专利名称：一组盐生肉苁蓉苯甲醇苷类化合物的利记博彩app
技术领域：
本发明涉及从肉苁蓉属植物中分离有效成分，特别是涉及从盐生肉苁蓉植物中分离新的苯甲醇苷类化合物。
背景技术：
盐生肉苁蓉C.salsa(C.A.Mey.)G.Beck为列当科Orobanchaceae肉苁蓉属Cistanche多年生寄生草本植物。中药肉苁蓉Herba Cistanches为该属植物干燥带鳞叶的肉质茎，始载于《神农本草经》，列为上品，具有补肾阳、益精血、润肠通便之功效，主治男子阳痿、女子不孕、血枯便秘等症，有“沙漠人参”之美誉。在补肾阳方剂中出现的频率最高。
肉苁蓉属植物主要含有苯乙醇苷、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其苷等成分。其中，苯乙醇苷类化合物为肉苁蓉属植物的主要成分也是主要的活性成分(Sato，T.Kozima，et al.Yakugaku Zasshi，105(12)1131，1985；何伟等.中国中药杂志，21(9)564，1996)。本实验室在研究盐生肉苁蓉的苯乙醇苷类化合物的过程中，发现了一类近似化合物，即苯甲醇苷类化合物。
发明内容
本发明的目的是系统研究肉苁蓉属植物盐生肉苁蓉的化学成分，寻找活性单体化合物。
发明是这样实现的利用多种分离手段，包括硅胶柱层析、大孔吸附树脂、葡聚糖凝较LH-20柱层析和制备型高效液相色谱法等，系统研究上述盐生肉苁蓉的化学成分。从盐生肉苁蓉中分离到20个化合物，其中3个为新的苯甲醇苷类化合物，分别为盐生肉苁蓉苷A、B和C1/C2(Salsaside A，B，C1/C2)。
实施例由于本发明的3个化合物的分离同时进行，因此放入同一个实施例阐述。
1、提取分离盐生肉苁蓉干燥肉质茎8Kg的75％乙醇渗漉液，减压浓缩至浸膏状，以适量H2O混悬，依次以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取。将乙酸乙酯萃取物99g经硅胶(200-300目)柱色谱分离，依次用氯仿至氯仿-甲醇(1∶2)不同比例的溶液梯度洗脱得9个馏分，馏分5经Sephadex LH-20色谱柱分离，以50％的甲醇水为洗脱剂，得到11个部分。馏分51-53通过Sephadex LH-20色谱柱分离，以50％的甲醇水为洗脱剂，得到11个部分。其中，6-7(2.5g)再利用反相硅胶柱(RP-18，100-200目)分离，以10％-50％甲醇梯度洗脱得35个馏分Fr.(1-35)，合并Fr.26-32(350mg)，以Sephaex LH-20柱色谱分离，20％甲醇作洗脱剂，得到20个馏分，将馏分5和6合并(70mg)，以HPLC半制备柱分离(C18柱，CH3CN-MeOH-H2O 10∶26∶72，2.0ml/min，330nm和254nm双波长检测)得化合物3(8mg)(结构式3)和化合物2(23mg)(结构式2)；馏分13和14合并(55mg)经半制备HPLC分离得化合物1(28mg(结构式1))。
2、结构鉴定主要利用光谱，包括紫外、红外、质谱、核磁共振谱(1HNMR、13CNMR、2D-NMR)和FAB-MS、HRSI-MS、HRESI-MS分析(表1-4)，鉴定其结构。
运用2D-NMR技术，尤其是HMQC和HMBC谱，解决了取代基的位置和糖的连接位置，结合高分辨质谱，对它们的全部氢信号进行了确切的归属。
新苯甲醇苷类化合物1-3的结构化合物1盐生肉苁蓉苷A(salsaside A) 化合物2盐生肉苁蓉苷B(salsaside B) 化合物3盐生肉苁蓉苷C1/C2(salsaside C1/C2)
