一种蛇床子微囊温敏凝胶及其制备方法与质量检测方法

一种蛇床子微囊温敏凝胶及其制备方法与质量检测方法
【专利摘要】本发明属于药物领域，具体涉及一种治疗晕动病的蛇床子微囊温敏凝胶药物及其制备方法，发明名称为一种蛇床子微囊温敏凝胶及其制备方法与质量检测方法。该蛇床子微囊温敏凝胶药物通过成型前工艺制得蛇床子提取物干膏，再通过多孔微囊的制备工艺制得蛇床子多孔微囊，最后采用多孔微囊的制备工艺制成蛇床子微囊温敏凝胶。本发明还提供了采用高效液相法建立蛇床子微囊温敏凝胶的指纹图谱分析方法，为评价和控制蛇床子微囊温敏凝胶的质量提供科学的方法。
【专利说明】
一种蛇床子微囊温敏凝胶及其制备方法与质量检测方法
技术领域
[0001] 本发明属于药物领域，具体涉及一种治疗晕动病的蛇床子微囊温敏凝胶药物及其 制备方法。
【背景技术】
[0002] 蛇床子为伞形科植物蛇床的干燥成熟果实，其性温、味辛苦，有小毒，归肾经。具有 燥湿祛风，杀虫止痒，温肾壮阳之功能。用于阴痒带下，湿疹瘙痒，湿脾腰痛，肾虚阳痿，宫冷 不孕等症。蛇床子化学成分复杂，主要含有具生物活性的香豆素类化合物，包括蛇床子素、 佛手柑内酯、异虎耳草素等。
[0003] 1、治疗药物过敏性皮炎 孙贞明对130例药物过敏性皮炎患者，应用地肤子、黄芪、甘草、蛇床子为 药引，配合其他药物，对药物(如血清制剂、青霉素类、磺胺类药物等）引起的过敏性皮 炎进行治疗，收到了良好效果，痊愈率达92.5%，无效率仅1.8%。药方为:全当归、金银花、赤 芍、生地、败酱草、蛇床子、茯苓皮、丹参各15g，蝉蜕、牛蒡子、白鲜皮各12g，川芎、夏枯草、白 蒺藜、甘草、陈皮各1 〇g，地肤子30g，黄芪40g，地骨皮20g等，根据病情而加减，口服后，药物 残渣局部热洗。治疗中服1~2剂后，自觉症状和体征明显减轻，红斑、荨麻疹、痒感完全消 失。90%以上者，服2~10剂即可痊愈。
[0004] 2、治疗湿疹 杨建新等采用自制制剂复方蛇床子搽剂（蛇床子、苦参、地肤子各60g，硫磺20g，百部 l〇〇g，硫酸锌17g，甘油33mL等）治疗婴幼儿湿疹，取得满意效果。治疗组外用本品，湿敷患 处，2次/d，l次15min，连续2周，对照组应用皮质类固醇类药物尤卓尔软膏同法治疗。经统计 分析，治疗组与对照组比较二者在总有效率方面无显著差异，但治疗组疗效更理想。李菁等 进行了蛇床子汤外用治疗81例皮炎湿疹的临床疗效观察，结果满意。作者将经验方蛇床子、 威灵仙、苦参、当归尾等成份，加水煎成汤剂，对于皮炎湿疹急性期采用纱布浸湿药液敷贴 于患处30min，l次/d，连续3d，慢性期则用超声雾化器冷喷患处，1次/d，连续7d。结果，治愈 率67.9%，好转率28.4%，总有效率96.3%，无效率3.7%。作者认为该方法简单易行，值得临床 推广。
[0005] 3、治疗荨麻疹 孔志凤等应用蛇床子注射液治疗荨麻疹患者41例，经1~2疗程，治愈32例，好转8例，未 愈1例。总有效率为97.56%。最快疗效为注射1次痊愈，最慢为注射21次痊愈。
[0006] 4、治疗复发性外阴阴道念珠菌病 刘锦丽等探讨加味蛇床子洗剂对女性复发性外阴阴道念珠菌病巩固治疗的临床效果， 结果令人满意。作者随机将198例患者分为2组，观察组100例，对照组98例。对照组氟康唑 150mg每周一次口服，治疗组在此基础上加用加味蛇床子洗剂125mL，加温水250mL熏洗外阴 阴道每次15~20min，隔日一次，两组各治疗3个月。结果，两组总有效率比较差异有统计学 意义(P<0.05)，治疗组疗效优于对照组。作者由此认为，加味蛇床子洗剂对复发性外阴阴 道念珠菌病巩固治疗疗效安全，可靠，可以显著地提高治愈率，降低复发性外阴阴道念珠茵 病的复发率。
[0007] 5、治疗阴道炎 王学会采用蛇床子散加减治疗阴道炎140例，取得满意效果。作者以蛇床子散为基础 方，即蛇床子、苦参各30g，百部、明矾、地肤子、黄柏15g，川椒10g。加减:外阴阴道假丝酵母 菌病去川椒，滴虫性阴道炎加苦楝皮l〇g。上述方剂分别制备成袋装汤剂，每袋250mL，l次/ d，每次500mL，阴道冲洗，7d为1个疗程，一般治疗1~2个疗程。结果，1个疗程疫愈98例，2个 疗程痊愈34例，治愈率87.1%，有效率97.8%，无效2.2%。李艳敏使用蛇床子散加味治疗阴道 炎100例，治疗有效率为96%。作者将蛇床子30g，黄柏15g，茵陈蒿、土茯苓各18g，川椒、明矾 各6g，蝴銳、薄荷各12g，加水1000mL，煎30min，取汁500mL，于每晚坐浴1次，坐浴前取药液放 于干净的容器中，坐浴后用消毒棉球系线蘸药液塞入阴道，次日晨取出。每1次/d，连用7d为 1疗程，结果100例滴虫性阴道炎、霉菌性阴道炎和老年性阴道炎总有效率为96%。官红霞用 蛇床子洗剂熏洗坐浴治疗与护理霉菌性阴道炎50例，取得满意效果。两组均每晚睡前给予 达克宁栓剂1粒阴道上药，1次/d，观察组采用自制蛇床子洗剂（当归、土茯苓、蛇床子、苦参、 黄柏、地肤子、百部、白鲜皮、茵陈、花椒、龙胆草、艾叶、冰片等，经中药煎药机煎煮并包装， 每袋150mL)2袋300mL，倒入坐浴专用盆，加热水至1000mL左右，先用热水熏，等水温降至50 °C~60°C时，用干净毛巾蘸药轻轻擦洗患处，当水温达38°C~42°C嘱患者坐浸药液中， 20min/次，1次/d，4d为1个疗程。对照组采用2%碳酸氢钠阴道冲洗，1次/d，7d为1个疗程。结 果，观察组总有效率为94.0%，而对照组为82.0%，两者差异有统计学意义(P<0.05)。田天梅 采用中西医结合治疗老年性阴道炎63例，结果令人满意。作者将113例病例随机分为两组， 对照组采用乙烯雌酚、诺氟沙星研磨成粉，每日用1:5000高锰酸钾温水冲洗阴道后，将药粉 放入阴道内。治疗组除用上述药物外，加入地塞米松1.5mg、硼酸粉0.5g，蛇床子2g阴道给 药，同时配合血府逐瘀口服液治疗，两组均7d为1个疗程。结果，对照组治愈率为56.0%，治疗 组治愈率90.5%，两组总有效率均为100%，但两组病例治疗后治愈率比较，差异有统计学意 义(P<0.05)。作者由此认为，中西医结合治疗老年性阴道炎，疗效显著，值得临床上进一步 推广应用。
