一种明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，属于超氧化物歧化酶技术领域，步骤包括：粉碎并干燥明绿豆、提取明绿豆超氧化物歧化酶、热水浴处理、离心过滤得到上清液Ⅰ和滤渣Ⅰ、硫酸铵分级沉淀、过G?200葡聚糖凝胶柱、无水石油醚提取滤渣Ⅰ、95%乙醇浸提混合物Ⅱ、乙醚溶解膏状物Ⅰ、丙酮溶解膏状物Ⅱ、粉碎泡沫状固体、混合溶剂溶解粉末状提取物Ⅰ、在混合溶液Ⅰ中加入胆固醇、注射超氧化物歧化酶磷酸缓冲液、减压干燥和磷酸盐缓冲溶液溶解等步骤；本发明利用明绿豆提取的滤渣制备明绿豆超氧化物歧化酶脂质体，方法简单，制备的超氧化物歧化酶脂质体具有包封率高，性质稳定，包埋成本低，制备原料普遍等特点，有利于明绿豆的综合利用。
【专利说明】
-种明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法
技术领域
[0001] 本发明设及一种绿豆提取物及其制备方法，特别是设及一种明绿豆超氧化物歧化 酶脂质体的制备方法。
【背景技术】
[0002] 绿豆（Ki狎a rac/iaie )，为豆科草本植物绿豆（Phaseolusradiatus)的成熟种 子。现代药理研究表明绿豆具有抗菌抑菌、抗肿瘤、抗氧化、提高免疫力、降血脂、及解毒等 作用。
[0003] 明光绿豆下简称"明绿豆"），主产于明光市明东、石巧、涧溪、管店等乡镇。W其 色泽晶奎碧绿，粒大皮薄、汤清易烂，清香可口等特点，质量为全国之冠，被誉为"明绿"，曾 经被作为贡品。2008年"明光绿豆"被列为"国家地理标志保护产品"，并获得注册商标。
[0004] 经检测：明光绿豆的种子中脂肪含量为0.90%，灰分含量为3.70%，绝对水分含量为 11.80%，蛋白质含量为25.26%，碳水化合物含量为58.34%。
[0005] 超氧化物歧化酶(Superoxide dismu化se，S0D)，是广泛存在于生物体内的一类金 属蛋白酶，具有催化超氧离子自由基(〇2^)歧化反应的特异作用，被医学界誉为"人体清道 夫"。超氧化物歧化酶能快速有效地清除体内的超氧自由基，在防止生物体免受超氧自由基 损伤，抗福射、抗肿瘤、提高人体免疫力、抗压力和疲劳，预防局部缺血再灌注损伤，治疗动 脉血管粥样硬化，治疗脂溢性皮肤炎症及延缓机体衰老等方面起到重要作用，在食品、农业 及化妆品行业的应用也越来越广泛。但是过去大多从血液中提取，不仅工艺复杂、制备成本 高、不易常溫保存，且存在艾滋病等血液病毒交叉感染的潜在危险，国际卫生组织已停止动 物性超氧化物歧化酶的使用。植物超氧化物歧化酶则有较高的使用安全性，所W，从植物源 中获取超氧化物歧化酶正成为热点。
[0006] 经检索，尚未检索到明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法。
[0007]
【发明内容】
[0008] 本发明的目的在于提供一种综合利用明绿豆的自身成分制备明绿豆超氧化物歧 化酶脂质体的方法。本发明提供了一种明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，具体流 程步骤为： a) 粉碎并干燥明绿豆； b) 超声辅助pH7憐酸盐缓冲液提取明绿豆超氧化物歧化酶，得到混合物I C)将混合物I用42~45 °C的热水水浴^化； d) 将水浴处理后的混合物I在溫度2~6 °C的条件下离屯、，离屯、后过滤得到上清液I和滤 渣I; e) 将硫酸锭加入到上清液I中，配制成硫酸锭含量为30~38%的溶液，静置后离屯、，过滤 得到上清液Π 和滤渣Π ，取上清液Π ，继续加硫酸锭，至上清液Π 的硫酸锭含量为60~70%， 完全溶解后二次离屯、，二次过滤得到上清液虹和沉淀物I; f) 将沉淀物I复溶至水中，用pH6.8±0.1的憐酸盐缓冲液进行透析，透析完成后过G- 