一种三七茎叶资源化制备医用止血海绵的方法
【专利摘要】本发明涉及一种三七茎叶资源化制备医用止血海绵的方法，属于医用材料制备领域。针对添加三七皂苷的止血材料，仅仅通过简单添加，无法改善其本身材料的局限性，止血效率差，感染率高，提供了一种通过将三七茎叶发酵处理，收集发酵菌液，再对三七茎叶有效发酵，细菌提取三七皂苷，通过对三七茎叶进行水解制备三七茎叶水解凝胶，将其与三七皂苷有机结合，本发明制备的医用止血海绵止血时间仅为55～58s，且在1～2月内可被人体完全吸收，且本发明制备过程简单，绿色环保无污染。
【专利说明】
一种三七茎叶资源化制备医用止血海绵的方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种三七茎叶资源化制备医用止血海绵的方法，属于医用材料制备领域。
【背景技术】
[0002]不论伤口是因创伤、烧伤、手术、急性或慢性伤口等造成，在愈合过程中有必要在伤口处以适当的覆盖物加以遮盖，这种遮盖物就称为敷料。其作用是保护伤口、减少感染、吸收分泌物、保持体温、促进愈合。传统的敷料多是以棉纤维制成的纱布、棉球等，虽有一定的吸湿和保护作用，但在愈合过程中易粘连伤口，从而造成二次损伤。
[0003]医用海绵的结构具有多孔性，对液体具有较大的吸收容量，对氧气和二氧化碳几乎能完全透过，其材料对伤口渗出物的处理是靠海绵型的水蒸气转运和吸收机理来控制渗出物的。医用海绵可制成各种厚度，并且对伤口有良好的保护功能，加入药物后还可促进伤口的愈合。但现有的止血海绵，虽然可以有效的对伤口进行修复，但是无法满足其对伤口有效止血的需求，其止血效率较低，伤口易感染，无法有效的被人体吸收，三七作为一种常见的止血草药，对其止血有着神奇的作用，但现有的止血材料仅仅添加三七皂苷，其物质本身还是壳聚糖或者胶原蛋白，三七皂苷所体现的止血效应较小，所以需要一种有效的、资源利用三七茎叶制备止血医用海绵的方法很有必要。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题:针对添加三七皂苷的止血材料，仅仅通过简单添加，无法改善其本身材料的局限性，止血效率差，感染率高，提供了一种通过将三七茎叶发酵处理，收集发酵菌液，再对三七茎叶有效发酵，细菌提取三七皂苷，通过对三七茎叶进行水解制备三七茎叶水解凝胶，将其与三七皂苷有机结合，有效的解决止血材料本身局限性，有效提尚医用海绵的止血效率。
[0005]为解决上述技术问题，本发明采用如下所述的技术方案是:
(1)收集成熟三七茎叶将其洗净并自然风干，随后碾磨并过筛，制备得65?80目三七茎叶粉末，随后按质量比2:1，将三七茎叶粉末与去离子水搅拌混合，并置于室温下发酵8?10天；
(2)待发酵完成后，对发酵液过滤并收集滤液，随后按重量份数计，分别称量45?65份去离子水、25?30份上述滤液、3?8份葡萄糖、3?5份KH2PC>4、2?5份MgSCk.7出0和2?7份青霉素置于培养皿中，在28?30°C下培养40?48h，制备得发酵菌液；
(3)按重量份数计，分别称量35?55份三七茎叶粉末、30?35份上制备的发酵菌液和15?30份无菌水置于发酵罐中，将发酵罐置于28?30°C下，在200?300r/min的摇床振荡培养5?7天；
(4)待培养完成后，对发酵液过滤分离，收集滤液备用，将滤饼用去离子水洗涤3?5次，制备得洗涤滤饼，再按重量份数计，分别称量15?35份洗涤滤饼、25?30份纤维素水解酶、5?10份聚乙稀醇、10?15份0.5mol/L氯化钾溶液和25?30份去离子水搅拌混合，再置于25?30°C下搅拌混合6?8h，制备得混合液，将混合液置于18000?20000r/min下离心分离10?15min，收集上层清液，制备得三七茎叶水解凝胶液；
