专利名称：无结晶型态盐酸万古霉素及其制备方法和用途、以及它的药物组合物的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及一种盐酸万古霉素，具体地说，涉及一种高密度无结 晶型态盐酸万古霉素及其制备方法、和该盐酸万古霉素用于口服或注 射给药的用途、以及含有该盐酸万古霉素的药物组合物。
背景技术：
盐酸万古霉素是东方诺卡氏菌在控制发酵条件下产生的一种两性糖肽类抗生素，其化学式为C66H75C12N9CVHC1，分子量为1，486。 通过发酵微生物Amycolatopis orientalis (以前的Nocardia orientalis) 制备万古霉素的方法已经在美国专利3,067,099 (1955年申请)和 WO91/08,300中更为详细的描述。盐酸万古霉素的冻干粉呈现米白 色，其水溶液为透明溶液，pH为2.5-4.5。临床上，盐酸万古霉素从20世纪50年代末开始有商业销售。已 知盐酸万古霉素与黏肽的前质末端D-Ala-D-Ala结合，抑制细菌细胞 壁的合成。此外，盐酸万古霉素还可以改变细胞膜的渗透性和RNA 的合成。盐酸万古霉素特别用于由抗P-乳胺抗生素的葡萄球菌引起的严 重或重症感染的初步治疗，也用于治疗对青霉素过敏或使用青霉素和 头孢菌素没有效果的患者。商业销售的盐酸万古霉素有口服(溶液和 胶囊/子弹型胶囊)和注射(小瓶的消毒静脉溶液)形式。盐酸万古霉素单独使用或与其它氨基葡糖苷结合使用可以治疗由葡萄球菌、链球菌、肠球菌或白喉杆菌引起的心内膜炎。只有在注射盐酸万古霉素对葡萄球菌引起的小肠结肠炎没有效果的情况下，才允许口服盐酸万古霉素。只有注射用盐酸万古霉素适用于其它所有的适应症。目前在临床上用的盐酸万古霉素都是用冻干粉为原料来制备口服和注射剂型，在口服剂型的胶囊剂型中，因冻干粉的密度比较小，制备胶囊颗粒较大，不易服用。发明内容本发明所要解决的技术问题是提供一种高密度无结晶型态的盐 酸万古霉素及其制备方法和药学上的应用，不但可以注射用，还可用 于口服，尤其可应用于胶囊。根据本发明的一方面，本发明提供了一种无结晶型态盐酸万古霉 素，其特征在于，所述盐酸万古霉素为无结晶型态，其具有与附图1所示的x射线粉末晶体衍射图谱基本相同的特征。所述盐酸万古霉素的x-射线衍射图谱不含有任何峰形。所述盐酸万古霉素的松密度为0.45 0.65g/ml，紧密度为0.65~0.85 g/ml 。根据本发明的另一方面，本发明还提供了一种药物组合物，所述 药物组合物包括治疗有效量的无结晶型态盐酸万古霉素、以及药学上 可接受的载体、赋形剂、稀释剂或辅料。其中，该盐酸万古霉素的治 疗有效量为0.5 5g。其中，该种药物组合物可制成注射剂给药，也可制成口服制剂给 药。注射剂主要制成注射用冻干粉针剂，所用的药用辅料包括葡萄糖、 蔗糖、乳糖、果糖、甘露醇、木糖醇等多元醇类作赋形剂，还包括5 %葡萄糖注射液及0.9%氯化钠注射液作临床给药时的稀释剂。注射剂主要用于治疗对甲氧西林耐药的葡萄球菌引起的感染，对青霉素过 敏的患者及不能使用其他抗生素包括青霉素、头孢菌素类，或使用后 治疗无效的葡萄球菌、肠球菌和棒状杆菌、类白喉杆菌属等感染患者， 如心内膜炎、骨髓炎、败血症或软组织感染等，也可用于防治血液透 析患者发生的葡萄球菌属所致的动、静脉血分流感染。口服制剂主要 制成片剂和胶囊剂，所用的药用辅料包括赋形剂和填充剂如微晶纤维素、羟丙纤维素、淀粉、乳糖、糊精等，粘合剂如聚维酮K30、羟丙 甲纤维素等，崩解剂如羧甲淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚维 酮等，助流剂或润滑剂如微粉硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸、硬脂酸钙等。 本品口服用于治疗由于长期服用广谱抗生素所致的甲硝唑治疗无效 的难辨梭状杆菌引起的伪膜性结肠炎或葡萄球菌性肠炎。根据本发明的再一方面，本发明还提供了所述盐酸万古霉素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤(1) 具有万古霉素色谱纯度不低于80%的万古霉素粗品在含有 NH4HC03流动相的层析柱中进行柱层析，得到色谱纯度不低于93% 的有效层析液或效层析液；(2) 向有效层析液或效层析液加入碳酸盐，产生沉淀；(3) 采用乙醇进行顶洗，干燥得到盐酸万古霉素。最好，所述有效层析液经过超滤、纳滤后可得到有效层析液的浓 縮液，以通过碳酸盐产生沉淀。其中，所述超滤的回流温度控制在 10~20°C，并用纯化水洗涤滤渣，超滤膜选用10000Da 50000Da。最好，所述有效层析液或有效层析液的浓縮液通过0.45pm和 0.2pm的滤芯过滤后再进行沉淀。所述纳滤溶液的温度控制在10~20°C，并分步加入纯化水和 0.04%~0.06°/。的乙二胺四乙酸(W/bons)，纳滤膜选用200Da 600Da。其中，所述碳酸盐包括(NH4)2CO;j， NH4HC03， Na2C03和 NaHC03。最好，向有效层析液或有效层析液的浓縮液中加入碳酸盐 所得到碳酸盐浓度为3%~7% (W/V)。其中，加入碳酸盐后，调节pH-2.0 3.5,不断搅拌30 90分钟， 混合液温度控制在5 25 °C,并静置24 48小时。最好，采用卯％的乙醇水溶液进行多次顶洗，顶洗至电导率 ^1000ns/cm时停止加入90%的乙醇水溶液。最好，采用的层析介质为葡聚糖凝胶Sephadex CM-25、琼脂糖 SP Sepharose或琼脂糖CM Sepharose，流动相为4~6% (w/v) NH4HC03。其中，流动相以流量为0.5-1.5柱体积/小时进行洗脱。最好，还包括在柱层析前，将万古霉素粗品溶于纯水中，搅拌， 用2 6 mol/LNaOH溶液调整至pH= 9~10，待完全溶解后过滤，收集 滤液，用2~6 mo1/ L HC1溶液调整滤液至pH=4.5 6.0。最好，还包括在用含有NH4HC03流动相洗脱前，先用纯水和低 浓度的NH4HC03溶液进行预洗。根据本发明的最后一方面，本发明提供了一种盐酸万古霉素用于 口服或注射给药的用途。