专利名称：含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物及其合成的利记博彩app
技术领域：
一种含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物及其合成，涉及有机硒和一种核苷类物质，具体是含硒的替加氟的硫代磷酸酯衍生物。
背景技术：
磷脂具有广泛的生理活性，大量的磷脂已被合成并证明具有良好的抗癌活性，同时它又是药物的有效载体，对肿瘤组织具有一定的靶向作用；核苷及其类似物在临床上广泛用作抗肿瘤和抗病毒药物；硒是人体必须微量元素，它具有非常明显的防癌、抗癌作用，临床结果表明，有机态硒能极为有效地提高硒的生物利用度及其作为生命必须微量元素的生理功能，且其毒性比无机硒大大降低，其化合物在治疗癌症方面发挥了重大的作用，近几年，将Se引入到药物分子中或合成新的含Se药物是一个研究的热点。但是将硒引人到磷脂核苷缀合物中，除本课题组进行了一些初步的研究外，还未见文献报道。我们设计两种方法将硒引人到磷脂核苷缀合物中，其一是将连有核苷的三价磷硒化，其二是合成核苷的环甘油磷脂缀合物，随后通过有机硒基团对它进行亲核开环。最近，本课题组已经完成了替加氟的硒(硫)代环甘油磷脂缀合物的合成及其硒(硫)酚对它的亲核开环，合成出几类结构新型的替加氟的磷脂衍生物，体外活性实验表明，对人体膀胱癌细胞的抑制效果比原药替加氟好(专利号ZL 02 139741.4；申请号200410046927.5，200410046925.6，200410046926.0)。在此基础上，继续开展新型的含硒核苷磷脂(酯)缀合物的合成与活性研究，对磷脂类新药的创制将会具有一定的指导意义。
发明内容
本发明的目的在于合成新型的含硒的替加氟的硫代磷酯类化合物，以期解决核苷类药物疗效低，毒性大等不足。
实现本发明的技术方案是本发明的化合物是一种如通式所示的含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物 其合成方法为 下面进一步详述本发明合成的含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物的31PNMR(85％H3PO4为外标)用BRUKER AC-P400HE型仪测定，质谱由Agilent 1100 Series测定，熔点是通过毛细管法测定。31PNMR，MS及理化数据见表1。
表1.3a～3c的31P NMR及理化数据
说明测定3a～c比移值Rf所用的流动相是甲醇/三氯甲烷(1∶5)；收率是柱层析后的产率。
用BRUKER AC-P400HE型仪测定测定1H NMR(以TMS为内标)和结果见表2。
表2. 2a～3c核磁共振氢实谱1H NMR如下3a7.193-7.480(m，6H)；6.016(s，1H)；3.933-4.313(m，8H)；3.078(t，2H，3JH-H＝7.2Hz)；1.829-2.436(m，4H).
3b7.255-7.342(m，3H)，7.013-7.082(m，2H)，6.013(s，1H)；3.936-4.319(m，8H)；3.083(t，2H，3JH-H＝7.2Hz)；2.273(s，3H)，1.831-2.438(m，4H).
3c 7.063-7.532(m，5H)；6.012(s，1H)；3.934-4.312(m，8H)；3.079(t，2H，3JH-H＝7.2Hz)；2.301(s，3H)，1.836-2.445(m，4H).
