专利名称：一种草甘膦微生物降解制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种可以利用和降解草甘膦的微生物制剂及其制备方法。属于微生物技术领域。
背景技术：
草甘膦(Glyphosate)是一种非选择性内吸传导型茎叶处理除草剂，属有机磷类农药。草甘膦在高等植物内的代谢十分缓慢，具有优异的除草性能.。2010年全球需求量达100万吨左右，其全球市场寿命至少还有10余年。近年来许多研究表明草甘膦对生物具有一定的毒性，并在遗传方面产生影响。草甘膦作为一种使用量极大的农药，国内外对其残留量的要求日益严格。目前，我国已制定了 79种农药在32种(类)农副产品中197项农药最 高残留限量(MRL)的国家标准，其中对草甘膦的残留限量标准有11项(mg/kg)，分别为稻谷
O.I、小麦6、小麦粉O. 5、全麦粉5、玉米I、水果O. I、甘蔗2、棉籽油O. 05、茶叶I、柑橘O. 5、苹果O. 5。对于农副产品中草甘膦残留量的控制，若是采用化学方法或物理方法进行处理来降低其草甘膦残留量，不但处理量大、成本高，而且还会有二次污染或营养损失。最有效的方法是在作物栽培时对其生长环境中的草甘膦用量加以控制，但是现阶段不使用草甘膦是不现实的，所以只有控制土壤中的草甘膦残留量。人为地在土壤中补加某些特殊的微生物，利用这些微生物具有利用草甘膦作为磷源或氮源的能力，从而可快速将草甘膦分解同化，达到降解土壤中草甘膦残留，提高农产品的品质和经济价值的目的。
发明内容
本发明的目的是提供一种源于复合微生物肥生产技术、工艺简单的、可以利用和降解草甘膦的微生物制剂及其制备方法。为了实现上述目的，本发明所采取的技术方案为由下以原料按重量配比制得微生物发酵混合液与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥的重量比为I :(5-10)(10-5) (3-4) (1-2)，所述微生物发酵混合液为胶质芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、固氮菌和细黄链霉菌发酵液，按体积分数计，胶质芽胞杆菌巨大芽胞杆菌固氮菌细黄链霉菌= (2-3) : (1-1. 5) : (1-1. 5) : (1-2)。本发明所述微生物发酵混合液的制备方法为将所述四种菌种分别接种至三角烧瓶装培养液中，其中胶质芽胞杆菌培养液中加入终浓度为2-4克/升的草甘膦，一起置27-31 °C,170rpm-190rpm培养24-48小时；然后再分别转入相应的种子罐，维持温度28-31。。、压力 O. 03-0. 05Mpa、通气量 I 0. 3-0. 6v/v/min、搅拌速度 300-400 转 / 分、发酵12-16小时再分别转入相应的发酵罐中，维持温度28-31 °C、压力O. 03-0. 05Mpa、通气量压力O. 03-0. 05v/v/min、搅拌速度200-300转/分、发酵14-18小时即得。本发明所述草甘膦降解制剂由以下方法制得将所述微生物发酵混合液与秸杆木炭粉、草炭和干鸡粪按所述比例混合、搅拌均匀即得。
本发明所述微生物发酵混合液为将四种菌种分别接种至三角烧瓶装培养液中振荡培养后按重量百分比1-3%的接种量接入种子罐，发酵12-16小时后再按重量百分比2-5%的接种量转接到发酵罐中，发酵14-18小时。本发明的优点在于
I、本发明制剂中的菌种均是我国微生物肥料生物安全通用技术准则中，菌种安全分级目录中的第一级免作毒理学试验的菌种，对生态环境友好，无二次污染，安全而有效。2、本发明制剂具有利用和降解草甘膦的功效，可作为常年使用草甘膦除草的农田进行去毒化修复时的一种手段，制剂本身就是一种微生物肥料，因此施肥和降解草甘膦一步完成，不增加生产成本和劳动成本。3、生产工艺简单，基本上与微生物复合肥的生产工艺相同，所以容易实现大规模的生产。
具体实施例方式实施例I
草甘膦降解制剂由四种微生物发酵液混合并与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥搅拌均匀即得，所述微生物发酵混合液与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥的重量比为1 :10 : 5 3 :2。草甘膦降解制剂制备方法将四种菌种分别接种至三角烧瓶装培养液中，其中胶质芽胞杆菌培养液中加入终浓度为4克/升的草甘膦。三角烧瓶装液量为30%，培养温度30°C，转速190rpm培养48小时；然后再按3%的接种量分别转入相应的种子罐，维持温度30。。、压力O. 05Mpa、通气量I :0. 6v/v/min、搅拌速度400转/分、发酵16小时再按5%的接种量分别转入相应的发酵罐中，维持温度31°C、压力O. 05Mpa、通气量I :0. 6v/v/min、搅拌速度300转/分、发酵18小时得到四种发酵液。四种微生物发酵液按体积分数计，胶质芽胞杆菌巨大芽胞杆菌固氮菌细黄链霉菌=3:1. 5:1. 5:2混合。将混合菌液与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥按重量比为1:10: 5 32混合搅拌均匀即得草甘膦微生物降解制剂。实施例2
草甘膦降解制剂由四种微生物发酵液混合并与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥搅拌均匀即得，所述微生物发酵混合液与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥的重量比为1 5 10 4 :1。草甘膦降解制剂制备方法将四种菌种分别接种至三角烧瓶装培养液中，其中胶质芽胞杆菌培养液中加入终浓度为2克/升的草甘膦。三角烧瓶装液量为20%,培养温度27°C，转速170rpm培养24小时；然后再按1%的接种量分别转入相应的种子罐，维持温度28°C、压力O. 03Mpa、通气量I :0. 3v/v/min、搅拌速度300转/分、发酵12小时再按2%的接种量分别转入相应的发酵罐中，维持温度28°C、压力O. 03Mpa、通气量I :0. 3v/v/min、搅拌速度200转/分、发酵14小时得到四种发酵液。四种微生物发酵液按体积分数计，胶质芽胞杆菌巨大芽胞杆菌固氮菌细黄链霉菌=2:1:1:1混合。将混合菌液与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥按重量比为1 5 10 4 1混合搅拌均匀即得草甘膦微生物降解制剂实施例3