[0008] 6、治疗阴痒 韩薇给予蛇床子散加减方外洗治疗阴痒，取得满意结果。作者将蛇床子30g，川椒、百部 各l〇g，苦参、龙胆草、黄柏、蒲公英各15g，地肤子20g等放予沙锅内，浸泡15min，先用武火煮 沸后。再以文火煎1 〇~15min。水煎两次，用纱布将药液滤过放温，先熏洗后坐浴15~20min， 2次/d，7d为1个疗程。结果，治愈率70.0%，显效率22.5%，无效率6%，总有效率为92.5%。该方 法对外阴及阴道瘙痒，包括由阴道炎、湿疹、外阴营养不良等原因引起的外阴瘙痒效果良 好。
[0009] 7、治疗银肩病 王金海等采用自制蛇床子素贴剂治疗寻常型银肩病296例，取得良好效果。作者采用开 放式自体对照的方法，左侧肢体靶皮损外用复方氟米松软膏，2次/ d;右侧肢体靶皮损外用蛇床子素贴剂(含5%蛇床子素），1次/d。每2周复诊1次，连续观 察6周为1个疗程。临床试验结果表明，蛇床子素贴剂和复方氟米松软膏的临床总有效率分 别为79.72%和82.77%，说明蛇床子素贴剂对银肩病治疗取得较满意的疗效，与复方氟米松 软膏组比较无显著差异。但临床观察中发现蛇床子素贴剂组止痒效果与复方氟米松软膏组 比较差异有统计学意义(P<〇. 05)，蛇床子素有较好的止痒作用。
[0010] 8、治疗不孕症 燕恒毅等采用蛇床子、五味子、远志中药煎剂口服促进排卵治疗不孕症，取得满意效 果。作者将68例女性不孕症排卵障碍的患者随即分为观察组35例，给上述中药促排卵治疗， 对照组33例给克罗米芬。结果，观察组子宫内膜明显较对照组厚(P<0.01)，妊娠率明显高 于对照组(P<〇. 05)，流产率明显低于对照组(P<0.05)，优势卵泡及排卵率两组对比（P< 0.05)均有显著性。因此，作者认为蛇床子、五味子、远志三味中药具有促子宫内膜生长、促 进卵泡发育及排卵作用，妊娠率高，妊娠结局好，具有临床推广价值。
[0011] 晕动症(motion sickness)，即晕车病、晕船病、晕机病和由于各种原因引起的摇 摆、颠簸、旋转、加速运动等所致疾病的统称。
[0012] 有许多人在旅行中，因身处运动环境而引发的头晕、恶心、呕吐、面色苍白、出冷汗 等症状群，"晕动"严重者甚至出现心律不齐、虚脱、休克等。这种晕动病症状通常改变旅行 方式或是结束旅游后不久均减轻。
[0013] 中国是世界"晕动症"发生率最高的国家之一，80%的人都曾经历过不同程度的晕 动反应。这种疾病目前没有彻底治愈的办法，但选择有效的抗晕药能够很好的缓解痛苦。基 于"晕动"的普遍性，人们也渐渐积累起一些小窍门，比如口含姜片，闻桔皮，抹风油精等，但 效果并不明显。
[0014] 本发明提供的蛇床子微囊温敏凝胶对于晕动症具有非常显著地治疗效果，能有效 抑制胃肠道植物神经功能紊乱的作用，对防治晕动病的发作疗效确切。
[0015] 注射用七叶皂苷钠是临床常用药物，具有抗感染、抗水肿、增加静脉张力、改善血 液循环以及保护神经等作用，但它对黏膜和肌肉组织也有较强的刺激作用，口服在胃肠道 不吸收，肌肉注射易引起组织坏死，仅供静脉输注，但静脉输注时常因药物浓度高、输注快 而对静脉造成不同程度的损伤，轻者有酸、麻、胀、痛等刺激症状，重者有静脉炎的表现，出 现局部痛、红、肿及静脉条索样改变，可触及硬结。静脉外渗不仅给病人带来痛苦，也增加了 护理人员静脉穿刺的难度，影响了治疗工作的连续性。为了迅速改善病人局部状况，更好地 使治疗方案顺利进行，发明人在临床与科研工作中一直在不断探索预防静脉刺激症状的方 法，在多次的实践试验中，意外发现应用本发明蛇床子微囊温敏凝胶局部外涂的方法疗效 显著，后续又进行了规范的临床试验研究，得到了本发明的技术方案。

【发明内容】

[0016] 本发明的目的是提供一种治疗晕动病的蛇床子微囊温敏凝胶药物。
[0017] 本发明的另一目的是提供该蛇床子微囊温敏凝胶药物的制备方法。
[0018] 本发明还提供该蛇床子微囊温敏凝胶药物的质量检测方法。
[0019] 本发明还提供了该蛇床子微囊温敏凝胶药物的制药用途。
[0020] 本发明的目的是通过以下方式实现的： 一种治疗晕动症的蛇床子微囊温敏凝胶剂药物，采用如下方法制备： (1)成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠，加水定容于容量瓶中，配制十二烷 基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗粉，十二烷基硫酸钠溶液，均装入圆底烧瓶，加入乙醇，加 热回流提取，合并提取药液，过滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤(1)制备的蛇床子提取物干膏，溶于乙酸乙酯中，再向其加 入液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶、阿拉伯胶溶于蒸馏水 中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用；将上述蛇床子提取物药物混合液缓慢加 入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌，制成0/W型乳剂;在50°C水浴下，向 0/W型乳剂中缓慢滴加醋酸至pH为4,搅拌均匀，加入蒸馏水进行稀释，至冰浴中继续搅拌迅 速降温至l〇°C，加入戊二醛固化，滴加NaOH溶液调至pH为7,静置待其沉降，沉降物用蒸馏水 洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、丙二醇 加入到蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4°C条件下放置，使凝胶充分溶胀而得到澄清溶液， 在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌均匀，制成蛇床子微囊温敏凝胶。
