一种三七/壳聚糖复合止血海绵的制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种三七/壳聚糖复合止血海绵的制备方法，属于医用敷料制备技术领域。本发明利用壳聚糖等制得N?丁二酰壳聚糖，增强渗液吸收性，提高抑菌活性，并经低温等离子体处理后，与泊洛沙姆接枝得亲水性壳聚糖，并与透明质酸钠进行氢键键合后，与三七总皂苷复合，冷冻干燥制得三七/壳聚糖复合止血海绵。本发明的有益效果是：本发明制备步骤简单，以三七与壳聚糖复合制备，增强其渗液吸收性，提高其抑菌活性，针对性强；所得产品呈弹性多孔海绵状，与创面贴合紧密，吸收渗液能力和止血效果好，抗菌凝血，抑菌活性高于传统创面敷料30.2%以上。
【专利说明】
一种三七/壳聚糖复合止血海绵的制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种三七/壳聚糖复合止血海绵的制备方法，属于医用敷料制备技术领域。
【背景技术】
[0002]医用敷料，是包伤的用品，用以覆盖疮、伤口或其他损害的医用材料。随着对创面愈合过程的病理生理的深入研究，人们对创面愈合过程的理解也越来越深刻，从而导致了医用创面敷料的不断改进与发展。今天，新型的创面护理用敷料相对于早期而言，已经发生了革命性的变化，而且多种不同性能的医用敷料可供临床护理人员选用。止血是紧急医疗救治的一个重要步骤，患者手术治疗、日常生活中出现突发性创伤时，均需进行快速止血，在恶劣的战争环境和复杂突出事件中的战伤急救治疗时，实现快速有效的止血尤为重要。止血海绵就是医用敷料的一类，已被广泛应用医用紧急止血治疗方面。医用止血海绵的吸水倍数和保水率越大，吸收和保持体液的作用就越强，越有利于创面伤口的恢复或手术过程中出血量的控制，合适的密度、透气率和膨胀率可对损伤处进行恰到好处的填塞，使止血效果更为显著。但目前的止血海绵吸收率和抑菌活性低，吸收渗液能力差，与创面贴合不紧密，导致材料止血效果差。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题:针对目前的止血海绵吸收率和抑菌活性低，吸收渗液能力差，与创面贴合不紧密，导致材料止血效果差的弊端，提供了一种利用壳聚糖等制得N-丁二酰壳聚糖，增强渗液吸收性，提高抑菌活性，并经低温等离子体处理后，与泊洛沙姆接枝得亲水性壳聚糖，并与透明质酸钠进行氢键键合后，与三七总皂苷复合，冷冻干燥制得三七/壳聚糖复合止血海绵的方法。本发明制备步骤简单，以三七与壳聚糖复合制备，增强其渗液吸收性，提高其抑菌活性，与创面贴合紧密，有效解决了材料吸收渗液能力和止血效果差问题。
[0004]为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是:
(1)称取2?3g三七根，用去离子水洗净并自然风干，然后加入粉碎机中粉碎，过60目筛，将过筛后的三七粉加入20?30mL质量浓度为75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在75?80°C下减压蒸发浓缩，回收乙醇，将浓缩液经大孔吸附树脂柱吸附静置I?3h，用去离子水对大孔吸附树脂洗脱至洗涤液不出现紫环，再用质量浓度为90%乙醇溶液继续洗脱，得三七总皂苷提取液，在75?80 °C下减压干燥，得三七总皂苷，备用；
(2)称取3?4g壳聚糖加入50?60mL无水乙醇中，以400?500r/min磁力搅拌，边搅拌缓慢加入1.2?1.5g丁二酸酐，混合后在40?45 °C恒温水浴下，反应I?2h，过滤，将滤渣在质量浓度为75%乙醇溶液中浸泡5?6h，过滤，并用质量浓度为75%乙醇溶液洗涤滤渣3?5次，将洗涤后滤渣置于70?72°C干燥箱中干燥2?3h，得N-丁二酰壳聚糖；
(3)称取2?3g上述N-丁二酰壳聚糖加入12?15mL质量浓度为1%醋酸溶液中，溶解静置至无气泡产生后，经流延真空干燥得壳聚糖膜，将壳聚糖膜置于低温等离子体箱中，在氩气氛围下，控制功率为50?60W，放电功率为10?12kHz，处理10?12min后，转入100?120mL质量浓度为3%泊洛沙姆水溶液中，在4?5°C氮气氛围下，进行接枝反应，过滤，干燥得壳聚糖一泊洛沙姆膜；
