pd/C(50%水，7. 9g)。将悬 浮液在气球压力下氢化3h，并然后用MeOH洗涤液通过两个玻璃纤维滤器过滤。将生成的溶 液真空浓缩至大约70mL的体积，并然后用EtOAc (500mL)稀释。将该溶液真空浓缩以除去大 约IOOmL的溶剂。将生成的固体通过真空过滤收集，并用EtOAc随后用己烷充分洗涤。将 母液真空浓缩，并然后用EtOAc (200mL)稀释。将混合物真空浓缩至大约50%体积，并将生 成的固体通过真空过滤收集，并用EtOAc随后用己烷充分洗涤。将两批固体合并，并置于高 真空下过夜。然后向该物质中加入大约466mg的通过类似顺序制备的物质，并将合并的物 料在高真空下于50°C加热过夜，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6-[ (9aS)-六 氢吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟 基甲酰胺(28.27g，83%产率，2步)。LC/MS (M+H) + :480. 3。将生成的固体分析表征，并发 现为多晶型1。实施例25((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [2_乙基_5_氟_6_ (4-甲基哌嗪基)_4_嘧啶
基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 部分A 2-乙基-5-氟-4-胼基-6-(4-甲基哌嗪基)嘧啶向冰冷却的1，4_ 二噁烷(IOmL)和Me0H(2mL)的溶液中顺序加入4，6_ 二氯_2_乙 基-5-氟嘧啶(1. Og, 5. 13mmol)、N-甲基哌嗪(626uL，5. 64mmol)和 DIPEA (1. 97mL, 12. 4mmol)。然后将该溶液在室温下搅拌2h。该反应完成后，加入无水胼(1. 29mL,99mmol)。 将生成的悬浮液在油浴中于90°C加热2h，直至中间体耗尽。蒸发溶剂，得到淡黄色固体。将 该固体溶于CH2Cl2(IOOmL)中，并用IN HCl洗涤。将水相用DCM(50mL)反萃取。将合并的 有机层经无水Na2SO4干燥。蒸发溶剂，得到淡黄色残余物，为所需的产物(890mg，69%)。部分B ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [2_乙基_5_氟_6_ (4_甲基哌嗪基)_4_嘧啶 基]胼基}-3_氧代丙基)[(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(12. 4g， 40. 6mmol)的DMF (120mL)溶液加入到2-乙基-5-氟-4-胼基-6- (4-甲基-1-哌嗪基)嘧 啶(9. 6g，37. 8mmol)、H0At(5. 66g，41. 58mmol)和 EDC(7. 97g，41. 58mmol)的混合物中。将生成的溶液用NMM(9. ImL, 83. 2mmol)处理，并在室温下搅拌3h。该反应完成后，加入200mL 的水，并将该溶液用200mL的乙醚萃取三次。将合并的有机层用水(200mL)和盐水(IOOmL) 洗涤，并然后经无水Na2SO4干燥。蒸发溶剂，得到淡黄色玻璃状固体，为纯的产物(17. lg， 84% )。部分C ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [2_乙基_5_氟_6_ (4-甲基哌嗪基)_4_嘧啶 基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺将悬浮于Me0H(400mL)中的((2R)_2_(环戊基甲基)_3-{2-[2_乙 基-5-氟-6- (4-甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)[(苯基甲基)氧基] 甲酰胺(17. lg,31.61mmol)和10%Pd/C(4g)的混合物在H2气球下搅拌。2小时后，加入另 外2g新制的10% Pd/C。将生成的悬浮液在氢气氛下再搅拌1. 5小时，直至起始物料耗尽。 通过Celite硅藻土过滤来除去Pd/C，用MeOH和CH2Cl2洗涤。将滤液真空浓缩。当进行蒸发 时，产物从剩余的溶液中结晶出来。继续蒸发直至只剩下 50mL的液体。然后将结晶通过 过滤收集，得到白色固体的产物(lO.Og)。将滤液进一步蒸发，得到第二批结晶(1.5g)，为 纯的产物。按照相同的方法，收集第三批产物。合并的((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [2-乙 基-5-氟-6-(4-甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺的产率 % 86% (12. 2g) ο LCMS :(M+H)+452. 1。实施例26N-[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[2_乙基_5_氟_6-(2_异噁唑烷基)_4_嘧啶 基]胼基}-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的异噁唑烷代替部分A中的氮杂环丁烷制备 N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [2-乙基_5_氟-6- (2-异噁唑烷基)_4_嘧啶基]胼 基}-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 425. 2。实施例27N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3R) _3_ ( 二 甲基氨基)_1_ 吡咯烷 基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的(3R)-(+)-3_( 二甲基氨基)吡咯烷代替部分A 中的氮杂环丁烷制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (3R) -3- ( 二甲基氨基)-1-吡 咯烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:466.2。实施例28N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3S) _3_ ( 二 甲基氨基)_1_ 吡咯烧 基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的(3S)-(-)-3_( 二甲基氨基)吡咯烷代替部分A 中的氮杂环丁烷制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (3S) -3- ( 二甲基氨基)-1-吡 口各烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+: 466.2。实施例29N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙基 _5_ 氟 _6_ [ (3S) _3_ 羟基 吡咯烷
基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的(S)-3_羟基吡咯烷代替部分A中的氮杂环丁 烧制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙基-5-氟-6- [ (3S) _3_羟基-1-吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 439. 2。实施例30N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙基 _5_ 氟 _6_ [ (3R) _3_ 羟基 吡咯烷
基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的(R)-3-羟基吡咯烷代替部分A中的氮杂环丁 烧制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙基-5-氟-6- [ (3R) _3_羟基-1-吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 439. 0。实施例31N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [6_ (环丙基氨基)_2_乙基_5_氟_4_嘧啶基] 胼基}-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的环丙基胺代替部分A中的氮杂环丁烷制备 N-[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(环丙基氨基)-2_乙基_5_氟-4-嘧啶基]胼 基}-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 409. 2。实施例32N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ {2_ [2~ 乙基 _6_ (4_ 乙基 哌嗪基)_5_ 氟 _4_ 嘧
啶基]胼基}-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的N-乙基哌嗪代替部分A中的氮杂环丁烷制备 N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [2-乙基-6- (4-乙基-1-哌嗪基)-5-氟-4-嘧啶基]胼 基}-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 466. 5。实施例33N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)~3~ (2~ {2~ 乙基 _5_ 氟 _6_ [4_ (2_ 羟基乙基)哌嗪
基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的1-(2_羟基乙基)哌嗪代替部分A中的氮杂环 丁烷制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙基-5-氟-6- [4- (2-羟基乙基)-1-哌嗪 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 482. 2。实施例34^[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[2-乙基_5_氟_6_(甲氨基)_4_嘧啶基]胼 基} -3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的甲胺代替部分A中的氮杂环丁烷制备 N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [2-乙基-5-氟_6_ (甲氨基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 383. 4。实施例35^[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[2-乙基_6_(乙氨基)_5_氟_4_嘧啶基]胼 基} -3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的乙胺代替部分A中的氮杂环丁烷制备 N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [2-乙基-6-(乙氨基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -3-氧 代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 397. 4。实施例36^[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{2-乙基_5_氟_6-[4-(1_甲基乙基)_1_哌嗪
基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的1-异丙基哌嗪代替部分A中的氮杂环丁烷制备 N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙基-5-氟-6- [4- (1-甲基乙基)哌嗪基]_4_嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:480。实施例371-(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基} -2-乙基-5-氟-4-嘧啶基)-N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺代替部分A中的氮 杂环丁烷制备1-(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基} -2-乙基-5-氟-4-嘧啶基)-N, N- 二甲基-L-脯氨酰胺。LCMS (M+H) + 494. 2。实施例38N-{(2R)-2_(环戊基甲基)-3-[2-(6-{[2_( 二甲基氨基)乙基](甲基)氨 基} -2-乙基-5-氟-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基} -N-羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用市售可得的N，N，N’_三甲基乙二胺代替部分A中的氮杂环丁 烷制备N- {(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2- (6- {[2- (二甲基氨基)乙基](甲基)氨基} _2_乙 基-5-氟-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基} -N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 454. 2。实施例39N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3R) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_2_ 乙
基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A (R)-1，2-二甲基哌嗪二盐酸盐将市售可得的(3R)-3-甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(1. 0g，5. Ommol)、氰 基硼氢化钠(1. 57g,25mmol)和甲醛(37% 的 H2O 溶液，2. 25mL,30mmol)在 Me0H(50mL)中溶 解并搅拌。滴加乙酸(1.75mL，30mmOl)，并将生成的反应混合物在室温下搅拌2h。随后将 溶剂蒸发，并将残余物溶于NaHCO3水溶液中，并用乙醚萃取三次。在从合并的乙醚层中除 去溶剂后，将粗产物(3R)-3，4- 二甲基-1-哌嗪甲酸1，1- 二甲基乙基酯溶于乙醇中，并用 2mL浓HCl处理。将形成的沉淀过滤并然后用乙醇和水中重结晶，得到(R)-l，2-二甲基哌 嗪二盐酸盐(1. 27g)。部分B N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3R) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_2_ 乙 基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法B，在部分A中使用(R) -1，2- 二甲基哌嗪二盐酸盐代替氮杂环丁 烷，并使用3. 5当量的DIPEA制备N- [ (2R) _2_ (环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (3R) -3，4- 二甲 基-1-哌嗪基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+466. 2。实施例40N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3S) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_2_ 乙
基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺

部分A (S)-1，2-二甲基哌嗪二盐酸盐如实施例39中所述，可按照类似于(R)_l，2-二甲基哌嗪二盐酸盐的方法可制备 (S)-1，2-二甲基哌嗪二盐酸盐。部分B N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3_ (2_ {6_[ (3S) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_2_ 乙 基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法B，在部分A中使用(S) -1，2- 二甲基哌嗪二盐酸盐代替氮杂环丁 烷，并使用3. 5当量的DIPEA制备N-[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(3S)-3，4- 二甲 基-1-哌嗪基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+466. 2。实施例41((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟_6_ (4-甲基哌嗪基)_2_ (甲硫
基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 部分A ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟_6_ (4-甲基哌嗪基)_2_ (甲硫 基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺在封闭管中，将{(2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[4-氯-5-氟-2-(甲硫基)_6_嘧 啶基]胼基}-3_氧代丙基}(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(11.60g，23.67mmOl)、 N-甲基哌嗪(2. 89mL, 26. OOmmol, 1. Ieq)和 N，N- 二异丙基乙胺(4. 95mL, 28. 40mmol, 1.2eq)溶于无水DMSO(IOOmL)中，并将混合物在搅拌下于68°C加热3天。将反应混合 物冷却至RT，用水(300mL)稀释，并用乙酸乙酯/己烷(2 l，2x300mL)萃取。将合 并的有机溶液用水(3x200mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，并浓缩，得到((2R)_2_(环戊基甲 基)-3-{2-[5-氟-6-(4-甲基-1-哌嗪基)-2-(甲硫基)-4_嘧啶基]胼基}_3_氧代丙 基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺，为红色的泡沫状固体(12. 5g，95.4%)0部分B ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟_6_ (4-甲基哌嗪基)_2_ (甲硫 基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺将((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_6_ (4-甲基哌嗪基)_2_ (甲硫 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(2.5g，22. 58mmol)溶于乙酸/水(4 1，1L)中，并在RT下搅拌3天。将反应混合物浓缩至干，并 与甲苯(20mL)随后与甲醇(50mL)/三乙胺(20mL)共同蒸发。将残余物溶于甲醇(120mL) 和三乙胺(20mL)中，并通过Gilson HPLC(10-95%乙腈/水，8分钟梯度时间)纯化，得到 ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-6- (4-甲基-1-哌嗪基)-2-(甲硫基)-4-嘧啶基] 胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺，为淡红色泡沫状固体(6.90g，65. 1%)。LCMS:(M+H)+: 470.2。实施例42((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [6_ (乙氨基)_5_氟_2_ (甲硫基)~4~嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的乙胺代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备 ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6-(乙氨基)-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧 代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 415. 2。实施例43((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_6_ (甲氨基)_2_ (甲硫基)~4~嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的甲胺代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备 ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[5-氟-6-(甲氨基)-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧 代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 401. 1。实施例44((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟 _6_ [ (3S) _3_ 羟基 吡咯烷基]_2_ (甲硫
基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的(S)-3-羟基吡咯烷代替部分A中的氮杂环丁烷 盐酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-6- [ (3S) -3-羟基-1-吡咯烷基]_2_ (甲 硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 457. 4。
实施例45 ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_[6_ ( 二甲基氨基)_5_氟_2_ (甲硫基)_4_嘧啶
基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的二甲胺代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制 备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-( 二甲基氨基)-5_氟-2-(甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ :415. 5。实施例46((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_ (甲硫基)_6_ (丙氨基)~4~嘧啶基]胼
基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的N-丙基胺代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐 制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-(甲硫基)_6_(丙氨基)_4_嘧啶基]胼 基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 429. 3。实施例47((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-6-{[2-(甲氧基)乙基]氨基}_2_(甲硫
基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的甲氧基乙胺代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸 盐制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-6-{[2-(甲氧基)乙基]氨基}_2_(甲硫 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 445. 2。实施例481-[6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]-N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺代替部分A中的氮杂 环丁烷盐酸盐制备1-[6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基) 胼基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]-N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺。LCMS (M+H) + :512. 3。实施例49((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_ 氟 _6_ [ (3R) _3_ 羟基 吡咯烷基]_2_ (甲硫 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的(R)-3-羟基吡咯烷代替部分A中的氮杂环丁烷 盐酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-6- [ (3R) -3-羟基-1-吡咯烷基]_2_ (甲 硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 457. 2。实施例50((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(3R)-3_( 二甲基氨基)_1_ 吡咯烷
基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的(3R)-(+)-3_( 二甲基氨基)吡咯烷代替部 分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- [ (3R) _3_ ( 二甲基氨 基)-1_吡咯烷基]-5-氟_2-(甲硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。 LCMS :(M+H)+484. 4。实施例51((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- (4-乙基哌嗪基)_5_氟_2_ (甲硫
基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的N-乙基哌嗪代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐 制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[6- (4-乙基-I-哌嗪基)-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧 啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 484. 2。
实施例52[ (2R) -3- {2- [2_氯_5_氟_6_ (4_吗啉基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的吗啉代替部分A中的N-甲基哌嗪制备 [(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (4-吗啉基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧代 丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 445. 2。实施例53[ (2R) -3- {2- [6_ (1_氮杂环丁烷基)_2_氯_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基
甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的氮杂环丁烷盐酸盐代替部分A中的N-甲基哌嗪 制备[(2R) -3- {2- [6- (1-氮杂环丁烷基)-2-氯-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲 基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ :415. 2。实施例54[ (2R) -3- {2- [2_氯_6_ (4_乙基哌嗪基)_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊
基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的N-乙基哌嗪代替部分A中的N-甲基哌嗪制 备[(2R) -3- {2- [2-氯-6- (4-乙基-1-哌嗪基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲 基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 472. 2。实施例55[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(2_羟基乙基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的N-2-羟基乙基-N-甲胺代替部分A中的N-甲 基哌嗪制备[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(Μ+Η)+:433.6。实施例56[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟_6-[3-(甲氧基)-1_氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的3-甲氧基氮杂环丁烷盐酸盐代替部分A中的 N-甲基哌嗪制备[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[3-(甲氧基)氮杂环丁烷基]_4_嘧啶 基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:445.7。实施例57[(2幻-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{甲基[2_(甲氧基)乙基]氨基} _4_嘧啶基)胼 基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的N-甲基_2-(甲氧基)乙胺代替部分A中的N-甲 基哌嗪制备[(2幻-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{甲基[2-(甲氧基)乙基]氨基} _4_嘧啶基) 胼基]-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:447.5。实施例58[(2R)-3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[(8aS)-六氢吡咯并[l，2_a]吡
嗪-2 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的(SaS)-八氢吡咯并[l，2_a]吡嗪代替部分 A中的N-甲基哌嗪制备[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(8必)-六氢吡咯并[l，2_a]吡 嗪-2(1H)_基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 484. 4。实施例591-{6-氯-2-[2_((210-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-4-嘧啶基} -N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺代替部分A中的N-甲 基哌嗪制备1-{6_氯-2-[2-((2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基) 胼基]-5-氟-4-嘧啶基} -N, N- 二甲基-L-脯氨酰胺。LCMS (M+H) + 500. 1。实施例60 [ (2R) -3- {2- [2_氯_5_氟_6_ (丙氨基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲
基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
根据一般方法D，使用丙基胺代替部分A中的N-甲基哌嗪制备 [(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6-(丙氨基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧代丙 基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 417. 1。实施例61[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_ [ (3S) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用(S)-1，2-二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例40)代替部分A中 的N-甲基哌嗪制备[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(3S)-3，4- 二甲基-1-哌嗪基]_5_氟-4-嘧 啶基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:472.2。实施例62[(2R)-3-(2-{2-氯 _6_[ (3R) _3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用(R)-1，2-二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例39)代替部分A中 的N-甲基哌嗪制备[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(3R)-3，4- 二甲基-1-哌嗪基]_5_氟-4-嘧 啶基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:472.2。实施例63[(2R)-3-(2-{2-氯 _6_[ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A N_{[(苯基甲基)氧基]羰基}-D_丙氨酰-N-甲基甘氨酸甲酯向N_{[(苯基甲基)氧基]羰基}-D-丙氨酸(133. 53g，598. 2mmol)在 DCM(IlOOmL)中的混合物中加入粉末状的肌氨酸甲酯盐酸盐(83. 49g，598. 2mmol)、1_羟基 苯并三唑(80. 81g，598. Immo 1)和4-甲基吗啉(242mL, 2201mmol)。将混合物搅拌IOmin, 并然后加入EDC (114. 68g，598. 2mmol)。将混合物搅拌过夜，并然后用水(500mL)、IN HCl水 溶液(2x300mL)和盐水(300mL)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得 到粗的N-{[(苯基甲基)氧基]羰基}-D-丙氨酰-N-甲基甘氨酸甲酯(162. 35g，88%产 率)，为黄色油状物。LCMS :(M+H)+309. 0。部分B (3R)-1，3_ 二甲基-2，5_ 哌嗪二酮向合并的三批N- {[(苯基甲基)氧基]羰基} -D-丙氨酰-N-甲基甘氨酸甲酯(合 并的总量为 489. 09g, 1586mmol)在 DCM(210mL)中的浆料中加入 MeOH(IOOOmL)和 10% Pd/ C(50g)。将混合物于50psi下氢化过夜，并然后加入另一批10%Pd/C(5g)。将混合物于 50psi下再氢化6h，并然后过滤，并用MeOH和DCM洗涤。将生成的澄清液体蒸发，得到透 明的油状物，随后将其静置固化，得到(3R)-1，3-二甲基-2，5-哌嗪二酮(214.0g，95%产 率)，为淡黄色固体。LCMS :(M+H)+ 143. 0。部分C (3R)-1，3_ 二甲基哌嗪二盐酸盐用1 小时的时间，向 0°C 的(3幻-1，3-二甲基-2，5-哌嗪二酮(93. 74g，659. 4mmol) 在THF(660mL)中的悬浮液中分批加入LiAlH4(75. lg，1979mmol)。然后将混合物于65°C加 热，并搅拌2. 5小时。然后将混合物冷却至0°C，并缓慢地加入Na2SO4 · IOH2O (75g)，随后缓 慢地加入IN NaOH水溶液(IOOOmL)。将混合物用CHCl3 (6xl000mL)萃取，并将合并的有机相 经无水Na2SO4干燥并过滤。向生成的溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(367mL)，并将混合物搅拌过夜。然后将混合物用Me0H(2000mL)稀释，并真空浓缩。将残余物与Me0H(2X1000mL) 共沸，并在高真空下放置过夜，得到(3R)-1，3-二甲基哌嗪二盐酸盐(102. 22g，83%产率)， 为褐色树胶状物。LCMS (M+H)+ :115. 1。部分D 2- {2-氯-6- [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基} _1，1，2_ 胼三甲 酸三(1，1-二甲基乙基)酯向(3R)-1，3-二甲基哌嗪二盐酸盐(102. 22g,546. 3mmol)中加入 2-(2，6-二 氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(271.71g，546. 3mmol) 的DMF (900mL)溶液。将混合物冷却至0°C，并加入N，N- 二异丙基乙胺(295mL，1694mmol)。 将该溶液搅拌，并温热至室温过夜。然后将该溶液用Et2O(IOOOmL)稀释，并用水(IOOOmL) 洗涤。将水相用新制的Et2O(IOOOmL)萃取，并将合并的有机相用水(2x500mL)洗涤。然后 将有机相用DCM(IOOOmL)稀释，经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过硅胶 填料过滤(30% EtOAc的己烷溶液；Et3N)。然后将该溶液真空浓缩，并将残余物与MeOH 共沸。将残余物用MeOH(IOOOmL)稀释，并通过加入水来结晶。将生成的固体通过真空过 滤收集，并用10% MeOH的水溶液洗涤。将生成的黄色固体在高真空下于50°C干燥，得到 2- {2-氯-6-[ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基} -1，1，2-胼三甲酸三(1， 1-二甲基乙基)酯(257. 34g，82%产率)，为淡黄色固体。LCMS _)+:575· 2。部分E 2-氯-4-[(2R)-2，4- 二甲基哌嗪基]_5_氟_6_胼基嘧啶三盐酸盐向2- {2-氯-6- [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基} _1，1，2_ 胼三 甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(215. 28g，374. 3mmol)的DCM(1870mL)溶液中加入2N HCl的 Et2O溶液(1870mL，3740mmOl)。将该溶液机械搅拌64h，并将生成的悬浮液沉降。然后将大 部分溶剂轻轻倒出，并将剩余的固体用DCM(IOOOmL)研磨，并通过真空过滤收集。将该固体 用DCM洗涤，并在高真空下干燥，得到2-氯-4-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-6-胼 基嘧啶，推测为三盐酸盐(138. 22g，96%产率)，为淡黄色粉末。LCMS :_)+ 275. 1。部分F [ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_[ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺
向0°C的2-氯-4-[ (2R) -2,4- 二甲基哌嗪基]_5_氟_6_胼基嘧啶，推测为三 盐酸盐(126. 70g, 329. 9mmol)和(2R) -3-环戊基_2_ ({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基} 甲基)丙酸，N，N-二异丙基乙胺盐，异丙醇溶剂合物(155. 42g，314. lmmol)在DMF(630mL) 中的混合物中加入4-甲基吗啉(240mL，2183mmol)，随后加入1_羟基_7_氮杂苯并三唑 (51. 31g，377. Ommo 1)和 EDC (72. 27g，377. Ommo 1)。将混合物搅拌过夜，用 Et2O (IOOOmL)稀 释，并用水(IOOOmL)洗涤。将水相用新制的Et2O(IOOOmL)萃取，并将合并的有机相用水 (3x300mL)洗涤。将合并的水相用新制的Et20(300mL)萃取，并将该Et2O相用水(200mL) 洗涤。将全部合并的有机相用DCM(IOOOmL)稀释，经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩， 得到粗的[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(193.65g，> 100%粗产 物的产率)，为暗红色泡沫状物质。LCMS (M+H) + 562. 3。
部分G [(2R)-3-(2-{2-氯 _6_[ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺向粗的[(2R)-3- (2- {2_ 氯 _6_ [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(推测176. 57g， 314. Immo 1)的Me0H(800mL)溶液中加入20% Pd (OH) 2/C (14. 13g)。将混合物在气球压力下 氢化，同时每30分钟进行监测，直至判断该反应完成(7h)。然后用MeOH洗涤液通过玻璃 纤维滤器过滤。将生成的深色滤液真空浓缩，并通过制备型反相色谱法(Lima C18(2)柱； 10 微米；101. 6mmx250mm ；250nm UV 检测；480mL/min ；40mg/mL 样品浓度；4g 注射物质；流 动相 A :300mmol 甲酸铵水溶液，pH 4. 0 ；流动相 B =MeCN ；方法28% B，9min ；90% B，9min ； 28% B，5min)纯化。合并产物溶液级分，并用NH4OH水溶液调节至pH 6. 8，并然后在室温 下与Darco (基于粗产物装入50%重量)搅拌30分钟。然后将该溶液通过Celite硅藻土 过滤。将滤液浓缩至3. 5L的体积，并用NH4OH将pH调节至5. 6-8. 5，得到橙色沉淀。将水 相用EtOAc萃取3次，并然后将合并的有机物用水和盐水洗涤。将有机物干燥(Na2SO4)， 过滤，并真空浓缩至IL的体积，得到黄褐色沉淀。加入等体积的庚烷(1L)，并将混合物于 0°C冷却1小时。然后通过过滤分离出产物，用庚烷洗涤，并在减压下于50°C干燥20h，得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺(85. 5g，57%产率，2步)，为白色固体。LCMS:(M+H)+: 472. 2。实施例64[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_[ (2S) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (3S)-1，3_ 二甲基哌嗪二盐酸盐按照类似于制备(3R)-1，3-二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例63)的方法，使用 CBZ-L-丙氨酸代替CBZ-D-丙氨酸可制备(3S)-1，3- 二甲基哌嗪二盐酸盐。部分B 根据一般方法D，使用(S)-l，3_ 二甲基哌嗪代替部分A中的N-甲基哌嗪制备 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2S) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 472. 2。实施例65[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(9aS)_ 六氢卩比嗪并[2，l_c] [1，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，使用(9aS)_八氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪二盐酸盐(其 可按照实施例24，部分A-H中所述的制备)代替部分A中的异丙胺，在部分B中使 用2N HCl的乙醚溶液，在部分C中进行萃取(乙醚/水)后处理，而不是HPLC纯 化，并在部分D中通过用EtOAc/乙醚重结晶而不是HPLC来纯化最终产物，制备得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，1-c] [1,4]噁嗪 _8 (IH)-基]-4-嘧 啶基}胼基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:501.0。实施例66N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟 _6_ [ (2S) _2_ (羟基甲基)氮杂环丁烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A (2S) -2-氮杂环丁烷基甲醇TFA盐将市售可得的(S)-l_(叔丁氧基羰基)-2_氮杂环丁烷甲醇(100mg，5.3mmOl)在 二氯甲烷(2mL)中溶解并搅拌。滴加三氟乙酸(ImL)，并将生成的反应混合物在室温下搅 拌，直至完全除去叔丁氧基羰基。然后将溶剂蒸发，并将粗的(2S)-2-氮杂环丁烷基甲醇的 TFA盐直接用于下一步骤中。部分B N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟 _6_ [ (2S) _2_ (羟基甲基)氮杂环丁烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法A，在部分A中使用(2S) _2_氮杂环丁烷基甲醇TFA盐代替吡咯烷， 并使用3当量的DIPEA制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟-6- [ (2S) -2-(羟基甲 基)-1_氮杂环丁烷基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 425. 4。实施例67((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- ( 二甲基氨基)-5-氟-2-(氟甲基)-4-嘧啶 基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法Α，在部分A中使用二甲胺代替吡咯烷，并使用4，6_ 二 氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶代替4，6-二氯-5-氟-2-甲基嘧啶制备((2R)-2-(环戊基甲 基)-3- {2- [6- ( 二甲基氨基)-5-氟-2-(氟甲基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基 甲酰胺。LCMS _)+ 401. 2。实施例68[ (2R) -3- {2- [6_ (环丁基氨基)_5_氟_2_ (氟甲基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，在部分A中使用市售可得的环丁基胺代替吡咯烷，并使用4，6_二 氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶代替4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶制备[(2R) -3- {2- [6-(环 丁基氨基)-5-氟-2-(氟甲基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基 甲酰胺。LCMS _)+ :427· 2。实施例69N- {(2R) -2-(环戊基甲基)_3_ [2_ (5_ 氟 _2_ 甲基 _6_ {[2_ 氧代 _2_ (1_ 吡咯烷基) 乙基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}-N-羟基甲酰胺 部分A [2-氧代-2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基甲酸苯甲基酯将吡咯烧(248uL,3mmol)、N-CBZ-甘氨酸(628mg，3mmol)和 HOAt (408mg, 3mmol) 溶于IOmL的二氯甲烷中。加入NMM(0. 66mL，6mmol)，随后加入EDC(575mg，3mmol)。在室温 下搅拌过夜后，将反应混合物用二氯甲烷稀释，用水、饱和的NaHCO3水溶液和饱和的NH4Cl 水溶液洗涤，然后干燥(Na2SO4)并蒸发，得到[2-氧代-2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基甲酸 苯甲基酯，为米色固体(782mg, 100% )0 LCMS (M+H) + 263. 1。部分B 2-氧代-2-(l-吡咯烷基)乙胺盐酸盐将[2-氧代-2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基甲酸苯甲基酯(782mg，3mmol)溶于30mL 的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(117mg)，随后加入0. 5mL 6N HCl，并将内 容物彻底地除气，并在氢气球下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。将生成的滤液真空浓缩，得到 2-氧代-2-(l-吡咯烷基)乙胺盐酸盐(491mg，100% )0 LCMS (M+H)+ 129. 1。部分C N- {(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2~ (5_ 氟 _2_ 甲基 _6_ {[2~ 氧代 _2_ (1_ 吡咯烷基) 乙基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}-N-羟基甲酰胺根据一般方法A，在部分A中使用2-氧代-2-(l-吡咯烷基)乙胺盐酸盐代替 吡咯烷，并使用2. 3当量的DIPEA制备N- {(2R) _2_ (环戊基甲基)-3- [2- (5-氟-2-甲 基-6-{[2-氧代-2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}-N-羟 基甲酰胺。LCMS (Μ+Η) + 466. 2。实施例70N-{(2R)-2_(环戊基甲基)-3-[2-(2_ 乙基 _5_ 氟 _6_ {[ (IR) 甲基 _2_ 氧 代-2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}-N-羟基甲酰胺 部分A [(IR)-I-甲基-2-氧代-2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基甲酸苯甲基酯将吡咯烷(1668uL,2mmol)、N-CBZ-D-丙氨酸(446mg, 2mmol)和 HOAt (272mg, 2mmol)溶于 6mL 的二氯甲烷中。加入 NMM (0. 44mL, 4mmol)，随后加入 EDC (382mg, 2mmol)。在 室温下搅拌过夜后，将反应混合物用EtOAc稀释，用水、饱和的NaHCOjK溶液和饱和的NH4Cl 水溶液洗涤，然后干燥(Na2SO4)并蒸发，得到[(IR)-I-甲基-2-氧代-2-(1-吡咯烷基)乙 基]氨基甲酸苯甲基酯，为白色固体(496mg,90% )0 LCMS (M+H) + 277. 2。部分B (2R)-1-氧代-1-(1-吡咯烷基)-2-丙胺将[(IR)-I-甲基-2-氧代-2-(1-吡咯烷基)乙基]氨基甲酸苯甲基酯(496mg, 1. 8mmol)溶于20mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(125mg)，并将内容物 彻底地除气，并在氢气球下放置过夜。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将 Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。将生成的滤液真空浓缩，得到(2R)_1_氧 代-1-(1-吡咯烷基)-2_ 丙胺(235mg,91% ) LCMS (M+H) + 143. 1。部分C N-{(2R)-2_(环戊基甲基)-3-[2-(2_ 乙基 _5_ 氟 _6_ {[ (IR) 甲基 _2_ 氧 代-2-(l-吡咯烷基)乙基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}-N-羟基甲酰胺根据一般方法Α，使用(2R)-1-氧代-1- (1-吡咯烷基)_2_丙胺代替部分A中的 吡咯烷制备N-{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(2_乙基_5_氟-6-{[ (IR)-1-甲基_2_氧 代-2-(l-吡咯烷基)乙基]氨基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}-Ν-羟基甲酰胺。 LCMS (M+H)+494. 2。实施例71[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-(氟甲基)-6-[(3幻-3-(甲氧基)_1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 [1021] 根据一般方法A，在部分A中使用市售可得的(S)-3_甲氧基1吡咯烷代替吡咯 烷，并使用4，6- 二氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶代替4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶制备 [(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-(氟甲基)-6-[(3S)-3-(甲氧基)_1_吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 457. 2。实施例72((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_甲基_6_ (丙氨基)_4_嘧啶基]胼
基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法Α，使用丙基胺代替部分A中的吡咯烷制备((2R)-2-(环戊基甲 基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-(丙氨基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺。 LCMS _)+ 494. 2.实施例73((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_ (氟甲基)_6_ (丙氨基)~4~嘧啶基]胼
基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法A，在部分A中使用市售可得的丙基胺代替吡咯烷，并使用4，6-二 氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶代替4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶制备((2R) -2-(环戊基甲 基)-3- {2- [5-氟-2-(氟甲基)-6-(丙氨基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰 胺。LCMS :(Μ+Η)+:415· 2。实施例74N2-(6-{2-[(2R)_3-环戊基_2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基} -5-氟-2-甲基-4-嘧啶基)-N, N- 二甲基-D-丙氨酰胺 部分A N1 ,N1-二甲基-D-丙氨酰胺按照类似于实施例69的方法，使用N-CBZ-D-丙氨酸代替N-CBZ-甘氨酸，使用二 甲基胺盐酸盐代替吡咯烷，并使用3当量的NMM制备N1，N1- 二甲基-D-丙氨酰胺盐酸盐。部分B N2-(6-{2-[(2R)_3-环戊基_2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基} -5-氟-2-甲基-4-嘧啶基)-N, N- 二甲基-D-丙氨酰胺根据一般方法A，使用N1，N1- 二甲基-D-丙氨酰胺盐酸盐代替部分A中的吡 咯烷制备N2-(6-{2-[(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基} -5-氟-2-甲基-4-嘧啶基)-N，N- 二甲基-D-丙氨酰胺。LCMS (M+H) + 454. 2。实施例75((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(4_乙基哌嗪基)_5_氟_2_(甲氧
基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 部分A [(2R)-3-{2_[6-氯-5-氟_2-(甲氧基)_4_嘧啶基]胼基}_2_(环戊基甲 基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺按照类似于制备中间体E的方法，在部分A中使用0-甲基异脲硫酸盐代替2-甲 基-2-异硫脲硫酸盐，并在部分D中使用(2R) -3-环戊基-2- ({甲酰基[(苯基甲基)氧基] 氨基}甲基)丙酸代替(2R) -3-环戊基-2- {[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基] 甲基}丙酸制备[(2 -3-{2-[6-氯-5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基 甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺。LCMS:(M+H)+:480. 1。部分B ((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(4_乙基哌嗪基)_5_氟_2_(甲氧 基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)[(苯基甲基)氧基]甲酰胺将[(2 -3-{2-[6-氯-5-氟-2-(甲氧基)_4_嘧啶基]胼基}_2_(环戊基甲 基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 150g, 0. 31mmol)、市售可得的1_乙基哌 嗪(0. 080mL,0. 63mmol)和二异丙基乙胺(0. 054mL,0. 31mmol)在 DMS0(2mL)中于 65°C搅拌 过夜。然后将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(4-乙 基-1-哌嗪基)-5_氟-2-(甲氧基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)[(苯基甲基)氧 基]甲酰胺，为红色固体(0. 145g,83% )。LCMS (M+H)+ = 558. 3。部分C [1050]((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(4_乙基哌嗪基)_5_氟_2_(甲氧 基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺将((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[6-(4_乙基-1-哌嗪基)-5_氟_2-(甲氧 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)[(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 145g,0. 26mmol) 和Pd(C) (0. 030g)在MeOH(IOmL)中的溶液按照一般方法A，部分C在标准的氢化条件下 进行氢化，得到((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- (4-乙基-1-哌嗪基)-5-氟_2_ (甲氧 基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺，为红色固体(0. 119g，98%)。LCMS (M+H)+ = 468. 4。实施例76[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {2_ ( 二氟甲基)_6_ [ (3R) _3_ (二甲基氨基)吡
咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法H，使用市售可得的(3R) -N, N- 二甲基_3_氨基吡咯烷代替部分A中 的N-甲基哌嗪制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)-6-[ (3R) _3_ ( 二甲基 氨基)-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (Μ+Η) + 488.1。实施例77N2-(6-{2-[(2R)_3-环戊基_2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基} -2-乙基-5-氟-4-嘧啶基)-N, N- 二甲基-D-丙氨酰胺 根据一般方法B，使用Ν1，N1-二甲基-D-丙氨酰胺(实施例74)代替部分A中的 氮杂环丁烷制备拟-(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基] 胼基} -2-乙基-5-氟-4-嘧啶基)-N，N- 二甲基-D-丙氨酰胺。LCMS (Μ+Η) + 468. 1。实施例78 N- [ (2R) -3- {2- [6_ ( 丁基氨基)_5_氟_2_甲基_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲
基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 [1062] 根据一般方法Α，使用市售可得的丁基胺代替部分A中的吡咯烷制备N- [ (2R) -3- {2- [6- (丁基氨基)-5-氟_2_甲基-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧 代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 411. 1。实施例79{(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2_ (5_ 氟 _2_ (甲氧基)_6_ {[ (IS) (1_ 吡咯烷基羰
基)丙基]氨基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺 部分A [ (IS)-I-(1-吡咯烷基羰基)丙基]胺将[(lS)-l-(l-吡咯烷基羰基)丙基]氨基甲酸苯甲基酯(J. Med. Chem. ,1991, 34,3149-58)溶于甲醇(20mL) (559mg，1. 9 謹 ol)中。加入 Pd(OH)2 (140mg)，并将生成的悬 浮液在氢气球下搅拌直至完成脱保护基。过滤催化剂并蒸发溶剂，得到[(IS)-I-(I-吡咯 烷基羰基)丙基]胺(291mg，97%)。部分B [ (2R) -3- {2- [6-氯_5_氟_2_ (甲氧基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺按照类似于制备中间体E的方法，使用0-甲基异脲硫酸盐代替部分A中的2-甲 基-2-异硫脲硫酸盐，并使用(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲 基)丙酸代替部分D中的(2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨 基]甲基}丙酸可制备[(2R) -3- {2- [6-氯-5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺。LCMS:(M+H)+:480. 1。部分C {(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2_ (5_ 氟 _2_ (甲氧基)_6_ {[ (IS) (1_ 吡咯烷基羰 基)丙基]氨基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺将[(2 -3-{2-[6-氯-5-氟-2-(甲氧基)_4_嘧啶基]胼基}_2_(环戊基甲 基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(70mg，0. 15mmol)溶于DMS0(2mL)中，并 加入[(lS)-l-(l-吡咯烷基羰基)丙基]胺(46mg，0. 29mmol)，随后加入DIPEA(26 μ L， 0. 15mmol)。将生成的混合物于80°C搅拌6天。将该反应直接通过RP-HPLC纯化，得 到苄基保护的中间体，随后将其溶于除气的Me0H(7mL)中。向该溶液中加入10 % Pd/ C(6. 3mg)，并将合并的混合物在氢气球下搅拌2小时。过滤催化剂，并蒸发溶剂，得到粗 的残余物，将其通过RP-HPLC纯化，得到{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5_氟-2-(甲氧 基)-6-{[ (IS)-I-(1-吡咯烷基羰基)丙基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟 基甲酰胺(15mg,20% )0实施例80((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(31 )-3，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-(甲 氧基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据实施例79，使用(2R)-1，2- 二甲基哌嗪(实施例39)代替部 分C中的[(lS)-l-(l-吡咯烷基羰基)丙基]胺合成得到((2R)-2-(环戊基甲 基)-3-{2-[6-[(31 )-3，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-(甲氧基)_4_嘧啶基]胼 基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 468. 3。实施例81 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2_ ( 二氟甲基)_6_ [ (3S) _3_ (二甲基氨基)吡
咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 [1082] 根据一般方法H，使用市售可得的(3S) -N, N- 二甲基_3_氨基吡咯烷代替部分A中 的N-甲基哌嗪制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)-6-[ (3S) _3_ ( 二甲基 氨基)-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 488.3。实施例82((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [6_ (环丙基氨基)_2_ ( 二氟甲基)_5_氟_4_嘧啶 基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法H，使用环丙基胺代替部分A中的N-甲基哌嗪制备((2R)-2_(环戊 基甲基)-3- {2-[6-(环丙基氨基)-2- ( 二氟甲基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙 基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 431. 3。实施例83(2幻-2-[(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-N，N- 二甲基丁酰胺[1091]部分A (2S)-2-氨基-N，N-二甲基丁酰胺盐酸盐按照类似于制备2-氧代-2-(l-吡咯烷基)乙胺盐酸盐(实施例69)的方法，在 部分A中使用N-CBZ-L-2-氨基丁酸代替N-CBZ-甘氨酸，使用二甲基胺盐酸盐代替吡咯烷， 并使用3当量的NMM制备(2S)-2-氨基-N，N- 二甲基丁酰胺盐酸盐。(M+H)+ :130. 9。部分B (2幻-2-[(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-N，N- 二甲基丁酰胺根据一般方法A，使用(2S)-2_氨基-N，N-二甲基丁酰胺盐酸盐代替部分A中的 吡咯烷制备(2幻-2-[(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基] 胼基} -5-氟-2-甲基-4-嘧啶基)氨基]-N，N- 二甲基丁酰胺。LCMS (M+H) + 468. 1。实施例84(2幻-2-[(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基]胼 基}-2_乙基-5-氟-4-嘧啶基)氨基]-N，N- 二甲基丁酰胺 根据一般方法B，使用(2S)-2-氨基-N，N-二甲基丁酰胺盐酸盐(实施例83)代 替部分A中的氮杂环丁烷制备(2幻-2-[(6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨 基]甲基}丙酰基]胼基} -2-乙基-5-氟-4-嘧啶基)氨基]-N, N- 二甲基丁酰胺。LCMS (M+H)+482. 1。实施例85{(2幻-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5-氟-2-甲基_6_ {[ (3S) 甲基_2_氧代-六 氢-IH-氮杂革-3-基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺根据一般方法A，使用(3S)-3_氨基-1-甲基-六氢-2H-氮杂革-2-酮(实 施例193)代替部分A中的吡咯烷制备{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5_氟-2-甲 基-6- {[ (3S) -1-甲基-2-氧代-六氢-IH-氮杂革-3-基]氨基} -4-嘧啶基)胼基]-3-氧 代丙基}羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 480. 3。实施例86
CN 101917981 A说明书86/230 页(2幻-2-{[6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]氨基}-N，N-二甲基丁酰胺 部分A [(2R)-3-{2_[6-氯-5-氟_2-(甲氧基)_4_嘧啶基]胼基}_2_(环戊基甲 基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺根据中间体E，使用0-甲基异脲硫酸盐代替部分A中的2-甲基-2-异硫脲硫酸盐， 并使用(2R) -3-环戊基-2- ({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸代替部分D中 的(2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸可制备 得到[(2R) -3- {2- [6-氯-5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧 代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺。LCMS (M+H)+ 480. 1。部分B (2幻-2-{[6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基) 丙酰基]胼基}-5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]氨基}-N，N-二甲基丁酰胺将[(2 -3-{2-[6-氯-5-氟-2-(甲氧基)_4_嘧啶基]胼基}_2_(环戊基甲 基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 1338，0.2811111101)、(25)-2-氨基-队^二 甲基丁酰胺盐酸盐(实施例83) (0. 075g，0. 45mmol)和二异丙基乙胺(0. ImL, 0. 62mmol)在 DMSO(2mL)中于65°C搅拌过夜。然后加入另外的二异丙基乙胺(0. 2mL)，并将该反应于80°C 搅拌7天。通过RP-HPLC纯化，得到(2幻-2-{[6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯 基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酰基]胼基}-5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]氨基}-N， N- 二甲基丁酰胺(0. 036g,23% )。LCMS (M+H)+ = 574. 3。部分C (2幻-2-{[6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]氨基}-N，N-二甲基丁酰胺将(2幻-2-{[6-{2-[(21 )-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲 基)丙酰基]胼基} -5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]氨基} -N, N- 二甲基丁酰胺(0. 036g, 0. 063mmol)和Pd(C) (0. 008g)在MeOH(IOmL)中的溶液按照一般方法A，部分C在标准的氢 化条件下进行氢化，得到(2幻-2-{[6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲 基}丙酰基)胼基]-5-氟-2-(甲氧基)-4-嘧啶基]氨基}-N，N-二甲基丁酰胺，为橙色 固体(0. 019g,63% )。LCMS (M+H)+ = 484. 4。实施例87((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[5_氟_2_甲基_6_ (四氢_5H_[1,3] 二氧杂环戊 烯并[4，5-c]吡咯-5-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 部分A (顺式)-3，4-二羟基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯将2，5-二氢-IH-吡咯-1-甲酸苯甲基酯(市售可得)(5. 07g，25mmol)溶于丙 酮(25mL)和水(IOmL)的混合物中。加入NMO(5. 9g，50mmol)随后加入催化量的0s04。将 该反应搅拌19小时，并然后通过加入Na2S2O3水溶液来终止。进行标准的后处理，随后通过 硅胶色谱法(3 1己烷乙酸乙酯至纯的乙酸乙酯至9 IDCM MeOH)纯化，得到(顺 式)-3，4_ 二羟基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(0.872g，15% )，为透明油状物。LCMS :(M+H)+ 237. 9.部分B (顺式)_四氢-3aH_[l，3]二氧杂环戊烯并[4，5_c]吡咯向(3札4幻-3，4-二羟基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(0. 872g,3. 7mmol)和二甲氧基 甲烷(IOmL)的DCM(4mL)溶液中加入5滴三氟甲磺酸，并将生成的溶液搅拌直至通过LCMS 判断该反应完成。用饱和的碳酸氢钠水溶液来终止该反应，随后进行标准的后处理，并通过 RP-HPLC纯化，得到中间体(顺式)_四氢-5H-[1，3] 二氧杂环戊烯并[4,5-c]吡咯-5-甲 酸苯甲基酯。将其立即溶于除气的MeOH (5mL)中，加入10 % Pd/C (25mg)，并将该反应在氢气 球下搅拌直至通过LCMS判断该反应完成。过滤并真空浓缩，得到(顺式)_四氢-3aH-[l， 3] 二氧杂环戊烯并[4,5-c]吡咯(88mg,21% )。LCMS (M+H)+ 116. 1。部分C ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [5_氟_2_甲基_6_ (四氢_5H_ [1，3] 二氧杂环戊 烯并[4，5-c]吡咯-5-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺根据一般方法A，使用(顺式)_四氢-3aH_[l，3] 二氧杂环戊烯并[4，5_c]吡咯代 替部分A中的吡咯烷制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基-6-(四氢-5H-[1， 3] 二氧杂环戊烯并[4，5-c]吡咯-5-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺。 LCMS (M+H)+ 453. 3。实施例88[ (2R) -3- {2- [2-氯_6_ ( 二甲基氨基)_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的二甲胺代替部分A中的N-甲基哌嗪制备 [(2R) -3- {2- [2-氯-6- ( 二甲基氨基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧 代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ :403。[1133]实施例89[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [(反式)_3_ ( 二甲基氨基)_4_甲基吡咯 烷基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体的混 合物) 部分A (反式)-N，N，4-三甲基-3-氨基吡咯烷将市售可得的(反式)-3-氨基-4-甲基-1-吡咯烷甲酸1，1- 二甲基乙基酯(lg， 5mmol)和甲醛(0. 69mL，25mmol，37%的水溶液)的THF(20mL)溶液在室温下搅拌1小时。 加入NaBH(0Ac)3(7.4g，35mmol)，并将该反应搅拌过夜。加入IM Na0H(20mL)，并将各层分 离。将水相用乙醚萃取，并将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗的残余物。 将该物质溶于4M HCl的二噁烷溶液(24mL)中，并搅拌3小时。蒸发溶剂，得到定量产量的 (反式)-N，N，4-三甲基-3-氨基吡咯烷。LCMS :_)+ 129. 1。部分B [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6_ [(反式)_3_ ( 二甲基氨基)_4_甲基吡咯 烷基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法A，使用反式-N，N，4-三甲基-3-氨基吡咯烷代替部分A中的吡咯 烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6-[(反式)-3- ( 二甲基氨基)_4_甲基-1-吡咯烷 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为非对映异构体的混 合物。LCMS (M+H)+:466. 4。实施例90(反式)-1-{6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基) 胼基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}-N，N，4-三甲基-3-吡咯烷甲酰胺(非对映异构体的混 合物) 部分A (反式)-N，N，4-三甲基-3-吡咯烷甲酰胺将市售可得的(反式)-3- [ ( 二甲基氨基)羰基]-4-甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基 酯(1. 06g, 3. 4mmol) ,DMAP (0. 63g, 5. 2mmol)和 EDC(1.0g，5. 2mmol)的 DCM(18mL)溶液搅拌5分钟，并加入二甲胺(1. 9mL, 3. 8mmol，2M的THF溶液)。将该反应搅拌直至通过LCMS判断 该反应完成，并用IM HCl终止。经过标准的后处理，得到所需的酰胺中间体。将该物质立即 溶于除气的Me0H(20mL)中，并加入10% Pd/C(120mg)。将反应混合物在氢气球下搅拌直至 通过LCMS观察脱保护基反应完成。过滤除去催化剂，得到(反式)_N，N，4-三甲基-3-吡 咯烷甲酰胺。LCMS (M+H) + 157. 2。部分B (反式)-1-{6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基) 胼基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}_N，N，4-三甲基-3-吡咯烷甲酰胺根据一般方法A，使用(反式)-N，N，4-三甲基-3-吡咯烷甲酰胺代替部分A中的 吡咯烷，制备(反式)-1-{6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰 基)胼基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}-N，N，4-三甲基-3-吡咯烷甲酰胺，为非对映异构 体的混合物。LCMS :(M+H)+:494.40实施例91[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)-6-[(反式)-3- ( 二甲基氨 基)-4_甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对 映异构体的混合物) 根据一般方法H，使用反式-Ν，Ν，4_三甲基-3-氨基吡咯烷(实施例89)代替部分 A中的N-甲基哌嗪制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- (二氟甲基)-6- [ (3S，4R) -3- (二 甲基氨基)-4-甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺， 为1 1非对映异构体的混合物。LCMS :(Μ+Η)+:502.4ο实施例92[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [(反式)_3_ ( 二甲基氨基)_4_甲基吡咯 烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用(反式)_Ν，Ν，4_三甲基-3-氨基吡咯烷(实施例89)代 替部分A中的氮杂环丁烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6-[(反式)_3_ ( 二甲基氨 基)-4_甲基-1-吡咯烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰 胺，为1 1非对映异构体的混合物。LCMS :(Μ+Η)+480. 3。[1159]实施例93[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)_6_ [ (3R) _3，4_ 二甲基 哌嗪
