2-芳基吡唑并[1,5-α]嘧啶-3-基乙酰胺衍生物作为转运蛋白(18kDa)配体的利记博彩app

专利名称：2-芳基吡唑并[1,5-α]嘧啶-3-基乙酰胺衍生物作为转运蛋白(18kDa)配体的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及使对象体内表达的转运蛋白(18 kDa)(TSPO)成像的化合物和方 法。本发明还涉及用于治疗对象的神经变性疾病、炎症或焦虑症的化合物和方 法。
背景技术：
转运蛋白(18kDa)(TSPO)，以前称为外周苯二氮卓受体(PBR)，可与腺嘌呤 核苷酸载体(ANC) (30 kDa)以及电压依赖性阴离子通道(VDAC) (32 kDa)形成 三聚复合物从而构成线粒体通透性转变孔(MPTP)。 TSPO与中央苯二氮卓受体 (CBR)的区别在于其独特的结构、生理功能以及在线粒体外膜上的亚细胞定位。 尽管已知TSPO参与许多生物过程，但其生理作用的若干方面仍旧不清楚。研 究暗示了TSPO在类固醇生物合成限速步骤、免疫调节、卟啉转运、钙体内平 衡和程序性细胞死亡中的重要性。
TSPO密集分布在大多数外周器官内，其中包括肺、心脏和肾脏，但它在 正常脑实质中仅少量表达。在神经损伤或感染之后，脑实质中的TSPO表达显 著提高。体外放射自显影和免疫组织化学已显示，该区域内TSPO结合升高与 存在激活的小胶质细胞直接相关。最近，在阿尔茨海默病(AD)和多发性硬化 (MS)患者体内正电子发射体层摄影(PET)成像证实脑实质中的TSPO结合仅限 于活化的小胶质细胞。
小胶质细胞是中枢神经系统(CNS)的主要免疫效应细胞。这些巨噬细胞样 的免疫细胞被假设源自单核细胞系，它们的主要作用取决于宿主防御和免疫监 视。它们对于它们微环境的改变高度敏感，并在病理事件响应中迅速激活。出 于这些原因，TSPO被认为与某些神经变性疾病早期节段的最初炎性过程密切 相关。
在过去几十年中已经报道了许多种类的TSPO配体，其中包括苯二氮卓类
5(苯甲二氮卓和Ro 5-4864)、异喹啉氨甲酰类(PK 11195)、吲哚乙酰胺类 (FGIN-l-27)、苯氧基苯基-乙酰胺类(DAA1106)、吡唑并嘧啶类 (pyrazolopyrimides)(DPA-713)、苯并噻氮卓类(benzothiazepine)和咪唑并吡啶类。
一些其他种类也已经开发出来，然而，需要更多具有不同结合特性和生物活性 的配体以更好地表征TSPO的生理和治疗作用、其准确定位以及TSPO亚类的 预期存在。
异喹啉氨甲酰["C](/ )-PK 11195已被用作药物探针用来研究TSPO的功能 和表达。在AD、 MS和多系统萎缩症(MSA)患者内进行的许多PET研究已经 显示，在体内用["C](i )-PK 11195测量TSPO在活体脑内是可行的。尽管 ["C](i )-PK 11195被认为是最广泛应用的PET TSPO配体，但它具有较差信噪 比并显示出较低脑透过性，这最终会降低其作为小胶质细胞激活标记物的灵敏 度。
1998年曾报道苯氧基苯基-乙酰胺衍生物DAA1106是TSPO的高选择性的 且有效的配体(Chaki， S.; Funakoshi， T.; Yoshikawa， R.; Okuyama， S.; Okubo， T.; Nakazato ， A.; Nagamine ， M.; Tomisawa ， K. European Journal of Pharmacology ， 1999， 371， 197-204)。最近，DAA1106被碳-11 ("C)标记并用于PET研究以 评价其在鼠类和灵长类大脑中的体内动力学(ZhangMR， KidaT， Noguchi J等， [UC]DAA1106: radiosynthesis and in vivo binding to peripheral benzodiazepine receptors in mouse brain(小鼠大脑内外周苯二氮卓受体的放射性合成和体内结 合).Wmc/Med说W2003; 30:513-519. Maeda J， SuharaT, ZhangMR等，Novel peripheral benzodiazepine receptor ligand [UC]DAA1106 for PET: An imaging tool for glial cells in the brain(用于PET的新型外周苯二氮卓受体配体 [UC]DAA1106:脑内神经胶质细胞的成像工具).S少"fl;we. 2004; 52:283-291)。 在猴枕叶皮质中，["C]DAA1106的结合显示比[UC](i )-PK 11195高四倍，说明 它有优良的脑透过性。该化合物的氟-18 ("F)类似物也已经被合成，名为 [18F]FEDAA1106，该类似物也显示出与["C]DAA1106类似的体内结合特性 (Zhang MR， Maeda J， Ogawa M等，Development of a new radioligand,
1 ft
N-(5-fluoro-2-phenoxyphenyl)-N-(2-[ F]fluoroethyl-5-methoxybenzyl)acetamide， for pet imaging of peripheral benzodiazepine receptor in primate brain诉于灵长类脑内外周苯二氮卓受体的pet成像的新型放射性配体N-(5-氟-2-苯氧基苯 基)-N-(2-["F]氟乙基-5-甲氧基苄基)乙酰胺的开发).Ozem. 2004; 47:2228-2235)。然而，["C]DAA1106和["F]FEDAA1106的结合似乎是不可逆 的，且实际上，它们从脑中缓慢清除，表明它们没有合适的定量分析动力学。 Ryu JK等，A^wra6/o/og7 o/D&^we， 20 (2005) 550-561报道称，TSPO配 体PK11195能减少注射了喹啉酸的大鼠皮层中的小胶质细胞活化和神经元死 亡。该篇论文中报道的结果说明，活化的小胶质细胞造成的炎性反应会损伤纹 状体神经元，因此药理学寻靶小胶质细胞中的TSPO有可能保护神经疾病中的 神经元。
鉴定可用于体内TSPO表达成像的具有改进的脑动力学的TSPO配体是有 益的，因为这样的配体可用于进一步研究涉及某些神经变性疾病早期阶段的生 化事件的级联。同样有利的是鉴定具有改进的脑动力学的TSPO配体，因为这 样的配体具有作为神经变性疾病诊断和治疗工具的潜能。
在第一个方面，本发明提供了用选自18F、 123I、 76Br、 1241或75Br的放射性 同位素放射性标记的式(I)的化合物，或其盐
式中
R是H、卤素、任选被卤素取代的烷基、或任选被卤素取代的垸氧基；
R,、 R2和R3各自独立为H或疏水性基团；和
R4和R5各自独立为任选被卤素取代的垸基、或任选被卤素取代的烷氧基。
文中，式(I)的化合物用18F、 123I、 76Br、 1241或7581""放射性标记"是指，

发明内容
7式(I)中的R,、 R2、 R3、 R4或R5中的至少一个被"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br取 代。通常是R、 R。 R2或R3中的一个被"F、 123I、 76Br、 1241或758[取代。
在第二个方面，本发明提供了一种药物组合物，其中包含用选自18F、 123I、 76Br、 124I或75Br的放射性同位素放射性标记的式(I)的化合物，或其药学上可 接受的盐，以及药学上可接受的载体。
在第三个方面，本发明提供了一种使对象体内的转运蛋白(18kDa)(TSPO) 成像的方法，所述方法包括给予该对象用选自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放 射性同位素放射性标记的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，并获得放射 性同位素在对象体内的定位图。
通常，当式(I)的化合物用18F、 76Br、 ^I或"Br放射性标记时，所述图像 通过正电子发射体层摄影(PET)成像而获得。通常，当式(I)的化合物用1231放射 性标记时，所述图像是通过单光子发射计算机体层摄影(SPECT)成像获得的。
在第四个方面，本发明提供了一种诊断对象的神经变性疾病的方法，包括 给予该对象用选自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素放射性标记的式 (I)的化合物，或其药学上可接受的盐，并获得放射性同位素在对象体内的定位 图以评价对象脑实质中该化合物或其盐的TSPO结合程度。
在第五个方面，本发明提供了用选自18F、 123I、 76Br、 124I或75Br的放射性 同位素放射性标记的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于对象体 内转运蛋白(18kDa)成像的药物中的应用。
在第六个方面，本发明提供了一种式(II)的化合物，或其盐<formula>formula see original document page 8</formula>式中:R是任选被^素取代的垸基，或任选被卤素取代的垸氧基； R" R2和R3各自独立为H或疏水性基团；和
R4和R5各自独立为任选被卤素取代的垸基、或任选被卤素取代的垸氧基，
和
其中，R、 R卜R2、 R3、 R4或Rs中的至少一个被F取代。 在第七个方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含式(II)的化合物或
其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