200葡聚糖凝胶柱，得到明绿豆超氧化物歧化酶憐酸盐缓冲液； g) 将滤渣I用无水石油酸提取，提取完成后取固体部分，称为混合物Π ; h) 将混合物Π 用95%乙醇溶液浸提，过滤去除不溶物并将滤液真空浓缩，得到膏状物 I; i) 用乙酸溶解真空浓缩得到的膏状物I，溶解后过滤，并将滤液置于20~30°C的环境中 减压蒸发，得到膏状物Π ; j) 再用丙酬溶解膏状物Π ，溶解后过滤，并将滤液真空冷冻干燥，得到泡沫状固体； k) 将泡沫状固体粉碎，得到粉末状提取物I; l) 将粉末状提取物I完全溶解在甲醇、乙醇、正己烧的混合溶剂中，得到混合溶液I; m) 在混合溶液I中加入胆固醇，得到混合溶液Π ; η)所述明绿豆超氧化物歧化酶憐酸盐缓冲液加入到混合溶液Π 中，料液比为1:4~1:5， 得到混合溶液虹； O) 减压干燥去除混合溶液m中溶剂，得到超氧化物歧化酶脂质膜； P) 在超氧化物歧化酶脂质膜中加入pH7.2 ± 0.1的憐酸盐缓冲溶液，使超氧化物歧化酶 脂质膜完全溶解，得到稳定的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体。
[0009] 1.根据权利要求1所述的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，其特征在于： 在步骤j中，所述混合溶剂各成分的配比为：甲醇：乙醇:正己烧=70:50:1。
[0010] 2.根据权利要求1所述的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，其特征在于： 在步骤k中，所述胆固醇的添加量为0.3~2.5%(W/V)。
[0011] 3.根据权利要求1所述的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，其特征在于： 在步骤m中，所述减压干燥的条件为在45~55°C，0.(Π ~0.2MP的条件下减压干燥。
[0012] 有益效果
【申请人】在明绿豆超氧化物歧化酶的提取过程中，发现采用提取过程中的滤渣I作为原 料，进一步通过95%乙醇溶液，乙酸和丙酬提纯后，再与提取的超氧化物歧化酶、胆固醇混合 后，经过磁力揽拌，减压干燥等手段，即可制备出稳定性较高的超氧化物歧化酶脂质体。得 到的活性超氧化物歧化酶脂质体的活性包埋率为:88.73%，可见，本发明的超氧化物歧化酶 未影响到超氧化物歧化酶的活性。
[0013]本发明从明绿豆自身寻找出保护明绿豆超氧化物歧化酶的方法，不仅能够保护从 明绿豆中提取出来的超氧化物歧化酶，而且综合利用了明绿豆超氧化物歧化酶提取过程中 的废料，包埋的物质为明绿豆自身的天然成分，在提取明绿豆超氧化物歧化酶的同时提取 明绿豆中的天然包埋成分，并连续对提取出来的超氧化物歧化酶进行包埋处理，制备出的 超氧化物歧化酶脂质体具有包封率高，性质稳定，包埋成本低，制备原料普遍等特点。该制 备脂质体的方法简单，完全融合在明绿豆超氧化物歧化酶的提取工艺中，仅仅采用了超氧 化物歧化酶提取后的废弃物，对明绿豆超氧化物歧化酶进行包埋处理的方法。本发明提供 了一种全新的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法。
[0014]
【附图说明】
[0015] 图1:经过实施例1的方法制备的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体电子显微镜图像； 图2:超声辅助提取的明绿豆超氧化物歧化酶电子显微镜图像。
[0016]
【具体实施方式】
[0017]下面结合具体实施例子进一步阐明本发明，应理解运些实施例仅用于说明本发 明，而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域的技术人员对本发明各种等 价形式的修改均落于本申请所附权利要求所规定的范围。
