专利名称：阿加曲班及其制备方法
技术领域：
本发明属于药物合成技术领域，涉及化学合成药物的制备方法，更具 体的说是一种阿加曲班的合成方法。
背景技术：
脑卒中(Stroke )是脑中风学名，是一种突然起病的脑血液循环障碍 性疾病。临床表现以猝然昏朴、不省人事或突然发生口眼歪斜、半身不 遂、舌强言蹇、智力障碍为主要特征。脑中风包括缺血性中风(短暂性 脑缺血发作、动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞、腔隙性脑梗塞、脑栓塞)、 出血性中风(脑出血、蛛网膜下腔出血)、高血压脑病和血管性痴呆四 大类。根据统计我国每年发生脑中风病人达200万。发病率高达120/10 万。现幸存中风病人700万，其中450万病人不同程度丧失劳动力和生 活不能自理。致残率高达75%。如常见的导致患者遗留语言、感觉或运动 功能障碍，需长期住院和家人照顾，给社会和家庭带来严重的经济问题， 更为严重的患者则可危及生命。在我国每年大约有300万人发生卒中， 近年还呈上升趋势，且缺少急性期治疗药物。因此，充分认识脑中风的 严重性，提高脑中风的治疗与预防水平，降低脑中风的发病率、致残率 和死亡率是医药工作者的当务之急。
阿加曲班(Argatroban )是目前为止世界上批准的用于急性缺血性脑 卒中治疗的唯一合成药物，具有如下的优点(l)直接凝血酶抑制剂， 对凝血酶具有高度的亲和性，选择性抑制凝血酶(2)分子量小，不但灭 活血液中游离状态的凝血酶，而且还能进入到血栓内部，直接灭活已经 与纤维蛋白结合的凝血栓(3)与凝血酶结合的速度非常快，而且是一种 完全可逆的过程。起效快，停药后很快恢复的特点使得阿加曲班即便过 量也很快自然恢复凝血功能(4)作用不依赖于体内的抗凝血酶，极低浓 度时即可抑制由凝血酶所致的纤维蛋白形成和血小板聚集。因此它比肝 素有更好的抗凝和抗血栓作用，可在发病48小时内用药，治疗有效率高，
副反应发生率低。
阿加曲班其化学名称为(2R，4R) -4-曱基-1-[^- ( (R，S)-3-曱 基-1， 2， 3， 4-四氢-8-喹啉磺酰基)-1^-精氨酰基]-2-哌咬羧酸一水合物。
化学结构式为
阿加曲班于1970年由日本三菱化学研究所(三菱制药林式会社)首 先合成。先被日本批准治疗外周血栓病和急性脑卒中。后被美国、法国 和英国几家制药公司购买许可，陆续被美国FDA批准用以肝素诱发的血 小板减少症和血栓综合症。阿加曲班在症状改善及总有效率方面在抗血 栓药中处于领先地位，其安全性与高效性为广大脑卒中患者带来了希望。 阿加曲班的问世为急性缺血性脑卒中的治疗提供了 一个新方案。
关于阿加曲班(Argatroban)的制备方法，目前文献报导的合成路线有 2条，第一条路线[EP8746; US4258192; US4201863; JP8115267〗。它是 以4-甲基哌啶为起始原料先制备中间体(2R, 4R ) -4-甲基-2-哌啶甲酸乙 酯。然后先与用t-BOC保护氨基的硝基L-精氨酸缩合，再与3-甲基-8-全啉磺酰氯缩合后经过水解、氢化、水合得到阿加曲班。此条路线合成 工艺复杂，操作过程需在氮气保护下进行，原料中有剧毒气体光气，操 作难度较大，不适合工业化生产。
第二条路线[US 4， 117， 127; JP 02-212473; EP 823430; EP 8746; J .C .S Perk Trans 1 1981 (5) ; JP 02-212473]。它是用硝基L-精氨酸先 与3-甲基-8-喹啉磺酰氯缩合后再与中间体(2R，4R) -4-曱基-2-哌啶甲 酸乙酯缩合，然后经过水解、氢化、水合得到阿加曲班。此合成路线尽 管工艺方法相对简单，原料易得到，但在N2-(3-甲基-8喹啉磺酰基)-『-硝基-L-精氨酸(羧化物)与(2R, 4R) 4MPE的缩合反应中，文献采用