在第八个方面，本发明提供了一种治疗对象的神经变性疾病、炎症或焦虑
症的方法，所述方法包括给予该对象治疗有效量的式(II)的化合物或其药学上
可接受的盐。
在第九个方面，本发明提供了式(n)的化合物或其药学上可接受的盐在制
备用于治疗神经变性疾病、炎症或焦虑症的药物中的应用。 附图简述


图1是TSPO配体PK11195、 Ro5-4864、 DPA-713和DPA-714对C6胶质
瘤大鼠细胞中孕烯醇酮积聚的作用的图示。所有化合物以相同浓度(40 一)使 用；培育期(2h)结束时，通过放射免疫测定(RIA)测定孕烯醇酮的量。所示值为 至少三次测定的平均值。
图2是实施例4中所述四组QA损伤大鼠中每一组的["F]DPA-714的外周 分布的图示；所述四组为对照组(仅注射放射性配体)和三个预处理组(PK 11195、 DPA-713和DPA-714)。
图3是实施例4中所述四组QA损伤大鼠中每一组的右纹状体(右Stri)、左 纹状体(左Stri)、右额皮质(右Cx)、左额皮质(左Cx)、右海马(右Hippoc)和左 海马(左Hippoc)中["F]DPA-714的大脑分布的图示；所述四组为对照组(仅注射 放射性配体)和三个预处理组(PK 11195、 DPA-713和DPA-714)。
图4显示了描绘实施例5所述三个研究中60分钟PET扫描时间期间狒狒 全脑中["F]DPA-714的摄取的时间活性曲线(TAC)(基线["F]DPA-714，阻断 [18F]DPA-714 + PK 11195 (1.5 mg/kg)，替代["F]DPA-714 + DPA-714 (1 mg/kg) 研究)。发明详述
文中，术语"垸基"指直链、支链或者单环或多环烷基。典型地，所述烷基 是C,-C3o烷基，例如，CrC6垸基。直链和支链垸基的例子包括甲基、乙基、 丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、1，2-二甲基丙基、U-二甲基丙基、己基、4-甲基戊基、l-甲基戊基、2-甲基戊基、 3-甲基戊基、1,1-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1,2-二甲基丁 基、1，3-二甲基丁基、1,2，2-三甲基丙基和1，1,2-三甲基丙基。 环垸基的例子包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。 文中，术语"烷氧基"指化学式为0垸基的基团。垸氧基的例子包括甲氧基、 乙氧基、丙氧基和丁氧基。
文中，术语"烯基"指直链、支链或环状烯基。典型地，所述烯基是CVC30 烯基，例如CVCV烯基。烯基的例子包括乙烯基，烯丙基，1-甲基乙烯基， 丁烯基，异丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，l-戊烯基，环戊烯基，1-甲基环戊烯基， l-己烯基，3-己烯基，环己烯基，l-庚烯基，3-庚烯基，l-辛烯基，环辛烯基， l-壬烯基，2-壬烯基，3-壬烯基，l-癸烯基，3-癸烯基，1，3-丁二烯基，1,4-戊 二烯基，1，3-环戊二烯基，1,3-己二烯基，1，4-己二烯基，1,3-环己二烯基，1,4-环己二烯基，1,3-环庚二烯基，1,3,5-环庚三烯基和1,3,5,7-环辛四烯基。
文中，术语"炔基"指直链、支链或环状炔基。典型地，所述炔基是C2-C30
炔基，例如，CVCV炔基。
文中，术语"芳基"指单核、多核、共轭或稠合的芳烃或芳香杂环系统的残 基。芳基的例子包括苯基、萘基和呋喃基。当芳基包含杂环芳环系统时，该 杂环芳环系统可含有1-4个独立选自N、 O或S的杂原子。
文中，术语"齒素"指卤素残基，例如氟、氯、溴或碘。文中，提及"任选 被卤素取代的"基团时是指该基团可被一个或多个卤素取代基取代。
本发明人吃惊地发现，用选自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素 放射性标记的式(I)的化合物是选择性TSPO配体，并可被用作TSPO的精确体 内标记物，因此可作为小胶质细胞活化的标记物。这些放射性标记的化合物因 此可用于研究许多神经变性疾病中的神经病理学事件，并可用作诊断这种疾病以及监测这种疾病进展的工具。
文献中已经描述了许多类型的TSPO配体。作为治疗药物有效的化合物不 必是可被放射性标记的并用于成像的化合物。实际上，许多在治疗上使用的药 物对于特定靶点没有选择性并且可与许多靶点相互作用而产生治疗效果。此
外，许多治疗药不具有成像所需的通常为nM级的亲和力，其亲和力为^M级。 此外，治疗药的代谢和亲油性，尤其当成像时以示踪剂水平给予时，可使得该 药不适合用于成像。
本发明人吃惊地发现，用选自18F、 123I、 76Br、 "I或"Br的放射性同位素 放射性标记的式(I)的化合物可用于使TSPO成像，因此可使对象体内小胶质细 胞的活化情况成像。用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性标记的式(I)的化合物 是TSPO的选择性配体并对TSPO具有高亲和力。
用选自"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素放射性标记的式(I)的化 合物形成盐，且这种化合物的盐也包括在本发明之内。所述盐优选是药学上可 接受的，但非药学上可接受的盐也落入本发明范围内。药学上可接受的盐的例 子包括包括药学上可接受的阳离子的盐，所述阳离子如钠、钾、锂、转、镁、 铵和烷基铵；药学上可接受的无机酸的酸加成盐，所述无机酸如盐酸、正磷酸、 硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氢溴酸；或者药学上可接受的有 机酸的盐，所述有机酸如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、马来酸、羟基马来酸、 延胡索酸、柠檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、 甲磺酸、三卤甲烷磺酸、甲苯磺酸、、苯磺酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、天冬 氨酸、谷氨酸、依地酸、硬脂酸、棕榈酸、油酸、月桂酸、泛酸、单宁酸、抗 坏血酸和缬草酸。
在式(I)中，R通常是CL6垸基或CL6烷氧基，其中CL6垸基或CV烷氧基
可任选被卤素取代。
典型地，！^和R3各自是除H之外的基团。当R。 112或113是疏水性基团，
该疏水性基团例如可以是任选被卤素取代的CL6垸基，任选被卤素取代的芳 基，任选被卤素取代的NHCV6烷基，任选被卤素取代的OCL6垸基，任选被卤 素取代的SCl6綜基，COOR6其中R6是任选被卤素取代的Cl6院基，(CH2)nOR^
其中R6是任选被卤素取代的CL6垸基且n是整数(如1、 2、 3、 4、 5或6)，或
11任选被卤素取代的聚醚。当R。 R2或R3是任选被卤素取代的聚醚时，所述聚
醚例如可以是任选被卤素取代的式-(0(CH2U(CH2)cCH3所示基团，其中a是1、 2或3， b是2、 3、 4或5，而c是0、 1、 2、 3、 4或5。
各种式(I)的化合物描述于Selleri等，"(2-Arylpyrazolo[l，5-a]pyrimidin-3-yl Acetamides. New Potent and Selective Peripheral Benzodiazepine Receptor Ligands (2-芳基吡唑射l,5-a]嘧啶-3-基乙酰胺—新的有效的选择性外周苯二氮 卓受体配体)"，说'oorg朋/c cfe Me&c/"a/ C/ em&fr7 9 (2001) 2661-2671 ("Selleri 等(2001)")，将其纳入本文作为参考。该文献描述了某些具体的式(I)的化合物(该 文献所述化合物3f-3y)的制备，并披露那些化合物对TSPO有亲和力和选择性 (该文献中称为PBR)。尽管该文献描述的具体化合物中的一些对CBR有一定 亲和力，但该文献所述化合物3f-3y中的每一种对TSPO的选择性高于CBR。
如Sdleri等(2001)所述，该文献提及的式(I)的化合物可从合适的芳酰基乙 腈开始采用三步骤方法制备。在所述方法中，芳酰基乙腈在碱性介质中与AUV-二乙基氯乙酰胺反应，所得焦油通过柱层析纯化以分离AUV-二乙基丁酰胺。将 AUV-二乙基丁酰胺在存在乙酸时与水合肼在乙醇中回流反应，以得到相应的 A^V-二乙基-(3-氨基-5-芳基吡唑-4-基)乙酰胺。A^V-二乙基-(3-氨基-5-芳基吡唑 -4-基)乙酰胺然后与合适的亲电试剂(4，4-二甲氧基-2-丁酮，1,1,3,3-四乙氧基丙 垸，2，4-戊二酮，l-三氟甲基-2,4-戊二酮，1，5-三氟甲基-2，4-戊二酮，1-苯基-1,3-丁二酮，3-甲基-2,4-戊二酮，2-乙酰-3-氧代丁酸乙酯，2-乙酰-3-乙氧基丙烯酸 乙酯，苯基丙醛或l-苯基-3-二甲基氨基-2-丙-l-酮)縮合以封闭嘧啶环，从而形 成相应的式(I)的化合物。
另一种制备各种式(I)的化合物的方法描述于Selleri， S.; Grafted, P.; Costagli， C; Bonaccini， C; Costanzo， A.; Melani， F.; Guerrini， G.; Ciciani， G.; Costa， B.; Spinetti， F.; Martini, C; Bruni， F.说'oorgam'c朋d Mec/Z"'"fl/ C/zem/Wo;， 2005， 13， 4821-4834 ("Selleri等(2005)")，纳入本文作为参考。在 该文献所述方法中，使苯甲酰乙腈在碱性介质(LiOH-H20)中与碘乙酸或碘乙酸 乙酯反应以分别得到相应的酸或酯(Ia和Ib)。中间体Ia和Ib在在存在乙酸时 与水合肼在乙醇中回流反应，以得到相应的3-氨基吡唑(2a和2b)。化合物2a 饥饿2b与2,4-戊二酮縮合以封闭嘧啶环，得到酸3a和酯3b。将酸3a转化成该中间体与酰胺反应以得到相应的式(I)的化合 物。