基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法H，使用(2R)-1，2_ 二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例39)代替部分A 中的N-甲基哌嗪制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)-6- [ (3R) -3，4- 二甲 基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 488. 7。实施例94{(2 -2-(环戊基甲基)-3-[2-(5-氟-2-甲基 _6_ {[ (3S) 甲基 _2_ 氧代 _2， 3，4，7-四氢-IH-氮杂革-3-基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺 部分A (2S)-2_({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-4_戊烯酸向MeOH (60mL)和水(70mL)的混合物中加入L-2-氨基_4_戊酸(2. 02g, 17. 5mmol) ^K2CO3 (12. 12g,88mmol)和焦碳酸二叔丁酯(4. 02g, 18. 4mmol)。将该混合物搅拌 12小时，随后冷却至0°C，并用IM HCl酸化至pH为2。除去MeOH，得到水溶液，将其用DCM 萃取。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩，得到(2S)-2_({[(1，1-二甲基乙基)氧基] 羰基}氨基)-4-戊烯酸(3. 47g,92% )0 LCMS :(M+Na)+238. 1.部分B {(IS)-1-[ (2-丙烯-1-基氨基)羰基]-3- 丁烯-1-基}氨基甲酸1，1- 二甲基乙向搅拌下的(2S)-2_({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)-4_戊烯酸 (2. 82g, 13mmol)、DMAP (1. 9g, 16mmol)和 EDC(3. lg, 16mmol)的溶液中加入 N-甲基烯丙基 胺(1. 38mL, 14mmol)。将该反应搅拌72小时，随后通过加入IMHCl (15mL)来终止。将生成 的两相混合物分离，并将水相用DCM萃取一次。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩，得 到KlS)-l-[(2-丙烯-1-基氨基)羰基]-3-丁烯-l-基}氨基甲酸1，1_ 二甲基乙基酯 (0. 94g,28% )。LCMS (M-tBut)+ 238. 1。部分C [(3S)-1-甲基-2-氧代-2，3，4，7-四氢_1Η_氮杂革_3_基]氨基甲酸1，1_ 二
甲基乙基酯[1174]将{(lS)-l-[(2-丙烯-1-基氨基)羰基]-3-丁烯-l-基}氨基甲酸1，1_ 二甲基 乙基酯(0. 94g,3. 9mmol)溶于DCM(350mL)中，并加入1，3_双(2，4，6-三甲基苯基)-2-咪 唑烷亚基)二氯(苯基亚甲基)(三环己基膦)合钌(0.3g，3.5mmol)。将生成的溶液 于40°C加热，并搅拌12小时。将溶剂在减压下蒸发并将粗产物通过RP-HPLC纯化，得到 [(3S)-1-甲基-2-氧代-2，3，4，7-四氢-IH-氮杂革_3_基]氨基甲酸1，1- 二甲基乙基 酯(0. 6g,63% )。LCMS (M+H)+ 242. 3。部分D (3S)-3_ 氨基-1-甲基-1，3，4，7-四氢 _2H_ 氮杂革 _2_ 酮.HCl向[(3S)-1-甲基-2-氧代-2，3，4，7_四氢-IH-氮杂革-3-基]氨基甲酸1，1_ 二 甲基乙基酯(0. 6g,2. 5mmol)的DCM(4mL)溶液中加入HCl (6. 2mL，25mmol，4M的二噁烷溶 液)，并将生成的混合物搅拌12小时。减压下除去溶剂，得到(3S)-3-氨基-1-甲基_1，3， 4，7-四氢-2H-氮杂革-2-酮· HCl (500mg,定量的)。LCMS (M+H)+ 未检测。部分E {(2 -2-(环戊基甲基)-3-[2-(5-氟-2-甲基 _6_ {[ (3S) 甲基 _2_ 氧代 _2， 3，4，7-四氢-IH-氮杂革-3-基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺按照类似于实施例105的方法，使用(3S)-3_氨基-1-甲基_1，3，4，7_四 氢-2H-氮杂革.-2-酮.HCl代替N-甲基-1- (4-嘧啶基)甲胺，并使用二异丙基乙胺代替 三乙胺制备{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5_氟-2-甲基-6-{[(3S)-l-甲基-2-氧代-2， 3，4，7-四氢-IH-氮杂革-3-基]氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺。 LCMS _)+ 478. 5。实施例95[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)_6_ [ (3S) _3，4_ 二甲基 哌嗪
基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法H，使用(2S)-1，2_ 二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例40)代替部分A 中的N-甲基哌嗪制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)-6- [ (3S) -3，4- 二甲 基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 488. 6。实施例96[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)_6_ [ (2S) _2，4_ 二甲基 哌嗪
基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (3S)-3，4-二甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯将市售可得的(3S)-3-甲基-1-哌嗪甲酸1，1- 二甲基乙基酯(3. 05g, 15. 23mmol)、甲醛(37%的水溶液)(2. 13mL)、三乙酰氧基硼氢化钠(5. 52g，26. 04mmol)和 DCM(250mL)搅拌过夜。将溶剂除去，并将IN NaOH加入到残余物中。将混合物用二氯甲烷 萃取，并将有机物干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到(3S)-3，4-二甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二 甲基乙基酯，为透明油状物(3. 15g. 97% )0 LCMS :(M+H)+ = 215.3。部分B (2S)-1，2_ 二甲基哌嗪二盐酸盐将(3S)-3，4-二甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(3. 15g, 14. 7mmol)在 IN HCl (40mL)中搅拌过夜。然后加入4M HCl的1，4_ 二噁烷溶液(25mL)，并将该反应搅拌过 夜。真空除去挥发物，得到(2S)-1，2-二甲基哌嗪二盐酸盐，为白色固体(2.88g)。LCMS (M+H)+ = 115. I0部分C 4-氯-6-[(3S)-3，4- 二甲基哌嗪基]_5_氟_2_甲基嘧啶在室温下，向4，6-二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(0. 181g, 1. Ommol)和(2S)_1，2_ 二 甲基哌嗪二盐酸盐(0. 189g，1. Ommol)的THF(IOmL)溶液中加入三乙胺(0. 42mL，3. Ommo 1)。 加入MeOH(ImL)以改善溶解性。将反应混合物搅拌过夜，并然后真空除去溶剂。将乙醚、THF 和水加入到生成的残余物中。分离有机物，干燥(Na2SO4)并蒸发，得到4-氯-6-[(3S)-3， 4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基嘧啶，为黄色固体(0. 254g,98% )。LCMS (M+H)+ = 259. 3 ο部分D 4-[(3S)-3，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶根据一般方法H，使用(3S)-1，3_ 二甲基哌嗪(实施例64)代替部分A中的N-甲 基哌嗪制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)-6- [ (2S) -2，4- 二甲基-1-哌 嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 488. 5。实施例97[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6_ [ (3S) -3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲
基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 向4-氯-6-[(3S)_3，4- 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲基嘧啶(0. 254g， 0. 98mmol)的DMS0(3mL)溶液中加入胼一水合物(2mL)。将该反应在室温下搅拌3天。 将挥发物真空除去，并将残余物通过RP-HPLC纯化，得到4-[ (3S)-3，4- 二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶，为黄色固体(0. 161g,64% )0 LCMS :_)+ = 255.6。部分E [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (3S) -3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(0. 184g， 0.60讓01)、4-[(35)-3，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶(0. 161g, 0. 63mmol)、NMM (0. 21mL, 1. 89mmol)、HOAt (0. 086g,0. 63mmol)禾口 EDC (0. 121g,0. 63mmol) 溶于DMF(4mL)中，并将该反应搅拌过夜。通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基甲 基)-3- (2- {6-[ (3S) -3，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧 代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0.219g，64% )。LCMS :(M+H)+ = 542.7。部分F [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (3S) -3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(3S)_3，4-二 甲基 哌嗪 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 219g， 0. 40mmol)和Pd (C) (0. 042g)在MeOH(IOmL)中的混合物按照一般方法A，部分C在标准的 氢化条件下进行氢化，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (3S) -3，4- 二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺，为白色固体(0. 172g， 94% )。LCMS (M+H)+ = 452. 3。实施例98[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (3R) -3，4_ 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟 _2_ 甲
基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (3R)-3，4_ 二甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯将市售可得的(3R)-3-甲基-1-哌嗪甲酸1，1- 二甲基乙基酯(2. 78g， 13. 88mmol)、甲醛(37%的水溶液)(1. 94mL)、三乙酰氧基硼氢化钠(5. 03g，23. 73mmol)和 DCM(200mL)搅拌过夜。将溶剂除去，并将IN NaOH加入到残余物中。将混合物用二氯甲烷 萃取，并将有机物干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到(3R)-3，4-二甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二 甲基乙基酯，为透明油状物(2. 70g，91% )。LCMS (M+H)+ = 215.4。[1216]部分B (2R)-1，2_ 二甲基哌嗪二盐酸盐将(3R)-3，4-二甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(2. 70g, 12. 6mmol)在 IN HCl (25mL)中搅拌过夜。然后加入4M HCl的1，4_ 二噁烷(25mL)溶液，并将该反应搅拌过 夜。将挥发物真空除去，得到(2R)-1，2-二甲基哌嗪二盐酸盐，为白色固体(2. 53g)。LCMS (M+H)+ = 115. I0部分C 4-氯-6-[ (3R) -3,4- 二甲基哌嗪基]_5_氟_2_甲基嘧啶向4，6-二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(0. 181g, 1. Ommol)和(2R) _1，2-二 甲基哌 嗪二盐酸盐(0. 189g, 1. Ommol)的 THF(IOmL)溶液中加入三乙胺(0. 42mL，3. Ommol)。加 入MeOH(ImL)以改善溶解性。将反应混合物搅拌过夜。真空除去溶剂，并将THF和乙 醚加入到生成的残余物中，将其用水洗涤。将有机物干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到 4-氯-6-[(3R)-3，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基嘧啶，为黄色的油状物(0. 242g， 94% )。LCMS (M+H)+ = 259. 3。部分D 4-[(3R)-3，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶向4-氯-6-[(3R)_3，4- 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲基嘧啶(0. 242g， 0. 94mmol)的DMS0(3mL)溶液中加入胼一水合物(2mL)。将该反应在室温下搅拌3天。真 空除去挥发物，并通过RP-HPLC纯化，得到4-[ (3R) -3,4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-6-胼 基-2-甲基嘧啶，为黄色固体(0. 079g,33% )。LCMS (M+H)+ = 255.3。部分E [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (3R) -3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(0. 079g, 0. 30mmol)、4-[(3R)-3，4- 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟-6-胼基-2-甲基嘧啶(0. 079g, 0. 31mmol)、ΝΜΜ(0· 10mL，0. 90mmol) ,HOAt (0. 042g，0. 31mmol)和 EDC (0. 059g，0. 31mmol)溶 于DMF (4mL)中，并按照类似于一般方法A，部分B的方法进行处理，得到[(2R) -2-(环戊基 甲基)-3- (2- {6- [ (3R) -3，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧 代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0.082g，49% )。LCMS (M+H)+ = 542.7。部分F [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (3R) -3，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (3R) _3，4_二甲基哌嗪基]_5_氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0.082g，0.15mmol)和 Pd(C) (0.016g)在MeOH(IOmL)中的溶液按照一般方法A，部分C在标准的氢化条件下进行 氢化，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (3R) -3，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为白色固体(0.067g，99% )。LCMS (M+H)+ = 452. 4。实施例99[1232]((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-(四氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡 咯-5(3H)_基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 部分A [(顺式)-1_(苯基甲基)-3，4_吡咯烷二基]二甲醇将(顺式)-1_(苯基甲基)-3，4_吡咯烷二甲酸二甲酯(Chem. Pharm. Bull. 198533 ；896-898) (2. 44g,8. 8mmol)溶于 THF(IOOmL)中，并冷却至 0°C。分批加入 LiAlH4(lg, 26mmol)，并将该反应于60°C加热过夜。在冷却至0°C时，加入含水乙醚，随后 加入水(ImL)、15w/w NaOH(水溶液)(ImL)和水(3mL)。将生成的混合物搅拌15分钟，并 通过Celite硅藻土过滤，得到粗的[(顺式)-1_(苯基甲基)-3，4_吡咯烷二基]二甲醇 (2，. 5g)，将其直接用于下一反应中。LCMS :(Μ+Η)+:222. 3。部分B (顺式)_3，4-吡咯烷二基二甲醇向粗的[(顺式)-1-(苯基甲基)-3，4-吡咯烷二基]二甲醇(2. 5g)的MeOH(50mL) 溶液中加入浓HCl (0. 2mL)，随后加入Pearlmans催化剂(700mg)。将生成的悬浮液于50psi 下在Parr振荡器上氢化48小时，随后加入另外700mg的催化剂。于50psi下再进行氢化 72小时，使得反应完成。通过过滤除去催化剂，并减压蒸发溶剂，得到(顺式)_3，4-吡咯烷 二基二甲醇(970mg，7. 4mmol)。LCMS (M+H)+ 未检测。部分C (顺式)-3，4_双(羟基甲基)-1_吡咯烷甲酸苯甲基酯将(顺式)-3，4_吡咯烷二基二甲醇(970mg，7.4mmol)溶于Me0H(20mL)和水(7mL) 的混合物中，并冷却至0°c。加入Na2C03(1.96g，19mmOl)，随后加入氯甲酸苄基酯(1. 15mL， 8. lmmol)，并将生成的溶液搅拌4小时，将温度保持在0°C下。将该反应减压浓缩以除去大 部分的甲醇，并将剩余的水溶液用EtOAc萃取两次。将合并的有机物用盐水洗涤，并经硫酸 钠干燥，随后真空浓缩。经过RP-HPLC纯化，得到(顺式)-3，4_双(羟基甲基)-1_吡咯烷 甲酸苯甲基酯(450mg,22%, 1. 7mmol) LCMS (M+H) + 266. 1。部分D 四氢-IH-呋喃并[3,4-c]吡咯_5(3H)_甲酸苯甲基酯向DCM(3mL)和吡啶(3mL)的混合物中加入(顺式)_3，4_双(羟基甲基)_1_吡咯 烷甲酸苯甲基酯(250mg，0.94mmol)，随后加入甲苯磺酰氯(540mg，2. 8mmol)，并将生成的 溶液回流4小时。将溶剂蒸发并将残余物与己烷共沸一次，随后通过RP-HPLC纯化，得到四 氢-IH-呋喃并[3,4-c]吡咯 _5 (3H)-甲酸苯甲基酯(170mg,73% ) LCMS (M+H) + 248. 4。部分E 六氢-IH-呋喃并[3,4-c]吡咯向除气的Me0H(5mL)溶液中加入四氢_1Η_呋喃并[3，4_c]吡咯_5(3H)_甲酸苯甲基酯(170mg，0. 68mmol)，随后加入Pd/C(40mg)。在氢气球下搅拌3小时，随后过滤催化 剂并蒸发溶剂，得到六氢-IH-呋喃并[3，4-c]吡咯(70mg，91% )。LCMS (M+H)+ 未检测。部分F ((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-(四氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡 咯-5(3H)_基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺根据一般方法A，使用六氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡咯代替部分A中的吡咯烷 制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6_(四氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡 咯-5(3H)_基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:451.3。实施例100[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (3R，4S) _3_ ( 二甲基氨基)_4_ 甲基 吡咯 烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(Dl) 根据一般方法B，使用反式-N，N，4_三甲基-3-氨基吡咯烷(实施例89)代替 部分A中的氮杂环丁烷制备[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(3R，4S)-3-( 二甲基氨 基)-4_甲基-1-吡咯烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰 胺。将部分B的产物进行手性色谱法处理，得到单一的对映异构体，将其根据部分C进行脱 保护基反应。该化合物的绝对的立体化学是未知的，并且在上述结构中的吡咯烷环上任意 指定。LCMS (M+H)+:480. 6。实施例101[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (3S，4R) _3_ ( 二甲基氨基)_4_ 甲基 吡咯 烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(D2) 根据一般方法B，使用反式-N，N，4_三甲基-3-氨基吡咯烷(实施例89)代替 部分A中的氮杂环丁烷制备[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(3S，4R)-3-( 二甲基氨 基)-4_甲基-1-吡咯烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰 胺。将部分B的产物进行手性色谱法处理，得到单一的对映异构体，将其根据部分C进行脱 保护基反应。该化合物的绝对的立体化学是未知的，并且在上述结构中的吡咯烷环上任意 指定。LCMS (M+H)+:480. 4。实施例102[1261 ] [ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [(反式)_3_ (羟基甲基)_4_ 甲基 吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体的混 合物) [1262] 部分A 消旋-(反式)-4_甲基-1-(苯基甲基)-3_吡咯烷甲酸甲酯在0°C下，向N_(甲氧基甲基)-N_(三甲基甲硅烷基甲基)苄基胺(1.8mL，7mm0l) 和巴豆酸甲酯(0. 62mL,5. 8mmol)的DCM(25mL)溶液中滴加三氟乙酸(0. 045mL,0. 58mmol) 的DCM(ImL)溶液。将该反应温热至室温，并搅拌3h。加入饱和的碳酸氢钠溶液，并分离 各相。将水相用DCM萃取两次，并将合并的有机物经硫酸钠干燥，并真空浓缩，得到粗的消 旋_ (反式)-4-甲基-1-(苯基甲基)-3-吡咯烷甲酸甲酯(1. 58g)，其不需进一步纯化而使 用。LCMS (Μ+Η)+:234· 3。部分B 消旋-[(反式)-4-甲基-3-吡咯烷基]甲醇根据实施例99，部分A和B，在部分A中使用消旋_(反式)~4~甲基_1_(苯基甲 基)-3_吡咯烷甲酸甲酯代替(顺式)-1_(苯基甲基)-3，4_吡咯烷二甲酸二甲酯合成[(反 式)-4_甲基-3-吡咯烷基]甲醇。LCMS (M+H)+ 未检测。部分C [ (2R) -3- (2- {2-氯 _5_ 氟 _6_ [(反式)_3_ (羟基甲基)_4_ 甲基 吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用消旋_ (反式)[(3R，4R) ~4~甲基_3_吡咯烷基]甲醇代替部 分A中的吡咯烷制备[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟_6_ [(反式)-3-(羟基甲基)~4~甲基-1-吡 咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。产物为非对映 异构体的混合物。LCMS (M+H)+ 453. 3。实施例103[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_2_甲基_6_[ (2_吡啶基甲基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 6-氯-5-氟-2-甲基-N-(2-吡啶基甲基)_4_嘧啶胺[1277]将4，6-二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(0. 2g, 1. lllmmol)溶于THF(ImL)中。向该溶液 中加入三乙胺(0. 17mL, 1. 22mmol)，随后加入溶于THF(ImL)中的市售可得的(2-吡啶基甲 基)胺(0. llmL，1.067mmOl)。将该反应搅拌4小时。将反应混合物用水稀释，并用乙醚萃 取。将有机物干燥(MgSO4)并浓缩，得到6-氯-5-氟-2-甲基-N-(2-吡啶基甲基)_4_嘧 啶胺，为黄色的蜡状物(0. 2517g,90% )。LCMS :_)+ = 253. 3。部分B 5-氟-2-甲基_6-[ (2-吡啶基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙将6-氯-5-氟-2-甲基-N-(2-吡啶基甲基)_4_ 嘧啶胺(0. 2517g，0. 999mmol) 溶于2mL的DMSO和ImL的胼一水合物中。将生成的反应混合物搅拌过夜。然后将反应混 合物通过RP-HPLC纯化，得到5-氟-2-甲基-6-[(2-吡啶基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮 腙，为米色固体(0. 0954g,39% )。LCMS (M+H)+ = 249. 3。部分C [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_2_甲基_6_ [ (2_吡啶基甲基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将5-氟-2-甲基-6-[(2-吡啶基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙(0. 0954g, 0. 3846mmol)和(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙 酸(0. 141g,0. 4622mmol)溶于 DMF(3mL)中。加入 NMM(0. 13mL，1. 1824mmol)，随后加入 HOAt (0. 063g，0. 4632mmol)和 EDC (0. 088g，0. 459mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物通过 RP-HPLC纯化，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [ (2-吡啶基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺，为白色固体(0.0999g， 48% ) ο LCMS (M+H)+ = 536. 3。部分D [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_氟_2_甲基_6_ [ (2_吡啶基甲基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲基_6_[ (2_吡啶基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0.0999g，0. 1867mmol) 溶于IOmL的MeOH中，除气，并放置在氮气下。然后加入10% Pd(C) (0. 025g)，并将内容 物除气，并在氢气球下搅拌2. 75小时。然后将内容物除气，并通过Acrodisc (CR PTFE 0. 45 μ m)过滤。将生成的滤液浓缩，并通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基甲 基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [ (2-吡啶基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基] 羟基甲酰胺，为米色固体(0. 0231g,28% )0 LCMS (M+H)+ = 446. 5。实施例104[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{2_ 乙基-5-氟-6_[(8aS)-六氢吡咯并[1,2-a] 吡嗪-2 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法B，在部分A中使用市售可得的(SaS)-八氢吡咯并[l，2_a]吡 嗪代替氮杂环丁烷，并使用DMSO代替MeOH制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2-乙 基-5-氟-6-[(SaS)-六氢吡咯并[l，2-a]吡嗪_2 (IH)-基]_4_嘧啶基}胼基)_3_氧代 丙基]羟基甲酰胺。实施例105[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲基_6_[甲基(4-吡啶基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 5-氟-6-胼基-N，2- 二甲基-N_(4_吡啶基甲基)_4_嘧啶胺将4，6-二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(0. 18g,0. 99mmol)溶于 DMSO (ImL)中。向该溶 液中加入三乙胺(0. 15mL，1.08mmOl)，随后加入市售可得的N-甲基-l-(4-吡啶基)甲胺 (0. 122g，1. Ommol)。将该反应搅拌3小时。然后加入胼一水合物，并将生成的反应混合物在 室温下搅拌过夜。将反应混合物于60°C加热90分钟。冷却后，将反应混合物通过RP-HPLC 纯化，得到5-氟-6-胼基-N, 2- 二甲基-N-(4-吡啶基甲基)-4-嘧啶胺(0. 130g,49% )0 LCMS (M+H)+ = 263. 0。部分B [(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲基_6_[甲基(4-吡啶基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将5-氟-6-胼基-N，2- 二甲基-N- (4-吡啶基甲基)~4~嘧啶胺(0. 130g， 0. 496mmol)和(2R) -3-环戊基-2- {[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙 酸，二异丙基胺盐(0. 238g，0. 56mmol)溶于 DMF(5mL)中。加入 NMM (0. 272mL,2. 4739mmol), 随后加入 H0At(0. 081g，0. 5955mmol)和 EDC(0. 114g，0. 5946mmol)。搅拌过夜后，将反应 混合物通过RP-HPLC纯化，得到[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基_6_[甲基 (4-吡啶基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基) 甲酰胺，为米色固体(0. 0979g,36% )。LCMS (M+2H). = 545. 6。部分C [(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲基_6_[甲基(4-吡啶基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲基_6_[甲基(4-吡啶基甲基) 氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0.0979g， 0. 1802mmol)溶于乙酸(SmL)和水(2mL)中。将该反应搅拌过夜。蒸发挥发物，并将生成的物 质通过RP-HPLC纯化，得到[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基_6_[甲基(4-吡 啶基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为米色固体(0. 0273g, 33% ) ο LCMS (M+H)+ = 460. 7。[1303]实施例106[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {2_ (二氟甲基)_5_ 氟 _6_ [ (SaS)-六氢吡咯并[1， 2-a]吡嗪_2 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法H，使用市售可得的(SaS)-八氢吡咯并[l，2_a]吡嗪代替部分A中 的N-甲基哌嗪制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {2- ( 二氟甲基)-5-氟-6-[ (SaS)-六 氢吡咯并[l，2-a]吡嗪_2 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+500. 3。实施例107N-[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基 _6_[ (1，3_ 噻唑 _2_ 基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A 5-氟-4-胼基-2-甲基-6-[(l，3-噻唑-2-基甲基)氨基]嘧啶将4，6_ 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(180mg，l_ol)溶于ImL的DMSO中，并在室温 下搅拌。加入(1，3-噻唑-2-基甲基)胺(124mg，l. lmmol)，随后加入三乙胺(150 μ L， 1. lmmol)。将生成的反应混合物搅拌3h，然后加入胼(1. OmL)，并将内容物于60°C加热1. 5 小时。然后将反应混合物冷却至室温，并通过RP-HPLC纯化，得到5-氟-4-胼基-2-甲 基-6-[(l，3-噻唑-2-基甲基)氨基]嘧啶(97mg,38% ) LCMS (M+H) + 255. 2。部分B [(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基_6_[ (1，3-噻唑_2_基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将5-氟-4-胼基-2-甲基-6-[(l，3-噻唑-2-基甲基)氨基]嘧啶(80mg， 0.33mmol)、(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙 酸(Hunigs 碱盐，140mg, 0. 33mmol)和 HOAt (45mg, 0. 33mmol)溶于 3mL 的 DMF 中。力口入 NMM(0. ImL,0. 9mmol)，随后加入EDC(65mg，0. 33mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合 物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲基_6_[ (1，3-噻 唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲 酰胺(72mg,45% )。LCMS _)+ 536. 2。部分C [(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基_6_[ (1，3-噻唑_2_基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基_6_[ (1，3-噻唑_2_基甲基) 氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(67mg， 0. 13mmol)在4 1的AcOH 水(5mL)中在室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，并将生成的 粗产物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲基_6_[(1， 3-噻唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(30mg，51%)。 LCMS (Μ+Η).:452· 1。实施例108[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2S) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲
基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 4-氯-6-[ (2S) -2,4- 二甲基哌嗪基]_5_氟_2_甲基嘧啶向4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(0. 309g, 1. 71mmol)和三乙胺(0. 83mL， 5. 98mmol)的THF(6. OmL)溶液中加入(3S)-1，3-二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例64) (0. 320g，1.71mmOl)。加入Me0H(3mL)以改善溶解性，并将该反应在室温下搅拌4天。真空 除去溶剂，并将乙醚、THF和水加入到生成的残余物中。将有机物干燥(Na2SO4)并真空浓缩， 得到4-氯-6-[(2S)-2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基嘧啶，为橙色固体(0. 277g， 63% )。LCMS (Μ+Η)+ = 259. 3。部分B 4-[(2S)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶将4-氯-6-[(2S)_2，4- 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲基嘧啶(0. 277g， 1. 07mmol)、胼一水合物(0. 5mL)和DMSO (2. OmL)在室温下搅拌过夜。然后将该反应 加热至50°C，并搅拌7小时。通过RP-HPLC纯化，得到4- [ (2S) -2，4- 二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶，为橙色固体(0. 118g,43% )。LCMS (M+H)+ = 255. 3。部分C [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (2S) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(0. 139g， 0.45讓01)、4-[(25)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶(0. 118g, 0. 46mmol)、NMM (0. 15mL, 1. 38mmol)、HOAt (0. 063g,0. 46mmol)禾口 EDC (0. 088g,0. 46mmol) 溶于DMF(2mL)中。将该反应搅拌过夜。通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基甲 基)-3- (2- {6-[ (2S) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧 代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺，为白色固体(0. 118g，47% )0 LCMS (Μ+Η) + = 542. 7。部分D [1332][ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (2S) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(2S)_2，4-二 甲基 哌嗪 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 118g， 0. 22mmol)和Pd(C) (0. 018g)在MeOH(IOmL)中的溶液按照一般方法A，部分C进行处理，得 到[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2S) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为白色固体(0.089g，91%)。LCMS:(M+H)+ = 452. 4。实施例109[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 4-氯-6-[ (2R) -2,4- 二甲基哌嗪基]_5_氟_2_甲基嘧啶向(3R)-1，3-二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例63) (5. 88g，31. 4mmol)的二氯甲烷 (126mL)溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(18. IlmL, 104mmol)和4，6-二氯-5-氟-2-甲 基嘧啶(5.69g，31.4mm0l)。将该溶液于35°C加热，并搅拌3天。将该溶液冷却至室温，用 DCM(IOOmL)稀释，并用饱和的NaHCO3水溶液(IOOmL)洗涤。将水相用新制的DCM(50mL)萃 取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的4-氯-6-[ (2R) -2， 4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基嘧啶(9.60g，> 100%产率)，为褐色油状物，其不需 进一步纯化而使用。LCMS :(M+H)+:258.90部分B 4-[(2R)-2，4- 二甲基哌嗪基]_5_氟_6_胼基_2_甲基嘧啶向4-氯-6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基嘧啶(9. 6g，推测 31. 4mmol)的1,4- 二噁烷(126mL)溶液中加入胼一水合物(8. 5mL, 175mmol)。将混合物于 85°C加热，并搅拌24h。将混合物冷却至室温，并然后真空浓缩。将残余物在DCM(200mL) 和饱和的NaHCO3水溶液(IOOmL)之间分配。将水相用新制的DCM(50mL)萃取，并将合并 的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的4-[(2R)-2，4- 二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶(8. 04g，> 100%粗产物的产率)，为深橙色油状物。LCMS (Μ+Η). :254· 9。部分C [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺向4-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-6-胼基-2-甲基嘧啶(8. 04g， 推测31.4mm0l)的N，N-二甲基甲酰胺(125mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸二异丙基乙胺盐，异丙醇溶剂合物(15.48g， 31. 3mmol)、N_ 甲基吗啉(17. 2ImL, 156mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(5. Ilg, 37. 6mmol) 和EDC(7. 20g，37.6mmol)。将该溶液搅拌过夜，并然后用Et20(150mL)稀释，并用水(2x IOOmL)洗涤。将合并的水相用新制的Et20(150mL)萃取，并将该有机相用水(75mL)洗涤。 将全部合并的水相用另一批新制的Et20(150mL)萃取，并将该有机相用水(75mL)洗涤。将 合并的有机相用DCM(IOOmL)稀释，并经无水Na2SO4干燥。将混合物过滤并真空浓缩，得到粗 的[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2R) _2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(15.6(^，28.8匪01，92%产率)， 为淡褐色泡沫状物。LCMS (M+H)+ :541. 7。部分D [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{6_[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(15.60g，28.8mmOl)的甲 醇(115mL)溶液中加入Pd/C(50%水，3. Ig)。将混合物在气球压力下氢化2h，并然后通过玻 璃纤维滤器过滤。然后将该溶液真空浓缩，并与EtOAc (IOOmL)共沸。将生成的固体用70% EtOAc的己烷溶液研磨，并通过真空过滤收集。将上清液真空浓缩，并由EtOAc-己烷结晶， 并将该固体与第一批的物质合并。将合并的固体在高真空下干燥过夜，得到[(2R)-2-(环 戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(8. 15g，18.05mmol，62. 7%产率)，为白色固体。LCMS (M+H)+ 451. 8。实施例110((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- [ (3S，4R) _3_ ( 二甲基氨基)_4_ 甲基 吡咯 烷基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺(非对映异构体 的混合物) 根据一般方法C，使用(反式)-N，N，4-三甲基-3-氨基吡咯烷(实施例89)代替 部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- [ (3S，4R) _3_ ( 二甲 基氨基)-4_甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基) 羟基甲酰胺，为1 1的非对映异构体的混合物。LCMS :(M+H)+498.5。实施例111((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-6- [ (SaS)-六氢吡咯并[1，2~a]吡 嗪-2(1!1)-基]-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的(SaS)-八氢吡咯并[l，2_a]吡嗪代替部分A中 的氮杂环丁烷盐酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-6- [ (SaS)-六氢吡咯并 [1,2-a]吡嗪-2(1H)_基]-2-(甲硫基)_4_嘧啶基]胼基}_3_氧代丙基)羟基甲酰胺。 LCMS (M+H) +496. 2。实施例112^[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2!1-吡啶并[l，2_a]吡嗪 _2_ 基)_4_ 嘧
啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(非对映异构体的混合物) 根据一般方法G，使用市售可得的(+/-)-1，4_ 二氮杂二环[4.4.0]癸烷代替部分 A中的(15，4幻-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2. 2. 1]庚烷二氢溴酸盐，并使用1当量的DIPEA 制备N- [ (2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6-(八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)-4-嘧啶基] 胼基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺，为非对映异构体的混合物。LCMS (M+H)+498. 3。实施例113[ (2R) -3- (2- {6-[顺式_3，4_双(二甲基氨基)吡咯烷基]_2_氯_5_氟_4_嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 6-氧杂-3-氮杂二环[3.1.0]己烷_3_甲酸苯甲基酯向0°C下的2，5- 二氢-IH-吡咯甲酸苯甲基酯(10. 30g, 50. 68mmol)的 DCM(250mL)溶液中加入m_CPBA (湿的；约75% ；17. 49g)。将该溶液搅拌，并温热至室温过 夜。将该溶液用DCM稀释，并用2x10% NaHCO3水溶液-IN的NaOH水溶液(1 1)洗涤。 将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，并通过硅胶色谱法(40% EtOAc的己烷溶液) 纯化，得到6-氧杂-3-氮杂二环[3. 1. 0]己烷-3-甲酸苯甲基酯(7. 90g, 71 %产率)，为淡黄色油状物。部分B 顺式-3，4_双(二甲基氨基)-1_吡咯烷甲酸苯甲基酯向6-氧杂-3-氮杂二环[3. 1.0]己烷_3_甲酸苯甲基酯(1. 0029g，4. 574mmol) 的MeOH (4. 6mL)溶液中加入二甲胺(2. OM的THF溶液，4. 6mL，9. 2mmol)。将该溶液于140°C 在微波辐射下加热lh，并然后冷却至室温。将该溶液真空浓缩，与THF(40mL)共沸，并然后 溶于THF(40mL)中。向该溶液中加入DMAP(56mg，0. 458mmol)、N，N-二异丙基乙胺(1. 6mL， 8. 96mmol)和MsCl (0. 390mL, 5. 039mmol)。将混合物搅拌2h，并然后加入二甲胺(2. OM的 THF溶液，4. 6mL，9. 2mmol)。将混合物搅拌2天，并然后用DCM(IOOmL)稀释，并用IN的NaOH 水溶液(20mL)洗涤。将有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。向残余物的MeOH (5mL) 溶液中加入二甲胺(2. OM的THF溶液，4. 6mL，9. 2mmol)，并将该溶液于140°C在微波辐射下 加热30分钟。将该溶液真空浓缩，并直接通过Gilson RPLC纯化，得到消旋的顺式-3，4-双 (二甲基氨基)-1_吡咯烷甲酸苯甲基酯(911.4!1^，68%产率)，为淡黄色油状物。LCMS: _)+ 292. 2。部分C N, N, N' ,N' _四甲基-顺式_3，4_吡咯烷二胺向顺式-3，4_双(二甲基氨基)-1_吡咯烷甲酸苯甲基酯(911.4mg，3. 128mmol)的 MeOH(30mL)溶液中加入10% Pd/C(50%水，270mg)。将混合物在气球压力下氢化lh，并然 后过滤，并将生成的溶液真空浓缩，得到粗的消旋的N，N，N' ,N'-四甲基-顺式-3，4-吡 咯烷二胺(516. Omg, > 100%粗产物的产率)，为亮黄色油状物。LCMS (M+H)+ 158. 1。部分D 1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N，N'，N' _四甲基-顺式_3，4_吡口各
烷二胺向2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(330mg，1. 638mmol)的 DCM(5mL)溶液中加入 N， ^二异丙基乙胺(0.3421^，1.963匪01)禾日队队",N'-四甲基-顺式_3，4-吡咯烷 二胺(257. 4mg，1. 637mmol)。将该溶液在室温下搅拌4h，并然后真空浓缩。向残余物的 MeOH(3mL)溶液中加入胼水合物(0. 5mL)。将该溶液搅拌，并于70°C加热3h，并然后冷却 至室温。将该溶液直接通过Gilson RPLC(7% MeCN的水溶液至30% MeCN的水溶液，8分 钟梯度)纯化，首先得到消旋的1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N，N' ,N'-四 甲基_顺式_3，4-吡咯烷二胺(118. 3mg)，为橙色固体，随后得到消旋的4_[顺式-3，4-双 (二甲基氨基)-I-吡咯烷基]-6-氯-5-氟-2 (IH)-嘧啶酮腙(194. 6mg, 60 %，两步合并的 产率)，为橙色油状物。部分E [ (2R) -3- (2- {6-[顺式_3，4_双(二甲基氨基)吡咯烷基]_2_氯_5_氟_4_嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺向消旋的1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N，N' ,N' _四甲基-顺式_3， 4-吡咯烷二胺(116. 3mg，0. 366mmol)的DMF(3mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-{[甲 酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸，N, N- 二异丙基乙胺盐(121. 2mg, 0. 283mmol)、N-甲基吗啉(0. 160ml, 1. 455mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(46mg，
1210. 337mmol)和EDC(65mg，0. 339mmol)。将溶液搅拌过夜，并然后直接通过Gilson RPLC纯 化，得到[(2R) -3- (2- {6-[顺式-3，4-双(二甲基氨基)-1-吡咯烷基]_2_氯-5-氟-4-嘧 啶基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺 (133. 4mg，78%产率)，为黄色油状物。LCMS (M+H) + :599. 4。部分F [ (2R) -3- (2- {6-[顺式_3，4_双(二甲基氨基)吡咯烷基]_2_氯_5_氟_4_嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2_{6-[顺式_3，4_双(二甲基氨基)_1_吡咯烷 基]-2-氯-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺(133. 4mg,0. 223mmol)的 4 IHOAc-H2O (5mL)溶液于 30°C 搅拌 18h。将该溶液真空浓缩，并用DCM(IOOmL)稀释。将该溶液用饱和的NaHCO3水溶液(50mL) 洗涤，并将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过Gilson RPLC纯化， 并然后由EtOAc-己烷结晶，得到[(2R)-3-(2-{6-[顺式-3，4-双(二甲基氨基)_1_吡咯 烷基]-2-氯-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺，为 淡黄色固体。LCMS (M+H)+ 515. 2。实施例114[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟_6_ [(顺式)_3_羟基_4_甲基吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体) 部分A (反式)-3_羟基-4-甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯在-10°C下，向搅拌下的Cul(10.2g，54mmol)在乙醚(120mL)中的悬浮液中滴 加MeLi (73mL, 109mmol, 1. 5M的乙醚溶液)，同时确保温度保持低于_5°C。将生成的溶液 于-10°C搅拌20分钟，并加入6-氧杂-3-氮杂二环[3. 1. 0]己烷-3-甲酸苯甲基酯(实施 例113) (5g,23mmol)的乙醚(50mL)溶液，同时保持温度低于_2°C。将该反应于_10°C搅拌1 小时，随后将其用水终止，并用DCM分配。进行标准的后处理，得到(反式)-3_羟基-4-甲 基-1-卩比咯烷甲酸苯甲基酯，将其纯化(enantiopure)并进行手性色谱法处理，得到两个光 学纯的未确定绝对立体化学的化合物。(E1的产量=1. 55g，E2的产量=1. 58g)。部分B (顺式)-3-甲基-4-{[(4-硝基苯基)羰基]氧基}-1_吡咯烷甲酸苯甲基酯向光学纯的(反式)-3_羟基-4-甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(El) (lg， 4. 25mmol)的THF(21mL)溶液中加入4-硝基苯甲酸(1. 42g，8. 5mmol)、三苯基膦(2. 23g， 8. 5mmol)和DIAD (1. 7mL，8. 5mmol)。将生成的溶液搅拌过夜。减压除去溶剂，得到粗产物， 将其通过RP-HPLC纯化，得到(顺式)-3-甲基-4- {[ (4-硝基苯基)羰基]氧基} +吡咯 烷甲酸苯甲基酯(1.30g，79%)。^1^:(1+!1)+:385.0(单一的未知对映异构体)。[1391]部分C (顺式)-4-甲基-3-吡咯烷醇在0°C下，将IM NaOH(水溶液)(13mL)滴加到(顺式)_3_甲基_4_ {[ (4_硝基苯 基)羰基]氧基}-1_吡咯烷甲酸苯甲基酯(1.30g，3.4mmOl)的THF(13mL)溶液中，并将该 反应搅拌过夜，停止冰浴。减压除去大约一半的反应体积，并加入氯仿。分离各相，并将有 机相用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗的醇。将该物质立即溶于除气的MeOH中，并 加入Pd/C (IOOmg)。将该反应在氢气球下搅拌3. 5小时，过滤除去催化剂，并减压蒸发除去 溶剂，得到(顺式)-4-甲基-3-吡咯烷醇(390mg，定量产率)。LCMS (M+H) + 102. 2 (单一 的未知对映异构体)。部分D [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _6_ [ (3S，4S) _3_ 羟基 _4_ 甲基 吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法A，使用(顺式)-4_甲基-3-吡咯烷醇代替部分A中的吡咯烷制备 [(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6-[(顺式)-3-羟基-4-甲基-1-吡咯烷基]-2-甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为单一的非对映异构体(吡咯烷环附近 的立体化学是任意指定的)。LCMS (M+H)+ 439. 2。实施例115[ (2R) -3- (2- {2-氯 _5_ 氟 _6_ [ (4S) ~4~ 羟基-3，3_ 二甲基 吡咯烷基]_4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 (3S) -4，4- 二甲基-3-吡咯烷醇盐酸盐向(3S)-4，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3_ 吡咯烷醇(J.Med. Chem. 1992，35， 4205-4213) (0. 7738g，3. 769mmol)的 MeOH(38mL)溶液中加入 IN 的 HCl 水溶液(3. 8mL, 3. 8mmol)和10 % Pd/C (50 %水，230mg)。将混合物在气球压力下氢化18h，并然后通过 0. 2μπι过滤嘴注射器过滤。将生成的溶液真空浓缩，并与Me0H(2X50mL)共沸，得到(3S)_4， 4-二甲基-3-吡咯烷醇盐酸盐(0. 52678，93%产率)，为淡橙色固体。LCMS (M+H)+ 116. 1。部分B (3S)-1-(2-氯-5-氟_6_胼基_4_嘧啶基)-4，4_ 二甲基_3_吡咯烷醇向2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(0. 3362g，1. 669mmol)的 DCM(6mL)溶液中加入(3S) -4， 4-二甲基-3-吡咯烷醇盐酸盐(0. 2530g,1.691mmol)和N，N-二异丙基乙胺(0. 640mL, 3. 674mmol)。将该溶液搅拌2h，并然后真空浓缩。向残余物的DMSO(4mL)溶液中加入胼水 合物(0.6mL)，并将该溶液搅拌过夜。然后将该溶液直接通过Gilson RPLC纯化，首先得到 (3S)-1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-4，4- 二甲基-3-吡咯烷醇(0. 1464g，32 %产 率)，为橙色固体，LCMS :(M+H)+ :276.0，随后得到4-氯-5-氟-6-[(45)-4-羟基-3，3-二 甲基-1-吡咯烷基]_2 (IH)-嘧啶酮腙(0. 2149g，47%产率)，为淡粉红色固体。[1405]部分C [ (2R) -3- (2- {2-氯 _5_ 氟 _6_ [ (4S) ~4~ 羟基-3，3_ 二甲基 吡咯烷基]_4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺向(3S)-1_(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-4，4_二甲基-3-卩比咯烷醇(0. 131g， 0. 475mmol)的DMF(3mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基 氧基)氨基]甲基}丙酸(0. 1181g，0. 395mmol)、N-甲基吗啉(0. 220ml，2. OOlmmol)、1-羟 基-7-氮杂苯并三唑(64mg，0. 470mmol)和EDC (91mg，0. 475mmol)。将溶液搅拌过夜，并然 后直接通过 Gilson RPLC 纯化，得到[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6-[ (4S) -4-羟基-3，3- 二 甲基-1-吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 1294g，59%产率)，为橙色油状物。LCMS _) + :557· 3。部分D [ (2R) -3- (2- {2-氯 _5_ 氟 _6_ [ (4S) ~4~ 羟基-3，3_ 二甲基 吡咯烷基]_4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2_{2-氯_5_ 氟 _6-[(4S)_4-羟基-3，3- 二甲基 吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基 氧基)甲酰胺(0. 1294g，0. 232mmol)的4 IHOAc-水(5mL)溶液于30 V加热，并 搅拌过夜。将该溶液冷却至室温，真空浓缩，并直接通过Gilson RPLC纯化，得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (4S) -4-羟基-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(69. lmg，63%产率)，为黄色固体。LCMS ； _)+ 473. 2。实施例116[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _6_ [ (4S) ~4~ 羟基-3，3_ 二甲基 吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺部分A (3S)-1-(5-氟-6-胼基_2_甲基_4_嘧啶基)_4，4_ 二甲基_3_吡咯烷醇向(3S)-4，4-二甲基-3-吡咯烷醇盐酸盐(实施例115) (0. 1370g, 0. 916mmol)的 MeOH(3mL)溶液中加入 4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(0. 1646g，0. 909mmol)和 N，N- 二异 丙基乙胺(0. 350mL,2. 009mmol)。将该溶液于120°C在微波辐射下加热30min，并然后真空 浓缩。向残余物的DMS0(3mL)溶液中加入胼水合物(0. 5mL)，并将该溶液于50°C加热，并 搅拌24h。然后将该溶液直接通过Gilson RPLC纯化，得到(3S)-1-(5-氟-6-胼基-2-甲 基-4-嘧啶基)-4，4-二甲基-3-卩比咯烷醇(0. 1560g，67%产率)，为淡黄色泡沫状物。LCMS (M+H)+256. 2。部分B [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _6_ [ (4S) ~4~ 羟基-3，3_ 二甲基 吡咯烷
基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺向(3S)-1_(5-氟-6-胼基-2-甲基-4-嘧啶基)-4，4_ 二甲基-3-吡咯烷醇 (0. 125g,0. 490mmol)的DMF(3mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基) 氧基]氨基}甲基)丙酸(0. 1246g，0.408mmol)、N-甲基吗啉(0. 225ml，2. 046mmol)、1-羟 基-7-氮杂苯并三唑(67mg，0. 492mmol)和EDC(94mg，0. 490mmol)。将混合物搅拌过夜，并然 后直接通过Gilson RPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟_6_[ (4S)-4-羟 基-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基][(苯基甲基) 氧基]甲酰胺(0. 1606g，73%产率)，为紫色油状物。LCMS :_)+:543.3。部分C [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _6_ [ (4S) ~4~ 羟基-3，3_ 二甲基 吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R)-2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _6_ [ (4S) ~4~ 羟基-3，3_ 二甲基 吡咯 烧基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 1606g, 0. 296mmol)的Me0H(5mL)溶液中加入10% Pd/C(50%水，48mg)。将混合物在气球压力下氢 化lh，并然后过滤。将该溶液真空浓缩，并将残余物由EtOAc-己烷结晶，得到[(2R)-2-(环 戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (4S) -4-羟基-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]_2_甲基-4-嘧 唳基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 1205g，90%产率)，为淡粉红色固体。LCMS (M+H)+ 453. 3。实施例117((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ (氟
甲基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法A，在部分A中，使用(3R)-1，3_ 二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例63) 代替吡咯烷，并使用4，6- 二氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶代替4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧 啶制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[6-[ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟_2_ (氟 甲基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 470. 2。实施例118[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_ [ (3R) _3_ ( 二 甲基氨基)哌啶基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}
胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (3R)-N，N-二甲基-3-哌啶胺a)在0°C下，将市售可得的(R)_3-氨基哌啶-1-甲酸叔丁基酯盐酸盐(5. 0g， 21. lmmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(11.2g,52. 8mmol)和甲醛(37 %的H2O溶液，0. 5mL， 63. 4mmol)在CH2Cl2中溶解并搅拌。将反应混合物温热至室温，并搅拌3h。随后，将反应混合 物用另外的CH2Cl2 (200mL)稀释，并用IN NaOH(IOOmL)洗涤。将有机层分离，干燥(Na2SO4)， 并蒸发，得到(3R)-3-( 二甲基氨基)-1_哌啶甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(5.0g)。b)将(3R)-3_( 二甲基氨基)-1_哌啶甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(5. Og的粗产物， 推测21. 12mmol)在CH2Cl2(IOmL)和4M HCl的二噁烷溶液(21mL,4eqv.)的混合物中溶解 并搅拌，形成白色沉淀。在反应大约完成70%时，该反应似乎停止，并因此将另外21mL的 4M HCl的二噁烷溶液加入到该反应混合物中。在室温下4h后，蒸发溶剂，得到白色固体的 (3R) -N，N- 二甲基-3-哌啶胺二盐酸盐(3. 5g，89%，两步)。部分B [ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_ [ (3R) _3_ ( 二 甲基氨基)哌啶基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法D，在部分A中使用(3R)-N，N_二甲基-3-哌啶胺二盐酸盐代替N-甲 基哌嗪，并使用2当量的DIPEA制备[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (3R) -3- ( 二甲基氨基)哌 啶基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS: (M+H)+486. 3。实施例119N-[(2R)-3-[2-(6-{[(2-氨基 _1，3_ 噻唑-4-基)甲基](甲基)氨 基} -5-氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A 4-[(甲氨基)甲基]-1，3-噻唑-2-胺将4-(氯甲基)-1，3_ 噻唑-2-胺(490mg，2. 65mmol)在 40% 甲胺水溶液(25ml) 中搅拌过夜。将反应混合物蒸发。将残余物用95 5 二氯甲烷/甲醇(25ml)稀释，经硫 酸钠干燥，过滤并蒸发，得到4-[(甲氨基)甲基]-1，3-噻唑-2-胺，其不需纯化而使用。 LCMS (Μ+Η)+:144· 0。部分B N-[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基]_6_氯_5_氟_2_甲基_4_嘧啶胺将4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(480mg，2. 65mmol)溶于 20mL 的 THF 中，并在 室温下搅拌。加入4-[(甲氨基)甲基]-1，3-噻唑-2-胺(2.65mmol，理论量)，随后加入 三乙胺(400yL，2.92mmol)。将生成的反应混合物搅拌过夜并蒸发。将残余物在水中搅 拌，并将沉淀的固体通过过滤收集，并真空干燥，得到N-[ (2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基]-6-氯-5-氟-2-甲基-4-嘧啶胺(450mg，59% )，其不需进一步纯化而使用。LCMS (M+H)+288. 1。部分C 6-{[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基]氨基} _5_氟_4_胼基_2_甲基嘧啶将N_[ (2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基]_6_氯_5_氟_2_甲基_4_嘧啶胺 (450mg, 1. 56mmol)溶于5mL的DMSO中，并加入5ml的胼一水合物。将混合物搅拌过夜， 并通过RP-HPLC纯化，得到6-{[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基]氨基}_5_氟-4-胼 基-2-甲基嘧啶(125mg,28% )。LCMS (M+H)+ 284. 1。部分D [ (2R) -3- [2- (6_ {[ (2_氨基-1，3_ 噻唑 _4_基)甲基]氨基} _5_ 氟 _2_ 甲基 _4_ 嘧 啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将6-{[(2_氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基]氨基}_5_氟_4_胼基_2_甲基嘧 啶(125mg，0.44mmol)、(2R)_3_环戊基_2_{[甲酰基(四氢_2H_吡喃-2-基氧基)氨 基]甲基}丙酸(130mg，0. 44mmol)和 HOAt (65mg, 0. 48mmol)溶于 4mL 的 DMF 中。力口入 NMM(0. 15mL, 1. 32mmol)，随后加入EDC(96mg，0. 48mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混 合物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -3- [2- (6- {[ (2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基]氨 基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺(114mg，46% )。LCMS (M+H)+ 565. 3。部分E [ (2R) -3- [2- (6_ {[ (2_氨基-1，3_ 噻唑 _4_基)甲基]氨基} _5_ 氟 _2_ 甲基 _4_ 嘧 啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺在室温下，将[(2R)-3-[2-(6_{[(2-氨基_1，3_噻唑-4-基)甲基]氨 基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺(114mg，0.2mmOl)在4 IAcOH 水(5mL)中搅拌过夜。真空除去 溶剂，并将生成的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-3-[2-(6-{[(2-00氨基_1，3_噻 唑-4-基)甲基]氨基}-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙 基]羟基甲酰胺(18mg，18% )。LCMS (M+H)+ 481. 2。实施例120[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [(顺式)_3_ ( 二甲基氨基)_4_甲基吡咯 烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺(单一的未知非对映 异构体) 部分A (反式)-4-甲基-3-吡咯烷醇[1460]将(反式)-3-羟基-4-甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(E1，实施例114，部分A) (100mg，0. 43mmol)和10% Pd/C(20mg)悬浮于甲醇(7mL)中，并在氢气球下搅拌19h。过滤 催化剂，并蒸发溶剂，得到(反式)-4-甲基-3-吡咯烷醇(单一的未知对映异构体)。部分B (反式)-3-{[ (4-氯苯基)磺酰基]氧基} -4-甲基-1-吡咯烷甲酸1，1_ 二甲基
乙基酯向(反式)-4-甲基-3-吡咯烷醇(单一的未知对映异构体)(707mg，7mmol)在 MeOH(IOmL)、DCM(IOmL)和饱和的碳酸钾水溶液(20mL)的混合物中的溶液中加入焦碳酸 二叔丁基酯(1.84g，8.42mm0l)，并将生成的溶液搅拌过夜。加入水随后加入氯仿，并分 离各相。将有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空蒸发，得到粗的Boc-保护的醇 (1.37g)。将其立即溶于吡啶(IOmL)中，并加入对甲苯磺酰氯(2. lg，llmmol)。将该反应 搅拌过夜，冷却至0°C，并加入IM HCl0低温下搅拌10分钟后，加入氯仿并分离各相。将水 相用氯仿萃取两次，并将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到 (反式)-3- {[ (4-氯苯基)磺酰基]氧基} -4-甲基-1-吡咯烷甲酸1，1- 二甲基乙基酯。 LCMS (M+Na)+ 378. 1 (单一的未知对映异构体)。部分C (顺式)-3-氨基-4-甲基-1-吡咯烷甲酸1，1_二甲基乙基酯向搅拌下的(反式)-3-{[(4_氯苯基)磺酰基]氧基}-4_甲基-1-吡咯烷甲酸 1，1-二甲基乙基酯(2. 3g，6. 5讓ol)的DMF(23mL)溶液中加入NaN3 (4. 2g，65mmol)。将生成 的溶液于60°C搅拌直至LCMS显示反应完成。冷却至室温后，将该反应过滤以除去不溶的沉 淀，并真空除去溶剂。将残余物溶于EtOAc中，用水洗涤，经硫酸钠干燥，并真空浓缩，得到 1. 26g粗的中间体。将该粗的叠氮化合物立即溶于除气的MeOH(20mL)中，并加入10% Pd/ C(126mg)。将生成的悬浮液在氢气球下搅拌过夜，随后过滤除去催化剂，并将溶剂在减压下 蒸发，得到(顺式)-3-氨基-4-甲基-1-吡咯烷甲酸1，1- 二甲基乙基酯(1. 02g, 70% )0 LCMS (M-tBut)+ 145. 1 (单一的未知对映异构体)。部分D (顺式)-N,N，4-三甲基-3-氨基吡咯烷· HCl将(顺式)-3-氨基-4-甲基-1-吡咯烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(1.0g,5. Ommol) 溶于THF(25mL)中，并加入甲醛(4. lmL，50mmol，37%的水溶液)。将生成的混合物搅拌40 分钟，并加入三乙酰氧基硼氢化钠(14. Sg, 50. Ommol)。将该反应搅拌72小时，并然后通过 加入IM NaOH(水溶液)来终止。加入乙醚，并分离各相。将合并的有机物经硫酸钠干燥， 过滤并蒸发，得到中间体二甲基化的胺(1.65g)。将其溶于HCl(10mL，40mmOl，4M的二噁烷 溶液)中，并搅拌过夜。蒸发溶剂和过量的酸，得到(顺式)_N，N，4-三甲基-3-氨基吡咯 烷· HCl (1. 42g)。(单一的未知对映异构体)。部分E 根据一般方法B，使用(顺式)_N，N，4-三甲基-3-氨基吡咯烷.HCl代替部分A 中的氮杂环丁烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (3R，4R) -3- ( 二甲基氨基)~4~甲 基-1-吡咯烷基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为单一 的未知对映异构体。LCMS (M+H)+ 480. 3。[1472]实施例121((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(3幻-3，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-(甲
硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用(2S)-1，2_ 二甲基哌嗪(实施例40)代替部分A中的氮 杂环丁烷盐酸盐制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(3S)-3，4- 二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H) +484. 4。实施例122[(2R)-3-(2-{2-氯 _6_[(顺式)_3_( 二甲基氨基)_4_ 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺(单一的未知 非对映异构体)根据一般方法D，使用光学纯的(顺式)_N，N，4-三甲基-3-氨基吡咯烷(实施 例120)代替部分A中的N-甲基哌嗪制备[(2R) -3- (2- {2-氯_6_[(顺式)_3_ ( 二甲基氨 基)-4-甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基] 羟基甲酰胺，为单一的未知非对映异构体。LCMS (M+H)+ 486. 1/483. 3。实施例123^[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2!1-吡啶并[l，2_a]吡嗪 _2_ 基)_4_ 嘧 啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构 体) 部分A [(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2!1-吡啶并[l，2_a]吡嗪 _2_ 基)_4_ 嘧啶 基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(非对映异构体 1)[1485]根据一般方法G的部分A和部分B，在部分A中使用市售可得的(+/_)_1， 4_ 二氮杂二环[4.4.0]癸烷代替(lS，4S)-2-甲基_2，5_ 二氮杂二环[2.2. 1]庚 烷二氢溴酸盐制备[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2H-吡啶并[l，2_a]吡 嗪-2-基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲 酰胺(非对映异构体的混合物)。通过手性色谱法(Chiralpak AD-H 21. 2x250mm)分离 [(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6-(八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)-4-嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(非对映异构体1)。LCMS (M+H)+588. 3。部分B ^[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2!1-吡啶并[l，2_a]吡嗪 _2_ 基)_4_ 嘧 啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构 体)根据一般方法G的部分C，使用[(2R)-3-{2_[2-氯_5_氟_6_(八氢_2H_吡啶 并[l，2-a]吡嗪-2-基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲 基)氧基]甲酰胺(非对映异构体1)代替部分C中的[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(15， 4S)-5-甲基-2，5-二氮杂二环[2. 2. 1]庚_2_基]-4-嘧啶基}胼基)_2_(环戊基甲 基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺制备N-[ (2R) -3- {2-[2-氯-5-氟-6-(八 氢-2H-吡啶并[l，2-a]吡嗪-2-基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙 基]-N-羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体)。LCMS (M+H)+ 498. 3。实施例124^[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2!1-吡啶并[l，2_a]吡嗪 _2_ 基)_4_ 嘧 啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构 体) 部分A [(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2!1-吡啶并[l，2_a]吡嗪 _2_ 基)_4_ 嘧啶 基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(非对映异构体 2)根据一般方法G的部分A和部分B，使用市售可得的(+/-)-1，4_ 二氮杂 二环[4.4.0]癸烷代替部分A中的(lS，4S)-2-甲基_2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚 烷二氢溴酸盐制备[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2H-吡啶并[l，2_a]吡 嗪-2-基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲 酰胺(非对映异构体的混合物)。通过手性色谱法(Chiralpak AD-H 21.2x250mm)分离 [(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6-(八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基)-4-嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(非对映异构体2)。LCMS (M+H)+588. 3。部分B ^[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢-2!1-吡啶并[l，2_a]吡嗪 _2_ 基)_4_ 嘧 啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构 体)根据一般方法G的部分C，使用[(2R)-3-{2_[2-氯_5_氟_6_(八氢_2H_吡啶 并[l，2-a]吡嗪-2-基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲 基)氧基]甲酰胺(非对映异构体2)代替部分C中的[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(15， 4S)-5-甲基-2，5-二氮杂二环[2. 2. 1]庚_2_基]-4-嘧啶基}胼基)_2_(环戊基甲 基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺制备N-[ (2R) -3- {2-[2-氯-5-氟-6-(八 氢-2H-吡啶并[l，2-a]吡嗪-2-基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙 基]-N-羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体)。LCMS (M+H)+ 498. 3。实施例125((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(31 )-3，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-(甲
硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺根据一般方法C，使用(2R)-1，2_ 二甲基哌嗪(实施例39)代替部分A中的氮 杂环丁烷盐酸盐制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(3R)-3，4-二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H) +484. 5。实施例126((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_ [6_ [ (2S) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _2_ (氟
甲基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法A，在部分A中使用(3S)-1，3_ 二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例40)代 替吡咯烷，并使用4，6- 二氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶代替4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶 制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[6-[ (2S) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟_2_ (氟甲 基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:470.2。实施例127[ (2R) -3- {2- [2_氯_6_ (环丙基氨基)~5~氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲
基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的环丙基胺代替部分A中的N-甲基哌嗪制备 [(2R) -3- {2- [2-氯-6-(环丙基氨基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧 代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 415. 2。实施例128((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_ 氟 _6-(7_ 羟基 _5_ 氮杂螺[2.4]
庚-5-基)-2_甲基-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 部分A 1-乙酰基环丙烷甲酸乙酯向搅拌下的3-氧代丁酸乙酯(10mL，78. 45mmol)和1，2-二溴乙烷(6. 5mL， 78. 45mmol)在150mL的DMF中的溶液中加入碳酸钾(22. 7g，164. 74mmol)。将生成的反应混 合物在室温下搅拌2天。将该溶液用300mL的水稀释。将产物萃取到乙醚(2x200mL)中， 并将合并的有机萃取物用水(lxlOOOmL)洗涤，并干燥(MgS04)。过滤并常压蒸馏乙醚，得 到粗产物，将其在减压下(IOmBar)蒸馏，得到1_乙酰基环丙烷甲酸乙酯(6. 4273g,52% )。 LCMS (M+H)+ 未检测。部分B 5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚_4，7_ 二酮将1-乙酰基环丙烷甲酸乙酯(6. 4273g，41. 153mmol)溶于46mL的EtOH中。将溴 (2. 32mL，45. 2683mmol)缓慢地加入到该溶液中。将生成的反应混合物搅拌2h，然后真空浓 缩。将粗的残余物溶于46mL的EtOH中，并将混合物用冰水浴冷却至0°C。向该溶液中缓 慢地加入苄基胺(11. 2mL, 102. 8825mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后真空浓 缩至干。将残余物溶于CH2Cl2 (200mL)和IN的HCl溶液(IOOmL)中。分离各相，并将水相 用CH2Cl2(IOOmL)萃取，将合并的有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过硅胶色 谱法，使用己烷/EtOAc (60 40)的洗脱系统纯化，得到5-(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4] 庚-4，7-二酮(2.4283g，27% )，为橙色固体。LCMS (M+H)+未检测。部分C 5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚_7_醇将5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2. 4]庚-4，7-二酮(997. 4mg,4. 63mmol)溶于 46mL 的THF中，并在搅拌下分批加入LiAlH4 (997mg)。将混合物于65°C加热5小时，然后冷却至 0°C。将该反应用Na2SO^H2O终止，并在室温下搅拌过夜。将内容物通过Celite硅藻土过滤， 并将Celite硅藻土填料(pad)用EtOAc洗涤。将Celite硅藻土滤饼悬浮于EtOAc (200mL) 中，并煮沸5分钟。将悬浮液过滤，并然后将合并的有机滤液真空浓缩，得到5-(苯基甲基)-5_ 氮杂螺[2. 4]庚-7-醇(983mg，> 100% )。LCMS (M+H)+ 204. 1部分D 5-氮杂螺[2. 4]庚-7-醇盐酸盐将5-(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4]庚_7_醇(推测941. 9mg，4. 63mmol)溶于 4.6mL的IN HCl水溶液在40mL MeOH中的溶液中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/ C(280mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置过夜。然后将内容物除气，并通过 Celite硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填料(pad)用MeOH洗涤。将生成的滤液真空浓缩， 并与Me0H(3x40mL)共沸，得到纯的5-氮杂螺[2. 4]庚-7-醇盐酸盐(685mg,99% )。LCMS (M+H)+ 未检测。部分E 5- (5-氟-6-胼基-2-甲基_4_嘧啶基)_5_氮杂螺[2. 4]庚_7_醇将4，6_ 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(110mg，0. 636匪ol)溶于 3mL 的 MeOH 中，然 后加入5-氮杂螺[2.4]庚-7-醇盐酸盐(685mg，0. 668mmol)，随后加入DIPEA(243yL， 1. 4mmol)。将生成的反应混合物于120°C微波加热30min，将挥发物真空浓缩，并将残余物 溶于DMS0(4mL)和MeOH(ImL)的混合物中。然后加入胼一水合物(600 μ L)，并将内容物于 60°C加热过夜。然后将反应混合物冷却至室温，并通过RP-HPLC纯化，得到5-(5_氟-6-胼 基-2-甲基-4-嘧啶基)-5-氮杂螺[2. 4]庚-7-醇(82mg, 51% ) LCMS (M+H) + :254。部分F ((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_ 氟 _6-(7_ 羟基 _5_ 氮杂螺[2.4] 庚-5-基)-2-甲基-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰 胺将5-(5-氟-6-胼基-2-甲基-4-嘧啶基)_5_氮杂螺[2. 4]庚_7_醇(82mg， 0. 324mmol)、(2R) -3-环戊基-2- {[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙 酸(115mg，0. 27mmol)和 H0At(44mg，0. 324mmol)溶于 2mL 的 DMF 中。加入 NMM(0. 089mL, 0. 81mmol)，随后加入EDC(62mg，0. 324mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物通过 RP-HPLC纯化，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (7S) -7-羟基-5-氮杂螺 [2. 4]庚-5-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基) 甲酰胺(91mg,63% )。LCMS (M+H)+ 535. 3。部分G ((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_ 氟 _6-(7_ 羟基 _5_ 氮杂螺[2.4] 庚-5-基)-2_甲基-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺将[(2R)-2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (7S) _7_ 羟基 _5_ 氮杂螺[2.4] 庚-5-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰 胺(91mg,0. 202mmol)溶于Ac0H/H20的混合物(10mL，4 1)中，在RT下搅拌直至LCMS表 明脱保护基反应完成(过夜)。将反应混合物在真空下浓缩至干，并通过RP-HPLC纯化，得 到((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-6-(7-羟基-5-氮杂螺[2. 4]庚-5-基)-2-甲 基-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺(25mg，27% )。LCMS (M+H)+ 451. 2。实施例129[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [4_ ( 二甲基氨基)_3，3_ 二甲基吡咯烷[1537]部分A (3R) -4，4- 二甲基_3_吡咯烷醇盐酸盐向(3幻-4，4-二甲基-1-(苯基甲基)-3-吡咯烷醇(J. Med. Chem. 1992，35， 4205-4213) (1. 8634g，9. 076mmol)的 MeOH(45mL)溶液中加入 IN 的 HCl 水溶液(9. ImL, 9. Immol)和10% Pd/C (50 %水，375mg)。将混合物在气球压力下氢化2天，并然后过滤。 将该溶液真空浓缩，并与Me0H(4x20mL)共沸，得到(3R)-4，4-二甲基-3-吡咯烷醇盐酸盐 (1. 26548，93%产率)，为琥珀色固体。LCMS :_)+ :116· 1。部分B (4R)-4-羟基-3，3- 二甲基吡咯烷甲酸苯甲基酯向(3R)-4，4-二甲基-3-吡咯烧醇盐酸盐(0. 9920g，6. 630mmol)在 1 1DCM-1N NaOH水溶液(33mL)中的混合物中加入氯甲酸苄基酯(0. 994mL，6. 963mmol)。将混合物剧 烈搅拌过夜，并然后用DCM(IOOmL)稀释。分离各相，并将有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并 真空浓缩。然后将残余物通过硅胶色谱法(40% EtOAc的己烷溶液)纯化，得到(4R)-4-羟 基-3，3-二甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(1.4654g，89%产率)，为无色油状物。LCMS (Μ+Η).:250· 1。部分C 3，3- 二甲基-4-氧代-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯向(4R)-4-羟基-3，3-二甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(1.4088g,5. 651mmol)的 MeCN(50mL)溶液中加入N-甲基吗啉-N-氧化物(0. 861g，7. 350mmol)和过钌酸四正丙基铵 (0. 099g,0. 282mmol)。将该溶液搅拌90min，真空浓缩，并直接通过硅胶色谱法(20% EtOAc 的己烷溶液)纯化，得到3，3_ 二甲基-4-氧代-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(1. 1321g,79%), 为无色油状物。LCMS:(M+Na)+:270. 4。部分D (4Z)-3，3_ 二甲基-4-[(甲氧基)亚氨基]吡咯烷甲酸苯甲基酯向3，3_ 二甲基-4-氧代-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(0. 9135g，3. 694mmol)的 MeOH(37mL)溶液中加入乙酸钠(0. 606g,7. 387mmol)和0-甲基羟基胺盐酸盐(0. 620g, 7. 397mmol)。将该溶液搅拌3h，并然后真空浓缩。将残余物在DCM(IOOmL)、水(5mL)和饱 和的NaHCO3水溶液(30mL)之间分配。将有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到 (4Z)-3，3-二甲基-4-[(甲氧基)亚氨基]-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(0.91248，89%产率)， 为淡黄色油状物。LCMS (M+H)+277. 0。部分E
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基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体的混合 物) 4-氨基-3，3- 二甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯向(4Z)-3，3_ 二甲基-4-[(甲氧基)亚氨基]-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(0. 7126g， 2. 579mmol)的THF (26mL)溶液中加入甲硼烷-THF络合物(1. OM的THF溶液，5. 2mL， 5.2mmol)。将该溶液于50°C加热，并搅拌2h。然后将该溶液冷却至室温，并通过加入6N 的NaOH水溶液(2mL)来终止。将混合物用盐水稀释，并用Et2O(3xl00mL)萃取。将合并的 有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。向残余物的MeOH(20mL)溶液中加入50%的 NH2OH水溶液(5mL)，并将该溶液于60°C加热，并搅拌过夜。然后将该溶液冷却至室温，并真 空浓缩。将残余物在DCM(200mL)和IN的NaOH水溶液(50mL)之间分配，并将有机相经无 水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到消旋的4-氨基-3，3- 二甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基 酯(0. 5899g，92%产率)，为无色油状物。LCMS :_)+249. 1。部分F 4- ( 二甲基氨基)-3，3- 二甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯将消旋的4-氨基-3，3-二甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(0. 5899g,2. 376mmol) 在甲酸(5mL)和福尔马林(5mL)中的溶液于100°C加热，并搅拌2h。然后将该溶液冷却至 室温，并用6N的NaOH水溶液调节至pH为14。然后将混合物用Et2O (2xl00mL)萃取，并将 合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。观察到存在两相，并收集MeOH能溶解 的部分，并真空浓缩，得到粗的消旋的4-( 二甲基氨基)-3，3_ 二甲基-1-吡咯烷甲酸苯甲 基酯(0. 6862g，> 100%粗产物的产率)，为无色油状物。LCMS (M+H)+ 277. 2。部分G N，N，4，4-四甲基-3-氨基吡咯烷向消旋的4_(二甲基氨基)-3，3_二甲基-1-卩比咯烷甲酸苯甲基酯(推测0.6565g， 2. 376mmol)的MeOH溶液中加入10 % Pd/C(50 %水，195mg)。将混合物在气球压力下氢 化lh，并然后过滤。将该溶液真空浓缩，得到消旋的N，N,4,4-四甲基-3-氨基吡咯烷 (0. 3479g，定量产率)，为几乎无色的油状物。LCMS :(M+H)+: 143. 1。部分H 1-(5-氟-6-胼基-2-甲基_4_嘧啶基)-N，N，4，4-四甲基_3_氨基吡咯烷向 N，N，4，4-四甲基-3-氨基吡咯烷(0. 0918g,0. 645mmol)的Me0H(3mL)溶液中加 Λ 4,6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(0. 1088g，0. 601mmol)和 N，N- 二异丙基乙胺(0. 130mL， 0. 746mmol)。将该溶液于120°C在微波辐射下加热，并搅拌30分钟。然后将该溶液冷却至 室温，并真空浓缩。向残余物的4 IDMSO-MeOH(5mL)溶液中加入胼水合物(0. 5mL)。将该 溶液于65°C加热，并搅拌过夜。然后将该溶液冷却至室温，并用DCM(50mL)稀释。将混合 物用饱和的NaHCO3水溶液(20mL)洗涤，并将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。 将残余物通过Gilson RPLC纯化，得到消旋的1_(5-氟-6-胼基-2-甲基_4_嘧啶基)_N， N，4，4-四甲基-3-氨基吡咯烷(0. 0617g，36% )，为淡黄色固体。LCMS (M+H) + :283. 2。部分I [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [4_ ( 二甲基氨基)_3，3_ 二甲基吡咯烷 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺向消旋的1- (5-氟-6-胼基-2-甲基_4_嘧啶基)-N, N, 4，4_四甲基_3_氨基吡咯 烷(0. 0617g，0. 219mmol)的DMF(3mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲
135基)氧基]氨基}甲基)丙酸(0. 0637g, 0. 209mmol)、N_ 甲基吗啉(0. 120mL, 1. 091mmol)、 1-羟基-7-氮杂苯并三唑(34mg，0. 250mmol)禾卩EDC (48mg，0. 250mmol)。将溶液搅拌过夜， 并然后直接通过Gilson RPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6_[4_( 二甲基氨 基)-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯 基甲基)氧基]甲酰胺(0.0775g，65%产率，非对映异构体的混合物)，为淡黄色油状物。 LCMS (M+H)+ 570. 3。部分J [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [4_ ( 二甲基氨基)_3，3_ 二甲基吡咯烷 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{6-[4_( 二甲基氨基)-3，3_ 二甲基-1-吡咯烧 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 0775g, 0. 136mmol)的Me0H(5mL)溶液中加入10% Pd/C(50%水，23mg)。将混合物在气球压力下氢 化lh，并然后过滤。将该溶液真空浓缩，并将残余物由EtOAc-己烷结晶，得到[(2R)-2-(环 戊基甲基)-3- (2- {6- [4- ( 二甲基氨基)-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 0566g，87%产率，非对映异构体的混合物)，为 灰白色固体。LCMS (M+H)+ 480. 1。实施例130[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(7-羟基-5-氮杂螺[2.4]庚 _5_ 基)_4_ 嘧啶基]
胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体的混合物) 部分A 5-(2-氯-5-氟-6-胼基_4_嘧啶基)_5_氮杂螺[2. 4]庚_7_醇向2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(611mg，3. 036mmol)的 DCM(5mL)溶液中加入 DIPEAd. 163mL，6.679mmol)，随后加入5-氮杂螺[2.4]庚_7_醇盐酸盐(实施例128) (477mg，3. 188mmol)。将该溶液在室温下搅拌。1小时后，将挥发物真空浓缩，并将残余 物溶于DMS0(4mL)和MeOH(ImL)的混合物中。加入胼一水合物(3. 055mL)，并将内容物 在RT下搅拌过夜。真空除去过量的胼，并将残余的溶液通过RP-HPLC纯化，得到推测为 5-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-5_氮杂螺[2. 4]庚-7-醇(第一洗脱液，167mg)， 以及推测为6-氯-5-氟-2-胼基-4-(4-甲基-1-哌嗪基)嘧啶(第二洗脱液，312mg)。 LCMS (M+H)+ 274. 0。部分B [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(7-羟基-5-氮杂螺[2.4]庚 _5_ 基)_4_ 嘧啶基] 胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将5- (2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)_5_氮杂螺[2. 4]庚-7-醇(167mg 0.610!1111101)、(210-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙
酸(217mg，0. 508mmol)和 HOAt (83mg，0. 610mmol)溶于 5mL 的 DMF 中。加入 NMM (0. 167mL, 1. 525mmol)，随后加入EDC(117mg，0. 6101mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应混合物通过 RP-HPLC纯化，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (7S) -7-羟基-5-氮杂螺 [2. 4]庚-5-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基) 甲酰胺(223mg,79% )。LCMS (M+H)+ 555. 3。部分C [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(7-羟基-5-氮杂螺[2.4]庚 _5_ 基)_4_ 嘧啶基] 胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (7S) _7_ 羟基 _5_ 氮杂螺[2.4] 庚-5-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲 酰胺(223mg，0. 401mmol)溶于中Ac0H/H20混合物(20mL，4 1)中，并在RT下搅拌直至 LCMS表明脱保护基反应完成(过夜)。将反应混合物真空浓缩至干，并通过RP-HPLC纯化， 得到[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(7-羟基-5-氮杂螺[2. 4]庚-5-基)-4-嘧啶基]胼 基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(14mg,7% )0 LCMS _) + :471· 1。实施例131((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(2S)_2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2_(甲 硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺根据一般方法C，使用(3S)-1，3_ 二甲基哌嗪(实施例64)代替部分A中的氮 杂环丁烷盐酸盐制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(2S)-2，4- 二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H) +484. 4。实施例132((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(3R)-3_( 二甲基氨基)_1_ 哌啶 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺根据一般方法C，使用(3R)_N，N-二甲基-3-哌啶胺(实施例118)代替部分 A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[(3R)-3-( 二甲基氨 基)-1-哌啶基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (Μ+Η) +498· 5。实施例133 [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二甲基氨基)_3，3_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构 体的混合物) 部分 A 1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N, 4，4_四甲基_3_氨基吡咯烷向消旋的N，N，4，4-四甲基-3-氨基吡咯烷(0. 1629g，1. 145mmol，根据实施例129 制备)的DCM(4mL)溶液中加入2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(0. 2219g, 1. 102mmol)和N，N-二 异丙基乙胺(0. 230mL，1.320mmOl)。将该溶液在室温下搅拌3h，并然后真空浓缩。向残余物 的4 IDMSO-MeOH(5mL)溶液中加入胼水合物(0. 5mL)，并将该溶液搅拌过夜。将该溶液用 DCM(50mL)稀释，并用饱和的NaHCO3水溶液(20mL)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过 滤，并真空浓缩。将残余物通过Gilson RPLC纯化，首先得到消旋的1-(2-氯-5-氟-6-胼 基-4-嘧啶基)-N, N, 4，4-四甲基-3-氨基吡咯烷(0. 0546g, 16 %产率)，为黄色/橙色油状 物，LCMS _)+ 303. 1，随后得到消旋的4-氯_6-[4_ ( 二甲基氨基)-3，3- 二甲基-I-吡 咯烷基]-5-氟_2 (IH)-嘧啶酮腙(0. 0859g, 26 %产率)，为黄色/橙色油状物。部分B [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二甲基氨基)_3，3_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧 基)甲酰胺向消旋的1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N，4，4_四甲基_3_氨基吡 咯烷(0. 0546g，0. 180mmol)的DMF(3mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四 氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸，N，N-二异丙基乙胺盐(71. Img, 0. 166mmol)、 N-甲基吗啉(0. IOOmL, 0. 910mmol)、1-羟基 _7_ 氮杂苯并三唑(27mg，0. 198mmol)和 EDC(38mg，0. 198mmol)。将溶液搅拌过夜，并然后直接通过Gilson RPLC纯化，得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [4- ( 二甲基氨基)-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]_5_氟-4-嘧啶基} 胼基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0.0681g， 70%产率，非对映异构体的混合物)，为淡黄色油状物。LCMS (M+H)+ 584. 4。部分C [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二甲基氨基)_3，3_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2_{2-氯_6-[4_( 二甲基氨基)_3，3_ 二甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基 氧基)甲酰胺(0. 0681g,0. 117mmol)的4 IHOAc-水(5mL)溶液搅拌56h，并然后真空浓 缩。将残余物的DCM(IOOmL)溶液用饱和的NaHCO3水溶液(30mL)洗涤，并将有机相经无水
138Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过GilsonRPLC纯化，并由EtOAc-己烷结晶，得 到[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [4- ( 二甲基氨基)-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 0300g，51%产率，非对映异构 体的混合物)，为白色固体。LCMS (M+H)+ 500. 3。实施例134((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟_2_(甲硫基)_6_(八氢_2 (IH)-异喹啉
基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺(非对映异构体的混合物) 根据一般方法C，使用市售可得的十氢异喹啉代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸 盐制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-(甲硫基)_6_ (八氢-2 (IH)-异喹啉 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (Μ+ΗΓ510. 5。实施例135[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[7_( 二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2.4] 庚-5-基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体 的混合物) 部分A 5- (2-乙基-5-氟-6-胼基_4_嘧啶基)-N，N- 二甲基_5_氮杂螺[2. 4]庚_7_胺向消旋的N，N- 二甲基-5-氮杂螺[2. 4]庚_7_胺二盐酸盐(0. 163g，0. 765mmol, 根据实施例136的方法制备)的Me0H(3mL)溶液中加入4，6_ 二氯-2-乙基-5-氟嘧啶 (0. 1358g，0. 696mmol)。将该溶液于120°C在微波辐射下加热30min，并然后真空浓缩。向残 余物的3 IDMSO-MeOH(4mL)溶液中加入胼水合物(0. 5mL)。将该溶液于50°C加热，并搅拌 3天。然后将该溶液冷却至室温，并用DCM(IOOmL)稀释。将混合物用饱和的NaHCO3水溶液 (20mL)洗涤，并将水相用新制的DCM(50mL)反萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥， 过滤，并真空浓缩。将残余物通过Gilson RPLC纯化，得到消旋的5-(2-乙基-5-氟-6-胼 基-4-嘧啶基)-N，N-二甲基-5-氮杂螺[2. 4]庚-7-胺(0. 0818g，40%产率)，为淡黄色 油状物。LCMS (M+H)+ 295. 2。部分B [(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[7_( 二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2.4] 庚-5-基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺[1611]向消旋的5-(2_乙基-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)_N，N-二甲基_5_氮杂螺 [2.4]庚-7-胺(0.0818g，0.278mmol)的 DMF(3mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲 酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(0. 0778g, 0. 255mmol)、N-甲基吗啉 (0. 140mL, 1. 273mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(42mg，0. 309mmol)禾Π EDC(59mg, 0.308mmol)。将溶液搅拌过夜，并然后直接通过Gilson RPLC纯化，得到[(2R)_2_(环戊基 甲基)-3-(2-{6-[7-( 二甲基氨基)-5-氮杂螺[2. 4]庚-5-基]-2-乙基_5_氟-4-嘧啶 基}胼基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 1058g，71%产率，非对映异构体 的混合物)，为黄色油状物。LCMS _)+ 582. 3。部分C [(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[7_( 二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2.4] 庚-5-基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [7_ ( 二甲基氨基)_5_氮杂螺[2. 4] 庚-5-基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺(0. 1058g，0. 182mmol)的 Me0H(5mL)溶液中加入 10% Pd/C (50 % 水，32mg)。将混合物 在气球压力下氢化lh，并然后过滤。将该溶液真空浓缩，并将残余物与EtOAc共沸，并由 EtOAc-己烷结晶，得到[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[7-( 二甲基氨基)-5_氮杂螺 [2. 4]庚-5-基]-2-乙基-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 0795g, 89%产率，非对映异构体的混合物)，为白色固体。LCMS _)+ 492. 3。实施例136[ (2R) -3- (2- {2-氯 _6_ [7- (二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2. 4]庚 _5_ 基]_5_ 氟 _4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体的混合物) 部分A 1-乙酰基环丙烷甲酸乙酯向3-氧代丁酸乙酯(10. Og, 76. 84mmol)的DMF(150mL)溶液中加入碳酸钾 (22. 30g, 161. 3mmol)和 1，2-二溴乙烷(6. 62mL，76. 82mmol)。将混合物搅拌 2 天，并然后 过滤。将该溶液用水(300mL)稀释，并用Et20(2x200mL)萃取。将合并的有机相用干净的 水(IOOmL)洗涤，经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物在约IOmbar下进行真空 蒸馏，并收集在100°C沸腾的馏分，得到1-乙酰基环丙烷甲酸乙酯(7. 6482g，64%),为无色 油状物。部分B 5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚-4，7-二酮通过注射器向1-乙酰基环丙烷甲酸乙酯(7. 6482g，48. 97mmol)的Et0H(54mL)溶 液中缓慢地加入溴(2.76mL，53.87mmol)。将该橙色溶液搅拌2h，并然后真空浓缩。通过注 射器向0°C下的残余物的EtOH溶液(54mL)中缓慢地加入苄基胺(13. 4mL, 122. 7mmol)，并将混合物搅拌，并温热至室温过夜。将混合物真空浓缩，并在DCM(200mL)和IN的HCl水溶 液(IOOmL)之间分配。将水相用新制的DCM(IOOmL)萃取，并将合并的有机相经无水MgSO4 干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(40% EtOAc的己烷溶液)纯化，得到 5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2. 4]庚_4，7-二酮(2. 7842g，26% )，为黄色固体。LCMS _)+ 216.1。部分C (7Z)-5_(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4]庚_4，7_ 二酮7_ (0-甲基肟)向5-(苯基甲基)-5_ 氮杂螺[2. 4]庚 _4，7_ 二 酮(2. 7802g, 12. 92mmol)的 MeOH (65mL)溶液中加入乙酸钠(2. 12g,25. 8mmol)和0-甲基羟基胺盐酸盐(2. 16g， 25.9mmol)。将混合物搅拌过夜，并然后用DCM(IOOmL)稀释。将混合物用饱和的NaHCO3 水溶液洗涤，并将有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的(7Z)-5-(苯基甲 基)-5-氮杂螺[2. 4]庚_4，7-二酮7-(0-甲基肟)(3. 4094g，> 100%粗产物的产率)，为 黄色油状物。LCMS (M+H)+ 245. 1。部分D 5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚-7-胺.向(7Z)-5_(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4]庚_4，7_ 二酮7_(0_甲基肟)(推测 3. 1553g,12. 92mmol)的 THF(130mL)溶液中加入氢化铝锂(1. 58g，41. 63mmol)。将混合物 于65°C加热，并搅拌3h。然后将混合物冷却至0°C，并加入Na2SO4* 10H20。将混合物搅拌 过夜，并然后加入IN NaOH水溶液(6mL)。将混合物剧烈搅拌30min，并然后用DCM(3x50mL) 萃取。将合并的有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到消旋的粗的5-(苯基甲 基)-5-氮杂螺[2.4]庚-7-胺(2. 5355g，97%，2步)，为淡黄色油状物。LCMS :(M+H)+ 203. 1。部分E N，N-二甲基-5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚_7_胺将消旋的5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2. 4]庚-7-胺(2. 5355g，12. 53mmol)在甲酸 (20mL)和福尔马林(20mL)中的溶液于100°C加热，并搅拌3h。然后将该溶液冷却至0°C， 并用6N的NaOH水溶液调节至pH为14。将生成的悬浮液用Et2O (2x200mL)萃取，并将合并 的有机相经无水Na2SO4干燥。将混合物过滤，并将该溶液真空浓缩。然后将MeOH可溶解 的部分通过Gilson RPLC纯化，得到消旋的N，N-二甲基-5-(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4] 庚-7-胺(1. 7643g,61% )，为橙色的油状物。LCMS (M+H) + 231. 1。部分F N，N- 二甲基-5-氮杂螺[2. 4]庚_7_胺二盐酸盐向消旋的N，N-二甲基-5-(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4]庚_7_胺(0. 8015g， 3. 479mmol)的 MeOH(18mL)溶液中加入 IN 的 HCl 水溶液(6. 96mL，6. 96mmol)禾口 10% Pd/ C(50%水，160mg)。将混合物在气球压力下氢化过夜，并然后过滤。将该溶液真空浓缩，得 到粗的消旋的N，N- 二甲基-5-氮杂螺[2. 4]庚-7-胺二盐酸盐(0. 8060g, > 100%粗产物 的产率)。LCMS :(M+H)+ 141. 1。部分G 5- (2-氯-5-氟-6-胼基_4_嘧啶基)-N，N- 二甲基_5_氮杂螺[2. 4]庚_7_胺
141[1638]向消旋的N，N-二甲基-5-氮杂螺[2.4]庚-7-胺二盐酸盐(0. 4585g，2. 151mmol) 在DCM(8mL)中的混合物中加入2,4,6-三氯~5~氟嘧啶(0. 3234g，1. 606mmol)和N, N- 二 异丙基乙胺(1.25mL，7. 18mmol)。将该溶液搅拌3小时，并然后真空浓缩。向残余物的 3 IDMSO-MeOH溶液中加入胼水合物(ImL)，并将该溶液搅拌3天，并然后用DCM(IOOmL) 稀释。将混合物用饱和的NaHCO3水溶液(20mL)洗涤，并将水相用新制的DCM(50mL)萃取。 将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，并过滤。将该溶液真空浓缩，并将残余物通过Gilson RPLC纯化，首先得到消旋的5- (2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N- 二甲基-5-氮杂 螺[2.4]庚-7-胺(0.0968g，20%产率)，为橙色油状物，LCMS (M+H)+:301. 1，随后得到 消旋的4-氯-6-[7-( 二甲基氨基)-5-氮杂螺[2. 4]庚-5-基]_5_氟_2 (IH)-嘧啶酮腙 (0. 1990g，41% )，为橙色泡沫状物。部分H [ (2R) -3- (2- {2-氯 _6_ [7- (二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2. 4]庚 _5_ 基]_5_ 氟 _4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺向消旋的5-(2_氯-5-氟-6-胼基_4_嘧啶基)_N，N- 二甲基_5_氮杂螺[2. 4] 庚-7-胺(0. 0968g,0. 322mmol)的DMF(3mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四 氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸，N，N-二异丙基乙胺盐(122. Img, 0. 285mmol)、 N-甲基吗啉(0. 160mL, 1. 455mmol)、1-羟基 _7_ 氮杂苯并三唑(47mg，0. 345mmol)和 EDC(66mg，0. 344mmol)。将溶液搅拌过夜，并然后直接通过Gilson RPLC纯化，得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [7- ( 二甲基氨基)-5-氮杂螺[2. 4]庚_5_基]-5-氟-4-嘧啶基} 胼基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0.0961g， 58%,非对映异构体的混合物)，为淡紫色油状物。LCMS (M+H) + 582. 3。部分I [ (2R) -3- (2- {2-氯 _6_ [7- (二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2. 4]庚 _5_ 基]_5_ 氟 _4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2_{2-氯-6-[7_(二 甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2. 4] 庚-5-基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺(0.0961g，0. 165mmol)的4 IHOAc-水(5mL)溶液搅拌3天。将 该溶液真空浓缩，并用DCM(IOOmL)稀释。将该溶液用饱和的NaHCO3水溶液(25mL)洗涤，并 将有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过Gilson RPLC纯化，并将所需 的级分真空浓缩，并首先与MeOH共沸并然后与EtOAc共沸。将残余物由EtOAc-己烷结晶， 得到[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[7-( 二甲基氨基)-5-氮杂螺[2.4]庚_5_基]-5-氟-4-嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 0469g，57%，非对映异构体 的混合物)，为白色固体。LCMS (M+H) + 498. 1。实施例137[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(4_吡啶基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
142[1648]部分A 2,6- 二氯-5-氟-N-甲基-N_(4_吡啶基甲基)_4_嘧啶胺将市售可得的N-甲基-l-(4-吡啶基)甲胺(0. 305g，2. 5mmol)溶于THF(5mL) 中。向该溶液中加入三乙胺(0. 38mL，2. 73mmol)，随后加入溶于THF(5mL)中的2，4，6-三 氯-5-氟嘧啶(0.5g，2.5mmol)。将该反应搅拌2. 5小时。将反应混合物用水稀释，然后用 乙醚萃取。将有机物干燥(MgSO4)，并浓缩。将生成的物质通过使用5% MeOH在95% DCM中 的溶剂的混合物作为流动相经硅胶过滤来纯化，得到2，6- 二氯-5-氟-N-甲基-N-(4-吡 啶基甲基)-4-嘧啶胺，为褐色油状固体(0. 3516g,49% )0 LCMS _)+= 287. 0。部分B 2-氯-5-氟-6-胼基-N-甲基_N_(4_吡啶基甲基)_4_嘧啶胺将2，6- 二氯-5-氟-N-甲基 _N_ (4_ 吡啶基甲基)~4~ 嘧啶胺(0. 3516g，1. 23mmol) 溶于5mL的DMSO和胼一水合物(0. 36mL，7. 4229mmol)中。将反应器加压密封并于50°C 加热2. 5小时。然后将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到2-氯-5-氟-6-胼基-N-甲 基-N-(4-吡啶基甲基)-4-嘧啶胺，为暗红色固体(0. 0803g,23% )。LCMS (M+H)+ = 283. 0。部分C [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(4_吡啶基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将2-氯-5-氟-6-胼基-N-甲基-N- (4_吡啶基甲基)_4_嘧啶胺(0. 0803g,
0.2847mmol)和(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲 基}丙酸，二异丙基胺盐(0. 146g，0. 3406mmol)溶于 DMF(4mL)中。加入 NMM (0. 16mL，
1.4552mmol)，随后加入 HOAt (0. 046g, 0. 3382mmol)和 EDC (0. 065g, 0. 339mmol)。搅拌过夜 后，将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(4-吡啶基 甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基 氧基)甲酰胺，为米色固体(0. 0958g，60% )。LCMS (M+H)+= 564. 3。部分D [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(4_吡啶基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(4_吡啶基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 0958g, 0. 1701mmol)溶于乙酸(SmL)和水(2mL)中。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发挥发物，并 将生成的物质通过RP-HPLC纯化，得到[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(4-吡啶基甲 基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为米色固体 (0. 0249g,31% )。LCMS (M+H)+ = 480. 1。实施例138[(2R)-3-(2-{2-氯 _6_[(反式)_3_( 二甲基氨基)_4_ 甲基 吡咯烷
基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 [1662] 根据一般方法D，使用(反式)_N，N，4-三甲基-3-氨基吡咯烷(实施例89)代 替部分A中的N-甲基哌嗪制备[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(反式)-3-( 二甲基氨基)-4_甲 基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。 LCMS (M+H)+ 486. 6。实施例139[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _6_ [ (2S，3R) _3_ 羟基 _2_ 甲基 吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法A，使用(2S，3R)-2_ 甲基 _3_ 吡咯烷醇(Tetrahedron，1998，54， 12547-12560)代替部分A中的吡咯烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟-6- [ (2S， 3R) -3-羟基-2-甲基-1-吡咯烷基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰 胺。LCMS (M+H)+:439. 2。实施例140[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(3-羟基-3-甲基吡咯烷基)_4_嘧啶基]胼 基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体的混合物)部分A 3-甲基-1-(苯基甲基)-3-吡咯烷醇在0°C下，向市售可得的1_(苯基甲基)-3_吡咯烷酮(1.0g，5. 71mmol)的 THF(30mL)和乙醚(30mL)溶液中加入MeMgBr (1· 4Μ在甲苯=THF(3 1)中的溶液)(6. ImL, 8. 65mmol)。将该反应于0°C搅拌1.5小时，然后用水终止并萃取。真空除去有机溶剂，并再 次用乙醚萃取，干燥有机物(Na2SO4)，并真空除去溶剂。通过RP-HPLC纯化，得到黄色油状物 的消旋的3-甲基-1-(苯基甲基)-3_吡咯烷醇(0. 501g，46% )。LCMS (M+H)+ = 192.3。部分B 3-甲基-3-吡咯烷醇将3-甲基-1-(苯基甲基)-3_吡咯烷醇(0. 501g，2. 62mmol)和Pd(C)在
MeOH (30mL)中的溶液在标准氢化条件下按照一般方法A，部分C中所述处理3天，得到3-甲 基-3-吡咯烷醇，为橙色油状物(0. 239g,90% )。LCMS :_)+ = 102. 1。部分C 1-(2，6_ 二氯-5-氟_4_嘧啶基)_3_甲基_3_吡咯烷醇向 2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(0. 476g，2. 36mmol)和三乙胺(0. 36mL，2. 60mmol)的 THF溶液中加入3-甲基-3-吡咯烷醇(0. 239g，2. 36mmol)在THF和MeOH(2mL)中的溶液。 将该反应在室温下搅拌2. 5小时，并然后真空除去溶剂。将水加入到残余物中，并将混合 物用乙酸乙酯萃取。将有机物干燥(Na2SO4)并蒸发，得到1-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶 基)-3_甲基-3-吡咯烷醇，为橙色固体(0. 486g，77% )。LCMS :_)+ = 266. 1。部分D 1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)_3_甲基_3_吡咯烷醇将1-(2，6_ 二氯-5-氟 _4_ 嘧啶基)_3_ 甲基 _3_ 吡咯烷醇(0. 486g，1. 83mmol) 和胼一水合物(0. 53mL，10. 96mmol)在DMS0(5mL)中于50°C加热直至认为该反应完成。通 过RP-HPLC纯化，得到1- (2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)_3_甲基-3-吡咯烷醇，为褐 色固体(0. 104g,21% )。LCMS (M+H)+ = 262. 1。部分E [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(3-羟基-3-甲基吡咯烷基)_4_嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2R)-3_环戊基_2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸 (0. 122g，0. 4mmol)、消旋的1- (2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)_3_甲基-3-吡咯烷 醇(0. 104g,0. 4mmol)、NMM (0. 13mL, 1. 2mmol)、HOAt (0. 054g,0. 4mmol)、EDC (0. 077g, 0. 4mmol)和DMF (2mL)混合。当该反应完成时，将混合物通过RP-HPLC纯化，得到 [(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (3-羟基-3-甲基-1-吡咯烷基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺，为非对映异构体的混合物(0.035g， 16% ) ο LCMS (M+H)+ = 549. 5。部分F [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(3-羟基-3-甲基吡咯烷基)_4_嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(3-羟基-3-甲基吡咯烷基)_4_嘧啶基] 胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0.035g，0.064mmol) 和Pd(C) (0. 005g)在MeOH(IOmL)中的溶液在标准氢化条件下按照一般方法A，部分C中 所述的进行处理。通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(3-羟基-3-甲 基-1-吡咯烷基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺，为白 色固体(非对映异构体的混合物)(0. OlOg, 34% )0 LCMS (M+H)+ = 459. 4。实施例141((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_ 氟 _6-[(3S)-3_(羟基甲基)_4_ 吗啉
基]-2_(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的(3S)-3-吗啉基甲醇代替部分A中的氮杂环丁 烷盐酸盐制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-6-[(3S)-3-(羟基甲基)-4_吗啉 基]-2-(甲硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (Μ+ΗΓ487. 5。实施例142N-[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(八氢吡嗪并[1,2-a]氮杂革 _2 (IH)-基)_4_ 嘧
啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法G，使用市售可得的十氢-吡嗪并[1，2_A]氮杂革代替部分A中的 (lS，4S)-2-甲基_2，5-二氮杂二环[2. 2. 1]庚烷二氢溴酸盐，并使用1当量的DIPEA制备 N-[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟_6_(八氢吡嗪并[1，2_a]氮杂革_2 (IH) -基)_4_嘧啶基] 胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 602. 4。实施例143[(2R)-3-[2_(2-氯-5-氟-6-{[2-(4_ 吗啉基)乙基]氨基}_4_ 嘧啶基)胼
基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的4-(2-氨基乙基)吗啉代替部分A中的N-甲 基哌嗪制备[(2R)-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{[2-(4-吗啉基)乙基]氨基} _4_嘧啶基)胼 基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(Μ+Η)+:488.3。实施例144[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (2R) _2_ (羟基甲基)_4_ 甲基 哌嗪
基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用[(2R)-4-甲基_2_哌嗪基]甲醇(Tetrahedron Asymmetry, 1993，4，2389-2398)代替部分A中的吡咯烷制备[(2R)_2_(环戊基甲 基)-3-(2-{5_氟-6-[(2R)-2-(羟基甲基)-4_甲基哌嗪基]_2_甲基_4_嘧啶基}胼 基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 468. 3。实施例145N- [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_ [ (3R，5S) _3，4，5_ 三甲基-1-哌嗪基]_4_ 嘧啶