[001 引 实施例1 一种明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，采用明绿豆、胆固醇为原料制备而成， 明绿豆由安徽燕之坊食品有限公司提供，胆固醇为食品级。
[0019] 具体操作方法包括如下步骤： 1.粉碎并干燥明绿豆:用粉碎设备将明绿豆粉碎，采用真空干燥设备在溫度为40°C，真 空度20-80k化的条件下减压干燥，并过80目的筛，得到明绿豆粉末。
[0020] 2.提取明绿豆超氧化物歧化酶:将明绿豆粉末加入抑7憐酸盐缓冲液，采用液固比 22:l(mL/g)、超声功率120W，溫度为44°C的条件下超声辅助提取明绿豆粉末90min，提取完 成后得到混合物I。
[0021] 3.热水浴处理:将上述混合物I用44 °C的热水水浴化。
[0022] 4.离屯、：将水浴处理后的混合物I在溫度4°C，离屯、转数100(K)r/min的条件下离屯、 20 min,过滤得到上清液I和滤渣I。
[0023] 5.硫酸锭分级沉淀:将固体硫酸锭粉末加入上清液I中，用上清液I配制硫酸锭含 量为35%的溶液，磁力揽拌30 min,在4°C的环境中静置4 h，Wl2000 r/min的转数离屯、20 min;离屯、后得到上清液Π ，取上清液Π ，继续加固体硫酸锭粉末，至上清液Π 的硫酸锭含量 为65%，然后在4°C的环境中，继续W12000 r/min的转数离屯、20 min,得到上清液虹和沉淀 物I。
[0024] 6.过G-200葡聚糖凝胶柱:将沉淀物I复溶至水中，于pH 6.7的憐酸盐缓冲液中透 析，过G-200葡聚糖凝胶柱，得到明绿豆超氧化物歧化酶憐酸盐缓冲液。
[0025] 7.无水石油酸提取滤渣：将滤渣I在40°C的条件下，用无水石油酸回流提取6~12 h，提取完成后过滤使其固液分离，得到的固体部分称为混合物Π 。
[0026] 8.95%乙醇浸提混合物Π :将混合物Π 加入到95%乙醇溶液中，其中，料液比为1: 1.5(m/V)，在40°C条件下浸提地，浸提完成后，过滤去除不溶物并将滤液真空浓缩，得膏状 物I。
[0027] 9.乙酸溶解膏状物I:用乙酸溶解真空浓缩得到的膏状物I，震荡揽拌，当膏状物不 减少后，过滤，并将滤液置于25 °C的环境中减压蒸发，得到膏状物Π ， 10.丙酬溶解膏状物Π :同理，再用丙酬溶解膏状物Π ，充分揽拌，当膏状物Π 不减少 后，过滤，并将滤液真空冷冻干燥，得到泡沫状固体。
[00%] 11.粉碎泡沫状固体:将泡沫状固体粉碎，粉末状提取物I。
[0029] 12.混合溶剂溶解粉末状提取物I:将粉末状提取物I完全溶解在甲醇、乙醇、正己 烧的混合溶剂中，料液比为:20.82 mg/mL，得到混合溶液I，其中，所述混合溶剂各成分的配 比为：甲醇：乙醇：正己烧=70:50:1。
[0030] 13.在混合溶液I中加入胆固醇:在混合溶液I中加入0.45%(m/V)胆固醇，得到混合 溶液丑。
[0031 ] 14.注射超氧化物歧化酶憐酸缓冲液:用注射器或注射装置将步骤6得到的明绿豆 超氧化物歧化酶憐酸盐缓冲液注射到混合溶液Π 中，料液比为1:4.1，磁力揽拌30 min，得 到混合溶液虹。
[0032] 15.旋转蒸发:在55°C，0.1 MP的条件下旋转蒸发去除混合溶液虹中溶剂，得到超氧 化物歧化酶脂质膜。
[0033] 16.憐酸盐缓冲溶液溶解:在超氧化物歧化酶脂质膜中加入抑7.2的憐酸盐缓冲 溶液，使超氧化物歧化酶脂质膜完全溶解，得到稳定的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体。
[0034]