[0021] 上述的蛇床子微囊温敏凝胶剂药物，优先采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠lg，加水定容于100mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。
[0022] -种治疗晕动症的蛇床子微囊温敏凝胶剂药物的质量检测方法，该蛇床子微囊温 敏凝胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠，加水定容于容量瓶中，配制十二烷 基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗粉，十二烷基硫酸钠溶液，均装入圆底烧瓶，加入乙醇，加 热回流提取，合并提取药液，过滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤(1)制备的蛇床子提取物干膏，溶于乙酸乙酯中，再向其加 入液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶、阿拉伯胶溶于蒸馏水 中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用；将上述蛇床子提取物药物混合液缓慢加 入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌，制成0/W型乳剂;在50°C水浴下，向 0/W型乳剂中缓慢滴加醋酸至pH为4,搅拌均匀，加入蒸馏水进行稀释，至冰浴中继续搅拌迅 速降温至l〇°C，加入戊二醛固化，滴加NaOH溶液调至pH为7,静置待其沉降，沉降物用蒸馏水 洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3)微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、丙二醇 加入到蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4°C条件下放置，使凝胶充分溶胀而得到澄清溶液， 在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌均匀，制成蛇床子微囊温敏凝胶； 采用如下高效液相法方法对上述制备的蛇床子微囊温敏凝胶进行指纹图谱的质量检 测，方法如下： (1) 色谱条件:色谱柱Waters Xbridge Cis柱，流动相以乙腈为流动相A，以水为流动相 B，梯度洗脱:Omin至12min，流动相A从15%线性增加至30%，流动相B从85%线性下降至70%， 12min至45min，流动相A从30%线性增加至80%，流动相B从70%线性下降至20%，45min至 55min，流动相A保持在80%，流动相B保持在20%，检测波长203nm，流速1. OmL · min-1;柱温30 °C，进样体积10此； (2) 对照品溶液的制备:精密称取异茴芹香豆素对照品、异栓翅芹醇对照品、香叶木素 对照品，置量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得； (3) 供试品溶液的制备:取蛇床子微囊温敏凝胶，精密称定，精密加入甲醇，称重，超声 处理，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，取续滤液过滤膜，即得； (4) 测定:精密吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，进行测定。 上述的蛇床子微囊温敏凝胶剂药物的质量检测方法，该蛇床子微囊温敏凝胶剂药物采 用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠lg，加水定容于100mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶； 优选采用如下高效液相法方法对上述制备的蛇床子微囊温敏凝胶进行指纹图谱的质 量检测，方法如下： (1)色谱条件:色谱柱Waters Xbridge Cis柱，流动相以乙腈为流动相A，以水为流动相 B，梯度洗脱:Omin至12min，流动相A从15%线性增加至30%，流动相B从85%线性下降至70%， 12min至45min，流动相A从30%线性增加至80%，流动相B从70%线性下降至20%，45min至 55min，流动相A保持在80%，流动相B保持在20%，检测波长203nm，流速1. OmL · min-1;柱温30 °C，进样体积10此； (2)对照品溶液的制备：精密称取异茴芹香豆素对照品4.13mg、异栓翅芹醇对照品 4.21mg、香叶木素对照品2.15mg，置10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得； (3 )供试品溶液的制备:取蛇床子微囊温敏凝胶0.5g，精密称定，精密加入甲醇25mL，称 重，超声处理30min，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，取续滤液过0.45μπι滤膜，即得； (4)测定:精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10yL注入高效液相色谱仪，进行测定。
[0023] -种蛇床子微囊温敏凝胶剂在制备治疗晕动症药物中的应用，该蛇床子微囊温敏 凝胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠lg，加水定容于100mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。