的方法是先将羧化物制备为酰氯化物而后再进行缩合，该方法使用的酰 氯化试剂为三氯氧磷、三氯化磷等等，其具有刺激性臭味，易吸潮，在 潮湿空气中剧烈发烟，污染环境，对人体的呼吸道刺激较大，可引起刺 激症状及眼和皮肤灼伤。且采用此方法，操作复杂，收率较低，成本较 高，特别不适合大规模的工业化生产。
发明内容
本发明的目的是克服上述方法中的缺点与不足，提供一种阿加曲班
的制备方法，它是对第二条路线中的L-精氨酸与3-甲基-8-喹啉磺酰氯 缩合后的侧链与中间体(2R，4R) -4-曱基-2-哌啶甲酸乙酯缩合方法的重 要改进。采用缩合剂叠氮化磷酸二苯酯、氰代磷酸二乙酯、氯代磷酸 二乙酯或溴代磷酸二乙酯等缩合剂在低温至室温条件下直接进行缩合， 简化了操作，减少了污染，更有利于工业化生产。
本发明的技术方案如下
一种阿加曲班的合成方法，包括硝基L-精氨酸与夸啉磺酰氯缩合、 再与哌啶曱酸乙酯酰胺化反应、然后经水解、氢化得到阿加曲班；其特 征在于，所述的酰胺化反应是在有机溶剂中使羧化物(c-V)与(2R， 4R) 4MPE (Z-YH)在缩合剂，或缩合剂和脱水促进剂的存在下反应，其中羧 化物(c-V) : (2R， 4R) 4MPE ( Z-VII):缩合剂脱水促进剂的摩尔比 1: 0.8-1.2: 0. 8-1. 2: 0-1.2。
L-HOOG—CH(CH2)3NHC-NH-N02 NHS02
^H3
2R,4R
"COOCH2CH3 H
羧化物(c-V)结构式
Z"VD
(2R， 4R ) 4MPE ( Z-VII)
1C
本发明所述的酰胺化反应的温度条件为-10X:至30°C。优选0至25
本发明所采用的有机溶剂为四氢呋喃、DMF、 二氯甲烷、氯仿或二甲
5
基亚砜。
本发明所述的酰胺化反应，其中缩合剂为叠氮化磷酸二苯酯(DPPA )、 氰代磷酸二乙酯(DEPC)、氯代磷酸二乙酯或溴代磷酸二乙酯。
本发明所述的脱7JC促进剂为吡咬、三乙胺、4-吡咯基吡啶、4-二曱氨 基吡啶(DMAP) 、 4-二甲基吡啶或N, N-二曱基苯胺。使用计量一般根据 需要选择的范围在0-1.2摩尔，加入脱水促进剂可以加快反应进程，提 高收率；不加脱水促进剂反应也可发生，但反应时间相对延长，收率偏 低。
本发明所述酰胺化反应优选的制备方法为酰胺化反应是在有机溶剂 中使羧化物(c-V)与(2R,化)(Z-Vn) 4MPE在缩合剂，或缩合剂和脱 水促进剂的存在下反应，其中羧化物(c-V) : (2R, 4R) 4MPE ( Z-VH ): 缩合剂脱水促进剂的摩尔比l: 1-1.2: l-l. 2: 0-1.2。
本发明更加优选的酰胺化反应的制备方法为 将l.O摩尔(c-V)化合物简称羧化物与l.O摩尔的化合物(Z-VII)简称 (2R, 4R)4MPE，在四氢呋喃溶剂中搅拌溶清，于0*€加入1. 0摩尔缩合 剂，l摩尔脱水促进剂，室温搅拌4-6小时，加入饱和食盐水，分层，有 机层浓缩至干，加入氯仿溶清，使用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，干燥， 浓缩至干得到黄色固体，收率88%。
本发明的阿加曲班合成方法与现有合成工艺相比较所具有的积极效 果在于
本发明的合成工艺相对简单，割除了既污染环境，又有强烈刺激性的 酰氯化试剂，筒化了操作步骤，提高了收率，降低了成本，更适合于大 规模的工业化生产。同时本发明所采用的缩合剂，原料易得到，反应时 间缩短，产品的后处理更适合工业化的需要。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。下述各实施例仅用于说 明本发明而并非对本发明的限制。
本发明的参考合成路线如下(参考文献US 4,117,127; JP 02-212473; EP 823430; EP 8746; J .C .S Perk Trans 1 1981(5);<formula>formula see original document page 7</formula>侧链合成路线