草甘膦降解制剂由四种微生物发酵液混合并与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥搅拌均匀即得，所述微生物发酵混合液与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥的重量比为I 7. 5 7. 5 3. 5 1. 5。草甘膦降解制剂制备方法将四种菌种分别接种至三角烧瓶装培养液中，其中胶质芽胞杆菌培养液中加入终浓度为3克/升的草甘膦。三角烧瓶装液量为25%，培养温度29°C，转速180rpm培养36小时；然后再按2%的接种量分别转入相应的种子罐，维持温度29。。、压力O. 04Mpa、通气量I 0. 45v/v/min、搅拌速度350转/分、发酵14小时再按3. 5%的接种量分别转入相应的发酵罐中，维持温度29°C、压力O. 04Mpa、通气量I :0. 4v/v/min,搅拌速度250转/分、发酵16小时得到四种发酵液。四种微生物发酵液按体积分数计，胶质芽胞杆菌巨大芽胞杆菌固氮菌细黄链霉菌=2. 5:1. 2:1. 2:1. 5混合。将混合菌液与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥按重量比为I :7. 5 :7. 5 :3. 5 :1. 5混合搅拌均匀即得草甘膦微生物降解制剂
应用实施例I
草甘膦微生物降解制剂在葡萄园里的应用
实验方法采用大区对比，不设重复，处理面积I. 2亩，草甘膦微生物降解制剂施用量370公斤/亩，分四次施用第一次是在葡萄采收后至春萌前，按120公斤/亩作为基肥在细根生长区开沟施用并覆土后灌水。第二次是在葡萄藤萌芽期按50公斤/亩施用，第三次是在葡萄座果期按150公斤/亩施用，第四次是在浆果上色期按50公斤/亩施用，后三次的施用方法与第一次的相同。对照区用不含微生物发酵液的相同基质。期间使用了草甘膦除草剂两次。11月份采取5点取土采样法分别对实验区和对照区采样采取0-20cm 土样，混合均匀，称取IOg混合土样于离心管中，加入IOml纯净水，涡旋振荡混匀，超声波提取20min, 5000r/min离心5min,取上清液,加入等体积三氯甲烧,剧烈振荡,5000r/min离心5min，取上层清液Iml用于草甘膦的液相色谱法检测。实验结果见表I
权利要求
1.一种草甘膦降解制剂，其特征在于由下以原料按重量配比制得微生物发酵混合液与秸杆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥的重量比为I :(5-10) :(10-5)(3-4) :(1-2)，所述微生物发酵混合液为胶质芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、固氮菌和细黄链霉菌发酵液，按体积分数计，胶质芽胞杆菌巨大芽胞杆菌固氮菌细黄链霉菌= (2-3) : (1-1. 5) : (1-1. 5) : (1-2)。
2.按权利要求I所述的草甘膦降解制剂，其特征在于所述微生物发酵混合液的制备方法为将所述四种菌种分别接种至三角烧瓶装培养液中，其中胶质芽胞杆菌培养液中加入终浓度为2-4克/升的草甘膦，一起置27-31°C，170rpm-190rpm培养24-48小时；然后再分别转入相应的种子罐，维持温度28-31°C、压力O. 03-0. 05Mpa、通气量I :0. 3-0. 6v/v/min、搅拌速度300-400转/分、发酵12-16小时再分别转入相应的发酵罐中，维持温度28-31°C、压力 O. 03-0. 05Mpa、通气量压力 O. 03-0. 05v/v/min、搅拌速度 200-300 转 / 分、发酵14-18小时即得。
3.按权利要求I或2所述的草甘膦降解制剂，其特征在于由以下方法制得将所述微生物发酵混合液与秸杆木炭粉、草炭和干鸡粪按所述比例混合、搅拌均匀即得。
4.按权利要求I或2所述的草甘膦降解制剂，其特征在于所述微生物发酵混合液为将四种菌种分别接种至三角烧瓶装培养液中振荡培养后按重量百分比1-3%的接种量接入种子罐，发酵12-16小时后再按重量百分比2-5%的接种量转接到发酵罐中，发酵14-18小时。
全文摘要
本发明公开了一种草甘膦微生物降解制剂及其制备方法，由微生物发酵混合液与秸秆木炭粉、草炭、干鸡粪和氮磷钾肥按重量比为1(5-10)(10-5)(3-4)(1-2)制得。所述微生物发酵混合液为胶质芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、固氮菌和细黄链霉菌发酵液，按体积分数计，胶质芽胞杆菌巨大芽胞杆菌固氮菌细黄链霉菌=(2-3):(1-1.5):(1-1.5):(1-2)。本发明制剂具有利用和降解草甘膦的功效，可作为常年使用草甘膦除草的农田进行去毒化修复时的一种手段，制剂本身就是一种微生物肥料，因此施肥和降解草甘膦一步完成，不增加生产成本和劳动成本。且生产工艺简单，易于实现大规模的生产。
文档编号A62D3/02GK102838417SQ20121035113
公开日2012年12月26日 申请日期2012年9月20日 优先权日2012年9月20日
发明者涂祖新, 邹明, 杨一兵, 邹益, 张莉莉 申请人:江西省科学院微生物研究所, 江西绿悦生物工程股份有限公司