基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A (3札5幻-3，5-二甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯在0°C下，向顺式-2，6-二甲基哌嗪(1. 142g, IOmmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中 滴加焦碳酸双(1，1-二甲基乙基)酯(2. 161g,9. 9mmol)的二氯甲烷(6mL)溶液。将反应 混合物温热至室温并搅拌过夜，随后用二氯甲烷稀释，并用饱和的Na2CO3水溶液洗涤。将 水层用二氯甲烷反萃取一次。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发，得到(3R， 5S)-3，5-二甲基-1-哌嗪甲酸 1，1_ 二甲基乙基酯(2. 04g,95% )。LCMS (M+H) + 215. 1。部分B (3R，5S)-3，4，5_三甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯在0°C下，向(3R，5S)-3，5_ 二甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(2. 04g， 9. 5mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中加入甲醛(1. 075mL，37%的水溶液，14. 3mmol)，随后加 入三乙酰氧基硼氢化钠(2. 628g，12. 4mmol)。将反应混合物温热至室温，并搅拌2h，随后用 二氯甲烷稀释，并用IN NaOH溶液洗涤。然后将有机物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发，得 到(3R，5S) -3，4，5-三甲基-1-哌嗪甲酸 1，1_ 二甲基乙基酯(2. 06g, 95% )0 LCMS (M+H) + 229* 2 ο部分C (2R，6S)-1，2，6_ 三甲基哌嗪，TFA 盐将(3R，5S)-3，4，5-三甲基-1-哌嗪甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(253mg，1. Immo 1)在 二氯甲烷(3mL)中溶解并搅拌。滴加三氟乙酸(1. 2mL)，并将生成的反应混合物在室温下搅 拌2.5小时。然后将溶剂蒸发，并将粗的(2R，6S)-1，2，6-三甲基哌嗪的TFA盐用于下一步 骤。LCMS (M+H). 129. 1。部分D [1718]N- [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (3R，5S) _3，4，5_ 三甲基 哌嗪基]~4~ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法G，使用(2R，6S)-1，2，6_三甲基哌嗪TFA盐代替部 分A中的(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备 N-[ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6-[ (3R，5S) -3，4，5-三甲基-1-哌嗪基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 486. 3。实施例146 [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {6_ [ (2R，3R) _3_ ( 二甲基氨基)_2_ 甲基 吡咯 烷基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用(2R，3R)_N，N，2_三甲基_3_氨基吡咯烷(Tetrahedron, 1998，54，12547-12560)代替部分A中的吡咯烷制备[(2R)_2_(环戊基甲 基)-3- (2- {6- [ (2R，3R) -3- ( 二甲基氨基)_2_甲基-1-吡咯烷基]_5_氟-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:466.4。实施例147 [(2R)-3-{2-[2-氯 _5_ 氟 _6_ (2，2，4_ 三甲基 哌嗪基)_4_ 嘧啶基]胼 基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法D，使用1，3，3_三甲基-哌嗪(市售可得的)代替部分A中的N-甲 基哌嗪制备[(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (2，2，4-三甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼 基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(Μ+Η)+:486.3。实施例148[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(3，3，4-三甲基 哌嗪基)_4_ 嘧啶基]胼
基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用1，2，2_三甲基-哌嗪(市售可得的)代替部分A中的N-甲 基哌嗪制备[(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (3，3，4-三甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼 基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(Μ+Η)+:486.3。[1739]部分A (7Z)-5_(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4]庚_4，7_ 二酮7_ (0-甲基肟)将5_(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4]庚_4，7_ 二酮(实施例128) (2. 8619g， 13. 29mmol)、乙酸钠(2. 23g，26. 59mmol)和 0-甲基羟基胺盐酸盐(2. 22g，26. 59)溶于 65mL的MeOH中。将混合物在室温下搅拌过夜，并然后用300mL的DCM稀释。将混合物用 饱和的NaHCO3水溶液(200mL)洗涤，并将有机物经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得 到(7Z)-5-(苯基甲基)-5_ 氮杂螺[2.4]庚 _4，7-二酮 7-(0-甲基肟)(3. 0864g，95 % )。 LCMS (M+H)+245. 1。部分B 7-氨基-5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2. 4]庚_4_酮根据实施例130，部分C，使用(7Z)-5_(苯基甲基)-5_氮杂螺[2.4]庚_4，7_ 二 酮7-(0_甲基肟)代替5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2. 4]庚_4，7-二酮制备7-氨基-5-(苯 基甲基)-5-氮杂螺[2. 4]庚-4-酮。LCMS :_)+:203. 1。部分C N，N-二甲基-5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚_7_胺将7-氨基-5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚_4_酮(2. 535g, 12. 28mmol)溶于 AcOH(20mL)和HCHO水溶液(20mL)的混合物中，将内容物于100°C加热3小时，并然后冷却 至0°C。将该溶液用6N NaOH水溶液调节pH至14，并然后用Et2O (2x200mL)萃取。将合并的
CN 实施例149N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3-(2-{5_ 氟 _2_ 甲基 _6_[ (3R，5S) _3，4，5_ 三甲
基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。 根据一般方法A，使用(2札65)-1，2，6-三甲基哌嗪1 六盐(实施例145)代替部分 A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟-2-甲 基-6-[ (3R，5S) -3，4，5-三甲基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲 酰胺。LCMS :(M+H)+:466.40实施例150[ (2R) -3- (2- {2-氯 _6_ [7- (二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2. 4]庚 _5_ 基]_5_ 氟 _4_ 啼
啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体)
有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，并通过RP-HPLC纯化，得到N，N- 二甲基-5-(苯 基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚-7-胺(2.6062g，92. 5% )。通过手性LC分离对映异构体的 混合物。El (1.4g)LCMS:(M+H)+:231ο Ε2 (1. 5g) LCMS (Μ+Η) + :231。部分E N，N- 二甲基-5-氮杂螺[2. 4]庚 _7_ 胺将N，N-二甲基-5-(苯基甲基)-5-氮杂螺[2.4]庚 _7_ 胺(El) (1.4g，0. 18mmol) 溶于12mL的IN HCl水溶液在30mL MeOH中的混合物中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(280mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置过夜。然后将内容物除气，并通过 0.2μπι过滤嘴注射器过滤。将生成的滤液真空浓缩，并将残余物用IN NaOH水溶液调节至 PH为14。将水相用CH2Cl2 (2xl00mL)萃取，将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真 空浓缩，得到纯的N, N- 二甲基-5-氮杂螺[2. 4]庚-7-胺(718mg, 84% ) 0 LCMS (Μ+Η) + 未检测。部分F 2-氯-5-氟-4，6-双(苯硫基)嘧啶在-30°C下，向 2，4，6-三氯-5-氟嘧啶(10. 0635g，49. 96mmol)的 DCM(250mL) 溶液中加入苯硫酚(10. 26mL，99. 93mmol)。在剧烈搅拌下，向该溶液中通过加料漏斗滴加 DIEA (21. 8mL, 124. 9mmol)。将反应混合物在室温下搅拌lh，然后将挥发物真空浓缩，并将残 余物溶于MeOH(IOOmL)和水(200mL)中。将生成的淡黄色固体沉淀通过过滤收集。将沉淀 用水(2xl00mL)洗涤，将生成的固体真空干燥，得到2-氯-5-氟-4，6-双(苯硫基)嘧啶 (17. 4080g,99% )。LCMS (Μ+Η)+ 349. 0。部分G 2-氯-5-氟-4，6-双(苯基磺酰基)嘧啶将2-氯-5-氟-4，6-双(苯硫基)嘧啶(3. 0185g，8. 652mmol)溶于 ACN(43mL)和 水(86mL)的混合物中。向该溶液中加入高碘酸钠(11. 10g，51.916mmOl)，随后加入氯化钌 (III) (36mg,0. 173mmol)。将混合物剧烈搅拌3. 5小时。将反应混合物用CH2Cl2(2xl00mL) 萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到纯的2-氯-5-氟-4， 6-双(苯基磺酰基)嘧啶(2. 51g,70% )。LCMS (M+H)+ 413. 0。部分H 5-(2-氯-5-氟-6-胼基_4_嘧啶基)_N，N- 二甲基_5_氮杂螺[2. 4]庚_7_胺将N，N-二甲基-5-氮杂螺[2.4]庚 _7_ 胺(464mg,3. 31mmol)和 DIEA(580 μ L， 3. 31mmol)溶于DCM(43mL)中，并冷却至0°C。在剧烈搅拌下滴加2-氯-5-氟-4，6-双(苯 基磺酰基)嘧啶(1.2427g，3. Olmmol)的3OmL DCM溶液。将混合物搅拌30分钟，并然后真 空浓缩。将残余物溶于MeOH(30mL)中，加入胼一水合物(1. 4mL)，并将内容物在RT下搅拌过 夜，并然后真空浓缩。将粗的残余物溶于CH2Cl2 (IOOmL)中，并将混合物用NaHCO3 (lX50mL) 洗涤。将水相用CH2Cl2(IxIOOmL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空 浓缩。将生成的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到5-(2_氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)_N， N-二甲基-5-氮杂螺[2. 4]庚-7-胺(465. 5mg，53% )。LCMS (Μ+Η) + :301. 2。部分I [ (2R)-3-(2-{5-氯-3-[7-( 二甲基氨基)-5-氮杂螺[2.4]庚 _5_ 基]_2_ 氟苯
150基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺根据一般方法E，部分C，使用5-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N-二甲 基-5-氮杂螺[2.4]庚-7-胺代替(5-氯-2-氟-3-胼基苯基)(1_甲基乙基)胺制备 [(2R)-3-(2-{5-氯-3-[7-( 二甲基氨基)-5_氮杂螺[2.4]庚-5-基]-2-氟苯基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺。LCMS:(M+H)+:588.3。部分T [ (2R)-3-(2-{5-氯-3-[7-( 二甲基氨基)-5-氮杂螺[2.4]庚 _5_ 基]_2_ 氟苯 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3- (2- {5_ 氯 _3_ [7_ ( 二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2. 4]庚 _5_ 基]_2_ 氟苯 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(300mg，0. 51mmol) 溶于5mL的MeOH中。加入5%铑/铝催化剂(240mg)，并将内容物在氢气球下搅拌过夜。然 后将内容物过滤以除去催化剂，并将滤液真空浓缩。将生成的粗产物通过反相HPLC纯化， 得到[(2R) -3- (2- {5-氯-3- [7- ( 二甲基氨基)-5-氮杂螺[2. 4]庚_5_基]-2-氟苯基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体)(142mg， 56% ) ο LCMS (M+H)+ 498. 3。实施例151[ (2R) -3- (2- {2-氯 _6_ [7- (二甲基氨基)_5_ 氮杂螺[2. 4]庚 _5_ 基]_5_ 氟 _4_ 嘧
啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体) 根据实施例150，使用E2对映异构体代替部分E中的El对映异构体制备 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [7- ( 二甲基氨基)-5-氮杂螺[2. 4]庚_5_基]-5-氟-4-嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体)。LCMS (M+H)+498. 3。实施例152[(2R)-3-(2-{2-氯-6_[3_( 二甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构 体的混合物) 部分A 2-甲基-N-[3-(甲氧基)-3-氧代丙基]丙氨酸甲酯将N-(2-氰基乙基)-2-甲基丙氨酸(J.Am. Chem. Soc. 1950，72，2599) (22. 58g)在I.25MHCl的甲醇溶液(460mL)中的溶液于75°C加热，并搅拌过夜。然后将该溶液真空浓 缩，并用CHCl3(200mL)稀释。将混合物过滤，并将该溶液用饱和的NaHCO3水溶液洗涤。将 有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到2-甲基-N- [3-(甲氧基)-3-氧代丙基] 丙氨酸甲酯(11.718，40%产率)，为无色油状物。LCMS :_)+:204. 1。部分B 2-甲基-N-[3-(甲氧基)-3-氧代丙基]-N-(苯基羰基)丙氨酸甲酯向2-甲基-N-[3_(甲氧基)-3_氧代丙基]丙氨酸甲酯(11.71g,57. 62mmol)在 1 IDCM-水(300mL)中的混合物中加入NaHCO3 (9. 68g，115. 2mmol)，随后加入苯甲酰氯 (7. 02mL,60. 48mmol)。将混合物剧烈搅拌过夜，并然后分离各相。将有机相经无水MgSO4干 燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(35% EtOAc的己烷溶液)纯化，得到2-甲 基-N_[3-(甲氧基)-3-氧代丙基]-N-(苯基羰基)丙氨酸甲酯(3.67878，21%产率)，为 无色油状物。LCMS (M+H)+ 308. 1。部分C 5，5_ 二甲基-4-氧代-1-(苯基羰基)-3_吡咯烷甲酸甲酯 向2-甲基-N- [3-(甲氧基)-3-氧代丙基]_N_ (苯基羰基)丙氨酸甲酯(3. 5589g，
II.58mmol)的甲苯(115mL)溶液中加入 MeOH (0. 94mL, 23. 21mmol)和 NaOMe (1. 25g, 23. 14mmol)。将混合物于60°C加热，并搅拌2h。加入另外一批MeOH(IOmL)，并将混合物 于60°C再搅拌2h。然后将混合物真空浓缩，并将残余物在DCM(200mL)和IN的HCl水溶 液(IOOmL)之间分配。将有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的5，5-二甲 基-4-氧代-1-(苯基羰基)-3_吡咯烷甲酸甲酯(2. 746g，86%产率)，为无色油状物。LCMS: _)+ 276. 1。部分D 2，2- 二甲基-1-(苯基羰基)-3-吡咯烷酮将5，5_ 二甲基-4-氧代-1-(苯基羰基)-3_吡咯烷甲酸甲酯(2. 5781g， 9. 364mmol)的10 IHOAc-水(50mL)溶液于100°C加热，并搅拌42h。将该溶液冷却至室 温，并真空浓缩。将残余物溶于DCM(200mL)中，并用饱和的NaHCO3水溶液洗涤。将有机相 经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的2，2- 二甲基-1-(苯基羰基)-3-吡咯烷酮， 为淡黄色油状物。LCMS (M+H)+ 218. 1。部分E (3幻-2，2-二甲基-1-(苯基羰基)-3-吡咯烷酮0_甲基肟向 2，2_二甲基-1-(苯基羰基)-3_吡咯烷酮(2. 0602g,9. 482mmol)的Me0H(50mL) 溶液中加入乙酸钠(0. 956g，11.38mmol)和甲氧胺盐酸盐(0. 950g，11. 37mmol)。将混合 物搅拌过夜，并然后真空浓缩。将残余物溶于DCM(200mL)中，并用饱和的NaHCO3水溶液 (50mL)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得 到(3E)-2，2-二甲基-1-(苯基羰基)-3_吡咯烷酮0-甲基肟(1.95678，84%产率)，为淡 黄色油状物，将其在高真空下固化。LCMS (M+H)+ 247. 2。部分F 2，2- 二甲基-1-(苯基甲基)-3_氨基吡咯烷向(3E)-2，2-二甲基(苯基羰基)_3_吡咯烷酮0_甲基肟(1. 9492g，
1527. 914mmol)的THF(80mL)溶液中加入氢化铝锂(0. 900g，23. 72mmol)，并将混合物于65°C加 热，并搅拌5小时。将混合物冷却至0°C，并加入Na2SO4 · IOH2O(2g)。将混合物搅拌30min， 然后加入IN的NaOH水溶液(IOOmL)。将混合物用Et2O (3xl50mL)萃取，并将合并的有机相 经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的消旋的2，2- 二甲基-1-(苯基甲基)_3_氨 基吡咯烷(1.8247g，> 100%粗产物的产率)，为淡黄色油状物。LCMS:(M+H)+:205. 2。部分G N，N，2，2-四甲基-1-(苯基甲基)-3-氨基吡咯烷将消旋的2，2-二甲基-1-(苯基甲基)-3-氨基吡咯烷(推测1. 6169g，7. 914mmol) 的甲酸(15mL)和福尔马林(15mL)溶液于100°C加热，并搅拌3h。然后将该溶液冷却至0°C， 并用6N的NaOH水溶液调节至pH为14。将混合物用Et20 (3xl00mL)萃取，并将合并的有机 相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过Gilson RPLC纯化，得到消旋的N， N，2，2-四甲基-1-(苯基甲基)-3-氨基吡咯烷(0. 5637g，31 %产率，2步)，为橙色油状物。 LCMS (M+H)+233. 3。部分H N，N，2，2-四甲基-3-氨基吡咯烷向消旋的N，N，2，2-四甲基+ (苯基甲基)_3_氨基吡咯烷(0. 5637g，2. 426mmol) 的Me0H(24mL)溶液中加入IN的HCl水溶液(4. 9ml)和10% Pd/C(50%水，113mg)。将混合 物氢化过夜，并然后通过0.2μ M膜过滤。将生成的溶液真空浓缩。将残余物用IN的NaOH 水溶液(20mL)稀释，并用DCM(2xl00mL)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤， 并真空浓缩，得到粗的消旋的N，N，2，2-四甲基-3-氨基吡咯烷(0. 2930g, 85%产率)，为淡 黄色的油状物。LCMS (M+H)+ 143. 1。部分I 2- {2-氯-6- [3- (二甲基氨基)_2，2_ 二甲基吡咯烷基]_5_氟_4_嘧啶基} _1， 1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯向消旋的N，N，2，2-四甲基-3-氨基吡咯烷(0. 1466g, 1. 031mmol)的 DMF(6mL)溶 液中加入N，N-二异丙基乙胺(0. 220mL，l. 263mmol)和2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)_1， 1，2-胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(0.513g，1.031mmOl)，并将该溶液搅拌过夜。将 该溶液在Et2O(IOOmL)和水(20mL)之间分配，并将有机相用干净的水(20mL)洗涤。将合 并的水相用新制的Et20(50mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空 浓缩。将残余物通过梯度硅胶色谱法(0%至100% EtOAc的己烷溶液)纯化，得到消旋的 2- {2-氯-6- [3- ( 二甲基氨基)-2，2- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基} -1，1，2-胼 三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(0.46478，75%产率)，为白色泡沫状物。LCMS :(M+H)+: 603. 3。部分J 1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N，2，2_四甲基_3_氨基吡咯烷五盐酸
Trrt.向消旋的2- {2-氯-6- [3- (二甲基氨基)_2，2_ 二甲基吡咯烷基]_5_氟_4_嘧 啶基}-1，1，2_ 胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 4618g,0. 766mmol)的 Me0H(5mL)溶 液中加入4N HCl的二噁烷溶液(5mL)。将该溶液搅拌3天，并然后真空浓缩，得到消旋的
1531-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N, N，2，2-四甲基-3-氨基吡咯烷五盐酸盐(0. 3673g， 99%产率)，为橙色油状物，将其在真空下结晶。LCMS :(M+H)+:303. 1。部分K [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[3_( 二甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺向消旋的1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N，2，2-四甲基_3_氨基吡 咯烷五盐酸盐(0. 3649g,0. 752mmol)的DMF(5mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲酰 基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(0.2140g，0.701mmol)、N-甲基吗啉(0. 770mL， 7. 00mmol)、l-羟基-7-氮杂苯并三唑(114mg，0. 838mmol)和 EDC (161mg，0. 840mmol)。将 溶液搅拌过夜，并直接通过Gilson RPLC纯化，得到[(2R)-3-(2-{2-氯_6-[3_( 二甲基氨 基)-2，2- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙 基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 1755g，42%产率，非对映异构体的混合物)，为褐色油 状物。LCMS (M+H)+:590. 4。部分L [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[3_( 二甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R)-3-(2_{2-氯-6_[3_(二甲基氨基)_2，2_ 二甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲 酰胺(0. 1737g，0. 294mmol)的 MeOH(IOmL)溶液中加入 5 % Rh/C(175mg)。将混合物于 50psi氢化过夜，并然后通过0.2μΜ膜过滤，并真空浓缩。向残余物的MeOH(4mL)溶液 中加入20% (1(0!1)2/((50%水，51^)。将混合物在气球压力下氢化50分钟。然后将混 合物通过0.2μ M膜过滤，并将该溶液真空浓缩。将残余物通过Gilson RPLC纯化，得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [3- ( 二甲基氨基)-2，2- 二甲基-1-吡咯烷基]_5_氟-4-嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 0670g，46%产率，非对映异构体的 混合物)，为白色固体，随后由EtOAc-己烷结晶。LCMS (M+H) + 500. 3。实施例153[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟_2_甲基_6_ [3- (3-吡啶基)吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体的混合物) 根据一般方法A，使用市售可得的3- (3-吡咯烷基)吡啶代替部分A中的吡咯烷制 备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [3- (3-吡啶基)-1-吡咯烷基]_4_嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。(非对映异构体的混合物)LCMS (Μ+ΗΓ486. 3。实施例154[1814]((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2_[5_氟_6_[2_ (羟基甲基)~4~吗啉基]_2_ (甲硫
基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用市售可得的2-吗啉基甲醇代替部分A中的氮杂环丁烷盐 酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-6- [2-(羟基甲基)~4~吗啉基]_2_ (甲 硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺。(非对映异构体的混合物)LCMS (M+H) +487. 5。实施例155N- [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ (反式 _2，4，5_ 三甲基 哌嗪基)_4_ 嘧啶基}
胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(Dl，单一的未知非对映异构体) 部分A (反式)-2，5_二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物)在0°C下，向(2札55)-2，5-二甲基哌嗪(市售可得的)(3.4958，30讓01)的二氯甲 烷(25mL)溶液中加入三乙胺(3. 76mL，27mmol)，随后滴加氯甲酸苄基酯(4. OmL，27mmol)。 将反应混合物温热至室温，并搅拌过夜。然后将溶剂蒸发至干。将残余物溶于IN HCl水溶 液中，并用EtOAc洗涤。将有机层用IN HCl溶液萃取两次，并将合并的水层用6N NaOH碱 化至 PH 11。将生成的碱性水溶液用EtOAc萃取三次。将合并的有机层用盐水洗涤，干 燥(MgSO4)并蒸发，得到反式-2，5-二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物) (1. 35g, 18% ) ο LCMS (M+H)+ 249. 1。部分B 反式-2，4，5_三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体1)在0°C下，向反式-2，5-二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合 物)(1.35g，5.43mm0l)的二氯甲烷(40mL)溶液中加入甲醛(0. 817mL，37 %的水溶液， 10. 87mmol)，随后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1. 726g，8. 14mmol)。将反应混合物温热至室 温，并搅拌2h，随后用二氯甲烷稀释，并用IN NaOH溶液洗涤。将有机物用盐水洗涤，干燥 (MgSO4)并蒸发，得到反式-2，4，5-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物) (1.42g,100% )0反式-2，4，5-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体1) (480mg)和 反式-2，4，5-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体2) (400mg)通过手性色谱法分离。 LCMS (M+H)+263. 3。
155[1826]部分C 反式-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐(对映异构体1)将反式-2，4，5_三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体1) (480mg, 1. 83mmol) 溶于30mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(96mg)，并将内容物彻底地除 气，并在氢气球下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将 Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。将IN HCl (3. 8mL)加入到得到的滤液中，将 其真空浓缩，得到反式-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐(对映异构体1) (370mg,100% )0 LCMS (Μ+Η)+:129· 1。部分D N- [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ (反式 _2，4，5_ 三甲基 哌嗪基)_4_ 嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(Dl，单一的未知非对映异构体)根据一般方法G，使用反式-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐(对映异构体1)代 替部分A中的(lS，4D)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备 N- [ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6-(反式-2，4，5-三甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+:486. 1。实施例156{(2R)-2_(环戊基甲基)-3-[2-(6-{(3R)-3_[( 二甲基氨基)甲基]_4_ 吗啉
基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺 部分A (3S)-N, N- 二甲基_5_氧代_4_(苯基甲基)_3_吗啉甲酰胺向(3S)-5_ 氧代 _4-(苯基甲基)-3_ 吗啉甲酸(1.5g，6. 4mmol) (J. Chem. Soc.， Perkin Trans. 1，1985，2577-2580)的 THF(50mL)溶液中加入二甲胺(3. 8mL，7. 6mmol，2M 的 THF 溶液)、EDC (1. 46g, 7. 7mmol) ,HOAt (1. 06g, 7. 7mmol)和 NMM (3. 5mL, 30mmol)。将反应混 合物搅拌过夜，并蒸发THF，用EtOAc代替。加入IM HC1，并分离各相。将水层用EtOAc萃取 两次，并将合并的有机物经硫酸钠干燥。真空浓缩，得到(3S)-N，N-二甲基-5-氧代-4-(苯 基甲基)_3吗啉甲酰胺，将其通过RP-HPLC纯化。LCMS (M+H)+ 263. 1。部分B 二甲基{[(3R)-4-(苯基甲基)-3-吗啉基]甲基}胺将(3S)-N，N-二甲基-5-氧代-4-(苯基甲基)-3-吗啉甲酰胺(390mg，1. 5mmol) 溶于THF (20mL)中，并将该溶液冷却至0°C。加入LiAlH4 (225mg, 5. 9mmol)，并将生成的混合 物回流过夜。冷却至0°C时，加入水(1. 4mL)，随后加入15% (w/w)NaOH(水溶液)(1. 4mL)， 并最后加入另一批水(4.2mL)。搅拌30分钟，随后过滤并真空浓缩，得到粗的混合物，将 其通过RP-HPLC纯化，得到二甲基{[(3R)-4-(苯基甲基)-3_吗啉基]甲基}胺(510mg，
41% )。LCMS (M+H)+ 235. 2。部分C 二甲基[(3R)-3-吗啉基甲基]胺.HCl向二甲基{[(3幻-4-(苯基甲基)-3-吗啉基]甲基}胺(5IOmg)在除气的MeOH 和4滴浓HCl中的溶液中加入10% (Pd/C) (IOOmg)。将生成的混合物于50psi在Parr振 荡器上氢化3小时，随后过滤并真空浓缩，得到二甲基[(3R)-3-吗啉基甲基]胺的盐酸盐。 LCMS (M+H)+ 145. 2。部分D {(2R)-2_(环戊基甲基)-3-[2-(6-{(3R)-3_[( 二甲基氨基)甲基]_4_ 吗啉 基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺根据一般方法E，使用二甲基[(3R)-3-吗啉基甲基]胺盐酸盐代替部分A中的 异丙胺制备K2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(6-{(3R)-3-[( 二甲基氨基)甲基]-4-吗啉 基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 502. 2。实施例157[ (2R)-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲基-2-(4-吗啉基)丙基]氨基}_4_ 嘧啶
基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺部分A 2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲基_2-(4_吗啉基)丙基]氨基}_4_嘧啶基)_1，1， 2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯在氮气下于0°C，向搅拌下的市售可得的[2-甲基-2-(4_吗啉基)丙基]胺 (0. 158g，1. OOmmo 1)的DMF(IOmL)溶液中加入二异丙基乙胺(0. 19mL, 1. Immo 1)，随后立即 加入2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 497g， l.OOmmol)。使该反应达到室温，并搅拌过夜。然后加入乙醚，并将混合物用水洗涤。将水 层用乙醚反萃取，并将合并的有机物干燥(Na2SO4),并真空浓缩。将生成的残余物通过硅胶 色谱法(5-60%乙酸乙酯的己烷溶液，三乙胺)纯化，得到2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲 基-2-(4-吗啉基)丙基]氨基}-4_嘧啶基)-1，1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯， 为透明油状物(0. 578g,94% )。LCMS (M+H)+ = 619. 4。部分B 2-氯-5-氟-6-{[2-甲基-2-(4-吗啉基)丙基]氨基} _4 (IH)-嘧啶酮腙向2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲基_2-(4_吗啉基)丙基]氨基}_4_嘧啶基)_1， 1，2-胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(0. 578g，0. 94mmol)在Me0H(8mL)中的悬浮液中 加入4M HCl的1，4_ 二噁烷溶液(SmL)，并将生成的混合物在室温下搅拌过夜。真空除去 溶剂，并将粗的残余物用K2CO3水溶液处理，进行萃取后处理，得到2-氯-5-氟-6-{[2-甲 基-2-(4-吗啉基)丙基]氨基} _4 (IH)-嘧啶酮腙，为褐色油状物(0. 249g)。LCMS (M+H)+
157=319. 2。部分C [ (2R)-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲基-2-(4-吗啉基)丙基]氨基}_4_ 嘧啶 基)胼基]_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2R)-3_环戊基_2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸 (0. 238g，0. 78mmol)、2-氯-5-氟-6-{[2-甲基-2_(4_ 吗啉基)丙基]氨基}_4(1H)-嘧 啶酮腙(0. 249g)、NMM(0. 26mL，2. 35mmol)、H0At(0. 106g，0. 78mmol)、EDC(0. 150g， 0. 78mmol)和DMF(4mL)混合在一起，并将该溶液搅拌过夜。通过RP-HPLC纯化，得到 [(2R)-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲基_2-(4_吗啉基)丙基]氨基}_4_嘧啶基)胼 基]-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺，为褐色油状物(0. 169g)。 LCMS (M+H)+ = 606. 3。部分D [ (2R)-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲基-2-(4-吗啉基)丙基]氨基}_4_ 嘧啶 基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲基_2-(4_ 吗啉基)丙基]氨基}_4_ 嘧 啶基)胼基]_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 169g， 0. 28mmol)和Pd(OH) 2 (0. 017g)按照一般方法E，部分D中所述的方法进行处理，得到 [(2R)-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{[2-甲基_2-(4_吗啉基)丙基]氨基}_4_嘧啶基)胼 基]-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为白色固体(0.070g，49%)。LCMS (M+H)+ = 516. 3。实施例158N- [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ (反式 _2，4，5_ 三甲基 哌嗪基)_4_ 嘧啶基}
胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(D2，单一的未知非对映异构体) 部分A 反式-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐(对映异构体2)将反式-2，4，5_三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体2)(实施例155，部分 B) (400mg, 1. 52mmol)溶于30mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(80mg)，并 将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅 藻土过滤，并将Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。将IN HCl (3. 2mL)加入到得 到的滤液中，将其真空浓缩，得到反式-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐(对映异构体2) (370mg, 100% ) ο LCMS (M+H)+ 129. 1。部分B N- [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ (反式 _2，4，5_ 三甲基 哌嗪基)_4_ 嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(D2，单一的未知非对映异构体) 根据一般方法G，在部分A中使用反式-1，2，5_三甲基哌嗪盐酸盐(对映 异构体2)代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2. 2.1]庚烷二氢溴酸盐制备 N- [ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6-(反式-2，4，5-三甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 486. 1。实施例159[(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二甲基氨基)_3，3_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(D1，单一的未
知非对映异构体)部分A [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二甲基氨基)_3，3_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺向消旋的1-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N，4，4_四甲基_3_氨基吡咯 烷(7. 37g，24. 34mmol，根据实施例133的方法制备)的DMF(77mL)溶液中加入(2R)_3_环 戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(7.08g，23. 18mmol)、N-甲基 吗啉(12. 75mL, 116. Ommol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(3. 79g，27. 85mmol)和 EDC(5. 33g, 27.80mmol)。将溶液搅拌过夜，并然后用Et20(IOOmL)稀释，并用水(3xl00mL)洗涤。将合 并的水相用新制的Et2O(IOOmL)萃取，并将该有机相用干净的水(50mL)洗涤。将合并的有 机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物用EtOAc (200mL)稀释，并将生成的 溶液经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[4-( 二甲基 氨基)-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代 丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(12.52g，92%产率，非对映异构体的混合物)。LCMS (M+H)+590. 2。将该非对映异构体的混合物通过手性制备型超临界流体色谱法(Chiralcel OJ-H 21. 2x250mm, 15% MeOH(0. 5%异丙胺)85% C02，70mL/min，35°C，280nM 检测，每个循环注入 16mg)纯化并分离，得到纯的两个对映异构体。部分B [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二甲基氨基)_3，3_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺(D1，单一的未知非对映异构体)向第一次洗脱出来的[(2R) -3- (2- {2_氯_6_ [4_ ( 二甲基氨基)_3，3_ 二甲 基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基) 氧基]甲酰胺的对映异构体(3. 90g,6. 61mmol)的Me0H(66mL)溶液中加入20 % Pd (OH) 2/
159 ^ ^水力卯！^)。将混合物在气球压力下氢化30分钟，并然后通过0.2μ M膜过滤。将 该溶液真空浓缩，并将残余物通过Gilson RPLC纯化。将所需的级分合并，真空浓缩，并与 MeOH共沸。将残余物由EtOAc-己烷结晶，得到[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [4- (二甲基氨基)-3， 3- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯 基甲基)氧基]甲酰胺(1.6820g，51%产率，单一的对映异构体，相对构型未知)，为淡粉红 色固体。LCMS (M+H)+ 500. 3。实施例160[(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二甲基氨基)_3，3_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(D2，单一的未
知非对映异构体) 向第二次洗脱出来的[(2R) -3- (2- {2_氯_6_ [4_ ( 二甲基氨基)_3，3_ 二甲 基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基) 氧基]甲酰胺的对映异构体(3. Ig, 5. 25mmol，按照实施例159)的Me0H(50mL)溶液中加入 20% (1(0!1)2/((50%水，3101^)。将混合物在气球压力下氢化30分钟，并然后过滤。将该溶 液真空浓缩，并将残余物通过Gilson RPLC纯化。将所需的级分合并，真空浓缩，并与MeOH 共沸，随后与EtOAc共沸。将残余物由EtOAc-己烷结晶，得到[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [4- (二 甲基氨基)_3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧 代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(1.0294g，39%产率，单一的对映异构体，相对构型未 知)，为淡粉红色固体。LCMS (M+H)+ 500. 3。实施例161[(2R)-3-(2_{2-氯-6-[1-( 二 甲基氨基)_3_ 氮杂 二 环[3. 1. 0] 己-3-基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对
映异构体的混合物) 部分A 队^二甲基-3-(苯基甲基)-3-氮杂二环[3.1.0]己胺将消旋的3_(苯基甲基)-3_氮杂二环[3. 1. 0]己胺(Tetrahedron Lett. 2003，44，2485) (0. 5930g，3. 150mmol)的甲酸(6mL)和福尔马林(6mL)溶液于 100°C 加热，并搅拌2h。然后将该溶液冷却至室温，并用6N的NaOH水溶液调节至pH为14。将混合 物用Et20(2xl00mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(4% MeOH的DCM溶液，1 % Et3N)纯化，得到消旋的N，N- 二甲基-3-(苯 基甲基)-3-氮杂二环[3.1.0]己-1-胺(0. 5806g，85% )，为黄色油状物。LCMS :(M+H)+ 217. 2。部分B N，N- 二甲基-3-氮杂二环[3. 1. 0]己胺二盐酸盐向消旋的N，N_ 二甲基_3-(苯基甲基)-3_氮杂二环[3. 1.0]己胺(0. 5800g， 2. 681mmol)的 MeOH(13mL)溶液中加入 IN 的 HCl 水溶液(5. 4mL，5. 4mmol)禾口 10 % Pd/ C(50%水，120mg)。将混合物在气球压力下氢化过夜，并然后过滤。将该溶液真空浓缩，并 与Me0H(4x50mL)共沸，得到粗的消旋的N，N-二甲基-3-氮杂二环[3. 1.0]己胺二盐 酸盐(0. 5453g，> 100%粗产物的产率)，为淡黄色泡沫状物。LCMS _)+ 127. 2。部分C 2-{2_ 氯-6-[1-( 二甲基氨基)-3_ 氮杂二环[3. 1.0]己 _3_ 基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶 基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯向消旋的N，N- 二甲基-3-氮杂二环[3. 1. 0]己胺二盐酸盐(推测0. 5339g， 2. 681mmol)的DMF(13mL)溶液中加入2-(2，6- 二氯-5-氟-4-嘧啶基)_1，1,2-胼三甲酸 三(1，1-二甲基乙基)酉旨(1. 33g，2. 674mmol)和 N，N-二异丙基乙胺(1. 87mL, 10. 74mmol)。 将溶液搅拌过夜，并然后用Et2O(IOOmL)稀释。将混合物用水(2x50mL)洗涤，并将合并的水 相用新制的Et20(50mL)萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将 残余物通过梯度硅胶色谱法(0%至100% EtOAc的己烷溶液；Et3N)纯化，得到消旋的 2-{2-氯-6-[1-( 二甲基氨基)-3-氮杂二环[3. 1.0]己-3-基]-5-氟-4-嘧啶基}-1，1， 2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(1.3261g，84% )，为白色泡沫状物。LCMS:(M+H)+: 587. 3。部分D 3-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N-二甲基-3-氮杂二环[3. 1. 0]己胺向消旋的2-{2_氯-6-[1-( 二甲基氨基)_3_氮杂二环[3. 1.0] 己-3-基]-5-氟-4-嘧啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(1.3231g， 2. 254mmol)的Me0H(13mL)溶液中加入4N HCl的二噁烷溶液(13mL)。将该溶液搅拌3天，并 然后真空浓缩。将残余物在10% K2COvK溶液和DCM之间分配，并将水相用新制的DCM萃取。 将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到消旋的3-(2-氯-5-氟-6-胼 基-4-嘧啶基)-N，N-二甲基-3-氮杂二环[3. 1.0]己-1-胺(0. 3415g，53% )，为褐色固 体。LCMS :(M+H)+ 287. 1。部分E [(2R)-3-(2_{2-氯-6-[1-( 二 甲基氨基)_3_ 氮杂 二 环[3. 1. 0] 己-3-基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧 基]甲酰胺向消旋的3- (2-氯-5-氟-6-胼基_4_嘧啶基)-N，N- 二甲基_3_氮杂二环[3. 1. 0] 己-1-胺(0. 3374g,l. 177mmol)的 DMF(IOmL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基 [(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(0. 3257g，1. 067mmol)、N-甲基吗啉(0. 590mL， 5. 366mmol)、1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0. 174g, 1. 278mmol)和 EDC (0. 245g, 1. 278mmol)。
161将混合物搅拌过夜，并然后用Et2O(IOOmL)稀释。将混合物用水(2x50mL)洗涤，并将合并的 水相用新制的Et2O (50mL)萃取。将该有机相用干净的水(50mL)洗涤，并将合并的有机相经 无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物用DCM(200mL)稀释，并经无水Na2SO4干燥。 将混合物过滤，并真空浓缩，得到粗的[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [1- ( 二甲基氨基)-3-氮杂二 环[3.1.0]己-3-基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基 甲基)氧基]甲酰胺(0.6428g，> 100%粗产物的产率，非对映异构体的混合物)，为橙色油 状物。LCMS :_)+:574· 2。部分F [(2R)-3-(2_{2-氯-6-[1-( 二 甲基氨基)_3_ 氮杂 二 环[3. 1. 0] 己-3-基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R)-3-(2_{2-氯-6-[1-(二 甲基氨基)_3_ 氮杂二环[3.1.0] 己-3-基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧 基]甲酰胺(推测 0. 6123g，1.067mmol)的 MeOH(IOmL)溶液中加入 20 % Pd (OH) 2/C (50 % 水，61mg)。将混合物氢化6. 5h，并然后过滤。将滤液真空浓缩，并通过GilsonRPLC纯化，得 到[(2 -3-(2-{2-氯-6-[1-(二甲基氨基)-3-氮杂二环[3. 1.0]己 _3_ 基]-5-氟-4-嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 2537g，49%产率，2步，非对 映异构体的混合物)，为淡粉红色固体。LCMS (M+H)+ 484. 2。实施例162N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ {2_ [5_ 氟 _2_ 甲基 _6_ (反式 _2，4，5_ 三甲基 哌
嗪基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体) 根据一般方法A，使用反式-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐(对映异构体2)(实 施例158)代替部分A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备N-[(2R)-2-(环戊基甲 基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6-(反式-2，4，5-三甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧 代丙基]-N-羟基甲酰胺(单一的未知非对映异构体)。LCMS (M+H)+:466. 2。实施例163[ (2R) -3- {2- [2-氯_6_ (环戊基氨基)_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用环戊胺代替异丙胺制备 [(2R) -3- {2- [2-氯-6-(环戊基氨基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲基)-3-氧 代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 443. 2/445. 4。[1914]实施例164[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [3-甲基 _3_ (4_ 吗啉基)氮杂环丁烷基]_4_ 嘧
啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺. 部分A 4-[1_( 二苯基甲基)-3_甲基-3-氮杂环丁烷基]吗啉根据报导的方法(J. Med. Chem. ,1993,36,801-810)制备甲磺酸1_( 二苯基 甲基)-3_甲基氮杂环丁烷-3-基酯。将该化合物(1.50g，4. 53mmol)和吗啉(3. 90g， 45. 3mmol)在异丙醇(20ml)中的混合物于70°C加热过夜。冷却至室温后，将混合物真空浓 缩至干。加入水(IOOmL)，并将混合物用二氯甲烷(2xl00mL)萃取。将合并的有机溶液用盐 水(60mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。将残余物通过RP-HPLC纯化，得到4-[1_( 二苯基甲 基)-3_ 甲基-3-氮杂环丁烷基]吗啉(1.05g，71.9% )。LCMS :(M+H)+323. 3。部分B 4-(3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吗啉二盐酸盐将4-[1_( 二苯基甲基)-3_甲基-3-氮杂环丁烷基]吗啉(1. 05g，3. 26mmol)、 10% Pd(OH)2 (0. 12g)在乙醇(30ml)和IN HCl (7ml)中的混合物于60psi用H2处理过夜。 过滤除去催化剂，并将溶剂真空蒸发。将残余物用苯(3x5ml)洗涤，并在高真空下干燥，得 到4-(3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吗啉二盐酸盐(0. 52g，74. 9% )0 LCMS _)+156· 9。部分C [ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [3-甲基 _3_ (4_ 吗啉基)氮杂环丁烷基]_4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法D，使用4-(3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吗啉二盐酸盐代替部分A中 的N-甲基哌嗪制备[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [3-甲基-3- (4-吗啉基)-1-氮杂环丁烷 基]-4-嘧啶基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(Μ+Η)+514.4。实施例165[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟_2_甲基_6_ [3- (4-吡啶基)吡咯烷
基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 按照类似于实施例182的方法，在部分A中使用4_(3_吡咯烷基)吡啶 代替1-(3_甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐制备[(2R)-2-(环戊基甲
163基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [3- (4-吡啶基)-1-吡咯烷基]~4~嘧啶基}胼基)-3-氧代 丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+486. 2。实施例166[(2R)-3-(2-{2-氯-6_[3_( 二甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(D1，单一的未
知非对映异构体) 部分A 2，2- 二甲基-1-(苯基甲基)-3_氨基吡咯烷根据实施例152中所述的方法制备消旋的2，2_二甲基-1-(苯基甲基)-3_氨基吡 咯烧。通过制备型 LC (Chiralpak AD 20 μ 100x250mm 柱，75 25 0. 1 MeCN-MeOH-iPrNH2, 400mL/min, 254nm检测)分离对映异构体，得到2，2- 二甲基-1-(苯基甲基)-3-氨基吡咯 烷的(+)_和(-)_对映异构体。部分B [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[3_( 二甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺.根据实施例152的方法，使用2，2_ 二甲基-1-(苯基甲基)_3_氨基吡咯烷的 (+)“对映异构体制备[(2R) -3- (2- {2-氯-6-[3- ( 二甲基氨基)-2，2- 二甲基-1-吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺，为单一的非 对映异构体，其相对构型未知。LCMS (M+H)+ 500. 3。实施例167[(2R)-3-(2-{2-氯-6_[3_( 二甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(D2，单一的未 知非对映异构体)根据实施例152的方法，使用实施例166的方法制备的2，2_ 二甲基_1_(苯基甲 基)-3_氨基吡咯烷的(-)_对映异构体来制备[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[3-(二甲基氨基)-2， 2- 二甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基 甲酰胺，为单一的非对映异构体，其相对构型未知。LCMS (M+H)+ 500. 3。实施例168[ (2R) -3- {2- [2_氯_6_ (环丁基氨基)_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲
基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 2-[2_氯_6-(环丁基氨基)-5_氟-4-嘧啶基]-1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基 乙基)酯在室温下，向2-(2，6- 二氯-5-氟_4_嘧啶基)_1，1,2-胼三甲酸三(1，二甲基 乙基)酯(0. 497g，1. Ommol)的 DMF(5mL)溶液中加入二异丙基乙胺(0. 19mL, 1. IOmmol)， 随后立即加入市售可得的环丁基胺(0. 085mL，1. Ommol)。将该反应搅拌4天，然后加入乙 醚，并将混合物用水洗涤，并将水层反萃取。将合并的有机物干燥(Na2SO4),真空浓缩，并与 MeOH共沸一次，得到2-[2-氯_6_ (环丁基氨基)-5-氟-4-嘧啶基]_1，1,2-胼三甲酸三 (1，1-二甲基乙基)酯，为白色固体。部分B 2-氯-6-(环丁基氨基)-5-氟-4 (IH)-嘧啶酮腙向2-[2_氯_6-(环丁基氨基)-5_氟-4-嘧啶基]-1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二 甲基乙基)酯(0. 495g，0. 96mmol)的MeOH(IOmL)溶液中加入4M HCl的1，4_ 二噁烷溶液 (IOmL)。将该反应在室温下搅拌过夜，然后将溶剂蒸发，并将残余物用标准的K2CO3水溶液 后处理方法处理，得到2-氯-6-(环丁基氨基)-5-氟-4 (IH)-嘧啶酮腙，为赤褐色油状物 (0. 225g)。LCMS (M+H)+ = 232. 0。部分C [ (2R) -3- {2- [2_氯_6_ (环丁基氨基)_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺向搅拌下的(2R)-3_环戊基_2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基) 丙酸(0. 282g，0. 92mmol)、2-氯-6-(环丁 基氨基)-5-氟-4 (IH)-嘧啶酮腙(0. 225g)、 HOAt (0. 132g，0. 97mmol)和 ΝΜΜ(0· 53mL，4. 85mmol)的 DMF(5mL)溶液中加入 EDC(0. 186g, 0. 97mmol)，并将该反应搅拌过夜。将混合物用乙醚稀释，用水洗涤，并将水层用乙醚反 萃取。将有机物干燥(Na2SO4),并真空浓缩。将生成的残余物通过RP-HPLC纯化，得到 [(2R) -3- {2- [2-氯-6-(环丁基氨基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)_3_氧 代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺，为褐色油状物(0.055g)。LCMS (M+H)+= 519. 2。部分D [ (2R) -3- {2- [2_氯_6_ (环丁基氨基)_5_氟_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺在室温下，将[(2R)-3-{2_[2-氯_6-(环丁基氨基)-5_氟-4-嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0. 055g, 0. 106mmol)溶 于Me0H(5mL)中。加入Pd(OH)2 (0. 006g)，并将内容物在氢气球下搅拌4小时。将内容物过 滤以除去催化剂，并将滤液真空浓缩。将上述步骤再重复3次。使用两次Pd (OH) 2 (0. OlOg)，并且第三次使用Pd (OH) 2 (0. 015g)，并将该反应搅拌5. 5小时。将内容物过滤以除去催化剂， 并将滤液真空浓缩。将生成的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到[(2 -3-{2-[2-氯-6-(环 丁基氨基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺，为黄 褐色固体(0. 005g, 11% ) ο LCMS (M+H)+ = 428. 9。实施例169[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(9aR)_ 六氢卩比嗪并[2，l_c] [1，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺部分A (3S)-5_氧代-4-(苯基甲基)-3-吗啉甲酸向0°C下的N-苄基丝氨酸(19. 15g, 105. 7mmol)在2N NaOH水溶液(IOOmL)中的 溶液中滴加氯乙酰氯(10. 2mL, 126. 4mmol)，并将该溶液搅拌45分钟。向该混合物中滴加 30%的NaOH水溶液(40mL)，并将该反应搅拌lh，并然后搅拌，并温热至室温保持72h。将 该反应调节至PH 1，并用三批EtOAc萃取。将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真 空浓缩。将残余物用EtOAc/己烷洗涤，得到(3S)-5-氧代-4-(苯基甲基)-3_吗啉甲酸 (4.618，19%产率).部分B (3S)-5-氧代-N，4-双(苯基甲基)_3_吗啉甲酰胺向(3S)-5-氧代-4-(苯基甲基)-3-吗啉甲酸(4. 611g，19. 60mmol)的 DCM(65mL) 溶液中加入苄基胺(2. 6mL，23. 80mmol)、N-甲基吗啉(llmL，100. Ommol)、1-羟基-7-氮 杂苯并三唑(3. 20g,23. 51mmol)和EDC (4. 51g，23. 53mmol)。将溶液搅拌过夜，并然后用 DCM(IOOmL)稀释。将该溶液用6N的HCl水溶液(2xl00mL)洗涤，并将有机相经无水MgSO4 干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的(3S)-5-氧代-N，4-双(苯基甲基)-3_吗啉甲酰胺 (6. 454g，> 100%粗产物的产率)，为淡黄色泡沫状物质。LCMS _)+ 325. 2。部分C 1-苯基4-{[(31 )-4-(苯基甲基)-3-吗啉基]甲基}甲胺向(3S)-5-氧代-N，4-双(苯基甲基)_3_吗啉甲酰胺(6. 3109g，19. 45mmol)的 1，2-二甲氧基乙烷(IOOmL)溶液中加入LiAlH4(2.6g，68.51mmol)。将混合物于100°C加 热，并搅拌6h，并然后冷却至60°C，并搅拌过夜。将混合物冷却至0°C，并通过缓慢地加入 IN的NaOH水溶液(IOOmL)来终止。将混合物用Et2O (2xl50mL)萃取，并将合并的有机相经 无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过梯度硅胶色谱法(1 %至5% MeOH的DCM 溶液)纯化，得到1-苯基-N-{[(3R)-4-(苯基甲基)-3-吗啉基]甲基}甲胺(3. 8342g, 66% )，为淡黄色油状物。LCMS (M+H)+ 297. 1。部分D [1971]((苯基甲基){[(3R)-4_(苯基甲基)-3_吗啉基]甲基}氨基)氧代乙酸甲酯向1-苯基-N-{[(3R)-4_(苯基甲基)_3_吗啉基]甲基}甲胺(3. 3777g， 11. 40mmol)的THF(114mL)溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(3mL，17. 22mmol)。通过注射 器向该混合物中滴加氯代(氧代)乙酸甲酯(1. 15mL，12.50mmol)，并将混合物搅拌3h。真 空除去溶剂，并将残余物溶于EtOAc (200mL)中，并用饱和的NaHCO3水溶液，随后用水洗涤。 将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的((苯基甲基){[(3R)-4-(苯基甲 基)-3_吗啉基]甲基}氨基)氧代乙酸甲酯(4.6881g，> 100%粗产物的产率)，为黄色油 状物。LCMS :(M+H)+ 383. 1。部分E (9aR)-8_(苯基甲基)六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪_6，7_ 二酮向粗的((苯基甲基){[(3幻-4-(苯基甲基)-3-吗啉基]甲基}氨基)氧代乙酸甲 酯(推测 4. 3583g，11.40mmol) ^MeOH(IHmL)溶液中加入 10% Pd/C(50%水，870mg)。将混 合物在气球压力下氢化16h，并然后通过0. 2 μ m膜过滤。将该溶液真空浓缩，并将残余物用 20% EtOAc-己烷研磨。将生成的固体通过真空过滤收集，并用己烷洗涤，得到(9aR) -8-(苯 基甲基)六氢吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪-6，7-二酮(2. 5610g，86%，2步)，为淡黄色固体。 LCMS (M+H)+261. 1。部分F (9aR)-8_(苯基甲基)八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪向0°C下的(9aR)-8_(苯基甲基)六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪_6，7_ 二酮 (2. 5610g，9. 84mmol)的 THF(IOOmL)溶液中分批加入 LiAlH4(1. 12g，29. 51mmol)。将混合 物于70°C加热，并搅拌1周。然后将混合物冷却至0°C，并通过加入Na2SO4* 10H20(2g)，随 后加入IN的NaOH水溶液(IOOmL)终止。将混合物用Et2O (2xl50mL)萃取，并将合并的有 机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶于DCM (200mL)中，经无水Na2SO4干 燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过梯度硅胶色谱法(0%至100% EtOAc的己烷溶液； Et3N)纯化，得到(9aR)-8-(苯基甲基)八氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪(1. 8147g, 79% ), 为无色油状物。LCMS (M+H)+ 233. 1。部分G (9aR)_八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪二盐酸盐向(9aR)-8_(苯基甲基)八氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪(1.8055g,7.77mmol)的 MeOH(80mL)溶液中加入 IN 的 HCl 水溶液(15. 5mL, 15. 5mmol)和 10% Pd/C(50%水，360mg)。 将混合物在气球压力下氢化过夜，并然后通过0. 2 μ mPTFE膜过滤。将该溶液真空浓缩，并 将残余物与Me0H(3x50mL)共沸，得到粗的(9aR)_八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪二盐酸盐 (1.7185g，> 100%粗产物的产率)，为橙色固体。LCMS :(Μ+Η)+:142. 9。部分H 2-{2-氯-5-氟-6-[(9aR)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪 _8 (IH)-基]_4_ 嘧啶 基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯向粗的(9aR)_八氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪二盐酸盐(1.7185g,7. 99mmol)的 DMF(40mL)溶液中加入2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲 基乙基)酯(3. 97g，7. 98mmol)和N，N- 二异丙基乙胺(4. 60mL, 26. 41mmol)。将溶液搅拌过夜，并然后用Et20(200mL)稀释。将混合物用水(2x IOOmL)洗涤，并将合并的水相用新 制的Et2O(IOOmL)萃取。将合并的有机相用干净的水(50mL)洗涤，并然后经无水Na2SO4干 燥。将混合物过滤，真空浓缩，并将残余物溶于DCM(200mL)中，并经无水Na2SO4干燥。将 混合物过滤，并将该溶液真空浓缩。将残余物通过梯度硅胶色谱法(0%至100% EtOAc的 己烷溶液；Et3N)纯化，得到2-{2-氯-5-氟-6-[(9aR)_六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}-1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(4. 34g，90%)，为 白色泡沫状物质。LCMS (M+H)+ 603. 3。部分I (9aR)-8-(2-氯_5_氟_6_胼基_4_嘧啶基)八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪向2-{2-氯-5-氟-6-[(9aR)_ 六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪 _8 (IH)-基]_4_ 嘧 啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(4. 34g，7. 20mmol)的Me0H(18mL)溶 液中加入4N HCl的二噁烷溶液(18mL，72mm0l)。将该溶液搅拌3天，并然后真空浓缩。 将残余物溶于水(50mL)中，并将该溶液用20%的K2CO3水溶液调节至pH为10。将混合 物用DCM(2xl00mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到 (9aR)-8-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪(1.41g,65%), 为橙色固体。LCMS (M+H)+ 303. 1。部分J [(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(9aR)_ 六氢卩比嗪并[2，l_c] [1，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基] 甲酰胺向(9aR)-8-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)八氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁嗪 (1.41g，4. 66mmol)的DMF(45mL)溶液中加入(2幻-3-环戊基-2_({甲酰基[(苯基甲基)氧 基]氨基}甲基)丙酸(1.36g，4. 45mmol)、N-甲基吗啉(2. 45mL，22. 3mmol)、1-羟基-7-氮 杂苯并三唑(0. 730g,5. 364mmol)和EDC (1. 02g，5. 32mmol)。将溶液搅拌过夜，并然后用 Et20(200mL)稀释。将混合物用水(2x IOOmL)洗涤，并将合并的水相用新制的Et2O(IOOmL) 萃取。将该Et2O层用干净的水(50mL)洗涤，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤， 并真空浓缩。将残余物溶于DCM(200mL)中，经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余 物与 Me0H(50mL)共沸，得到[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟 _6_[ (9aR)-六氢吡嗪并[2，l_c][l， 4]噁嗪-8(1H)_基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧 基]甲酰胺(2.4027g，91%粗产物的产率)，为红色/橙色油状物。LCMS:(M+H)+:590.2。部分K [(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(9aR)_ 六氢卩比嗪并[2，l_c] [1，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(9aR)_六氢卩比嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基] 甲酰胺(2. 3947g,4. 058mmol)的 Me0H(40mL)溶液中加入 20% Pd (OH) 2/C (50%水，240mg)。 将混合物在气球压力下氢化2. 5h，并然后通过0. 2 μ m膜过滤。将该溶液真空浓缩，并将残 余物通过Gilson RPLC(10% MeCN的水溶液至65% MeCN的水溶液；8分钟梯度)纯化。将 所需的级分合并，并将MeCN真空除去。将生成的混合物用EtOAc (2xl50mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。然后将残余物由EtOAc-己烷结晶，得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (9aR)-六氢吡嗪并[2，1-c] [1,4]噁嗪 _8 (IH)-基]-4-嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(1.2759g，63%)，为淡粉红色 固体。LCMS (M+H)+500. 1。实施例170[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (3S) _4_ 甲基 _3_ (1_ 甲基乙基)哌嗪基]_4_ 嘧
啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 (2S)-1-甲基-2-(l-甲基乙基)哌嗪二盐酸盐a)在室温下，将市售可得的(S)-M-苄基-2-异丙基哌嗪(2. 0g，9. 2mmol)、 三乙酰氧基硼氢化钠(2. 9g，13. 8mmol)和甲醛(37 %的H2O溶液，1. 12mL，13. 8mmol)在 CH2Cl2 (40mL)中溶解并搅拌lh。随后，将反应混合物用另外的CH2Cl2稀释，并用IN NaOH(2x) 和盐水(Ix)洗涤。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4),并真空浓缩，得到(2S)-1-甲 基-2- (1-甲基乙基)-4-(苯基甲基)哌嗪(2. 14g)，为无色油状物。b)将(2S)-1-甲基-2-(l-甲基乙基)-4_(苯基甲基)哌嗪(2. 14g的粗产物，推 测9. 2mmol)溶于20mL的MeOH中。加入5% Pd/C(500mg)，并将内容物彻底地除气，并置于 氢气球下。将生成的反应混合物搅拌过夜，并然后将内容物除气，并过滤。将4N HCl的二 噁烷溶液(4. 6mL)加入到滤液中，并将滤液真空浓缩，得到(2S)-1-甲基_2_(1_甲基乙基) 哌嗪二盐酸盐。[ (2R) -3- (2- {2-氯 _5_ 氟 _6_ [ (3S) _4_ 甲基 _3_ (1_ 甲基乙基)哌嗪基]_4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法D，在部分A中使用(2S)-1-甲基-2-(l-甲基乙基)哌嗪二盐酸盐 代替N-甲基哌嗪，并使用2当量的DIPEA制备[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(3幻-4-甲 基-3- (1-甲基乙基)-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟 基甲酰胺。LCMS (Μ+Η)+ 500. 3。实施例171[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (2S) _4_ 甲基 _2_ (1_ 甲基乙基)哌嗪基]_4_ 嘧
啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 (3S)-1-甲基-3-(l-甲基乙基)哌嗪二盐酸盐[2006]a)在室温下，将市售可得的(S) -N-l-Boc-2-异丙基哌嗪(2. Og, 8. 76mmol)、 三乙酰氧基硼氢化钠(2. 76g，13mmol)和甲醛(37 %的H2O溶液，1. 06mL, 13mmol)在 CH2Cl2 (40mL)中溶解并搅拌过夜。随后，将反应混合物用另外的CH2Cl2稀释，并用IN NaOH 和盐水洗涤。将合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)，并真空浓缩，得到(2S)-4-甲基_2_(1_甲 基乙基)-1_哌嗪甲酸1，1- 二甲基乙基酯(2. 18g)，为无色油状物。b)将(25)-4-甲基-2-(1-甲基乙基)-1-哌嗪甲酸1，1-二甲基乙基酯(2. 18g的 粗产物，推测8. 76mmol)溶于MeOH (5mL)、CH2Cl2 (5mL)和4N HCl的二噁烷(8mL)溶液的混 合物中。在室温下搅拌过夜后，加入另外的8mL的4NHC1的二噁烷溶液和8mL的MeOH，使 形成的白色沉淀溶解并促使该反应完成。真空蒸发溶剂，得到(3S)-1-甲基-3-(l-甲基乙 基)哌嗪二盐酸盐(1.97g)，为白色固体。[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (2S) _4_ 甲基 _2_ (1_ 甲基乙基)哌嗪基]_4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法D，在部分A中使用((3S)-1-甲基-3-(l-甲基乙基)哌嗪二盐酸盐 代替N-甲基哌嗪，并使用2当量的DIPEA制备[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(2幻-4-甲 基-2- (1-甲基乙基)-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟 基甲酰胺。LCMS (Μ+Η)+ 500. 3。实施例172[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2. 5]辛 _7_ 基)_4_ 嘧啶
基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 1-氨基环丙烷甲酸甲酯将1-氨基环丙烷甲酸(13. Ig, 129. 57mmol)溶于Me0H(200mL)中，并将生成的混 合物于0°C冷却30分钟。然后加入亚硫酰氯(11. 84mL, 161. 97mmol)，并将混合物于80°C 加热4h。将混合物冷却至室温过夜。将挥发物真空浓缩，并将残余物溶于Et2O(200mL)中， 并剧烈搅拌30分钟。通过过滤收集生成的白色固体沉淀，得到1-氨基环丙烷甲酸甲酯 (15. 83g，80% )。LCMS (Μ+Η)+:116· 1。部分B 1_({[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)环丙烷甲酸甲酯将1-氨基环丙烷甲酸甲酯(15. 83g，104. 43mmol)溶于CH2Cl2 (150mL)禾口水 (150mL)的混合物中。向该混合物中加入NaHCO3 (35. 09g，417. 72mmol)，随后加入氯甲酸苄 基酯(15. 43mL, 109. 64mmol)。将混合物剧烈搅拌2小时，分离两层后，将水层用IOOmL的 CH2Cl2萃取。将合并的有机层经MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到1-({[(苯基甲基)氧 基]羰基}氨基)环丙烷甲酸甲酯(12. 0g,46% )0 LCMS (Μ+Η)+206. 1。[2019]部分C 1-(甲基{[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)环丙烷甲酸甲酯将氢化钠(995mg，41. 466mmol)溶于DMF(50mL)中，并于0°C冷却30分钟。然后用 10分钟的时间，缓慢地加入1-({[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)环丙烷甲酸甲酯(6. 46g， 25. 916mmol)在DMF(25mL)中的混合物。将生成的混合物搅拌45min，并然后加入碘甲烷 (4.84mL，77. 74mmol)，并将该反应温热至室温过夜。然后将混合物小心地用水(IOmL)稀 释，并将水层用Et20(5x50mL)萃取。将有机萃取物用水(5x 50mL)洗涤，然后经Na2SO4干燥， 并真空浓缩。将粗的残余物通过Combiflash纯化，使用0% -50Et0Ac/Hex梯度洗脱，得到 1-(甲基{[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)环丙烷甲酸甲酯(16.9g，> 100%)。LCMS (M+H)+264. 1。部分D 1-(甲氨基)环丙烷甲酸甲酯将1-(甲基{[(苯基甲基)氧基]羰基}氨基)环丙烷甲酸甲酯(推测6.8g， 25. 91mmol，100%理论收率)溶于30mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/ C(2.04g)，并将内容物彻底地除气，并置于氢气球下过夜。然后将内容物除气，并通过 Celite硅藻土过滤除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的1_(甲氨基)环丙 烷甲酸甲酯(1.538，45%，经两步)。LCMS :_)+ 130. 1。部分E 1-[甲基(N_{[(苯基甲基)氧基]羰基}甘氨酰)氨基]环丙烷甲酸甲酯向 1-(甲氨基)环丙烷甲酸甲酉旨(1. 53g, 11. 85mmol)和 H0Bt(l. 920g, 14. 21mmol) 的CH2Cl2 (30mL)溶液中加入4-甲基吗啉(5. 2mL，47. 40mmol)、N-{[(苯基甲基)氧基]羰 基}甘氨酸(2. 48g,11.85mmol)和EDCI (2. 73g，14. 21mmol)。搅拌过夜后，将该溶液用6N 的HCl水溶液(IOOmL)和水(IOOmL)洗涤。将水层用CH2Cl2(IxIOOmL)萃取，并将合并的 有机层用水(IOOmL)和盐水(IOOmL)洗涤，然后经无水MgSO4干燥，并真空浓缩，得到纯的 1-[甲基(N-{[(苯基甲基)氧基]羰基}甘氨酰)氨基]环丙烷甲酸甲酯(3. 66g,97%)0 LCMS _)+ 321. 1。部分F 4-甲基-4，7- 二氮杂螺[2. 5]辛烷 _5，8- 二酮将1-[甲基(N_{[(苯基甲基)氧基]羰基}甘氨酰)氨基]环丙烷甲酸甲酯 (3. 66g，11. 42mmol)溶于50mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(2. 04g)，并 将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过Ce 1 ite硅藻土过 滤除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩。将残余物溶于MeOH(IOOmL)中，并在搅拌下 于60°C加热4h。真空除去溶剂，得到纯的4-甲基_4，7-二氮杂螺[2.5]辛烷_5，8_ 二酮 (1.76g，99%)。LCMS (M+H)+ 155. 1。部分G 4-甲基-7-(苯基甲基)-4，7-二氮杂螺[2.5]辛烷_5，8_ 二酮将氢化钠(302mg, 12. 62mmol)溶于DMF(IOmL)中，并于0°C冷却30分钟。然后 用10分钟的时间，缓慢地加入4-甲基-4，7-二氮杂螺[2. 5]辛烷-5，8-二酮(1. 769g， 11.47mmol)在DMF(5mL)中的混合物。将该混合物搅拌45min，并然后加入苄基溴(4. 08mL，34.41mmol)，并将该反应再搅拌45分钟。将混合物小心地用水(IOmL)稀释，并真空浓缩。 将生成的粗产物通过反相HPLC纯化，得到4-甲基_7-(苯基甲基)-4，7_ 二氮杂螺[2. 5] 辛烧-5，8-二酮(1. 535g,54% )。LCMS (M+H)+245. 1。部分H 4-甲基-7-(苯基甲基)-4，7-二氮杂螺[2.5]辛烷将4-甲基_7-(苯基甲基)-4，7_ 二氮杂螺[2.5]辛烷_5，8_ 二酮(1. 535g， 6. 284mmol)溶于THF(IOOmL)中，并将混合物冷却至0°C。用10分钟的时间分批加入甲硼 烷-THF络合物(25. 13mL, 25. 13mmol)。将混合物于60°C加热4h，并然后通过LCMS检测。 如果剩余的原料大于15%，缓慢地加入另一批甲硼烷-THF络合物(12. 56mL, 12. 56mmol)， 并将该反应再搅拌45分钟。当通过LCMS确定该反应完成时，将反应混合物冷却至室温。加 入IN HCl (25mL)，并将混合物于80°C加热1小时。然后将反应混合物冷却至室温，并加入 6N的NaOH水溶液以调节pH至14。将混合物用CH2Cl2 (3x50mL)萃取。将合并的有机层经 Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将生成的粗产物通过反相HPLC纯化，得到4-甲基_7_(苯 基甲基)-4，7_ 二氮杂螺[2.5]辛烷(1.43g,94% )0 LCMS _) + :217· 2。部分I 4-甲基-4-氮杂-7-氮鐺杂螺[2. 5]辛烷二盐酸盐将4-甲基-7-(苯基甲基)-4，7-二氮杂螺[2. 5]辛烷(1. 43g，6. 624mmol)溶于 IOmL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入Pd(OH)2(HOmg)，并将内容物在50psi下氢化 4h。然后将内容物过滤以除去催化剂，将IN HCl (14. 57mL, 14. 57mmol)加入到滤液中，并将 滤液真空浓缩，得到纯的4-甲基-4-氮杂-7-氮鐺杂螺[2. 5]辛烷二盐酸盐(0. Sg, 60% )。 LCMS _)+ :127· 2。部分J [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2. 5]辛 _7_ 基)_4_ 嘧啶 基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用4-甲基-4-氮杂_7_氮鐺杂螺[2. 5]辛烷二盐 酸盐代替异丙胺，并使用3. 5当量的DIEA制备[(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (4-甲基-4， 7-二氮杂螺[2. 5]辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲 酰胺。LCMS :(M+H)+:484. 2。实施例173N-[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_[ (2R，3S) _2，3，4_ 三甲基 哌嗪基]~4~ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺部分A (2S，3R)-1，2，3_三甲基哌嗪盐酸盐将(2R，3S) -2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(实施例175) (770mg,
2. 94mmol)溶于40mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(125mg)，并将内容物 彻底地除气，并在氢气球下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过 滤，并将Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入6. 2mL IN HCl后，将生成的 滤液真空浓缩，得到(2S，3R)-1，2，3-三甲基哌嗪的二盐酸盐。LCMS :_)+ 129. 1。部分B N-[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_[ (2R，3S) _2，3，4_ 三甲基-1-哌嗪基]~4~ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法G，在部分A中使用(2S，3R)-1，2，3-三甲基哌嗪二盐 酸盐代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备 N-[ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6-[ (2R，3S) -2，3，4-三甲基-1-哌嗪基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+:486. 1。实施例174[(2R)-3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[(8aR)-六氢吡咯并[l，2_a]吡 嗪-2 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法D，使用(8aR)_八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪(J. Med. Chem. 1993， 36,2311-20)(以二-HCl盐使用)代替部分A中的N-甲基哌嗪，并在部分A中使用 3 当量的 DIPEA 制备[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6_[(8aR)-六氢吡咯并[l，2_a]吡 嗪-2(1H)_基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 484. 2。实施例175N-[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_[ (2S，3R) _2，3，4_ 三甲基 哌嗪基]~4~ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺部分A 顺式-2，3_ 二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物)向IOOmL三-颈圆底烧瓶中装入顺式_2，3- 二甲基哌嗪(Helvetica ChimicaActa, 1994，77，1057-64) (1. 781g，15. 6mmol)。将烧瓶在冰浴中冷却，并缓慢地加 入甲磺酸(2. 02mL, 31. 2mmol)的1. 4mL水溶液，同时保持温度低于40°C。将该溶液冷却至 20°C，并加入2mL乙醇。用60%乙酸钾水溶液将pH调节至4，并然后同时滴加氯甲酸苄基 酯(2. 08mL, 14. 8mmol在ImL的THF中)和乙酸钾溶液来调节比例以保持反应溶液的pH为 4，同时冷却使温度保持在25°C下。将混合物再搅拌1小时后，除去有机溶剂，并将剩余的 水溶液用乙酸乙酯洗涤。将乙酸乙酯洗涤液用IM HCl萃取两次以回收所需的产物。将所 述酸的萃取液与最初的水溶液合并，并通过加入6N NaOH将pH调节至11，同时冷却使温度 保持在40°C下。将水溶液用乙酸乙酯萃取，并将合并的萃取物经硫酸镁干燥，并真空浓缩， 得到顺式_2，3- 二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物)，为黄色的油状物 (1.77g，46%)。LCMS (M+H)+249. 1。部分B (2S，3R)-2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯和(2R，3S) _2，3，4_三甲基哌 嗪甲酸苯甲基酯在0°C下，向顺式-2，5-二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合 物)(1. 77g，7. Immo 1)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入甲醛(0. 803mL, 37 %的水溶液， 10. 7mmol)，随后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1. 964g，9. 2mmol)。将反应混合物温热至室 温，并搅拌2h，随后用二氯甲烷稀释，并用IN NaOH溶液洗涤。将有机物用盐水洗涤，干 燥(MgSO4)并蒸发，得到顺式-2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合 物)(1.72g，92% )。通过手性色谱法分离(2S，3R)-2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基 酯(950mg)和(2R，3S)-2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(770mg)。绝对构型使用Ab Initio振动圆二色光谱确定。LCMS _)+ 263. 3。部分C (2R，3S)-1，2，3_三甲基哌嗪二盐酸盐将(2S，3R)-2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(950mg，3. 62mmol)溶于60mL的 MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(160mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球 下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填 料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入7. 6mL IN HCl后，将生成的滤液真空浓缩，得到(2R， 3S)-1，2，3-三甲基哌嗪二盐酸盐(740mg)。LCMS (M+H) + 129. 1。部分D N-[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_[ (2S，3R) _2，3，4_ 三甲基 哌嗪基]~4~ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法G，在部分A中使用(2R，3S)-1，2，3_三甲基哌嗪二盐 酸盐代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备 N- [ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2S，3R) -2，3，4-三甲基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+:486. 1。实施例176[ (2R) -3- (2- {2-氯 _5_ 氟 _6_ [3-甲基 _3_ (1_ 吡咯烷基)氮杂环丁烷
基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分 A [2075]1-[1_( 二苯基甲基)-3_甲基-3-氮杂环丁烷基]吡咯烷将甲磺酸1-( 二苯基甲基)-3_甲基氮杂环丁烷-3-基酯(1.55g，4.68mm0l) (J.Med· Chem. 1993，36，801-810)和吡咯烧(3. 86ml, 46. 68mmol)在异丙醇(15ml)中的混 合物于70°C加热过夜。冷却至室温后，将混合物真空浓缩至干。加入水(100ml)，并将混合 物用二氯甲烷(2xl00mL)萃取。将合并的有机溶液用盐水(60ml)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓 缩。将残余物通过RP-HPLC纯化，得到1-[1-( 二苯基甲基)-3_甲基-3-氮杂环丁烷基] 吡咯烧(0. 94g,65% )。LCMS (M+H)+ 307. 2。部分R 1-(3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐将1-[1_( 二苯基甲基)-3_甲基-3-氮杂环丁烷基]吡咯烷(0.94g，3.07mmol) 和20% Pd (OH) 2(0. Ilg)在乙醇(30ml)和IN HCl (7ml)中的混合物于60psi下用H2处理 过夜。过滤除去催化剂，并将滤液真空蒸发。将残余物用苯(3x5ml)洗涤，并在高真空下 干燥，得到1-(3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐(0. 76g，推测86%纯)。LCMS (M+H)+ 141. 0。部分C 2- {2-氯-5-氟-6-[3_甲基_3_ (1_吡咯烷基)氮杂环丁烷基]_4_嘧啶基} _1， 1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯在0°C下，向搅拌下的1-(3_甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐(0. 128g， 86 % 纯，0. 52mmol)的 DMF (8mL)溶液中加入 DIPEA (0. 34mL, 1. 94mmol)，随后立即加入 2-(2，6_ 二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0.24， 0.49mmol)。将该反应温热至室温，并搅拌过夜。将混合物通过RP-HPLC纯化，得到 2- {2-氯-5-氟-6- [3-甲基-3- (1-吡咯烷基)-1-氮杂环丁烷基]_4_嘧啶基} -1，1，2-胼 三甲酸三(1,1-二甲基乙基)酯(0. 225g,77% ) ο LCMS :(Μ+Η)+:601· 2。部分D 2-氯-5-氟-4-胼基-6-[3-甲基_3-(1_吡咯烷基)_1_氮杂环丁烷基]嘧啶将2-{2-氯-5-氟-6-[3-甲基_3-(1_吡咯烷基)_1_氮杂环丁烷基]_4_嘧啶 基}-1，1，2_ 胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 225g，0. 37mmol)在 Me0H(6mL)和 4. OM HCl的二噁烷溶液(4mL)中的溶液在室温下搅拌3天。然后将溶剂真空除去，得到粗的 2_氯-5-氟-6-胼基-N- (1 -甲基乙基)-4-嘧啶胺，推测为三-HCl盐。LCMS (M+H) + 301. 0。部分E [ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [3_ 甲基 _3_ (1_ 吡咯烷基)氮杂环丁烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲 酰胺将(2R)-3_环戊基_2-{[甲酰基(四氢_2H_吡喃_2_基氧基)氨基]甲基}丙 酸(112mg，0. 374mmol)、2-氯-5-氟-4-胼基-6-[3-甲基_3-(1_吡咯烷基)_1_氮杂环 丁烷基]嘧啶(推测 112mg 的游离碱，0. 374讓ol)、EDC(86mg，0. 449讓ol)、H0At(56mg， 0. 411mmol)和NMM(0. 25mL，2. 24mmol)在DMF (5ml)中的混合物在室温下搅拌过夜。然后将 反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [3-甲基-3- (1-吡咯烷 基)"I"氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(145mg,66% )。LCMS (M+H)+ 582. 5。部分F [ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [3_ 甲基 _3_ (1_ 吡咯烷基)氮杂环丁烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R) -3- (2- {2-氯 _5_ 氟 _6_ [3-甲基 _3_ (1_ 吡咯烷基)氮杂环丁烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰 胺(145mg)的4 IAcOH 水(20mL)溶液在室温下搅拌过夜。LCMS表明脱保护基的反应完 成了 45%。加入另一批混合溶剂(4 IAcOH 水，20mL)，并继续搅拌过夜。然后将溶剂 真空除去，并将生成的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[3-甲 基-3- (1-吡咯烷基)-1-氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙 基]羟基甲酰胺(45mg，36% )0 LCMS (Μ+Η)+ :498· 2。实施例177[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (SaR)-六氢吡咯并[1，2~a]吡 嗪-2 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用(8aR)_八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪(J. Med. Chem. 1993， 36,2311-20)(以二 -HCl盐使用)代替部分A中的吡咯烷制备[(2R)-2-(环戊基甲 基)-3- (2- {5-氟-6- [ (8aR)-六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基} 胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:464.2。实施例178[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{2-乙基-5-氟-6-[(8池)-六氢吡咯并[l，2_a] 吡嗪-2 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法B，使用(8aR)_八氢吡咯并[1,2-a]吡嗪(J. Med. Chem. 1993， 36,2311-20)(以二 -HCl盐使用)代替部分A中的吡咯烷，使用4当量的DIPEA，并使用 1 IMeOH DMSO混合溶剂体系代替纯的MeOH或纯的DMSO制备[(2R)-2-(环戊基甲 基)-3- (2- {2-乙基-5-氟-6- [ (8aR)-六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2 (IH)-基]-4-嘧啶基} 胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。实施例179 [ (2R) -3- {2- [2-氯_5_氟_6_ (四氢_2H_吡喃_4_基氨基)~4~嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 [2102] 部分A 2-[2-氯-5-氟-6-(四氢_2H_吡喃_4_基氨基)_4_嘧啶基]_1，1,2-胼三甲酸 三(1，1-二甲基乙基)酯将市售可得的四氢-2H-吡喃-4-胺(0. 122g，1. 21mmol)的DMF(6mL)溶液冷却至 0°c。然后加入二异丙基乙胺(0. 24mL，1. 33mmol)和2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)_1， 1，2-胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(0. 600g, 1. 21mmol)。使生成的溶液达到室温，并搅 拌过夜。将混合物用乙醚萃取，并用水洗涤，并将生成的水层用乙醚萃取一次。将合并的乙 醚层干燥(Na2SO4),并真空浓缩。将生成的物质通过硅胶色谱法(5-60%乙酸乙酯的己烷溶 液，三乙胺)纯化，得到2-[2-氯-5-氟-6-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-4-嘧啶基]-1， 1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯，为白色固体(0. 602g,89% )0 LCMS (M+H-2Boc)+ =362. 1。部分B 2-氯-5-氟_6-(四氢-2H-吡喃_4_基氨基)_4 (IH)-嘧啶酮腙向2-[2-氯-5-氟-6-(四氢_2H_吡喃_4_基氨基)_4_嘧啶基]_1，1，2_胼三甲 酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 602g，1.071mmol)的Me0H(20mL)溶液中加入4MHC1的1， 4_ 二噁烷溶液(20mL)。在室温下搅拌2天后，将溶剂蒸发，并加入饱和的NaHC03。将水层 萃取，并将有机物干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到2-氯-5-氟-6-(四氢-2H-吡喃-4-基 氨基)-4 (IH)-嘧啶酮腙，为红色固体(0. 199g)。LCMS :_)+ = 261.8。部分C [ (2R) -3- {2- [2-氯_5_氟_6_ (四氢_2H_吡喃_4_基氨基)~4~嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(0. 220g， 0. 72mmol)、2-氯-5-氟-6-(四氢-2H-吡喃 _4_ 基氨基)-4(1Η)-嘧啶酮腙(0. 199g)、 NMM (0. 42mL，3. 80mmol)、HOAt (0. 103g，0. 76mmol)、EDC (0. 146g，0. 76mmol)溶于 DMF(5mL) 中。将该反应搅拌过夜。加入乙醚，用水洗涤，用乙醚反萃取水层，干燥(Na2SO4)并真空 浓缩，得到[(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6-(四氢-2H-吡喃_4_基氨基)-4-嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺，为深褐色固体(0. 321g)。 LCMS (M+H)+ = 549. 2。部分D [ (2R) -3- {2- [2~氯_5_氟_6_ (四氢_2H_吡喃_4_基氨基)~4~嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-{2_[2-氯-5-氟_6-(四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-4_嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(0.321g，0.58mmol)、Pd (OH) 2 (0. 064g)和MeOH(IOmL)混合，并按照一般方法E，部分D中所述的处理4小时。该反 应没有完成，并因此将内容物过滤以除去催化剂，并将滤液真空浓缩。将生成的残余物再溶 于MeOH (IOmL)中，加入Pd (OH) 2 (0. 080g)，并将内容物在氢化条件下按照一般方法E，部分D 再次搅拌2. 5小时。然后将内容物过滤以除去催化剂，并将滤液真空浓缩。将生成的粗产物 通过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -3- {2-[2-氯-5-氟_6_ (四氢-2H-吡喃-4-基氨基)-4-嘧 啶基]胼基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为灰白色固体(0. 024g,9%)o LCMS (M+H)+ = 459. 5。实施例180N-[(2R)-2-(环戊基甲基)_3-(2-{5_ 氟 _2_ 甲基 _6_[ (2S，3R) _2，3，4_ 三甲
基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法Α，使用(2R，3S)-1，2，3_三甲基哌嗪二盐酸盐(实施例175)代替部 分A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备N-[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲 基-6-[ (2S，3R) -2，3，4-三甲基-I-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲 酰胺。LCMS :(M+H)+:466. 2。实施例181N-[(2R)-2-(环戊基甲基)_3-(2-{5_ 氟 _2_ 甲基 _6_[ (2R，3S) _2，3，4_ 三甲
基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用(2S，3R)-1，2，3_三甲基哌嗪二盐酸盐(实施例173)代替部 分A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备N-[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲 基-6-[ (2R，3S) -2，3，4-三甲基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲 酰胺。LCMS :(M+H)+:466. 2。实施例182[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [3-甲基 _3_ (1_ 吡咯烷
基)-1_氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 5-氟-4-胼基-2-甲基-6-[3-甲基_3_ (1_吡咯烷基)氮杂环丁烷基]嘧啶向4，6-二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(90mg，0. 50mmol)、1_ (3_ 甲基 _3_ 氮杂环丁烷 基)吡咯烷二盐酸盐(实施例176) (131mg，推测86%纯，0. 53mmol)在5mL的DMSO中的混 合物中加入DIPEA (0. 345mL, 1. 98mmol)。将生成的反应混合物于室温下搅拌过夜，并然后加 入胼一水合物(0.5mL)，并将内容物于80°C加热4h。然后将反应混合物冷却至室温，并通 过RP-HPLC纯化，得到5-氟-4-胼基-2-甲基-6-[3-甲基_3_(1_吡咯烷基)_1_氮杂环 丁烷基]嘧啶(100mg,71% )。LCMS (M+H)+ 281. 0。部分B [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [3-甲基 _3_ (1_ 吡咯烷 基)"I"氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基) 甲酰胺将(2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙 酸(107mg，0. 357mmol)、5-氟-4-胼基-2-甲基_6-[3_甲基_3_(1_吡咯烷基)_1_氮杂 环丁烧基]嘧啶(100mg，0. 357mmol)、EDC(82mg，0. 428mmol)、HOAt (53mg，0. 393mmol)和 NMM(0. 20mL, 1. 79mmol)在DMF(5ml)中的混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物通 过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟-2-甲基-6- [3-甲基-3- (1-吡 咯烷基)-1_氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧 基)甲酰胺(118mg,58% )。LCMS (M+H)+ 562. 2。部分C [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [3-甲基 _3_ (1_ 吡咯烷 基)-1_氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-2_(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-甲基_6-[3_甲基_3-(1_吡咯烷 基)-1-氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲 酰胺(IlSmg)的4 IAcOH 水(20mL)溶液在室温下搅拌3天。真空除去溶剂，并将生成 的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟_2_甲基-6- [3-甲 基-3-(l-吡咯烷基)-1-氮杂环丁烷基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 (65mg,64% )。LCMS (M+H)+ 478. 1。实施例183{(2R) -2-[ (2- {2_ 氯 _6_[ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼
基)羰基]己基}羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用(R)-1，3-二甲基哌嗪二盐酸盐(实施例39)代 替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂，并在部分C中使用 (2R)-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}己酸(实施例201)代替(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸制备{(2幻-2-[(2-{2-氯-6-[(21 )-2，4-二 甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)羰基]己基}羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+: 446.1/448. 2。实施例184[(2R)-3-{2-[2-氯 _5_ 氟 _6-(4，4，5_ 三甲基-六氢吡咯并[3，4_c]吡 咯-2(1!1)-基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映 异构体的混合物) 部分A (消旋)_顺式-1，1，2-三甲基_5-(苯基甲基)八氢吡咯并[3,4-c]吡咯将4，4，5_三甲基_2-(苯基甲基)四氢吡咯并[3,4-c]吡咯_1，3 (2H，3aH)- 二酮 (5. 39g,20mmol) (Bull. Chem. Soc. Jpn.，1987，60，4079-4089)溶于 THF(50mL)中，并冷却至 0 V。分批加入LiAlH4 (2. 25g，59mmol)，并将生成的混合物回流过夜。冷却至0°C后，将该 反应通过加入水(2. 25mL)，随后加入15% (w/w) NaOH (水溶液)(2. 25mL)，并加入另一批的 水(6.75mL)来终止。将终止的反应搅拌，并然后通过Celite硅藻土过滤，，随后在减压下 浓缩。通过RP-HPLC纯化，得到(消旋)_顺式-1，1，2-三甲基-5-(苯基甲基)八氢吡咯 并[3,4-c]吡咯(1. 44g,30% ) ο LCMS (Μ+Η)+:245· 2。部分B (消旋)_顺式-1，1，2-三甲基-八氢吡咯并[3,4-c]吡咯向除气的(消旋)_顺式-1，1，2-三甲基_5-(苯基甲基)八氢吡咯并[3,4-c]吡 咯(1. 44g,6mmol)的 MeOH(30mL)溶液中加入 IM HCl (12. 3mL, 12mmol)，随后加入 10% Pd/ C(220mg)。将生成的混合物在氢气球下搅拌过夜。过滤催化剂，并真空蒸发溶剂，得到定量 产率的(消旋)_顺式-1，1，2-三甲基-八氢吡咯并[3,4-c]吡卩各，为盐酸盐。LCMS :(M+H)+: 155. 1。部分C [(2R)-3-{2-[2-氯 _5_ 氟 _6-(4，4，5_ 三甲基-六氢吡咯并[3,4-c]吡 咯-2 (IH)-基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用消旋_(顺式)-1，1，2_三甲基-八氢吡咯并[3， 4-c]吡咯代替异丙胺制备[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4，4，5-三甲基-六氢吡咯并[3， 4-c]吡咯-2(1H)_基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。 产物为非对映异构体的混合物。LCMS (M+H)+ 512. 3/514. 2。实施例185((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[6-[3_( 二甲基氨基)-3_甲基氮杂环丁烷 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用N，N，3-三甲基-3-氨基氮杂环丁烷(J. Med. Chem. 1993,36,801-810)代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备((2R)_2_(环戊基甲 基)-3- {2- [6- [3- ( 二甲基氨基)-3-甲基-1-氮杂环丁烷基]-5-氟-2-(甲硫基)~4~嘧 啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (Μ+Η)+484· 1。实施例186[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟_2_甲基_6_ [(顺式)_10_氧杂_4_氮杂三 环[5. 2. 1. O2'6]癸-4-基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺部分A (顺式)-4-(苯基甲基)-10-氧杂-4-氮杂三环[5.2.1.02'6]癸_8_烯_3，5_ 二 酮在封闭管中，将呋喃(6mL，83mmol)加入到N-苄基马来酰亚胺(3g，16mmol)的乙 醚(30mL)溶液中，并将该反应于90°C加热过夜。蒸发溶剂，得到残余物，将其用冷的MeOH 研磨，得到(顺式)-4-(苯基甲基)-10-氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2’6]癸-8-烯-3，5-二 酮(2. 72g,67% )，为灰白色固体。LCMS :(M+Na)+ 278. 1。部分B (顺式)-4-(苯基甲基)-10-氧杂-4-氮杂三环[5.2.1. O2’6]癸_3，5-二酮向除气的(顺式)-4_(苯基甲基)-10_氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2'6] 癸-8-烯-3,5- 二 酮(2. 72g，10. 1 讓ol)在 1，2-DME (50mL)中的溶液中加入 10 % Pd/ C(540mg,20% w/w)0将生成的悬浮液在氢气球下搅拌1小时。通过过滤除去催化剂，并真 空浓缩滤液，得到定量产率的(顺式)-4-(苯基甲基)-10-氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2'6] 癸-3，5-二酮。LCMS (M+H)+ 258. 1。部分C (顺式)-4-(苯基甲基)-10-氧杂-4-氮杂三环[5.2.1.02'6]癸烷在0°C下，向(顺式)-4_(苯基甲基)-10_氧杂-4-氮杂三环[5.2. 1.02'6]癸-3， 5- 二酮(2. 39g，9. 2mmol)的THF(93mL)溶液中加入LiAlH4,并将生成的溶液加热至65V. 将该反应在此温度下搅拌72小时，随后冷却至0°C，并用IMNaOH终止。然后将终止的反应用 乙醚萃取，将合并的有机物经硫酸钠干燥，并真空除去溶剂。将残余物溶于DCM中，经硫酸 钠干燥，浓缩并通过梯度硅胶色谱法(0-100% EtOAc的己烷溶液，Et3N)纯化，得到(顺 式)-4-(苯基甲基)-10_氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2'6]癸烷，为黄色的油状物(1.72g， 67%)。LCMS (M+H)+ 230. 1。[2167]部分D (顺式)-10-氧杂-4-氮杂三环[5.2.1.02'6]癸烷向除气的(顺式)-4_(苯基甲基)-10_氧杂-4-氮杂三环[5.2. 1.02'6]癸烷 (1. 72g，7. 5mmol)的 MeOH(40mL)溶液中加入 IM HCl (7. 5mL)，随后加入 10% Pd/C(344mg, 20%w/w)o在氢气球下搅拌72小时，随后过滤，并真空浓缩，得到(顺式)-10-氧杂-4-氮 杂三环[5.2. 1.02,6]癸烷的盐酸盐(1.26g，96% )，为黄色泡沫状物。LCMS (M+H)+ 140. 1。部分E [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟_2_甲基_6_ [(顺式)_10_氧杂_4_氮杂三 环[5. 2. 1. O2'6]癸-4-基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法A，使用(顺式)-10-氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2’6]癸烷代替部 分A中的吡咯烷制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6-[(顺式)-10-氧 杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2’6]癸-4-基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。 LCMS _)+ 477. 3。实施例187[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [(顺式)-10-氧杂 _4_ 氮杂三环[5. 2. 1. O2'6] 癸-4-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用(顺式)-10_氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2, 6]癸烷(实施例186)代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作 为溶剂制备[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟_6-[(顺式)-10_氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. O2，6] 癸-4-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 497. 1/499. 2。实施例188[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基 _6_[ (9aR)-八氢 _2H_ 吡啶并[1， 2-a]吡嗪-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (2R)-1-(N_{[(苯基甲基)氧基]羰基}甘氨酰)-2_哌啶甲酸甲酯向(2R)-2-哌啶甲酸甲酯盐酸盐(1. Og, 5. 56mmol)和 HOBt (0. 90g，6. 67mmol)的 CH2Cl2 (20mL)溶液中加入4-甲基吗啉(2. 44mL, 22. 24mmol)、N_ {[(苯基甲基)氧基]羰基} 甘氨酸(1. 16g,5. 56mmol)和EDCI (1. 28g，6. 67mmol)。搅拌过夜后，将该溶液用6N的HCl羰基}甘氨酰)-2-哌啶甲酸甲酯(2. 029g,99% )0 LCMS :_)+ :335· 1。部分B (9aR)_ 四氢-2Η-吡啶并[l，2_a]吡嗪 _1，4 (3H，6H) - 二酮将(2R)-1-(N_{[(苯基甲基)氧基]羰基}甘氨酰)_2_哌啶甲酸甲酯(2. 029g， 6. 068mmol)溶于Me0H(30mL)中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(610mg)，并将内容物 彻底地除气，并在氢气球下放置3h。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤来除去 Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的(9aR)-四氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪-1， 4 (3H, 6H) - 二酮(779mg, 76% ) LCMS (M+H)+ 169. 1。部分C (9aR)_八氢-2H-吡啶并[l，2_a]吡嗪_2_甲酸苯甲基酯将(9aR)_四氢 _2H_ 吡啶并[1,2-a]吡嗪 _1，4(3H，6H)- 二酮(779mg,4. 63mmol) 溶于46mL的THF中，并冷却至0°C。然后分批加入LiAlH4 (352mg, 9. 57mmol)。将混合物于 85°C加热2小时，然后冷却至0°C。将该反应用硫酸钠十水合物(704mg，9. 27mmol)终止，并 在0°C下搅拌30分钟。向该溶液中加入IN的NaOH水溶液(5mL)，并在0°C下将反应混合物 搅拌30分钟。然后加入Et2O (20mL)，随后加入氯甲酸苄基酯(0. 783mL，5. 563mmol)。将反 应混合物在0°C下剧烈搅拌2h，分离各相，并将水相用Et20(3x50mL)萃取。将合并的有机相 经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。将生成的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到(9aR)_八 氢-2H-吡啶并[l，2-a]吡嗪-2-甲酸苯甲基酯(688mg，55% )。LCMS (M+H) + 275. 1。部分D (9aR)_ 八氢 _2H_ 吡啶并[l，2_a]吡嗪将(9aR)_八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪_2_甲酸苯甲基酯(688mg，2. 50mmol)溶 于Me0H(15mL)中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(206mg)，并将内容物彻底地除气， 并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤除去Pd/C，用MeOH 洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的(9aR)_八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪(364mg，99% )。 LCMS (M+H)+ 141. 1。部分E [(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基 _6_[ (9aR)-八氢 _2H_ 吡啶并[1， 2-a]吡嗪-2-基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺按照类似于实施例210，部分E和F的方法，在部分E中使用(9aR)-八氢_2H_吡啶 并[l，2-a]吡嗪代替l-{l_[(2S)-2-吡咯烷基]环丙基}吡咯烷盐酸盐制备[(2R)_2_(环 戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [ (9aR)-八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基]-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 478. 4。实施例189[(2R)-3-[2-(2-氯 _6_ {(2S) _2-[1_ ( 二甲基氨基)环丙基]吡咯烷
基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
183 部分A 队^二甲基-1-[(2幻-2-吡咯烷基]环丙胺根据实施例210，部分A至部分D，在部分B中使用市售可得的二甲基胺代替吡咯 烷制备队^二甲基-1-[(25)-2-吡咯烷基]环丙胺。LCMS:(M+H)+:未检测。部分B 根据一般方法E，在部分A中使用N，N-二甲基-1-[(2S)_2-吡咯烷基]环丙胺 代替异丙胺制备[(2R)-3-[2-(2-氯-6-{(2S)-2-[l-( 二甲基氨基)环丙基]吡咯烷 基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 512. 3。实施例190N-{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5-氟-2-甲基-6-{甲基[2-(4-吡啶基)乙
基]氨基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}-N-羟基甲酰胺 部分A 6-氯-5-氟-N，2- 二甲基-N-[2-(4-吡啶基)乙基]_4_嘧啶胺将4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(280mg，1. 54mmol)溶于5mL的THF中，并在室温 下搅拌。加入甲基[2-(4-吡啶基)乙基]胺(210mg，1.54mmOl)，随后加入三乙胺(240 μ L, 1.69mm0l)。将生成的反应混合物搅拌过夜。将该反应用EtOAc稀释，用盐水洗涤，干燥 (硫酸钠)，并蒸发，得到6-氯-5-氟-N，2- 二甲基-N-[2-(4-吡啶基)乙基]-4-嘧啶胺 (350mg，81% )，其不需进一步纯化而使用。LCMS :(M+H)+281. 1。部分B 5-氟-6-胼基-N，2-二甲基-N-[2-(4-吡啶基)乙基]_4_嘧啶胺将6-氯-5-氟-N，2- 二甲基-N- [2- (4-吡啶基)乙基]_4_嘧啶胺(350mg， 1. 25mmol)溶于4mL的DMSO中，并加入4ml的胼一水合物。将混合物搅拌过夜，并通过 RP-HPLC纯化，得到5-氟-6-胼基-N，2- 二甲基-N- [2- (4-吡啶基)乙基]_4_嘧啶胺 (220mg,63% )。LCMS (M+H)+ 277. 2。部分C {(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2_ (5_氟_2_甲基_6_ {甲基[2_ (4_吡啶基)乙基] 氨基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}[(苯基甲基)氧基]甲酰胺将(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(230mg， 0. 76mmol)、5_ 氟-6-胼基-N，2- 二甲基-N- [2- (4-吡啶基)乙基]~4~ 嘧啶胺(2IOmg, 0. 76mmol)、EDC(180mg,0. 9Immo 1)、HOAt (120mg, 0. 91mmol)禾口 NMM (0. 25mL,2. 28mmol)在5ml DMF中的混合物在室温下搅拌过夜。然后将反应混合物通过反相HPLC纯化，得 到{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5_氟-2-甲基_6_{甲基[2_(4_吡啶基)乙基]氨 基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}[(苯基甲基)氧基]甲酰胺(290mg，67%)。LCMS (M+H)+ 564. 3。部分D N-{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5-氟-2-甲基-6-{甲基[2_(4_吡啶基)乙 基]氨基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}-N-羟基甲酰胺将{(2R)-2_(环戊基甲基)-3-[2-(5_氟-2-甲基_6_{甲基[2_(4_吡啶基) 乙基]氨基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}[(苯基甲基)氧基]甲酰胺(290mg， 0. 51mmol)溶于IOmL的MeOH中。加入10% Pd/碳(60mg)，并将内容物在氢气球下搅拌 大约5小时。然后将内容物过滤以除去催化剂，并将滤液真空浓缩，得到{(2R)-2-(环戊 基甲基)-3-[2-(5_氟-2-甲基-6-{甲基[2-(4_吡啶基)乙基]氨基}_4_嘧啶基)胼 基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺(230mg,96% )。LCMS _)+ 474. 3。实施例191[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(l，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4_ 嘧啶基}胼
基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼三甲 酸三(1，1-二甲基乙基)酯将2-(2，6_ 二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯 (0. 988g, 1. 992mmol)溶于 THF(IOmL)中。向该溶液中加入三乙胺(0. 61mL,4. 3765mmol), 随后加入市售可得的2-氨基甲基噻唑盐酸盐(0. 30g，1. 992mmol)，将其悬浮于THF(12mL) 中。将该反应搅拌2天，期间将另外的IOmLTHF和2-氨基甲基噻唑盐酸盐(0. 061g， 0. 4049mmol)加入到反应混合物中。再过3天后，将反应混合物用水稀释，并用乙酸乙酯萃 取。将有机物干燥(Na2SO4)并浓缩。生成的粗物质通过硅胶色谱法(0-100%乙酸乙酯的己 烷溶液)纯化，得到2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧啶基}-1，1， 2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯，为黄色的油状物(0. 5826,51% )0 LCMS :(M+H-3Boc) + =375. 0。部分B 2-氯-5-氟-6-[(l，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙二盐酸盐在室温下，将2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4_嘧啶基}_1， 1，2_胼三甲酸三(1，1_二甲基乙基)酯(0. 5826,1. 015mmol)溶于MeOH(IOmL)和 HC1(4M 的 1，4-二噁烷溶液)(10mL)中，并搅拌过夜。真空除去溶剂，得到2-氯-5-氟-6-[(l，3-噻 唑-2-基甲基)氨基]-4(1H)_嘧啶酮腙，推测为二盐酸盐，为米色固体(0. 3507,100% )0 LCMS (M+H)+ = 274. 8。[2227]部分C [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将2-氯-5-氟-6-[(l，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4(IH)-嘧啶酮腙二盐酸盐 (0. 3052g, 0. 882mmol)和(2R) -3-环戊基-2- {[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基] 甲基}丙酸(0. 457g, 1. 059mmol)溶于 DMF(8mL)中。加入 NMM(0. 58mL，5. 2753mmol)，随后 加入HOAt (0. 144g，1. 059mmol)和EDC (0. 203g, 1. 059mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物通 过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺，为米 色固体(0. 3031g,62% )。LCMS (M+H)+ = 556. 2。部分D [(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(l，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4_嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 3031g, 0. 5461mmol)溶于乙酸(SmL)和水(2mL)中。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发挥发物，并 将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -3-(2- {2-氯_5_氟-6- [ (1，3-噻唑-2-基甲 基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为白色固体 (0. 1484g, 58% ) ο LCMS (M+H)+ = 472. 0。实施例192[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨基]_4_嘧啶基}
胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A N-甲基-1-(1，3-噻唑-2-基)甲胺将市售可得的2-噻唑甲醛(3.61g，31.91mm0l)溶于异丙醇(90mL)中，将分子 筛(sieves) (3. 65g)加入到反应容器中。然后将甲胺盐酸盐(17. 28g，256mmol)、乙酸钠 (7. 85g,96mmol)和氰基硼氢化钠(3. 07g，48. 9mmol)加入到反应混合物中。将混合物置于 氩气下，并搅拌3天。过滤出分子筛，并用异丙醇洗涤。将滤液蒸发，并将生成的残余物溶 于乙酸乙酯中。将有机物用饱和的NaHCO3水溶液和盐水洗涤。将合并的水层用IL的10% MeOH在氯仿中的溶剂混合物萃取，并将合并的有机物干燥(Na2SO4),并蒸发。将粗产物通过 硅胶色谱法(0-5% MeOH的二氯甲烷溶液)纯化，生成N-甲基-1-(1，3-噻唑-2-基)甲 胺，为黄色的油状物(0. 930g,23% )0 LCMS (M+H)+ = 129.0。部分B 2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼 三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯[2241]将2-(2，6_ 二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯 (1. 16g,2. 339mmol)溶于THF(5mL)中。向该溶液中加入三乙胺(0. 39mL，2. 8mmol)，随后加 入N-甲基-1-(1，3-噻唑-2-基)甲胺(0. 30g,2. 3437mmol)的THF(2mL)溶液。将该反应 搅拌过夜。然后将反应混合物用水稀释，并将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物干燥(Na2SO4) 并浓缩，以生成2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧啶基}-1， 1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯，为白色固体(1.51g)。LCMS :(M+H-Boc)+ = 489. 1。部分C 2-氯-5-氟-6-胼基_N_甲基_N_(1，3_噻唑_2_基甲基)_4_嘧啶胺二盐酸盐在室温下，将2-{2_氯-5-氟_6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨基]_4_嘧 啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(1.51g，2. 57mmol)溶于Me0H(25mL) 和HC1(4M的1，4-二噁烷溶液)(25mL)中。将反应混合物搅拌4天，并然后蒸发，得到 2-氯-5-氟-6-胼基-N-甲基-N-(l，3-噻唑-2-基甲基)-4-嘧啶胺，推测为二盐酸盐，为 米色固体(0. 9034g,98% )。LCMS (M+H-2HC1)+ = 289. 0。部分D [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨基]_4_嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将2-氯-5-氟-6-胼基_N_甲基_N_ (1，3_噻唑_2_基甲基)~4~嘧啶胺(推测为 二盐酸盐)(0. 9034g, 2. 509mmol)和(2R) -3-环戊基-2- {[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基 氧基)氨基]甲基}丙酸(1. 299g，3. Olmmol)溶于 DMF(13mL)中。加入 NMM(1. 655mL， 15. 05mmol)，随后加入 HOAt (0. 4095g, 3. Olmmol)和 EDC (0. 577g, 3. Olmmol)。搅拌过夜 后，将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(1，3_噻 唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺，为红色粘稠状物。LCMS (M+H)+ = 570. 2。部分E [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨基]_4_嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨基]_4_嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺溶于乙酸 (SmL)和水(2mL)中。将反应混合物搅拌2天。蒸发挥发物，并将生成的残余物通过RP-HPLC 纯化，得到[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[甲基(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4_嘧啶 基}胼基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为米色固体(0.3469g)。LCMS (M+H) + = 486. 1。实施例193[ (2R) -3- [2_ (2_ 氯 _5_ 氟 _6_ {[ (3S) 甲基 _2_ 氧代-六氢-IH-氮杂革 _3_ 基]
氨基}-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A [ (3S)-1-甲基-2-氧代-六氢-IH-氮杂革_3_基]氨基甲酸1，1_ 二甲基乙基向除气的[(3S)-1-甲基-2-氧代-2，3，4，7-四氢_1Η_氮杂革_3_基]氨基甲 酸1，1- 二甲基乙基酯(实施例94) (680mg，2. 8mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入10% Pd/ C(IOOmg)，并将生成的悬浮液在氢气球下搅拌过夜。过滤催化剂，并减压浓缩滤液，得到 [(3S)-1-甲基-2-氧代-六氢-IH-氮杂革-3-基]氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(470mg， 88% )。LCMS (M」But)+ 186. 2。部分B (3S) -3-氨基-1-甲基-六氢_2H_氮杂革_2_酮向[(3S)-1_甲基-2-氧代-六氢-IH-氮杂革-3-基]氨基甲酸1，1_ 二甲基乙 基酯(470mg, 1. 9mmol)的二噁烷(5mL)溶液中加入HCl (4. 8mL, 19mmol,4M的二噁烷溶液)， 并将该反应搅拌过夜。蒸发溶剂，得到定量产率的(3S)-3-氨基-1-甲基-六氢-2H-氮杂 革-2-酮。LCMS (M+H) + 143. 1。部分C [ (2R) -3- [2- (2_ 氯 _5_ 氟 _6_ {[ (3S) 甲基 _2_ 氧代-六氢-IH-氮杂革 _3_ 基] 氨基}-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用(3S)-3_氨基-1-甲基-六氢-2H-氮杂 革-2-酮代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂制备 [(2R) -3- [2- (2-氯-5-氟-6- {[ (3S) 甲基 _2_ 氧代-六氢-IH-氮杂革-3-基]氨 基}-4_嘧啶基)胼基]_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+: 500. 1/502. 2。实施例194[ (2R) -3- [2_ (2-氯 _5_ 氟 _6_ {(2R) _2_ [(甲氧基)甲基]吡咯烷基} _4_ 嘧啶 基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用市售可得的(S)-(+)-2_(甲氧基甲基)吡咯烷代 替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂制备[(2R) _3-[2_(2 -氯-5-氟-6- {(2R) -2-[(甲氧基)甲基]-1-吡咯烷基} -4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS _)+ 473. 2/475. 2。实施例195[(2R)-3-(2-{2-氯 _6-[4_( 二 甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(D1，单一的未
知非对映异构体) 部分A 3-甲基-3-[(苯基甲基)氨基]丁酸甲酯向苄基胺(10. 0mL，91. 6mmol)在95 % MeOH-水(180mL)中的溶液中加入3_甲 基-2- 丁烯酸甲酯(12. 3mL, 100. 8mmol)。将该溶液于55°C加热，并搅拌2周。然后将该溶 液冷却至室温，真空浓缩，并将残余物通过梯度硅胶色谱法(0%至100% EtOAc的己烷溶 液；Et3N)纯化，得到3-甲基-3-[(苯基甲基)氨基]丁酸甲酯(5. 5893g，28%),为淡 黄色油状物。LCMS (M+H)+ 222. 1。部分B 3-甲基_3-[[(甲氧基)(氧代)乙酰基](苯基甲基)氨基]丁酸甲酯向3-甲基-3-[(苯基甲基)氨基]丁酸甲酯(5. 5853g，25. 24mmol)的 THF(125mL) 溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(6. 6mL，37. 89mmol)。将该溶液冷却至0°C，并滴加氯代(氧 代)乙酸甲酯(2.55mL，27.73mmol)。然后将混合物搅拌，并温热至室温过夜。将混合物用 EtOAc (200mL)稀释，并用IN的HCl水溶液(IOOmL)，随后用饱和的NaHCO3水溶液(IOOmL) 洗涤。将有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物由EtOAc-己烷结晶，得到 白色固体，将其通过真空过滤收集，并用己烷洗涤，得到3-甲基_3-[[(甲氧基)(氧代)乙 酰基](苯基甲基)氨基]丁酸甲酯(7.0709g，91% )，为白色固体。LCMS :_)+ 308. 1。部分C 2，2- 二甲基-4，5- 二氧代_1_(苯基甲基)_3_吡咯烷甲酸甲酯向3-甲基_3-[[(甲氧基)(氧代)乙酰基](苯基甲基)氨基]丁酸甲酯 (6. 9702g,22. 68mmol)在甲苯(IlOmL)中的混合物中加入 25% w/w NaOMe 的 MeOH(14mL) 溶液。将混合物于80°C加热，并搅拌2h。然后将该溶液冷却至室温，并真空浓缩至约1/2 体积。将残余物在DCM(200mL)和IN的HCl水溶液(200mL)之间分配。将水相用新制的 DCM(IOOmL)萃取，并将合并的有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。将生成的白色固 体用己烷研磨，并通过真空过滤收集，得到2，2- 二甲基-4，5- 二氧代-1-(苯基甲基)-3-吡 咯烷甲酸甲酯(5. 5965g，88% )，为白色固体。LCMS (M+H) + 276. 1。部分D 5，5- 二甲基-1-(苯基甲基)-2，3_吡咯烷二酮将2，2_ 二甲基-4，5-二氧代-1-(苯基甲基)-3_吡咯烷甲酸甲酯(5. 6429g，