表1.化合物1-3的理化常数及主要光谱数据化合物1分子式为C28H34O13，浅棕色无定形粉末，5％FeCl3显蓝灰色，UV365下显亮蓝色荧光，UVλmaxMeOHnm328，208，FAB-MS(neg.)m/z577(M-H)-；HRESI-MS(m/z)596.2348(M+NH4)+，1HNMR(500MHz，DMSO-d6)和13CNMR(125MHz，DMSO-d6)见表2。化合物2分子式为C28H34O13，浅棕色无定形粉末，5％FeCl3显蓝灰色，UV365下显亮蓝色荧光，UVλmaxMeOHnm332，208，1HNMR(500MHz，MeOH-d4)和13CNMR(125MHz，MeOH-d4)见表3。化合物3分子式为C28H34O12，浅棕色无定形粉末，5％FeCl3显蓝灰色，UV365下显亮蓝色荧光，UVλmaxMeOHnm315，225，211。HRSI-MS(neg.)m/z561.1958(M-H)-，1HNMR(300MHz，MeOH-d4)和13CNMR(75MHz，MeOH-d4)见表4。
表2. 化合物1的1HNMR和13CNMR的化学位移值(δ，溶剂为DMS0-d6)序号 碳原子 相应的氢原子与碳相关的氢信号Aglycone1137.7 --- A-3；A-5；A-α2127.8 7.37(1H，br.d，7.5) A-4；A-α3128.1 7.32(1H，br.t，7.5) A-54127.5 7.27(1H，br.t，7.5) A-2；A-65128.1 7.32(1H，br.t，7.5) A-36127.8 7.37(1H，br.d，7.5) A-4；A-αα69.74.59(1H，d，12.0)； A-2；A-6；G-14.77(1H，d，12.0)Ester1125.5 --- E-5；E-β2114.9 7.07(1H，brs)E-6；E-γ3145.6 --- E-54148.4 --- E-2；E-5；E-65115.7 6.76(1H，br.d，8.5) ---6121.4 7.03(1H，d，8.5) E-2；E-γα166.6 --- E-γ；E-β；G-6β113.9 6.34(1H，d，16.0)E-γγ145.3 7.51(1H，d，16.0)E-6；E-2Glc.
1101.7 4.32(1H，d，7.5) A-α；G-2274.13.20(1H，t，9.5) G-3380.83.40(1H，t) G-2；R-1468.63.23(1H，t，9.5) G-3；G-6573.83.48(1H，m) G-6；G-1663.44.40(1H，br.d，11.5) ---4.23(1H，m)Rha.
1100.6 5.04(1H，br.s) G-3270.63.69(1H，br.s) R-1370.63.50(1H，m) R-2；R-4；R-5472.13.18(1H，t，9.5) R-2；R-3；R-5568.13.91(1H，m) R-1；R-4617.81.09(3H，d，6.5) R-4；R-5表3.化合物2的1HNMR和13CNMR的化学位移值(δ，溶剂为MeOH-d4)Carbon Carbon Correlated Ha(JHz) H correlated withNo.δCδH(JHz)CbAglycone1138.0---- A-3；A-5；A-α2128.27.45(1H，br.d，7.3) A-4；A-6；A-α3128.37.36(1H，br.t，7.3) A-54127.87.31(1H，br.t，7.3) A-2；A-65128.37.36(1H，br.t，7.3) A-36128.27.45(1H，br.d，7.3) A-2；A-4；A-αα71.0 4.71(1H，d，11.8) G-14.98(1H，d，11.8)Ester1126.7--- E-β；E-52114.27.08(1H，d，1.6) E-γ；E-63145.8--- E-2；E-54148.8--- E-2；E-6；E-55115.56.81(1H，d，8.2) E-66122.26.98(1H，dd，8.2；1.6)E-γ；E-2α167.3--E-γ；E-β；G-4β113.76.31(1H，d，15.9) E-γγ147.07.62(1H，d，15.9) E-2；E-6Glc.