本发明所提供的工艺流程具体描述如下。万古霉素发酵液在碱性条件下过滤，得到的澄清滤液通过大孔吸附树脂，万古霉素被吸附在树脂，树脂水洗后用含有溶剂的酸性水溶 液洗脱，典型的洗脱液为含乙醇的盐酸水溶液。万古霉素被洗脱下来， 含有万古霉素的洗脱液加入活性炭脱色，过滤得到的滤液浓縮得到盐 酸万古霉素水溶液，水溶液的浓度大约在100mg/mL。浓縮结束后，接着进行沉淀操作。在含有盐酸万古霉素的水溶液中加入NH4HC03 (数量为浓缩液体积的6%~10% (W/V))，然后用氨水调节万古霉素浓縮液pH至 7.5~8.5，搅拌45 60min使其混合均匀，大量的万古霉素从溶液中沉 淀出来。沉淀过程的温度必须控制在10~20°C，静置16士2小时后，把 混合液固液分离，使万古霉素沉淀从溶液中分离出来得到固体万古霉 素碱，然后用乙醇顶洗，顶去固体中残留液，分离后得到万古霉素粗 品。得到的万古霉素碱中万古霉素色谱纯度不低于80% (HPLC)， 一 般在85%以上。万古霉素粗品在水溶液里溶解后过滤，上层析柱层析纯化得到万 古霉素色谱纯度93%以上的有效层析液。有效层析液经过超滤、纳滤 后得到盐酸万古霉素浓縮液。盐酸万古霉素浓縮液通过0.45pm和 0.2pm的滤膜过滤后进行沉淀。向含有盐酸万古霉素的浓縮液中加入碳酸盐，例如NaHC03、 (NH4)2C03、 NH4HC03、或Na2C03，使浓縮液中碳酸盐[NaHC03或 (NH4)2C03或NH4HC03或Na2C03]的浓度为3% 7% (W/V)，此时浓 縮液中有气泡产生，再向溶液中加入适量的HCl调节pH值到2.0-3.5， 并持续搅拌60±30分钟，控制混合液温度在5 25°C，静置24 48 小时后固液分离。盐酸万古霉素滤饼先用90%的乙醇水溶液进行第一 次顶洗，顶洗至电导率^1000^is/cm时停止加入90%的乙醇水溶液。 再用经0.45pm膜过滤后的无水乙醇进行第二次顶洗，顶洗后即得盐 酸万古霉素沉淀湿品(乙醇水溶液是由0.45pm膜过滤后的无水乙醇 与纯化水配制而成)。沉淀湿品通过干燥去除残留乙醇及水分，获得 盐酸万古霉素成品。通过本发明得到的盐酸万古霉素有效组份大大得到提高，其它杂 质大大降低，纯度很高，色谱纯度可达到95%以上，该盐酸万古霉素 的松密度为0.45 0.65g/ml，紧密度为0.65~0.85 g/ml。该密度比常规冻干工艺要高，不但可以用于注射剂，还可用于胶囊等固体制剂。同 时产品外观颜色得到明显改观，适于口服或注射给药。
图l为本发明高密度无结晶型态的盐酸万古霉素的x射线粉末衍射谱图。
具体实施方式
通过以下实施例来对本发明作进一步具体说明，但并不仅限于以 下实施例和实施例中的工艺参数范围。实施例l:万古霉素粗品的制备万古霉素发酵液在碱性条件下过滤，得到的澄清滤液通过大孔吸 附树脂XAD-1600，万古霉素被吸附在树脂，树脂水洗后用40%乙醇 的酸性水溶液洗脱，万古霉素被洗脱下来，含有万古霉素的洗脱液加 入活性炭脱色，过滤得到的滤液浓縮得到盐酸万古霉素水溶液，接着 加入NH4HC03进行沉淀，得到万古霉素粗品。万古霉素粗品中万古 霉素B含量为86.8%，效价为599u/mg。取此粗品2500g，加纯化水20.0L,加NaOH溶液调节pH到10.0， 用0.2M2的0.5pm孔径的陶瓷膜过滤得到25.0L万古霉素滤液，溶液 效价为51224IU/ml，万古霉素B含量为86.5%,滤液pH为9.72，滤 液用HC1水溶液调节pH到4.82后上柱层析，层析柱填料为琼脂糖凝 胶。上柱结束后层析柱用纯化水洗柱6BV，然后用O.lmol/1的 NH4HC03水溶液洗柱10BV，然后用0.6mol/l的NH4HC03水溶液层 析，收集其中万古霉素含量在93n/。以上以及效价在2000IU/ml的部分，得到有效层析液。有效层析液中加入HC1，调节pH到2.76，然后用 50000Da的超滤膜超滤得到滤液，然后用200Da孔径的纳滤膜浓縮脱 盐，最后获得浓度为200mg/mL的盐酸万古霉素水溶液体积4500mL, 含万古霉素色谱纯度为95.6%,溶液pH为2.85。
实施例2:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45pm和0.2jim的滤膜过 滤后边搅拌边加入25gNaHC03，万古霉素从中析出，形成了浆状物， 加入HCl水溶液调节pH到2.80，继续搅拌60MIN，使其混合均匀， 停搅拌静置38小时，过程温度控制在14 15 'C。混合物通过过滤分 离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 385us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 99.7g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体72.5g，再通过高真 空干燥后得到盐酸万古霉素成品63.2g，成品水分为3.4%，盐酸万古 霉素其松密度为0.62g/ml，紧密度为0.81g/ml 。该无结晶型态盐酸万 古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同 的特征。请参见图1。
实施例3:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45pm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入15gNaHC03，万古霉素从中析出，形成了浆状物， 加入HCl水溶液调节pH到3.50，继续搅拌30MIN，使其混合均匀， 停搅拌静置48小时，过程温度控制在5~6°C。混合物通过过滤分离 并先用用200mL 90%乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 293us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品92.3g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体68.5g，再通过高真 空干燥后得到盐酸万古霉素成品58.6g，成品水分为3.1%，盐酸万古 霉素其松密度为0.45g/ml，紧密度为0.69 g/ml 。该无结晶型态盐酸万 古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同 的特征。请参见图1。
