专利名称：：结合三叶因子的构象特异性抗体以及使用该抗体治疗癌症以及增殖疾病的方法
技术领域：
：本发明大体涉及针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体，以及使用这种抗体调节、治疗、预防或者缓解癌症或者增殖疾病的发展的方法。
背景技术：
：对于动物体内的细胞的增殖和/或存活进行的调节以及控制是一种复杂的过程，这关系到许多细胞因子以及它们之间的相互作用。这些细胞因子中有任意数量的细胞因子在表达上发生突变或者改变将导致细胞发生不受控制的增殖或者生长，并且最终导致肿瘤以及癌症的形成。对于细胞的生长以及发育进行的正常的调剂以及控制涉及到激素和/或生长因子。例如，在正常的青春期乳腺的发育过程中涉及到生长激素(GH)(参见Walden等人于1998年在Endocrinology《内分泌学》139,659-662中发表的文章；参见Kleinberg于1997年在J.MammaryGlandBiol.Neoplasia《乳腺生物学肿瘤形成杂志》2，49-57中发表的文章；Bchini等人(于1991年)在Endocrinology《内分泌学》128，539-546中发表的文章；Tornell等人于1991年在Int.J.Cancer《国际癌症杂志》49，114-11中发表的文章；Nagasawa等人于1985年在Eur.J.CancerClin.Oncol《欧洲临床肿瘤学杂志》21，1547-1551中发表的文章；Swanson以及Unterman于2002年在Carcinogenesis《肿瘤形成学》23,977-982中发表的文章;Stavrou以及Kleinberg于2001年在Endocrinol.Metab.Clin.NorthAm.《北美临床代谢内分泌学》30，545-563中发表的文章；0kada以及Kopchick于2001年在TrendsMol.Med.《分子医学趋势》7，126-132中发表的文章；Ng等人于1997年在Nat.Med.《自然医学》3，1141-1144中发表的文章)，并且所述生长激素(GH)在正常的人类乳腺中进行表达(参见Raccurt等人于2002年在J.Endocrinol《内分泌学杂志》175，307-318中发表的文章)。激素例如生长激素(GH)的表达水平的改变可以导致细胞的异常增殖。例如，人类生长激素(hGH)基因的上皮表达的增强与病理学增殖的产生有关，并且在转移性乳腺癌细胞中观察到最高水平的人类生长激素的表达(参见Raccurt等人于2002年在J.Endocrinol《内分泌学杂志》175，307-318中发表的文章)。这类自分泌人类生长激素的表达的改变可以导致正常细胞向癌症细胞的转化。目前需要进一步的了解激素和/或生长因子在增殖疾病的形成中所起的作用，包括识别出任何促进细胞增殖、细胞存活和/或致瘤转化的细胞因子。这将为调节增殖和/或存活的方法的识别带来帮助，特别是为治疗增殖疾病例如癌症的方法的识别带来帮助。
发明内容本发明提供针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体，以及使用这种抗体调节，例如减轻、抑制、治疗或者预防癌症或者增殖疾病的方法，和/或调节，例如减轻、抑制、或者缓解癌症或者增殖疾病的发展的方法。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括能够与三叶因子l(TFFl)多肽发生特异性结合的抗体，其中所述抗体结合于所述三叶因子1多肽的构象表位上。例如，所述构象表位选自如表3中所示的构象表位。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括能够与三叶因子1(TFF1)多肽发生特异性结合的抗体，其中所述抗体包括抗原决定簇，所述抗原决定簇选自如表4中所示的抗原决定簇。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括能够与三叶因子l(TFFl)同型二聚体多肽发生特异性结合的抗体，其中所述抗体结合于所述三叶因子1多肽的构象表位上。例如，所述构象表位选自如表l中所示的构象表位。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括能够与三叶因子l(TFFl)同型二聚体多肽发生特异性结合的抗体，其中所述抗体包括一种如表2中所示的抗原决定簇。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括能够与三叶因子3(TFF3)多肽发生特异性结合的抗体，其中所述抗体结合于所述三叶因子3多肽的构象表位上。例如，所述构象表位选自如表5中所示的构象表位。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括能够与三叶因子3(TFF3)同型二聚体多肽发生特异性结合的抗体，其中所述抗体结合于所述三叶因子3多肽的构象表位上。例如，所述构象表位选自如表5中所示的构象表位。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括能够与三叶因子3(TFF3)同型二聚体多肽发生特异性结合的抗体，其中所述抗体包括如表6中所示的抗原决定簇。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括嵌合抗体组合物，所述嵌合抗体组合物含有三叶因子1结合部位以及三叶因子3结合部位。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体包括由杂交瘤细胞系产生的抗体，并且在本发明中指的是1C6，3F6，2C5，1D，1A12，3A2，3A5，3B8，3F4，3F12，3G4，1A11，2B3，3B4，1C4，2C12，2A8，3D7，1E4，2E2，2H4，1D8以及2D7。这里描述的针对三叶因子(TFF)具有构象特异性的抗体与三叶因子多肽发生特异性结合。例如，在某些实施方式中，所述针对三叶因子的构象特异性抗体与三叶因子1发生结合。在某些实施方式中，所述针对三叶因子的构象特异性抗体与三叶因子3发生结合。本发明还提供了能够同时识别三叶因子1以及三叶因子3的多价抗体。这些抗体在本发明中还被称为多亚基抗体。例如，在某些实施方式中，所述的三叶因子特异性抗体是异源二聚体。在某些实施方式中，所述的三叶因子特异性抗体是嵌合抗体，在所述嵌合抗体中来自于一种物种的抗体的抗原结合片段与来自于另外一种物种的恒定区域发生融合。例如，所述的三叶因子特异性抗体是一种人源化抗体。这里所使用的所述术语"抗体"取其最广泛的含义，并且意在包括完整的单克隆抗体或者多克隆抗体，及其衍生物，变体，片段和/或对其进行的任意其他修饰，只要它们表现出期望的生物活性即可。抗体包括免疫球蛋白分子以及免疫球蛋白(Ig)分子的免疫活性部分，即，含有能够与抗原发生特异性结合(通过免疫反应)的抗原结合位点的分子。它们包括，但不局限于，多克隆，单克隆，嵌合，单链，Fc，Fab，Fab'，以及FA片段，以及Fab表达文库。抗体分子涉及到免疫球蛋白G(IgG)，免疫球蛋白M(IgM)，免疫球蛋白A(IgA)，免疫球蛋白E(IgE)以及免疫球蛋白D(IgD)中的任何一种种类，它们之间通过存在于所述分子中的重链的性质的不同而区别于其他。其中也包括亚种，例如免疫球蛋白Gl(IgGl)，免疫球蛋白G2(IgG2)以及其他。所述的轻链可以是一种k链或者是A链。本发明中对于抗体的引用包括对于所有种、亚种以及类型的引用。同样被包括在内的是嵌合抗体，例如，单克隆抗体或者对其进行的修饰，使其对于不只一种来源具有特异性，例如，小鼠序列或者人类序列。进一步被包括在内的是骆驼抗体或者纳米抗体。三叶因子结合抗体还包括具有多种特异性例如双重特异性的抗体及其功能性片段。在本发明中所述术语"三叶因子结合抗体"以及"三叶因子抗体"是交替使用的。应当理解的是，在本发明中对于"抗体"或者任何类似术语的每种引用都包括完整抗体，以及对其进行的任意修饰。三叶因子构象特异性抗体包括那些与结构域或者暴露在外的残基发生结合的抗体，例如在溶液中的蛋白质的三级结构的外环结构上的残基，参与三叶因子二聚化、聚合作用的残基，以及负责促进细胞增殖、存活以及导致肿瘤形成的结构域。例如，所述抗体的表位结合特异性包括一种三叶因子序列，所述三叶因子序列含有一种与细胞增殖、存活以及导致肿瘤形成的剌激作用相关的结构域。例如，与本发明的表1、表3或者表5中提供的构象表位发生结合的抗体。所述的抗体是一种多克隆抗血清或者是一种单克隆抗体或者是上述任意物质之一的衍生物。本发明不仅仅包括完整的单克隆抗体，也包括具有免疫活性的抗体片段，例如，Fab片段或者(Fab、片段；工程化的单链Fv分子；或者嵌合分子，例如，含有一种抗体的结合特异性以及另外一种抗体的其余部分的抗体，其中所述的一种抗体是例如来源于鼠科动物，而所述的另外一种抗体是例如来源于人类。三叶因子结合抗体被用来调节，例如完全的或者部分程度的减轻或者抑制所述目标三叶因子分子(即，能够与一种给定的三叶因子结合抗体发生结合的三叶因子抗原，)发生结合的能力或者与另外的三叶因子分子发生反应的能力。所述的另外的三叶因子分子可以与所述的目标三叶因子分子是相同的，正如在同型多聚情况中，例如，同型二聚，或者所述的另外的三叶因子分子与所述的目标三叶因子分子是不同的。