18920. 50mmol)的10 IHOAc-水(IOOmL)溶液于100°C加热，并搅拌2天。将该溶液冷却至 室温，并真空浓缩。将残余物在DCM(200mL)和饱和的NaHCO3水溶液(IOOmL)之间分配。将 水相用新制的DCM(50mL)萃取，并将合并的有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得 到粗的5，5- 二甲基-1-(苯基甲基)-2，3-吡咯烷二酮(3. 9096g, 88%粗产物的产率)，为 淡橙色固体。LCMS (M+H)+ 218. 1。部分E (3E) -5，5_ 二甲基(苯基甲基)-2，3_吡咯烷二酮3_ (0-甲基肟)向5，5_ 二甲基-1-(苯基甲基)-2，3_ 吡咯烷二酮(3. 9036g，17. 97mmol)的 MeOH(90mL)溶液中加入乙酸钠(1. 81g, 21. 54mmol)和甲氧胺盐酸盐(1. 80g，21. 55mmol)。 将溶液搅拌过夜，并然后将溶剂真空除去。将残余物在DCM(200mL)、饱和的NaHCO3水溶液 和水之间分配。将水相用新制的DCM(50mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过 滤，并真空浓缩，得到粗的(3E) -5，5- 二甲基-1-(苯基甲基)-2，3-吡咯烷二酮3- (0-甲基 肟)(4. 5282g，> 100%粗产物的产率)，为黄色/橙色油状物。LCMS :_)+:247. 1。部分F 5，5- 二甲基-1-(苯基甲基)-3_氨基吡咯烷向0°C的(3E)-5，5_ 二甲基-1-(苯基甲基)-2，3_吡咯烷二酮3-(0-甲基肟) (4. 2872g, 17. 41mmol)的 THF(90mL)溶液中分批加入 LiAlH4 (2. 64g，69. 57mmol)。将混合物 于70°C加热，并搅拌6. 5小时。然后将混合物冷却至室温，并通过加入Na2SO4 · IOH2O(3g)， 随后加入IN的NaOH水溶液(IOOmL)来终止。将混合物用Et2O(2xl50mL)萃取，并将合并 的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物用DCM(200mL)稀释，并将混合物 经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到粗的消旋的5，5- 二甲基-1-(苯基甲基)_3_氨 基吡咯烷(3. 2293g,86% )，为淡黄色油状物。LCMS (M+H)+ 205. 2。部分G N，N，5，5-四甲基-1-(苯基甲基)-3-氨基吡咯烷将消旋的5，5-二甲基-1-(苯基甲基)-3-氨基吡咯烷(3. 2293g，15. 81mmol)的 甲酸(20mL)和福尔马林(20mL)溶液于100°C加热，并搅拌1小时。然后将该溶液冷却至 0°C，并用6N的NaOH水溶液调节pH至14。将混合物用Et2O(2xl50mL)萃取，并将合并的 有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物用DCM(200mL)稀释，并将该溶液 经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过梯度硅胶色谱法(0%至100% EtOAc 的己烷溶液；Et3N)纯化，得到消旋的N，N，5，5-四甲基-1-(苯基甲基)-3_氨基吡咯烷 (2.8158g，77%)，为橙色油状物。LCMS :(M+H)+ :232. 9。通过制备型手性超临界流体色谱法 (Chiralpak AD-H 20x250mm ；6% MeOH (0. 1% Et2NH) ,94% CO2 ；50mL/min ；230nm检测；50mg 注射量/循环)将该物质分成两个基本的对映异构体。部分H N，N，5，5-四甲基_3_氨基吡咯烷二盐酸盐向第一次洗脱出来的N，N，5，5-四甲基(苯基甲基)-3-氨基吡咯烷的对映异 构体(1. 0607g，4. 569mmol)的 MeOH(40mL)溶液中加入 IN 的 HCl 水溶液(9. ImL, 9. Immol) 和10% Pd/C(50%水，265mg)。将混合物氢化过夜，并然后通过0. 2 μ m PTFE膜过滤。将该 溶液真空浓缩，并将残余物与MeOH(5x50mL)共沸，得到粗的N，N，5，5-四甲基-3-氨基吡咯烷二盐酸盐(1.0206g，> 100%粗产物的产率)，为白色泡沫状物质。LCMS :(M+H)+ 143. 1。部分I 2- {2-氯-6- [4_ (二甲基氨基)_2，2_ 二甲基吡咯烷基]_5_氟_4_嘧啶基} _1， 1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯向N，N，5，5_四甲基-3-氨基吡咯烷二盐酸盐(推测0. 9831g，4. 569mmol)的 DMF(23mL)溶液中加入2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基 乙基)酯(2. 27g，4. 564mmol)和N，N- 二异丙基乙胺(2. 63mL, 15. IOmmol)。将溶液搅拌过 夜，并然后用Et2O(IOOmL)稀释。将混合物用水(2x50mL)洗涤，并将合并的水相用新制的 Et2O (50mL)萃取。将该有机相用干净的水(20mL)洗涤，并将合并的有机相经无水Na2SO4干 燥，过滤，并真空浓缩。将残余物通过梯度硅胶色谱法(0%至100% EtOAc的己烷溶液； Et3N)纯化，得到2- {2-氯-6- [4- ( 二甲基氨基)-2，2- 二甲基-1-吡咯烷基]_5_氟-4-嘧 啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(2. 2034g，80%)，为淡黄色泡沫状物质。 LCMS (M+H)+ 603. 3。部分T 1-(2-氯-5-氟-6-胼基_4_嘧啶基)-N，N，5，5_四甲基_3_氨基吡咯烷向2-{2-氯_6-[4-( 二甲基氨基)_2，2_ 二甲基吡咯烷基]_5_氟_4_嘧啶 基}-1，1，2_ 胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(2. 2004g,3. 648mmol)的 Me0H(22mL)溶液 中加入4N HCl的二噁烷溶液(22mL)。将该溶液搅拌3天，并然后真空浓缩。将残余物与 MeOH(50mL)共沸，并然后在DCM(IOOmL)和饱和的NaHCO3水溶液(IOOmL)之间分配。将水 相用新制的DCM(2x50mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩， 得到I-(2-氯-5-氟-6-胼基-4-嘧啶基)-N，N，5，5-四甲基-3-氨基吡咯烷(1. 0552g, 96% ),为橙色泡沫状物质。LCMS (M+H)+ 303. 1。部分K [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二 甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺向1- (2-氯-5-氟-6-胼基_4_嘧啶基)-N，N，5，5_四甲基_3_氨基吡咯烷 (1.0502g,3. 469mmol)的DMF(16mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲 基)氧基]氨基}甲基)丙酸(1.0075g，3.299mmol)、N-甲基吗啉(1. 8mL，16. 37mmol)、 1-羟基-7-氮杂苯并三唑(0. 540g，3. 968mmol)和 EDC(0. 760g，3. 964mmol)。将溶液搅 拌过夜，并然后用Et2O(IOOmL)稀释。将混合物用水(3x50mL)洗涤，并将合并的水相用新 制的Et20(50mL)萃取。将该有机相用干净的水(25mL)洗涤，并将合并的有机相经无水 Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。将残余物溶于DCM(150mL)中，经无水Na2SO4干燥，过滤， 并真空浓缩，得到粗的[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [4- ( 二甲基氨基)-2，2- 二甲基-1-吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺(1. 6539g，85%粗产物的产率)，为暗红色泡沫状物质。LCMS _)+ 590. 2。部分L [(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二 甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺[2305]向[(2R)-3-(2_{2-氯-6_[4_(二 甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰 胺(1. 6493g，2. 795mmol)的 Me0H(28mL)溶液中加入 20 % Pd(0H)2/C(50 %水，165mg)。将 混合物氢化3. 5h，并然后过滤。将该溶液真空浓缩，并将残余物通过GilsonRPLC纯化，得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [4- ( 二甲基氨基)-2，2- 二甲基-1-吡咯烷基]_5_氟-4-嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 7580g，54%，单一的未知非对映异 构体)，为粉红色固体，随后由EtOAc-己烷结晶。LCMS (M+H)+ 500. 3。实施例196[(2R)-3-(2-{2-氯-6_[4_( 二 甲基氨基)_2，2_ 二 甲基 吡咯烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(D2，单一的未 知非对映异构体) 根据实施例195的方法，使用第二次洗脱出来的N，N，5，5_四甲基(苯基甲 基)-3-氨基吡咯烷的对映异构体制备[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [4- ( 二甲基氨基)_2，2- 二 甲基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰 胺。LCMS :(Μ+Η)+:500· 3。实施例197 [ (2R) -3- [2- (2_ 氯 _6_ {3_ [2_ ( 二甲基氨基)_1，1_ 二甲基乙基]吡咯烷 基}-5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构 体的混合物) [2312] 部分A {1-甲基-1-[1-(苯基甲基)-3_吡咯烷基]乙基}胺根据文献方法(J.Org. Chem. 2000，65，1016-1021)可制备{1_ 甲基-1_[1_(苯基 甲基)-3_吡咯烷基]乙基}胺。LCMS (M+H)+ 219. 1。部分B N，N- 二甲基-2-[1-(苯基甲基)_3_吡咯烷基]_2_丙胺将{1-甲基-1-[1-(苯基甲基)-3_吡咯烷基]乙基}胺(1. 0726mg，4. 912mmol) 溶于甲醛(30mL)和甲酸(30mL)的混合物中，并然后于100°C加热2小时。冷却至0°C后， 加入6N的NaOH水溶液以调节pH至14。然后将水层用Et20(3x50mL)萃取，并将合并的有 机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到N，N- 二甲基-2-[1-(苯基甲基)-3_吡咯烷基]-2-丙胺(1. 85g,99% )。LCMS :(Μ+Η)+:247· 2。部分C N，N- 二甲基-2- (3-吡咯烷基)_2_丙胺盐酸盐将N，N-二甲基-2-[1_(苯基甲基)-3-吡咯烷基]-2-丙胺(2. 089g,8. 47mmol) 溶于Me0H(50mL)和IN HCl (18. 65mL, 18. 65mmol)的混合物中，除气，并置于氩气下。加入 10 % Pd/C (625mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并 通过玻璃纤维过滤器过滤除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的N，N-二甲 基-2-(3-吡咯烷基)-2-丙胺盐酸盐(1.245g，76% )。LCMS (M+H) + 157. 2。部分D [ (2R) -3- [2~ (2_ 氯 _6_ {3_ [2_ ( 二甲基氨基)_1，1_ 二甲基乙基]吡咯烷 基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用N，N- 二甲基_2_ (3_吡咯烷基)_2_丙胺盐酸盐 代替异丙胺制备[(2R) -3- [2- (2-氯-6- {3- [2- ( 二甲基氨基)_1，1_ 二甲基乙基]吡咯 烷基}-5_氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺，为非对映 异构体的混合物。LCMS (Μ+Η)+ :514· 2。实施例198N-[ (2R) _3_ (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_[ (2R，3R) _2，3，4_ 三甲基 哌嗪基]_4_ 嘧啶
基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A 2，3_ 二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯向IOOmL的三-颈圆底烧瓶中装入反式-2，3-二甲基哌嗪和顺式-2，3-二甲基哌 嗪的混合物(Yakugaku Zasshi，1958，78，229-232) (3. 571g，31. Immol)。将烧瓶在冰浴中 冷却，并缓慢地加入甲磺酸(3. 95mL,60. 9mmol)的2. 7mL水溶液，同时保持温度低于40°C。 将该溶液冷却至20°C，并加入4mL的乙醇。使用60%乙酸钾水溶液将pH调节至4，并然后 同时滴加氯甲酸苄基酯(3. 86mL，27. 4mol在2mL的THF)和乙酸钾溶液来调节比例以保持 反应溶液的PH为4，同时冷却使温度保持在25°C下。将混合物再搅拌1小时后，除去有机 溶剂，并将剩余的水溶液用乙酸乙酯洗涤。将乙酸乙酯洗涤液用IMHCl萃取两次以回收所 需的产物。将所述酸的萃取液与最初的水溶液合并，并通过加入6N NaOH将pH调节至11， 同时冷却使温度保持在40°C以下。将水溶液用乙酸乙酯萃取，并将乙酸乙酯的萃取液经硫 酸镁干燥。过滤并除去溶剂，得到2，3_ 二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯的所有的四个立体异 构体，为深褐色油状物(3. Ilg,41% ) ο LCMS :(M+H)+249. 1。部分B (2札3幻-2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯和(2S，3S) _2，3，4_三甲基哌 嗪甲酸苯甲基酯[2333]在0°C下，向2，3_ 二甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(四个立体异构体的混合 物)(3. 105g,12. 5mmol)的二氯甲烷(90mL)溶液中加入甲醛(1. 409mL，37 %的水溶液， 18. 75mmol)，随后加入三乙酰氧基硼氢化钠(3. 445g，16. 26mmol)。将反应混合物温热至室 温，并搅拌2h，随后用二氯甲烷稀释，并用IN NaOH溶液洗涤。将有机物用盐水洗涤，干燥 (MgSO4)并蒸发，得到2，3，4_三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(所有四个立体异构体的混合 物)(3. 04g, 93% )0通过制备型和手性色谱法的组合分离出(2R，3R) -2，3，4-三甲基-1-哌 嗪甲酸苯甲基酯(365mg)和(25，3幻-2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(420mg)。使用 Ab Initio振动圆二色光谱确定绝对构型。LCMS (M+H)+ 263. 3。部分C (2R，3R)-1，2，3-三甲基哌嗪盐酸盐将(2R，3R)-2，3，4-三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(328mg, 1. 25mmol)溶于20mL的 MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C (8Img)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球 下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填 料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入2. 75mL IN HCl后，将生成的滤液真空浓缩，得到(2R， 3R)-1，2，3-三甲基哌嗪的盐酸盐(251mg,100% )0 LCMS (M+H) + 129. 1。部分D N-[ (2R) _3_ (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_[ (2R，3R) _2，3，4_ 三甲基 哌嗪基]_4_ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用(2R，3R)-1，2，3_三甲基哌嗪盐酸盐代替异丙胺， 并使用 3 当量的 DIPEA制备N-[ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6-[ (2S，3R) _2，3，4-三甲基-1-哌 嗪基]-4-嘧啶基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+: 486.1。实施例199 [ (2R) -3- {2- [2~氯_6_ (3-乙基_3_羟基氮杂环丁烷基)_5_氟_4_嘧啶基] 胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 3-乙基-3-氮杂环丁醇盐酸盐将1- ( 二苯基甲基)-3-乙基-3-氮杂环丁醇(0. 200g, 0. 75mmol) (J. Med. Chem. 1993，36，801-810)和 20% Pd (OH) 2 (200mg)在乙醇(30ml)和 IN HCl (5ml)中的混合 物于55psi下用H2处理过夜。进行标准的后处理后，得到3-乙基-3-氮杂环丁醇盐酸盐。 LCMS (Μ+Η).102· 2。部分B [ (2R) -3- {2_ [2~氯_6_ (3-乙基_3_羟基氮杂环丁烷基)_5_氟_4_嘧啶基] 胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺[2356]部分A (2R)-2_({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)己酸按照类似于制备中间体A的方法，在部分A中使用己酰氯代替3-环戊基丙酰氯制 备(2R)-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)己酸。LCMS:(M+H)+:280.2。部分B {(2R)-2-[(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[(9aR)-八氢 _2H_ 批啶并[l，2_a]批 嗪-2-基]-4-嘧啶基}胼基)羰基]己基}羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用(9aR)_八氢-2H-吡啶并[1,2-a]吡嗪(J.Med. Chem. 1993，36，2311-2320)代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚 溶液作为溶剂，在部分C中使用(2R)-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基) 己酸代替(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸制备 {(2R) -2- [ (2- {2-氯-5-氟-6- [ (9aR)-八氢-2H-吡啶并[1，2-a]吡嗪-2-基]-4-嘧唆 基}胼基)羰基]己基}羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 472. 2/474. 1。实施例202N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3-(2-{5_ 氟 _2_ 甲基 _6_[ (2S，3S) _2，3，4_ 三甲
CN 101917981 A说明书179/230 页根据一般方法D，使用3-乙基-3-氮杂环丁醇盐酸盐代替部分A中的N-甲基哌嗪 制备[(2R) -3- {2- [2-氯-6- (3-乙基-3-羟基-1-氮杂环丁烷基)_5_氟-4-嘧啶基]胼 基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+459. 1。实施例200[ (2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(四氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡咯 _5 (3H)-基)_4_ 嘧
啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用六氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡咯(实施例 99)代替异丙胺制备([(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(四氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡 咯-5(3H)_基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 471. 1/473. 1。实施例201{(2R)-2-[(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[(9aR)-八氢 _2H_ 批啶并[1,2-a]吡
嗪-2-基]-4-嘧啶基}胼基)羰基]己基}羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用(2R，3R)-1，2，3_三甲基哌嗪盐酸盐(实施例198)代替部分 A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟-2-甲 基-6-[ (2R，3R) -2，3，4-三甲基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲 酰胺。LCMS :(Μ+Η)+:466· 2。 实施例204[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(3-噻吩基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_(环
戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 [2364]部分A (2S，3S)-1，2，3_三甲基哌嗪盐酸盐将(2S，3S)-2，3，4_三甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(323mg，1. 23mmol)(实施例 198)溶于20mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C (8Img)，并将内容物彻底地 除气，并在氢气球下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将 Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入2. 70mL IN HCl后，将生成的滤液真空 浓缩，得到(2S，3S)-1，2，3-三甲基哌嗪的盐酸盐(246mg,100% )0 LCMS _)+ 129. 1。部分B N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3-(2-{5_ 氟 _2_ 甲基 _6_[ (2S，3S) _2，3，4_ 三甲 基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法A，使用(2S，3S)-1,2, 3_三甲基哌嗪盐酸盐代替部分A中的吡咯烷， 并使用3当量的DIPEA制备N- [ (2R) _2_ (环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [ (2S， 3S)-2，3，4-三甲基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+466. 2。实施例203N-[(2R)-2_(环戊基甲基)_3-(2-{5_ 氟 _2_ 甲基 _6_[ (2R，3R) _2，3，4_ 三甲
基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺2-{2-氯-5-氟-6-[(3-噻吩基甲基)氨基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼三甲酸三(1，
1-二甲基乙基)酯 将2-(2，6_ 二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯 (1. 413g,2. 85mmol)溶于 THF(5mL)中。向该溶液中加入三乙胺(0. 48mL，3. 4438mmol)，随 后加入市售可得的溶于THF(ImL)中的(3-噻吩基甲基)胺(0. 322g，2. 85mmol)。搅拌后， 将反应混合物用水稀释，并将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物干燥(Na2SO4)并浓缩，以生成
2-{2-氯-5-氟-6- [ (3-噻吩基甲基)氨基]-4-嘧啶基} -1，1，2-胼三甲酸三(1，1- 二甲 基乙基)酯，为白色固体(1. 6214g,99% )。LCMS (M+H-3Boc)+ = 374. 1。2-氯-5-氟-6-[(3-噻吩基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙二盐酸盐将2-{2-氯-5-氟_6-[ (3-噻吩基甲基)氨基]-4-嘧啶基}_1，1，2-胼三甲酸三 (1，1_ 二甲基乙基)酯(1. 6214g,2. 83mmol)溶于 Me0H(28mL)和 HCl (4M 的 1，4-二噁烷溶 液)(28mL)中。将反应混合物搅拌过夜，并然后蒸发，得到2-氯-5-氟-6-[(3-噻吩基甲基) 氨基]-4 (IH)-嘧啶酮腙，推测为二盐酸盐，为暗红色固体(1. 0828g)。LCMS (M+H-2HC1)+ = 273. 9。[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(3-噻吩基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_(环 戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将2-氯-5-氟-6-[(3-噻吩基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙二盐酸盐(1. 0828g) 和(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸二异丙胺盐 (1. 63g,3. 8mmol)溶于 DMF(9mL)中。加入 ΝΜΜ(2· lmL，19. lmmol)，随后加入 HOAt (0. 512g， 3. 76mmol)和EDC (0. 722g，3. 77mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到 [(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (3-噻吩基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲 基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺，为赤褐色固体(0.7045g)。LCMS (M+H-THP)+ = 471. I0[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(3-噻吩基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_(环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2_{2-氯_5_氟_6-[(3_噻吩基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0.7045g， 1. 272mmol)溶于乙酸(SmL)和水(2mL)中。将反应混合物搅拌过夜。蒸发挥发物，并将 生成的残余物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟_6-[(3_噻吩基甲基) 氨基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为米色固体 (0. 2284g,38% )。LCMS (M+H)+ = 471. 0。实施例205((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟_6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨
基]-2_(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺
197[2389]部分A N-甲基-1-(1，3-噻唑-2-基)甲胺将市售可得的2-噻唑甲醛(3.61g，31.91mm0l)溶于异丙醇(90mL)中，将分子 筛(3. 65g)加入到反应容器中。然后将甲胺盐酸盐(17.28g，256mm0l)、乙酸钠(7. 85g, 96mmol)和氰基硼氢化钠(3. 07g，48. 9mmol)加入到反应混合物中。将混合物置于氩气下， 并搅拌3天。过滤出分子筛，并用异丙醇洗涤。将滤液蒸发，并将生成的残余物溶于乙酸乙 酯中。将有机物用饱和的NaHCO3水溶液和盐水洗涤。将合并的水层用IL的10% MeOH在 氯仿中的溶剂混合物萃取，并将合并的有机物干燥(Na2SO4),并蒸发。将粗产物通过硅胶色 谱法(0-5% MeOH的二氯甲烷溶液)纯化，生成N-甲基-1-(1，3-噻唑-2-基)甲胺，为黄 色的油状物(0. 930g,23% )。LCMS (M+H)+ = 129. 0。部分B 6-氯-5-氟-N-甲基_2_ (甲硫基)_N_ (1，3_噻唑_2_基甲基)_4_嘧啶胺将4，6-二氯-5-氟-2-(甲硫基)嘧啶(参见中间体 E) (0. 3313g，1. 563mmol)、 N-甲基-1-(1，3-噻唑-2-基)甲胺(0. 200g, 1. 5625mmol)和三乙胺(0. 26mL, 1. 8654mmol) 溶于THF(5mL)中，并搅拌过夜。然后将反应混合物用水稀释，并将水层用乙酸乙酯萃取。 将有机物干燥(Na2SO4)并浓缩，以生成6-氯-5-氟-N-甲基_2_(甲硫基)-Ν_(1，3-噻 唑-2-基甲基)-4_嘧啶胺，为黄色的油状物(0. 4928g)。LCMS (M+H)+ = 305. 0。部分C 5-氟-6-胼基-N-甲基_2_ (甲硫基)_N_ (1，3_噻唑_2_基甲基)_4_嘧啶胺将6-氯-5-氟-N-甲基_2_ (甲硫基)_N_ (1，3_噻唑_2_基甲基)~4~嘧啶胺 (0. 4928g, 1. 621mmol)溶于 5mL 的 DMSO 和胼一水合物(0. 63mL, 12. 96mmol)中。将反应器加压密封，并于80°C加热2小时。将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到 5-氟-6-胼基-N-甲基-2-(甲硫基)-N- (1，3-噻唑-2-基甲基)-4-嘧啶胺，为米色固体 (0. 2112g,43% )。LCMS (M+H)+ = 301. 0。部分D ((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟_6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨 基]-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺 [2401 ] 将5-氟-6-胼基-N-甲基-2-(甲硫基)_N_ (1，3_噻唑_2_基甲基)_4_嘧啶胺 (0. 2112g，0. 704mmol)和(2幻-3-环戊基-2_{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基] 甲基}丙酸(0. 365g,0. 846mmol)溶于 DMF(5mL)中。加入 NMM(0. 31mL，2. 8195mmol)，随后 加入HOAt (0. 115g,0. 846mmol)和EDC (0. 162g，0. 845mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物通 过RP-HPLC纯化，得到((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-6-[甲基(1，3-噻唑-2-基甲 基)氨基]-2-(甲硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基) 甲酰胺，为米色-橙色固体(0. 2601g,63% )0 LCMS (M+H)+ = 582.2。部分E ((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟_6-[甲基(1，3_噻唑_2_基甲基)氨 基]-2_(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺将((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟_6_[甲基(1，3_噻唑_2_基甲 基)氨基]_2-(甲硫基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 2601g，0.448mmol)溶于乙酸(8mL)和水(2mL)中。将该反应混合物搅 拌3天。蒸发挥发物，并将生成的残余物通过RP-HPLC纯化，得到((2R)-2-(环戊基甲 基)-3-{2-[5-氟-6-[甲基(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_2-(甲硫基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺，为米色固体(0. 1396g，63% )。LCMS :_)+ = 498. 1。实施例206[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _2_ (甲硫基)_6_ [ (1，3_ 噻唑 _2_ 基甲基)
氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 6-氯-5-氟-2-(甲硫基)-N- (1，3-噻唑_2_基甲基)_4_嘧啶胺将4，6_ 二氯-5-氟-2-(甲硫基)嘧啶(参见中间体 E) (0. 422g，1. 991mmol)、 市售可得的(1，3-噻唑-2-基甲基)胺盐酸盐(0. 300g, 1. 992mmol)和三乙胺(0. 61mL， 4. 3765mmol)溶于THF(3mL)中，并搅拌4天。将反应混合物用水稀释，并将水层用乙酸乙酯 萃取。将有机物干燥(MgSO4)并浓缩，以生成6-氯-5-氟-2-(甲硫基)-N- (1，3-噻唑-2-基 甲基)-4_嘧啶胺，为黄色-橙色固体(0. 6773g)。LCMS (M+H)+ = 291. 0。部分B 5-氟_2-(甲硫基)-6-[(1，3_噻唑-2-基甲基)氨基]_4(IH)-嘧啶酮腙将6-氯-5-氟_2-(甲硫基)-Ν-(1，3-噻唑-2-基甲基)-4_嘧啶胺(0. 6773g, 2. 336mmol)溶于DMS0(7mL)和胼一水合物(0. 91mL，18. 72mmol)中。将反应器加压密封， 并于80°C加热2小时。将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到5-氟-2-(甲硫基)_6_[(1， 3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙，为橙色固体(0. 1958g,29% )0 LCMS (M+H)+ =287. 1。部分C [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _2_ (甲硫基)_6_ [ (1，3_ 噻唑 _2_ 基甲基) 氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将5-氟_2-(甲硫基)-6-[(1，3_噻唑-2-基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙 (0. 1958g,0. 685mmol)和(2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃_2_基氧基)氨 基]甲基}丙酸(0. 355g,0. 823mmol)溶于 DMF(5mL)中。加入 NMM (0. 30mL，2. 7286mmol)，随 后加入HOAt (0. 112g,0. 824mmol)和EDC(0. 157g，0. 819mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物 通过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟-2-(甲硫基)-6- [ (1，3-噻 唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲 酰胺，为橙色固体(0. 2197g,57% ) ο LCMS (M+H)+= 568. 2。部分D [2418][ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _2_ (甲硫基)_6_ [ (1，3_ 噻唑 _2_ 基甲基) 氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-2-(甲硫基)-6-[(1，3-噻唑-2-基甲 基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 2197g， 0. 387mmol)溶于乙酸(SmL)和水(2mL)中。将该反应混合物搅拌3天。蒸发挥发物，并 将生成的残余物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-(甲硫 基)-6-[(1，3_噻唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为 米色固体(0. 0878g,47% )。LCMS (M+H)+ = 484. 2。实施例207[(2R)-3-(2-{2-氯_5_氟_6_[ (2_呋喃基甲基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 2-{2-氯-5-氟-6-[(2-呋喃基甲基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼三甲 酸三(1，1-二甲基乙基)酯将2-(2，6_ 二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯 (6. 22g, 12. 54mmol)溶于 THF(15mL)中。向该溶液中加入三乙胺(2. ImL, 15. 0667mmol), 随后加入市售可得的溶于THF(3mL)中的(2-呋喃基甲基)甲胺(1. 394g，12. 32mmol)。将 该反应搅拌过夜。然后将反应混合物用水稀释，并将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物干 燥(Na2SO4)并浓缩，以生成2-{2_氯-5-氟_6_[ (2-呋喃基甲基)(甲基)氨基]_4_嘧啶 基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯，为米色固体(7. 1439g)。LCMS (M+H)+ = 572. 3。部分B 2-氯-5-氟-N- (2_呋喃基甲基)~6~胼基_N_甲基_4_嘧啶胺将2-{2_氯-5-氟-6_[(2-呋喃基甲基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼 三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(7. 1439g, 12. 51mmol)溶于 Me0H(65mL)和 HCl (4M 的 1， 4_ 二噁烷溶液)(65mL)中。将反应混合物搅拌5小时，蒸发，并通过RP-HPLC纯化，得到 2-氯-5-氟-N-(2-呋喃基甲基)-6-胼基-N-甲基-4-嘧啶胺，为橙色固体(0. 856Ig)。 LCMS (M+H)+ = 272. 1。部分C [(2R)-3-(2-{2-氯_5_氟_6-[(2_呋喃基甲基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将2-氯-5-氟-N-(2-呋喃基甲基)_6_胼基_N_甲基_4_嘧啶胺(0. 400g)和 (2R)-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸(0. 764g， 1. 770mmol)溶于 DMF 中。加入 NMM (0. 65mL，5. 912mmol)，随后加入 HOAt (0. 241g, 1. 772mmol) 和EDC (0. 3396g，1. 771mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到 _4_嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺，为橙色固体(0. 6318g)。 LCMS (M+H)+ = 553. 2。部分D [(2R)-3-(2-{2-氯_5_氟_6-[(2_呋喃基甲基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(2_呋喃基甲基)(甲基)氨基]_4_嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 6318g， 1. 145mmol)溶于乙酸(SmL)和水(2mL)中。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发挥发物，并将 生成的残余物通过RP-HPLC纯化，得到[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(2-呋喃基甲基)(甲 基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为米色固体 (0. 3182g,59% )。LCMS (M+H)+ = 469. 2。实施例208[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [4_ (2_ 羟基乙基)哌嗪基]_4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
HO、部分A (2S)-2-甲基-4-{2-[(苯基甲基)氧基]乙基}_1_哌嗪甲酸苯甲基酯将(2S)-2-甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯(市售可得的)(lg，4. 3mmol)和苄氧基 乙醛(0. 9mL，6. 4mmol)的 DCM(50mL)溶液搅拌 30 分钟，并然后加入 NaBH(OAc)3(1. 36g， 6. 4mmol)。将该反应搅拌过夜，随后用IM NaOH终止。分离各相，并将水层用DCM萃取。 将合并的有机物用盐水洗涤，经硫酸钠干燥，并浓缩成粗的残余物，将其通过硅胶色谱 法(5-95% EtOAc的己烷溶液)纯化，得到(2S)-2-甲基-4_{2_[(苯基甲基)氧基]乙 基}-1_ 哌嗪甲酸苯甲基酯(0. 93g,58% )0 LCMS :_)+369. 1。部分B 2-[(3S)-3-甲基哌嗪基]乙醇向除气的(2S)-2-甲基-4_{2-[(苯基甲基)氧基]乙基}哌嗪甲酸苯甲基 酯(0. 93g,2. 5mmol)的Me0H(30mL)溶液中加入Pd/C(200mg)。将生成的悬浮液在氢气球 下搅拌过夜，但是LCMS显示只失去了 CBZ-基团。过滤除去催化剂，并减压除去溶剂。将剩 余的残余物溶于MeOH中，并加入另外200mg的Pd/C以及5滴浓HCl。将该混合物于50psi 下在Parr振荡器上氢化96小时，随后过滤除去催化剂。减压浓缩滤液，得到定量产率的 2-[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]乙醇盐酸盐。LCMS _)+: 145. 1。部分C
201 [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [4_ (2_ 羟基乙基)哌嗪基]~4~ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用2-[(3S)_3-甲基哌嗪基]乙醇盐酸盐代替 异丙胺制备[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[4-(2-羟基乙基)-1_哌嗪基]-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:502.2。实施例209[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (2R) _4_ (2_ 羟基乙基)_2_ 甲基 哌嗪基]_4_ 嘧
啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用2-[(R)_3-甲基-1-哌嗪基]乙醇盐酸盐(根据 实施例208，部分A和B，使用(2R)-2-甲基-1-哌嗪甲酸苯甲基酯代替(2S)-2-甲基-1-哌 嗪甲酸苯甲基酯制备)代替异丙胺制备[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(21 )-4-(2-羟基乙 基)-2_甲基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰 胺。LCMS :(M+H)+ 502. 1实施例210{(2R) -2-(环戊基甲基)_3_ [2- (5-氟 _2_ 甲基 _6_ {(2S) _2_ [1_ (1_ 吡咯烷基)环 丙基]-1-吡咯烷基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺部分A 1-(苯基甲基)-L-脯氨酸盐酸盐将1-(苯基甲基)-L-脯氨酸乙酯(13. 20g，56. 57mmol)溶于 THF(40mL)、 EtOH (40mL)和H2O (16mL)的混合物中。向该溶液中加入固体氢氧化钠(6. 789g， 169. 73mmol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。将该溶液用IN的HCl水溶液调节pH至2，并 然后用CH2Cl2 (3x50mL)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，生成的粗 产物为1_(苯基甲基)-L-脯氨酸盐酸盐(0.8g)。将水层真空浓缩，将残余物悬浮于MeOH 中，并将生成的固体沉淀物通过过滤收集，与由有机萃取物得到的产物合并，得到1_(苯基 甲基)-L-脯氨酸盐酸盐(13. 30g,97% )0 LCMS :(M+H)+ 206. 1部分B (2S)-1_(苯基甲基)-2-(1_吡咯烷基羰基)吡咯烷将1-(苯基甲基)-L_ 脯氨酸盐酸盐(2. Og,8. 247mmol)和 HOBt (1. 34g， 9. 928mmol)溶于 CH2Cl2 (50mL)中，并加入 4-甲基吗啉(3. 63mL, 33. 09mmol)、吡咯烧
202(0. 760mL,9. IOlmmol)和 EDCI (1. 906g，9. 928mmol)。将该溶液搅拌过夜，并然后用水 (50mL)洗涤。将水层用CH2Cl2 (3x50mL)萃取，并将合并的有机层经无水MgSO4干燥，并真空 浓缩。将该粗产物通过快速色谱法(Combiflash，0-100%乙酸乙酯/己烷，三乙胺)纯 化，得到(2S) -1-(苯基甲基)-2- (1-吡咯烷基羰基)吡咯烷(1. 619g，76 % )。LCMS (M+H) + 259. 2 ο部分C (2S)-1_(苯基甲基)-2-[1-(1_吡咯烷基)环丙基]吡咯烷向搅拌下的冷却至-78 V的THF (50mL)溶液中加入溴化乙基镁(11. 6mL， 34. 8mmol)，随后加入异丙醇钛(IV) (2. 042mL，6. 96mmol)，并然后加入(2S)_1_(苯基甲 基)-2-(1_吡咯烷基羰基)吡咯烷(1.619g,6. 96mmol)0将混合物温热至室温，并搅拌2h， 并然后通过LCMS检测。剩余大于40%的原料，所以将混合物搅拌过夜，并然后再次通过 LCMS检测。剩余大于20%的原料，因此加入另一批溴化乙基镁(5. 8mL, 17. 4mmol)，并将混 合物搅拌2h，再次通过LCMS检测。剩余大于5%的原料，并加入另一批溴化乙基镁(2. 32mL, 6. 96mmol)，并将混合物搅拌2h。当通过LCMS确定该反应完成时，将反应混合物用饱和的 NH4Cl水溶液(150mL)和水(50mL)稀释，并滤除生成的白色固体沉淀。将滤液的pH用6N 的NaOH水溶液调节至> 12。将水溶液用Et20(3xl00mL)萃取，并将合并的有机层经MgSO4 干燥，并真空浓缩。将该粗产物通过快速色谱法(Combiflash，0-100%乙酸乙酯/己烷， 三乙胺)纯化，得到(2S)-l-(苯基甲基)-2-[1-(1_吡咯烷基)环丙基]吡咯烷(1.0837g, 57% )。LCMS _)+ 271. 2。部分D l-{l-[(2S)-2-吡咯烷基]环丙基}吡咯烷盐酸盐将(25)-1-(苯基甲基)-2-[1-(1_吡咯烷基)环丙基]吡咯烷(1. 083g，4. OOmmo 1) 溶于Me0H(30mL)和IN HCl (8. 8mL)的混合物中，除气，并置于氩气下。加入10%Pd/ C (325mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过玻璃 纤维过滤器过滤除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的l-{l_[(2S)-2-吡咯 烷基]环丙基}吡咯烷盐酸盐(0. 978g，> 99% )0 LCMS (Μ+Η)+ :181· 2。部分E 5-氟-4-胼基-2-甲基_6_ {(2S) _2_ [1_ (1_吡咯烷基)环丙基]吡咯烷基} 嘧啶将4，6- 二氯-5-氟 _2_ 甲基嘧啶(428mg，2. 368mmol)溶于 3mL 的 MeOH 中，并然 后加入1-{1-[(2S)_2-吡咯烷基]环丙基}吡咯烷盐酸盐(489mg, 2. 256mmol)，随后加入 DIPEAd. 572mL，9. 024mmol)。将生成的反应混合物于120°C下微波加热30min，将挥发物真 空浓缩，并将残余物溶于DMSO (4mL)和MeOH(ImL)的混合物中。加入胼一水合物(2. 44mL)， 并将内容物于60°C加热过夜。然后将反应混合物冷却至室温，并通过RP-HPLC纯化，得到 5-氟-4-胼基-2-甲基-6-{(25)-2-[1-(1-吡咯烷基)环丙基]吡咯烷基}嘧啶(69mg， 10% )。LCMS (M+H)+ 321. 2。部分F {(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2- (5-氟 _2_ 甲基 _6_ {(2S) _2_ [1_ (1_ 吡咯烷基)环 丙基]-1-吡咯烷基}-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺[2471 ] 根据一般方法A，部分B和C，使用5-氟_4_胼基_2_甲基_6_ {(2S) _2_ [1_ (1_吡 咯烷基)环丙基]-1-吡咯烷基}嘧啶代替部分B中的5-氟-4-胼基-2-甲基-6-(l-吡 咯烷基)嘧啶制备{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(5_氟-2-甲基-6-{(2S)-2-[l-(l-吡 咯烷基)环丙基]-1-吡咯烷基}-4_嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺。LCMS (Μ+Η)+:518· 4。实施例211[(2R)-3-(2-{2-氯 _6-[3_( 二甲基氨基)_3_ 乙基 氮杂环丁烷
基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 1-( 二苯基甲基)-3-乙基-N，N- 二甲基_3_氨基氮杂环丁烷将甲磺酸1-( 二苯基甲基)-3_乙基氮杂环丁烷-3-基酯(1.00g，2.89mmOl) (Ellsworth, Edmund Lee ；Hoyer, Denton Wade ；Hutchings, Kim Marie ；Kendall, Jackie Diane ；Murphy,Sean Timothy ；Starr,Jeremy Tyson ；Tran,TuanPhong. WO 2005049605)、二 甲胺(2M的THF溶液，14. 45ml, 28. 9mmol)和TEA(0. 80ml, 5. 78mmol)在异丙醇中的混合物 于70°C加热过夜。进行标准的后处理，随后通过RP-HPLC纯化，得到1-(二苯基甲基)-3-乙 基-N，N-二甲基-3-氨基氮杂环丁烷(0. 215g,25. 3% )。LCMS (Μ+Η)+295. 2。部分B 3-乙基-N，N- 二甲基_3_氨基氮杂环丁烷二盐酸盐将1-( 二苯基甲基)-3_乙基-N，N-二甲基-3-氨基氮杂环丁烷(0. 215g， 0. 73mmol)在 IN HCl (5ml)和乙醇(30ml)中于 60psi 下在 Pd(OH)2-碳(IOOmg)存在下 用H2处理。进行标准的后处理，得到3-乙基-N，N-二甲基-3-氨基氮杂环丁烷二盐酸盐 (0. 165g, 112. 2% ) ο LCMS (Μ+Η)+129· 1。部分C [(2R)-3-(2-{2-氯 _6-[3_( 二甲基氨基)_3_ 乙基 氮杂环丁烷 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据实施例176，在部分C中使用3_乙基-N，N-二甲基_3_氨基氮杂环丁烷二盐酸 盐代替1-(3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐制备[(2 -3-(2-{2-氯-6-[3-(二 甲基氨基)-3-乙基-1-氮杂环丁烷基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧 代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+486. 2。实施例212((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[6-[3- ( 二甲基氨基)-3-乙基-1-氮杂环丁烷 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺. 根据一般方法C，使用3-乙基-N，N- 二甲基_3_氨基氮杂环丁烷盐酸盐(实施例 211)代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-[3-( 二甲 基氨基)-3-乙基-1-氮杂环丁烷基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙 基)羟基甲酰胺。LCMS _)+498· 3。实施例213[ (2R) -3- {2_[2_氯_6_ (3_环丙基_3_羟基氮杂环丁烷基)_5_氟_4_嘧啶 基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺.根据一般方法D，使用3-环丙基-3-氮杂环丁醇盐酸盐(Ellsworth，EdmundLee ； Hutchings, Kim Marie ；Murphy, Sean Timothy ；Powell, Sharon Anne ；Sciotti, Richard John ；Tran, Tuan Phong. WO 2005026146)代替部分 A 中的 N-甲基哌嗪制备 [(2R)-3-{2-[2-氯-6-(3-环丙基-3-羟基-1-氮杂环丁烷基)_5_氟-4-嘧啶基]胼 基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+471.0。实施例214N- [ (2R) _3_ (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_ [ (2R，5R) _2，4，5_ 三甲基 哌嗪基]_4_ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺部分A (2札5幻-1，2，5-三甲基-4-(苯基甲基)哌嗪在0°C下，向(2R，5R)-2，5_二甲基-1-(苯基甲基)哌嗪(根据 J. Med. Chem. 2006， 49，716-726，使用 N-Boc-D-丙氨酸代替 N-Boc-L-丙氨酸制备)(667mg，3. 26mmol)的二氯 甲烷(25mL)溶液中加入甲醛(0. 367mL，37%的水溶液，4. 89mmol)，随后加入三乙酰氧基硼 氢化钠(900mg，4.24mmol)。将反应混合物温热至室温，并搅拌2h，随后用二氯甲烷稀释并 用IN NaOH溶液洗涤。将有机物用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发，得到(2R，5R)-1，2，5-三 甲基-4-(苯基甲基)哌嗪(680mg，96% )。LCMS _) + :219· 1。部分B (2R，5R)-1，2，3_三甲基哌嗪盐酸盐将(2札51 )-1，2，5-三甲基-4-(苯基甲基)哌嗪(680mg，3.llmmol)溶于 50mL 的 MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(170mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球 下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填 料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入6. 5mL IN HCl后，将生成的滤液真空浓缩，得到(2R， 5R)-1，2，5-三甲基哌嗪的盐酸盐(251mg,100% )0 LCMS _)+ 129. 1。部分C N- [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_ [ (2R，5R) _2，4，5_ 三甲基-1-哌嗪基]_4_ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法G，在部分A中使用(2R，5R)-1，2，5-三甲基哌嗪盐 酸盐代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备 N- [ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2R，5R) -2，4，5-三甲基-1-哌嗪基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 486. 1。实施例215N-[(2R)-2-(环戊基甲基)_3-(2-{5_ 氟 _2_ 甲基 _6_[ (2R，5R) _2，4，5_ 三甲
基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用(2R，5R)-1，2，5_三甲基哌嗪盐酸盐(实施例214)代替部分 A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备N- [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2- {5-氟-2-甲 基-6- [ (2R，5R) -2，4，5-三甲基-1-哌嗪基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲 酰胺。LCMS :(M+H)+:466.40实施例216[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _2_ (氟甲基)_6_[ (9aS)-六氢吡嗪并[2， l-c][l，4]噁嗪_8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法A，在部分A中使用(9aS)_八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁 嗪二盐酸盐(实施例22)代替吡咯烷，使用4，6_ 二氯-5-氟-2-(氟甲基)嘧啶 代替4，6_ 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶，并使用3当量的DIPEA制备[(2R)_2_(环 戊基甲基)-3-(2-{5_氟-2-(氟甲基)-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:498.3。实施例217[2513]((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[6-(3_环丙基_3_羟基氮杂环丁烷 基)-5_氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用3-环丙基-3-氮杂环丁醇盐酸盐(Ellsworth，EdmundLee ； Hutchings, Kim Marie ；Murphy, Sean Timothy ；Powell, Sharon Anne ；Sciotti, Richard John ； Tran, Tuan Phong. WO 2005026146)代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备 ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- (3-环丙基-3-羟基-1-氮杂环丁烷基)_5_氟_2_ (甲 硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+483. 1。实施例218((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[6-[3_乙基_3-(1_吡咯烷基)_1_氮杂环丁烷 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺部分A 1-(3-乙基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐根据制备3-乙基-N，N_ 二甲基-3-氨基氮杂环丁烷二盐酸盐(实施例211)中所 述的方法，在部分A中使用吡咯烷代替二甲胺制备1-(3_乙基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷 二盐酸盐。LCMS (M+H)+155. 1。部分B ((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[6-[3_乙基_3-(1_吡咯烷基)_1_氮杂环丁烷 基]-5-氟-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用1-(3_乙基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐代替部分 A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[6-[3-乙基-3- (1-吡咯烷 基)-1_氮杂环丁烷基]-5-氟_2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰 胺。LCMS (M+H)+524. 3。实施例219[ (2R) -3- (2_ {2_氯_6_ [(环丙基甲基)氨基]_5_氟_4_嘧啶基}胼基)_2_ (环
戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
207 按照类似于实施例176的方法，使用1-环丙基甲胺代替部分C中的1_(3_甲 基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐制备[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(环丙基甲基)氨 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) +429. 1。实施例220[ (2R) -3- [2- (2_ 氯 _5_ 氟 _6_ {[2_ (3_ 噻吩基)乙基]氨基} _4_ 嘧啶基)胼
基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 2-(3-噻吩基)乙酰胺在氮气下，将市售可得的3-噻吩乙酸(2. Og, 14. 07mmol)溶于DCM(45mL)中。然 后加入草酰氯(1.35mL，15.48mm0l)，并将该反应搅拌过夜。然后在搅拌下滴加氢氧化铵 (30%的NH3溶液)(8.22mL)。将反应混合物蒸发，得到2-(3-噻吩基)乙酰胺，为米色固体 (3. 2082g)。LCMS (M+H)+ = 142. 1。部分B [2- (3-噻吩基)乙基]胺在氩气下，在0°C下在冰浴中将氢化铝锂置于THF (IOmL)中。然后加入2_(3_噻吩 基)乙酰胺(0.9828g，6.97mmol)在THF(30mL)中的悬浮液。将反应混合物于65°C加热过 夜，然后冷却至环境温度，并置于冰浴中。将该反应用水(10mL)、3N NaOH(IOmL)和另外的 水(IOmL)终止。将混合物经Celite硅藻土过滤，并将滤液用饱和的NaCl溶液洗涤，干燥 (MgSO4)并蒸发，得到[2-(3-噻吩基)乙基]胺，为黄色的油状物(0. 470g,53%)o LCMS (M+H)+ = 128.I0部分C 2-(2-氯-5-氟-6-{[2-(3-噻吩基)乙基]氨基} _4_嘧啶基)_1，1，2_胼三甲酸 三(1，1-二甲基乙基)酯将2-(2，6_ 二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯 (1. 84g,3. 71mmol)溶于THF(5mL)中。向该溶液中加入三乙胺(0. 62mL，4. 4482mmol)，随后 加入半悬浮于THF(15mL)中的[2-(3-噻吩基)乙基]胺(0. 470g,3. 70mmol)。将该反应搅 拌过夜，然后用水和饱和的NaCl稀释。将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物干燥(MgSO4)并 浓缩，以生成2- (2-氯-5-氟-6- {[2- (3-噻吩基)乙基]氨基} -4-嘧啶基)_1，1，2-胼三 甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯，为橙色油状物(2. 389g)。LCMS (M+H)+= 588. 3。部分D [2542]2-氯-5-氟-6-{[2-(3-噻吩基)乙基]氨基} _4 (IH)-嘧啶酮腙在室温下，将2-(2-氯-5-氟-6-{[2-(3-噻吩基)乙基]氨基} _4_嘧啶基)_1， 1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(2. 389g,4. 07mmol)溶于 Me0H(25mL)和 HCl (4M 的1，4-二噁烷溶液)(25mL)中。将反应混合物搅拌3天，蒸发，并通过RP-HPLC纯化，得 到2-氯-5-氟-6-{[2-(3-噻吩基)乙基]氨基} _4 (IH)-嘧啶酮腙，为褐色粘稠状固体 (0. 1401g)。LCMS (M+H)+ = 288. 0。部分E [ (2R) -3- [2_ (2_ 氯 _5_ 氟 _6_ {[2_ (3-噻吩基)乙基]氨基} _4_ 嘧啶基)胼 基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将褐色粘稠状固体的2-氯-5-氟-6-{[2-(3-噻吩基)乙基]氨基}_4(1H)-嘧 啶酮腙(0. 1401g)和(2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃_2_基氧基)氨基] 甲基}丙酸(0. 253g,0. 586mmol)溶于 DMF(7mL)中。加入 NMM(0. 27mL，2. 90mmol)，随后加 Λ HOAt (0. 080g，0. 588mmol)和 EDC (0. 112g，0. 584mmol)。搅拌过夜后，将反应混合物通过 RP-HPLC纯化，得到[(2R) -3- [2- (2-氯-5-氟-6- {[2- (3-噻吩基)乙基]氨基} _4_嘧啶 基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺，为橙色 固体(0. 1677g)。LCMS (M+H)+ = 569. 3。部分F [ (2R) -3- [2_ (2_ 氯 _5_ 氟 _6_ {[2_ (3-噻吩基)乙基]氨基} _4_ 嘧啶基)胼 基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3- [2~ (2~ 氯 _5_ 氟 _6_ {[2~ (3_ 噻吩基)乙基]氨基} _4_ 嘧啶基) 胼基]_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 1677， 0. 295mmol)溶于乙酸(SmL)和水(2mL)中。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发挥发物，并将 生成的残余物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-3-[2-(2-氯-5-氟-6-{[2-(3-噻吩基)乙 基]氨基}-4_嘧啶基)胼基]_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为米色固体 (0. 0715g,50% )。LCMS (M+H)+ = 485. 1。实施例221[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基-八氢_1 (2H)-喹喔啉基)_4_嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (4aR，8aS)-八氢 _2，3_ 喹喔啉二酮向顺式-1，2- 二氨基环己烷(4. 8g，42mmol)的二甲氧基乙烯 (dimethoxyethylene) (IOOmL)溶液中缓慢地加入草酸二乙酯(28. 5mL，210mmol)。将反应 混合物在室温下搅拌0.5h，并于100°C搅拌2h。将悬浮液冷却至室温后，将生成的白色固 体沉淀过滤收集。将该沉淀用乙醚洗涤并干燥，得到(4aR，8aS)_八氢-2，3-喹喔啉二酮(4. 6g, 66 % )。LCMS (M+H) + 169. 1。部分B (4aR, 8aS)-十氢喹喔啉将(4aR，8aS)_八氢 _2，3_ 喹喔啉二酮(4. 67g，27. 8mmol)分批加入到 IMLAH(IllmLailmmol)的乙醚(30mL)溶液中。将该反应加热回流，并在回流下搅拌4h。冷 却至室温后，将该反应通过依次加入H2O(4. 2mL)U5% NaOH(4. 2mL)和H2O(12. 6mL)终止。 将混合物搅拌0. 5h，并将该固体滤除，并用过量的EtOAc洗涤。在减压下浓缩合并的滤液， 得到(4aR，8aS)_ 十氢喹喔啉，为白色固体(3. 6g,92% ) LCMS (M+H) + 141. 1。部分C 八氢-1 (2H)_喹喔啉甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物，顺式)向(4aR，8aS)_十氢喹喔啉(1. 4g，IOmmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中加入三乙 胺(1.7mL，12mm0l)，随后滴加氯甲酸苄基酯(1. 71g，IOmrnol)。将反应混合物在室温下搅 拌2h，随后用二氯甲烷稀释，并用IN NaOH，随后用饱和的NH4Cl水溶液洗涤。将合并的 有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩，得到粗产物，将其通过Combiflash纯化，得到 八氢-1(2H)_喹喔啉甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物，顺式)(2.32g，85% )。LCMS _)+ :275· 1.部分D (4aS，8aR)-4_甲基-八氢_1 (2H)-喹喔啉甲酸苯甲基酯，(4aR，8aS)_4_甲基-八 氢-1 (2H)-喹喔啉甲酸苯甲基酯在0°C下，向八氢-1 (2H)-喹喔啉甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物)(2. 32g， 8. 5mmol)的二氯甲烷(80mL)溶液中加入甲醛(0. 76mL，37%的水溶液，10. 2mmol)，随后加 入三乙酰氧基硼氢化钠(2. 7g，12. 75mmol)。将反应混合物温热至室温，并搅拌lh，随后用 二氯甲烷稀释，并用IN NaOH溶液洗涤。将有机物用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，得到 2. 3g的4-甲基-八氢-1 (2H)-喹喔啉甲酸苯甲基酯(对映异构体的混合物，顺式)(2. 3g)， 将其通过手性LC分离，得到(4aS，8aR)-4-甲基-八氢-I (2H)-喹喔啉甲酸苯甲基酯和 (4aR，8aS)-4-甲基-八氢-1(2H)_喹喔啉甲酸苯甲基酯。使用Ab Initio振动圆二色光谱 确定绝对构型。LCMS (M+H)+ 289. 2。部分E (4aR，8aS) 甲基-十氢喹喔啉，盐酸盐将(4aS，8aR)-4_甲基-八氢_1 (2H)-喹喔啉甲酸苯甲基酯(2. 7g，9. 4mmol)溶于 140mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(400mg)，并将内容物彻底地除气，并 在氢气球下放置大约2小时，然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite 硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入19. 6mL IN HCl后，将生成的滤液真空浓缩， 得到(4aR，8aS)-l-甲基-十氢喹喔啉的盐酸盐(2. lg，100% )。LCMS (M+H)+ 155. 1。部分F [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基-八氢_1 (2H)-喹喔啉基)_4_嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法G，在部分A中使用(4aR，8aS)-l-甲基-十氢喹喔啉 盐酸盐代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备[(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (4-甲基-八氢-1 (2H)-喹喔啉基)~4~嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:512.3。实施例222((2R) -2-(环戊基甲基)_3_ {2-[5-氟_2_甲基_6_ (4-甲基-八氢_1 (2H)-喹喔
啉基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用(4aR，8aS)-l-甲基-十氢喹喔啉(制备参见实施 例221)代替部分A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备((2R) _2_ (环戊基甲 基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6- (4-甲基-八氢-1 (2H)-喹喔啉基)_4_嘧啶基]胼基} -3-氧 代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 492. 3。实施例223N-[(2R)-3-[2-(6-{[(2-氨基 _1，3_ 噻唑-4-基)甲基](甲基)氨 基} -2-氯-5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A 4-[(甲氨基)甲基]-1，3-噻唑-2-胺将4-(氯甲基)-1，3_ 噻唑-2-胺(490mg，2. 65mmol)在 40% 甲胺水溶液(25ml) 中搅拌过夜。将反应混合物蒸发。然后将残余物通过反相HPLC纯化，得到4-[(甲氨基) 甲基]-1，3-噻唑-2-胺(55mg, 15% ) LCMS (M+H) + 144. 0。部分B 2-{6-[[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基](甲基)氨基]_2_氯_5_氟_4_嘧啶 基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯将4-[(甲氨基)甲基]-1，3-噻唑-2-胺(55mg，0. 38mmol)溶于 THF(3mL)中。加 入三乙胺(0. 06mL，0. 42mmol)，随后立即加入2-(2，6- 二氯-5-氟-4-嘧啶基)_1，1，2_胼 三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(180mg，0. 38mmol)。将反应混合物搅拌过夜，用EtOAc稀 释，干燥(硫酸钠)并蒸发，得到2-{6-[[(2_氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基](甲基)氨 基]-2-氯-5-氟-4-嘧啶基}-1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(230mg,100%)o LCMS (M+H)+ 604. 2。部分C 6-[[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基](甲基)氨基]_2_氯_5_氟_4 (IH)-嘧 啶酮腙三盐酸盐[2586]将2-{6-[[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基](甲基)氨基]_2_氯_5_氟_4_嘧 啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(220mg，0. 36mmol)溶于IOmL的甲醇中， 并搅拌。向该溶液中缓慢地加入5mL的4M HCl的二噁烷溶液。将混合物搅拌3天，并蒸发， 得到6- [ [ (2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基](甲基)氨基]-2-氯-5-氟-4 (IH)-嘧啶酮 腙三盐酸盐(150mg,83% )。LCMS (M+H)+ 303. 9。部分D [(2R)-3-(2-{6_[[(2-氨基 _1，3_ 噻唑-4-基)甲基](甲基)氨 基]-2-氯-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺将6-[[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基](甲基)氨基]_2_氯_5_氟_4 (IH)-嘧 啶酮腙三盐酸盐(150mg, 0. 29mmol)、(2R) -3-环戊基-2- {[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基 氧基)氨基]甲基}丙酸(120mg, 0. 4mmol)和 HOAt (59mg, 0. 43mmol)溶于 IOmL 的 DMF 中。 加入NMM (0. 2mL, 1. 8mmol)，随后加入EDC(85mg，0. 43mmol)。在室温下搅拌过夜后，将反应 混合物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-3-(2-{6-[[(2-氨基-1，3-噻唑-4-基)甲基](甲 基)氨基]-2-氯-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺(110mg，52% )。LCMS (M+H) + 585. 2。部分E N-[(2R)-3-[2-(6-{[(2-氨基 _1，3_ 噻唑-4-基)甲基](甲基)氨 基} -2-氯-5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2-{6_[[(2-氨基_1，3_ 噻唑-4-基)甲基](甲基)氨 基]-2-氯-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡 喃-2-基氧基)甲酰胺(110mg，0. 19mmol)在4 IAcOH 水(5mL)中在室温下搅拌2 天。真空除去溶剂，并将生成的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到N- [ (2R) -3- [2- (6- {[ (2-氨 基-1，3-噻唑-4-基)甲基](甲基)氨基} -2-氯-5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基 甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺(20mg,21% )0 LCMS (M+H)+ 501. I0实施例224[ (2R) -3- (2_ {2-氯 _5_ 氟 _6_ [ (2S) _2_ (1_ 吡咯烷基甲基)吡咯烷基]_4_ 嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用市售可得的1-[(2S)_2-吡咯烷基甲基]吡咯 烷代替异丙胺制备[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2S) -2- (1-吡咯烷基甲基)吡咯烷 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 512. 3实施例225((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6_(苯基氨基)_4_嘧啶基]胼 基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺
212 根据一般方法A，使用苯胺代替部分A中的吡咯烷制备((2R)-2_(环戊基甲 基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6-(苯基氨基)-4-嘧啶基]胼基} -3-氧代丙基)羟基甲酰胺。 LCMS (M+H)+451. 2。实施例226[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基-八氢_1 (2H)-喹喔啉基)_4_嘧啶基]胼
基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (4aS，8aR) 甲基-十氢喹喔啉盐酸盐将(4aR，8aS)-4-甲基-八氢-1(2H)_喹喔啉甲酸苯甲基酯(实施例221) (2. 58g， 9. Ommol)溶于120mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(380mg)，并将内容 物彻底地除气，并在氢气球下放置大约2小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土 过滤，并将Celite硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入19. OmL IN HCl后，将生成 的滤液真空浓缩，得到(4aS，8aR)-l-甲基-十氢喹喔啉的盐酸盐(2.0g，100% )。LCMS (Μ+Η)+:155· 1。部分B [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基-八氢_1 (2H)-喹喔啉基)_4_嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法G，在部分A中使用(4aS，8aR)-l-甲基-十氢喹喔啉 盐酸盐代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备 [(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (4-甲基-八氢-1 (2H)-喹喔啉基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:512.3。实施例227 ((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[5-氟_2_甲基_6_ (4-甲基-八氢_1 (2H)-喹喔