[0024] -种蛇床子微囊温敏凝胶剂在制备预防注射用七叶皂苷钠所引起的静脉损伤药 物中的应用，该蛇床子微囊温敏凝胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠lg，加水定容于l〇〇mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。
[0025] -种蛇床子微囊温敏凝胶剂在制备治疗阳痿药物中的应用，该蛇床子微囊温敏凝 胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠lg，加水定容于l〇〇mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。
[0026] -种蛇床子微囊温敏凝胶剂在制备治疗湿疹药物中的应用，该蛇床子微囊温敏凝 胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠lg，加水定容于l〇〇mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。
[0027]通过如下实验研究验证本发明的技术效果： 实验一:本发明凝胶药物治疗晕动病的实验研究 发明人独创本发明凝胶药物，对犬进行了治疗晕动病的实验研究。
[0028] 1材料与方法 1.1实验材料 1.1.1实验动物 家养健康犬6只，雌雄各半，体重5~6kg，普通级，由黑龙江中医药大学实验动物中心提 供。
[0029] 1.1.2 药品 本发明药物(蛇床子微囊温敏凝胶）:处方:干燥的蛇床子粗分l〇g。制备方法：（1)成型 前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠lg，加水定容于100mL容量瓶中，配制质量分数为 1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液10mL，均装入圆 底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过滤，将滤液浓缩 烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。
[0030] 对比药物(蛇床子素凝胶）：处方:蛇床子素〇.5g;制备方法:称取0.15g卡波姆940， 均匀撒布于适量水中，置于室温下溶胀过夜；量取乙醇和〇.5mL月桂氮酮，分别加入其中并 搅拌均匀，滴加三乙醇胺调节pH至6~8使成凝胶;称取蛇床子素0.5g加入上述基质中，充 分搅匀，即得l〇g白色蛇床子素凝胶。（详细制备方法详见：楼莹，赵华，胡晋红.正交试验法 优化蛇床子素凝胶剂的配方[J]药学服务与研究.2016.16( 1): 52) 1.1.3设备 旋转刺激装置，由黑龙江中医药大学药学院按〇311^1:〇11等报道(〇311^|1:〇116!1儿11(3〇七 JB. A stimulator for labo ratory studies of motion sickness in cars [J].Aviat Space Environ Med，1985，56:462.)仿制而成。该装置旋转轮直径1.2m，配有透明通气的动 物箱及转速控制钮。根据转速及旋转轮的直径，可计算出角加速度的大小（即诱发运动病发 作的刺激量）。
[0031] 1.2 方法 1.2.1动物筛选 实验时，将实验犬无束缚地置入旋转装置的动物箱中，绕水平轴顺时针旋转，以70° · (s)2-1角加速度加速4.5s，达最大速度315° · (s)-1后匀速旋转3s，立即以126° · (s)2-1角减 速度减速，直至旋转停止为1个周期，如此循环进行可诱发晕动病(姜正林.生姜合剂对运动 病大鼠血液肾素、血管紧张素、醛固酮水平的影响[J].中华航海医学与高气压医学杂志， 2001， 8( 1):16)。
[0032] 旋转开始后半小时内，被选犬若出现流诞或呕吐症状者，即被视为对本试验敏感， 作为本实验用犬，共6只，然后分别标记编号，按常规适应性饲养2周。
[0033] 1.2.2自身对照试验 第1次进行本发明凝胶药物治疗组(观察组)实验。每犬于开始实验前半小时内，剃除脐 部被毛，用75%乙醇棉球擦净脐部皮肤，再涂抹本发明凝胶剂2g，外用胶布封固，然后将犬置 于动物箱中旋转，测定实验开始至动物出现流诞或呕吐症状的时长，并分别记录。
[0034]实验结束后，即时洗净脐部本发明凝胶剂，然后按常规饲养10天，再进行第2次实 验。
[0035] 第2次进行蛇床子素凝胶对照组实验。每犬于开始实验前半小时内，剃除脐部被 毛，用75%乙醇棉球擦净脐部皮肤，再涂抹蛇床子素凝胶剂2g，外用胶布封固，然后将犬置于 动物箱中旋转，测定实验开始至动物出现流诞或呕吐症状的时长，并分别记录。
[0036] 2 结果 实验观察组与对照组在接受相同旋转刺激量后出现呕吐或流涎的时长见表1-1。观察 组诱导犬产生流涎或呕吐症状的时间较对照组明显延长，经配对t检验，两组差异有极显著 性(P〈0.01，t=4.9035)，提示观察组的疗效明显优于对照组。
[0037] 表1-1两组实验犬出现呕吐或流涎的时间(min)
3讨论与结论 本实验通过在相同的旋转刺激量条件下，比较观察组与对照组诱导恶心呕吐的时间， 时间越长，动物对旋转刺激的耐受性越强，表明疗效越佳。结果表明，本发明蛇床子微囊温 敏凝胶较蛇床子素凝胶有更强的抑制胃肠道植物神经功能紊乱的作用，对防治晕动病的发 作疗效确切。这也充分说明，本发明提供的独特的制备方法，显著地提高了药物的作用疗 效。
[0038] 现代医学研究认为，脐为胚胎发育过程中，腹壁的最后闭合处，其表皮角质层最 薄，屏障功能最弱，皮下无脂肪层，且血管神经丰富，有利于药物吸收，故脐部施治有可靠的 理论依据。发明人结合现代透皮吸收机制的研究理论，通过脐部给药的途径，使有效药物迅 速吸收入血而发挥最佳疗效。其疗效强力、迅速、持久。同传统的治疗方法相比，本发明凝胶 药物还具有使用方便，无副作用，且老幼皆宜等优点，因此具有广阔的研发前景。