三叶因子结合抗体还被用来调节，例如完全的或者部分程度的减轻或者抑制所述目标三叶因子分子发生结合的能力或者与第二分子发生反应的能力，其中所述第二份子是例如，一种同类的三叶因子受体分子，一种胞外受体或者其他的细胞表面和/或胞内信号分子。其他的三叶因子结合抗体被用来直接针对三叶因子过表达细胞进行破坏。在所述后者的情况中，在利用所述抗体进行治疗的患者体内，所述的抗体或其片段激活了补体(complement)。在某些情况中，在利用所述抗体进行治疗的患者体内，所述的抗体介导了患者体内的肿瘤细胞的抗体依赖性细胞毒性。所述的抗体或其片段可以单独施用或者与细胞毒性试剂共同施用。所述抗体与表达三叶因子的肿瘤细胞的结合导致了所述细胞的损伤或者死亡，从而减轻了肿瘤的负载。所述抗体任选的与一种放射性化学标记或者化学标记进6行共轭结合，所述的放射性化学标记或者化学标记能够使与其结合的细胞对于放射性介导的杀伤或者激光介导的杀伤具有敏感性。任选的，所述的抗体组合物含有药物可接受性载体和/或第二种化合物。例如，所述的第二种化合物是一种化学治疗剂或者抗肿瘤制剂。这些制剂可以连续施用，例如在施用所述三叶因子抗体之前或者之后进行施用，或者同时施用，例如，共同施用或者共同治疗。本发明所述的三叶因子构象特异性抗体被用在抑制肿瘤细胞的增殖和/或存活的方法中，所述方法通过利用本发明所述的三叶因子构象特异性抗体中的任意一种或者这些抗体的组合与所述细胞、被怀疑含有肿瘤细胞的生物样本、胞外受体例如三叶因子受体、或者位于所述肿瘤细胞之上的另外一种细胞表面蛋白进行接触的方式来完成。本发明所述的三叶因子构象特异性抗体被用在针对需要接受治疗的宿主预防癌症或者细胞增殖和/或存活疾病的方法中，所述方法通过施用本发明所述的三叶因子构象特异性抗体中的任意一种，或者通过施用这些抗体的组合的方式来完成的。本发明所述的三叶因子构象特异性抗体被用来治疗癌症或者肿瘤。例如，所述的肿瘤或者癌症是一种上皮肿瘤，例如，肺癌，结肠直肠癌，乳腺癌，胰腺癌，卵巢癌，前列腺癌，肝癌，胃癌，子宫内膜癌，肾癌，甲状腺癌，胆道癌，食道癌，脑癌，恶性黑素瘤，多发性骨髓瘤，血液瘤以及淋巴瘤。本发明所述的三叶因子构象特异性抗体被用来治疗增殖疾病。增殖疾病包括，例如，角化细胞过度增殖，炎性细胞浸润，细胞因子变化，子宫内膜异位，上皮以及皮样囊肿，脂肪瘤，腺瘤，毛细血管以及皮肤血管瘤，淋巴管瘤，痣损伤，畸胎瘤，肾瘤，肌纤维瘤，成骨细胞瘤，以及其他退变性聚集。所述的宿主是哺乳动物，优选是患有肿瘤或者癌症或者增殖疾病的人类，或者是存在发展为肿瘤或者癌症或者增殖疾病的危险的人类。所述的组合物以及方法同样可以被有效的用于兽医用途，例如，用于治疗猫，狗，以及除家畜、马、牛以及类似牲畜之外的其他宠物。本发明所述的三叶因子构象特异性抗体也同样可以被有效的用于各种诊断应用之中。本发明的特征在于公开了一种用于诊断哺乳动物体内的癌症或者细胞增殖和/或存活疾病的方法，所述方法通过下述方式来完成在足以形成抗原-抗体复合物的条件下，将来自于所述哺乳动物的组织或者体液与一种三叶因子构象特异性抗体发生接触，并且对所述的抗原-抗体复合物进行探测。利用本发明所述的三叶因子构象特异性抗体进行探测的癌症或者肿瘤包括上皮肿瘤，例如肺癌，结肠直肠癌，乳腺癌，胰腺癌，卵巢癌，前列腺癌，肝癌，胃癌，子宫内膜癌，肾癌，甲状腺癌，胆道癌，食道癌，脑癌，恶性黑素瘤，多发性骨髓瘤，血液瘤以及淋巴瘤。利用本发明所述的三叶因子构象特异性抗体进行探测的增殖疾病包括，例如，角化细胞过度增殖，炎性细胞浸润，细胞因子变化，子宫内膜异位，上皮以及皮样囊肿，脂肪瘤，腺瘤，毛细血管以及皮肤血管瘤，淋巴管瘤，痣损伤，畸胎瘤，肾瘤，肌纤维瘤，成骨细胞瘤，以及其他退变性聚集。将来自于患者的组织样本例如固体肿瘤的活组织切片以及体液与三叶因子构象特异性抗体进行接触，其中所述的体液是例如来自于中枢神经系统(CNS)的体液，血液，血清，尿液，唾液，痰液，肺脏渗出液，以及腹水液体。除非特别指明，本发明中所使用的全部技术术语以及科学术语与本发明所述
技术领域：
的普通技术人员通常所理解的含义相同。尽管与本发明中所描述的那些方法以及物质相类似或者相等同的方法以及物质可以被用于本发明的实践或者检验中，但下面描述的是合适的方法以及物质。本发明中所提及的所有公开物，专利申请，专利，以及其他参考文献均在此引入作为参考。如果存在矛盾的状况，则以本发明的具体内容包括定义为主。除此之外，所述的材料、方法以及实施例仅仅是描述性的而并不意在进行限制。通过下面的详细描述以及权利要求，可以显而易见的看出本发明的其他特征以及优点。附图l是一张照片，描述的是对三叶因子1以及三叶因子3重组蛋白(3微克)进行的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析而得到的结果，其中所述的三叶因子1以及三叶因子3重组蛋白经过了100毫摩二硫苏糖醇(DTT)的还原、热变性并且进行电泳。三叶因子3具有大约9kDa的分子量，而三叶因子1具有大约7kDa的分子量。附图2是一张照片，描述的是对重组三叶因子1以及三叶因子3进行的天然_聚丙烯酰胺凝胶电泳分析而得到的结果。利用天然样本缓冲液装载3微克的三叶因子1以及三叶因子3。带(Lane)A:三叶因子3;带B:三叶因子l;带C:指示出的分子量标记物。在天然条件下，观察到的三叶因子l主要是一条单一的带(单体)以及一条次要带(二聚体)，而观察到的三叶因子3是一种二聚体以及具备高分子量(四聚体)。附图3是一张照片，描述的是对重组人类三叶因子1以及三叶因子3蛋白进行的天然-聚丙烯酰胺凝胶电泳western印迹分析而得到的结果。观察到的三叶因子3是以多亚基的形式(大约35kDa)运行的，而观察到的三叶因子1则主要是单体形式，占次要程度的是二聚体。带A:印有三叶因子3抗体的重组三叶因子1蛋白；带B:印有三叶因子3抗体的重组三叶因子3蛋白；带C:印有三叶因子1抗体的重组三叶因子3蛋白；带D:印有三叶因子1抗体的重组三叶因子1蛋白；带E:指示出的分子量标记物。所述的多克隆抗体对于其引发(raised)的抗原具有高度的特异性。所述的抗体对于其抗原具有高度的敏感性所述的抗体以l:100000的水平进行使用，并且仍然表现出强烈的信号，并且在酶联免疫吸附试验(ELISA)中，所述的抗体以大于1:5000000的水平进行滴定。附图4是一张图表，其说明了三叶因子1或者三叶因子3中的任意一种的抗体使得乳腺癌细胞在体外发生细胞凋亡。经受细胞凋亡的细胞的百分比利用Hoescht33258通过对清晰可见的发生细胞凋亡的核细胞进行观察来进行测定。附图5是一张照片图表，描述的是三叶因子1以及三叶因子3在各种不同的人类癌症细胞系中的表达，是由逆转录聚合酶链式反应(PCR)测定的。所述细胞的名称以及组织的来源被标注于所述附图之上。B-肌动蛋白被用来作为装载对照。附图6是一张图表，其说明了三叶因子1构象特异性抗体或者三叶因子3构象特异性抗体在抑制(A)乳腺癌细胞；(B)前列腺癌细胞和(C)胃癌细胞以及(D)T47D乳腺癌细胞的体外存活能力方面所产生的作用。为了进行比较，它莫西芬(TAM)也被包括在(A)中。(IgG=对照的免疫球蛋白G;pAbl=三叶因子1的多克隆抗血清；pAb3=三叶因子3的多克隆抗血清)。8附图7是一张图表，其说明了三叶因子1(A)或者三叶因子3(B)的多克隆抗体减小了由MCF-7细胞所引起的肿瘤的体积，所述结果是在免疫妥协小鼠体内进行的异种移植物检测中得到的。箭头表示的是开始施用对照免疫球蛋白G或者直接针对三叶因子1或者三叶因子3的抗体。附图8是一张图表，其说明了三叶因子1的小鼠单克隆抗体降低了胃癌细胞的体外存活能力(A)。所述附图还包括胃癌细胞(B)的代表性的显微镜照片以及作为对比的对照免疫球蛋白G(C)的显微镜照片，其中所述的胃癌细胞是经过三叶因子1单克隆抗体1C6培养72小时之后获得的。附图9是一张图表，其说明了与对照组小鼠免疫球蛋白G(mlgG)相比，三叶因子1的小鼠单克隆抗体(1C6)降低了HT-29直肠癌细胞的体外存活能力。附图10是一张图表，其说明了三叶因子1的小鼠单克隆抗体降低了DLD-1直肠癌细胞的体外存活能力。附图11是一张图表，其说明了三细胞的体外存活能力。附图12是一张图表，其说明了三细胞的体外存活能力。附图13是一张图表，其说明了三细胞的体外存活能力。附图14是一张图表，其说明了三细胞的体外存活能力。附图15是一张图表，其说明了三细胞的体外存活能力。附图16是一张图表，其描述的是利用不同浓度的2D7单克隆抗体对三叶因子1抗原进行的探测，利用10纳克以及100纳克的2D7单克隆抗体(mAb)探测到小于0.1匹克的三叶因子l抗原。叶因子1的小鼠单克隆抗体降低了MCF-7乳腺癌叶因子3的小鼠单克隆抗体降低了DLD-1直肠癌叶因子3的小鼠单克隆抗体降低了HT-29直肠癌叶因子3的小鼠单克隆抗体降低了MCF-7乳腺癌:叶因子3的小鼠单克隆抗体降低了T47D乳腺癌具体实施例方式所述的三叶因子蛋白家族的特征在于是一种具有40个氨基酸的三叶基序，所述的三叶基序含有3个保守的二硫键。所述的3个链内的二硫键形成了所述的三叶基序(三叶结构域)。所述的三叶基序是本领域已知的，例如，参见Taupin以及Podolsky于2003年在NatRevMolCellBio.《自然评论分子细胞生物学》4(9):721-32中发表的文章；Hoffmann等人于2001年在HistolHistopathol《组织学与组织病理学》16(1):319-34中发表的文章；以及Thim于1997年在CellMolLifeSci《细胞与分子生命科学》53(11-12):888-903中发表的文章。