(4)分别称取2?3g上述壳聚糖一泊洛沙姆膜，I?2g透明质酸钠，0.2?0.5g步骤(I)备用的三七总皂苷，50?60mL去离子水混合均匀，用300W超声波超声分散30?40min，并用质量浓度为10%氢氧化钠溶液调节pH至5.0?5.5，再加入0.4?0.5g吐温60，于4?5°C下静置20?24h，再置于-70 °C低温下冻结20?24h，冻结后于真空冷冻干燥机中冷冻干燥45?48h，得多孔隙海绵状固体，即三七/壳聚糖复合止血海绵。
[0005]本发明的应用方法:本发明制得的三七/壳聚糖复合止血海绵可应用于各种外科手术、整形手术的术后切口或创面，使用前先用无菌纱布将创面周围皮肤擦干，再选用比创面大5?7cm的复合止血海绵覆盖创面，再以无菌纱布包扎，使复合止血海绵与创面紧贴，每隔2?3天更换即可。该复合止血海绵能抗菌凝血，抑菌活性高，吸收渗液能力和止血效果好，可有效防止灰尘和微生物的侵入，预防交叉感染，修复损伤组织，促进创面愈合。
[0006]本发明与其他方法相比，有益技术效果是:
(1)本发明制备步骤简单，以三七与壳聚糖复合制备，增强其渗液吸收性，提高其抑菌活性，针对性强；
(2)所得产品呈弹性多孔海绵状，与创面贴合紧密，吸收渗液能力和止血效果好，抗菌凝血，抑菌活性高于传统创面敷料30.2%以上。
【具体实施方式】
[0007]首先称取2?3g三七根，用去离子水洗净并自然风干，然后加入粉碎机中粉碎，过60目筛，将过筛后的三七粉加入20?30mL质量浓度为75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在75?80°C下减压蒸发浓缩，回收乙醇，将浓缩液经大孔吸附树脂柱吸附静置I?3h，用去离子水对大孔吸附树脂洗脱至洗涤液不出现紫环，再用质量浓度为90%乙醇溶液继续洗脱，得三七总皂苷提取液，在75?80 °C下减压干燥，得三七总皂苷，备用；再称取3?4g壳聚糖加入50?60mL无水乙醇中，以400?500r/min磁力搅拌，边搅拌缓慢加入1.2?1.5g 丁二酸酐，混合后在40?45°C恒温水浴下，反应I?2h，过滤，将滤渣在质量浓度为75%乙醇溶液中浸泡5?6h，过滤，并用质量浓度为75%乙醇溶液洗涤滤渣3?5次，将洗涤后滤渣置于70?72°C干燥箱中干燥2?3h，得N-丁二酰壳聚糖;然后称取2?3g上述N-丁二酰壳聚糖加入12?15mL质量浓度为1%醋酸溶液中，溶解静置至无气泡产生后，经流延真空干燥得壳聚糖膜，将壳聚糖膜置于低温等离子体箱中，在氩气氛围下，控制功率为50?60W，放电功率为10?12kHz，处理1?12min后，转入100?120mL质量浓度为3%泊洛沙姆水溶液中，在4?5 °C氮气氛围下，进行接枝反应，过滤，干燥得壳聚糖一泊洛沙姆膜;最后分别称取2?3g上述壳聚糖一泊洛沙姆膜，I?2g透明质酸钠，0.2?0.5g备用的三七总阜苷，50?60mL去离子水混合均匀，用300W超声波超声分散30?40min，并用质量浓度为10%氢氧化钠溶液调节pH至5.0?5.5，再加入0.4?0.58吐温60，于4?5°(:下静置20?2411，再置于-70°(:低温下冻结20?2411，冻结后于真空冷冻干燥机中冷冻干燥45?48h，得多孔隙海绵状固体，即三七/壳聚糖复合止血海绵。
[0008]实例I