(5)按质量比1:5，将上述备用的滤液与无水乙醇搅拌混合，随后置于1500?1800r/min下离心分离10?15min，收集上层清液并旋转蒸发至原体积的1/8，制备得三七皂苷细菌提取液，随后按重量份数计，分别称量45?65份冰醋酸溶液、10?20份三七皂苷细菌提取液和25?35份上述制备的三七茎叶水解凝胶液，搅拌混合并滴加冰醋酸质量1/10的聚乙烯醇，搅拌混合10?15min，制备得混合凝胶液；
(6)将混合凝胶液置于硅胶模具中，在O?5°C冰水浴下静置交联20?24h，随后将模具置于冷冻干燥装置中，干燥处理40?48h，即可制备得一种三七茎叶资源化制备的医用止血海绵。
[0006]本发明制备应用方法是:将上述制备的壳医用止血海绵用质量浓度75%酒精喷洒消毒，并用紫外灯照射半个小时灭菌，随后将其置于消毒后伤口处，用三层医用止血海绵覆盖并包扎。
[0007]本发明与其他方法相比，有益技术效果是:
(1)本发明制备的医用止血海绵止血时间仅为55?58s，且在I?2月内可被人体完全吸收；
(2)本发明制备过程简单，绿色环保无污染。
【具体实施方式】
[0008]首先(I)收集成熟三七茎叶将其洗净并自然风干，随后碾磨并过筛，制备得65?80目三七茎叶粉末，随后按质量比2:1，将三七茎叶粉末与去离子水搅拌混合，并置于室温下发酵8?10天;待发酵完成后，对发酵液过滤并收集滤液，随后按重量份数计，分别称量45?65份去离子水、25?30份上述滤液、3?8份葡萄糖、3?5份KH2PO4、2?5份MgSCk.7出0和2?7份青霉素置于培养皿中，在28?30°C下培养40?48h，制备得发酵菌液;按重量份数计，分别称量35?55份三七茎叶粉末、30?35份上制备的发酵菌液和15?30份无菌水置于发酵罐中，将发酵罐置于28?300C下，在200?300r/min的摇床振荡培养5?7天;待培养完成后，对发酵液过滤分离，收集滤液备用，将滤饼用去离子水洗涤3?5次，制备得洗涤滤饼，再按重量份数计，分别称量15?35份洗涤滤饼、25?30份纤维素水解酶、5?1份聚乙烯醇、1?15份0.5mol/L氯化钾溶液和25?30份去离子水搅拌混合，再置于25?30 °C下搅拌混合6?8h，制备得混合液，将混合液置于18000?20000r/min下离心分离10?15min，收集上层清液，制备得三七茎叶水解凝胶液;按质量比1:5，将上述备用的滤液与无水乙醇搅拌混合，随后置于1500?1800r/min下离心分离10?15min，收集上层清液并旋转蒸发至原体积的1/8，制备得三七皂苷细菌提取液，随后按重量份数计，分别称量45?65份冰醋酸溶液、10?20份三七皂苷细菌提取液和25?35份上述制备的三七茎叶水解凝胶液，搅拌混合并滴加冰醋酸质量1/10的聚乙烯醇，搅拌混合10?15min，制备得混合凝胶液;将混合凝胶液置于硅胶模具中，在O?5°C冰水浴下静置交联20?24h，随后将模具置于冷冻干燥装置中，干燥处理40?48h，即可制备得一种三七茎叶资源化制备的医用止血海绵。
[0009]实例I 首先收集成熟三七茎叶将其洗净并自然风干，随后碾磨并过筛，制备得65目三七茎叶粉末，随后按质量比2:1，将三七茎叶粉末与去离子水搅拌混合，并置于室温下发酵8天;待发酵完成后，对发酵液过滤并收集滤液，随后按重量份数计，分别称量45份去离子水、30份上述滤液、8份葡萄糖、5份KH2P04、5份MgSO4.7Η20和7份青霉素置于培养皿中，在28°C下培养40h，制备得发酵菌液;按重量份数计，分别称量35份三七茎叶粉末、30份上制备的发酵菌液和15份无菌水置于发酵罐中，将发酵罐置于28°C下，在200r/min的摇床振荡培养5天;待培养完成后，对发酵液过滤分离，收集滤液备用，将滤饼用去离子水洗涤3次，制备得洗涤滤饼，再按重量份数计，分别称量15份洗涤滤饼、30份纤维素水解酶、10份聚乙烯醇、15份