已经在人类中识别出三个不同的三叶肽成员。三叶因子l或者pS2首先作为一种雌激素诱导基因从乳腺癌细胞系中被检测出来。在人类的胃中，其主要存在于胃粘膜的小凹细胞之中。三叶因子2(原来被表示为解痉多肽或者SP)是首先从猪的胰腺中被纯化出来的，并且其在颈粘液细胞、深层幽门腺以及布路纳氏腺(Bru皿er'sglands)中进行表达。三叶因子3或者肠内三叶因子(ITF)是最后被识别出来的，并且其主要在小肠以及大肠的杯状细胞中进行表达。所述的三叶肽在粘膜愈合的过程中有所涉及并且其在肿瘤疾病中以异常升高的水平进行表达。有很多的人类癌症以及胃肠炎性恶性肿瘤异常的表达了三叶肽，其中所述的人类癌症以及胃肠炎性恶性肿瘤包括胃溃疡以及大肠炎，克罗恩氏病，胰腺炎，以及胆道疾病。已经在其他动物中识别出了这些人类蛋白的直系同源物，所述的动物是例如大鼠，小鼠以及灵长类。所述的三叶肽家族在乳腺中具有互为分歧的功能，三叶因子1提供有丝分裂原的功能而三叶因子2则剌激分支的成形以及细胞的存活。在人类乳腺的恶性肿瘤中，三叶因子3与三叶因子1存在着广泛的共同表达，而三叶因子2不在乳腺上皮细胞中进行表达。本发明所提及的"三叶因子"、"三叶因子蛋白"或者"三叶因子蛋白家族"指的是一组包括三叶因子1、三叶因子2、以及三叶因子3在内的相关蛋白。三叶因子蛋白与其相同的种类存在至少大约28至45%的氨基酸同一性。这里所使用的所述术语"抗体"指的是免疫球蛋白分子以及免疫球蛋白(Ig)分子的免疫活性部分，即，含有能够与抗原发生特异性结合(通过免疫反应)的抗原结合位点的分子。这样的抗体包括，但不局限于，多克隆，单克隆，嵌合，单链，Fab，Fab'，以及F(ab')2片段，以及Fab表达文库。"特异性结合"或者"发生免疫反应"指的是所述的抗体与所述目标抗原的一种或者多个抗原决定簇发生反应，而不与其他的多肽发生反应(即，结合)，或者以低得多的亲和性(Kd>10—6)与其他多肽进行结合。已知所述的基本抗体结构单元包括一种四聚体。每个四聚体是由两对同样的多肽链组成的，每对具有一种"轻"链(大约25kDa)以及一种"重"链(大约50-70kDa)。所述每条链的氨基末端部分包括一种大约100至110个或者更多个氨基酸的可变区域，所述可变区域主要负责抗原的识别。所述每条链的羧基末端部分定义了一种恒定区域，主要负责效应物功能。人类的轻链被分类为k轻链以及A轻链。重链被分类为ii，o，y，a，或者e，并且分别将所述的抗体同型物定义为免疫球蛋白M(IgM)，免疫球蛋白D(IgD)，免疫球蛋白A(IgA)以及免疫球蛋白E(IgE)。在轻链以及重链之中，所述的可变区域以及恒定区域通过一种具有大约12个或者更多个氨基酸的"J"区域相互连接，并且其中所述的重链还包括一种具有大约IO个或者更多个氨基酸的"D"区域。通常可以参见FundamentalImmunology《基础免疫学》第七章(Paul，W.，编辑，第二版，Raven出版社，纽约(1989年))。每个所述轻链/重链对的可变区域构成了所述的抗体结合位点。这里所使用的所述术语"单克隆抗体"(MAb)或者"单克隆抗体组合物"指的是一类抗体分子群体，所述的抗体分子仅仅含有一种抗体分子的分子种类，其由一种唯一的轻链基因产物以及一种唯一的重链基因产物组成。特别是，在所述群体的所有的分子中，所述单克隆抗体的互补决定区域(CDR)是相同的。单克隆抗体含有一种抗原结合位点，所述的抗原结合位点能够与所述抗原的一种特定的表位发生免疫反应，所述的抗原即被表征为与所述抗体具有唯一的结合亲和性。—般而言，从人类中获得的抗体分子涉及到免疫球蛋白G(IgG)，免疫球蛋白M(IgM)，免疫球蛋白A(IgA)，免疫球蛋白E(IgE)以及免疫球蛋白D(IgD)中的任何一种种类，它们之间通过存在于所述分子中的重链的性质的不同而区别于其他。某些种类还具有亚种，例如免疫球蛋白Gl(IgG》，免疫球蛋白G2(IgG》以及其他。而且，在人类中，所述的轻链可以是一种k链或者是A链。所述的术语"抗原结合位点"或者"结合部位"指的是所述免疫球蛋白分子中参与进行抗原结合的部分。所述的抗原结合位点是由所述重("H")链以及轻("L")链的N-末端可变("V")区域的氨基酸残基形成的。在所述的重链以及轻链中的可变区域内具有三个高度分歧的展开(stretches)，被称为"高变区域"，所述高变区域介于更加保守的侧翼展开之间，其中已知所述的更加保守的侧翼展开被称为"骨架区域"或者"FRs"。因此，所述的术语"骨架区域FR"指的是天然发现的存在于免疫球蛋白的高变区域之间或者与所述高变区域相邻的氨基酸序列。在一种抗体分子中，轻链上的三个所述高变区域以及重链上的三个所述高变区域在三维空间内是相互裸露的，从而形成了一种抗原结合表面。所述的抗原结合表面互补于所述结合抗原的三维表面，并且每条重链以及轻链上的所述三个高变区域被称为"互补决定区域"或者"CDR"。每个结构域上的氨基酸的分配与具有免疫学重要性的Kabat蛋白序列的定义中相一致(NationalInstitutesofHealth(国立卫生研究院)，Bethesda贝塞斯达)，Md.(1987年以及1991年))，或者参见Chothia&Lesk(于1987年)在J.Mol.Biol.《分子生物学杂志》196:901-917中发表的文章，Chothia等人(于1989年)在Nature《自然》342:878-883中发表的文章)。这里所使用的所述术语"表位"包括能够与免疫球蛋白、scFv、或者T细胞受体发生特异性结合的任意的蛋白决定簇。所述的术语"表位"包括能够与免疫球蛋白或者T细胞受体发生特异性结合的任意的蛋白决定簇。表位决定簇通常是由分子中具有化学活性的表面基团构成的，所述的表面基团是例如氨基酸或者糖侧链，并且通常具有特异性的三维结构特性，以及特异性的充电特性。当所述解离常数《1微摩，优选《100纳摩并且最优选《10纳摩时，抗体被认为能够与抗原发生特异性的结合。本领域技术人员能够意识到，在不进行过度不当的试验的条件下确定一种抗体是否与本发明所描述的三叶因子1抗体或者三叶因子3抗体具有相同的特异性是可能的，只要确定前者是否阻止了后者与CD3抗原多肽的结合即可。如果所述的受试抗体与本发明所述的抗体形成竞争，这种竞争表示为本发明所述的三叶因子1抗体或者三叶因子3抗体发生的结合的减少，那么所述的两个抗体结合于相同的、或者紧密相关的表位。确定一种抗体是否具有本发明所述抗体的特异性的另外一种方式是利用对所述抗体具有正常反应性的三叶因子抗原，即，三叶因子l或者三叶因子3，对本发明所述的抗体进行预培养，并且随后加入受试抗体，从而确定所述受试抗体与所述三叶因子抗原发生结合的能力是否被抑制。如果所述受试抗体被抑制，那么其可能与本发明所述抗体具有相同的、或者官能上等价的表位特异性。本发明所描述的数据是通过下列物质以及方法得到的。重组人类三叶因子l以及三叶因子3蛋白的制备利用来自于AmershamBiosciences的谷胱甘肽S_转移酶(GST)基因融合系统在大肠杆菌细菌中制备重组三叶因子l以及三叶因子3蛋白。利用下述引物对通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)对编码成熟蛋白的、来自于乳腺癌(MCF-7)细胞的人类三叶因子1以及三叶因子3cDNA进行扩增5'-ccggaattcGAGGCCCAGACA-3'(正向，在下游情况中克隆衔接体)以及5'-ccgetcgagCTAAAATTCACA-3'(逆向)用于进行三叶因子1的扩增；而5，-ccggaattcGAGGAGTACGTGGGC-3'(正向)以及5，-ccgetcgagTCAGAAGGTGCA-3'(逆向)用于进行三叶因子3的扩增。通过5'EcoRI以及3'Xhol酶切将上述逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)产物克隆至pGEX4T1载体(AmershamBiosciences)中，从而生成pGEX4Tl-三叶因子1以及pGEX4Tl-三叶因子3质粒。所述的质粒是经过DNA序列校验的。上述pGEX4T1-三叶因子1以及pGEX4Tl-三叶因子3质粒被用来转化BL21-Gold感受态细胞(Strategene)。将单独的重组大肠杆菌菌落接种至含有羧苄青霉素(50微克/毫升)的LB培养基中。在LB培养基/羧苄青霉素中以1:200的比例对上述过夜的培养液进行稀释，其PH达到7.4，并且在37t:下进行培养，直至600纳米处的光学密度达到大约0.5。随后，通过加入异丙基-13-D-硫代半乳糖苷(IPTG)达到0.2毫摩的最终浓度，来诱导蛋白的表达，并且将所述培养液在37t:下继续培养3-4小时。收集细胞并且在非变性条件下将谷胱甘肽S-转移酶-融合蛋白(GST-fusionproteins)从细胞团块中分离出来，并且利用谷胱甘肽琼脂糖4B基质(AmershamBiosciences)对其进行纯化。利用凝血酶蛋白酶对结合于所述柱之上的谷胱甘肽s-转移酶融合蛋白进行酶切反应，从而使三叶因子1/三叶因子3蛋白从谷胱甘肽中切离开来并且利用磷酸缓冲液(PBS)将其从柱中洗脱出来，从而获得本质上纯的产物。利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)在4-12X的NuPAGE双向-三向凝胶(Invitrogen)上对完整的谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白以及纯化的三叶因子1和三叶因子3蛋白进行分析，并且利用考马斯亮蓝染色进行显像，并且通过Bradford's检测进行量化(附图1)。