【申请人】采用包封率评价明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的效果，方法如下： 采用邻苯Ξ酪法测定包封前超氧化物歧化酶酶活性，方法见GB/T5009.171-2003。
[0035] 制备脂质体后，取明绿豆超氧化物歧化酶脂质体1. OmL，加入正丙醇至3. OmL破乳， 使类脂双分子层溶解从而释放出超氧化物歧化酶，采用邻苯Ξ酪法测定碎化后超氧化物歧 化酶活性，并计算明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的活性包封百分率。
[0036]
【申请人】将本实施例制备的超氧化物歧化酶脂质体放在电子显微镜中，得到的结构 图如图1所示，而直接提取出来的超氧化物歧化酶的结构图如图2所示。图中明显看出，超氧 化物歧化酶脂质体的表面光滑，紧密无空隙，由此可见脂质体在超氧化物歧化酶的表面形 成了一层保护膜，从而保护酶的活性相对稳定。经过检测，本实施例得到的超氧化物歧化酶 脂质体的活性包封率为:88.73%。可见整个制备工艺制备的超氧化物歧化酶脂质体对超氧 化物歧化酶的活性保护作用显著。
[0037]
【申请人】对超氧化物歧化酶和本实施例的超氧化物歧化酶脂质体溫度耐受性做了 对比实验，结果显示，超氧化物歧化酶脂质体在70 °C水浴恒溫60 min后，残余活力为90%， 而与之对比的游离超氧化物歧化酶在同样条件下的残余活力为75% ;80°C水浴恒溫150 min处理条件下，本实施例超氧化物歧化酶脂质体的相对活力为90%，游离的超氧化物歧化 酶仅为2%，说明本发明制备的超氧化物歧化酶脂质体对超氧化物歧化酶具有很好的保护作 用。
[0038]
【申请人】模拟人体消化环境，在37°C的条件下分别用胃蛋白酶处理游离的超氧化物 歧化酶和超氧化物歧化酶脂质体，结果显示，处理后游离的超氧化物歧化酶的活性是处理 前的5.2%，而处理后超氧化物歧化酶脂质体的活性是处理前的72.6%，由此可见，本发明制 备的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体对明绿豆超氧化物歧化酶有显著的保护作用。
[0039] 实施例2 一种明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，采用明绿豆、胆固醇为原料制备而成， 明绿豆由安徽燕之坊食品有限公司提供，胆固醇为食品级。
[0040] 具体操作方法包括如下步骤： 1.粉碎并干燥明绿豆:用粉碎设备将明绿豆粉碎，采用真空干燥设备在溫度为50°C，真 空度20-80k化的条件下减压干燥，并过100目的筛，得到明绿豆粉末。
[0041] 2.提取明绿豆超氧化物歧化酶:将明绿豆粉末加入抑7憐酸盐缓冲液，采用超声辅 助法提取明绿豆粉末，提取完成后得到明绿豆粉末和憐酸盐缓冲液的混合物，命名为:混合 物I。
[0042] 3.热水浴处理:将混合物I用45°C的热水水浴化。
[0043] 4.离屯、：将水浴处理后的混合物I在溫度6°C的条件下离屯、，离屯、后过滤得到上清 液I和滤渣I。
[0044] 5.硫酸锭分级沉淀:将固体硫酸锭粉末加入上清液I中，用上清液I配制硫酸锭含 量为38%的溶液，磁力揽拌，在6°C的环境中静置，静置后离屯、，得到上清液Π 和滤渣Π ，取上 清液Π ，继续加固体硫酸锭粉末，至上清液Π 的硫酸锭含量为70%，完全溶解后二次离屯、，得 到上清液虹和沉淀物I。
[0045] 6.过G-200葡聚糖凝胶柱:将沉淀物I复溶至水中，于pH 6.8的憐酸盐缓冲液中透 析，过G-200葡聚糖凝胶柱，得到明绿豆超氧化物歧化酶憐酸盐缓冲液。
[0046] 7.无水石油酸提取滤渣:将滤渣I在45°C的条件下，用无水石油酸逆向回流提取3~ 8 h，提取完成后过滤使其固液分离，得到的固体部分称为混合物Π 。