啉基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 [2612] 根据一般方法A，使用(4aS，8aR)-l-甲基-十氢喹喔啉盐酸盐(实施例226)代替
部分A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-2-甲 基-6-(4-甲基-八氢-1(2H)_喹喔啉基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺。 LCMS (M+H)+ 492. 3。实施例228[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_[ (2S，3R) _2，3，4_ 三甲基 哌嗪基]_4_ 嘧啶基}
胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用(2R，3S)-1，2，3_三甲基哌嗪二盐酸盐(实 施例175)代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂， 在部分C中使用(2R)-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)己酸(实施 例201)代替(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸制 备[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6-[ (2S，3R) -2，3，4-三甲基-1-哌嗪基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:460.2./462. 1。实施例229[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (2R) _2_ (4_ 吗啉基甲基)-1-吡咯烷基]_4_ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用⑶_2-(吗啉-4-基甲基)_吡咯烷(Bull. Chem. Soc. 1990，63，721-727)代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为 溶剂制备[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2R) -2- (4-吗啉基甲基)-1-吡咯烷基]-4-嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+528. 2/530. 2。实施例230[(2R)-3-[2_(2-氯-6-{3_乙基_3-[乙基(甲基)氨基]氮杂环丁烷
基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A N, 3- 二乙基-N-甲基_3_氨基氮杂环丁烷二盐酸盐根据制备3-乙基-N，N_ 二甲基-3-氨基氮杂环丁烷二盐酸盐(实施例211)的所 述的方法，在部分A中使用N-甲基乙胺代替二甲胺制备N，3- 二乙基-N-甲基-3-氨基氮 杂环丁烷二盐酸盐。LCMS :(M+H)+144. 1。部分B [(2R)-3-[2-(2-氯-6-{3-乙基_3_[乙基(甲基)氨基]氮杂环丁烷 基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺按照类似于实施例176的方法，在部分C中使用N，3- 二乙基-N-甲基-3-氨 基氮杂环丁烷二盐酸盐代替1-(3_甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐制备 [(2R) -3- [2- (2-氯-6- {3-乙基-3-[乙基(甲基)氨基]-1-氮杂环丁烷基} _5_氟-4-嘧 啶基)胼基]_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+500.3。实施例231((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-(甲硫基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 根据一般方法C，使用(9aS)_八氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪二盐酸 盐(实施例22)代替部分A中的氮杂环丁烷盐酸盐制备((2R)-2_(环戊基甲 基)-3-{2-[5_ 氟-6-[(9aS) -六氢吡嗪并[2，l_c] [1，4]噁嗪-S(IH)-基]_2_(甲硫 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (Μ+ΗΓ512. 2。实施例232[(2R)-3-[2_(2-氯-6-{(2S)_2-[(二 甲基氨基)甲基]吡咯烷 基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺部分
A N，N- 二甲基-1-(苯基羰基)-L-脯氨酰胺[2640]将N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺(2. 50g, 17. 58mmol)溶于 CH2Cl2 (50mL)和水(50mL) 的混合物中，然后加入固体碳酸氢钠(2.95g，35. 16mmol)，随后加入苯甲酰氯(2. ImL, 18.45mmol)。搅拌过夜后，分离各相，并将水相用CH2Cl2 (3x50mL)萃取。将合并的有机相 经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到N，N- 二甲基-1-(苯基羰基)-L-脯氨酰胺 (4. 502g, > 99% )。LCMS (M+H)+ 247. 2。部分B 队^二甲基-1-[(2幻-1-(苯基甲基)-2-吡咯烷基]甲胺将N，N- 二甲基-1-(苯基羰基)-L-脯氨酰胺(4. 50g, 18. 269mmol)溶于 IOOmL 的THF中，冷却至0°C，并然后分批加入LiAlH4(l. 386mg，36. 54mmol)。将混合物于80°C加 热2h，然后冷却至RT。将该反应通过依次用H20(1. 5mL)、15%的NaOH水溶液(1. 5mL)和 H2O (4. 5mL)终止，并在室温下搅拌过夜。将内容物过滤，并将滤液真空浓缩，得到N，N-二甲 基-l-[(2S)-l-(苯基甲基)-2_ 吡咯烷基]甲胺(3. 7305g,94% ) LCMS _) + :219· 1。部分C 队^二甲基-1-[(25)-2_吡咯烷基]甲胺盐酸盐将队^二甲基-1-[(2幻-1-(苯基甲基)-2-吡咯烷基]甲胺(3. 730g, 17. 08mmol) 溶于MeOH(IOOmL)和IN HCl(35mL,34. 16mmol)的混合物中，除气，并置于氩气下。加入 10%Pd/C(l. 119g)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并 通过玻璃纤维过滤器过滤来除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的N，N-二 甲基-l-[(2S)-2-吡咯烷基]甲胺盐酸盐(3. 3701g，>99% )。LCMS (M+H) + 129. 1。部分D [(2R)-3-[2_(2-氯-6-{(2S)_2-[(二 甲基氨基)甲基]吡咯烷 基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用N，N-二甲基_1_[ (2S) _2_吡咯烷基]甲胺盐 酸盐代替异丙胺制备[(2R)-3-[2-(2-氯-6-{(2S)-2-[( 二甲基氨基)甲基]吡咯烷 基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 486.0。实施例233[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(l，3-噻唑-4-基甲基)氨基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 2- (3-溴-2-氧代丙基)-IH-异吲哚 _1，3 (2H) - 二酮在氮气氛下，将市售可得的邻苯二甲酰亚氨基丙酮(2. Og,9. 8522mmol)溶于二甘 醇(13mL)中，并在冰浴中冷却至0°C。滴加溴(0. 51mL，9.9242mmol)。将该反应遮蔽光线， 使其达到环境温度，并搅拌过夜。LCMS (M+H)+ = 282. 0。[2656]部分B 2-(1，3-噻唑-4-基甲基)-IH-异吲哚-1，3 (2H)-二酮将乙醚(7.5mL)加入到2_ (3_溴_2_氧代丙基)_1Η_异吲哚_1，3 (2H) - 二酮的上 述溶液中，并在冰/NaCl盐浴中冷却至0°C。然后加入硫代甲酰胺(Europeanjournal of Medicinal Chemistry, 2004, 39,867-872.) (1. 20g)的 Et0H(8mL)溶液，并将该反应搅拌过 夜。将溶剂蒸发，并将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到白色固体的2-(1，3_噻唑-4-基 甲基)-IH-异吲哚-1，3 (2H)-二酮。LCMS :_)+ = 245. 1。部分C (1，3-噻唑-4-基甲基)胺将溶于EtOH (15mL)和胼一水合物(0. 145mL，2. 98mmol)中的 2-(1，3-噻唑-4-基 甲基)-1Η-异吲哚-1，3(2H)_二酮(0. 6556g，2. 69mmol)置于密封的圆底烧瓶中，并于70°C 加热2. 5小时，然后在环境温度下搅拌过夜。用EtOH稀释后，将该固体滤除，用EtOH洗涤， 并将滤液蒸发，得到(1，3-噻唑-4-基甲基)胺，为米色固体(0. 1491g,49%)0LCMS:(M+H) + =115. 1。部分D 2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼三甲 酸三(1，1-二甲基乙基)酯向(1，3-噻唑-4-基甲基)胺(0.1491g, 1. 308mmol)的 THF(IOmL)悬浮液中加 入2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1，1，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 649g， 1. 308mmol)和三乙胺(0. 22mL, 1. 5784mmol)在 THF(2mL)中的溶液。加入另外的 THF(3mL)， 并将该反应搅拌过夜。然后将反应混合物用水稀释，并将水层用乙酸乙酯萃取。将有机物 干燥(Na2SO4)并浓缩。将生成的粗物质通过硅胶色谱法(0-100%乙酸乙酯的己烷溶液)纯 化，生成2- {2-氯-5-氟-6-[ (1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]-4-嘧啶基} -1，1，2-胼三甲 酸三(1，1-二甲基乙基)酯，为黄色的油状物(0.51g，68% )。LCMS (M-2Boc) = 375.0。部分E 2-氯-5-氟-6-[(l，3-噻唑-4-基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙将2- {2-氯-5-氟-6- [ (1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]-4-嘧啶基} -1，1，2-胼 三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯(0. 51g,0. 8868mmol)溶于 Me0H(5mL)和 HCl (4M 的 1， 4_ 二噁烷溶液)(5mL)中。将反应混合物搅拌过夜，然后蒸发，并通过RP-HPLC纯化，得到 2-氯-5-氟-6- [ (1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]-4 (IH)-嘧啶酮腙，为橙色油状物(0. 105g)。 LCMS (M+H)+ = 275. 0。部分F [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺将2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]_4 (IH)-嘧啶酮腙(0. 105g)和 (2幻-3-环戊基-2-{[甲酰基(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)氨基]甲基}丙酸(0. 182g， 0. 422mmol)溶于 DMF (5mL)中。加入 NMM (0. 2ImL, 1. 91mmol)，随后加入 HOAt (0. 063g, 0. 463mmol)和EDC (0. 088g, 0. 459mmol)。搅拌2天后，将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得 到[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]_4_嘧啶基}胼基)_2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺，为褐红色固体(0. 1133g)。 LCMS (M+H)+ = 556. 0。部分G [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1，3-噻唑-4-基甲基)氨基]_4_嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺(0. 1133g， 0. 204mmol)溶于乙酸(SmL)和水(2mL)中。将该反应混合物搅拌过夜。蒸发挥发物，并将 生成的残余物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟_6-[(1，3_噻唑-4-基 甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 0497g, 52% ) ο LCMS (M+H)+ = 472. 1。实施例234[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (2R) _2_ (氟甲基)吡咯烷基]_4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用(2R)-氟甲基吡咯烷(Bioorg. Med. Chem. Lett. 2007，17，1443-1446)代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OMHCl的乙醚溶液作 为溶剂制备[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2R) _2_ (氟甲基)-1-吡咯烷基]_4_嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(Μ+Η)+:461. 1/463.0。实施例235{(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2_ (6_ {(2S) _2_ [ ( 二甲基氨基)甲基]吡咯烷
基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用N，N- 二甲基-1- [ (2S) _2_吡咯烷基]甲胺盐酸盐代替部分A 中的吡咯烷制备{(2幻-2-(环戊基甲基)-3-[2-(6-{(2幻-2-[(二甲基氨基)甲基]吡 咯烷基}-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+: 466.2。实施例236[(2R) -3-(2-{2-氯 _5_ 氟-6-[(3R)_3-甲基 _4_ 吗啉基]_4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺[2685]根据实施例241的方法，使用(2R)-2-氨基丙醇制备 [(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (3R) -3-甲基-4-吗啉基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基 甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。实施例237N- [ (2R) _3_ (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_ [ (2S，5S) _2，4，5_ 三甲基 哌嗪基]~4~ 嘧啶
基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A (25，5幻-1，2，5-三甲基-4-(苯基甲基)哌嗪在0°C下，向(2S，5S)-2，5_ 二甲基-1-(苯基甲基)哌嗪(J. Med. Chem. 2006，49， 716-726) (770mg,3. . 77mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中加入甲醛(0. 396mL，37 % 的水溶 液，5. 28mmol)，随后加入三乙酰氧基硼氢化钠(959mg，4. 52mmol)。将反应混合物温热至室 温，并搅拌2h，随后用二氯甲烷稀释，并用IN NaOH溶液洗涤。将有机物用盐水洗涤，干燥 (MgSO4)并蒸发，得到(25，5幻-1，2，5-三甲基-4-(苯基甲基)哌嗪(782mg,95% )0 LCMS (Μ+Η)+:219· 1。部分B (2S，55)-1，2，3-三甲基哌嗪盐酸盐将(25，5幻-1，2，5-三甲基-4-(苯基甲基)哌嗪(782mg,3.58mmol)溶于 50mL 的 MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(200mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球 下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite硅藻土填 料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入7. 5mL IN HCl后，将生成的滤液真空浓缩，得到(2S， 5S)-1，2，5-三甲基哌嗪的盐酸盐(715mg,100% )0 LCMS (Μ+Η) + 129. 1。部分C N- [ (2R) _3_ (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_ [ (2S，5S) _2，4，5_ 三甲基 哌嗪基]~4~ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法G，在部分A中使用(2S，5S)-1，2，5_三甲基哌嗪盐 酸盐代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备 N- [ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2S，5S) -2，4，5-三甲基-1-哌嗪基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+:486. 1。实施例238[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (5_ 氟 _2_ 吡啶基)氨基]_2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺
219[2700] 部分A 5-氟-6-[(5-氟-2-吡啶基)氨基]_2_甲基_4 (IH)-嘧啶酮腙将2-氨基-5-氟嘧啶(110mg，Immo 1)的THF (5mL)溶液冷却至O °C，并加入 NaH (60%在油中的悬浮液)(72mg，1. 8mmol)。将反应混合物在低温下搅拌lOmin，并在室温 下搅拌20分钟，随后再次冷却至0°C—次。加入4，6- 二氯-5-氟-2-甲基嘧啶(180mg， lmmol)，并将该反应温热至室温，并搅拌1. 5小时。然后加入水，并将该溶液用EtOAc萃 取。将合并的有机物经硫酸钠干燥并浓缩，得到粗物质。将其溶于DMS0(4mL)中，并加入胼 (ImL)。将生成的混合物加热至60°C，并搅拌5小时。冷却后，5-氟_6_[ (5-氟-2-吡啶 基)氨基]-2-甲基_4 (IH)-嘧啶酮腙(63mg，25%)沉淀出来，并通过过滤分离出来。LCMS (M+H)+ 253. 1。部分B [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _6_ [ (5_ 氟 _2_ 吡啶基)氨基]_2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法A，部分B和C，在部分B中使用5_氟_6_[ (5_氟_2_吡啶基)氨 基]-2-甲基-4 (IH)-嘧啶酮腙代替5-氟-4-胼基-2-甲基-6- (1-吡咯烷基)嘧啶制备 [(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2-{5-氟-6- [ (5-氟-2-吡啶基)氨基]_2_甲基-4-嘧啶基} 胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 450. 1。实施例239[ (2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2-氰基乙基)(环丙基)氨基]_5_氟_4_嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
产VyS1T, H
NN丫N Ay^ 0H根据一般方法D，使用市售可得的3-(环丙基氨基)丙腈代替部分A中的N-甲基 哌嗪制备[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(2-氰基乙基)(环丙基)氨基]_5_氟-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+468. 1。实施例240[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3S) _3_ 甲基 _4_ 吗啉
基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (3S) -4-(5-氟_6_胼基_2_甲基_4_嘧啶基)_3_甲基吗啉向(3S)-3-甲基吗啉盐酸盐(0. 1591g，1. 156mmol，根据实施例241中所述的方法 制备的)的Me0H(3mL)溶液中加入N，N-二异丙基乙胺(0. 440mL,2. 526mmol)和4，6-二 氯-5-氟-2-甲基嘧啶(0. 2085g, 1. 152mmol)。将该溶液于140°C在微波辐射下加热30min， 并然后真空浓缩。将生成的固体用水研磨，通过真空过滤收集，并用水洗涤。向生成的固体 的二噁烷(IlmL)溶液中加入胼水合物(0. 210mL)。将混合物加热，并于80°C搅拌过夜，并然 后冷却至室温，并真空浓缩。将残余物在DCM(IOOmL)和饱和的NaHCO3水溶液(30mL)之间 分配。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到(3S)-4-(5-氟-6-胼基-2-甲 基-4-嘧啶基)-3_甲基吗啉(0. 2148g，77%产率)，为黄色油状物。LCMS _)+242. 1。部分B [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3S) _3_ 甲基 _4_ 吗啉 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺向(3S)-4_(5-氟_6_胼基-2-甲基_4_嘧啶基)_3_甲基吗啉(0. 2123g， 0. 880mmol)的DMF(4mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨 基}甲基)丙酸，N，N-二异丙基乙胺盐，异丙醇溶剂合物(327. Img, 0. 66lmmol) ,N-甲基吗 啉(0. 290ml，2.64mmol)、l-羟基-7-氮杂苯并三唑(0. 108g,0. 794mmol)和 EDC(0. 152g， 0.793mmol)。将该溶液搅拌过夜，并然后直接通过Gilson RPLC纯化。向残余物的 MeOH(7mL)溶液中加入10% Pd/C(50%水，88mg)。将混合物在气球压力下氢化lh，并然后通 过PTFE膜过滤。将生成的溶液真空浓缩，溶于EtOAc中，并真空浓缩。将该固体通过真空过 滤收集，并用己烷洗涤，得到[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-2-甲基-6- [ (3S) -3-甲 基-4-吗啉基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(0. 2326g，80%产率)，为白 色固体。LCMS (M+H)+ 439. 2。实施例241[(2R) -3-(2-{2-氯 _5_ 氟-6-[(3S)_3-甲基 _4_ 吗啉基]_4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (2S)-2_[(苯基甲基)氨基]-1-丙醇向(2S)-2-氨基-1-丙醇(5. Olg,66. 70mmol)的甲苯(130mL)溶液中加入苯甲 醛(7.08mL，70.05mmOl)。该烧瓶装配有迪安-斯达克榻分水器，并将该溶液于150°C加 热2h。然后将该溶液冷却至室温，并真空浓缩。向0°C的残余物的EtOH溶液(130mL)中加入NaBH4 (6. 31g，166. 8mmol)和足够的4NHC1的二噁烷溶液以调节pH至约2。将混合物 搅拌过夜，并然后真空浓缩。将残余物在IN的HCl水溶液(200mL)和DCM(IOOmL)之间分 配。将水相用新制的DCM(IOOmL)洗涤，并然后用6N的NaOH水溶液调节pH > 13。将水 相用DCM(2xl50mL)萃取，并将合并的有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到 (2S) -2-[(苯基甲基)氨基]-1-丙醇(10. 52g，95%),为无色油状物。LCMS (M+H) + 166. 1。部分B (5S)-5-甲基-4-(苯基甲基)-3-吗啉酮向(2S)-2-[(苯基甲基)氨基]-1-丙醇(10.52g,63. 67mmol)的 THF(65mL)溶液 中加入K2CO3 (26. 40g, 191. Ommol)的水(65mL)溶液。将剧烈搅拌的混合物冷却至0°C，并用 20分钟的时间滴加氯乙酰氯(7. IOmL, 89. 14mmol)。将混合物搅拌lh，并然后滴加另一批的 氯乙酰氯(0. 500mL,6. 278mmol)。将混合物搅拌lh，并然后将混合物用50%的NaOH水溶液 (约20mL)调节pH > 13。将混合物搅拌，并温热至室温过夜，并然后用DCM(250mL)萃取。 将有机相用IN的HCl水溶液，随后用水洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓 缩，得到(5S)-5-甲基-4-(苯基甲基)-3_吗啉酮(12.74g，97% )，为无色油状物。LCMS (M+H)+206. 1。部分C (3S) -3-甲基-4-(苯基甲基)吗啉向0°C的(5S)-5-甲基-4-(苯基甲基)-3-吗啉酮(12. 74g，62. 07mmol)的甲苯 (150mL)溶液中通过加料漏斗滴加Red-Al (65% w/w在PhMe中，38mL)。将生成的溶液于 60°C加热，并搅拌4h，然后冷却至40°C，并搅拌过夜。然后将该溶液冷却至0°C，并通过滴 加IN的NaOH水溶液(15mL)来终止。将混合物用Et2O(IOOmL)稀释，并用IN的NaOH水溶 液(IOOmL)，随后用盐水(50mL)洗涤。将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，并与 MeOH(50mL)共沸，得到(3S)_3_甲基-4-(苯基甲基)吗啉(11. 33g，95% )，为微粉红色的 油状物。LCMS (M+H)+ 192. 2。部分D (3S)-3-甲基吗啉盐酸盐向(3S)-3-甲基-4-(苯基甲基)吗啉(11. 33g,59. 24mmol)的 Me0H(150mL)溶 液中加入6N的HCl水溶液(9. 9mL, 59. 4mmol)和10% Pd/C(50%水，1. 13g)。将悬浮液在 气球压力下氢化过夜，并然后通过玻璃纤维滤器过滤。将生成的黄色溶液真空浓缩，并与 Me0H(4xl50mL)共沸，得到(3S)_3_甲基吗啉盐酸盐(8. 17g，定量产率)，为黄色的油状物， 其在高真空下固化。LCMS (M+H)+ 102. 2。部分E 2- {2-氯-5-氟_6_ [ (3S) _3_甲基_4_吗啉基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼三甲酸三 (1，1_ 二甲基乙基)酯向(3S) -3-甲基吗啉盐酸盐(0. 2059g, 1. 496mmol)的DMF(7. 5mL)溶液中加入 2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)-l，l，2-胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 7451g， 1. 498mmol)和N，N- 二异丙基乙胺(0. 575mL, 3. 301mmol)。将该溶液搅拌过夜，并然后用 Et20(150mL)稀释。将混合物用水(2x50mL)洗涤，并将合并的水相用新制的Et2O(50mL)萃 取。将该Et2O层用干净的水(50mL)洗涤，并将合并的有机相用DCM(50mL)稀释，经无水Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩，并与EtOAc共沸。将该固体通过真空过滤收集，并用己烷洗涤。 将上清液真空浓缩，并通过梯度硅胶色谱法(0%至100% EtOAc的己烷溶液；Et3N)纯 化。将所需的级分真空浓缩，并将生成的固体通过真空过滤收集，用己烷洗涤，并与第一批 的固体合并，得到2-{2-氯-5-氟-6-[ (3S)-3-甲基-4-吗啉基]-4-嘧啶基} -1，1，2-胼 三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 6610g，79% )，为白色固体。LCMS :_)+:562· 2。部分F (3S) -4- (5-氟_6_胼基_2_甲基_4_嘧啶基)_3_甲基吗啉二盐酸盐向2-{2-氯-5-氟-6-[(3S)-3-甲基_4_吗啉基]_4_嘧啶基} _1，1，2_胼三甲酸 三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 6552g，l. 166mmol)的 DCM(12mL)溶液中加入 2NHC1 的 Et2O 溶 液(12mL，24mm0l)。将该溶液搅拌2天，并将生成的混合物真空浓缩。将该固体用Et2O研 磨，并通过真空过滤收集，得到(3S)-4-(5-氟-6-胼基-2-甲基-4-嘧啶基)-3_甲基吗啉 二盐酸盐(0. 2543g，65% )，为黄色固体。LCMS :_)+262.0。部分G [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3S) _3_ 甲基 _4_ 吗啉 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺向(3S)-4-(5-氟-6-胼基-2-甲基_4_嘧啶基)_3_甲基吗啉二盐酸盐(251. 5mg， 0. 752mmol)的DMF(6mL)溶液中加入(2R)-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨 基}甲基)丙酸，N，N-二异丙基乙胺盐，异丙醇溶剂合物(306. lmg，0.619mmol)、N-甲基吗 啉(0. 410ml，3. 73mmol)、l-羟基-7-氮杂苯并三唑(0. IOlg,0. 742mmol)和 EDC(0. 142g, 0.741mmol)。将该溶液搅拌过夜，并然后直接通过Gilson RPLC纯化，得到[(2R)_2_(环戊 基甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基-6-[(3S)-3-甲基-4-吗啉基]-4-嘧啶基}胼基)_3_氧 代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(314.6!1^，93%)，为橙色泡沫状物质。LCMS:(M+H)+: 549.2。部分H [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3S) _3_ 甲基 _4_ 吗啉 基]-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺向[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2_ {5_ 氟 _2_ 甲基 _6_ [ (3S) _3_ 甲基 _4_ 吗啉 基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(309. Img,0. 563mmol) 的甲醇(6mL)溶液中加入20% Pd(0H)2/C(50%水，62mg)。将悬浮液氢化lh，并然后通过 PTFE膜过滤。将生成的溶液真空浓缩，并通过Gilson RPLC纯化，得到[(2R)-2-(环戊基 甲基)-3-(2-{5-氟-2-甲基-6-[(3S)-3-甲基-4-吗啉基]-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代 丙基]羟基甲酰胺(94. Omg, 36% )，为白色固体，随后由EtOAc-Et2O结晶。LCMS _)+ 459.1。实施例242N- [ (2R) _3_ (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_ [ (3S，5S) _3，4，5_ 三甲基 哌嗪基]~4~ 嘧啶
基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A (3S，5S)-3，5_ 二甲基-2-哌嗪酮将N-{(1S)_2-[双(苯基甲基)氨基]甲基乙基}_L_丙氨酸甲酯(J. Org. Chem. 1995，60，4177-4183) (2. 156g，6. 33mmol)、37 % 浓盐酸(0.805mL)、5 % 钯/碳 (0. 863g)和Et0H(40mL)的混合物在氢气球下氢化48h。将混合物通过Celite硅藻土过 滤，并将该固体用MeOH和CH2Cl2洗涤。将滤液合并，并在减压下浓缩。将残余物再溶于 EtOH(55mL)中，加入对甲苯磺酸(0. 344g)，并将混合物加热回流16h。将混合物在减压下 浓缩，并在CH2Cl2和NaHCO3之间分配。将水层用CH2Cl2反萃取，并将合并的有机层干燥 (MgSO4),过滤，并在减压下浓缩。将残余物通过快速色谱法(9 1，CH2Cl2=MeOH)纯化，得 到N-{(IS)-I-甲基-2-[(苯基甲基)氨基]乙基}-L-丙氨酸甲酯(685mg,50% )0 LCMS (M+H)+ 129. 1。将剩余的水层再用40%异丙醇的CHCl3溶液萃取两次，并将合并的有机层 干燥(Na2SO4),过滤，并浓缩，得至Ij (3S，5S)-3，5-二甲基-2-哌嗪酮(306mg,38% ) LCMS (Μ+Η)+:129· 1。部分B (3S，5S)-3，4，5_ 三甲基-2-哌嗪酮在室温下，向(3S，5S)-3，5_ 二甲基-2-哌嗪酮的甲醇(12mL)溶液中加入甲醛 (0. 345mL，37%的水溶液，4. 6mmol)，随后加入硼氢化钠(261mg，6. 9mmol)。将反应混合物 搅拌2h，随后用二氯甲烷稀释，并用IN NaOH溶液洗涤。将水层用CH2Cl2反萃取三次，并将 合并的有机层用盐水洗涤，干燥(MgSO4)并蒸发，得到(3S，5S)-3，4，5-三甲基-2-哌嗪酮 (128mg,39% ) LCMS (M+H) + 143. 1。部分C (2S，6S)-1，2，6-三甲基哌嗪盐酸盐将IM LAH 的 THF 溶液(3mL，3mmol)滴加到(3S，5S) _3，4，5_ 三甲基-2-哌嗪酮 (123mg,0. 86mmol)中。将该反应温热至室温，然后在室温下搅拌40min，并再回流5小时。 冷却至室温后，将该反应通过依次加入H2O(0. 114mL)U5%Na0H(0. 114mL)和吐0(0. 342mL) 来终止。将混合物搅拌0.5h，并将该固体滤除，并用过量的THF洗涤。向合并的滤液中加入 1.8mL IN HC1，随后减压浓缩，得到(2S，6S)-1，2，6-三甲基哌嗪的盐酸盐(162mg,93% )0 LCMS (M+H)+ :129· 1。部分D N- [ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 ~5~ 氟 _6_ [ (3S，5S) _3，4，5_ 三甲基 哌嗪基]~4~ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)~3~氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法G，在部分A中使用(2S，6S)-1，2，6_三甲基哌嗪盐 酸盐代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2. 1]庚烷二氢溴酸盐制备 N- [ (2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (3S，5S) -3，4，5-三甲基-1-哌嗪基]_4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 486. 1。[2762]实施例243[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _2_ 甲基 _6_ [ (2S) _2_ (4-吗啉基甲
基)-1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 4- [ (2S) -2-吡咯烷基甲基]吗啉盐酸盐根据实施例264，部分A至部分C，在部分A中使用市售可得的吗啉代替哌啶制备 4-[(2S)-2-吡咯烷基甲基]吗啉盐酸盐。LCMS :_)+ 171. 1。部分B 4- {[ (2S)-1-(5_氟_6_胼基_2_甲基_4_嘧啶基)_2_吡咯烷基]甲基}吗啉按照类似于实施例210，部分E和部分F的方法，在部分E中使用4_[(2S)_2_吡 咯烷基甲基]吗啉盐酸盐代替l-{l_[(2S)-2-吡咯烷基]环丙基}吡咯烷盐酸盐制备 4-{[(2S)-l-(5-氟-6-胼基-2-甲基-4-嘧啶基)-2_吡咯烷基]甲基}吗啉。LCMS (M+H)+508. 2。实施例244[ (2R) -3- {2_ [2_ 氯 _5_ 氟 _6_ (3_ 氟 氮杂环丁烷基)_4_ 嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用3-氟氮杂环丁烷盐酸盐(Hulin，Bernard ； Piotrowski, David W. US 2005256310)代替部分A中的N-甲基哌嗪制备 [(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (3-氟-1-氮杂环丁烷基)~4~嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+433. O。实施例245[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (2S) _2_ (羟基甲基)吡咯烷基]_4_ 嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用市售可得的(2S)-2_吡咯烷基甲醇代替异丙胺 制备[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(2S)-2-(羟基甲基)-1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+:459. 1。[2779]实施例246[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(2-甲基吡唑烷基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环
戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 3-氧代-1-吡唑烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯向3-吡唑烷酮盐酸盐(3. 84g，31. 33mmol)在水(50ml)和二噁烷(IOml)中的混 合物中缓慢地加入碳酸钠(6.64g，62.66mmol)，随后加入焦碳酸双(1，1_ 二甲基乙基)酯 的二噁烷溶液(20mL)。将混合物于室温下搅拌1小时。加入水(50ml)，并将混合物用二氯 甲烷(2xl50mL)萃取。将合并的有机溶液用水(2x50ml)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到 3_ 氧代-I-吡唑烷甲酸 1，1_ 二甲基乙基酯(4. OOg,68. 6% )。LCMS (M+H)+186. 9。部分B 2-甲基-3-氧代-1-吡唑烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯向3-氧代-1-吡唑烷甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.00g，5. 37mmol)和碳酸钾 (0. 89g,6. 44mmol)在DMF(IOml)中的混合物中加入碘甲烷(2M的MTBE溶液，3. 22ml， 6.44mmol)。将反应混合物于室温下搅拌2h。LCMS表明反应完成。将混合物用乙酸乙酯/ 己烷(1 1，150ml)稀释，并用水(5x50ml)、盐水(50ml)洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到 2-甲基-3-氧代-1-吡唑烷甲酸1，1- 二甲基乙基酯(0. 57g，53. 0%) ο LCMS _)+201· 0。部分C 2-甲基-1-吡唑烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯向2-甲基-3-氧代-1-吡唑烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(0.98g，4.89mmol)的无 水二氯甲烷溶液中加入甲硼烷二甲基硫醚络合物(1. 16ml, 12. 24mmol)。将混合物于室温下 搅拌过夜。LCMS表明剩余 40%的原料。加入另一批的甲硼烷二甲基硫醚络合物(0. 5ml, 5.28mmol)，并继续搅拌过夜。将甲醇滴加到反应混合物中直至停止产生气泡。然后加入 水(Iml)，并将混合物回流1小时。冷却至室温后，将混合物真空浓缩至干。将残余物溶于 水(30ml)和二氯甲烷(45ml)中，将有机层分离，并将水层用二氯甲烷(45mL)萃取。将合 并的有机溶液干燥(Na2SO4),过滤并浓缩，得到2-甲基-1-吡唑烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯 (0. 48g，52. 7% ) ο LCMS (2M+H) +372. 9。部分D 1-甲基吡唑烷盐酸盐将2-甲基-I-吡唑烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(0. 48g，2. 58mmol)在4N HCl的二 噁烷溶液(5ml)中的溶液于室温下搅拌过夜。LCMS表明反应完成。真空除去挥发物，得到 1-甲基吡唑烷盐酸盐(0.41g，推测为77%纯)，为白色固体。部分E [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(2-甲基吡唑烷基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺[2796]按照类似于实施例176的方法，在部分C中使用1_甲基吡唑烷盐酸盐代替 1-(3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐制备[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(2-甲 基-1-吡唑烷基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) +444. 1。实施例247[ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _6_ [ (2S) _2_ (2_ 羟基乙基)吡咯烧
基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分 A 2- [ (2S) -2-吡咯烷基]乙醇根据文献方法(W09748681，1997)，使用⑶_2_吡咯烷甲醇代替(R)-对映异构体制备2-[(2S)-2-吡咯烷基]乙醇。部分B [ (2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟 _6_ [ (2S) _2_ (2_ 羟基乙基)吡咯烧 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法A，使用2-[(2S)_2-吡咯烷基]乙醇代替部分A中的吡咯烷制备 [(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (2S) _2_ (2-羟基乙基)-1-吡咯烷基]_2_甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:453. 1。实施例248[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _5_ 氟 _6_ [ (2S) _2_ (2_ 羟基乙基)吡咯烷基]_4_ 嘧啶基}
胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用2-[(2S)-2-吡咯烷基]乙醇(实施例247)代替 异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂制备[(2R) -3- (2- {2-氯 -5-氟-6-[ (2S)-2-(2-羟基乙基)-1-吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧 代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 473. 1/475. 2。实施例249[(2R)-3-{2-[2-氯 _5_ 氟 _6_ ((2S) _2_ {[ (2_ 羟基乙基)(甲基)氨基]甲 基}-1-吡咯烷基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺[2812] 按照类似于实施例264的方法，在部分A中使用市售可得的2_(甲氨基)乙醇代 替哌啶制备[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-((2S)-2-{[(2-羟基乙基)(甲基)氨基]甲 基}-1_吡咯烷基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 517. 0。实施例250[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(2S)-2_({甲基[2_(甲氧基)乙基]氨基}甲
基)"I"吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 按照类似于实施例264的方法，在部分A中使用市售可得的N-甲基_2_ (甲氧基) 乙胺代替哌啶制备[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(2幻-2-({甲基[2_(甲氧基)乙基]氨 基}甲基)-1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰 胺。LCMS (M+H)+ 530. 1。实施例251[(2R)-3-{2_[2-氯 _6-(3，3-二氟-1-氮杂环丁烷基)-5-氟-4-嘧啶基]胼
基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 按照类似于实施例176的方法，在部分C中使用3，3_ 二氟氮杂环丁烷盐酸 盐(Carling, William Robert ；Mitchinson, Andrew ；Russell, Michael GeoffreyNeil ； Street, Leslie Joseph. WO 2000047582)代替 1_(3_ 甲基 _3_ 氮杂环丁烷基)吡咯烧二 盐酸盐制备[(2R)-3-{2-[2-氯-6-(3，3-二氟-1-氮杂环丁烷基)-5_氟-4-嘧啶基]胼 基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+450.9。实施例252[(2 -3-(2-{6-[(25)-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氟-2-甲基 _4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法F，在部分A中使用市售可得的(2S)-2_吡咯烷甲腈盐酸盐代替 3-吡咯啉制备[(2R) -3- (2- {6- [ (2S0-2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基} 胼基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:434. 1。实施例253((2R) -2-(环戊基甲基)_3_ {2_[6_ ((2S0-2- {[乙基(甲基)氨基]甲基} 吡
咯烷基)-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 按照类似于实施例243的方法，在部分A中使用市售可得的乙基(甲基)胺代替 吗啉制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [6- ((2S) _2_ {[乙基(甲基)氨基]甲基} -1-吡 咯烷基)-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+: 480.3。实施例254 {(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2_ (6_ {(2S) _2_ [ ( 二乙基氨基)甲基]吡咯烷
基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺 按照类似于实施例243的方法，在部分A中使用市售可得的二乙胺代替吗啉 制备{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(6-{(2S)-2-[( 二乙基氨基)甲基]吡咯烷 基}-5_氟-2-甲基-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 494. 4。实施例255[(2R)-3-{2-[2-氯 _6_ ((2S) _2_ {[乙基(甲基)氨基]甲基}_1_ 吡咯烷
基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 按照类似于实施例197的方法，在部分A中使用市售可得的乙基(甲基)胺代 替哌啶制备[(2 -3-{2-[2-氯-6-((2幻-2-{[乙基(甲基)氨基]甲基}_1_吡咯烷 基)-5-氟-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 500.1。[2838]实施例256[(2R)-3-[2_(2-氯-6-{(2S)_2-[(二 乙基氨基)甲基]吡咯烷
基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 按照类似于实施例264的方法，在部分A中使用市售可得的二乙胺代替哌啶制备 [(2R) -3- [2- (2-氯-6- {(2S) _2_ [(二乙基氨基)甲基]吡咯烷基} _5_氟-4-嘧啶基) 胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 514. 0。实施例257[ (2R) -3- (2_ {2_ 氯 _6_ [ (2S) _2_ 氰基 吡咯烷基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法D，使用市售可得的(2S)-2_吡咯烷甲腈盐酸盐代替部分A中的 N-甲基哌嗪制备[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2S) -2-氰基-1-吡咯烷基]-5-氟-4-嘧啶基} 胼基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:454.0。实施例258[ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2_ {5_ 氟 _6_ [ (2S) _2_ (羟基甲基)哌啶基]_2_ 甲
基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (2S) -2-(羟基甲基)-1-哌啶甲酸苯甲基酯将(2S)-1_{[(苯基甲基)氧基]羰基}-2_哌啶甲酸(1.0g，3.798mmOl)的 THF (5mL)溶液冷却至-18 °C，并用10分钟时间加入甲硼烷-THF络合物(3. 798mL， 3.798mmol)。将混合物在搅拌下温热至室温过夜，然后冷却至0°C，并加入水(4mL)，随后 加入K2C03(1.4g)。分离各相，并将水相用Et20(3x25mL)萃取。将合并的有机相用盐水 (lx25mL)洗涤，并经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩，得到(2S)-2-(羟基甲基)-1-哌啶 甲酸苯甲基酯(815mg,86% ) LCMS (M+H) + 250. 2。部分B (2S) -2-哌啶甲酸盐酸盐将(2S)-2_(羟基甲基)-l-哌啶甲酸苯甲基酯(815mg，3. 26mmol)溶于
230MeOH(30mL)和IN HCl (7. 19mL，7. 19mmol)的混合物中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(225mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过 玻璃纤维过滤器过滤来除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的N，N-二甲 基-2- (3-吡咯烷基)-2-丙胺盐酸盐(492mg, 99% )0 LCMS (M+H) + 116. 1部分C [ (2R) -2-(环戊基甲基)_3_ (2_ {5_ 氟 _6_ [ (2S) _2_ (羟基甲基)哌啶基]_2_ 甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺按照类似于实施例210，部分E和部分F的方法，在部分E中使用N，N- 二甲 基-2-(3-吡咯烷基)-2_丙胺盐酸盐代替1-{1-[(2S)_2-吡咯烷基]环丙基}吡咯烷盐酸 盐制备[(2R) -2-(环戊基甲基)-3-(2- {5-氟-6- [ (2S) _2_ (羟基甲基)-1-哌啶基]-2-甲 基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 453. 3。实施例259[ (2R) -3- {2_ [2_氯_5_氟_6_ (2_乙基吡唑烷基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环
戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺.部分A 1-乙基吡唑烷盐酸盐根据制备1-甲基吡唑烷盐酸盐(实施例246)的所述方法，在部分B中使用碘乙 烷代替碘甲烷制备1-乙基吡唑烷盐酸盐。LCMS (M+H)+102. 2。部分B [ (2R) -3- {2_ [2_氯_5_氟_6_ (2_乙基吡唑烷基)_4_嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺按照类似于实施例176的方法，在部分C中使用1_乙基吡唑烷盐酸盐代替 1-(3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐制备[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(2-乙 基-1-吡唑烷基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) +458. 3。实施例2601-{2-氯-6-[2_((210-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-4-嘧啶基} -N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺 部分 A N，N- 二乙基-1-(苯基甲基)-L-脯氨酰胺[2872]按照类似于实施例210，部分A至部分B的方法，在部分B中使用市售可得的二甲 基胺代替吡咯烷制备N, N- 二乙基-1-(苯基甲基)-L-脯氨酰胺。LCMS (M+H)+ 261. 1。部分B N，N- 二乙基-L-脯氨酰胺盐酸盐将N，N- 二乙基-1-(苯基甲基)-L-脯氨酰胺(1. 603g，6. 156mmol)溶于 MeOH (50mL)和IN HCl (14mL, 14mmol)的混合物中，除气，并置于氩气下。加入10%Pd/ C(480mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过玻璃 纤维过滤器过滤来除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的N，N- 二乙基-L-脯 氨酰胺盐酸盐(1. 658g，> 99% )0 LCMS (M+H) + 171. 1。部分C 1-{2-氯-6-[2_((210-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-4-嘧啶基} -N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺根据一般方法E，在部分A中使用N，N- 二乙基-L-脯氨酰胺盐酸盐代替异丙胺 制备1-{2-氯-6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-4-嘧啶基} -N，N- 二甲基-L-脯氨酰胺。LCMS (M+H) + 528. 3。实施例261N-[(2R) -3-(2-{2-氯 _6_[ (2R，5R) _5_ 乙基-2，4- 二 甲基-1-哌嗪
基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 部分A (2R，5R) _2_乙基-1，5_ 二甲基_4_ (苯基甲基)哌嗪在0°C下，向(2R，5R)-5-乙基_2_甲基_1_(苯基甲基)哌嗪(根据J.Med· Chem. 2006，49，716-726中所述的方法，使用Boc-D-2-氨基丁酸代替N-Boc-L-丙氨酸制 备)(902mg，4. 13mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中加入甲醛(0. 435mL，37 %的水溶液， 5. 78mmol)，随后加入三乙酰氧基硼氢化钠(1050mg，4. 96mmol)。将反应混合物温热至室 温，并搅拌2h，随后用二氯甲烷稀释，并用IN NaOH溶液洗涤。将有机物用盐水洗涤，干燥 (MgSO4)并蒸发，得到(2R，5R)-2-乙基-1，5-二甲基-4-(苯基甲基)哌嗪(875mg,91% )0 LCMS (M+H)+233. 3。部分B (2R，5R) _2_乙基_1，5_ 二甲基哌嗪盐酸盐将(2R，5R)-2-乙基-1，5-二甲基-4-(苯基甲基)哌嗪(873mg，3.76mmol)溶于 50mL的MeOH中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C (175mg)，并将内容物彻底地除气，并 在氢气球下放置大约3小时。然后将内容物除气，并通过Celite硅藻土过滤，并将Celite 硅藻土填料(pad)用DCM和MeOH洗涤。加入7. 9mL IN HCl后，将生成的滤液真空浓缩，得 到(2R，5R)-2-乙基-1，5-二甲基哌嗪的盐酸盐(800mg,100% )0 LCMS (M+H) + 143. 1。部分C [2889]N-[(2R)-3-(2_{2-氯 _6_[ (2R，5R) _5_ 乙基-2，4- 二 甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺根据一般方法G，在部分A中使用(2R，5R)-2-乙基_1，5_ 二甲基哌嗪 盐酸盐代替(lS，4S)-2-甲基-2，5-二氮杂二环[2.2，1]庚烷二氢溴酸盐制备 N- [ (2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2R，5R) -5-乙基 _2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 500. 3。实施例262N- [ (2R) _2_ (环戊基甲基)_3_ (2_ {6_ [ (2R，5R) _5_ 乙基 _2，4_ 二甲基 哌嗪 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺 根据一般方法A，使用(2R，5R)-2-乙基_1，5_ 二甲基哌嗪盐酸盐(实施 例261)代替部分A中的吡咯烷，并使用3当量的DIPEA制备N_[ (2R)-2-(环戊基甲 基)-3- (2- {6-[ (2R，5R) -5-乙基-2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟_2_甲基-4-嘧啶基} 胼基)-3-氧代丙基]-N-羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 480. 1。实施例263((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基-6-(3_甲基-1-氮杂环丁烷
基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺. 按照类似于实施例182的方法，在部分A中使用3_甲基氮杂环丁烷盐酸盐 (Journal of Heterocyclic Chemistry，1971，8，961_6)代替 1_(3_ 甲基 _3_ 氮杂环丁烷 基)吡咯烷二盐酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2-[5-氟-2-甲基-6- (3-甲基-1-氮 杂环丁烷基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS :(M+H)+409. 1。实施例264[(2R) -3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[ (2S) _2_ (1_ 哌啶基甲基)_1_ 吡咯烷基]_4_ 嘧啶
基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (2S)-1_(苯基甲基)-2-(1_吡咯烷基羰基)吡咯烷将1-(苯基甲基)-L_ 脯氨酸盐酸盐(2. Og,8. 247mmol)和 HOBt (1. 34g，
H9. 928mmol)溶于 CH2Cl2 (50mL)中，并将 4-甲基吗啉(2. 72mL, 24. 822mmol)、哌啶(0. 981mL, 9. 929mmol)和EDCI (1. 906g，9. 928mmol)加入到该溶液中。搅拌过夜后，将该溶液用水 (50mL)洗涤，并将水层用CH2Cl2 (3x50mL)萃取。将合并的有机层经无水MgSO4干燥并真空浓 缩，得到(2S)-l-(苯基甲基)-2-(1_吡咯烷基羰基)哌啶(0.901g，40% )。LCMS:(M+H)+: 273. 1。部分B 1-{[(2幻-1-(苯基甲基)-2-吡咯烷基]甲基}哌啶将(2S)-1_(苯基甲基)-2-(1_吡咯烷基羰基)哌啶(901mg,3. 307mmol)溶于 20mL的THF中，冷却至0°C，并然后分批加入LiAlH4 (251mg, 6. 615mmol)。将混合物于80°C 加热2h，然后冷却至RT。将该反应连续用H20(0. 300mL)、15%的NaOH水溶液(0. 300mL) *H20(0.900mL)终止，并在室温下搅拌过夜。将内容物过滤，并将滤液真空浓缩，得到 1-{[(25)-1-(苯基甲基)-2-吡咯烷基]甲基}哌啶(710mg，83%)。部分C 1-[(2S)_2-吡咯烷基甲基]哌啶盐酸盐将1-{[(2S)-1_(苯基甲基)-2_吡咯烷基]甲基}哌啶(710mg，2. 747mmol)溶于 MeOH(20mL)和IN HCl (6mL，6. 044mmol)的混合物中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/ C (213mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过玻璃 纤维过滤器过滤来除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的l-[(2S)-2-吡咯烷 基甲基]哌啶盐酸盐(692mg，> 99% ) ο LCMS (M+H)+ 169. 2。部分D [(2R)-3-(2-{2-氯 _5_ 氟 _6_[ (2S) _2_ (1_ 哌啶基甲基)_1_ 吡咯烷基]_4_ 嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用1-[(2S)_2-吡咯烷基甲基]哌啶盐酸盐代替异 丙胺制备[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2S) -2- (1-哌啶基甲基)吡咯烷基]_4_嘧啶 基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:581.4。实施例265((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基-6-(2_甲基-1-氮杂环丁烷 基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺(非对映异构体的混合物) 按照类似于实施例182的方法，在部分A中使用2_甲基氮杂环丁烷盐酸盐 (J. Org. Chem. 1961，26，138-144)代替1_ (3-甲基-3-氮杂环丁烷基)吡咯烷二盐酸盐制 备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6_(2_甲基氮杂环丁烷基)_4_嘧 啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺，为非对映异构体的混合物。LCMS:(M+H)+409.2。实施例266[ (2R) -3- {2- [2-氯_5_氟_6_ (2_甲基氮杂环丁烷基)~4~嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(非对映异构体的混合物) [2920]根据一般方法D，使用2-甲基氮杂环丁烷盐酸盐(J. Org. Chem. 1961，26，138-144) 代替部分A中的N-甲基哌嗪制备[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(2-甲基氮杂环丁烷 基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺，为非对映异构体的 混合物。LCMS (M+H)+429. 1。实施例267[ (2R) -3- [2_ (2-氯 _6_ {(2S) _2_ [ ( 二甲基氨基)甲基]哌啶基} _5_ 氟 _4_ 嘧 啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (2S)-2_[( 二甲基氨基)羰基]-1-哌啶甲酸苯甲基酯将(2S) -1- {[(苯基甲基)氧基]羰基} -2-哌啶甲酸(2. 0g，7. 595mmol)和 HOBt (1. 231g,9. 114mmol)溶于 CH2Cl2 (40mL)中，并加入 4-甲基吗啉(2. 5mL，22. 78mmol)、 2. OM 二甲基胺的 THF 溶液(4. 55mL，9. 114mmol)和 EDCI (1. 750g，9. 114mmol)。将该溶液搅 拌过夜，并然后用IN HCl (25mL)洗涤，并将水层用CH2Cl2 (3x25mL)萃取。将合并的有机层 经无水MgSO4干燥并真空浓缩。将该粗产物通过快速色谱法(Combiflash，0-100%乙酸乙酯 /己烷)纯化，得到(2S)-2-[( 二甲基氨基)羰基]-1-哌啶甲酸苯甲基酯(1.919g，87%)。 LCMS (M+H)+291. 1。部分B (2S) -N, N- 二甲基_2_哌啶甲酰胺盐酸盐将(2S)-2_[( 二甲基氨基)羰基]-I-哌啶甲酸苯甲基酯(1.918g，6.609mmOl)溶 于Me0H(40mL)和IN HCl (14. 53mL, 14. 53mmol)的混合物中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(575mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过玻 璃纤维过滤器过滤来除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的(2S)-N，N-二甲 基-2-哌啶甲酰胺盐酸盐(1. 483g，> 99% )0 LCMS (Μ+Η)+ :157· 2。部分C (2S) -N, N- 二甲基(苯基羰基)_2_哌啶甲酰胺将(2S)_N，N- 二甲基_2_哌啶甲酰胺盐酸盐(880mg，4. 567mmol)溶于 CH2Cl2 (15mL)和水(15mL)的混合物中，并然后加入固体碳酸氢钠(1. 534g, 18. 268mmol), 随后加入苯甲酰氯(0. 556mL，4. 795mmol)。搅拌过夜后，分离各相，并将水相用 CH2Cl2 (3x50mL)萃取。将合并的有机相经无水MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。将该粗产物通过快速色谱法(Combif lash，0-10%甲醇/ 二氯甲烷)纯化，得到(2S)-N，N-二甲基-1-(苯 基羰基)-2_哌啶甲酰胺(883mg,74% )。LCMS _)+ 未检测。部分D 队^二甲基-1-[(2幻-1-(苯基甲基)-2-哌啶基]甲胺将(2S)_N，N-二甲基-l-(苯基羰基)-2-哌啶甲酰胺(883mg，3. 396mmol)溶于 20mL的THF中，冷却至0°C，并然后分批加入LiAlH4(1. 386mg，36. 54mmol)。将混合物于 80°C加热2h，然后冷却至RT。将该反应依次用H2Od. OmL)、15%的NaOH水溶液(1. OmL)和 H2O (3. OmL)终止，并在室温下搅拌过夜。将内容物过滤，并将滤液真空浓缩，得到N，N-二甲 基-l-[(2S)-l-(苯基甲基)-2_ 哌啶基]甲胺(590mg，75% )。LCMS (M+H) + 233. 1。部分E 队^二甲基-1-[(25)-2_哌啶基]甲胺盐酸盐将N，N-二甲基-1-[(2S)-1_(苯基甲基)-2_ 哌啶基]甲胺(590mg,2. 539mmol) 溶于Me0H(20mL)和IN HCl (5. 5mL,5. 5mmol)的混合物中，除气，并置于氩气下。加入10% Pd/C(117mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过 玻璃纤维过滤器过滤来除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的N，N-二甲 基-l-[(2S)-2-哌啶基]甲胺盐酸盐(425mg,78% )0 LCMS (M+H) + 未检测。部分F [ (2R) -3- [2- (2_ 氯 _6_ {(2S) _2_ [ ( 二甲基氨基)甲基]哌啶基} _5_ 氟 _4_ 嘧 啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用N，N- 二甲基_1_[ (2S) _2_哌啶基]甲胺盐 酸盐代替异丙胺制备[(2R)-3-[2-(2-氯-6-{(2S)-2-[( 二甲基氨基)甲基]哌啶 基} -5-氟-4-嘧啶基)胼基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 501. 1。实施例268[ (2R) -3- (2_ {2-氯 _5_ 氟 _6_ [ (2S) _2_ 苯基 吡咯烷基]_4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用(S)-降烟碱(J. Org. Chem. 2001，66， 6305-6312)代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂制备 [(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2S) -2-苯基-1-吡咯烷基]_4_嘧啶基}胼基)-2-(环戊 基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 506. 2/508. 2。实施例269[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-((2幻-2-{[甲基(1-甲基乙基)氨基]甲基}_1_吡
咯烷基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 按照类似于实施例264的方法，在部分A中使用市售可得的甲基(1_甲基乙基) 胺代替哌啶制备[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-((2幻-2-{[甲基(1-甲基乙基)氨基]甲 基}-1_吡咯烷基)-4_嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (Μ+Η). :514· 3。实施例270((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-((2S)-2_{[甲基(1_甲基乙
基)氨基]甲基}-1_吡咯烷基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 按照类似于实施例243的方法，在部分A中使用市售可得的甲基(1_甲基乙基)胺 代替吗啉制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6- ((2S) -2- {[甲基(1-甲基 乙基)氨基]甲基}-1_吡咯烷基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS: (Μ+Η)+ 494. 2。实施例271((2R)-2_(环戊基甲基)-3-{2-[5_ 氟-2-甲基 _6_((2S)_2_{[甲基(丙基)氨
基]甲基}-1_吡咯烷基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺 按照类似于实施例243的方法，在部分A中使用市售可得的N-甲基丙胺代替 吗啉制备((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基-6-((2S)-2-{[甲基(丙基)氨 基]甲基}-1_吡咯烷基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+: 494. 4。实施例272[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-((2幻-2-{[甲基(丙基)氨基]甲基}_1_吡咯烷
基)-4-嘧啶基]胼基}-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 按照类似于实施例264的方法，在部分A中使用市售可得的N-甲基丙胺代替哌啶制备[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-((2幻-2-{[甲基(丙基)氨基]甲基}_1_吡 咯烷基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H) + 514. 3。实施例273[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(4-甲基 哌嗪基)(1，3_ 噻唑 _2_ 基甲基)氨