所述的三叶因子1以及三叶因子3重组蛋白被成功的从细菌中分离出来。随后在自然条件下使所述蛋白溶解并且通过亲和色谱对其进行纯化。所述的最终的天然蛋白因而适合作为抗原被用于多克隆抗体的制备之中。上述方案可以被扩大规模用来制备毫克级的重组蛋白，以满足所述构象特异性多克隆抗体的制备以及亲和纯化的需求。多克降抗体的制备利用在大肠杆菌中制备的5毫克纯化的重组天然三叶因子1以及三叶因子3蛋白来引发相应的兔抗三叶因子1以及三叶因子3的多克隆抗体。利用200微克的每种抗原通过对动物的肌肉内注射的方式对两只ZIKA雌性兔进行免疫。每月利用100微克的抗原对其进行加强(boost)。在每个月的月末通过耳边缘静脉的导管插入术对兔进行抽血并且将所述的抗体从所述的抗血清中被亲和纯化出来抗三叶因子1-06和抗三叶因子1-07，以及抗三叶因子3-08和抗三叶因子3-09。利用酶联免疫吸附(ELISA)滴定法测定其敏感性，并且利用天然以及还原型western印迹分析测定其特异性。将引发出的针对天然三叶因子1以及三叶因子3抗原的所述构象特异性多克隆抗体进行亲和纯化。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对来自于四只兔子的所有批次的抗体的敏感性/亲和性进行测试，并且利用天然western印迹分析对来自于四只兔子的所有批次的抗体的特异性/抗原_选择性进行测试。生物材料的保藏在国际承认的用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约的条款的要求下，于2007年9月27日，在10801UniversityBoulevard，Manassas(马纳萨斯)，VA20110-2209USA(美国)的美国典型微生物保藏中心(ATCC)对所述的杂交瘤细胞系M661/7E5/1C6，M661/7E5/3F6，M661/7E5/2D7，M661/7E5/2C5，以及M661/7E5/1D8进行了保藏，所述的杂交瘤细胞系用于制备本发明中被称为1C6，3F6，2D7，2C5，以及1D8的抗体，其联邦快递12(FederalExpress)的Airbill追踪号码为799193538311。美国典型微生物保藏中心(ATCC)已经于2007年10月3日发出了收到于2007年9月27日进行保藏的细胞系的证明。酶联免疫吸附试验(ELISA)将存在于100微升50毫摩的碳酸氢钠/pH8.5中的100纳克天然三叶因子1以及三叶因子3重组蛋白涂覆于96孔NUNCMaxiSorp微滴定板上并且在室温(RT)下培养过夜。利用存在于磷酸缓冲液/o.1X的吐温-20(PBST)中的5%的无脂肪无水牛乳粉末对上述孔进行1小时的封闭。在封闭过后，向孔中加入100微升的一级抗体(多克隆抗三叶因子1或者抗三叶因子3)并且培养1小时。所述三叶因子1以及三叶因子3多克隆抗体的储备浓度为i微克/微升，利用pbst(磷酸缓冲液/吐温)以i:500，i:iooo，i:ioooo，i:25000，i:50000，i:ioooooo，i:2000000，i:4000000以及i:8000000的水平一式三份的进行连续稀释。利用PBST(磷酸缓冲液/吐温)对所述的孔洗涤三次并且随后利用辣根过氧化物酶(HRP)共轭的抗兔二级抗体(利用磷酸缓冲液/吐温以1:1000的比例稀释)培养1小时。利用PBST(磷酸缓冲液/吐温)对所述的孔洗涤5次并且通过底物缓冲液产生信号。通过加入3N的盐酸终止所述反应。在405纳米下对所述培养板进行读数。上述酶联免疫吸附试验(ELISA)的结果表明，全部四种多克隆抗体对于它们各自的天然抗原具有高亲和性，并且不会交错的与其他的天然三叶因子抗原发生反应。在达到高于l:4000000的稀释度后滴定出所述的抗体。天然-聚丙烯酰胺凝胶电泳以及天然-Western印迹分析在天然条件下对重组蛋白进行电泳，使用Novex⑧4_20%的Tris-甘氨酸预浇制凝胶(Invitrogen)在125V条件下，直至所述PonceauS跟踪指示染料靠近所述凝胶的底部。利用在25V条件下的tris/甘氨酸转移缓冲液在2小时的时间内将蛋白转移至聚偏氟乙烯(PVDF)膜上。随后在室温下利用存在于磷酸缓冲液-o.1X的吐温-20(PBST)中的5%无脂肪无水牛乳将所述的膜封闭2小时。利用被封闭缓冲液相应稀释的一级抗体(多克隆三叶因子1或者三叶因子3)在4t:下对所述的膜进行过夜培养。利用PBST(磷酸缓冲液/吐温)进行洗涤之后，在室温下利用被封闭缓冲液稀释了的抗兔免疫球蛋白G-辣根过氧化物酶(IgG-HRP)共轭的二级抗体对所述的膜进行1小时的培养，同时伴随着轻微的搅拌。进一步利用PBST(磷酸缓冲液/吐温)进行三次洗涤，每次洗涤5分钟，之后向其中加入SuperSignalWestDura持久性化学发光底物(Pierce)并且对膜进行拍照。上述的天然-聚丙烯酰胺凝胶电泳证明，重组天然三叶因子1主要分解为一条单一带(单体)以及一条次要带(二聚体)，而重组三叶因子3分解为一条单一带(四聚体)以及一条次要带(二聚体)(附图2)。所述利用多克隆抗体的天然western同样证明了三叶因子1主要形成一种单体而次要的形成二聚体，而三叶因子3形成了一种四聚体以及一种二聚体，其中所述的四聚体为大约35kDa(附图3)。所述的多克隆抗体表现出了针对其抗原具有完全的特异性，且不会与其他三叶因子蛋白发生交叉反应。利用计算机模拟(InSilico)对构象表位(CE)进行的预测三叶因子1以及三叶因子3蛋白具有高度的核苷酸序列同源性。先前已经通过核磁共振(NMR)解析了人类三叶因子1以及三叶因子3的结构，并且其配位物已经被保藏于蛋白质数据库(PDB)中。将核磁共振配位物放入RASMOL三维分子显像软件中。由三叶因子l以及三叶因子3形成的同型二聚体在全部的结构以及构象上表现出了显著的差异。表位被定义为与抗体的抗原结合位点发生反应的所述抗原分子的部位。这里所使用的天然western分析表明，所述的抗体是具有特异性的并且不与其他的三叶因子发生交叉反应。表位被分为两种类型，被命名为顺序表位(SE)(当所述抗体(Ab)与一种通过肽键连接的氨基酸残基的连续的一段发生结合时)以及构象表位(CE)(当抗体与不连续的残基发生结合时，其中所述的不连续的残基通过多肽链的折叠被连接在一起)。顺序表位在本发明中也被称为线性表位。结合于线性表位上的抗体是与抗原序列中的连续的氨基酸发生结合的抗体。构象表位在本发明中也被称为天然表位。结合于构象表位或者天然表位上的抗体是与溶液中的三叶因子多肽和/或蛋白发生结合的抗体，例如，在生理学相容的条件下。从对于抗原-抗体(Ag-Ab)复合物的晶体结构分析中可以知晓，为了能被所述抗体识别出来，所述的残基必须是易于发生反应的并且因此存在于所述抗原的表面上。除此之外，本发明提供的三叶因子构象特异性抗体可以与来自于三叶因子的变性三叶因子多肽或者蛋白或者线性序列发生结合。利用一种可商购获得的运算法则对三叶因子1以及三叶因子3的顺序表位(SE)以及构象表位(CE)进行预测。所述的结果如下述表格1-6中所示。^!^在三叶因子1同型二聚体中预测的构象表位构象表位编号在只t照AD的6A内的AD(:抗原决定簇)在对照AD的6A内的对照(才元原决定簇)1A一l:A—19A—34A—46EAQTETCTVApRErQN:16FPGvTPSQcANKG:31FDDTVRG:40YPnTIDVPPEEECEF:60A—43:W14<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>AD-抗原决定簇；CE-构象表位；A以及B是形成所述同型二聚体的两种三叶因子l蛋白。表1表示出的是存在于三叶因子1同型二聚体中的七种不同的构象表位。在对照抗原决定簇的6入距离内发现的任何抗原决定簇构成了一种构象表位的一部分。没有预测出顺序表位(SE)。上游表示的是在所述的表面可以利用的氨基酸，而下游表示的是被包含于所述三级结构内的氨基酸，并且对于所述抗体具有小于25%的易接近性。^!^在三叶因子1同型二聚体中预测出的抗原决定簇<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>AD-抗原决定簇；A以及B是形成所述同型二聚体的两种三叶因子1蛋白。表2表示出的是在所述天然三叶因子1同型二聚体中发现的七种不同的抗原决定簇(AD)。所述的抗原决定簇具有7至31个氨基酸的长度，所述的氨基酸长度涵盖了超过80%的一级蛋白序列，其是与形成不同的构象表位所相关的。在三叶因子1单体中预测出的构象表位构象表位编号在^寸照AD的6A内的AD所形成的预测的构象表位在^t照AD的6A内的对照(抗原决定簇)1A—1:EAQTETCTVApRErQN:16A—19:FPGvTPSQcANKG:31A—34:FDDTVRG:40A—46:YPnTIDVPPEEECEF:60A—43:W2A—34:FDDTVRG:40A—1:EAQTETCTVApRErQN:16A—19:FPGvTPSQcANKG:31A—43:WA—46:YPnTIDVPPEEECEF:60A—1:EAQTETCTVApRErQN:16A—19:FPGvTPSQcANKG:31AD-抗原决定簇；CE-构象表位。表3表示出的是存在于三叶因子1单体中的三种不同的构象表位。在对照抗原决定簇的6A距离内发现的任何抗原决定簇构成了一种构象表位的一部分。没有发现顺序表位(SE)。