实施例4:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL,通过0.45jam和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入35gNaHC03，万古霉素从中析出，形成了浆状物， 加入HC1水溶液调节pH到2.01，继续搅拌30MIN,使其混合均匀， 停搅拌静置48小时，过程温度控制在24 25°C。混合物通过过滤分 离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 396us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 102.1g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体81.3g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品64.1g，成品水分为3.5%，盐酸万 古霉素其松密度为0.63g/ml，紧密度为0.82 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图l所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相
同的特征。请参见图1。
实施例5:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45pm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入25gNaHC03，万古霉素从中析出，形成了浆状物， 加入HC1水溶液调节pH到3.00,继续搅拌卯MIN，使其混合均匀， 停搅拌静置24小时，过程温度控制在15 16°C。混合物通过过滤分 离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为351us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 98.1g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体72.2g，再通过高真 空干燥后得到盐酸万古霉素成品63.3g，成品水分为3.2%，盐酸万古 霉素其松密度为0.59g/ml，紧密度为0.79 g/ml 。该无结晶型态盐酸万 古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同 的特征。请参见图1。
实施例6:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45nm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入25gNa2C03，万古霉素从中析出，形成了浆状物， 加入HC1水溶液调节pH到2.82,继续搅拌60MIN，使其混合均匀， 停搅拌静置36小时，过程温度控制在14 15 °C。混合物通过过滤分 离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 405us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 101.5g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体73.0g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品62.4g，成品水分为2.8%，盐酸万 古霉素其松密度为0.64g/ml，紧密度为0.85 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图l所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相 同的特征。请参见图1。
实施例7:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45pm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入15gNa2C03，万古霉素从中析出，形成了浆状物， 加入HC1水溶液调节pH到3.50,继续搅拌60MIN，使其混合均匀， 停搅拌静置48小时，过程温度控制在5~6 °C 。混合物通过过滤分离并先用用200mL90%乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 325us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 91.3g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体62.5g，再通过高真 空干燥后得到盐酸万古霉素成品50.8g，成品水分为2.9%，盐酸万古 霉素其松密度为0.46g/ml，紧密度为0.65 g/ml 。该无结晶型态盐酸万 古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同 的特征。请参见图1。