[0047] 8.95%乙醇浸提混合物Π :将混合物Π 加入到95 %乙醇溶液中，浸提化后，过滤去 除不溶物并将滤液真空浓缩，得膏状物I。
[004引9.乙酸溶解膏状物I:用乙酸溶解真空浓缩得到的膏状物I，完全溶解后过滤，并将 滤液置于20~30°C的环境中减压蒸发，得到膏状物Π ， 10.丙酬溶解膏状物Π :同理，再用丙酬溶解膏状物Π ，完全溶解后过滤，并将滤液真空 冷冻干燥，得到泡沫状固体。
[0049] 11.粉碎泡沫状固体:将泡沫状固体粉碎，粉末状提取物I。
[0050] 12.混合溶剂溶解粉末状提取物I:将粉末状提取物I完全溶解在甲醇、乙醇、正己 烧的混合溶剂中，得到混合溶液I，其中，所述混合溶剂各成分的配比为：甲醇：乙醇:正己烧 =70:50:1。
[0051 ] 13.在混合溶液I中加入胆固醇：在混合溶液I中加入0.3~2.5%(W/V)胆固醇，得到 混合溶液Π 。
[0052] 14.注射超氧化物歧化酶憐酸缓冲液:将步骤6得到的明绿豆超氧化物歧化酶憐酸 盐缓冲液加入到混合溶液Π 中，料液比为1:4.1，揽拌30 min，得到混合溶液虹。
[0053] 15.减压干燥:在45°C，0.01MP的条件下减压干燥去除混合溶液虹中溶剂，得到超 氧化物歧化酶脂质膜。
[0054] 16.憐酸盐缓冲溶液溶解:在超氧化物歧化酶脂质膜中加入抑7.2的憐酸盐缓冲 溶液，使超氧化物歧化酶脂质膜完全溶解，得到稳定的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体。
[0化5] 实施例3 一种明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，采用明绿豆、胆固醇为原料制备而成， 明绿豆由安徽燕之坊食品有限公司提供，胆固醇为食品级。
[0056] 具体操作方法包括如下步骤： 1.粉碎并干燥明绿豆:用粉碎设备将明绿豆粉碎，采用真空干燥设备干燥明绿豆，并过 100目的筛，得到明绿豆粉末。
[0057] 2.提取明绿豆超氧化物歧化酶:将明绿豆粉末加入抑7憐酸盐缓冲液，采用超声辅 助法提取明绿豆粉末，提取完成后得到明绿豆粉末和憐酸盐缓冲液的混合物，命名为:混合 物I。
[0化引 3.热水浴处理:将混合物I用42Γ的热水水浴化。
[0059] 4.离屯、：将水浴处理后的混合物I在溫度2°C的条件下离屯、，离屯、后过滤得到上清 液I和滤渣I。
[0060] 5.硫酸锭分级沉淀:将固体硫酸锭粉末加入上清液I中，用上清液I配制硫酸锭含 量为30%的溶液，揽拌，在2°C的环境中静置，静置后离屯、，得到上清液Π 和滤渣Π ，取上清液 Π ，继续加固体硫酸锭粉末，至上清液Π 的硫酸锭含量为60%，完全溶解后二次离屯、，得到上 清液虹和沉淀物I。
[0061] 6.过G-200葡聚糖凝胶柱:将沉淀物I复溶至水中，于pH 6.8±0.1的憐酸盐缓冲液 中透析，过G-200葡聚糖凝胶柱，得到明绿豆超氧化物歧化酶憐酸盐缓冲液。
[0062] 7.无水石油酸提取滤渣:将滤渣I在50°C的条件下，用无水石油酸提取10~18 h，提 取完成后过滤使其固液分离，得到的固体部分称为混合物Π 。
[0063] 8.95%乙醇浸提混合物Π :将混合物Π 加入到95 %乙醇溶液中，浸提化后，过滤去 除不溶物并将滤液真空浓缩，得膏状物I。
[0064] 9.乙酸溶解膏状物I:用乙酸溶解真空浓缩得到的膏状物I，完全溶解后过滤，并将 滤液置于20~30°C的环境中减压蒸发，得到膏状物Π ， 10.丙酬溶解膏状物Π :同理，再用丙酬溶解膏状物Π ，完全溶解后过滤，并将滤液真空 冷冻干燥，得到泡沫状固体。
[0065] 11.粉碎泡沫状固体:将泡沫状固体粉碎，粉末状提取物I。
[0066] 12.混合溶剂溶解粉末状提取物I:将粉末状提取物I完全溶解在甲醇、乙醇、正己 烧的混合溶剂中，得到混合溶液I，其中，所述混合溶剂各成分的配比为：甲醇：乙醇:正己烧 =70:50:1。