上游表示的是在所述的表面可以利用的氨基酸，而下游表示的是被包含于所述三级结构内的氨基酸，并且对于所述抗体具有小于25%的易接近性。^i^在三叶因子1单体中预测出的抗原决定簇<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>AD-抗原决定簇。表4表示出的是在所述天然三叶因子1单体中发现的四种不同的抗原决定簇(AD)。所述的抗原决定簇具有7至16个氨基酸的长度，所述的氨基酸长度涵盖了超过80%的一级蛋白序列，其是与形成不同的构象表位所相关的。在三叶因子3同型二聚体中预测的构象表位<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>2A—12AvPaKDrVDcGyPHVTPKEcNN:33A—1:EEYVTLsAN:9A—40:SRJPG:44B—12:AvPaKDrVDcGyPHVTPKEcNN:33A—43:W3A—40:SRIPG:40A_12:AvPaKDrVDcGyPHVTPKEcNN:33A—43:W4B一l:EEYVGLsAN:9B—1:EEYVGLsAN:9B_12:AvPaKDrVDcGyPHVTPKEcNN:33B—12:AvPaKDrVDcGyPHVTPKEcNN:33A—12:AvPaKDrVDcGyPHVTPKEcNN:33B—38:FdSRIPG:44B—1:EEYVGLsAN:96B—38:FdSRIPG:44B—12:AvPaKDrVDcGyPHVTPKEcNN:33AD-抗原决定簇；CE-构象表位；A以及B是形成所述同型二聚体的两种三叶因子3蛋白。19表5表示出的是存在于三叶因子3同型二聚体中的六种不同的构象表位。在对照抗原决定簇的6A距离内发现的任何抗原决定簇构成了一种构象表位的一部分。与三叶因子1的同型二聚体类似，没有发现顺序表位(SE)。没有发现与三叶因子1同型二聚体发生重叠的构象表位。上游表示的是在所述的表面可以利用的氨基酸，而下游表示的是被包含于所述三级结构内的氨基酸，并且对于所述抗体具有小于25%的易接近性。^^在三叶因子3同型二聚体中预测出的抗原决定簇予贞测的^t原决定蔟(AD)抗原决定蔟编号:沆原决定蔟1—AA—1:EEYVTLsAN:92—AA—12:AvPaKDrVDcGyPHvTPKEc丽333—AA—40:SRIPG:444—AB—1:EEYVGLsAN:95—AB—12:AvPaKDrVDcGyPHVTPKEc丽336—AB—38:FdSRIPG:44AD-抗原决定簇；A以及B是形成所述同型二聚体的两种三叶因子3蛋白。表6表示出的是在所述天然三叶因子3同型二聚体中发现的六种不同的抗原决定簇(AD)。所述的抗原决定簇具有5至21个氨基酸的长度，所述的氨基酸长度涵盖了超过50%的一级蛋白序列，其是与形成不同的构象表位所相关的。将所述天然三叶因子1的单亚基形式以及二亚基形式以及三叶因子3的二亚基形式进行核磁共振(NMR)解析的三维结构用于预测它们的表位。天然三叶因子1以及三叶因子3具有多个构象表位(CE)，这些构象表位涵盖了暴露在外的天然表面结构并且不具有任何顺序表位(SE)。上述两种抗原表现出了不同的抗体抗原特异性的构象表位一致性，其中所述的抗体抗原特异性是通过天然western观察到的。三叶因子1单体以及二聚体具有两个共同的表位。三叶因子1以及三叶因子3不具有任何共同的抗原决定簇(AD)。单克降抗体的制备通过注射天然三叶因子1以及三叶因子3蛋白对小鼠进行免疫。依照标准方法学制备单克隆抗体。在培养液中对杂交瘤克隆体进行扩张(expand)，从而制备出大量的针对构象表位而形成的单一类型的抗体。这些抗体被称为单克隆抗体，利用酶联免疫吸附试验(ELISA)对这些抗体的特异性以及敏感性进行检查。MTT(3_(4，5-二甲基_2_噻唑基)_2，5_二苯基四氮唑基溴)检测进行一项快速的比色测定，以所述的四唑盐MTT(3-(4，5_二甲基_2_噻唑基)_2，5-二苯基四氮唑基溴)为基础，仅测定存活的细胞并且可以在扫描多层分光光度计(ELISA读取器)中进行读取。只有当线粒体还原酶具有活性时，MTT才转化成甲紫，并且因而这种转化与存活的细胞的数量有直接的关系。对利用试剂处理过的细胞中的甲(formazan)的产量进行测定并且与对照细胞的产量进行比较，可以得到一条剂量响应曲线。从美国典型微生物保藏中心(ATCC)处购买各种不同的癌症细胞系并且以每孔2500个细胞/100微升培养基的密度接种于96孔培养板中。利用不同浓度的任意一种多克隆兔或者小鼠的单克隆三叶因子l以及三叶因子3抗体(最终体积100微升)对细胞进行处理。利用相同浓度的兔免疫球蛋白G(用于多克隆三叶因子1以及三叶因子3抗体)或者小鼠免疫球蛋白G(用于小鼠单克隆三叶因子1以及三叶因子3多克隆抗体)进行与上述相同的步骤，并且将其作为对照。在5%的二氧化碳的气体氛围下于37t:下将所述微孔板培养72小时。随后，向96孔培养板的每个孔中加入20微升的MTT溶液(5毫克/毫升)，其中所述的96孔培养板的每个孔中装有经过不同浓度的抗体处理过的细胞。在培养4小时之后，通过加入140微升0.04摩/升的盐酸的异丙醇溶液终止所述反应，并且利用ELISA读取器在490纳米的检验波长下对每个孔中的吸光度进行测定。每种浓度的处理在三个孔中进行。M麵t歸测l通过对细胞DNA进行荧光显微分析，来测定存在或者不存在三叶因子1或者三叶因子3抗体的情况下发生凋亡的细胞的死亡，其中所述的细胞DNA的染色类型是通过亲核Hoescht33258进行的(Del，B.G.，Z.Darzynkiewicz，C.Degraef，R.Mosselmans，D.Fokan，以及P.Galand，1999年)。癌症和/或增殖疾病的i会断本发明中所描述的三叶因子构象特异性抗体还可以被有效的用于各类诊断应用之中。本发明的特征在于公开了一种用于诊断哺乳动物体内的癌症或者细胞增殖和/或存活疾病的方法，所述方法通过下述方式来完成在足以形成抗原-抗体复合物的条件下，将来自于所述哺乳动物的组织或者体液与一种三叶因子构象特异性抗体进行接触，并且对所述的抗原-抗体复合物进行探测。利用本发明所述的三叶因子构象特异性抗体进行探测的癌症或者肿瘤包括上皮肿瘤，例如肺癌，结肠直肠癌，乳腺癌，胰腺癌，卵巢癌，前列腺癌，肝癌，胃癌，子宫内膜癌，肾癌，甲状腺癌，胆道癌，食道癌，脑癌，恶性黑素瘤，多发性骨髓瘤，血液瘤以及淋巴瘤。利用本发明所述的三叶因子构象特异性抗体进行探测的增殖疾病包括，例如，角化细胞过度增殖，炎性细胞浸润，细胞因子变化，子宫内膜异位，上皮以及皮样囊肿，脂肪瘤，腺瘤，毛细血管以及皮肤血管瘤，淋巴管瘤，痣损伤，畸胎瘤，肾瘤，肌纤维瘤，成骨细胞瘤，以及其他退变性聚集。诊断方法包括在体液中或者在组织中对肿瘤细胞进行活体或者体外探测。例如，将活组织切片与一种抗体进行接触，并且测定结合的抗体。除了活组织切片样本之外，全血，血清，血浆，大便，尿液，脑脊髓液，支气管肺泡灌洗液，痰液，呼出气体的冷凝物，精液，唾液，关节液或者溃疡分泌液可以被检验。可以进行全身诊断成像，以探测常规诊断方法无法探测到的微小肿瘤。因此，用于诊断哺乳动物体内的肿瘤的方法按照下述方式进行将哺乳动物的组织例如淋巴结与一种被探测性标记过的抗体进行接触，所述的抗体与三叶因子构象表位相结合。与正常的非肿瘤组织中的结合水平相比，在组织位点上的抗体结合水平的增加表明在该组织位点上存在肿瘤。为了达到检测的目的，利用可探测的标记物对所述抗体进行标记，所述的可探测的标记物是例如，非放射性标签，放射性化合物，或者比色试剂。例如，将所述抗体或者抗体的片段利用1251(碘)、"Tc(锝)、Gd+++(钆离子)，或者6++(亚铁离子)进行标记。绿色荧光蛋白被用来作为比色标签。诊断或者预后的方法按照下述方式进行在足以形成抗原-抗体复合物的条件下，将来自于所述哺乳动物的体液或者组织样本与一种抗体进行接触，并且对所述的抗原-抗体复合物进行探测；对复合物的量进行量化以确定所述三叶因子的水平，并且将这种水平与三叶因子的正常对照水平进行比较。为了达到预后的目的，随着时间的过去三叶因子水平的增加表明了所述疾病的进一步恶化，并且因此是一项不利的预后。将来自于患者的组织样本例如固体肿瘤的活组织切片，以及体液与三叶因子构象特异性抗体进行接触，其中所述的体液是例如来自于中枢神经系统(CNS)的体液，血液，血清，尿液，唾液，痰液，肺脏渗出液，以及腹水液体。利用标准方法对来源于患者的组织样本(例如，固体组织或者体液)中的三叶因子或者三叶因子基因产物的增加进行探测，其中所述的标准方法是例如通过Western印迹分析或者例如酶联免疫吸附试验(ELISA)的定量检测。例如，利用三叶因子构象特异性抗体的标准的竞争性酶联免疫吸附试验形式被用来对患者的三叶因子水平进行量化。或者，可以使用夹心酶联免疫吸附试验，在所述试验中使用第一抗体作为捕获抗体，并且使用第二种构象特异性抗体作为探测抗体。探测三叶因子的方法包括如下步骤将体液中的组分与一种结合于固体基质上的构象特异性抗体进行接触，其中所述的固体基质是例如微滴定板，磁珠，量油计。例如，将所述的固体基质浸没于来源于患者的体液样本中，进行洗涤，并且将所述的固体基质与一种试剂进行接触，其中所述的试剂是用来探测存在于所述固体基质上的免疫复合物的试剂。将存在于受试样本中的蛋白固定于(例如，结合于)固体基质之上。使蛋白共价结合或者非共价结合于固体基质上的方法以及手段是本领域已知的。所述固体表面的性质可以依据所述的检测形式而发生改变。