Selleri等(2001)和Selleri等(2005)中描述的式(I)的化合物可通过那些文献 中描述的方法或通过有机化学合成领域技术人员已知的其他方法制备。本领域 技术人员将了解，其他式(I)的化合物可通过与Selleri等(2001)和Selleri等(2005) 所述方法类似的方法制备。
式(I)的化合物可通过有机化学领域已知的修饰有机化合物的标准技术用 18F、 123I、 76Br、 Wl或"Br放射性标记，从而用18F、 123I、 76Br、 124I或75Br代 替化合物中的卤素或卤素基团。
或者，用选自！8F、 ！23I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素放射性标记的式 (I)的化合物可通过在用于合成式(I)的化合物的开始原料之一或中间体中掺入 18F、 123I、 76Br、 "4l或75Br作为取代基来制备。
例如，用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性标记的式(I)的化合物可以通过 制备具有上文定义的式(I)的化合物来制备，但其中，R2、 R3、 R4或Rs中 的一个被其上能发生无环亲核取代反应的离去基团如甲苯磺酸根、甲磺酸根、
Br或I取代，然后将化合物置于能发生无环亲核取代反应的环境下以使18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br取代该离去基团。例如，当离去基团是Br或甲苯磺酸根 时，可使化合物在乙腈(acetonitrite)中与["F]-kryptofix-K222复合物在约8(TC反 应10分钟以形成用"F放射性标记的式(I)的化合物。用1231、 76Br、 ^I或"Br 放射性标记的式(I)的化合物也可通过形成上文定义的式(I)的化合物来形成，但 其中，R、 R,、 R2、 R3、 R4或Rs中的一个被甲锡烷基、甲硅垸基或卤素(该卤 素取代基通常不同于放射性同位素)取代，并在酸性介质中用氧化剂如氯胺-T 对化合物进行亲电取代反应以形成用123I、 76Br、 ^I或"Br放射性标记的式(1) 的化合物。在一些实施方式中，该反应可在室温进行，而在其他实施方式中， 反应混合物被加热至约80'C至10(rC。如上文所定义的但R、 R!、 R2、 R3、 R4 或R5中的一个被离去基团取代的式(I)的化合物可通过与Selleri等(2001)或 Selleri等(2005)描述的制备式(I)的化合物的方法类似的方法来制备，但合适的 反应物被离去基团取代。或者，式(I)的化合物可通过有机化学中己知的反应来 修饰以引入离去基团作为R、 R4、 R2、 R3、 R4或R5中一个上的取代基。
13式(I)的化合物可用18F (半衰期110分钟)、1231 (半衰期13.2小时)、76Br (半 衰期16.2小时)、124I (半衰期4.2天)或75Br (半衰期1.6小时)放射性标记。典型 地，式(I)的化合物用"F放射性标记的。相比用具有明显较短半衰期的放射性 同位素放射性标记的化合物，临床成像时更经常使用18F、 123I、 76Br、 124I或75Br 放射性标记的式(I)的化合物，从而可在一天内进行多次扫描。此外，现场没有 回旋加速器的医院/机构可使用这种放射性配体，因为这种放射性配体可在上述 地点外制备并运送到医院/机构，在运输过程中没有明显的活性损失。此外，对 用18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br标记的化合物可进行较长时间扫描(如180分钟)，
这使得它们更适用于大多数生物过程的研究。
用"F、 123I、 76Br、 ^或"Br放射性标记的式(I)的化合物对TSPO有高亲 和力和选择性，并可用于对象体内的TSPO成像。因此，用18F、 123I、 76Br、 124I 或"Br放射性标记的式(I)的化合物可用于研究对象体内的TSPO。
在患有神经变性疾病的对象中，脑实质内的TSPO表达较之未患神经变性 疾病的对象明显升高。因此，用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性标记的式(1) 的化合物可用于研究神经变性疾病并可用来诊断和监测神经变性疾病的进展。 可利用这些化合物研究、诊断或监测的神经变性疾病包括阿尔茨海默病、多发 性硬化、帕金森病、亨廷顿病、多系统萎縮症、癫痫、脑病、中风和脑瘤。这 些疾病中的每一种都与神经损伤或感染有关。
根据本发明第三或第四方面的方法，用选自18F、 123I、 76Br、 124I或75Br 的放射性同位素放射性标记的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐被给予对 象。当式(I)的化合物用18F、 76Br、 Wl或"Br放射性标记时，可采用本领域已 知的常规技术通过正电子发射体层摄影(PET)成像获得该放射性同位素在对象 体内的定位影像，以及对象体内TSPO的定位。当化合物用1231放射性标记时， 可采用本领域已知的常规技术通过SPECT成像获得该放射性同位素在对象体 内的定位影像。通常，对于PET和SPECT成像，数据都是利用常规的动态或 序列模式采集技术获得的，在给予用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性标记的 式(I)的化合物或其药学上可接受的盐之后立即开始，并持续约40分钟或更长 时间。在完成数据釆集时，通常对数据进行处理以提供各自描绘了特定时间点 上放射性同位素在体内的分布的三维重建的时间序列。典型地，用"F、 123I、 76Br、 1241或7&放射性标记的式(1)的化合物或其药 学上可接受的盐是肠胃外给予的。典型地，用"F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射 性标记的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐是通过静脉注射或灌注肠胃外 给予的。典型地，用"F、 76Br、 ^I或"Br放射性标记的式(I)的化合物或其药 学上可接受的盐是以约5-20 mCi (185-740 MBq)的剂量范围给药。
典型±也，用"F、 123I、 76Br、 "I或"Br放射性标记的式(I)的化合物或其药 学上可接受的盐通过给予一种药物组合物来施用，该药物组合物包含用18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br放射性标记的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐， 以及药学上可接受的载体。
供肠胃外给予的制品的形式通常是无菌的水性或非水性溶液、悬浮液或乳 液。合适的非水性溶剂的例子包括丙二醇，聚乙二醇，植物油如橄榄油，以 及可注射的有机酯类如油酸乙酯。合适的水性载体包括水和醇性/水性溶液、 乳液或悬浮液，包括盐水和缓冲介质。合适的肠胃外载体包括氯化钠溶液。
本发明人还发现，其中的R是任选被卤素取代的垸基或任选被卤素取代的 烷氧基并含有至少一个氟基的式(I)的化合物对TSPO的活性明显高于不含氟基 的类似化合物。
因此，本发明还提供了式(II)的化合物，或其盐 <formula>formula see original document page 15</formula>
式中
R是任选被卤素取代的垸基，或任选被卤素取代的垸氧基； R,、 R2和R3各自独立为H或疏水性基团；和
R4和115各自独立为任选被卤素取代的烷基、或任选被卤素取代的烷氧基，和
其中，R、 R。 R2、 R3、 R4或R5中的至少一个被F取代。 式(II)的化合物的盐优选是药学上可接受的，但非药学上可接受的盐也落 入本发明范围内。式(II)的化合物的非药学上可接受的盐可用作制备式(II)的化 合物的药学上可接受的盐的中间体。药学上可接受的盐的例子包括包括药学 上可接受的阳离子的盐，所述阳离子如钠、钾、锂、钙、镁、铵和垸基铵；药 学上可接受的无机酸的酸加成盐，所述无机酸如盐酸、正磷酸、硫酸、磷酸、 硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氢溴酸；或者药学上可接受的有机酸的盐，所 述有机酸如乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、马来酸、羟基马来酸、延胡索酸、柠 檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、三卤 甲垸磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、天冬氨酸、谷氨酸、 依地酸、硬脂酸、棕榈酸、油酸、月桂酸、泛酸、单宁酸、抗坏血酸和缬草酸。 典型地，在式(II)中，A和R3各自是除H之外的基团。
典型地，R是任选被卤素取代的CL6烷基、或任选被卤素取代的CL6烷氧
基。在一些实施方式中，R是被F取代的CV6垸氧基，如OCH2CH2F。
典型地，R!、 R2和R3各自独立选自H， Cl6院基，芳基，NHCw烷基，
OCL6烷基，Sd-6垸基，COOR6其中R6是d-6烷基(如甲基、乙基或丙基)，