首先称取2g三七根，用去离子水洗净并自然风干，然后加入粉碎机中粉碎，过60目筛，将过筛后的三七粉加入20mL质量浓度为75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在75°C下减压蒸发浓缩，回收乙醇，将浓缩液经大孔吸附树脂柱吸附静置lh，用去离子水对大孔吸附树脂洗脱至洗涤液不出现紫环，再用质量浓度为90%乙醇溶液继续洗脱，得三七总皂苷提取液，在75 °C下减压干燥，得三七总皂苷，备用；再称取3g壳聚糖加入50mL无水乙醇中，以400r/min磁力搅拌，边搅拌缓慢加入1.2g丁二酸酐，混合后在40 °C恒温水浴下，反应Ih，过滤，将滤渣在质量浓度为75%乙醇溶液中浸泡5h，过滤，并用质量浓度为75%乙醇溶液洗涤滤渣3次，将洗涤后滤渣置于70°C干燥箱中干燥2h，得N-丁二酰壳聚糖;然后称取2g上述N-丁二酰壳聚糖加入12mL质量浓度为1%醋酸溶液中，溶解静置至无气泡产生后，经流延真空干燥得壳聚糖膜，将壳聚糖膜置于低温等离子体箱中，在氩气氛围下，控制功率为50W，放电功率为1kHz，处理1min后，转入10mL质量浓度为3%泊洛沙姆水溶液中，在4°C氮气氛围下，进行接枝反应，过滤，干燥得壳聚糖一泊洛沙姆膜;最后分别称取2g上述壳聚糖一泊洛沙姆膜，Ig透明质酸钠，0.2g备用的三七总皂苷，50mL去离子水混合均匀，用300W超声波超声分散30min，并用质量浓度为10%氢氧化钠溶液调节pH至5.0，再加入0.4g吐温60，于4°C下静置20h，再置于-70°C低温下冻结20h，冻结后于真空冷冻干燥机中冷冻干燥45h，得多孔隙海绵状固体，即三七/壳聚糖复合止血海绵。
[0009]本发明制得的三七/壳聚糖复合止血海绵可应用于各种外科手术、整形手术的术后切口或创面，使用前先用无菌纱布将创面周围皮肤擦干，再选用比创面大5cm的复合止血海绵覆盖创面，再以无菌纱布包扎，使复合止血海绵与创面紧贴，每隔2天更换即可。该复合止血海绵能抗菌凝血，抑菌活性高，吸收渗液能力和止血效果好，可有效防止灰尘和微生物的侵入，预防交叉感染，修复损伤组织，促进创面愈合。
[0010]实例2
首先称取3g三七根，用去离子水洗净并自然风干，然后加入粉碎机中粉碎，过60目筛，将过筛后的三七粉加入25mL质量浓度为75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在78°C下减压蒸发浓缩，回收乙醇，将浓缩液经大孔吸附树脂柱吸附静置2h，用去离子水对大孔吸附树脂洗脱至洗涤液不出现紫环，再用质量浓度为90%乙醇溶液继续洗脱，得三七总皂苷提取液，在78 °C下减压干燥，得三七总皂苷，备用；再称取4g壳聚糖加入55mL无水乙醇中，以450r/min磁力搅拌，边搅拌缓慢加入1.3g丁二酸酐，混合后在43 °C恒温水浴下，反应2h，过滤，将滤渣在质量浓度为75%乙醇溶液中浸泡6h，过滤，并用质量浓度为75%乙醇溶液洗涤滤渣4次，将洗涤后滤渣置于71°C干燥箱中干燥3h，得N-丁二酰壳聚糖;然后称取3g上述N-丁二酰壳聚糖加入14mL质量浓度为1%醋酸溶液中，溶解静置至无气泡产生后，经流延真空干燥得壳聚糖膜，将壳聚糖膜置于低温等离子体箱中，在氩气氛围下，控制功率为55W，放电功率为I IkHz，处理I Imin后，转入I 1mL质量浓度为3%泊洛沙姆水溶液中，在5 °C氮气氛围下，进行接枝反应，过滤，干燥得壳聚糖一泊洛沙姆膜;最后分别称取3g上述壳聚糖一泊洛沙姆膜，2g透明质酸钠，0.4g备用的三七总皂苷，55mL去离子水混合均匀，用300W超声波超声分散35min，并用质量浓度为10%氢氧化钠溶液调节pH至5.3，再加入0.5g吐温60，于5°C下静置22h，再置于-70°C低温下冻结22h，冻结后于真空冷冻干燥机中冷冻干燥47h，得多孔隙海绵状固体，即三七/壳聚糖复合止血海绵。
[0011]本发明制得的三七/壳聚糖复合止血海绵可应用于各种外科手术、整形手术的术后切口或创面，使用前先用无菌纱布将创面周围皮肤擦干，再选用比创面大6cm的复合止血海绵覆盖创面，再以无菌纱布包扎，使复合止血海绵与创面紧贴，每隔3天更换即可。该复合止血海绵能抗菌凝血，抑菌活性高，吸收渗液能力和止血效果好，可有效防止灰尘和微生物的侵入，预防交叉感染，修复损伤组织，促进创面愈合。
[0012]实例3