对于在微滴定孔中进行的检测而言，所述的固体表面是所述微滴定孔的壁或者杯(cup)。对于使用磁珠的检测而言，所述的固体表面是所述磁珠的表面。在使用量油计的检测中(即，一种由多孔材料或者纤维质材料制成的固体物体，所述的多孔材料或者纤维质材料是例如织物或者纸张)，所述的表面是制成所述量油计的材料的表面。有效的固体支持物的例子包括硝基纤维素(例如，以膜或者微滴定孔的形式)，聚氯乙烯(例如，以板或者微滴定孔的形式)，聚苯乙烯橡胶(例如，以磁珠或者微滴定板的形式)，聚偏氟乙烯(已知的有IMMUL0N)，重氮化纸张，尼龙膜，活化磁珠，以及蛋白A磁珠。在将所述含有抗体的固体支持物与所述受试样本进行接触之后，通常对其进行洗涤，并且在此之后对结合的免疫复合物进行探测。利用所示的受试样本对所述抗体进行培养，之后通过一种可探测性标记对免疫复合物进行探测。例如，所述的标记是酶，荧光素，化学发光物质，放射性物质，或者染料。用于对来自于所述免疫复合物的信号进行扩增的检测方法是本领域已知的，例如，利用生物素以及抗生物素蛋白的检测。将三叶因子探测试剂，例如构象特异性抗体以试剂盒的形式进行包装，所述的试剂盒中含有一种或者多种构象特异性抗体，对照组合物(阳性和/或阴性)，和/或可探测22的标记。所述的检测可以是本领域已知的标准的两种抗体夹心检测的形式。实施例三叶因子1以及三叶因子3在各种器官的癌症细胞中进行过表达，并且诱导了肿瘤细胞的入侵、存活以及增殖。本发明所描述的研究被设计成用以对在癌症细胞中分泌出的三叶因子1以及三叶因子3的抑制(中和)进行评价，所述研究中使用了三叶因子1和/或三叶因子3特异性抗体作为细胞毒性试剂。实施例1:构象特异件多克降三叶闵子1以及三叶闵子3杭体对人类官肠癌细朐糾白勺麵蹄白勺翻所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制HT-29直肠癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制C0L0-320匿直肠癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制DLD-19直肠癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例2:构象特异件多克降三叶因子1以及三叶因子3抗体对人类卵巢癌细胞系中的细胞存活的抑制所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制0VCAR-4卵巢癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制0VCAR-5卵巢癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制0VCAR-8卵巢癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制SK0V-3卵巢癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例3:构象特异件多克降三叶因子1以及三叶因子3抗体对人类乳腺癌细胞23糾白勺麵蹄、肿細碰舰睡战柳衣薩4^白勺翻所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制MCF-7乳腺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制MCF-7乳腺癌细胞的锚定不依赖性生长。如上文中所描述，通过软琼脂检测法测定细胞的锚定不依赖性生长对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制由存在于基底凝胶中的MCF-7乳腺癌细胞而导致的肿瘤的形成。在进行过处理的一周之后，利用相衬显微镜通过对菌落大小进行的形态学检查，来研究肿瘤的体外衰退。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制T47D乳腺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制T47D乳腺癌细胞的锚定不依赖性生长。如上文中所描述，通过软琼脂检测法测定细胞的锚定不依赖性生长对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制由存在于基底凝胶中的T47D乳腺癌细胞而导致的肿瘤的形成。在进行过处理的一周之后，利用相衬显微镜通过对菌落大小进行的形态学检查，来研究肿瘤的体外衰退。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制BT-549乳腺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例4:构象特异件多克降三叶因子1以及三叶因子3抗体对人类胃癌细胞系中的细胞存活的抑制所述的三叶因子l以及三叶因子3抗体抑制AGS胃癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例5:构象特异件三叶因子1以及三叶因子3抗体对人类肺癌细胞系中的细胞存活的抑制所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制A549肺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制NCI-H1299肺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制NCI-H2009肺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例6:构象特异件多克降三叶闵子1以及三叶闵子3杭体对人类胰腺癌细朐糾白勺麵蹄白勺翻所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制BX-PC3胰腺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制HPAC胰腺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例7:构象特异件多克降三叶因子1以及三叶因子3抗体对人类前列腺癌细胞系中的细胞存活的抑制所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制DU145前列腺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制22RV1前列腺癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例8:构象特异性多克隆三叶因子1以及三叶因子3抗体对人类肝癌细胞系中的细胞存活的抑制所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制SK-HEP-1肝癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例9:构象特异件多克降三叶因子1以及三叶因子3抗体对人类子宫内膜癌细胞系中的细胞存活、肿瘤的体外形成以及锚定不依赖件牛长的抑制所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制AN3CA子宫内膜癌细胞的锚定不依赖性生长。如上文中所描述，通过软琼脂检测法测定细胞的锚定不依赖性生长对25于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制由存在于基底凝胶中的AN3CA子宫内膜癌细胞而导致的肿瘤的形成。在进行过处理的一周之后，利用相衬显微镜通过对菌落大小进行的形态学检查，来研究肿瘤的体外衰退。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制RL95-2子宫内膜癌细胞的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的构象特异性三叶因子1以及三叶因子3抗体抑制由存在于基底凝胶中的RL95-2子宫内膜癌细胞而导致的肿瘤的形成。在进行过处理的一周之后，利用相衬显微镜通过对菌落大小进行的形态学检查，来研究肿瘤的体外衰退。輔你l10:木,線性《德H口十附1衞細中麟柳斤f術效舰",船只隨卜异种移植物分析将MCF-7(5xl(f个)细胞悬浮于基底凝胶中，并且将其注射入第一只3至4周大的无胸腺(皿/皿)雌性裸鼠的乳腺(腋下)脂垫中，其中所述的裸鼠经过了三叶因子1抗体(n=5，darkcircle)或者对照小鼠免疫球蛋白G(n=5，opencircle)其中之一的处理。通过腹膜内(i.P.)注射的方式每天供给三叶因子l抗体(200微克)并持续2周。上述小鼠同时接受了一种释放60天的释放丸的处理，所述的60天释放丸含有0.72毫克17P_雌二醇(InnovativeResearchofAmerica,Southfield，MI)。在第16天、第19天、第22天、第15天时测量所述肿瘤的体积并且在第30天试验结束时将小鼠处死。在验尸时，通过肉眼的观察评价初始的肿瘤(primarytumors)以及所有器官中是否存在肿瘤。所述的初始肿瘤以及器官的组织样本被固定于4%的多聚甲醛中，并且利用H&E进行染色以评价其形态。