[0039] 实验二:本发明蛇床子微囊温敏凝胶外涂治疗注射用七叶皂苷钠致静脉外渗的效 果观察 1.资料与方法 1.1 一般资料 将28例静脉输注注射用七叶皂苷钠致静脉外渗的病人随机分为实验组和对照组各14 例。
[0040]实验组男7例，女7例;年龄20岁~55岁；重度静脉外渗7例，中度静脉外渗5例，轻度 静脉外渗2例。
[0041 ]对照组男7例，女7例;年龄21岁~55岁；重度静脉外渗7例，中度静脉外渗6例，轻度 静脉外渗1例。
[0042] 均采用7号头皮针，选取较粗大静脉。两组病人性别、年龄、病种、注射用七叶皂苷 钠(北京四环科宝制药有限公司生产，批准文号：国药准字H20044036)剂量及用法、静脉外 渗程度比较差异无统计学意义(P>〇.05)，具有可比性。
[0043] 1.2方法 1.2.1治疗方法 给实验组病人静脉外渗肿胀、疼痛的部位外涂本发明蛇床子微囊温敏凝胶(参照本发 明说明书【具体实施方式】中的实施例1制备），用药厚度3mm~5mm，不要按摩，每天1次，09:00 外涂，连续使用3d，不用包扎。轻者用药厚度可薄一些。
[0044] 给对照组病人用热水湿敷后外贴切薄的马铃薯72h。
[0045] 1.2.2疗效评定标准 治愈:治疗72h后疼痛明显消失，无触痛，无肿胀，正常皮肤颜色。
[0046] 显效:治疗后72h内疼痛消失，肿胀消退，皮肤呈暗红色条索消失或变软。
[0047] 有效:治疗后72h内疼痛减轻，肿胀减轻，皮肤呈暗红色条索缩小。
[0048] 无效:疗效结束后症状体征无变化。
[0049]治愈+显效+有效为总有效。
[0050] 2.结果 表2-1两组病人治疗效果比较例(％)
注:两组治疗效果比较，P〈〇.05。
[0051 ] 3.讨论与结论 注射用七叶皂苷钠在体内能充分抑制前列腺素E的释放，提高血液中促皮质素含量，降 低腺苷三磷酸酯酶的活性，保护细胞膜的稳定，提高静脉张力，维持毛细血管正常通透性， 改善微循环，改善氧自由基对神经细胞的损伤，可抑制炎性物质，消除细胞水肿，还对髓神 经再灌注损伤有保护作用，减轻组织损害。大部分病人在静脉输注3d~5d后血管局部会有 酸、麻、胀、痛等刺激症状，对药物敏感者用药当天即出现症状，并以输液静脉处为中心向 上、向左右扩散，局部皮肤发红、灼热并有压痛，静脉变硬，弹性消失，甚至管壁闭塞，静脉塌 陷，肢体活动时疼痛加重，不能继续静脉输液，而且很容易堵塞针头，增加病人的痛苦，也很 容易引起静脉外渗，引起局部红肿痛剧烈，也增加护理人员穿刺静脉的难度，同时也影响了 治疗工作的连续性。在临床与护理工作中，采用本发明蛇床子微囊温敏凝胶外涂局部治疗 方法，预防注射用七叶皂苷钠所引起的静脉损伤，疼痛、肿胀消失快，此法效果明显，同时提 高了护理人员穿刺血管的成功率。其主要原因是本发明蛇床子微囊温敏凝胶能防止浅表血 栓形成，加速细胞再生，促进吸收，阻止局部炎症的发展和加速血肿的吸收，可缓和并迅速 减轻疼痛。而热水湿敷后外贴马铃薯在临床应用过程中，热水很容易凉，而且容易浸湿床 单、被套，而切块的马铃薯外贴容易掉落，不方便，而且效果不理想。
[0052]综上所述，与热水湿敷后外贴马铃薯比较，本发明蛇床子微囊温敏凝胶操作简单 方便，保留时间长，舒适度好，有清凉感觉，特别是夏天，疗效高，安全有效，病人容易接受。 [0053]实验三:蛇床子微囊温敏凝胶的HPLC指纹图谱研究 采用高效液相法建立蛇床子微囊温敏凝胶的指纹图谱分析方法，为评价和控制蛇床子 微囊温敏凝胶的质量提供科学的方法。
[0054] 1 材料 1.1仪器 Waters2695-2998型高效液相色谱仪(美国）;PDA检测器，四元梯度栗， 软件为Empower〗数据处理软件系统；KQ5200DE型数控超声波清洗器（昆山）。 METTLERXS205DU 电子天平（瑞士）。
[0055] 1.2 试药 蛇床子微囊温敏凝胶，10批，参照本发明说明书【具体实施方式】中的实施例1制备，见表 3-1。对照品异茴芹香豆素、异栓翅芹醇、香叶木素购于中国药品生物制品检定研究院。乙腈 为色谱纯，液相用水为屈臣氏蒸馏水，其余试剂均为分析纯。
[0056] 表3-1蛇床子微囊温敏凝胶测试样品批号 2方法与结果
2.1色谱条件 色谱柱Waters Xbridge 〇18(4.6111111\25〇1]1111，5以111)柱，流动相以乙腈为流动相4，以水为 流动相B，按表3-2进行梯度洗脱，检测波长203nm，流速1. OmL · mirT1;柱温30°C，进样体积10 yL〇
[0057] 表3-2流动相洗脱条件
2.2对照品溶液的制备 精密称取异茴芹香豆素对照品4.13 m g、异栓翅芹醇对照品4.21 m g、香叶木素对照品 2.15mg，置lOmL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得。
[0058] 2.3供试品溶液的制备 取上述S1~S10号蛇床子微囊温敏凝胶约0.5g，精密称定，精密加入甲醇25mL，称重，超 声处理30min，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，取续滤液过0.45μπι滤膜，即得。
[0059] 2.4方法学考察 2.4.1重复性试验 取同一批号样品，分别精密称取6份，按照2.3项下方法制备供试品溶液，分别进样，以4 号峰异茴芹香豆素为参照峰，计算出1~18号共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积的 RSD<3%，同时用相似度评价软件计算各色谱指纹图谱的相似度均大于0.99,表明方法重复 性良好。
[0060] 2.4.2精密度试验 取重复性试验中同一供试品溶液，连续进样5次，以4号峰异茴芹香豆素为参照峰，计算 出1~18号共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%，同时用相似度评价软 件计算各色谱指纹图谱的相似度均大于0.99,表明仪器稳定，精密度良好。