-、硝基精氨酸
<formula>formula see original document page 8</formula>
硝基精氨酸
二、 n2—(3 —甲基—8—喹啉磺酰)一n6—硝基一l—精氨酸的制备
N<formula>formula see original document page 8</formula>
其中
N2- (3-甲基-8-喹啉磺酰基)-NG-硝基-L-精氨酸(C-V)的制备，参 考文献EP 823430A1。
实施例1
(2R， 4R ) -l-[Nt硝基-N2- ( 3-曱基-8-会啉磺酰基)4-精氨酰]-4-曱基-2-哌啶羧酸乙酯(Z-雨)的制备
将羧化物76. 4g (0.18摩尔)与30. 7克(0. 18摩尔)的(2R， 4R ) 4MPE加入反应瓶，加入THF 1000ml搅拌溶清，OX:加入49. 5g ( 0. 18摩 尔)DPPA，室温搅拌14小时，加入饱和食盐水500ml，搅拌10分钟， 分出有机层，水层使用THF 200mlx2提取，合并有机层，浓缩至干，加 入氯仿500nil溶清，分别使用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，干燥，浓缩至 干得到黄色固体，收率54%， HPLC>92% (归一法)。 ， 实施例2
(2R， 4R ) -1-[^-硝基-^- ( 3-曱基-8-喹啉磺酰基)-L-精氨酰]-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯(Z-雨)的制备
将羧化物100g (0. 24摩尔)与44g (0.26摩尔)的(2R， 4R ) 4MPE 加入反应瓶，加入二氯曱烷1000ml搅拌溶清，-5"C加入72. 6g (0. 26摩 尔)溴代磷酸二乙酯，搅拌下滴加吡啶23. 2ml ( 0.288摩尔)，30"C搅 拌6小时，加入饱和食盐水500ml，分出有机层，水层使用二氯甲烷400ml 提取，合并有机层，分别使用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，干燥，浓缩至 干得到黄色固体，收率84.5%， HPLC>95% (归一法)。 实施例3.
(2R, 4R) -1-[NG-硝基-N2- ( 3-曱基-8-夸啉磺酰基)-卜精氨酰]-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯(Z-稷)的制备
将羧化物76. 4g (0. 18摩尔)与30. 7克(0. 18摩尔)的(2R， 4R ) 4MPE加入反应瓶，加入DMF800ml，搅拌溶清，Ot:加入31. 2 ml (0.216 摩尔)氯化磷酸二乙酯，搅拌下加入DMAP26.4g (0.216摩尔)，25*0搅 拌6小时，减压蒸干溶剂，加入水500ml，水层使用二氯甲烷600ml分三 次提取，合并有机层，分别使用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，干燥，浓缩 至干得到黄色固体，收率88.5%, HPLC>95% (归一法)。 实施例4.
(2R, 4R) -1-[NG-硝基-N2- (3-甲基-8-喹啉磺酰基)-L-精氨酰]-4-甲 基- 2-哌咬羧酸乙酯(Z-Vffl )的制备
将羧化物76. 4g (0.18摩尔)与28. 7克(0. 168摩尔)的(2R， 4R) 4MPE加入反应瓶，加入乙酸乙酯1200ml搅拌溶清，151C加入30. 8g( 0. 189
摩尔)氰代磷酸二乙酯(DEPC)， 25'C搅拌6小时，加入饱和食盐水800ml，
分出有机层，水层使用乙酸乙酯700ml提取，合并有机层，分别使用碳
酸氩钠水溶液和水洗涤，干燥，浓缩至干得到黄色固体，收率72.5%,
HPLC>90% (归一法)。
实施例5.