1102.24.47(1H，d，7.9) A-α；G-2275.2 3.49(1H，t，8.8) G-3380.7 3.84(1H，t，9.2) R-1；G-4；G-2469.7 4.96(1H，t，9.3) G-3；G-5；G-6575.1 3.59(1H，m) G-6；G-4661.4 3.67(1H，br.d，10.1)；G43.57(1H，m)Rha.
1102.15.21(1H，br.s)G-3271.3 3.94(1H，d，1.7) R-1371.1 3.60(1H，m) R-2；R-4472.8 3.32(1H，t，9.5) R-2；R-3；R-5；R-6
5 69.43.59(1H，m) R-1；R-4；R-66 17.51.11(3H，d，6.0)R-5表4.化合物3的1HNMR和13CNMR的化学位移值(δ，溶剂为DMSO-d6)序号 碳原子 氢原子Aglycone1 139.0 ---2 129.2 7.42(1H，br.d，7.5)3 129.3 7.36(1H，br.t，7.5)4 128.7 7.29(1H，br.t，7.5)5 129.3 7.36(1H，br.t，7.5)6 129.2 7.42(1H，br.d，7.5)α 71.9 4.62(1H，d，11.5)4.87(1H，d，11.5)Coumaroyl1 127.1130.0 ---2 131.4134.3 7.53(1H，d，9.0) 7.70.(d，9.0)3 116.8115.8 6.80(1H，d，9.0) 6.75(d，9.0)4 161.5160.4 ---5 116.8115.8 6.80(1H，d，9.0) 6.75(d，9.0)6 131.4134.3 7.53(1H，d，9.0) 7.70(d，9.0)α 168.3166.0 ---β 114.7 6.34(1H，d，15.9) 5.70(d，12.5)γ 147.6 7.55(1H，d，15.6) 6.92(d，12.5)Glc.
1 103.2 4.42(1H，d，8.1) 4.40(d，7.5)2 76.2 3.46(1H，t，8.4)3 80.8 3.81(1H，t，9.0)4 70.6 4.75(1H，t，9.5) 4.71(t，9.5)5 76.1 3.49(1H，m)6 62.4 3.41(1H，m)3.28(1H，m)Rha.
1 103.15.02(1H，br.s)2 72.3 3.68(1H，br.s)3 72.0 3.30(1H，dd，9.0，3.0)4 73.8 3.09(1H，t，9.5)5 70.4 3.43(1H，m)6 18.3 0.94(3H，d，6.5) 1.03(d，6.0)
发明效果本发明利用多种手段，包括硅胶柱层析、大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶LH-20柱层析和制备型高效液相色谱法等，首次从肉苁蓉属植物中分离得到一组与苯乙醇苷类化合物结构类似的新结构类型-盐生肉苁蓉苯甲醇苷类化合物，其活性研究发现，该新结构类型化合物同样具有抗神经细胞凋亡功效，为今后深入研究与开发奠定了物质基础。
权利要求
1.一种苯甲醇苷类化合物1(盐生苷A，salsaside A)，如结构式1结构式1
2.一种苯甲醇苷类化合物2(盐生苷B，salsaside B)，如结构式2结构式2
3.一种苯甲醇苷类化合物3(盐生苷C1/C2，sal saside C1/C2)，如结构式3结构式全文摘要
本发明涉及从盐生肉苁蓉中提取的一组新苯甲醇苷类化合物,具体地说,本发明运用各种分离手段包括硅胶柱层析、大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶LH－20柱层析和制备型高效液相色谱法等,从肉苁蓉属植物盐生肉苁蓉中分离到3个新的化学成分,经初步活性研究表明,这类化合物具有一定的抗神经细胞凋亡功能,为今后的研究开发奠定了基础。
文档编号C07H15/00GK1379035SQ02117640
公开日2002年11月13日 申请日期2002年5月10日 优先权日2002年5月10日
发明者屠鹏飞, 雷丽, 赵明波 申请人:北京大学药学院