0.5mol/L氯化钾溶液和30份去离子水搅拌混合，再置于25 °C下搅拌混合6h，待搅拌混合完成后，制备得混合液，将混合液置于18000r/min下离心分离1min，收集上层清液，制备得三七茎叶水解凝胶液；按质量比1: 5，将上述备用的滤液与无水乙醇搅拌混合，随后置于1500r/min下离心分离1min，收集上层清液并旋转蒸发至原体积的1/8，制备得三七阜苷细菌提取液，随后按重量份数计，分别称量45份冰醋酸溶液、20份三七皂苷细菌提取液和35份上述制备的三七茎叶水解凝胶液，搅拌混合并滴加冰醋酸质量1/10的聚乙烯醇，搅拌混合1min，制备得混合凝胶液;将混合凝胶液置于硅胶模具中，在O °C冰水浴下静置交联20h，随后将模具置于冷冻干燥装置中，干燥处理40h，即可制备得一种三七茎叶资源化制备的医用止血海绵。
[0010]将上述制备的壳医用止血海绵用质量浓度75%酒精喷洒消毒，并用紫外灯照射半个小时灭菌，随后将其置于消毒后伤口处，用三层医用止血海绵覆盖并包扎。
[0011]实例2
首先收集成熟三七茎叶将其洗净并自然风干，随后碾磨并过筛，制备得72目三七茎叶粉末，随后按质量比2:1，将三七茎叶粉末与去离子水搅拌混合，并置于室温下发酵9天;待发酵完成后，对发酵液过滤并收集滤液，随后按重量份数计，分别称量50份去离子水、30份上述滤液、5份葡萄糖、5份KH2P04、5份MgSO4.7Η20和5份青霉素置于培养皿中，在29°C下培养44h，制备得发酵菌液;按重量份数计，分别称量40份三七茎叶粉末、30份上制备的发酵菌液和30份无菌水置于发酵罐中，将发酵罐置于29°C下，在250r/min的摇床振荡培养6天;待培养完成后，对发酵液过滤分离，收集滤液备用，将滤饼用去离子水洗涤4次，制备得洗涤滤饼，再按重量份数计，分别称量20份洗涤滤饼、30份纤维素水解酶、10份聚乙烯醇、15份
0.5mol/L氯化钾溶液和25份去离子水搅拌混合，再置于27 °C下搅拌混合7h，待搅拌混合完成后，制备得混合液，将混合液置于19000r/min下离心分离12min，收集上层清液，制备得三七茎叶水解凝胶液；按质量比1: 5，将上述备用的滤液与无水乙醇搅拌混合，随后置于1700r/min下离心分离12min，收集上层清液并旋转蒸发至原体积的1/8，制备得三七阜苷细菌提取液，随后按重量份数计，分别称量50份冰醋酸溶液、20份三七皂苷细菌提取液和30份上述制备的三七茎叶水解凝胶液，搅拌混合并滴加冰醋酸质量1/10的聚乙烯醇，搅拌混合12min，制备得混合凝胶液;将混合凝胶液置于硅胶模具中，在4°C冰水浴下静置交联22h，随后将模具置于冷冻干燥装置中，干燥处理44h，即可制备得一种三七茎叶资源化制备的医用止血海绵。
[0012]将上述制备的壳医用止血海绵用质量浓度75%酒精喷洒消毒，并用紫外灯照射半个小时灭菌，随后将其置于消毒后伤口处，用三层医用止血海绵覆盖并包扎。
[0013]实例3
首先收集成熟三七茎叶将其洗净并自然风干，随后碾磨并过筛，制备得80目三七茎叶粉末，随后按质量比2:1，将三七茎叶粉末与去离子水搅拌混合，并置于室温下发酵10天;待发酵完成后，对其过滤并收集滤液，随后按重量份数计，分别称量65份去离子水、25份上述滤液、3份葡萄糖、3份KH2P04、2份MgSO4.7Η20和2份青霉素置于培养皿中，在30°C下培养48h，制备得发酵菌液;按重量份数计，分别称量55份三七茎叶粉末、30份上制备的发酵菌液和15份无菌水置于发酵罐中，将发酵罐置于30°C下，在300r/min的摇床振荡培养7天;待培养完成后，对发酵液过滤分离，收集滤液备用，将滤饼用去离子水洗涤5次，制备得洗涤滤饼，再按重量份数计，分别称量35份洗涤滤饼、25份纤维素水解酶、5份聚乙烯醇、10份
