Virosaine A的哌嗪基和咪唑基衍生物的组合物在抗心衰药物中的应用
【专利摘要】本发明涉及有机合成和药物化学领域，具体涉及组合物及其在制备抗心衰药物上的用途。本发明公开了一种组合物及其制备方法。药理学实验表明，本发明的组合物具有抗心衰作用，具有开发抗心衰药物的价值。
【专利说明】
Vi rosa i ne A的脈瞎基和咪性基衍生物的组合物在抗心衰药 物中的应用
技术领域
[0001] 本发明设及有机合成和药物化学领域，具体设及组合物、制备方法及其用途。
【背景技术】
[0002] 屯、衰化ear化ilure，HF)是指屯、脏功能异常导致屯、脏累血量不能满足组织代谢需 要的一种病理生理状态。病因是屯、脏负荷过重、屯、肌本身舒张受限，及任何原因导致的初始 屯、肌损伤;而感染、贫血、妊娠、分娩、屯、律素乱、肺栓塞、甲亢、糖尿病、抑制屯、脏药诱发加重 HF。发病机理过去认为HF发生发展的机制是血流动力学异常；20世纪80年代后期认识到神 经-内分泌激素的激活起重要作用(交感?肥TRAST等激活）；90年代W后逐渐明确了 "屯、肌重 塑"（remodelling)是导致屯、衰的发生发展的基本机制。屯、衰又分为急性屯、衰和慢性屯、衰。
[0003] 目前对于屯、衰的治疗，临床上没有特效药物，大部分药物在缓解屯、衰症状的同时 具有不可避免的毒副作用，从天然产物中寻找化合物或先导化合物并进行结构修饰获得其 衍生物，从而得到高效低毒的潜在药物最有重要价值。
[0004] 本发明设及的化合物I是一个2012年发表（Bing-Xin Zhao et al .， 2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096- 3099)的化合物，我们对化合物I进行了结构修饰，获得了两个新的衍生物即化合物HI和化 合物IV，并用化合物ΠΙ和化合物IV制备了组合物并对该组合物抗抗屯、衰活性进行了评价， 其具有抗屯、衰活性。
【发明内容】
[0005] 本发明公开了一个新的组合物，该组合物由化合物ΙΠ 和化合物IV组成，该组合物 中化合物ΠI和化合物IV的质量百分数分别为65 %和35 %。
[0006]
[0007] 本发明公开的组合物可W制成药学上可接受的盐或药学上可接受的载体。
[0008] 药效学实验表明，本发明的组合物具有较好的抗屯、衰作用。本发明的药学上可接 受的盐具有同样的药效。
[0009] W下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加 W限定。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1化合物Virosaine A的制备
[0011] 化合物Virosaine A(I)的制备方法参照Bing-Xin Zhao等人发表的文献(Bing- Xin Zhao et al.,2012.Virosaines A and B,Two New Birdcage-Shaped Securinega Alkaloids with an Unprecedented Skeleton from Flueggea virosa.Organic Letters 14(2012)3096-3099)的方法。
[0012]
[0013] 实施例SVirosaine A的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0014] 将化合物I(235mg，1.00mmol)溶于20mL苯，向溶液中加入四下基漠化锭（TBAB) (0.08邑），1，2-二漠乙烧(3.760邑，20.00臟〇1)和51^的50%氨氧化钢溶液。混合物在35摄氏 度揽拌化。她之后将反应液倒入冰水中，立即用二氯甲烧萃取两次，合并有机相溶液。然后 对有机相溶液依次用水和饱和食盐水洗涂3次，再用无水硫酸钢干燥，最后减压浓缩去除溶 剂得到产物粗品。产物粗品用硅胶柱层析纯化(流动相为:石油酸/丙酬=100:1.0，v/v)，收 集栋色集中洗脱带并挥去溶剂即得到化合物II的栋色粉末(26Img，78% )。
[001 引 iHMffi(500MHz，DMS0-d6)S5.91(s，lH)，4.07(s，lH)，3.81(s，2H)，3.59(s，lH)， 3.43(s，2H)，3.33(s，lH)，2.26(s，lH)，1.58(d J = 9.8Hz，3H)，1.41(s，2H).
[0016] "C 醒R(125MHz，DMS0-d6)Sl71.81(s)，106.71(s)，79.95(s)，74.33(s)，69.81 (s),66.68(s),44.21(s),35.56(s),33.28(s),25.85(s),21.88(s).
[0017] HRMS(ESI)m/z[M+扣+calcd for Cm出7BrN04:342.0:341;found 342.0:343.