[0061 ] 2.4.3稳定性试验 取重复性试验中同一供试品溶液，分别在〇,4,8，12,24h进样，以4号峰异茴芹香豆素为 参照峰，计算出1~18号共有指纹峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%，同时用 相似度评价软件计算各色谱指纹图谱的相似度均大于0.99,表明供试品溶液在24h内稳定。 [0062] 2.5指纹图谱的建立 精密吸取2.2项下的对照品溶液及2.3项下制备的供试品溶液各10yL，注入高效液相色 谱仪，得到10个批号蛇床子微囊温敏凝胶HPLC指纹图谱，结果见图1。
[0063] 通过与对照品的比较，确认3号峰为香叶木素，4号峰为异茴芹香豆素，7号峰为异 栓翅芹醇，其中4号峰异茴芹香豆素峰面积较大且较稳定，故选择此峰为参照峰。将10批蛇 床子微囊温敏凝胶指纹图谱导入采用药典委员会推荐的中药色谱指纹图谱相似度评价系 统(A版），进行色谱峰匹配，匹配结果见图2,所得对照指纹图谱见图3。
[0064] 以4号峰异茴芹香豆素为参照，去除溶剂峰后确定18个共有峰为构成蛇床子微囊 温敏凝胶指纹图谱的特征峰，样品共有峰的相对保留时间及相对峰面积分别列于表3-3和 表3-4。10批蛇床子微囊温敏凝胶与对照指纹图谱相似度计算结果分别为0.968,0.999， 0.998,0.998,0.997,0.990,0.990,0.999,0.999,0.998。
[0065] 表3-3 10批蛇床子微囊温敏凝胶的共有峰的相对保留时间
表3-4 10批蛇床子微囊温敏凝胶共有峰的相对峰面积
3讨论 实验中对提取溶剂、检测波长、流动相系统进行了考察。曾采用水、50%甲醇、甲醇作为 提取溶剂，结果以水及50%甲醇为提取溶剂的供试品溶液峰形欠佳，分离度不高，以甲醇作 为提取溶剂所得色谱峰峰形较好，故采用甲醇作为提取溶剂。
[0066]采用二极管阵列检测器对图谱进行了全波长扫描，结果在203nm下的色谱峰信息 较为丰富，故选用203nm作为测定波长。
[0067] 流动相条件优化时分别试验了甲醇-水、乙臆-水2种流动相系统，最后选取乙臆-水作为流动相，在此条件下色谱峰峰形较好。
[0068] 以异茴芹香豆素、异栓翅芹醇、香叶木素为对照峰确定了蛇床子微囊温敏凝胶的 18个共有峰，并通过相似度计算软件得到10批蛇床子微囊温敏凝胶的对照图谱及各批样品 与对照图谱之间的相似度，结果均大于0.9,表明蛇床子微囊温敏凝胶的制备工艺稳定。对 照图谱能提供较为全面的质量控制信息，可作为蛇床子微囊温敏凝胶的质量控制与评价方 法之一〇
[0069]
【附图说明】: 图1:蛇床子微囊温敏凝胶HPLC 图2:10批样品匹配色谱 图3:对照品指纹图谱
【具体实施方式】： 实施例1:蛇床子微囊温敏凝胶剂药物 采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠lg，加水定容于100mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶； 采用如下高效液相法方法对上述制备的蛇床子微囊温敏凝胶进行指纹图谱的质量检 测，方法如下： (1) 色谱条件:色谱柱Waters Xbridge Cis柱，流动相以乙腈为流动相A，以水为流动相 B，梯度洗脱:Omin至12min，流动相A从15%线性增加至30%，流动相B从85%线性下降至70%， 12min至45min，流动相A从30%线性增加至80%，流动相B从70%线性下降至20%，45min至 55min，流动相A保持在80%，流动相B保持在20%，检测波长203nm，流速1. OmL · min-1;柱温30 °C，进样体积10此； (2) 对照品溶液的制备：精密称取异茴芹香豆素对照品4.13mg、异栓翅芹醇对照品 4.21mg、香叶木素对照品2.15mg，置10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得； (3 )供试品溶液的制备:取蛇床子微囊温敏凝胶0.5g，精密称定，精密加入甲醇25mL，称 重，超声处理30min，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，取续滤液过0.45μπι滤膜，即得； (4) 测定:精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10yL注入高效液相色谱仪，进行测定。 蛇床子为伞形科蛇床属植物蛇床〇3〗0^咖《0/!0〗61^(^.)(^/55.^5'6_/^0咖《0/10_^1^ 的干燥成熟果实。
[0070] 此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包 含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当 将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员 可以理解的其他实施方式。
[0071]此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包 含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当 将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员 可以理解的其他实施方式。
【主权项】