(CH2)。OR6其中R6是CL6烷基且n是整数(如1、 2、 3、 4、 5或6)，以及聚醚， 其中，这些基团中的任何一个(H除外)可任选被卤素取代。当R。 R2或R3是 任选被卤素取代的聚醚时，所述聚醚例如可以是任选被卤素取代的式 -(0(CH2)a)b(CH2)eCH3所示基团，其中a是l、 2或3， b是2、 3、 4或5，而c 是0、 1、 2、 3、 4或5。
在一些实施方式中，R4和R5各自独立选自CL6烷基或Q.6烷氧基，其中， cl6烷基或cl6垸氧基可任选被卤素取代。
在一些实施方式中，R是被F取代的cl6垸氧基，R。 R2和R3各自独立
选自H， Cl6院基，芳基，NHCl6院基，OdV烷基，SCL6烷基，COOR6其 中R6是Cw垸基，(CH2)nOR6其中R6是CL6烷基且n是整数，和聚醚，且R4 和R5各自独立选自CL6烷基或CL6垸氧基。
式(II)的化合物对TSPO有选择性并激活TSPO。 TSPO的活化与神经类固醇合成增加有关。因此TSPO的活化可提高脑内神经类固醇的浓度。这些神经 类固醇，包括孕酮和脱氢表雄酮以及它们的代谢物，正性调节，氨基丁酸
(GABA)神经递质从而导致非镇静的抗焦虑效应，这种效应对于记忆和应激相 关疾病有治疗益处。式(II)的化合物也可用作治疗神经变性疾病的神经保护剂、 作为抗炎药、以及作为抗焦虑药。
因此，在另一方面，本发明提供了一种治疗对象的神经变性疾病、炎症或
焦虑症的方法，该方法包括给予该对象治疗有效量的式(n)的化合物或其药学
上可接受的盐。可用该方法治疗的神经变性疾病包括阿尔茨海默病，多发性硬
化，帕金森病，亨廷顿病，多系统萎縮症，癫痫，脑病，中风和脑瘤。式(n) 的化合物或其药学上可接受的盐通常是通过给予包含式(n)的化合物或其药学 上可接受的盐的药物组合物而施用的。
在另一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含式(n)的化合物或其 药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
本发明第七个方面所述的组合物包含至少一种式(n)的化合物或其药学上 可接受的盐以及一种或多种药学上可接受的载体，并任选包含其他治疗剂。合 适的组合物包含那些适合口服、直肠、鼻、局部(包括含服和舌下)、阴道或肠 胃外(包括皮下、肌内、静脉内和真皮内)给药的物质。该组合物可方便地以单 位剂型存在，并可通过药物领域熟知的方法制备。这种方法包括使活性成分与 构成一种或多种辅助成分的载体相结合的步骤。通常，该组合物是通过使式(n) 的化合物或其药学上可接受的盐与液态载体、稀释剂、佐剂和/或赋形剂或者细 致分散的固态载体，或者这两者，均匀而密切地结合而制备的，如果需要的话 然后可使产物成形。
术语"对象"在文中指任何动物。所述对象可以是哺乳动物，如人。在一些 实施方式中，所述对象是伙伴动物如狗或猫、驯养动物如马、小型马、驴、骡、 骆驼、羊驼、猪、奶牛或绵羊，或动物园动物如灵长类动物、猫科动物、犬科 动物、牛科动物或有蹄类动物。
文中，术语"治疗有效量"指有效产生所需治疗反应的化合物的量。具体的 "治疗有效量"将随要治疗的具体症状、对象的身体状况、要治疗对象的类型、 治疗持续时间、并行治疗(如果有的话)的特性、以及采用的具体制剂等因素变
17化，且主治医师将能够决定合适的治疗有效量。例如，主治医师可根据其他神
经活性化合物或动物实验的结果来决定式(n)的化合物或其药学上可接受的盐
的合适的治疗有效量。在一些实施方式中，式(II)的化合物或其药学上可接受
的盐的给药剂量可以约为l-20mg/kg体重/天。
文中，"药学上可接受的载体"是用来将化合物递送给对象的药学上可接受 的溶剂、悬浮剂或载体。所述载体可以是液态或固态，并可根据计划的给药方 式选择。载体是"药学上可接受的"是指不是生物学上或其他方面不需要的，即 该载体可与活性成分一起给予对象而不会造成任何或实质性不良反应。
式(II)的化合物或其药学上可接受的盐可采取含有常规的药学上可接受的 无毒载体的剂量单位形式通过口服、局部或肠胃外(如通过皮下注射，通过气 溶胶给予肺部或鼻腔，或通过静脉内、肌内、鞘内或颅内注射或灌注技术)给 予。式(II)的化合物或其药学上可接受的盐可作为片剂、水性或油性悬浮液、 锭剂、含片、粉末剂、颗粒剂、乳液、胶囊、糖浆剂或酏剂口服给予。供口服 的组合物可包含一种或多种选自下组的试剂以得到美观且可口的药物制品甜
味剂、调味剂、着色剂、崩解剂、润滑剂、延时剂和防腐剂。合适的甜味剂包 括蔗糖、乳糖、葡萄糖、阿斯巴特或糖精。合适的崩解剂包括玉米淀粉、甲基 纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶、膨润土、藻酸或琼脂。合适的调味剂包括 薄荷油、冬青油、樱桃、橙子或覆盆子香精。合适的防腐剂包括苯甲酸钠、维
生素E、 ct生育酚、抗坏血酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或亚硫
酸氢钠。合适的润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸、油酸钠、氯化钠或滑石。合适 的延时剂包括甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。
供肠胃外给药的制品的形式通常是无菌的水性或非水性溶液、悬浮液或乳
液。合适的非水性溶剂的例子包括丙二醇，聚乙二醇，植物油如橄榄油，以 及可注射的有机酯类如油酸乙酯。合适的水性载体包括水和醇性/水性溶液、 乳液或悬浮液，包括盐水和缓冲介质。合适的肠胃外载体包括氯化钠溶液。也 可存在防腐剂和其他添加剂，如抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂、生长因子、 惰性气体，等等。
通常，术语"治疗"等在文中用来表示使对象获得所需药理学和/或生理效 应。所述效应可以是预防性的，即完全或部分防止疾病或病症或其征兆或症状，
18和/或可以是治疗性的，即部分或完全治愈疾病或病症。"治疗"在文中涵盖对脊 椎动物、哺乳动物，尤其是人类的疾病或病症的任何处理，并包括(a)防止 疾病或病症在可能对于这种疾病或病症易感但还未被诊断为患有该疾病或病 症的对象中发生；(b)抑制疾病或病症，即延迟疾病或病症的发展；或(C)缓解 或改善疾病或病症的影响，即使疾病或病症的影响减退。
实施例
下面参考以下非限制性实施例描述了本发明的实施方式。 实施例1合成DPA-714和["F]DPA-714 1.合成DPA-714
方案1.合成PBR配体DPA-714及其甲苯磺酰基前体8; (i)乙腈，甲醇 钠；(ii)A/^-二乙基氯-乙酰胺，碘化钠，NaOH/80%EtOH; (iii)水合肼，EtOH， 乙酸；(iv)2,4-戊二酮，EtOH. (Selleri等，2001); (v) 48% HBr/PTC; (vi)7，三 苯基膦，DIAD; (vii)三苯基膦，2-氟乙醇，DMF， DIAD。
3-(4-甲氧基-苯萄-3-氧代-丙腈(2)
将4-甲氧基苯甲酸甲酯(30 g， 181 mmol)和甲醇钠(9.75 g， 181 mmol)的 混合物在氩气下8(TC加热，并连续搅拌直至均匀。在混合物中逐滴加入乙腈 (16.5 ml， 313 mmol)和氯苯(19 ml)。反应物在90-100。C加热24小时并连续搅
19拌。将混合物冷却至约0。C并用冰水(约50ml)和二乙醚(约200 ml)处理，振荡 直至固体物质溶解。将水层与有机层分离并用稀硫酸酸化至pH2。加入二乙醚 之后萃取有机层，用无水Na2S04干燥并蒸发至干。将所得黄色固体溶于CHC13 并用饱和NaHC03水溶液洗涤(5x 100 ml)以除去苯甲酸。有机层用无水NaS04 干燥并蒸发至干。固体用石油醚洗涤纯化，得到精细的淡黄色晶体状的2(2.91 g， 9%); mp: 132-137。C; ^n.m.r.(CDCl3， 300 MHz) S 3.89 (s， 3H， OCH3)， 4.03 (s， 2H， CH2)， 6.97 (d， J=9.0， 2H， Ph)， 7.90 (d， J = 9.0， 2H， Ph)。 3-氰基-N,N-二乙基-4-(4-甲氧基-苯基)-4-氧代-丁酰胺(3) 将2 (2.0 g， 11.4 mmol)、N,N-二乙基氯乙酰胺(1.7 g， 11.4 mmol)和Nal (5.1 g， 34 mmol)的混合物加入用80% EtOH (80 ml)配制的NaOH (0.5 g， 12.5 mmol) 溶液，同时连续搅拌。混合物在室温搅拌7小时并通过TLC监测。 一旦反应 完成便将其冷却并过滤以除去无机物质。将滤液浓縮，残余物通过柱层析 (CH2Cl2作为洗脱液)纯化以得到暗黄色油状的3 (2.1 g,64 %); n.m.r. (CDC13， 300 MHz) 5 1.06-1.30 (m， 6H， N(CH2CH3)2)， 2.85 (dd， J=4.5， 16.2 Hz， 1H， CH2)， 3.21-3.43 (m， 5H: 4H， N(CH2CH3)2: 1H， CH2)， 3.卯(s， 3H， OCH3)， 4.89-5.02 (m， 1H， CH)， 6.98 (d， J=8.7， 2H， Ph)， 8.05 (d， J=9.0， 2H， Ph)。 质谱CI， m/z289 (M+ 1)。