[001 引
[0019] 实施例3Virosaine A的0-(赃嗦基）乙基衍生物（III)的合成
[0020] 将化合物II(17Img，0.5mmo 1)溶于20mL乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟(690mg， S.Ommol)，舰化钟（168mg，1 .Ommol)和无水赃嗦（3446mg，40mmol)，混合物加热回流池。反应 结束后将反应液倒入冰水中，用等量二氯甲烧萃取2次，合并有机相。依次用水和饱和食盐 水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗 品用硅胶柱层析纯化(流动相为:石油酸/丙酬= 100: l.〇，v/v)，收集栋色集中洗脱带并挥 去溶剂即得到化合物π I的淡栋色固体(123.2mg，71 % )。
[00別]1h 醒R(500MHz，DMS0-d6)S5.90(s，lH)，4.04(s，lH)，3.59(s，lH)，3.50(s，2H), 3.40(d J = 65.9Hz，lH)，2.64(s，4H)，2.54(s，2H)，2.31(s，4H)，2.22(s，lH)，1.62(s，2H), 1.56(s，lH)，1.43(s，2H)，0.97(s，lH).
[0022] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl71.84(s)，106.72(s)，79.94(s)，74.33(s)，66.72(d， J=9.2Hz),54.45(s),54.16(s),45.25(s),44.20(s),35.56(s),25.86(s),21.87(s).
[0023] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for Cl姐26化〇4:348.1923;found:：M8.1927。
[0024]
[0025]
[0026] 实施例4Virosaine A的0-(咪挫基）乙基衍生物（IV)的合成
[0027] 将化合物II(17Img，0.5mmo 1)溶于25mL乙腊当中，向其中加入无水碳酸钟(690mg， 5. Ommo 1)，舰化钟（2 5 2mg，1.5mmo 1)和咪挫（8 7 Omg，1 Ommo 1)，混合物加热回流化。反应结束 后将反应液倒入25mL冰水中，用等量二氯甲烧萃取3次，合并有机相。依次用水和饱和食盐 水洗涂合并之后的有机相，再用无水硫酸钢干燥，减压浓缩去除溶剂得到产物粗品。产物粗 品用硅胶柱层析纯化(流动相为:石油酸/丙酬= 100:0.3，v/v)，收集栋色集中洗脱带并挥 去溶剂即得到化合物IV的淡栋色固体(144. lmg，71%)。
[002引 1h NMR(500MHz，DMS0-d6)S7.86(s，lH)，7.12(s，lH)，6.71(s，lH)，5.99(s，lH), 4.09(s，lH)，3.89(d，J=16.4Hz，2H)，3.80(s，2H)，3.58(s，lH)，3.35(s，lH)，2.31(s，lH)， 1.68(s,lH),1.58(s,2H),1.44(s,2H).
[0029] ?3〇 NMR(125MHz，DMS0-d6)i3c 醒R(125MHz，Common 醒R Solvents)Sl71.82(s), 139.64(s)，128.67(s)，119.31(s)，106.70(s)，79.92(s)，74.31(s)，67.61(s)，66.66(s), 44.20(s),43.75(s),35.52(s),25.85(s),21.86(s).
[0030] HRMS(ESI):m/z[M+H]+calcd for Cl讯20化〇4:330.1454;found:330.1458。
[0031]
[0032] 实施例5组合物抗屯、衰活性
[0033] (一)实验例:组合物对犬急性屯、力衰竭的治疗作用
[0034] 1材料：动物--健康成年犬体重12.5~13.5kg。戊己比妥钢（Sigma,进口分装，规 格:25g);仪器美国BIC16导生理记录仪(美国BIC公司生产）；电磁流量计(MFV-3200型）：日 本光电公司生产。
[0035] 组合物的制备：将研磨之后过200目网的65mg化合物III的粉末和研磨之后过200 目网的35mg化合物IV的粉末装入带盖的小管中并用满轮揽拌仪混合即得到lOOmg组合物， 使用时用水溶解运lOOmg的组合物即得到组合物的溶液。
[0036] 2试验方法与结果
[0037] 将犬随机分为NS组（等容量溶剂），灌胃给药组合物l.Omg/kg组、化合物III l.Omg/kg组和化合物IV l.Omg/kg组，每组6只。禁食12小时后，静脉注射戊己比妥钢40mg/ kg麻醉，气管插管，人工呼吸，监测主动脉压(AP)与屯、电图。左侧开胸，从屯、尖插导管至左室 压及其压力变化速度（± dp/dtmax)。将Waltan-Rrodie应变弓植入左屯、室前壁，测定屯、肌收 缩力。用电磁流量计测定升主动脉血流量。W升主动脉流量作为屯、输出量(C0)，计算屯、脏指 数(CI)，每搏指数(SI)，每搏作功(SW)，左屯、作功(LVW)。各项参数记录与BIC生理记录仪。术 后半小时，各项参数达到稳定。从股静脉恒速输注戊己比妥钢（〇.5mL/kg -min)，W±^/ 化max下降到约lOOOmHg/s为主要指标形成急性屯、力衰竭。待急性屯、衰模型稳定后，各组动物 十二指肠给予相应药物。组间T检验，进行统计学处理。
