专利名称：：模拟移动床色谱拆分20(S)和20(R)-人参皂苷Rg3对映体的利记博彩app
技术领域：
：本发明涉及受性药物的拆分技术，特别地，涉及拆分20(S)-和20(R)-人参皂苷Rg3对映体的模拟移动床色谱分离方法。技术背景20(S)-人参皂苷Rg3其化学名称分别为3-0-[e-D-吡喃葡萄糖基-(1-2)-e-D-吡喃葡萄糖基]-达玛-24-烯-,12e，20(S)-三醇。20(R)-人参皂苷Rg3化学名称分别为3-0-[e-D-吡喃葡萄糖基-(1-2)-e-D-吡喃葡萄糖基]-达玛-24-烯-30，12e，20(R)-三醇。二者为对映体，生物活性实验表明均具有较强的抗癌活性，其中20(R)-人参皂苷Rg3已经开发上市，药品名称为"参一胶囊"，由吉林亚泰医药股份有限公司生产。20(R)-人参皂苷Rg3抗癌机理主要是抑制肿瘤新生血管生成和抑制肿瘤细胞的黏附作用，深受广大患者的青睐。而20(S)-人参皂苷Rg3也正在进行II期临床研究阶段，而且发现其具有抗病毒活性。因此拆分二者是十分有意义的。鞍山科技大学专利卡波前列素甲酯模拟移动床色谱分离方法。申请号:00110348.2本发明公开了一种卡波前列素甲酯的模拟移动床色谱分离方法，解决了批处理方法存在的溶媒、填料消耗量大、纯度受到限制等问题。而且改善了操作环境，提高了生产自动化水平。本发明的特征是采用模拟移动床色谱系统，填料为反相硅胶，以甲醇、水的混合液为流动相。原料经去杂预处理，进入模拟移动床色谱系统。模拟移动床色谱系统出来的产品经过浓縮、重结晶等处理得到纯度为90%以上的合格产品。鞍山科技大学专利用模拟移动床色谱分离提取替考拉宁的方法。申请号02132707.3，本发明采用模拟移动床色谱(简称SMBC)系统，取代现有的活性炭法精提方法。本发明与目前精提替考拉宁的活性炭法比较，效价由原来的829提高到900以上，纯度由95%提高到97%，收率由35%提高到70%。另外模拟移动床过程是连续过程，活性炭方法是间歇的，因此模拟移动床技术的引入提高了生产的自动化水平，生产效率，并使生产环境得到极大的改善。目前未见到有关模拟移动床色谱拆分20(S)和20(R)-人参皂苷Rg3对映体的报道，属首次发现。
发明内容本发明的目的在于提供一种利用模拟移动床色谱拆分20(S)和20(R)-人参皂苷Rg3对映体的技术方法。本发明为实现上述发明目的采用的技术方案如下一种人参皂苷Rg3对映体的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于，用含有十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂作固定相，用甲醇和水的混合物作流动相，用模拟移动床色谱系统将20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3的混合物分开。进一步地，包括以下步骤(1)将20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3的混合物溶于流动相，浓度为lmg/mL200mg/mL。(2)从模拟移动床色谱系统中分出20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3溶液。(3)分别浓縮、重结晶、过滤、干燥得到纯度高于90%的20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3。本发明的有益效果本发明用模拟移动床色谱，将20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3对映体分开，纯度达到90%以上。工艺简单，生产可工业化，产品稳定。流动相可回收，降低成本、减少污染，真正实现了清洁生产。具体实施方式本发明可通过下面的实验例进一步说明。1.采用模拟移动床色谱(简称SMBC)系统，该系统是众所周至的。样品溶液和洗脱液分别从样品入口与洗脱液入口注入色谱系统，20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3对映体分别从萃余液和萃取液两个出口流出系统，操作温度206(TC。最佳的操作温度为25"C。2.色谱柱填料以及流动相选择填料为十八烷基硅烷键合硅胶，采用公知的方法制备，填料粒经2060um，粒经越小，分离效果越好。最佳粒经为4045Pm。流动相为甲醇和水，体积比为3070:7030。最佳体积比为83:17。3.分离步骤20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3混合物溶于流动相，浓度为lmg/mL200mg/mL。进样浓度增加有利于提高产率，但其浓度受人参皂苷Rg3溶解度的限制。色谱系统由424根制备柱组成，柱子越多，分离效果越好，但系统的非线性成度越高，最佳柱子数目为48个。样品溶液和洗脱液分别从样品入口与洗脱液入口注入色谱系统，经过SMBC分离，从萃取液出口可获得高纯度的20(R)-人参皂苷Rg3溶液，从萃余液出口则获得得高纯度的20(S)-人参皂苷Rg3溶液。