2-[3-氨基-5-(4-甲氧基-苯基)-lH-吡唑-4-基]-N,N-二乙基乙酰胺(4) 在EtOH(37 ml)配制的3 (2.1 g， 7.3 mmol)的溶液中加入水合肼(0.73 g， 14.6 mmol)和乙酸(0.73 ml)。将混合物加热回流4小时并通过TLC监测。 一旦反应 完成便使其冷却至室温。将溶液蒸发至干，残余物通过硅胶柱层析 (CH2Cl2/MeOH， 10:1 v/v，作为洗脱液)纯化。将纯化产物重溶于CH2C12并用 饱和NaHC03水溶液洗涤(4x20 ml)以除去乙酸。这样得到黄色晶体状的4 (1.52 g， 68%); mp: 154.5-157.5°C; ^ n.m.r. (CDC13， 300 MHz) 5 0.90-1.10 (m， 6H， N(CH2CH3)2)， 3.04-3.33 (m， 4H， N(CH2CH3)2)， 3.50 (s， 2H， CH2)， 3.85 (s， 3H， OCH3)， 6.98 (d， J=8.7， 2H， Ph)， 7.32 (d， J=9.0, 2H， Ph)。
将^>^-二乙基-2-[2-(4-甲氧基-苯基)-5,7-二甲基吡唑并[1,5-01]嘧啶-3-基]-乙酰胺(5) 2,4-戊二酮(0.4 g，4 mmol)加入EtOH (20 ml)配制的4 (1.2 g，4 mmol) 的溶液。将混合物加热回流12小时。使反应混合物冷却并将溶剂蒸发至干。残余物通过硅胶柱层析(CHCVMeOH， 40:1 v/v作为洗脱液)纯化，得到淡黄色 晶体状的5(1.37g， 93%); mp: 120.5-123.5。C;H n.m.r. (CDC13， 300 MHz) S 1.09-1.22 (m， 6H， N(CH2CH3)2)， 2.54 (s， 3H， 5-CH3)， 2.74 (s， 3H， 7-CH3)， 3.39-3.51 (m， 4H， N(CH2CH3)2)， 3.85 (s， 3H， OCH3)， 3.91 (s, 2H， CH2), 6.51 (s， 1H， H-6)， 6.98 (d， J=9.0， 2H， Ph)， 7.76 (d， J=9.0， 2H， Ph)。
N,N-二乙基-2-[2-(4-羟基-苯基)-5,7-二甲基-卩比唑并[l,5-a]嘧啶-3-基]-乙酰 胺(6)
将5(0.43g， 1.16mmo1)，溴化十六烷基三丁基l粦(0.06 g， 0.116 mmol)和 45% HBr (6 ml)的溶液在IO(TC边搅拌边加热7小时。反应混合物用NaHC03 碱化至pH 8-9并用CH2Cb萃取。收集有机层并用无水NaS04干燥。真空除去 溶剂，残余物通过柱层析(CHCl3/MeOH， 40:1 v/v作为洗脱液)纯化，得到象牙 色晶体6 (220 mg， 54%); mp: 242.5陽247。C; 'H n.m.r. (CDC13， 300 MHz) S 1.06-1.18 (m， 6H, N(CH2CH3)2)， 2.54 (s， 3H， 5-CH3)， 2.73 (s， 3H， 7-CH3)， 3.34-3.51 (m， 4H， N(CH2CH3)2)， 3.96 (s， 2H， CH2)， 6.49 (s， 1H， H-6)， 6.79-6.82 (d， J=8.7， 2H, Ph)， 7.61-7.64 (d， J=8.4， 2H， Ph);(实测值，C， 66.35; H， 6.71; N， 15.38。 C20H24N4O2.l/2H2O理论值C， 68.16; H， 6.86; N， 15.90%)。 质谱CI， m/z353 (M+l)。
甲苯-4-磺酸2-羟基-乙酯(7)
在二氯甲垸(10ml)中的1，2-乙二醇(62mg， 1 mmol)溶液中边搅拌边加入新 鲜氧化银(350 mg， 1.5mmo1)、对甲苯磺酰氯(210 mg， 1.1 mmol)和碘化钾(33 mg， 0.2 mmol)。将反应混合物室温搅拌1小时，通过小硅藻土垫过滤并用油 酸乙酯洗漆。除去溶剂，粗产物通过柱层析(CH2Cl2MeOH， 40:lv/v作为洗脱 液)纯化，得到透明油状的单甲苯磺酸酯产物7，产率为46%。 iHiLmx^DC^, 300 MHz) S: 7.81 (d， 2H， J = 8.1)， 7.36 (d， 2H， J=8.1)， 4.15(d， 2H， J=9.0)， 3.82 (d， 2H， J=9.0)， 2.46 (s， 3H)。
甲苯-4-磺酸2-[4-(3-二乙基氨甲酰基甲基-5,7-二甲基-吡唑并-[l，5-a]嘧啶 -2_基)-苯氧基]-乙酯(S)
二异丙基偶氮二羧酸酯(DIAD， 0.48 ml， 2.4 mmol)加入6 (400 mg， 1.1 mmol)三苯基膦(637 mg, 2.4 mmol)和2-羟基乙基甲苯磺酸根(525 mg， 2.4mmol)的溶液在干燥THF(10ml).反应混合物室温搅拌20小时并蒸发至干應 余物通过硅胶柱层析(CHQ3/MeOH， 80:1 v/v作为洗脱液)产生淡黄色晶体8， 产率85。/。？Hn.m.r.(CDCl3， 300應z)8: 7.83 (d， 2H， J=8.1)， 7.74 (d， 2H， J=9.0)， 7.35 (d， 2H， J= 8.1)， 6.86 (d， 2H， J= 9.0)， 6.52 (s， 1H)， 4.37 (d， 2H， J=4.8)， 4.19 (d， 2H， J=4.8)， 3.92 (s， 2H)， 3.39-3.52 (m， 4H)， 2.74 (s， 3H)， 2.56 (s， 3H)， 2.45 (s， 3H)， 1.08-1.23 (m， 6H);(实测值，C， 63.37; H， 5.96; N， 9.89。质谱CI， m/z 551 (M + 1)。
^^二乙基-2-{2-[4-(2-氟-乙氧基)-苯基]-5，7-二甲基-吡唑并[1,5-01]嘧啶-3-基}-乙酰胺(DPA-714)
在无水DMF(6ml)中的6(150mg， 0.43 mmol)、三苯基膦(274 mg， 0.94 mmol)和2-氟乙醇(60 mg， 0.94 mmol)的溶液中加入二异丙基偶氮二羧酸酯 (DIAD， 190 mg， 0.94 mmol)。将反应混合物室温搅拌48小时然后蒸发48小 时再然后蒸发至干。残余物通过硅胶柱层析(CHCyMeOH， 80:lv/v作为洗脱 液)纯化，得到淡黄色晶体状的DPA-714，产率为47%。 1Hn.m.r.(CDCl3， 300 MHz)S: 7.78 (d， 2H， J=9.0Hz)， 6.52 (s, 1H)， 7.01 (d， 2H， J=9.0Hz)， 4.78 (dt， 2H， J=4， 47Hz)， 4.26 (dt， 2H， J=4， 28Hz)， 3.93 (s， 2H)， 3.39-3.51 (m， 4H)， 2.75 (s， 3H)， 2.56 (s， 3H)， 1.09-1.27 (m， 6H);(实测值，C， 66.70; H， 6.60; N， 13.14。质谱CI， m/z399 (M+l)。
2.放射性合成["F]DPA-714
K[18F〗FK222
CH3CN， 85°C， 5分钟 USaLyDPA-714
放射性同位素制备。在PETtrace回旋加速器(瑞典GE医疗公司(GE Healthcare, Sweden))上制造未加入载体的水性["F]氟化物离子，方法是应用 16.5 MeV质子束在95。/。富集的卩S0]-H20上通过卩S0(p,nysF]核反应激发0.8 mL水靶。制备["F]-kryptofix-K222。将[180]富集的H20中的["F]氟化物转移至GE TRACERlab MXFDG合成仪并使其在真空下通过阴离子交换树脂(Sep-Pak Waters Accell Light QMA柱，碳酸酯形式，制备时用10 mL 0.5 M K2C03洗 涤然后用10mL水冲洗)。捕获的["F]氟化物离子然后用含有K2C03(7mg溶于 300 ^tL纯水)、300 乙腈和22 mg Kryptofix 222 (K222: 4，7,13,16,21,24-六氧 杂-l，10-二氮杂二环[8.8.8]二十六烷)的洗脱液从Sep-Pak柱上洗脱下来并转移至 反应容器。加入等份乙腈并在每次加入后将反应混合物蒸发至干(3次每次 80pL)。蒸发在氮气流和真空下于95。C进行。
制备并配制["F]DPA-714。将甲苯磺酸酯前体(7)溶于3 mL乙腈并加入无 水["F]-kryptofix-K222配合物。使混合物在85'C反应5分钟。反应完成后用注 射水Waters for Injections BP (WFI BP)稀释反应混合物并通过tC-18 Sep-Pak柱。 反应容器用WFI冲洗后再次通过tC18 Sep-Pak柱。tC18捕获的放射性标记的 产物再用WFI(总共40mL)冲洗三次。然后用EtOH (2mL)和WFI (3mL)将产物 从tC18 Sep-Pak柱上洗脱下来。使所得溶液通过0.22 Millipore CATHIVEX 无热原无菌滤膜以除去颗粒物质，然后进行HPLC纯化。将粗制混合物注射到 HPLC Waters XTerra RP C-18 10pm (7.8 x 300 mm)半制备型反相柱上。采用的 流动相为0.1 MNH4Ac: CH3CN(pH=10): (60/40， v:v)，流速为4.0毫升/分钟， [18F]DPA-714的保留时间(tR)为12.42分钟。收集对应于["F]DPA-714的放射性 组分并真空蒸发。残余物在WFI BP (4 mL)中重建并通过无菌13 mm Millipore GV0.22pm滤膜过滤入无菌无热原的真空瓶内。如此得到["F]DPA-714，产率 为10%(n=6)无衰变校正放射性化学物质。DPA-714的质控。为测定比放射活性和放射化学纯度，将已知体积和 放射活性的等份最终溶液注射到分析型反相HPLC柱(Waters XTerra C18 5pm (4.6 x 150 mm)。洗脱用的流动相为0.1 MNH4Ac: CH3CN (pH,: (50:50; v:v)，流速为2.0毫升/分钟，[18"0 八-714的保留时间(110为2.23分钟。在对应 于载体产物的254 nm下测量(积分)HPLC色谱图上UV吸收峰的面积，并与将 质量与UV吸收进行关联的标准曲线进行比较。放射化学和化学纯度大于98W， 比活为1680GBq/pmo1。实施例2 DPA-714的体外结合亲和力