实施例8:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45pm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入35gNa2C03,万古霉素从中析出，形成了浆状物， 加入HC1水溶液调节pH到2.02，继续搅拌30MIN,使其混合均匀， 停搅拌静置48小时，过程温度控制在24~25 °C 。混合物通过过滤分 离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 413us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 103.8g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体73.9g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品63.6g，成品水分为3.0%，盐酸万 古霉素其松密度为0.63g/ml，紧密度为0.83 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相 同的特征。请参见图1。
实施例9:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓缩液500mL，通过0.45pm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入25gNa2C03，万古霉素从中析出，形成了浆状物， 加入HC1水溶液调节pH到3.10,继续搅拌90MIN，使其混合均匀，停搅拌静置24小时，过程温度控制在14 15 °C。混合物通过过滤分 离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 394us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 99.7g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体72.8g，再通过高真 空干燥后得到盐酸万古霉素成品62.8g，成品水分为3.0%,盐酸万古 霉素其松密度为0.61g/ml，紧密度为0.84 g/ml 。该无结晶型态盐酸万 古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同 的特征。请参见图1。
实施例10:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45pm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入25gNH4HC03，万古霉素从中析出，形成了浆状 物，加入HC1水溶液调节pH到2.78，继续搅拌60MIN，使其混合均 匀，停搅拌静置30小时，过程温度控制在11 12 °C。混合物通过过 滤分离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 524us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 103.7g,湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体74.5g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品64.5g，成品水分为3.2%，盐酸万 古霉素其松密度为0.64g/ml，紧密度为0.82 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图l所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相 同的特征。请参见图1。
实施例ll:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL,通过0.45pm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入35gNH4HC03，万古霉素从中析出，形成了浆状物，加入HC1水溶液调节pH到3.48,继续搅拌60MIN，使其混合均 匀，停搅拌静置48小时，过程温度控制在5~6 °C。混合物通过过滤 分离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 531us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 104.3g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体75.8g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品66.9g，成品水分为3.1%，盐酸万 古霉素其松密度为0.65g/ml，紧密度为0.85 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相 同的特征。请参见图1。
实施例12:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45pm和0.2fim的滤膜过 滤后边搅拌边加入15g NH4HC03，万古霉素从中析出，形成了浆状 物，加入HC1水溶液调节pH到2.04,继续搅拌30MIN，使其混合均 匀，停搅拌静置24小时，过程温度控制在24~25 °C 。混合物通过过 滤分离并先用用200mL90M乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 524us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 88.2g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体61.7g，再通过高真 空干燥后得到盐酸万古霉素成品49.8g，成品水分为2.8%，盐酸万古 霉素其松密度为0.45g/ml，紧密度为0.66 g/ml 。该无结晶型态盐酸万 古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同 的特征。请参见图1。