首先称取3g三七根，用去离子水洗净并自然风干，然后加入粉碎机中粉碎，过60目筛，将过筛后的三七粉加入30mL质量浓度为75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在80°C下减压蒸发浓缩，回收乙醇，将浓缩液经大孔吸附树脂柱吸附静置3h，用去离子水对大孔吸附树脂洗脱至洗涤液不出现紫环，再用质量浓度为90%乙醇溶液继续洗脱，得三七总皂苷提取液，在80 0C下减压干燥，得三七总皂苷，备用；再称取4g壳聚糖加入60mL无水乙醇中，以500r/min磁力搅拌，边搅拌缓慢加入1.5g丁二酸酐，混合后在45 °C恒温水浴下，反应2h，过滤，将滤渣在质量浓度为75%乙醇溶液中浸泡6h，过滤，并用质量浓度为75%乙醇溶液洗涤滤渣5次，将洗涤后滤渣置于72°C干燥箱中干燥3h，得N-丁二酰壳聚糖;然后称取3g上述N-丁二酰壳聚糖加入15mL质量浓度为1%醋酸溶液中，溶解静置至无气泡产生后，经流延真空干燥得壳聚糖膜，将壳聚糖膜置于低温等离子体箱中，在氩气氛围下，控制功率为60W，放电功率为12kHz，处理12min后，转入120mL质量浓度为3%泊洛沙姆水溶液中，在5°C氮气氛围下，进行接枝反应，过滤，干燥得壳聚糖一泊洛沙姆膜;最后分别称取3g上述壳聚糖一泊洛沙姆膜，2g透明质酸钠，0.5g备用的三七总皂苷，60mL去离子水混合均匀，用300W超声波超声分散40min，并用质量浓度为10%氢氧化钠溶液调节pH至5.5，再加入0.5g吐温60，于5°C下静置24h，再置于-70°C低温下冻结24h，冻结后于真空冷冻干燥机中冷冻干燥48h，得多孔隙海绵状固体，即三七/壳聚糖复合止血海绵。
[0013]本发明制得的三七/壳聚糖复合止血海绵可应用于各种外科手术、整形手术的术后切口或创面，使用前先用无菌纱布将创面周围皮肤擦干，再选用比创面大7cm的复合止血海绵覆盖创面，再以无菌纱布包扎，使复合止血海绵与创面紧贴，每隔3天更换即可。该复合止血海绵能抗菌凝血，抑菌活性高，吸收渗液能力和止血效果好，可有效防止灰尘和微生物的侵入，预防交叉感染，修复损伤组织，促进创面愈合。
【主权项】
1.一种三七/壳聚糖复合止血海绵的制备方法，其特征在于具体制备步骤为: (1)称取2?3g三七根，用去离子水洗净并自然风干，然后加入粉碎机中粉碎，过60目筛，将过筛后的三七粉加入20?30mL质量浓度为75%乙醇中，回流提取3次，合并提取液，在75?80°C下减压蒸发浓缩，回收乙醇，将浓缩液经大孔吸附树脂柱吸附静置I?3h，用去离子水对大孔吸附树脂洗脱至洗涤液不出现紫环，再用质量浓度为90%乙醇溶液继续洗脱，得三七总皂苷提取液，在75?80 °C下减压干燥，得三七总皂苷，备用； (2)称取3?4g壳聚糖加入50?60mL无水乙醇中，以400?500r/min磁力搅拌，边搅拌缓慢加入1.2?1.5g丁二酸酐，混合后在40?45 °C恒温水浴下，反应I?2h，过滤，将滤渣在质量浓度为75%乙醇溶液中浸泡5?6h，过滤，并用质量浓度为75%乙醇溶液洗涤滤渣3?5次，将洗涤后滤渣置于70?72°C干燥箱中干燥2?3h，得N-丁二酰壳聚糖； (3)称取2?3g上述N-丁二酰壳聚糖加入12?15mL质量浓度为1%醋酸溶液中，溶解静置至无气泡产生后，经流延真空干燥得壳聚糖膜，将壳聚糖膜置于低温等离子体箱中，在氩气氛围下，控制功率为50?60W，放电功率为10?12kHz，处理10?12min后，转入100?120mL质量浓度为3%泊洛沙姆水溶液中，在4?5°C氮气氛围下，进行接枝反应，过滤，干燥得壳聚糖一泊洛沙姆膜； (4)分别称取2?3g上述壳聚糖一泊洛沙姆膜，I?2g透明质酸钠，0.2?0.5g步骤(I)备用的三七总皂苷，50?60mL去离子水混合均匀，用300W超声波超声分散30?40min，并用质量浓度为10%氢氧化钠溶液调节pH至5.0?5.5，再加入0.4?0.5g吐温60，于4?5°C下静置20?24h，再置于-70 °C低温下冻结20?24h，冻结后于真空冷冻干燥机中冷冻干燥45?48h，得多孔隙海绵状固体，即三七/壳聚糖复合止血海绵。
【文档编号】A61L24/00GK105963768SQ201610469758
【公开日】2016年9月28日
【申请日】2016年6月26日
【发明人】仇颖莹, 盛海丰
【申请人】仇颖莹