为进行结合研究，线粒体按之前的描述(TrapaniG， FrancoM， RicciardiL 等，Synthesis and binding affinity of 2-phenylimidazo[l,2-alpha]pyrimidin derivatives for both central and peripheral benzodiazepine receptor. A new series of high-affinity and selective ligands for the peripheral type(新系歹U的夕卜周类型的高 亲和力和选择性配体一中央和外周苯二氮卓受体的2-苯基咪唑并[l，2-a]嘧啶衍 生物的合成和结合亲和力)./owma/ C/zem^fry. 1997; 40:3109-3118
以及CampianiG， NacciV， Fiorinil等，Synthesis, Biological Activity, and SAR of Pyrrolo benzoxazepine Derivatives ， a New Class of Specific "Peripheral-Type" Benzodiazepine Receptor Ligands (新的一类特异性"外周型"苯二氮卓受体配体 一吡唑并苯并噁氮卓衍生物的合成、生物活性和SAR). Jow加/ 0 em/^y. 1996; 39:3435-3450)经细微改进从经颈脱臼处死的雄性Wistar大鼠 的肾脏制备。在玻璃匀浆器内用特氟隆研体将肾脏匀浆在含有蛋白酶抑制剂 (160吗/mL节脒，200(xg/mL杆菌肽(bacitracine)和20 (xg/mL大豆胰蛋白酶 抑制剂)的20倍体积的冰冷的50 mM Tris/HCl， pH 7.4， 0.32 M蔗糖和1 mM EDTA(缓冲液A)中，并在4t:下600g离心10分钟。所得悬浮液在4t:下10,000g 离心10分钟。然后将沉淀重悬于20倍体积冰冷的缓冲液A中，并在4t;下 10,000g离心10分钟。粗制的线粒体沉淀在-20。C冷冻直至测定或与0.6 nM 卩H]PK11195—起在50mMTris/HCl， pH 7.4 (缓冲液B)中培育，待测化合物的 浓度范围为0.1nM-10pM，总体积为0.5mL，在4'C下培育90分钟。用冰冷 的缓冲液B稀释至5 mL以终止培育，然后立即通过玻璃纤维Whatman GF/C 滤器快速过滤。滤器然后用缓冲液B洗涤(2 5mL)，并通过功效设定为66%的 Packard 1600 TR液体闪烁计数器测定滤器上保留的放射活性的量。在存在未标 记的1 pMPK 11195时分别评估各种情况下的非特异性结合。测定ICso值并根 据Cheng和Prusoff的方程(Cheng Y-C， Prusoff WH. Relationship between the inhibition constant (KI) and the concentration of inhibitor which causes 50 per cent inhibition (150) of an enzymatic reaction(抑制常数(KI)和能够抑制50%酶反应的 抑制剂浓度(I50)之间的关系).5/oc/ eAm'cfl/P/zamzflco/ogy. 1973; 22:3099-3108) 推测得到Ki值。通过Lowry等(LcwxyOH， RosebroughNJ, FairAL， Randall
24RJ. Protein measurement with the folin phenol reagent(用福林酚试齐U领!j量蛋白质) /owm"/o/5/o/og/ca/C/^m/W7. 1951; 193:265-275)的方法估算蛋白质浓度，以 牛血清作为标准品。
采用[SH]PK11195作为放射性配体并以大鼠肾柱子作为受体来源通过膜结 合实验评价DPA-714对TSPO的亲和力。为确保DPA-714的选择性，用^H]Ro 15-1788和大鼠脑组织来评价其与CBR的结合。结果示于表1。如表1所示， 在相同试验中，DPA-714的亲和力(Ki = 7.0 nM)不如DPA-713的(Ki = 4.7 nM) 高，但高于PK 11195的(IQ = 9.3 nM)。所有三种TSPO配体，DPA-714、 DPA-713 和PK 11195对CBR的亲和力可忽略。
表1.配体对TSPO和CBR的亲和力，采用[3H]PK 11195和卩H]Ro 15-1788 作为放射性配体，并分别以大鼠肾包膜和大鼠脑组织作为受体来源。各配体的 LogD值通过HPLC测定c
配体A (nM) TSPO(nM) CBRLogD
DPA-7147.0> 10,0002.44
DPA-7134.7〉10,0002.44
PK 111959.3> 10,0003.35
实施例3刺激神经类固醇产生
在该实施例中，采用充分开发的类固醇生成试验(Selleri S， Bruni F， Costagli C等，"2-芳基吡唑射l,5-a]嘧啶-3-基乙酰胺—新的有效的选择性外周苯二氮卓 受体配体".MeWc/"fl/ Ozem/Wo;. 2001; 9:2661-2671)评价了 DPA-714提高孕烯醇酮合成的能力。
孕烯醇酮试验的结果(示于图l)证实，DPA-714刺激类固醇产生的功效显 著高于DPA-713和广泛使用的PBR配体PK11195和Ro5-4864。
细胞培养
大鼠胶质瘤C6细胞在添加有10%FBS, 2mML-谷氨酰胺，100单位/mL 青霉素和100 pg/mL链霉素的Dulbecco改进的Eagle培养基中培养。培养在 37°C、 5%(:02/95%空气的潮湿气氛下进行。
类固醇生物合成试验
25将C6细胞以约1 x 106细胞/孔的密度接种于24孔板，终体积为1 ml。测 量孕烯醇酮产量之前细胞用由140mMNaCl、 5mMKCl、 1.8mMCaCl2、 1 mM MgS04、 10mM葡萄糖、10 mM HEPES/NaOH， pH7.4，加0,P/。BSA构成的
单盐培养基洗涤三次。试验期间，将细胞与该单盐培养基一起在37t;空气培养
箱中孵育。为测量分泌到培养基中的孕烯醇酮，在单盐培养基中加入曲洛司坦
(25 pM)和SU 10603 (10 ^M)(分别为3|3-羟基类固醇脱氢酶和17a-羟化酶的抑 制剂)以阻断其进一步代谢，如之前所述(Campiani B， Nacci V， Fiorinil等， 新的一类特异性"外周型"苯二氮卓受体配体一吡唑并苯并噁氮卓衍生物的合 成、生物活性和SAR， ^wma/o/Mecfc/wa/C/^w/Wo/ 1996; 39:3435-3450)。在 C6细胞中加入新化合物以及加入PK 11195、 Ro 5-4864或氯硝西泮能将单盐培 养基彻底改变成含有适当浓度(40 ^M)化合物的培养基。每次实验期间所有孔 的乙醇终浓度是恒定的且不超过0.5% (v/v)，浓度本身对于类固醇产生没有影 响。在培育期(2h)结束时，保留细胞培养基并1500g离心10分钟。分泌到培养 基中的孕烯醇酮的量通过放射免疫测定(RIA)定量测定，测定采用获自美国加 州ICN生物化学公司(ICN Biochemical Inc.， CA， USA)的抗体在供应商推荐的 条件下进行。按照之前描述的方法(Lowry OH, Rosenbrough NJ， Farr AL， Randall RJ.用福林酚试剂测量蛋白质.J5fo/CAem. 1951; 193; 265-275)测定细胞蛋白 质浓度。
结果示于图1。如图1所示，DPA-714刺激孕烯醇酮合成水平高出基线80^， 明显比PK 11195和Ro 5-4864有效。在相同试验中，DPA-713显示对于类固醇 产生没有影响。
实施例4离体["F]DPA-714的啮齿动物研究
离体实验采用重300-320g的成年雄性Wistar大鼠(Janvier ， Le Genest-St-Isle，法国)。所有过程按照关于实验室动物护理的欧洲社团委员会指 令86/609/EEC(European Community Council Directive 86/609/EEC)进行。动物 在12小时昼/夜循环条件下养殖(温度22.4 ± 0.5°C;湿度40.3 ± 7.2%)并可随意
获得水和食物。
喹诺酮酸(QA， Quinolonicacid)损伤大鼠用异氟烷(4%， 500 mL/分钟)局
26部麻醉，置于立体定位装置(Stoelting， Phymep，巴黎，法国)上并在手术期间
维持2。/。异氟烷注射(500 mL/分钟)。暴露头骨并用牙钻钻出小孔。按以下坐标
在动物右侧纹状体单侧注射离开前囟A， 0.7; L， -3; P， -5.5 mm(Paxinos
和Watson， 1986)。插入套管(25号，Hamilton, Massy，法国)并以0.5 ^L/分钟
的流速输注QA溶液(300 nmol，用2pL磷酸盐缓冲液，pH 7.4配制)。将注射
器保留在位4分钟，然后抽出以免QA倒流。在头骨中填入蜡，然后缝合头皮。 生物分布研究用QA损伤一侧纹状体6天后用["F]DPA-714进行离体生
物分布研究。通过阴茎静脉给大鼠注射含20-37MBq [18F]DPA-714的水和EtOH