采用国际通用的四氮唑盐(MTT)比色法，体外实验测定了化合物3a～c对人体对膀胱癌细胞T-24和胃癌细胞BGC-823抑制作用及对正常肝上皮细胞L-02毒性作用效果，本试验选用体外连续培养的T-24、BGC-823及L-02细胞株。细胞倍增时间为24～30h.其结果见表3。
表3化合物3a～c对膀胱癌细胞T-24、胃癌细胞BGC-823抑制作用及对正常肝上皮细胞L-02的毒性作用(半数置死量ID50，μg/ml)
从表3可知，化合物3a～c具有良好的抗肿瘤活性，且对正常的肝上皮细胞L-02的毒性作用较少。进一步的活性研究正在进行中。
含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物是一类未见文献报道新化合物。其合成是通过“两步一锅煮”，以无水苯为溶剂，65℃下，以碘粉作催化剂使2-N，N-二乙基氨基-1，3，2-二氧磷杂环戊烷依次与羟烷基替加氟及硫粉反应合成中间体(2)；然后，在室温、无水乙醇中，硼氢化钠还原二芳基二硒醚产生的芳硒化钠对中间体(2)进行亲核开环，高产率的形成含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物。它们的结构通过31P NMR、1H NMR及质谱确证。
具体实施例方式
1、含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物合成1.1含替加氟的1，3，2-二氧磷杂环戊烷(2)的合成在25ml无水苯中依次加入3-羟乙基替加氟732mg(3.0mmol)、2-N，N-二乙基氨基-1，3，2-二氧磷杂环戊烷978mg(6.0mmol)和76mg(0.3mmol)碘粉，氮气保护，油浴65℃搅拌(800转/分钟)24小时，然后加入192mg(6.0mmol)硫粉继续搅拌0.5小时，旋转去掉溶剂，残留物柱层析(乙酸乙脂/石油醚＝1/1)分离得化合物(2)638mg，无色粘稠液体。
2.2含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物合成向50ml的三口瓶中依次加入76mg(2.0mmol)硼氢化钠、10ml无水乙醇、312mg(1.0mmol)二硒醚，室温搅拌约50分钟，直到反应体系变为澄清，用注射器抽取制备好的苯硒酚钠溶液5ml注入366mg(1.0mmol)化合物(2)的无水乙醇(2ml)溶液中，氮气保护，室温搅拌过夜，敞口继续搅拌12小时，减压去掉溶剂后柱层析(甲醇/三氯甲烷＝1/5)得化合物(3a)481mg，白色粉末。
2、抗肿瘤活性测定用含10％新生小牛血清的RPIM 1640培养基(完全培基)将待测细胞培养至对数生长期，用含0.25％胰酶、0.02％EDTA的消化液消化成单个细胞，计数，接种细胞于96孔培养板，每孔5000个细胞，包括5个剂量组，每组6个平行孔，在37℃，100％相对湿度，含5％CO2、95％空气的培养箱中预培养24小时。
差量法称取待测样品30mg，以3mlDMSO溶解，加入二次去离子水至总体积为30ml，即母液浓度为1000ug/ml。
试验组换新的含不同浓度待测样品的培养基10ug/ml取母液0.12ml和11.82ml完全培基加到6个培养板孔中；20ug/ml取母液0.24ml和11.76ml完全培基加到6个培养板孔中；50ug/ml，100ug/ml，200ug/ml以类似的方法配制。对照组则换成12ml完全培基。
细胞在37℃，100％相对湿度，含5％CO2、95％空气的培养箱中连续培养24小时后，每孔加入20ul新配制的含0.2mg/mlMTT的无血清培养液，继续培养4小时。
小心地吸去上层清液，每孔加入100ulDMSO，轻轻振荡使代谢产生的结晶物完全溶解后在570nm波长处用酶标仪测出OD值。
致谢本文工作得到国家自然科学基金(20372020)资助。
权利要求
1.一种含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物，其特征在于该化合物的通式为 Ar＝C6H5，p-CH3C6H4，m-CH3C6H4，
2.一种如权利要求1所述的含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物的合成方法，其特征在于通过“两步一锅煮”，以无水苯为溶剂，65℃下，以碘粉作催化剂使2-N，N-二乙基氨基-1，3，2-二氧磷杂环戊烷依次与羟烷基替加氟及硫粉反应合成中间体(2)；然后，在室温、无水乙醇中，硼氢化钠还原二芳基二硒醚产生的芳硒化钠对中间体(2)进行亲核开环，高产率的形成含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物，反应式为 Ar＝C6H5，p-CH3C6H4，m-CH3C6H全文摘要
含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物及其合成涉有机硒与一种核苷类物质。该化合物的结构如通式所示，化合物的合成，是通过“两步一锅煮”，以无水苯为溶剂，65℃下，以碘粉作催化剂使2－N，N－二乙基氨基－1，3，2－二氧磷杂环戊烷依次与羟烷基替加氟及硫粉反应合成中间体(2)；然后，在室温、无水乙醇中，硼氢化钠还原二芳基二硒醚产生的芳硒化钠对中间体(2)进行亲核开环，高产率的形成含硒的替加氟的硫代磷酸酯类化合物。经抗肿瘤活性测定，本发明化合物对人体膀胱癌细胞、胃癌细胞具有良好的抑制效果，而对肝上皮细胞的显示小的毒性。因此，硒的引入是提高替加氟的磷酯类化合物活性的有效途径之一。
文档编号C07H19/06GK1660873SQ200410047109
公开日2005年8月31日 申请日期2004年12月28日 优先权日2004年12月28日
发明者许新华, 张秋林, 李言杰, 陈雄, 张青丽 申请人:湖南大学