与经过免疫球蛋白G处理的组进行比较可以发现，经过三叶因子l抗体处理的组的肿瘤的体积发生了显著的减小(P<0.001)。实施例11:三叶因子1以及三叶因子3抗体形成MCF-7乳腺癌细胞的细胞凋亡所述的构象特异性三叶因子l(a-三叶因子l，多克隆抗体)以及三叶因子3(a-三叶因子3，多克隆抗体)多克隆抗体增加了MCF-7乳腺癌细胞的细胞凋亡速率(附图4)。利用抗体对MCF-7细胞进行72小时的培养之后，利用Hoescht33258测定细胞凋亡对于上述抗体的处理所产生的应答，其中所述抗体是存在于含有介质的血清中的。兔免疫球蛋白G被用作对照。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例12:三叶因子1以及三叶因子3在各种不同的人类癌症细胞系中的表达通过逆转录聚合酶链式反应(PCR)测定三叶因子1以及三叶因子3蛋白在各种人类细胞系中的表达。被检查的所述表达发生在前列腺(22RV1，PC3，LnC即以及DU145)、胃(AGS)、结肠直肠(HCT-116，C0L0320DM，HT-29以及DLD-1)、卵巢(0VCAR5以及0VCAR8)以及乳腺(MCF-7，T47D，BT-549以及MDA-MB-231)人类癌症细胞系中。P-肌动蛋白被用来作为装载对照(附图5)。实施例13:构象特异性多克隆三叶因子1以及三叶因子3抗体对人类癌症细胞系中的细胞存活的抑制所述的构象特异性三叶因子l(ci-三叶因子l，多克隆抗体)以及三叶因子3(a-三叶因子3，多克隆抗体)多克隆抗体抑制了MCF-7乳腺癌细胞(附图6(A))、PC3前列腺癌细胞(附图6(B))、AGS胃癌细胞(附图6(C))以及T47D乳腺癌细胞(附图6(D))的存活。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5_二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。兔免疫球蛋白G被用作对照。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。輔你l14:木,線性《德H口十附1衞細中麟柳斤f術效舰",船只隨卜异种移植物分析将MCF-7(5xl(f个)细胞悬浮于基底凝胶中，并且将其注射入第一只3至4周大的无胸腺(皿/皿)雌性裸鼠的乳腺(腋下)脂垫中，其中所述的裸鼠经过了三叶因子1抗体(n=5，darkcircle)或者对照小鼠免疫球蛋白G(n=5，opencircle)其中之一的处理。通过腹膜内(i.P.)注射的方式每天供给三叶因子l抗体(200微克)并持续2周。上述小鼠同时接受了一种释放60天的释放丸的处理，所述的60天释放丸含有0.72毫克17P_雌二醇(InnovativeResearchofAmerica,Southfield，MI)。在第16天、第19天、第22天、第15天时测量所述肿瘤的体积并且在第30天试验结束时将小鼠处死。三叶因子l(附图7(A))或者三叶因子3(7(B))的多克隆抗体减缓了乳腺癌(MCF-7)的异种移植物在免疫妥协小鼠体内的生长。箭头表示的是开始施用对照免疫球蛋白G或者直接针对三叶因子1或者三叶因子3的抗体。輔你l15:木,線性H口十附1絲歸舰^赫麵糾白勺麵蹄白勺删受试的小鼠三叶因子1(1C6，1A12，3A2，3A5，3B8，3F4，3F12，3G4，1A11，2B3，3B4，1C4，2C12，2A8，2D7，1E4，2E2，2H4(附图8(A))以及1C6，3F6，2C5，3F11，3F3(附图8(B)))单克隆抗体降低了胃癌细胞的体外存活能力。利用三叶因子11C6单克隆抗体对所述细胞进行培养之后，观察到最强烈的抑制效应。显微镜照片(C)以及(D)说明了与免疫球蛋白G对照组(C)相比，经过72小时的培养之后所述三叶因子1单克隆抗体1C6(D)的有效性。如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5-二甲基-2-噻唑基)-2，5-二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。实施例16:构象特异性三叶因子1小鼠单克隆抗体1C6对人类癌症细胞系中的细胞存活的抑制如上文中所描述，通过MTT(3_(4，5_二甲基_2_噻唑基)_2，5_二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的1C6小鼠单克隆三叶因子1抗体显著降低了HT-29直肠癌细胞的体外存活能力(附图9)。所述的1C6小鼠单克隆三叶因子1抗体显著降低了DLD-1直肠癌细胞的体外存活能力(附图io)。所述的1C6小鼠单克隆三叶因子1抗体显著降低了MCF-7乳腺癌细胞的体外存活27能力(附图ll)。实施例17:构象特异件三叶闵子3小鼠单克降杭体1D8对人类癌症细朐系中的细朐'蹄白勺翻如上文中所描述，通过MTT(3-(4，5_二甲基_2_噻唑基)_2，5_二苯基四氮唑基溴)检测法测定细胞存活对于上述抗体的处理所产生的应答。每个点表示的是三次测定的平均+_标准误差(SE)。所述的1D8小鼠单克隆.能力(附图12)。所述的1D8小鼠单克隆.能力(附图13)。所述的1D8小鼠单克隆.能力(附图14)。所述的1D8小鼠单克隆能力(附图15)。肝赫鮒白鄉A麵翻本发明所描述的构象特异性三叶因子特异性抗体被用来抑制肿瘤细胞的生长，或者杀灭所述的肿瘤细胞。除了癌症治疗之外，所述的方法能够有效的给予那些患有癌前状态或者病变或者非癌性过度增殖疾病的人、或者是存在发展为癌前状态或者病变或者非癌性过度增殖疾病的危险的人以临床上的益处。用来抑制三叶因子的试剂(例如，本发明所述的肽或者核酸)可以单独使用，或者以组合物的形式与一种或者多种药物可接受性稀释剂，载体和/或赋形剂组合使用。本发明所使用的所述术语"药物可接受性稀释剂，载体和/或赋形剂"意在包括能够有效的制备药物组合物的物质，其可以与本发明所述的试剂共同施用并同时保证所述试剂发挥其预想的作用，并且所述物质通常是安全的，无毒性的并且既不具有生物学特性也不具有其他不期望的性质。药物可接受性稀释剂，载体和/或赋形剂的例子包括溶液，溶剂，分散介质，缓释试剂，乳液以及类似物质。稀释剂，载体和/或赋形剂可以含有少量的添加物质，例如能够增强等渗性以及化学稳定性的物质。可以将本领域已知的各种药物可接受性稀释剂，载体和/或赋形剂用于本发明所述的组合物中。可以理解的是，对于这类稀释剂、载体和/或赋形剂的选择在某种程度上将受到所使用的试剂的性质、所述组合物的预想的药剂类型、以及所述组合物的施用方式的指挥。举一种例子，在施用核酸的情况中，适当的载体包括等渗溶液，水，盐水溶液，葡萄糖水溶液，以及类似物，其中所述的核酸是例如适合于表达反义RNA或者iRNA的载体。除了标准的稀释剂、载体和/或赋形剂之外，本发明所述的药物组合物可以与其他组分配制在一起，或者以一种增强所述试剂的活性或者帮助保护所述试剂的完整性的方式进行配制。例如，所述组合物可以进一步包括佐剂或者组分，所述的佐剂或者组分能够在施用给宿主之后为试剂提供保护，防止试剂的降解或者抗原性的降低。或者，所述的试剂可以是经过修饰的，使其能够命中特异性细胞、组织或者肿瘤。除此之外，将所述的抗体与其他成分配制在一起，所述的其他成分能够在特定的情况下为宿主提供益处。例如，任选的，将一种或者多种抗肿瘤试剂进行共同施用或者将其三叶因子3抗体显著降低了DLD-1直肠癌细胞的体外存活三叶因子3抗体显著降低了HT-29直肠癌细胞的体外存活三叶因子3抗体显著降低了MCF-7乳腺癌细胞的体外存活三叶因子3抗体显著降低了T47D乳腺癌细胞的体外存活加入到所述剂型中。这类试剂的例子包括烷基化试剂(例如，苯丁酸氮芥(Leukeran)，环磷酰胺(Endoxan,Cycloblastin,Neosar,Cyclophosphamide)，异环磷酰胺(HoloxanTM，IfexTM，MesnexTM)，噻替派(Thioplex,Thiotepa));抗代谢物/S期抑制剂(例如，甲氨蝶呤钠(FolexTM，AbitrexateTM，EdertrexateTM)，5-氟尿嘧啶(Efudix,Efudex)，羟基脲(Droxia,Hydroxyurea,Hydrea)，安吖啶，吉西他滨(Gemzar)，氮烯唑胺，硫鸟嘌呤(Lanvis));抗代谢物/有丝分裂毒素(例如，表鬼臼毒素(Etopophos,Etoposide，Toposar)，长春碱(Velbe,Velban)，长春地辛(Eldesine)，长春瑞滨(Navelbine)，紫杉醇(Taxol));抗生素类试剂(例如，多柔比星(RubexTM)，博来霉素(Blenoxane)，更生霉素(Cosmegen)，道诺霉素(Cerubidin)，丝裂霉素(Mutamycin));激素类试剂(例如，氨鲁米特(Cytadren);阿纳曲唑(Arimidex)，雌氮芥(Estracyt,Emcyt)，性瑞林(Zoladex)，六甲基三聚氰胺(Hexamet)，来曲唑(Femara)，阿纳曲唑(Arimidex)，它莫西芬(Estroxyn,Genox,Novaldex,Soltamox,Tamofen));或者任意两种或者多种抗肿瘤试剂的任意组合(例如，阿霉素/5-氟尿嘧啶/环磷酰胺(FAC)，环磷酰胺/甲氨蝶呤/S-氟尿嘧啶(CMF))。本发明所述的抗体也可以依照公认的制药学惯例与除本发明中特别提及的那些物质之外的化合物以及试剂进行配制。