的混合物(85/15)，或者预注射PK 11195 (n = 5， 5mg/kg)、DPA-714 (n = 2， 1 mg/kg)
或DPA-713(n-2; 1 mg/kg)， 15分钟后再注射放射性配体。仅注射放射性配
体(['SF]DPA-714)而未预注射的大鼠作为对照组(n = 6)。注射["F]DPA-714后
60分钟处死动物。将外周组织样品，即血液、肌肉、骨骼、肝脏、心脏、肾上
腺和一些脑部区域(小脑，右和左纹状体，右和左额皮质，右和左海马)除去，
称重并用(acompleterDenis)测量它们的放射活性。对于外周组织，结果表示为
(%ID/g组织)/(Q/oID/g血液)之比± SEM。对于脑，结果表示为(。/。ID/g大脑区
域)/(o/。ID/g小脑)之比士SEM。当数据数》5时进行斯氏t检测。当pO.05时
被认为有统计学显著性。
结果
外周生物分布图2显示了["F]DPA-714分别在四个QA损伤大鼠组；对 照组(仅注射放射性配体)和三个预处理组(PK 11195、DPA-713和DPA-714)中的 外周分布。对照组的结果显示，["F]DPA-714最多积聚在肾上腺(71.62土 35.06) 和心脏(59.26 ± 29.06)，而在骨骼(6.30 ± 0.97)、肝脏(3.36 ± 0.16)和肌肉(2.11 ± 1.13)中的积聚最少。用PK 11195 (5 mg/kg)预处理的大鼠显著抑制心脏、骨骼 和肝脏摄取放射性配体，但不抑制肾上腺和肌肉摄取。相反，用DPA-714 (1 mg/kg)或DPA-713 (1 mg/kg)预处理能阻断["F]DPA-714在所有外周组织内积 聚。
大脑生物分布图3显示了四个QA损伤大鼠组中每一组的["F]DPA-714 的大脑分布。对照组的结果证实，与它们对应的未损伤侧相比，右(损伤)侧纹状体(4.81 ± 0.47对比0.61 ± 0.14;pO.05)和额皮质(1.92 ± 0.86对比0.68 ±0.13， pO.05)摄入的["F]DPA-714在统计学上显著升高。而在海马中未观察到这一现 象(0.74 ± 0.13对比0.77 ±0.29)。在右纹状体和额皮质中，预注射PK 11195能 显著降低["F]DPA-714的积聚(分别为1.90 ± 0.59和1.18 ±0.16， p<0.05)。预注 射DPA-714 (分别为2.00 ± 0.23和1,28 ± 0.17)或DPA-713 (分别为1.08 ± 0.08 和1.06±0.05)之后在这些相同区域同样看到了可见的降低。有趣的是，与对照 相比，在PK 11195预处理组中，在左纹状体(1.25 ± 0.48)、左额皮质(0.99 ± 0.04)、 右海马(1.19 ± 0.14)和左海马(1.09 ± 0.10)内积聚的["F]DPA-714增加。预注射 DPA-714和DPA-713之后也观察到类似趋势。
实施例5体内["F]DPA-714狒狒PET研究
选择13岁、23.1 kg的正常雄性toma*_yay狒狒进行PET扫描。按 照全国卫生与医学研究委员会(NHMRC)有关供科学研究使用的非人灵长类动 物的护理和使用实践规范抚养和处理狒狒。项目申请获得悉尼西南部健康服务 (SSWAHS)动物伦理学委员会批准。注射的放射性配体的剂量为100 MBq [18F]DPA-714。
在澳大利亚皇家阿尔佛雷德王子医院(Royal Prince Alfred Hospital)的PET 和核医学科利用西门子Biograph LSO PET-CT扫描仪获得所有PET数据。该双 模态装置在同一扫描架内装备了具有24个晶体环(crystal ring)的全-3D PET扫 描仪和双层CT扫描仪。它在视野中央产生6.3 mm半高宽(FWHM)的重建PET 空间分辨率。先用氯胺酮(8mg/kg， /m)麻醉狒狒。以0，2mg氯胺酮/kg/分的剂 量速率静脉内(AO输注含氯胺酮(帕内尔实验室(ParnellLaboratory),澳大利亚) 盐水以维持麻醉。半小时后狒狒还接受了 MgS04 (2 mL /v) +阿托品(l mg /m) + maxalon(5mg/m)。用塑料带将狒狒的头固定以使运动伪影最小。先进行头部 的CT扫描，完成后再注射放射性配体。以列表模式(list mode)采集PET数 据，之后立即注射放射性配体并持续60分钟。阻断研究包括在注射放射性配 体5分钟前用PK 11195 (1.5 mg/kg)进行预处理，而替代研究包括在注射 [18F]DPA-714后20分钟给予冷的DPA-714 (1 mg/kg)。在总结各研究时，将列 表模式(listmode)数据按动态扫描分类，包括54层面(20x30s， 30x60s禾口4 x 300 s)。动态3-D PET正弦图用Fourier Rebinning (FORE)重新划分(rebinned) 并重建，重建采用过滤的反投影和基于CT数据的光子衰减校正，并分散到47 个轴向层中，各层包含128 x 128体素。重建体素的尺寸为0.206 x 0.206 x 0.337 cm。以注射剂量百分数/脑组织体积(M剂量/mL)作为单位将放射性配体摄取进 行转换并对时间作图。用自动3D配准算法配准两种重建的扫描，然后定义 ROI(Eberl S， Ka皿o I， Fulton RR， Ryan A， Hutton BF， Fulham MJ. 1996. Automated interstudy image registration technique for SPECT and PET(SPECT禾口 PET的自动交互研究图像配准技术).JA^c/Med37(1): 137-145)。
从选出的丘脑、小脑、纹状体、皮层、颅骨和全脑的兴趣区层面构建代表 配体浓度改变与时间关系的延迟校正时间活性曲线。列表模式(list mode)采 集之后进行全身PET-CT扫描，在六个床位中的每一个上进行2分钟，以测定 摄取放射性配体的其他部位。
结果
进行基线研究，其中动态PET脑成像开始于i.v.给予["F]DPA-714 (100 MBq，用2ml盐水配制，比活性为270 GBq4imol)之前数分钟时并结束于注射 后60分钟时。然后进行全身采集，在六个床位中的每一个上采集2分钟。在 基线研究中获得的这种轴向脑切片PET全图证实，[18F]DPA-714能够透过血脑 屏障并在脑中可观地积聚。未观察到狒狒颅骨内有积聚。
为测定["F]DPA-714结合的特异性进行了阻断研究，其中包括用TSPO配 体PK11195 (1.5 mg/kg)进行预处理。该研究中获得的轴向脑层面的PET全图证 实，PK11195能有效阻断脑摄取["F]DPA-714。最后进行替代研究以评价放射 性配体结合的可逆性，该研究在注射["F]DPA-714后20分钟给予冷的DPA-714 (1 mg/kg)。
图4显示了描绘三种PET研究(基线研究、阻断研究和替代研究)中狒狒全 脑中["F]DPA-714的摄取的时间活性曲线(TAC)。在基线研究中，[18F]DPA-714 在10分钟内达到最大摄取并在随后的50分钟内维持大致相同的摄取水平。替 代研究在最初的20分钟内似乎类似于基线研究，然后，在注射冷的DPA-714 之后，曲线升高形成尖峰，然后放射性配体被完全清除。相反，用TSPO特异 性配体PK 11195预处理导致["F]DPA-714摄取先升高，然后迅速降至清除水平，与替代研究结果相同。
脑成像后还立即获得了全身图像，以研究摄取放射性配体的其他部位。这
些图像证实在心脏、肾上腺和唾液腺中["F]DPA-714高摄取。给予放射性配体 20分钟后注射冷的DPA-714导致这些外周区域内的["F]DPA-714结合被完全 替代(数据未显示)。
实施例6 ["F]DPA-714作为TSPO的PET示踪剂在HSV脑炎大鼠模型 中与[HC]PK11195的比较
包括帕金森病和单纯性疱疹性脑炎(HSE)在内的许多神经疾病与神经炎症 有关。外周苯二氮卓受体(PBR)的表达在神经炎症期间升高并可用[UC]PK11195 通过正电子发射体层摄影(PET)观测。然而，[UC]PK11195显示出低脑摄取和 高非特异性结合，并可能对显示轻微炎症不够灵敏。在该研究中，在HSE大 鼠模型中评价了["F]DPA-714，并在相同模型中与[UC]PK11195进行比较。
实验:使相应的甲苯磺酸酯前体与K"F/kryptofix反应以制备["F]DPA-714。 通过TLC检测["F]DPA-714的稳定性。给雄性Wistar大鼠鼻内接种1型单纯 疱疹病毒(107 PFU，用1001PBS配制)或PBS(对照)。接种后一周内，复制中 的病毒迁移到脑中并导致神经炎症。接种后第6或7天时给大鼠/.v.注射 [18F]DPA-714 (559 MBq)或[H(:]PK11195 (7822 MBq)，并分别进行2小时和1 小时动态PET扫描(MicroPET Focus 220)，然后进行离体生物分布研究。
结果和讨论[18F]DPA-714的放射化学产率为20 ± 5%，比活为10428 MBq/nmo1，放射化学纯度>99%。在体内，[18F]DPA-714缓慢转化成极性更大 的代谢物，注射示踪剂211时含有母体化合物的大鼠血浆的放射活性为78±1%。 [18F] DPA-714的PET图像显示在对照大鼠(11=3)中有低示踪剂摄取，该值明显 低于lh时的[UC]PK11195摄取(11=5)( =0.01)，且示踪剂从脑中缓慢廓清 (T1/2>100分钟)。HSE大鼠中积聚HSV-1的嗅区和的逆行脑区域的["F]DPA-714 摄取升高(90-150%)。在这些区域当中，[UC]PK11195摄取未显著升高。