[0067] 13 .在混合溶液I中加入胆固醇：在混合溶液I中加入0.3~2.5%(W/V)胆固醇胆固 醇，得到混合溶液Π 。
[0068] 14.注射超氧化物歧化酶憐酸缓冲液:将步骤6得到的明绿豆超氧化物歧化酶憐酸 盐缓冲液加入到混合溶液Π 中，料液比为1:5，揽拌30 min，得到混合溶液虹。
[0069] 15.减压干燥:在50°C，0.2MP的条件下减压干燥去除混合溶液虹中溶剂，得到超氧 化物歧化酶脂质膜。
[0070] 16.憐酸盐缓冲溶液溶解:在超氧化物歧化酶脂质膜中加入抑7.2±0.1的憐酸盐 缓冲溶液，使超氧化物歧化酶脂质膜完全溶解，得到稳定的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体。
【主权项】
1. 一种明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，所述制备方法包括步骤:粉碎并干 燥明绿豆，超声辅助PH7磷酸盐缓冲液提取明绿豆超氧化物歧化酶，得到混合物I;其特征在 于，所述制备方法还包括如下步骤： 将混合物I用42~45 °C的热水水浴1~3h; 将水浴处理后的混合物I在温度2~6 °C的条件下离心，离心后过滤得到上清液I和滤渣 I; 将硫酸铵加入到上清液I中，配制成硫酸铵含量为30~38%的溶液，静置后离心，过滤得 到上清液Π 和滤渣Π ，取上清液Π ，继续加硫酸铵，至上清液Π 的硫酸铵含量为60~70%，完 全溶解后二次离心，二次过滤得到上清液m和沉淀物I; 将沉淀物I复溶至水中，用pH 6.8±0.1的磷酸盐缓冲液进行透析，透析完成后过G-200 葡聚糖凝胶柱，得到明绿豆超氧化物歧化酶磷酸盐缓冲液； 将滤渣I用无水石油醚提取，提取完成后取固体部分，称为混合物Π ; 将混合物Π 用95%乙醇溶液浸提，过滤去除不溶物并将滤液真空浓缩，得到膏状物I; 用乙醚溶解真空浓缩得到的膏状物I，溶解后过滤，并将滤液置于20~30°C的环境中减 压蒸发，得到膏状物Π ; 再用丙酮溶解膏状物Π ，溶解后过滤，将滤液真空冷冻干燥，得到泡沫状固体； 将泡沫状固体粉碎，得到粉末状提取物I; 将粉末状提取物I完全溶解在甲醇、乙醇、正己烷的混合溶剂中，得到混合溶液I; 在混合溶液I中加入胆固醇，得到混合溶液Π ; 所述明绿豆超氧化物歧化酶磷酸盐缓冲液加入到混合溶液Π 中，料液比为1:4~1: 5,得 到混合溶液m; 减压干燥去除混合溶液m中溶剂，得到超氧化物歧化酶脂质膜； 在超氧化物歧化酶脂质膜中加入pH 7.2 ± 0.1的磷酸盐缓冲溶液，使超氧化物歧化酶 脂质膜完全溶解，得到稳定的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体。2. 根据权利要求1所述的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，其特征在于:在步 骤j中，所述混合溶剂各成分的配比为：甲醇：乙醇:正己烷=70:50:1。3. 根据权利要求1所述的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，其特征在于:在步 骤k中，所述胆固醇的添加量为0.3~2.5%(W/V)。4. 根据权利要求1所述的明绿豆超氧化物歧化酶脂质体的制备方法，其特征在于:在步 骤m中，所述减压干燥的条件为在45~55°C，0.01~0.2MP的条件下减压干燥。
【文档编号】A61P39/00GK105920591SQ201610275288
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月29日
【发明人】李梅青, 王星, 张瑜, 代蕾莉
【申请人】安徽农业大学