实施例13:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45|xm和0.2pm的滤膜过滤后边搅拌边加入25gNH4HC03，万古霉素从中析出，形成了浆状 物，加入HC1水溶液调节pH到3.02,继续搅拌90MIN，使其混合均 匀，停搅拌静置48小时，过程温度控制在12 13 °C。混合物通过过 滤分离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 385us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 101.8g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体72.9g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品62.8g，成品水分为2.9%，盐酸万 古霉素其松密度为0.59g/ml，紧密度为0.78 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图i所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相 同的特征。请参见图1。
实施例14:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓缩液500mL，通过0.45|xm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入25g (NH4)2C03，万古霉素从中析出，形成了浆状 物，加入HCl水溶液调节pH到2.82，继续搅拌60MIN,使其混合均 匀，停搅拌静置40小时，过程温度控制在8~9 °C。混合物通过过滤 分离并先用用200mL90。/Q乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 352us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 104.2g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体75.1g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品6S.3g，成品水分为3.3%，盐酸万 古霉素其松密度为0.65g/ml，紧密度为0.84 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相 同的特征。请参见图1。
实施例15:盐酸万古霉素的沉淀取实施例1中的浓缩液500mL，通过0.45nm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入15g (NH4)2C03，万古霉素从中析出，形成了浆状 物，加入HC1水溶液调节pH到3.47應续搅拌30MIN,使其混合均 匀，停搅拌静置48小时，过程温度控制在5 6 °C 。混合物通过过滤 分离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 318us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 94.5g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体69.2g，再通过高真 空干燥后得到盐酸万古霉素成品5S.0g，成品水分为3.2%，盐酸万古 霉素其松密度为0.51g/ml，紧密度为0.69 g/ml 。该无结晶型态盐酸万 古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同 的特征。请参见图l。
实施例16:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45pm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入35g (NH4)2C03，万古霉素从中析出，形成了浆状 物，加入HC1水溶液调节pH到2.00，继续搅拌30MIN，使其混合均 匀，停搅拌静置48小时，过程温度控制在24 25 °C 。混合物通过过 滤分离并先用用200mL90Q/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 502us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 108.2g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体78.4g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品69.0g，成品水分为2.9%，盐酸万 古霉素其松密度为0.62g/ml，紧密度为0.80 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相 同的特征。请参见图1。实施例17:盐酸万古霉素的沉淀
取实施例1中的浓縮液500mL，通过0.45jxm和0.2pm的滤膜过 滤后边搅拌边加入25g (NH4)2C03,万古霉素从中析出，形成了浆状 物，加入HC1水溶液调节pH到3.05,继续搅拌90MIN,使其混合均 匀，停搅拌静置24小时，过程温度控制在20-21 °C。混合物通过过 滤分离并先用用200mL90。/。乙醇顶洗，顶洗结束是顶洗液电导率为 401us/cm，然后用200mL无水乙醇顶洗，得到了盐酸万古霉素湿品 101.9g，湿品通过干燥去除残留乙醇后得到中间体73.2g，再通过高 真空干燥后得到盐酸万古霉素成品66.5g，成品水分为2.7%，盐酸万 古霉素其松密度为0.61g/ml，紧密度为0.79 g/ml 。该无结晶型态盐酸 万古霉素，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相 同的特征。请参见图1。