[0038] 表1组合物对屯、力衰竭犬化/化的影响(n = 6)
[0039]
[0040] 与 NS 组比较，?p<0.05
[0041 ]表2组合物对屯、力衰竭犬屯、脏作功的影响(n = 6)
[0042]
[0043] 与给药前比较*p<0.05;与NS组比较?p<0.05
[0044] 结果如表1、2所示，组合物可显著增加屯、衰犬的SW、LVW、+化/dt(与模型组对照组 比较，p<〇.〇5)。化合物ΙΠ 和化合物IV不可显著增加屯、衰犬的SW、LVW、+化/化。
[0045] 表3组合物对屯、力衰竭犬屯、输出量的影响(n = 6)
[0046]
[0047] 与给药前比较*p<0.05;与NS组比较?p<0.05
[004引结果如表3所示，组合物可显著增加屯、衰犬的屯、输出量（与模型对照组比较，p< 0.05)。化合物ΠI和化合物IV不可显著增加屯、衰犬的屯、输出量。
[0049] 结论:组合物能够显著改善急性屯、衰，可W用来制备治疗或预防急性屯、衰的药物。 化合物ΠΙ和化合物IV不能显著改善急性屯、衰，不可用来制备治疗或预防急性屯、衰的药物。
[0050] (二)实验例组合物对慢性屯、衰大鼠的影响 [0051 ]试验方法与结果
[0化2] 大鼠50只，雌雄各半。10只作为正常对照组。40只腹腔注射盐酸阿霉素2mg/kg，每 周1次，共6周，第5周时随机分为4组，即正常NS组和3个灌胃给药2.5mg/kg组。灌胃给药组合 物2.5mg/kg组、化合物III 2.5mg/kg组和化合物IV 2.5mg/kg组在第5周起每日分别给予组 合物、化合物III和化合物IV灌胃各组，给药21天。20 %乌拉坦1.1 g/kg腹腔注射麻醉，手术 剥离气管并插管，同时游离出右侧总动脉，经其插入自制的屯、室插管(直径1mm，充满1%肝 素），描记血压曲线；再继续插入，使其通过左侧动脉瓣进入左屯、室，描记室内压曲线，自动 分析处理左室收缩压化VSP)，屯、室内压最大上升速率(+化/dtmax)，屯、室内压最大下降速度 (-dpMtmax)和实测屯、肌最大收缩速度(化m)等数据。另取10只大鼠作为正常对照组，不给予 盐酸阿霉素，其余操作同上述，组间T检验，进行统计学处理。
[0053]表4组合物对慢性屯、衰大鼠屯、功能的影响(η = 10)
[0化4]
[ο化5]
[0化6] 与NS组比较，α:ρ<〇.〇5
[0057] 表4试验结果表明组合物2.5mg/kg能显著升高由盐酸阿霉素导致的屯、衰大鼠的 LVSP，+dp/化max，-dp/化max和化m的降低（与NS组比较，P<0.05);化合物III 2.5mg/kg和化合 物IV 2.5mg/kg不能显著升高由盐酸阿霉素导致的屯、衰大鼠的LVSP，+dp/化max，-dp/化max和 化m的降低。
[005引结论:组合物具有显著的治疗或预防慢性屯、衰的作用，可W用来制备治疗或预防 慢性屯、衰的药物。化合物ΠΙ和化合物IV不具有显著的治疗或预防慢性屯、衰的作用，不可W 用来制备治疗或预防慢性屯、衰的药物。
[0059] 实施例6本发明所设及组合物片剂的制备
[0060] 取2克组合物，加入制备片剂的常规辅料18克，混匀，常规压片机制成100片。
[0061 ]实施例7本发明所设及组合物胶囊的制备
[0062]取2克组合物，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉18克，混匀，装胶囊制成100粒。
【主权项】
1. 一种组合物，其特征为该组合物由化合物III和化合物IV组成，该组合物中化合物 III和化合物IV的质量百分数分别为65%和35%，2. 如权利要求1所述的组合物的制备方法，其特征为:将化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照质量百分数分别为65 %和35 %充分混合。3. 如权利要求1所述的一种组合物在抗心衰药物中的应用。4. 如权利要求3所述的组合物在抗心衰药物中的应用，其特征在于:所述心衰为急性心 衰。5. 如权利要求4所述的组合物在抗心衰药物中的应用，其特征在于:所述组合物可以增 加急性心衰的心脏做功。6. 如权利要求4所述的一种组合物在抗心衰药物中的应用，其特征在于:所述组合物可 以增加急性心衰的心输出量。7. 如权利要求3所述的组合物在抗心衰药物中的应用，其特征在于:所述心衰为慢性心 衰。8. 如权利要求7所述的组合物在抗心衰药物中的应用，其特征在于:所述组合物可以增 加慢性心衰的左室收缩压。9. 如权利要求7所述的组合物在抗心衰药物中的应用，其特征在于:所述组合物可以增 加慢性心衰的心室内压最大上升速率。10. 如权利要求7所述的组合物在抗心衰药物中的应用，其特征在于:所述组合物可以 增加慢性心衰的心肌最大收缩速度。
【文档编号】C07D498/22GK105920007SQ201610279939
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月28日
【发明人】蒋登旭
【申请人】镇江玛珂荛生物医药科技有限公司