分别经浓縮、重结晶、过滤、干燥等得到20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3纯品。4.纯品检验流动相甲醇水(83:17)流速lml/min色谱柱4.6X250mm，5um，C18填料检测器SPD-10AVP(日本)紫外检测器检测波长为203nm下面结合实施例进一步说明本发明1.流动相的选择流动相中，甲醇和水的含量对分离20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3影响很大，进而影响模拟移动床色谱的分离效果。首先用分析色谱柱(4.6X250mm)选择流动相。如表1，20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3分离度随着甲醇含量的减少而增加，但是保留时间明显增加，同时系统的柱压也明显增加。表1流动相的选择<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>2.SMBC分离以下列出两个分离实例。分离实例1a.操作条件运行模式1-4-3(8个色谱柱)流动相甲醇/水(70/30)进样浓度人参皂苷Rg3混合物浓度20mg/ml进样液流速UF=4ml/min洗脱液流速UE二40ml/min萃余液流速20ml/min萃取液流速24ml/min切换时间350S柱温20°Cb.成品分析用十八烷基硅垸键合硅胶柱分析萃余液和萃取液组成。萃余液中20(R)-人参皂苷Rg3纯度为92.5%;萃取液中20(S)-人参皂苷Rg3纯度为90.3%。分离实例2c.操作条件运行模式1-4-3(8个色谱柱)流动相甲醇/水(30/70)进样浓度人参皂苷Rg3混合物浓度10mg/ml进样液流速Ue5ml/min洗脱液流速UE=50ml/min萃余液流速30ml/min萃取液流速25ml/min切换时间360S柱温60°Cd.成品分析用十八烷基硅烷键合硅胶柱分析萃余液和萃取液组成。萃余液中20(R)-人参皂苷Rg3纯度为93.5%;萃取液中20(S)-人参皂苷Rg3纯度为91.8%。分离实例3e.操作条件运行模式1-4-3(8个色谱柱)流动相甲醇/水(50/50)进样浓度人参皂苷Rg3混合物浓度15mg/ml进样液流速UF=6ml/min洗脱液流速UE=49ml/min萃余液流速30mlZmin萃取液流速25ml/min切换时间360S柱温4CTCf.成品分析用十八烷基硅烷键合硅胶柱分析萃余液和萃取液组成。萃余液中20(R)-人参皂苷Rg3纯度为92.5%;萃取液中20(S)-人参皂苷Rg3纯度为93.8%。权利要求1.一种人参皂苷Rg3对映体的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于，用含有十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂作固定相，用甲醇和水的混合物作流动相，用模拟移动床色谱系统将20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3的混合物分开。2.根据权利要求1的所述的人参皂苷Rg3对映体的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于，包括以下步骤(1)将20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3的混合物溶于流动相，浓度为lmg/mL200mg/mL。(2)从模拟移动床色谱系统中分出20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3溶液。(3)分别浓縮、重结晶、过滤、干燥得到纯度高于90%的20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3。3.根据权利要求1的所述的人参皂苷Rg3对映体的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于，所述流动项中甲醇和水的体积比为3070:7030。4.根据权利要求1的所述的人参皂苷Rg3对映体的模拟移动床色谱分离方法，其特征在于，所述模拟移动床色谱系统的温度为206(TC。最佳的操作温度为25°C。全文摘要本发明公开了一种人参皂苷Rg3对映体的模拟移动床色谱分离方法，本发明采用模拟移动床色谱系统，采用含十八烷基硅烷键合硅胶(C18)固定相，流动相采用甲醇、水的混合物，从20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3的混合物中分离出高纯度的20(R)-人参皂苷Rg3和20(S)-人参皂苷Rg3。由于模拟移动床色谱分离为连续过程，因此本方法的生产自动化程度高，生产效率高，溶剂可以回收利用，整个分离过程不接触有毒溶剂。文档编号C07B57/00GK101230080SQ200710055249公开日2008年7月30日申请日期2007年1月22日优先权日2007年1月22日发明者刘金平,丹卢,卢爱萍,李平亚,杜秀娟申请人:李平亚