本发明通过上面的实施例进行举例说明，但是，应当理解，本发 明并不限于这里所描述的特殊实例和实施方案。在这里包含这些特殊 实例和实施方案的目的在于帮助本领域中的技术人员实践本发明。任 何本领域中的技术人员很容易在不脱离本发明精神和范围的情况下 进行进一步的改进和完善，因此本发明只受到本发明权利要求的内容 和范围的限制，其意图涵盖所有包括在由附录权利要求所限定的本发 明精神和范围内的备选方案和等同方案。
权利要求
1、一种无结晶型态盐酸万古霉素，其特征在于，所述盐酸万古霉素为无结晶型态，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同的特征。
2、 如权利要求1所述的盐酸万古霉素，其特征在于，所述盐酸 万古霉素的X-射线衍射图谱不含有任何峰形。
3、 如权利要求1或2所述的盐酸万古霉素，其特征在于，所述 盐酸万古霉素的松密度为0.45 0.65g/ml，紧密度为0.65~0.85 g/ml 。
4、 一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要 求1~3中任一的权利要求所述的治疗有效量的无结晶型态盐酸万古 霉素、以及药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂或辅料。
5、 如权利要求4所述的药物组合物，其特征在于，该盐酸万古 霉素的治疗有效量为0.5 5g。
6、 一种如权利要求1~3所述的盐酸万古霉素的制备方法，其特 征在于，包括以下步骤(1) 具有万古霉素色谱纯度不低于80%的万古霉素粗品在含有 NH4HCCb流动相的层析柱中进行柱层析，得到色谱纯度不低于93%的有效层析液或有效层析液的浓縮液；(2) 向有效层析液或有效层析液的浓縮液加入碳酸盐，产生沉淀；(3) 采用乙醇进行顶洗，干燥得到盐酸万古霉素。
7、 如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述有效层析 液经过超滤、纳滤后可得到有效层析液的浓縮液，以通过碳酸盐产生 沉淀。
8、 如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述有效层析 液或有效层析液的浓縮液通过0.45pm和0.2pm的滤芯过滤后再进行 沉淀。
9、 如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述碳酸盐包 括(NH4)2C03， NH4HCO;j， Na2C03和NaHC03。
10、 如权利要求9所述的制备方法，其特征在于，向有效层析液 或有效层析液的浓縮液中加入碳酸盐所得到碳酸盐的浓度为3%~7%(W/V)。
11、 如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，加入碳酸盐后， 调节pH=2.0 3.5，不断搅拌30~90分钟，混合液温度控制在5 25°C ， 并静置24~48小时。
12、 如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，还包括采用 90%的乙醇水溶液进行多次顶洗，顶洗至电导率2000ias/cm时停止加 入90%的乙醇水溶液。
13、 如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，采用的柱层析 介质为葡聚糖凝胶Sephadex CM-25、琼脂糖SP Sepharose或琼脂糖 CMSepharose，流动相为4 6% (w/v) NH4HC03。
14、 如权利要求13所述的制备方法，其特征在于，流动相以流 量为0.5-1.5柱体积/小时进行洗脱。
15、 如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述超滤的回 流温度控制在10~20°C，并用纯化水洗涤滤渣，超滤膜选用 10000Da~50000 Da。
16、 如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述纳滤溶液 的温度控制在10 20°C，并分步加入纯化水和0.04% 0.06°/。的乙二胺 四乙酸(W/bons)，纳滤膜选用200Da 600Da。
17、 如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，还包括在柱层析前，将万古霉素粗品溶于纯水中，搅拌，用2 6 mol/L NaOH溶液 调整至pH-9 10，待完全溶解后过滤，收集滤液，用2 6mol/LHCl 溶液调整滤液至pH=4.5 6.0。
18、 如权利要求6所述的制备方法，还包括在用含有NH4HC03 流动相洗脱前，先用纯水和低浓度的NH4HC03溶液进行预洗。
19、 一种如权利要求1 3任一所述的盐酸万古霉素用于口服或注 射给药的用途。
全文摘要
本发明提供了一种高密度无结晶型态盐酸万古霉素及其制备方法、和该盐酸万古霉素用于口服或注射给药的用途、以及含有该盐酸万古霉素的药物组合物。所述盐酸万古霉素为无结晶型态，其具有与附图1所示的X射线粉末晶体衍射图谱基本相同的特征。通过本发明得到的盐酸万古霉素有效组份大大得到提高，其它杂质大大降低，纯度很高，色谱纯度可达到95％以上，不但可以用于注射剂，还可用于胶囊等固体制剂，同时产品外观颜色得到明显改观，适于口服或注射给药。
文档编号C07K9/00GK101613396SQ20081012643
公开日2009年12月30日 申请日期2008年6月26日 优先权日2008年6月26日
发明者劳学军, 孙新强, 张国钧, 王小勇 申请人:浙江医药股份有限公司新昌制药厂