结论这些结果证实，["F]DPA-714是一种有效的显示神经炎症的示踪剂， 并且由于炎症和非炎症区域更好的反差，它比[HC]PK11195更加灵敏。实施例7 DPA-714的毒性研究
在该研究中，通过静脉途径给大鼠施用一次DPA-714之后评价了它的潜在 毒性。
该研究包括2组共20只SPF Sprague-Dawley大鼠(每组5只雄性和5只雌 性大鼠)，7周龄，随机分组当天雄性大鼠重量在193.1 g和215 g之间，雌性 大鼠重量在160.6 g和180.1 g之间。动物购自法国查尔斯河实验室(Charles River Laboratories France)(Domaine des Oncins - 69592 L'Arbresle Cedex，法国)。
各组如下
组l:给予载体(即0.9。/。NaCl/乙醇(9/1， (v/v))。
组2:给予5 mL/kg DPA-714
将1/10稀释于载体(即0.9。/。NaCl/乙醇9/1， (v/v))的待测DPA-714或者载 体用0.2 pm滤膜过滤，然后通过静脉内途径在约30秒内以团注形式给予动物， 给药体积为5 mL/kg。
在随机分组当天、D7、 D14和D15(尸检当天)对动物称重。
在D1进行常规观测，给药后60分钟± 30分钟进行，再在给药后3-4小 时观测一次，然后每天一次持续14天。还在D1评价功能和神经行为，给药后 60分钟±30分钟进行，然后在D7和D14进行。每天记录两次死亡率，持续 14天。对14天后存活的所有动物通过肉眼进行尸检。
在采取的实验条件下，给予载体(即0.9。/。NaCl/乙醇9/1， v/v))的动物未显 示任何明显征兆且体重增加正常。尸检时未检测到载体对器官造成任何异常影 响。
1/10稀释于载体(即终浓度为0.05 mg/mL)并以5 mL/kg通过静脉内途径施 用的DPA-714未导致死亡。观察到与对照组相比，对于雄性和雌性大鼠的体重 增加没有影响。在以5 mL/kg通过静脉内给予1/10稀释于载体DPA-714的动 物中未观察到有关临床征兆。尸检时未观察到肉眼损伤。
在采取的实验条件下，以5 mL/kg给Sprague-Dawley大鼠静脉注射一次的 DPA-714 (批号140306)未导致任何中毒迹象。
因此，DPA-714(批号140306)当通过静脉内途径给予时，其在雄性和雌性 Sprague-Dawley大鼠中的LD5o高于5 mL/kg。解释
采用大鼠肾膜和卩H]PK 11195进行的体外结合研究(实施例2)证实，
DPA-714以高亲和力特异性结合TSPO。在正常和损伤大鼠内采用microPET 进行的生物分布研究(实施例4)显示，[18F]DPA-714在检测TSPO表达改变区域 时是一种高度灵敏且精确的放射性配体。这些大鼠研究还证实，[18F]DPA-714 在体内具有良好的动力学和稳定性。
正常狒狒脑的PET成像(实施例5)再次证实了在大鼠研究中观察到的结 果。实施例5的结果显示，["F]DPA-714特异性并选择性结合TSPO，且在TSPO 结合时未显示物种依赖性。
DPA-714的一个新特征是其在孕烯醇酮类固醇生成试验中显著的功能活 性(实施例3)。实际上，DPA-714在刺激神经类固醇合成时的活性是最广泛使 用的TSPO配体PK 11195在相同实验中的两倍。
此外，与PK 11195(K,-9.3nM)相比，DPA-714具有较高的结合亲和力(K, =7.0 nM)(实施例2)。 DPA-714的这种较高的结合亲和力以及良好的体内动力 学和较低亲油性意味着["F]DPA-714能够更好地标记TSPO。
因此，["F]DPA-714能够被用作小胶质细胞活化的精确体内标记物。更具 体地说，[18F]DPA-714可与PET —起使用以检测许多神经变性疾病的最初神经 病理学事件。这种放射性配体也可被用作研究疾病进展和治疗功效的工具。可 将["F]DPA-714用作研究疾病进展和治疗功效的工具的疾病种类包括阿尔茨 海默病(AD)、帕金森病(PD)、亨廷顿病、多发性硬化(MS)、多系统萎縮症(MSA)、 癫痫、脑病、中风和脑瘤。["F]DPA-714的高特异性结合和高选择性以及其良 好的体内动力学使其适合这种应用。
本领域技术人员将了解，除了那些具体描述之外，易对这里描述的发明进 行变化和修改。所有这种变化和修改都被认为包含在本发明范围之内，其特征 可从上面的描述中得出。
在随后的权利要求书和之前的发明描述中，除非由于表达方式或必要暗示 的原因在文中另有说明，词语"包含"或其变化形式如"包括"或"含有"以 开放式含义使用，即表示存在所列举的特征但不排除存在或加入本发明各种实 施方式中的其他特征。
3权利要求
1. 一种用选自18F、123I、76Br、124I或75Br的放射性同位素放射性标记的式(I)的化合物，或其盐式中R是H、卤素、任选被卤素取代的烷基、或任选被卤素取代的烷氧基；R1、R2和R3各自独立为H或疏水性基团；和R4和R5各自独立为任选被卤素取代的烷基、或任选被卤素取代的烷氧基。
2. 如权利要求1所述的放射性标记的化合物或其盐，其特征在于，在式(I)中，R是任选被卤素取代的CL6垸基或任选被卤素取代的CL6垸氧基。
3. 如权利要求1或2所述的放射性标记的化合物或其盐，其特征在于，在式(I)中，R。 R2和R3各自独立选自氢；任选被卤素取代的Cw烷基；任 选被卤素取代的芳基;任选被卤素取代的NHCL6垸基;任选被卤素取代的Od.6 烷基；任选被卤素取代的SQv烷基；COOR6，其中&是任选被卤素取代的 Cw烷基；(CH2)nOR6，其中R6是任选被卤素取代的CL6烷基，n是整数；以及任选被卤素取代的聚醚。
4. 如权利要求1-3中任一项所述的放射性标记的化合物或其盐，其特征在于，在式(I)中，R4和R5各自独立选自任选被卤素取代的Cu6垸基或任选被卤素取代的Cw烷氧基。
5. —种药物组合物，其包含如权利要求1-4中任一项所述的放射性标记的 化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
6. —种使对象体内的转运蛋白(18 kDa) (TSPO)成像的方法，所述方法包括 给予该对象如权利要求l所定义的用选自18F、 123I、 76Br、 124I或75Br的放射性 同位素放射性标记的式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，并获得放射性同 位素在对象体内的定位图。
7. 如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述式(I)的化合物用18F、 76Br、 "I或"Br放射性标记，且所述图像通过正电子发射体层摄影(PET)成像而获得。
8. 如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述式(I)的化合物用1231放射 性标记，且所述图像是通过SPECT成像获得的。
9. 一种诊断对象的神经变性疾病的方法，该方法包括给予该对象如权利要 求l所定义的用选自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同位素放射性标记的 式(I)的化合物，或其药学上可接受的盐，并获得放射性同位素在对象体内的定 位图以评价对象脑实质中该化合物或其盐的TSPO结合程度。
10. 如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述神经变性疾病是阿尔茨 海默病、帕金森病、亨廷顿病、多发性硬化、多系统萎縮症、癫痫、脑病、中 风或脑瘤。
11. 如权利要求6-9中任一项所述的方法，其特征在于，所述对象是人。
12. 如权利要求l所定义的用选自18F、 123I、 76Br、 ^I或"Br的放射性同 位素放射性标记的式(I)的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于对象体内 转运蛋白(18kDa)成像的药物中的应用。
13. —种式(II)的化合物，或其盐<formula>formula see original document page 3</formula>式中:R是任选被卤素取代的垸基，或任选被卤素取代的垸氧基； R。 R2和R3各自独立为H或疏水性基团；和R4和R5各自独立为任选被卤素取代的垸基、或任选被卤素取代的垸氧基，和其中，R、 R,、 R2、 R3、 R4或R5中的至少一个被F取代。
14. 如权利要求13所述的化合物，或其盐，其中，R是OCH2CH2F。
15. —种药物组合物，其包含权利要求13或14所述的化合物或其药学上 可接受的盐以及药学上可接受的载体。
16. —种治疗对象的神经变性疾病、炎症或焦虑症的方法，所述方法包括 给予该对象治疗有效量的如权利要求13或14所述的化合物或其药学上可接受 的盐。
17. 如权利要求16所述的方法，其特征在于，所述对象是人。
18. 如权利要求13所定义的式(II)的化合物或其药学上可接受的盐在制备 用于治疗神经变性疾病、炎症或焦虑症的药物中的应用。
全文摘要
本发明提供了用¹⁸F、¹²³I、⁷⁶Br、¹²⁴I或⁷⁵Br放射性标记的式(I)的化合物及其盐，以及使对象体内的转运蛋白(18kDa)(TSPO)成像的方法，该方法包括给予用¹⁸F、¹²³I、⁷⁶Br、¹²⁴I或⁷⁵Br放射性标记的式(I)的化合物及其药学上可接受的盐。本发明还提供了氟-取代的式(II)的化合物及其盐，以及治疗对象的神经变性疾病、炎症或焦虑症的方法，该方法包括给予式(II)的化合物或其药学上可接受的盐。
文档编号C07D487/04GK101448834SQ200780018195
公开日2009年6月3日 申请日期2007年5月4日 优先权日2006年5月19日
发明者M·L·詹姆斯, M·卡西奥 申请人:悉尼大学