基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 4-甲基-N-(1，3-噻唑-2-基甲基)-1_哌嗪胺将市售可得的1，3-噻唑-2-甲醛(0. 388mL, 4. 42mmol)和市售可得的4_甲 基-1-哌嗪胺(0. 532mL,4. 42mmol)溶于Me0H(20mL)中，并冷却至0°C。然后加入甲基橙 指示剂和足量的4M HCl的二噁烷溶液以保持反应混合物为酸性，并为浅的略带桃红色。然 后加入氰基硼氢化钠(0.555g，8.84mmol)，并将该反应搅拌。将反应混合物蒸发，得到粗的 4-甲基-N-(1，3-噻唑-2-基甲基)-1_哌嗪胺，为米黄色固体(2. 2168g)。LCMS (M+H)+ = 213. 0。部分B 2-{2-氯-5-氟-6-[(4-甲基哌嗪基)(1，3_噻唑_2_基甲基)氨基]_4_嘧 啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯将4-甲基-N_(l，3-噻唑-2-基甲基)-1-哌嗪胺(2. 2169g, 10. 44mmol)溶于 THF(30mL)和三乙胺(4. 37ml，31. 3mmol)中。然后加入 2-(2，6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)-1， 1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(3. 89g，7. 83mmol)和DMSO(5mL)。将该反应搅拌过 夜。然后蒸除THF，并将混合物用水稀释。将水层用乙酸乙酯萃取，并将有机物干燥(Na2SO4) 并蒸发。通过硅胶色谱法和RP-HPLC纯化，得到2-{2-氯-5-氟-6-[(4-甲基哌嗪基) (1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]-4-嘧啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1-二甲基乙基)酯 (0. 2014g,3% ) ο LCMS (M+H)+= 674. 6。部分C 2-氯-5-氟-6-胼基_N_ (4-甲基哌嗪基)_N_ (1，3_噻唑_2_基甲基)~4~嘧 啶胺在氮气氛下，将2-{2_氯-5-氟-6_[(4-甲基哌嗪基)(1，3_噻唑_2_基甲 基)氨基]-4-嘧啶基}-1，1，2_胼三甲酸三(1，1_ 二甲基乙基)酯(0. 2014g，0. 299mmol) 溶于DCM(20mL)中。然后加入2M HCl (2. 99mL，5. 98mmol)，并将该反应搅拌过夜。将反应混 合物蒸发，得到粗的2-氯-5-氟-6-胼基-N-(4-甲基-1-哌嗪基)-Ν-(1，3-噻唑-2-基 甲基)-4_ 嘧啶胺，为黄色固体(0. 1683g)。LCMS (M+H)+ = 373. 0。部分D [2976][(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(4-甲基 哌嗪基)(1，3_ 噻唑 _2_ 基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲 酰胺将(2R)-4-乙基_2-{[甲酰基(四氢_2H_吡喃_2_基氧基)氨基]甲基}庚 酸(0. 3764g, 1. 257mmol)、2-氯-5-氟-6-胼基-N- (4-甲基-1-哌嗪基)-Ν_(1，3-噻 唑-2-基甲基)-4-嘧啶胺(0. 1683g)、ΝΜΜ(0· 298mL，2. 71mmol) ,HOAt (0. 074g，0. 542mmol) 和EDC(0. 104g，0. 542mmol)溶于DMF (IOmL)中。将该反应搅拌过夜。通过RP-HPLC纯化得到 [(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(4-甲基-1-哌嗪基)(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]_4_嘧 啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基)甲酰胺，为褐 色油状固体(0. 1688g)。LCMS (M+H)+ = 655. 4。部分E [(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(4-甲基 哌嗪基)(1，3_ 噻唑 _2_ 基甲基)氨 基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺将[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(4-甲基哌嗪基)(1，3_ 噻唑 _2_ 基甲基) 氨基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基](四氢-2H-吡喃-2-基氧基) 甲酰胺(0. 1688g,0. 258mmol)溶于水(2mL)和乙酸(8mL)中。将该反应搅拌过夜。通过 RP-HPLC 纯化，得到[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟 _6_[ (4-甲基-1-哌嗪基)(1,3-噻唑-2-基 甲基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)_2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，为米色固 体(0. 0483g,25% )。LCMS (M+H)+ = 571. 2。实施例274[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(25)-2-(3!1-[1，2，3]三唑并[4，5_d]嘧啶 _3_ 基
甲基)-1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (2S) -2- ({[2-氯_5_ ( 二羟基氨基)_4_嘧啶基]氨基}甲基)吡咯烷甲酸1， 1-二甲基乙基酯将2，4- 二氯 _5-( 二羟基氨基)嘧啶(2. 5g，12. 75mmol)、(2S)_2_(氨基甲 基)-l-吡咯烷甲酸 1,1-二甲基乙基酯(1.277g，6. 38mmol)和 DIEA(1. 114mL，6. 38mmol) 溶于DCM(75mL)中。将混合物搅拌lh，当通过LCMS确定该反应完成时，将该溶液真空 浓缩。将该粗产物通过快速色谱法(Combiflash，0-100%乙酸乙酯/己烷)纯化，得到 (2S) -2- ({[2-氯-5- ( 二羟基氨基)-4-嘧啶基]氨基}甲基)-1-吡咯烷甲酸1，1- 二甲基 乙基酯(1. 6362g,71% )。LCMS (M+H)+ 357. 8。部分R (2S) -2- {[ (5-氨基_4_嘧啶基)氨基]甲基} 吡咯烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯将(2S) -2- ({[2-氯_5_ (二羟基氨基)_4_嘧啶基]氨基}甲基)吡咯烷甲酸1， 1-二甲基乙基酯(2. 064g,5. 74mmol)溶于Me0H(40mL)中，除气，并置于氩气下。加入10%Pd/C(619mg)，并将内容物彻底地除气，并在氢气球下放置2h。然后将内容物除气，并通过玻 璃纤维过滤器过滤来除去Pd/C，用MeOH洗涤。将滤液真空浓缩，得到纯的(2S)-2-{[(5-氨 基-4-嘧啶基)氨基]甲基}-1_吡咯烷甲酸1，1_ 二甲基乙基酯(1.589g，94%)。LCMS (M+H)+294. 1。部分C (2S)-2_(3H-[1，2，3]三唑并[4，5_d]嘧啶 _3_ 基甲基)吡咯烷甲酸 1，1_ 二甲
基乙基酯将(2幻-2-{[(5-氨基-4-嘧啶基)氨基]甲基}_1_吡咯烷甲酸1，1_ 二甲基乙 基酯(1. 6633g,5. 67mmol)和亚硝酸钠(469mg,6. 80mmol)溶于乙酸(5mL)和水(8mL)的混 合物中，并将混合物剧烈搅拌1小时。将该溶液真空浓缩，得到(2S)-2-(3H-[l，2，3]三唑 并[4,5-d]嘧啶-3-基甲基)-l-吡咯烷甲酸1，1-二甲基乙基酯(1.98g，>99%)。LCMS (M+H)+ 305. 2。部分D 3-[(2幻-2-吡咯烷基甲基]-3!1-[1，2，3]三唑并[4,5-d]嘧啶将(2S)-2_(3H-[1，2，3]三唑并[4,5-d]嘧啶_3_基甲基)吡咯烷甲酸1， 1-二甲基乙基酯(1.98g,6. 54mmol)溶于CH2Cl2(IOmL)和TFA(2. 5mL)的混合物中，并在 室温下搅拌过夜。当通过LCMS确定该反应完成时，将该溶液真空浓缩，并将残余物溶于 CH2Cl2 (5mL)中，并用IN的NaOH水溶液(30mL)洗涤。将水层用CH2Cl2 (3x20mL)萃取。将 合并的有机层经无水MgSO4干燥并真空浓缩，得到3- [ (2S) -2-吡咯烷基甲基]-3H- [1，2，3] 三唑并[4,5-d]嘧啶(758mg,57% )。LCMS (M+H)+ 205. 1。部分E 2,4- 二氯-5-氟_6_胼基嘧啶向胼一水合物(289μ L，5. 96mmol)和三乙胺(830 μ 1,5. 96mmol)在 Me0H(15mL) 中的溶液中加入2，4，6_三氯-5-氟嘧啶(1.0g，4. 96mmol)的Me0H(15mL)溶液，并将混合 物搅拌过夜。当通过LCMS确定该反应完成时，将该溶液真空浓缩，并将生成的粗产物通过 RP-HPLC 纯化，得到 2，4_ 二氯-5-氟-6-胼基嘧啶(358mg，32% )。LCMS (M+H)+ :196. 9。部分F {(2R) -2-(环戊基甲基)-3- [2- (2，6_ 二氯_5_氟_4_嘧啶基)胼基]_3_氧代丙 基}[(苯基甲基)氧基]甲酰胺将2，4-二氯-5-氟-6-胼基嘧啶(358mg 1. 817mmol)、(2R) _3_ 环戊基 _2_ ({甲酰 基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(746mg, 1. 508mmol)和 HOAt (247mg，1. 817mmol) 溶于 15mL 的 DMF 中。加入 NMM (0. 798mL, 7. 27mmol)，随后加入 EDC (348mg, 1. 817mmol)。在室 温下搅拌过夜后，将反应混合物通过RP-HPLC纯化，得到{(2R) -2-(环戊基甲基)_3_ [2- (2， 6-二氯-5-氟-4-嘧啶基)胼基]-3-氧代丙基}[(苯基甲基)氧基]甲酰胺(442mg， 50% ) ο LCMS (M+H)+ 483. 6。部分G [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(25)-2-(3!1-[1，2，3]三唑并[4,5-d]嘧啶 _3_ 基 甲基)-1-吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基) 氧基]甲酰胺
240[3004]将{(2R)-2-(环戊基甲基)-3-[2-(2，6_二氯-5-氟-4-嘧啶基)胼基]_3_氧代丙 基}[(苯基甲基)氧基]甲酰胺(136mg，0. 278mmol)和3- [ (2S) -2-吡咯烷基甲基]_3H_ [1， 2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶(63mg,0. 308mmol)溶于 DMS0(5mL)中，然后加入 DIEA(59 μ L， 0. 308mmol)，并将该溶液于65°C加热过夜。当通过LCMS确定该反应完成时，将该溶液真空 浓缩，并将生成的粗产物通过RP-HPLC纯化，得到[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (2S) -2- (3H -[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基甲基)-l-吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基 甲基)-3-氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺(43mg，21% )。LCMS (Μ+Η)+:651· 6。部分H [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(25)-2-(3!1-[1，2，3]三唑并[4,5-d]嘧啶 _3_ 基 甲基)-1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，部分D，在部分D中使用[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(25)-2-(3!1 -[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基甲基)-l-吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)_2_(环戊基 甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲酰胺代替[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(1-甲 基乙基)氨基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基][(苯基甲基)氧基]甲 酰胺制备[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(2幻-2-(3!1-[1，2，3]三唑并[4,5-d]嘧啶 _3_ 基 甲基)-1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。 LCMS (M+H)+562. 2。实施例275((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟 _2_ 甲基 _6_ (4-甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2. 5]
辛-7-基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺 按照类似于实施例210，部分E和部分F的方法，在部分E中使用4_甲基_4，7_ 二 氮杂螺[2. 5]辛烷二盐酸盐(实施例172)代替1-{1-[(2S)_2-吡咯烷基]环丙基}吡咯 烷盐酸盐制备((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6- (4-甲基_4，7- 二氮杂螺 [2. 5]辛-7-基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ 463. 8。实施例276[ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_ [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼
基)-2-(环丁基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A (2R)-3_环丁基_2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸按照类似于制备中间体A的方法，在部分A中使用溴代甲基环丁烷代替3-环戊基丙酰氯制备(2幻-3-环丁基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸。部分B [ (2R) -3- (2- {2_ 氯 _6_ [ (2R) _2，4_ 二甲基 哌嗪基]_5_ 氟 _4_ 嘧啶基}胼 基)-2-(环丁基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺按照类似于实施例63的方法，在部分F中使用(2幻-3-环丁基-2-({甲酰基[(苯 基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸代替(2 -3-环戊基-2-({甲酰基[(苯基甲基)氧基] 氨基}甲基)丙酸制备[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧 啶基}胼基)_2-(环丁基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS:(M+H)+:457.6。实施例277[(2R)-3-(2_{2-氯-5-氟-6-[(9aS)_ 六氢卩比嗪并[2，l_c] [1，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环丁基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 按照类似于实施例64的方法，在部分F中使用(2幻-3-环丁基-2-({甲酰基[(苯 基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸(实施例281)代替(2幻-3-环戊基-2-({甲酰基[(苯 基甲基)氧基]氨基}甲基)丙酸制备[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并 [2，1-c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环丁基甲基)_3_氧代丙基]羟基 甲酰胺。LCMS _)+ 465. 8。实施例278((3幻-1-{2-氯-6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰
基)胼基]-5-氟-4-嘧啶基}-3_吡咯烷基)氨基甲酸甲酯 部分A (3S)-3-{[(甲氧基)羰基]氨基}-l-吡咯烷甲酸苯甲基酯将碳酸氢钠(2.073g，24. 68mmol)溶于水(20. OOmL)和 DCM(20mL)的混合物中， 并加入(3S)-3-氨基-1-吡咯烷甲酸苯甲基酯(2.88g，11.22mm0l)，随后加入氯甲酸甲酯 (0. 953mL，12. 34mmol)。将该混合物搅拌6h。然后将两相混合物分离，并将水相用DCM萃取 一次。将合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并蒸发。然后将残余物通过硅胶色谱法(0-100% EtoAc的己烷溶液)纯化，得到(3S)-3-{[(甲氧基)羰基]氨基}-1_吡咯烷甲酸苯甲基酯 (2g,64% )，为透明的油状物。LCMS (M+H)+ 278. 9。[3031]部分B (3S)-3-吡咯烷基氨基甲酸甲酯将(3S)-3_{[(甲氧基)羰基]氨基}-1_吡咯烷甲酸苯甲基酯(2. OOg, 7. 19mmol) 溶于除气的甲醇(20mL)中，并加入Pd/C(0.4g，0. 376mmol)。将反应器抽真空，并通过气球 用氢气将反应器再填充。将该反应搅拌2h，随后通过Celite硅藻土过滤除去催化剂。蒸发 溶剂，得到(3S)-3-吡咯烷基氨基甲酸甲酯(0.99g，76%)，为透明油状物。部分C ((3幻-1-{2-氯-6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰 基)胼基]-5-氟-4-嘧啶基}-3_吡咯烷基)氨基甲酸甲酯根据一般方法E，在部分A中使用(3S)-3-吡咯烷基氨基甲酸甲酯 代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂制备 ((3幻-1-{2-氯-6-[2-((21 )-3-环戊基-2-{[甲酰基(羟基)氨基]甲基}丙酰基)胼 基]-5-氟-4-嘧啶基}-3_吡咯烷基)氨基甲酸甲酯。LCMS (M+H)+ 502. 2/504. 1。实施例279[(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(25)-2-(3!1-[1，2，3]三唑并[4，5_b]吡啶 _3_ 基
甲基)-1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 部分A 3-[(2幻-2-吡咯烷基甲基]-3!1-[1，2，3]三唑并[4，5_b]吡啶按照类似于实施例 279，部分A至部分D的方法，在部分A中使用市售可得的2-氯_3_( 二羟基氨基)吡啶代 替2，4- 二氯-5- ( 二羟基氨基)嘧啶制备3-[ (2S) -2-吡咯烷基甲基]-3H-[1，2，3]三唑并 [4,5-b]吡啶。LCMS (M+H)+ 204. 1。部分B [(2 -3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(25)-2-(3!1-[1，2，3]三唑并[4,5-b]吡啶 _3_ 基 甲基)-1_吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺根据一般方法E，在部分A中使用3-[(2S)_2-吡咯烷基甲基]-3H_[1，2，3]三唑 并[4，5-b]吡啶代替异丙胺制备[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(2S)-2-(3H-[l，2，3]三唑 并[4，5-b]吡啶-3-基甲基)-l-吡咯烷基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧 代丙基]羟基甲酰胺。LCMS (M+H)+ :561. 2。实施例280[ (2R) -3- [2- (2_ 氯 _5_ 氟 _6_ {[2_ (2_ 呋喃基)乙基]氨基} _4_ 嘧啶基)胼 基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用[2-(2-呋喃基)乙基]胺(W09611210， 1996)代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂制备 [(2R) -3- [2- (2-氯-5-氟-6- {[2- (2-呋喃基)乙基]氨基} _4_嘧啶基)胼基]-2-(环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS _)+ 469. 2/471. 1。实施例281[ (2R) -3- [2- (2_ 氯 _5_ 氟 _6_ {[2_ (3_ 呋喃基)乙基]氨基} _4_ 嘧啶基)胼 基]-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺 根据一般方法E，在部分A中使用[2-(3-呋喃基)乙基]胺(W09611210， 1996)代替异丙胺，在部分B中使用含有DCM的2. OM HCl的乙醚溶液作为溶剂制备 [(2R) -3- [2- (2-氯-5-氟-6- {[2- (3-呋喃基)乙基]氨基} _4_嘧啶基)胼基]-2-(环戊 基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。LCMS _)+ 469. 2/471. 1。多晶型实施例实施例IP[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型1多晶型1通过下面的实施例24，部分L的另一种方法的一般方法制备。另一种方法将乙酸乙酯(0.5mL)力卩入到结晶的[(2R)_2_(环戊基甲 基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(多晶型l，30.8mg)中。将生成的淤浆由0-40°C 用 48小时进行温度-循环16次。此时，淤浆中的固体为乙酸乙酯溶剂合物。在室温下 将生成的固体和上清液通过过滤分离。将该固体在实验室环境条件下真空干燥1小时，将 该溶剂合物去溶剂化得到多晶型1。实施例2P[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型2将 5. 3mg 的[(2R) _2_ (环戊基甲基)_3_ (2_ {5_氟 _6_ [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(多晶型 1)在500uL的水中浆化。将该样品使用热风器温和地加热以增加溶解度，但固体永不完全 溶解。将该固体在实验室环境条件下真空干燥，并将生成的固体进行特征分析，发现其为多 晶型2。[3062]另一种方法向反应器中加入[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (9aS)-六氢吡嗪并 [2，l-c][l，4]噁嗪-S(IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰胺 (多晶型1，1. Oeq)和水(20体积)。将悬浮液在T = 20°C下搅拌 60小时。将悬浮液过滤 并用2. 5体积水洗涤两次。将该物质在T = 60°C下减压干燥，并将其磨细(Qimdro Comil, 不锈钢，筛目大小Imm)，得到[(2R) _2_ (环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (9aS)-六氢吡嗪 并[2，l-c][l，4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰 胺的多晶型2，为白色固体。实施例3P[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型3将1-丙醇(0.5mL)力卩入到结晶的[(2R) _2_ (环戊基甲 基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺(多晶型l，30.8mg)中。将生成的淤浆由0-40°C 用 48小时的时间进行温度-循环16次。在室温下将生成的固体和上清液通过过滤分离。 将该固体在实验室环境条件下真空干燥1小时。将生成的固体进行特征分析，发现其为多 晶型3。[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型的分析将多晶型1和多晶型2通过FT-IR、FT_拉曼、XRPD、DSC和TGA进行分析。多晶型 3通过FT-拉曼、XRPD、DSC和TGA进行分析。用于分析的样品通过本领域的标准方法在环 境条件下制备。通常，将l_5mg的无水多晶型1、多晶型2或多晶型3置于仪器/样品架上。 使用下面的仪器和参数。FT-IR仪器Thermo Magna MidIR System关键性运行参数样品扫描数64分辨率4·OOOcnT1±真零的标准(Levels of zero filling) 2(Apodization) Happ-Genzel相位校正Mertz背景扫描数64检测器DTGS分光镜KBr进样配件(Sampling Accessory) Thermo Smart DuraScope ATR, diamondATR elementFT-拉曼仪器Thermo FT-拉曼 System 960 Spectrometer关键性运行参数
245[3084]检测器:Liquid Nitrogen-Cooled Germanium分光镜CaF2样品扫描数64分辨率4. OcnT1填零的标准(Levelsof zero filling) 2变迹法(Apodization) Happ-Genzel相位校正功率谱图(Power spectrum)拉曼激光频率9393·6416cm"1XRPDiX^ =Bruker AXS PXRD General Area Detector Diffraction System关键性运行参数扫描范围3-42°2 θ发生器功率40kV，40mA放射源CuKa扫描类型偶合扫描(Coupled scan)帧数3帧每中贞时间5min样品振幅0. 1-0. 5mm振幅，取决于样品尺寸检测器距离25cm滤色器 / 单色仪Single Goebel Mirror检测器类型:General Area Detector Diffraction热分析仪器TAInstruments Thermal Analysis System (ΤΑ 仪器热分析系统)，型号 DSC Q100关键性运行参数模型-DSCStandard Cell FC方法-直线上升(Ramp)盘(Pan)封闭铝材料(Closedaluminum)吹扫气体N2，40mL/minCell# FC-00615方法1 在30. 00°C保持平衡2 以 15. 00oC /min 直线上升至 350. 00°C仪器TAInstruments Thermal Analysis System (ΤΑ 仪器热分析系统，型号 TGA Q500关键性运行参数方法-直线上升(Ramp)吹扫气体N2，40mL/min平衡气体N2，40mL/min方法1 以 15. OO0C /min 直线上升至 300. 00 °C
权利要求
式(I)化合物或其盐其中R1选自C2 C7烷基和 (CH2)n C3 C6环烷基；R2选自C1 C3烷基；环丙基；C1 C3烷氧基；C1 C3卤代烷基；C1 C3烷硫基；5 元杂芳基；5 元杂环烃基；卤素；羟基甲基；和 NRaRb；R3选自 NR4R5；卤素；苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；和杂芳基，其任选被一至三个R6基团所取代；R4选自H；C1 C6烷基，其任选被一个或两个R7基团所取代；C1 C6烷氧基；C3 C6环烷基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂环烃基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂芳基，其任选被一至三个R6基团所取代；和苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；R5选自H；C1 C6烷基，其任选被一个或两个R7基团所取代；C1 C6烷氧基；C3 C6环烷基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂环烃基，其任选被一至三个R6基团所取代；杂芳基，其任选被一至三个R6基团所取代；和苯基，其任选被一至三个R6基团所取代；或者R4和R5与同它们相连的N 原子结合到一起形成任选被一至三个R6基团所取代的杂环烃基；每个R6独立地选自C1 C6烷基，其任选被一至三个R7基团所取代；羟基；C1 C3烷氧基； C(O)NRaRb； C(O)Rc； C(O)ORc；杂环烃基；C3 C6环烷基，其任选被一个 NRaRb或吡咯烷基所取代；氧代基；氰基； NRaRb；苯基；杂芳基；和卤素；每个R7独立地选自羟基；C1 C3烷氧基；卤素；苯基；氰基； NRaRb； C(O)NRaRb； C(O)Rc；C3 C6环烷基，其任选被一个羟基、杂环烃基或 NRaRb基团所取代；杂环烃基；和杂芳基，其任选被一个甲基、NRaRb或羟基所取代；每个Ra各自独立地选自H以及任选被一个羟基、甲氧基或二甲基胺所取代的C1 C3烷基；每个Rb独立地选自H和C1 C3烷基；每个Rc独立地选自任选被一个甲氧基所取代的C1 C3烷基；苯基；杂环烃基；以及杂芳基；和n为0 2的整数。FPA00001182153800011.tif
2.根据权利要求1的化合物或其盐，其中Rl为-(CH2)n-C3-C6环烷基并且η为1。
3.根据权利要求2的化合物或其盐，其中Rl为-CH2-环戊基。
4.根据权利要求3的化合物或其盐，其中R2为C1-C3烷基；C1-C3烷氧基；C1-C3卤代 烷基；C1-C3烷硫基；或卤素。
5.根据权利要求4的化合物或其盐，其中R2为甲基；乙基；甲硫基；乙硫基；氟代甲基； 二氟甲基；1-氟甲基；氯；环丙基；或甲氧基。
6.根据权利要求1-5中任一项的化合物或其盐，其中R3为-NR4R5。
7.根据权利要求6的化合物或其盐，其中R3为-NR4R5，并且R4和R5与同它们相连的 N-原子结合到一起形成任选被一至三个R6基团所取代的杂环烃基。
8.根据权利要求7的化合物或其盐，其中R3为-NR4R5，并且R4和R5与同它们相连 的N-原子结合到一起形成氮杂环丁烷基；吡咯烷基；哌嗪基；吗啉基；2，5- 二氢-IH-吡 咯基；六氢吡嗪并[2，l-c][l，4]噁嗪-(IH)-基；异噁唑烷基；六氢吡咯并[l，2-a]吡 嗪_ (IH)-基；或2，5- 二氮杂二环[2. 2. 1]庚基，其中每个基团可任选被一至三个R6基团 所取代。
9.根据权利要求7的化合物或其盐，其中R3为-NR4R5，其中R4和R5与同它们相连 的N-原子结合到一起形成1-哌啶基；4-硫代吗啉基；1-吡唑烷基；四氢-5H-[1，3] 二氧 杂环戊烯并[4,5-c]吡咯基；四氢-IH-呋喃并[3,4-c]吡咯-(3H)_基；六氢吡咯并[3， 4-c]吡咯-(IH)-基；六氢吡咯并[l，2-a]吡嗪-(IH)-基；六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-(IH)-基；六氢呋喃并[3，4-b]吡嗪-(2H)-基；八氢-2H-吡啶并[l，2_a]吡嗪基；八 氢吡嗪并[l，2-a]氮杂革-(IH)-基；八氢吡嗪并[2，l-c] [1,4]噁嗪基；八氢-IH-环戊二 烯并[b]吡嗪基；八氢-1(2H)_喹喔啉基；八氢-6H-吡咯并[3，4-b]吡啶基；3-氮杂二环 [3. 1. 0]己基；2，5- 二氮杂二环[2. 2. 1]庚基；4，7- 二氮杂螺[2. 5]辛基；5-氮杂螺[2. 4] 庚基；或10-氧杂-4-氮杂三环[5. 2. 1. 02，6]癸基。
10.根据权利要求6的化合物或其盐，其中R4为环丙基；环丁基；环戊基；四氢-2H-吡 喃-4-基；2-氧代-六氢-IH-氮杂革基；2-氧代-2，3，4，7-四氢-IH-氮杂革基；或C1-C6 烷基，其任选被一个选自下列的R7基团所取代羟基、甲氧基、氰基、-C(O)NRaRb、-C(O) Re、 吗啉基、吡啶基、1，3-噻唑基、2-氨基-1，3-噻唑基、噻吩基、呋喃基、苯基和1-羟基-IH-咪 唑-2-基；以及R5为H ；C1-C3烷基；环丙基；或任选被一个R6基团所取代的哌嗪基。
11.实质上如实施例1-281中任一个所述的化合物或其盐。
12.根据权利要求1的化合物或其盐，所述化合物为[(2R) -3- {2- [6- (1-氮杂环丁烷基)-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲 基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [2-乙基-5-氟-6- (4-甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基] 胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-6- (4-甲基-1-哌嗪基)-2-(甲硫基)-4-嘧啶 基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺；[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(3R)-3，4- 二甲基-1-哌嗪基]_5_ 氟-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(2S)-2，4- 二甲基-1-哌嗪基]_5_ 氟-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；或[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (4S) -4-羟基-3，3- 二甲基-1-吡咯烷基]-4-嘧啶基} 胼基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。
13.根据权利要求1的化合物或其盐，所述化合物为[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (4S) -4-羟基-3，3- 二甲基-1-吡咯烷 基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R) -3- {2-[2-氯-5-氟-6- (3，3，4-三甲基-1-哌嗪基)-4-嘧啶基]胼基} _2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R)-3-(2-{2-氯-5-氟-6-[(9aR)-六氢吡嗪并[2，l_c] [1，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R) -3- (2- {2-氯-5-氟-6- [ (8aR)-六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2 (IH)-基]-4-嘧啶 基}胼基)-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺；或[(2 -3-{2-[2-氯-5-氟-6-(四氢-IH-呋喃并[3，4_c]吡咯 _5 (3H)-基)-4-嘧啶 基]胼基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。
14.根据权利要求1的化合物或其盐，所述化合物为[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [3- ( 二甲基氨基)_3_乙基-1-氮杂环丁烷基]_5_氟-4-嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R) -3- {2- [2-氯-5-氟-6- (2-甲基-1-吡唑烷基)~4~嘧啶基]胼基} -2-(环戊基 甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；[(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2S) -2-氰基吡咯烷基]_5_氟-4-嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺；((2R) -2-(环戊基甲基)-3- {2- [5-氟-2-甲基-6- (3-甲基-1-氮杂环丁烷基)~4~嘧 啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺；或[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(2R)-2，4- 二甲基-1-哌嗪基]_5_ 氟-4-嘧啶基}胼 基)-2-(环丁基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。
15.根据权利要求1、11、12、13和14中任一项的化合物的盐，所述盐为药学上可接受的盐。
16.药物组合物，其含有根据权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐以及药学上 可接受的赋形剂。
17.根据权利要求16的药物组合物，其配制为用于口服给药。
18.根据权利要求17的药物组合物，其配制为片剂。
19.根据权利要求17的药物组合物，其配制为液体。
20.根据权利要求16的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
21.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量的根据 权利要求1的化合物或其药学上可接受的盐。
22.根据权利要求21的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
23.根据权利要求21的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感染、 下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
24.根据权利要求21的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
25.根据权利要求21的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
26.根据权利要求21的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
27.下式的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，1-c] [1， 4]噁嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺，或其盐
28.下式的[(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {5-氟-6- [ (9aS)-六氢吡嗪并[2，1-c] [1， 4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺，或其药学上 可接受的盐
29.药物组合物，其含有[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪 并[2，l-c][l，4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰 胺或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
30.根据权利要求29的药物组合物，其配制为用于口服给药。
31.根据权利要求30的药物组合物，其配制为片剂。
32.根据权利要求30的药物组合物，其配制为液体。
33.根据权利要求29的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
34.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量 的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]嚼 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受 的盐。
35.根据权利要求34的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
36.根据权利要求34的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感染、 下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
37.根据权利要求36的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
38.根据权利要求36的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
39.根据权利要求36的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
40.下式的[(2幻-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5-氟-6-[(9必)-六氢吡嗪并[2，l_c][l， 4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
41.药物组合物，其含有[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪 并[2，l-c][l，4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰 胺以及药学上可接受的赋形剂。
42.根据权利要求41的药物组合物，其配制为用于口服给药。
43.根据权利要求42的药物组合物，其配制为片剂。
44.根据权利要求42的药物组合物，其配制为液体。
45.根据权利要求41的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
46.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量 的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺。
47.根据权利要求46的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
48.根据权利要求46的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感染、 下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
49.根据权利要求48的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
50.根据权利要求48的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
51.根据权利要求48的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
52.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型1，其具有 至少一个基本上如下所示的谱图图1的FT-IR谱图、图3的FT-拉曼光谱、图6的X-射线 粉末衍射图、图9的DSC热分析图以及图12的痕量TGA图。
53.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型1，其中所 述多晶型的特征在于X-射线衍射图包括下列以2 θ角表示的峰，其中a.所述X-射线衍射图包括在4.1+/-0. 1°处的峰；或b.所述X-射线衍射图包括在4.1+/-0. 1°和6. 1+/-0. 1°处的峰；或c.所述X-射线衍射图包括在4.1+/-0. 1°、6. 1+/-0. 1°和6. 9+/-0. 1°处的峰；或d.所述X-射线衍射图包括在4. 1+/-0. 1°、6· 1+/-0. 1°、6· 9+/-0. 1° 和 8. 1+/-0. 1° 处的峰；或e.所述X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1°、6. 1+/-0. 1°、6. 9+/-0. 1°、8. 1+/-0. 1° 和9. 5+/-0. 1°处的峰；或f.所述X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1°、6. 1+/-0. 1°、6. 9+/-0. 1°、8. 1+/-0. 1°、 9. 5+/-0. 1° 和 11. 2+/-0. 1° 处的峰；或g.所述X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1° 6. 1+/-0. 1°、6. 9+/-0. 1°、8. 1+/-0. 1°、 9. 5+/-0. 1°、11.2+/-0. 1° 和 12. 9+/-0. 1° 处的峰；或h.所述X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1°、6. 1+/-0. 1°、6. 9+/-0. 1°、8. 1+/-0. 1°、 9. 5+/-0. 1° >11. 2+/-0. 1°、12. 9+/-0. 1° 和 13. 8+/-0. 1° 处的峰；或i.所述X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1°、6. 1+/-0. 1°、6. 9+/-0. 1°、8. 1+/-0. 1°9. 5+/-0. 1° >11. 2+/-0. 1°、12. 9+/-0. 1°、13. 8+/-0. 1° 和 15. 6+/-0. 1° 处的峰；或j.所述 X-射线衍射图包括在 4. 1+/-0. 1°、6. 1+/-0. 1°、6. 9+/-0. 1°、8. 1+/-0. 1°、 9. 5+/-0. 1° >11. 2+/-0. 1°、12·9+/-0·1°、13. 8+/-0. 1°、15. 6+/-0. 1° 和 18. 3+/-0. 1° 处的峰。
54.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型1，其中所 述多晶型的特征在于X-射线衍射图包括以2 θ角表示的在选自下列的四个或更多位置上 的峰4· 1+/-0. 1、6· 1+/-0. 1、6· 9+/-0. 1、8· 1+/-0. 1,9. 5+/-0. 1,11. 2+/-0. 1,12. 9+/-0. 1、 13. 8+/-0. 1、15. 6+/-0. 1 和 18. 3+/-0. 1 度。
55.根据权利要求52-54中任一项的多晶型1，其为基本上纯的晶型。
56.药物组合物，其含有[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪 并[2，l-c][l，4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰 胺的多晶型1以及药学上可接受的赋形剂。
57.根据权利要求56的药物组合物，其配制为用于口服给药。
58.根据权利要求57的药物组合物，其配制为片剂。
59.根据权利要求57的药物组合物，其配制为液体。
60.根据权利要求56的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
61.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量 的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型1。
62.根据权利要求61的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
63.根据权利要求61的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感染、 下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
64.根据权利要求63的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
65.根据权利要求63的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
66.根据权利要求63的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
67.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型2，其具有 至少一个基本上如下所示的谱图图2的FT-IR谱图、图4的FT-拉曼光谱、图7的X-射线 粉末衍射图、图10的DSC热分析图以及图13的痕量TGA图。
68.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型2，其中所 述多晶型的特征在于X-射线衍射图包括下列以2 θ角表示的峰，其中a.所述X-射线衍射图包括在7.8+/-0.1°处的峰；或b.所述X-射线衍射图包括在7.8+/-0. 1°和9. 5+/-0. 1°处的峰；或c.所述X-射线衍射图包括在7.8+/-0. 1°、9· 5+/-0. 1°和12. 3+/-0. 1°处的峰；或d.所述X-射线衍射图包括在 7. 8+/-0. 1 °、9. 5+/-0. 1 °、12. 3+/-0. 1 ° 和，13.2+//-ο.1°处的峰；或e.所述X-；射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1 °、9· 5+,/-0.1 °,12.3+/" .1 °、，13.2+//-ο·1°和 15. 6+/-0.1°处的峰；或f.所述X-；射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1 °、9· 5+,/-0.1 °,12.3+/" .1 °、，13.2+//-0.1°,15..6+/-0. 1° 和 18. 3+/-0. 13处的峰；或g·所述X-；射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1 °、9· 5+,/-0.1 °,12.3+/" .1 °、，13.2+//-0.1°,15..6+/-0. 1°、18·3+/-0·1°和 19. 0+/-0.1°处的峰 或h.所述X-；射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1 °、9· 5+,/-0.1 °,12.3+/- .1 °、，13.2+//-0.1°,15..6+/-0. 1°、18·3+/-0·1°、19· 0+/-0. 1。和 20. 6+/-，0.1°处的峰 或 ，'τΛ i.所述X-；射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1 °、9· 5+,/-0.1 °,12.3+/" .1 °、，13.2+//-0.1O15. 6+/-0.,1 °、18.3+/-0 1 ° ,19. 0+/-0. 1O、20·6+/·-0. 1C‘ 和，21.4+//-0.1°处的峰；或j·所述X-；射线衍射图包括在7. 8+/-0. 1 °、9· 5+,/-0.1 °,12.3+/- .1 °、，13.2+//-0.1°,15, 6+/-0. 1°、18·3+/-0·1°、19· 0+/-0. 1°、20·6+/"-0. 1°、21.4+-0. 1°和26.7+/"-0.1°处的峰。
69.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型2，其 中所述多晶型的特征在于X-射线衍射图包括以2 θ角表示的在选自下列的四个或更多 位置上的峰7. 8+/-0. 1 °、9. 5+/-0. 1°、12. 3+/-0. 1°、13. 2+/-0. 1°、15. 6+/-0. 1°、 18. 3+/-0.1° >19. 0+/-0.1°、20. 6+/-0.1°、21· 4+/-0.1° 和 26. 7+/-，0.1°。
70.根据权利要求67-69中任一项的多晶型2，其为基本上纯的晶型。
71.药物组合物，其含有[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪 并[2，l-c][l，4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)_3_氧代丙基]羟基甲酰 胺的多晶型2以及药学上可接受的赋形剂。
72.根据权利要求71的药物组合物，其配制为用于口服给药。
73.根据权利要求72的药物组合物，其配制为片剂。
74.根据权利要求72的药物组合物，其配制为液体。
75.根据权利要求71的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
76.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量 的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型2。
77.根据权利要求76的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
78.根据权利要求76的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感染、 下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
79.根据权利要求78的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
80.根据权利要求78的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
81.根据权利要求78的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
82.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c] [1,4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型3，其具有 至少一个基本上如下所示的谱图图5的FT-拉曼光谱、图8的X-射线粉末衍射图、图11 的DSC热分析图以及图14的痕量TGA图。
83.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8 (IH)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型3，其中所 述多晶型的特征在于X-射线衍射图包括下列以2 θ角表示的峰，其中a.所述X-射线衍射图包括在6.1+/-0. 1°处的峰；或b.所述X-射线衍射图包括在6.1+/-0. 1°和7. 5+/-0. 1°处的峰；或c.所述X-射线衍射图包括在6.1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°和8. 2+/-0. 1°处的峰；或d.所述X-射线衍射图包括在6.1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°、8· 2+/-0. 1° 和9. 1+/-0. 1° 处的峰；或e.所述X-射线衍射图包括在 6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°、8· 2+/-0. 1°、9· 1+/-0. 1° 和12. 0+/-0. 1°处的峰；或f.所述X-射线衍射图包括在 6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°、8· 2+/-0. 1°、9· 1+/-0. 1°、 12. 0+/-0. 1° 和 12. 8+/-0. 1° 处的峰；或g.所述X-射线衍射图包括在 6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°、8· 2+/-0. 1°、9· 1+/-0. 1°、 12. 0+/-0. 1° ,12. 8+/-0. 1° 和 13. 4+/-0. 1° 处的峰；或h.所述X-射线衍射图包括在 6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°、8· 2+/-0. 1°、9· 1+/-0. 1°、 12. 0+/-0. 1° >12. 8+/-0. 1°、13. 4+/-0. 1° 和 16. 0+/-0. 1° 处的峰；或i.所述Χ-射线衍射图包括在 6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°、8· 2+/-0. 1°、9· 1+/-0. 1°、`12.0+/-0. 1° >12. 8+/-0. 1°、13. 4+/-0. 1°、16. 0+/-0. 1° 和 23. 3+/-0. 1° 处的峰；或j.所述 Χ-射线衍射图包括在 6. 1+/-0. 1°、7· 5+/-0. 1°、8· 2+/-0. 1°、9· 1+/-0. 1°、 12.0+/-0. 1 °、12·8+/-0·1 °、13·4+/-0·1 °、16·0+/_0·1 °、23· 3+/-0. 1 ° 和 27. 6+/-0. 1° 处的峰。
84.[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_ 六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型3，其中所述 多晶型的特征在于X-射线衍射图包括以2 θ角表示的在选自下列的四个或更多位置上的 峰6· 1+/-0. 1°、7·5+/-0·1°、8·2+/-0·1°、9· 1+/-0. 1°、12·0+/_0·1°、12·8+/_0·1°、`13.4+/-0. 1°、16. 0+/-0. 1°、23. 3+/-0. 1° 和 27. 6+/-0. 1°。
85.根据权利要求82-84中任一项的多晶型3，其为基本上纯的晶型。
86.药物组合物，其含有[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪 并[2，l-c][l，4]噁嗪-8 (IH)-基]-2-甲基_4_嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰 胺的多晶型3以及药学上可接受的赋形剂。
87.根据权利要求86的药物组合物，其配制为用于口服给药。
88.根据权利要求87的药物组合物，其配制为片剂。
89.根据权利要求87的药物组合物，其配制为液体。
90.根据权利要求86的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
91.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{5_ 氟-6-[(9aS)_六氢吡嗪并[2，l_c][l，4]噁 嗪-8(1H)-基]-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺的多晶型3。
92.根据权利要求91的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
93.根据权利要求91的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感染、 下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
94.根据权利要求93的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
95.根据权利要求93的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
96.根据权利要求93的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
97.下式的[(2 -3-(2-{2-氯-6-[(21 )-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其盐
98.下式的[(2 -3-(2-{2-氯-6-[(21 )-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基} 胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐
99.药物组合物，其含有[(2R)-3-(2-{2-氯_6_[(2R)-2，4- 二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可 接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
100.根据权利要求99的药物组合物，其配制为用于口服给药。
101.根据权利要求100的药物组合物，其配制为片剂。
102.根据权利要求100的药物组合物，其配制为液体。
103.根据权利要求99的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
104.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量的 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐。
105.根据权利要求104的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
106.根据权利要求104的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感 染、下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
107.根据权利要求106的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
108.根据权利要求106的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
109.根据权利要求106的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
110.下式的[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶 基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
111.药物组合物，其含有[(2R)-3-(2-{2-氯-6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)-2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺以及药学上可 接受的赋形剂。
112.根据权利要求111的药物组合物，其配制为用于口服给药。
113.根据权利要求112的药物组合物，其配制为片剂。
114.根据权利要求112的药物组合物，其配制为液体。
115.根据权利要求111的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
116.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量的 [(2R) -3- (2- {2-氯-6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-4-嘧啶基}胼基)_2_ (环 戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。
117.根据权利要求116的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
118.根据权利要求116的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感 染、下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
119.根据权利要求118的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
120.根据权利要求118的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
121.根据权利要求118的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
122.下式的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其盐
123.下式的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(2R)-2，4- 二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐
124.药物组合物，其含有[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌 嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
125.根据权利要求124的药物组合物，其配制为用于口服给药。
126.根据权利要求125的药物组合物，其配制为片剂。
127.根据权利要求125的药物组合物，其配制为液体。
128.根据权利要求124的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
129.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量的 [(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐。
130.根据权利要求129的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
131.根据权利要求129的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感 染、下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
132.根据权利要求131的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
133.根据权利要求131的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
134.根据权利要求131的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
135.下式的[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌嗪 基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺
136.药物组合物，其含有[(2R)-2-(环戊基甲基)-3-(2-{6-[(2R)-2，4-二甲基-1-哌 嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧啶基}胼基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺以及药学上可接受的 赋形剂。
137.根据权利要求136的药物组合物，其配制为用于口服给药。
138.根据权利要求137的药物组合物，其配制为片剂。
139.根据权利要求137的药物组合物，其配制为液体。
140.根据权利要求136的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
141.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量的 [(2R) -2-(环戊基甲基)-3- (2- {6- [ (2R) -2，4- 二甲基-1-哌嗪基]-5-氟-2-甲基-4-嘧 啶基}胼基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。
142.根据权利要求141的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
143.根据权利要求141的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感 染、下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
144.根据权利要求143的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
145.根据权利要求143的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
146.根据权利要求143的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
147.下式的 _6-(4_ 甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2.5] 辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其盐
148.下式的 二氮杂螺[2.5] 辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可 接受的盐
149.药物组合物，其含有[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基-4，7-二氮杂螺[2.5] 辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可 接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
150.根据权利要求149的药物组合物，其配制为用于口服给药。
151.根据权利要求150的药物组合物，其配制为片剂。
152.根据权利要求150的药物组合物，其配制为液体。
153.根据权利要求149的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
154.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量的 [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2. 5]辛 _7_ 基)-4-嘧啶基]胼 基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐。
155.根据权利要求154的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
156.根据权利要求154的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感 染、下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
157.根据权利要求156的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
158.根据权利要求156的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
159.根据权利要求156的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
160.下式的[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟_6-(4_ 甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2.5] 辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺
161.药物组合物，其含有[(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基-4，7-二氮杂螺[2.5] 辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基} -2-(环戊基甲基)-3-氧代丙基]羟基甲酰胺以及药学上可 接受的赋形剂。
162.根据权利要求161的药物组合物，其配制为用于口服给药。
163.根据权利要求162的药物组合物，其配制为片剂。
164.根据权利要求162的药物组合物，其配制为液体。
165.根据权利要求161的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
166.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量的 [(2R)-3-{2-[2-氯-5-氟-6-(4-甲基 _4，7_ 二氮杂螺[2. 5]辛 _7_ 基)-4-嘧啶基]胼 基}-2_(环戊基甲基)-3_氧代丙基]羟基甲酰胺。
167.根据权利要求166的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
168.根据权利要求166的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感 染、下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
169.根据权利要求168的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
170.根据权利要求168的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
171.根据权利要求168的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
172.下式的((2幻-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-(4-甲基_4，7-二氮杂 螺[2. 5]辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺或其盐
173.下式的((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-(4-甲基-4，7-二氮杂 螺[2. 5]辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐
174.药物组合物，其含有((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6_(4_甲 基-4，7-二氮杂螺[2. 5]辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺或其药 学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂。
175.根据权利要求174的药物组合物，其配制为用于口服给药。
176.根据权利要求175的药物组合物，其配制为片剂。
177.根据权利要求175的药物组合物，其配制为液体。
178.根据权利要求174的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
179.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量 的((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6-(4_甲基_4，7_ 二氮杂螺[2.5] 辛-7-基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺或其药学上可接受的盐。
180.根据权利要求179的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
181.根据权利要求179的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感 染、下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
182.根据权利要求181的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
183.根据权利要求181的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
184.根据权利要求181的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
185.下式的((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5-氟-2-甲基-6-(4-甲基-4，7-二氮杂 螺[2. 5]辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺
186.药物组合物，其含有((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6_(4_甲 基-4，7-二氮杂螺[2. 5]辛-7-基)-4-嘧啶基]胼基}-3-氧代丙基)羟基甲酰胺以及药 学上可接受的赋形剂。
187.根据权利要求186的药物组合物，其配制为用于口服给药。
188.根据权利要求187的药物组合物，其配制为片剂。
189.根据权利要求187的药物组合物，其配制为液体。
190.根据权利要求186的药物组合物，其配制为用于肠胃外给药。
191.治疗人中的细菌感染的方法，所述方法包括给药于需要该治疗的人有效量 的((2R)-2-(环戊基甲基)-3-{2-[5_氟-2-甲基_6-(4_甲基_4，7_ 二氮杂螺[2.5] 辛-7-基)-4_嘧啶基]胼基}-3_氧代丙基)羟基甲酰胺。
192.根据权利要求191的方法，其中所述细菌感染是由链球菌属、葡萄球菌属、莫拉菌 属、嗜血杆菌属、奈瑟氏菌属、枝原体属、军团菌属、衣原体属、拟杆菌属、梭菌属、梭杆菌属、 丙酸杆菌属或消化链球菌属引起的。
193.根据权利要求191的方法，其中所述细菌感染是耳朵感染、鼻窦炎、上呼吸道感 染、下呼吸道感染、生殖器感染、皮肤和软组织感染或细菌性心内膜炎。
194.根据权利要求193的方法，其中所述细菌感染是上呼吸道感染。
195.根据权利要求193的方法，其中所述细菌感染是下呼吸道感染。
196.根据权利要求193的方法，其中所述细菌感染是皮肤和软组织感染。
197.权利要求1、11-14、27、52-54、67-69、82-84、97、122、147和 172 中任一项所限定的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。
198.权利要求1、11-14、27、52-54、67-69、82-84、97、122、147 和 172 中任一项所限定的 化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗细菌感染。
199.权利要求1、11-14、27、52-54、67-69、82-84、97、122、147 和 172 中任一项所限定的 化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗细菌感染的药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及某些{2-(烷基)-3-[2-(5-氟-4-嘧啶基)肼基]-3-氧代丙基}羟基甲酰胺衍生物，包含它们的组合物，该化合物在抑制细菌的肽脱甲酰化酶(PDF)活性中的用途，以及该化合物在治疗细菌感染中的用途。特别地，本发明涉及式(I)化合物及其药学上可接受的盐，其中R1、R2和R3如文中所定义。本发明化合物是细菌的肽脱甲酰化酶抑制剂，并可用于治疗细菌感染。
文档编号C07D239/42GK101917981SQ200880124510
公开日2010年12月15日 申请日期2008年11月6日 优先权日2007年11月9日
发明者凯利·M·奥巴特, 安德鲁·B·贝诺维茨, 安德鲁·N·诺克斯, 廖湘民, 方育红, 李镇华, 秦东辉, 西格弗里德·B·克里斯滕森四世, 贝丝·诺顿, 贾森·C·德雷比特 申请人:葛兰素史密斯克莱有限责任公司