1. 一种治疗晕动症的蛇床子微囊温敏凝胶剂药物，其特征在于，采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠，加水定容于容量瓶中，配制十二烷 基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗粉，十二烷基硫酸钠溶液，均装入圆底烧瓶，加入乙醇，加 热回流提取，合并提取药液，过滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏，溶于乙酸乙酯中，再向其加 入液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶、阿拉伯胶溶于蒸馏水 中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用；将上述蛇床子提取物药物混合液缓慢加 入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌，制成0/W型乳剂;在50°C水浴下，向 0/W型乳剂中缓慢滴加醋酸至pH为4,搅拌均匀，加入蒸馏水进行稀释，至冰浴中继续搅拌迅 速降温至l〇°C，加入戊二醛固化，滴加 NaOH溶液调至pH为7,静置待其沉降，沉降物用蒸馏水 洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、丙二醇 加入到蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4°C条件下放置，使凝胶充分溶胀而得到澄清溶液， 在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌均匀，制成蛇床子微囊温敏凝胶。2. 根据权利要求1所述的蛇床子微囊温敏凝胶剂药物，其特征在于，采用如下方法制 备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠 lg，加水定容于100mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备：取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于40mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。3. -种治疗晕动症的蛇床子微囊温敏凝胶剂药物的质量检测方法，该蛇床子微囊温敏 凝胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠，加水定容于容量瓶中，配制十二烷 基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗粉，十二烷基硫酸钠溶液，均装入圆底烧瓶，加入乙醇，加 热回流提取，合并提取药液，过滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备:取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏，溶于乙酸乙酯中，再向其加 入液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶、阿拉伯胶溶于蒸馏水 中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用；将上述蛇床子提取物药物混合液缓慢加 入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌，制成0/W型乳剂;在50°C水浴下，向 0/W型乳剂中缓慢滴加醋酸至pH为4,搅拌均匀，加入蒸馏水进行稀释，至冰浴中继续搅拌迅 速降温至l〇°C，加入戊二醛固化，滴加 NaOH溶液调至pH为7,静置待其沉降，沉降物用蒸馏水 洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3)微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取泊洛沙姆407、泊洛沙姆188、丙二醇 加入到蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4°C条件下放置，使凝胶充分溶胀而得到澄清溶液， 在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌均匀，制成蛇床子微囊温敏凝胶； 其特征在于，采用如下高效液相法方法对其指纹图谱进行质量检测： (1)色谱条件：色谱柱Waters Xbridge Cis柱，流动相以乙腈为流动相A，以水为流动相 B，梯度洗脱:Omin至12min，流动相A从15%线性增加至30%，流动相B从85%线性下降至70%， 12min至45min，流动相A从30%线性增加至80%，流动相B从70%线性下降至20%，45min至 55min，流动相A保持在80%，流动相B保持在20%，检测波长203nm，流速1. OmL · min-1;柱温30 °C，进样体积10此； (2)对照品溶液的制备:精密称取异茴芹香豆素对照品、异栓翅芹醇对照品、香叶木素 对照品，置量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得； (3) 供试品溶液的制备:取蛇床子微囊温敏凝胶，精密称定，精密加入甲醇，称重，超声 处理，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，取续滤液过滤膜，即得； (4) 测定:精密吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，进行测定。4.