根据需要使用的给药方式，以及本发明先前所提及的适当的药物赋形剂、稀释剂和/或载体，将本发明所述的组合物转化为惯用的药剂类型，例如溶液，口服施用的液体，注射性液体，片剂，涂层片剂，胶囊剂，丸剂，颗粒剂，栓剂，透皮贴剂，悬浮液，乳液，缓释剂型，凝胶剂，气雾剂，脂质体，粉末以及免疫脂质体。所选择的药剂形式将反应出所期望使用的给药方式、被治疗的疾病以及所使用的试剂的性质。特别优选的药剂类型包括口服施用的片剂，凝胶剂，丸剂，胶囊剂，半固体，粉末，缓释剂型，悬浮液，酏剂，气雾剂，用于局部施用的药膏或者溶液，以及注射性液体。技术人员将容易的识别出适当的药剂类型以及配制方法。可以通过将具体的试剂与成分相互接触或者混合的方法制备所述的组合物。之后，如果需要的话，将所述产物成型至期望的剂型。举一种例子，配制组合物的某些方法可以在例如Ge皿aroAR:Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy《雷明顿氏药学的理论与实践》，第20版，Lippincott，Williams&Wilkins，2000年中找到。本发明所述抗体在组合物中的剂量可以根据组合物的类型、单位剂量的大小、载体、稀释剂和/或赋形剂的种类、以及本领域普通技术人员熟知的其他因素而在大范围内变化。所述最终的组合物可以包括O.0001%重量(％w)至100%重量的本发明所述的活性物质，优选为0.001%重量至10%重量，其余为存在的任意其他的活性试剂和/或载体、稀释剂和/或赋形剂。可以通过任何方式对本发明所述的任意试剂或者组合物进行施用，只要所述的施用方式能够将所期望的活性(对肿瘤细胞增殖的抑制)传递到宿主机体中的靶向位点上即可。"靶向位点"可以是存在于所述机体内的、具有增殖疾病或者被怀疑具有增殖疾病的任何位点，并且可以包括一种或者多种细胞，组织或者具体的肿瘤。例如，给药方式可以包括肠胃外给药路径，系统性给药路径，口服以及局部给药。例如，可以通过注射、皮下、眶内、眼用、脊柱内、脑池内、局部、输注(使用例如缓释装置或者微型真空泵例如渗透泵或者皮肤贴剂)、植入、气雾、吸入、划痕、腹膜内、荚膜内、肌肉内、肿瘤内、鼻内、口服、口腔内、透皮、肺、直肠或者阴道的方式给药。可以理解的是，可以根据宿主机体内的靶向位点的位置以及所使用的所述试剂或者组合物的性质来选择所述的给药路径。本发明所述抗体或者组合物的给药剂量、给药周期、以及一般的给药方案可能在宿主间存在不同，取决于下述变量接受治疗的病症的性质，宿主的症状的严重程度，被治疗的任何肿瘤的大小，接受治疗的靶向位点，所选择的给药方式，以及宿主的年龄，性别和/或一般健康。本发明所属领域的一般技术人员将容易的认识到或者能够在注意到这些因素时确定出合适的给药方案，而不需要进行任何过度不当试验。本发明所述抗体的给药剂量是至少部分获得所期望的应答的必需剂量。给药方式可以包括单一的日剂量或者施用一系列适当的离散的分次剂量。给药方案可以组合不同的给药方式或者给药路径。例如，可以将肿瘤内注射与系统性给药进行组合。所述的方法可以进一步包括进一步的步骤，例如施用其他的试剂或者组合物，所述的试剂或者组合物是在注意到被治疗的病症后判断出的对宿主可能有益的试剂或者组合物。例如，可以施用用于治疗增殖疾病的其他试剂(例如前文中所提及的抗肿瘤试剂)。应当被理解的是，这类其他的试剂以及组合物可以与本发明所述的试剂以及组合物同时施用，或者以有序的方式施用，例如，可以在施用本发明所述试剂或者组合物之前或者之后施用所述的其他试剂或者组合物。在试剂或者组合物的有序给药的方面，应当被理解的是，继一种试剂或者组合物的施用之后，另外一种试剂或者组合物的有序施用不必须立即发生，尽管这样做可能是优选的。在所述试剂或者组合物的给药之间可以存在时间上的延迟。所述延迟的周期将取决于例如下列因素接受治疗的病症以及所施用的所述组合物或者试剂的性质。然而，举一种例子，所述的延迟周期可以在几小时至几天或者几个月的范围内。尽管本发明通过其中的详细说明进行了描述，前述的说明意在进行阐述并且不构成对本发明的范围的限制，本发明的范围由后附的权利要求进行定义。其他的方面、优点、以及修饰落入随后的权利要求的范围之内。本发明将在下面的实施例中被进一步的描述，所述实施例不构成对权利要求中所描述的本发明的范围的限制。30权利要求与三叶因子1(TFF1)多肽发生特异性结合的抗体，其中所述的抗体结合于所述三叶因子1多肽的构象表位之上。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述的构象表位选自表3中所示的构象表位。3.与三叶因子1(TFF1)多肽发生特异性结合的抗体，其中所述的抗体包括抗原决定簇，所述的抗原决定簇选自如表4中所示的抗原决定簇。4.与三叶因子1(TFF1)同型二聚体或者异型二聚体多肽发生特异性结合的抗体，其中所述的抗体结合于所述三叶因子1多肽的构象表位之上。5.根据权利要求4所述的抗体，其中所述的构象表位选自表1中所示的构象表位。6.与三叶因子1(TFF1)同型二聚体或者异型二聚体多肽发生特异性结合的抗体，其中所述的抗体包括抗原决定簇，所述的抗原决定簇选自如表2中所示的抗原决定簇。7.与三叶因子3(TFF3)同型二聚体、三叶因子3异型二聚体多肽、或者所述三叶因子3同型二聚体聚合物发生特异性结合的抗体，其中所述的抗体结合于所述三叶因子3多肽的构象表位之上。8.根据权利要求7所述的抗体，其中所述的构象表位选自表5中所示的构象表位。9.与三叶因子3(TFF3)同型二聚体或者异型二聚体多肽发生特异性结合的抗体，其中所述的抗体包括抗原决定簇，所述的抗原决定簇选自如表6中所示的抗原决定簇。10.根据权利要求1-9中任意一项所述的抗体，其中所述的抗体是由杂交瘤细胞系产生的，其选自1C6，3F6，2C5，1D，1A12，3A2，3A5，3B8，3F4，3F12，3G4，1A11，2B3，3B4，1C4，2C12，2A8，3D7，1E4，2E2，2H4，1D8以及2D7。11.嵌合抗体组合物，包括三叶因子1结合部分以及三叶因子3结合部分。12.根据权利要求1-11中任意一项所述的抗体，其中所述的抗体是多亚基的。13.—种组合物，其包括权利要求1-12中任意一项所述的抗体，其中所述的组合物进一步包括药物可接受性载体。14.一种抑制肿瘤细胞的增殖或者存活的方法，包括将所述细胞与权利要求1-12中任意一项所述的抗体进行接触。15.根据权利要求14所述的方法，其中所述的肿瘤细胞是上皮肿瘤细胞。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述的上皮肿瘤细胞是来自于选自肺癌，结肠直肠癌，乳腺癌，胰腺癌，卵巢癌，前列腺癌，肝癌，胃癌，子宫内膜癌，肾癌，甲状腺癌，胆道癌，食道癌，脑癌，恶性黑素瘤，多发性骨髓瘤，血液瘤以及淋巴瘤中的肿瘤。17.—种为有需要的宿主治疗或者预防癌症、细胞增殖疾病或者细胞存活疾病的方法，包括给所述的宿主施用权利要求1-12中任意一项所述的抗体。18.根据权利要求17所述的方法，其中所述的癌症是上皮癌症。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述的上皮癌症选自肺癌，结肠直肠癌，乳腺癌，胰腺癌，卵巢癌，前列腺癌，肝癌，胃癌，子宫内膜癌，肾癌，甲状腺癌，胆道癌，食道癌，脑癌，恶性黑素瘤，多发性骨髓瘤，血液瘤以及淋巴瘤中的肿瘤。20.根据权利要求17所述的方法，其中所述的细胞增殖疾病或者细胞存活疾病选自由下列疾病所组成的组角化细胞过度增殖，炎性细胞浸润，子宫内膜易位，细胞因子变化，子宫内膜异位，上皮以及皮样囊肿，脂肪瘤，腺瘤，毛细血管以及皮肤血管瘤，淋巴管瘤，痣损伤，畸胎瘤，肾瘤，肌纤维瘤，成骨细胞瘤，以及其他退变性聚集。21.根据权利要求14-20中任意一项所述的方法，其中所述的宿主是人类。22.根据权利要求14-20中任意一项所述的方法，其中进一步包括施用第二种化合物，其中所述的第二种化合物是化学治疗剂或者抗肿瘤试剂。23.—种为宿主诊断癌症、细胞增殖疾病或者细胞存活疾病的方法，包括将来自于所述宿主的受试样本与权利要求1-12中任意一项所述的抗体进行接触，并且检测所述抗体与所述样本发生结合的水平，与对照样本中的结合水平进行比较，与所述样本发生结合的抗体的水平的增加指示出癌症、细胞增殖疾病或者细胞存活疾病的存在。24.根据权利要求23所述的方法，其中所述的癌症是上皮癌症。25.根据权利要求24所述的方法，其中所述的上皮癌症选自肺癌，结肠直肠癌，乳腺癌，胰腺癌，卵巢癌，前列腺癌，肝癌，胃癌，子宫内膜癌，肾癌，甲状腺癌，胆道癌，食道癌，脑癌，恶性黑素瘤，多发性骨髓瘤，血液瘤以及淋巴瘤。26.根据权利要求23所述的方法，其中所述的细胞增殖疾病或者细胞存活疾病选自由下列疾病所组成的组角化细胞过度增殖，炎性细胞浸润，子宫内膜易位，细胞因子变化，子宫内膜异位，上皮以及皮样囊肿，脂肪瘤，腺瘤，毛细血管以及皮肤血管瘤，淋巴管瘤，痣损伤，畸胎瘤，肾瘤，肌纤维瘤，成骨细胞瘤，以及其他退变性聚集。27.根据权利要求23-26中任意一项所述的方法，其中所述的宿主是人类。全文摘要本发明涉及针对三叶因子(TFF)的构象特异性抗体及其组合物。本发明还涉及调节细胞增殖和/或存活的方法，特别是治疗癌症、肿瘤以及增殖疾病的方法。文档编号C07K16/30GK101743476SQ200780042777公开日2010年6月16日申请日期2007年10月3日优先权日2006年10月3日发明者P·E·罗比申请人:尼瑞医药品有限公司