专利名称：一种提取发酵液中纳他霉素的方法
技术领域：
本发明涉及一种发酵液中纳他霉素的提取方法。
背景技术：
纳他霉素(natamycin)也称游链霉素或匹马菌素(pimaricin)，是一种重要的多 烯类抗菌素。纳他霉素是一种高效杀真菌剂，对霉菌、酵母菌具有极强的抑制和杀灭作用。 因此，纳他霉素用于食品防腐不仅可以解决食品腐败问题，还能减少真菌毒素对人类的毒 害。与其他抗菌成分相比，纳他霉素对哺乳动物细胞的毒性极低，可以广泛应用于由真菌引 起的疾病。除此之外，由于纳他霉素的溶解度低，可用其对食品的表面进行处理以增加食品 保质期而不影响食品的风味和口感。 纳他霉素除了在食品中的应用外，还可以用于医药、日化、饲料、畜牧和农业等领 域。医药上可以用于眼科等外用药；在日化上用在消毒、洗发香波、浴液等；在饲料上，可以 作为饲料防霉剂，防病剂和促生长剂；在畜牧上可以防止牛羊马洗液防止真菌病，也可以用 在宠物上；在农业上可以作为绿色农药，可以应用在植物组织培养中防止霉菌污染，可以用 在蘑菇栽培上，提高蘑菇的产量和质量。 国内外目前使用的食品防腐剂的防腐效果均受微生物种类、食品成分、pH值和溶 解性等因素的影响，且在常规使用量下，影响食品的风味，致使这些防腐剂的使用受到限 制，不能满足现代食品加工的需要。而且，随着人们对化学合成食品防腐剂安全认识的提 高，低毒、高效、广谱及经济实用的生物防腐剂的研究和开发，受到人们的关注。
纳他霉素是通过发酵法制备的，产生菌一般为纳塔尔链霉菌、褐黄孢链霉菌等。最 早的描述其回收过程的专利一般都要求多种纯化步骤，并包含一些相对来说比较昂贵的单 元操作。英国专利GB846933发现了一种吸附一洗提的方法，可以用水溶性极性溶剂如甲 醛、丁醇和丙酮从发酵液中提取纳他霉素。美国专利USP3892850提出了一种方法，用不 易溶于水的有机溶剂从发酵液中萃取纳他霉素，然后从溶剂中回收纳他霉素。美国专利 USP3378441声称可以用盐析的方法从发酵液中分离纳他霉素，并辅以溶剂溶解和浓縮沉 淀。最新的专利GB2106498，描述了用真空浓縮或丁醇萃取过滤了的发酵液来得到一种原始 的抗真菌复合体，而从这种复合体中可以得到纳他霉素。世界专利W092/10550发现纳他霉 素易溶于低pH的甲醇，之后只要除去固形物，提高pH以沉淀析出纳他霉素即可。
发明内容
本发明公开了一种纳他霉素提取回收的方法。其方法是纳他霉素发酵液留下固形 物，低pH条件下异丙醇溶液中溶解，除去固形物，回调pH值，结晶，醇洗，水洗，真空干燥得 到成品。本法可使纳他霉素回收率达到60%，且工艺过程相对简单，适于工业化生产。
具体步骤如下 1.在含有纳他霉素的发酵液中加入2倍体积的异丙醇-水-冰乙酸(体积比 40 : 50 : 10)，保持混合液的温度在20到30。C之间。
2.在上述温度条件下加入一种酸，调整混合液的pH值为1到3，这使得纳他霉素 在提取介质中高度可溶，任何常规的兼容的酸性物料都可使用。
3.在上述温度条件下超声波处理1小时。 4.通过过滤或者离心，分离出混合液中的固体，收集富含纳他霉素的混合液。
5.任何兼容性的物料调整混合液的pH为6到9之间，此时混合液中纳他霉素的溶 解度下降而逐渐结晶沉淀下来。 6.通过板框压滤或离心的方法分离出纳他霉素结晶体，洗涤干燥后得到粗品。
具体实施方式
实施例1 : 该实施例说明了在控制pH值和温度的条件下提取纳他霉素。 发酵法制备的含有纳他霉素、生物体、水和少量营养物和杂质的发酵液，采用板框 过滤法浓縮至约含30%固体，滤饼中含有约6%重量的纳他霉素。 大约50g的滤饼与约lOOmL的异丙醇_水_冰乙酸(体积比40 : 50 : 10)混合
以生成一种萃取介质，在3(TC下将盐酸加入其中，降低pH值至约2，并将此介质于超声波仪 中处理l小时左右。 过滤浆液，加入氢氧化钠溶液调节pH值至7左右，并在此条件下缓慢搅拌保持约 l小时，此时，白色晶体析出。 用过滤法分离出沉淀，并在5(TC左右真空干燥。得到约6g干品。产品含纳他霉素
约占95%重量。
实施例2 : 该实施例说明了在控制的pH值和温度条件下提取纳他霉素。重复实施例l的过 程，但加入盐酸时萃取介质温度为约2(TC，干燥后得到4. 5g左右产品。产品约含90%重量 的纳他霉素。
权利要求
一种提取发酵液中纳他霉素的方法，包括下列步骤(1)将体积比为40∶50∶10的异丙醇-水-冰乙酸加入发酵液，并维持该萃取介质的温度为20到30℃之间；(2)调节该萃取介质的pH值为1到3；(3)超声波处理1小时；(4)将萃取介质中的固体除去以形成纳他霉素混合液；(5)将混合液的pH值提高至6到9之间；(6)回收沉淀的纳他霉素。
2. 根据权利要求1所述的一种提取发酵液中纳他霉素的方法，其特征在于所述发酵液 中至少含有40%重量的固体。
3. 根据权利要求1或2所述的一种提取发酵液中纳他霉素的方法，其特征在于在步骤 (1)之前，将纳他霉素发酵液中除去水，以使其含有少于10%重量的水。
全文摘要
本发明公开了一种纳他霉素的提取方法，具体说是一种从发酵液中提取纳他霉素的方法。其方法是从纳他霉素发酵液中得到固形物，将固形物在低pH条件下用异丙醇-水-冰乙酸溶液溶解，除去固形物，回调pH值，结晶，醇洗，水洗，真空干燥得到成品。本法可使纳他霉素回收率达到60％，且工艺过程相对简单，适于工业化生产。
文档编号C07H1/06GK101735293SQ20081017625
公开日2010年6月16日 申请日期2008年11月12日 优先权日2008年11月12日
发明者丁春华, 朱至 申请人:镇江东方生物工程设备技术有限责任公司