根据权利要求3所述的蛇床子微囊温敏凝胶剂药物的质量检测方法，该蛇床子微囊 温敏凝胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠 lg，加水定容于100mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备：取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶； 其特征在于，采用如下高效液相法方法对其指纹图谱进行质量检测： (1)色谱条件：色谱柱Waters Xbridge Cis柱，流动相以乙腈为流动相A，以水为流动相 B，梯度洗脱:Omin至12min，流动相A从15%线性增加至30%，流动相B从85%线性下降至70%， 12min至45min，流动相A从30%线性增加至80%，流动相B从70%线性下降至20%，45min至 55min，流动相A保持在80%，流动相B保持在20%，检测波长203nm，流速1. OmL · min-1;柱温30 °C，进样体积10此； (2)对照品溶液的制备：精密称取异茴芹香豆素对照品4.13mg、异栓翅芹醇对照品 4.21mg、香叶木素对照品2.15mg，置10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，即得； (3 )供试品溶液的制备:取蛇床子微囊温敏凝胶0.5g，精密称定，精密加入甲醇25mL，称 重，超声处理30min，取出，放冷，补重，摇匀，滤过，取续滤液过0.45μπι滤膜，即得； (4)测定:精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10yL注入高效液相色谱仪，进行测定。5. -种蛇床子微囊温敏凝胶剂在制备治疗晕动症药物中的应用，其特征在于，该蛇床 子微囊温敏凝胶剂药物采用如下方法制备： (1)成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠 lg，加水定容于100mL容量瓶中，配 制质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备：取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。6. -种蛇床子微囊温敏凝胶剂在制备预防注射用七叶皂苷钠所引起的静脉损伤药物 中的应用，其特征在于，该蛇床子微囊温敏凝胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠 lg，加水定容于100mL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备：取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到100mL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4 °C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。7. -种蛇床子微囊温敏凝胶剂在制备治疗阳痿药物中的应用，其特征在于，该蛇床子 微囊温敏凝胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠 lg，加水定容于lOOmL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备：取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到lOOmL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4°C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。8. -种蛇床子微囊温敏凝胶剂在制备治疗湿疹药物中的应用，其特征在于，该蛇床子 微囊温敏凝胶剂药物采用如下方法制备： (1) 成型前工艺:称取表面活性剂十二烷基硫酸钠 lg，加水定容于lOOmL容量瓶中，配制 质量分数为1%的十二烷基硫酸钠溶液，分别称取蛇床子粗分l〇g，十二烷基硫酸钠溶液 10mL，均装入圆底烧瓶，加入95%乙醇60mL，加热回流提取2次，每次1.5h，合并提取药液，过 滤，将滤液浓缩烘干，得蛇床子提取物干膏； (2) 多孔微囊的制备：取步骤（1)制备的蛇床子提取物干膏2g，溶于lmL乙酸乙酯中，再 向其加入2mL液体石蜡，超声混匀，得蛇床子提取物药物混合液，备用；取明胶lg、阿拉伯胶 lg溶于20mL蒸馏水中，混匀，制成阿拉伯胶和明胶的混合溶液，备用;将上述蛇床子提取物 药物混合液缓慢加入阿拉伯胶和明胶的混合溶液中，于组织捣碎机中搅拌3次，制成0/W型 乳剂;在50°C水浴下，缓慢滴加5%醋酸至pH为4，搅拌均匀，加入系统体积2倍量的蒸馏水进 行稀释，至冰浴中继续搅拌迅速降温至l〇°C，加入戊二醛固化lh，滴加10%Na0H溶液调至pH 为7，静置待其沉降，沉降物用蒸馏水洗至无戊二醛气味，过滤干燥，即得蛇床子多孔微囊； (3) 微囊温敏凝胶制备:采用冷法制备凝胶溶液，取18g的泊洛沙姆407、lg的泊洛沙姆 188、15mL的丙二醇加入到lOOmL蒸馏水中，搅拌使其分散均匀，于4°C条件下放置12h，使凝 胶充分溶胀而得到澄清溶液，在搅拌状态下加入步骤(2)制备的蛇床子多孔微囊，搅拌，制 成蛇床子微囊温敏凝胶。
【文档编号】A61P15/10GK106038479SQ201610588932
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年7月25日 公开号201610588932.1, CN 106038479 A, CN 106038479A, CN 201610588932, CN-A-106038479, CN106038479 A, CN106038479A, CN201610588932, CN201610588932.1
【发明人】杨婧, 王蔚, 王锐, 葛鹏玲, 韩东卫, 孙娜
【申请人】黑龙江中医药大学