最终产品阿加曲班的合成
(水解)将30. Og ( 2R, 4R ) -1-[NG-硝基-N2- ( 3-甲基-8-喹啉磺酰基) -L-精氨酰]-4-甲基-2-哌啶羧酸乙酯溶于100ml乙醇和100mllN氢氧化 钠溶液中，室温搅拌反应24小时，反应毕用1N盐酸调至中性，并浓缩 至约70ml，浓缩液用1N氢氧化钠溶液调至PH11，然后用乙酸乙酯100ml x3洗涤后，用1N盐酸酸化，用氯仿100ml x 3提取合并，无水硫酸钠干 燥后蒸干，得到28. 0g(97。/i)的无定形固体(2R, 4R)-1-[NG-硝基-N2-(3-曱基-8-喹啉磺酰基) -L-精氨酰]-4-甲基-2-哌啶羧酸，m.p. 211~213x:。
(氢化)将3. Og ( 2R， 4R) -1-[NG-硝基-N2- ( 3-曱基-8-喹啉磺酰基) -L-精氨酰]-4-曱基-2-哌啶羧酸加入反应釜中，加入40ml无水乙醇、 10ml冰醋酸、0. 3g5W钯碳，通氳气于50Kgf/cm2、 80t:氲化反应4小时， 反应结束后，出料、过滤、洗涤、减压浓缩，残余物加30ml氯仿，加30ml 饱和碳酸氢钠洗，加30ml水洗，减压蒸干，残余物固体用乙醇重结晶得 1. 75g(收率63. 4%) (2R，4R)-4-甲基-l-[N2-( ( R, S ) —3-甲基-1, 2, 3， 4-四氢-8-喹啉磺酰基)-L-精氨酰基]-2-哌啶羧酸。
(水合)将阿加曲班粗品21.0g加入110ml95W乙醇热溶，加活性炭 2.1g煮沸10分钟，热过滤，放冷析晶，过滤，105C真空千燥6小时得 到阿加曲班一水合物16. 5g,收率78. 6%。白色或类白色粉末状固体。
'H NMR (200MHz CD3OD): 5 ppm 0.85 (d ， 3 H)， 1.05 (d， 3 H)， 1.30 ~ 1.80 (m， 6 H)， 2.13 (m， 1 H)， 2.45 (m， 1 H)， 2.60 ~ 3.20 (m， 6 H)， 3.29(s， 1 H)， 3.35 (m， 2 H)， 3.98 (m， 1 H)， 4.11 (m， 2 H)， 6.54 (t， 1 H) ， 7.07 (d， 1 H)， 7.42 (d，lH)。
在详细说明的较佳实施例之后，熟悉该项技术人士可清楚地了解，在 不脱离上述申，专利范围与精神下可进行各种变化与修改，凡依据本发 明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均 属于本发明技术方案的范围。且本发明亦不受限于说明书中所举实例的 实施方式。
权利要求
1、一种阿加曲班的合成方法，包括硝基-L-精氨酸与喹啉磺酰氯缩合、再与哌啶甲酸乙酯酰胺化反应、然后经水解、氢化得到阿加曲班；其特征在于，所述的酰胺化反应是在有机溶剂中使羧化物(c-V)与(2R，4R)4MPE(Z-VII)在缩合剂，或缩合剂和脱水促进剂的存在下反应，其中羧化物(c-V)∶(2R，4R)4MPE(Z-VII)∶缩合剂∶脱水促进剂的摩尔比1∶0.8-1.2∶0.8-1.2∶0-1.2； 羧化物(c-V)结构式 (2R，4R)4MPE(Z-VII)。
2、 权利要求1所述的合成方法，其中的缩合剂为叠氮化磷酸二苯酯、 氰代磷酸二乙酯、氯代磷酸二乙酯或溴代磷酸二乙酯。
3、 权利要求1所述的合成方法，其中酰胺化反应的温度条件为-IO "C至30"C。
4、 如权利要求1所述的合成方法，其中的有机溶剂为四氢呋喃、二 氯甲烷、氯仿、二甲基曱酰胺或二甲基亚砜。
5、 如权利要求1所述的合成方法，其中的脱水促进剂为吡啶、三乙 胺、4-吡咯基吡啶、4-二曱氨基吡啶、4-二甲基吡啶或N， N-二曱基苯胺。
全文摘要
本发明涉及一种阿加曲班的合成方法。包括硝基L-精氨酸与喹啉磺酰氯缩合、再与哌啶甲酸乙酯酰胺化反应、然后经水解、氢化得到阿加曲班；其中所述的酰胺化反应是在有机溶剂中使羧化物(c-V)与(2R，4R)4MPE(Z-VII)在缩合剂，或缩合剂和脱水促进剂的存在下反应，其中羧化物(c-V)∶(2R，4R)4MPE(Z-VII)∶缩合剂∶脱水促进剂的摩尔比为1∶0.8-1.2∶0.8-1.2∶0-1.2。本发明所采用的缩合剂为叠氮化磷酸二苯酯、氰代磷酸二乙酯、氯代磷酸二乙酯或溴代磷酸二乙酯。本发明简化了操作，降低了成本，减少了污染，提高了收率，更适合阿加曲班大规模的工业化生产。
文档编号C07D401/00GK101348481SQ200810084148
公开日2009年1月21日 申请日期2008年3月27日 优先权日2007年12月25日
发明者刘秀颖, 吴民义, 周学福, 孙继铨, 张殿镇, 杨胜利, 虹 瞿, 胡雅萍, 健 赵, 克 马, 魏文涛 申请人:天津泰普药品科技发展有限公司;天津药物研究院药业有限责任公司