0.5mol/L氯化钾溶液和25份去离子水搅拌混合，再置于30 °C下搅拌混合Sh，待搅拌混合完成后，制备得混合液，将混合液置于20000r/min下离心分离15min，收集上层清液，制备得三七茎叶水解凝胶液；按质量比1: 5，将上述备用的滤液与无水乙醇搅拌混合，随后置于1800r/min下离心分离15min，收集上层清液并旋转蒸发至原体积的1/8，制备得三七阜苷细菌提取液，随后按重量份数计，分别称量65份冰醋酸溶液、10份三七皂苷细菌提取液和25份上述制备的三七茎叶水解凝胶液，搅拌混合并滴加冰醋酸质量1/10的聚乙烯醇，搅拌混合15min，制备得混合凝胶液;将混合凝胶液置于硅胶模具中，在5°C冰水浴下静置交联24h，随后将模具置于冷冻干燥装置中，干燥处理48h，即可制备得一种三七茎叶资源化制备的医用止血海绵。
[0014]将上述制备的壳医用止血海绵用质量浓度75%酒精喷洒消毒，并用紫外灯照射半个小时灭菌，随后将其置于消毒后伤口处，用三层医用止血海绵覆盖并包扎。
【主权项】
1.一种三七茎叶资源化制备医用止血海绵的方法，其特征在于具体制备步骤为: (1)收集成熟三七茎叶将其洗净并自然风干，随后碾磨并过筛，制备得65?80目三七茎叶粉末，随后按质量比2:1，将三七茎叶粉末与去离子水搅拌混合，并置于室温下发酵8?10天； (2)待发酵完成后，对发酵液过滤并收集滤液，随后按重量份数计，分别称量45?65份去离子水、25?30份上述滤液、3?8份葡萄糖、3?5份KH2PO4、2?5份MgSCU.7出0和2?7份青霉素置于培养皿中，在28?30°C下培养40?48h，制备得发酵菌液； (3)按重量份数计，分别称量35?55份三七茎叶粉末、30?35份上制备的发酵菌液和15?30份无菌水置于发酵罐中，将发酵罐置于28?30°C下，在200?300r/min的摇床振荡培养5?7天； (4)待培养完成后，对发酵液过滤分离，收集滤液备用，将滤饼用去离子水洗涤3?5次，制备得洗涤滤饼，再按重量份数计，分别称量15?35份洗涤滤饼、25?30份纤维素水解酶、5?10份聚乙稀醇、10?15份0.5mol/L氯化钾溶液和25?30份去离子水搅拌混合，再置于25?30°C下搅拌混合6?8h，制备得混合液，将混合液置于18000?20000r/min下离心分离10?15min，收集上层清液，制备得三七茎叶水解凝胶液； (5)按质量比1:5，将上述备用的滤液与无水乙醇搅拌混合，随后置于1500?1800r/min下离心分离10?15min，收集上层清液并旋转蒸发至原体积的1/8，制备得三七皂苷细菌提取液，随后按重量份数计，分别称量45?65份冰醋酸溶液、10?20份三七皂苷细菌提取液和25?35份上述制备的三七茎叶水解凝胶液，搅拌混合并滴加冰醋酸质量1/10的聚乙烯醇，搅拌混合10?15min，制备得混合凝胶液； (6)将混合凝胶液置于硅胶模具中，在O?5°C冰水浴下静置交联20?24h，随后将模具置于冷冻干燥装置中，干燥处理40?48h，即可制备得一种三七茎叶资源化制备的医用止血海绵。
【文档编号】A61L24/00GK105920656SQ201610240117
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月18日
【发明人】裴俊, 高玉刚
【申请人】裴俊