用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物及制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物，它由如下重量份数的原料制备得到:杜仲5?20份，丹参5?20份，郁金5?20份，茵陈5?20份，制大黄5?20份，栀子5?20份，黄芩5?20份，田基黄5?20份，云茯苓5?20份，白鲜皮5?20份。本发明还公开了上述用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方法。该制备方工艺简单可操作性强，提取效率高，最终产品的服用量小，质量可控，本发明的中药组合物具有补肾安胎、通瘀利胆、健脾化湿的作用，对妊娠期肝内胆汁淤积症的治疗效果好。
【专利说明】
用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物及制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物 组合物及制备方法。
【背景技术】
[0002] 妊娠期肝内胆汁齡积症（intrahepatic cholestasis of pregnancy, ICP)是妊娠 期特发的常见病，多发生于妊娠中、晚期，以皮肤瘙痒和黄疸为特征，国内发生率约为2%~ 4% <JCP对孕妇无明显危害，也不会遗留慢性肝脏病损，瘙痒和黄疸通常于产后1~2周可自 行消退。本病的主要危害在于对围产儿的不良影响。胆酸可以刺激子宫及蜕膜释放前列腺 素，过早激发子宫收缩，引起早产。资料显示，本病引起的早产发生率约为36%。由于胆酸的 影响还可引起胎盘绒毛间隙体积减少、滋养细胞水肿等病理改变，造成母儿间氧和营养物 质交换的障碍，导致胎儿宫内发育迟缓、胎儿宫内缺氧，甚至可发生胎死宫内的严重后果。 胎儿的宫内死亡常常是突然发生的，难以预测。资料显示，本病围产儿的死亡率约为正常妊 娠者的6~10倍。由于本病对围产儿的严重危害，已将本病列为高危妊娠，以引起人们对它 的重视，目前没有有效治疗本病药物。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的是提供一种用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物和制备 方法，降低了围产儿死亡及产后出血等并发症，改善了妊娠结局，且中药制剂易被孕产妇接 受，改药物组合物制备方法简单可操作性强，提取效率高，最终产品的服用量小，质量可控， 药效作用良好。本发明提供的技术方案为：
[0004] -种用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物，其原料组分按重量份数计 包括:杜仲5-20份，丹参5-20份，郁金5-20份，茵陈5-20份，制大黄5-20份，栀子5-20份，黄芩 5-20份，田基黄5-20份，云茯苓5-20份，白鲜皮5-20份。
[0005] 2、如权利要求2所述的用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方 法，其特征在于，包括以下步骤：
[0006] a)药液提取:将上述重量组分的杜仲、丹参、郁金、茵陈、制大黄、栀子、黄芩、田基 黄、云茯苓、白鲜皮药材混合均匀，加水煮沸提取三次，水的体积倍数分别为药材质量的10 倍、8倍、8倍，第一次提取3小时，第二次提取2小时，第三次提取2小时，合并三次提取液，过 滤，以每kg生药浓缩至2000-6000ml药液的浓缩比例进行浓缩，再滤取上清液；
[0007] b)提取液上柱吸附及洗脱:将步骤a)所得上清液用大孔吸附树脂柱进行吸附，弃 去流出液，用去离子水洗涤所述大孔吸附树脂柱至流出液为淡黄色，弃去流出液，然后用5-20%的C1-3醇作洗脱剂洗脱至流出液为淡黄色，弃去流出液，再用50-80%的C1-3醇洗脱至 洗脱液为淡黄色，收集洗脱液，将洗脱液减压回收并滤除去C1-3醇，以0.5-2g生药浓缩lml 回收液的浓缩比例进行浓缩，冷却；
[0008] c)提取物的制备:将步骤b)所得浓缩液过滤，浓缩，低温干燥后粉碎得到所需中药 组合物提取物。
[0009] 优选的是，在所述的用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方法 中，所述的C1-3醇为甲醇或乙醇。
[0010] 优选的是，在所述的用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方法 中，所述的大孔吸附树脂为D101型，HPD-100型，HPD-300型或AB-8型大孔吸附树脂。
[0011]优选的是，在所述的用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方法 中，所述中药组合物提取物制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂、软胶囊、滴丸、□服液、 分散片、泡腾片或咀嚼片。
[0012] 本发明的技术方案较现有技术有突出优点。本发明配方合理，本方临床疗效良好， 为妊娠期肝内胆汁淤积症患者提供了较为理想的药物。降低了围产儿死亡及产后出血等并 发症，改善了妊娠结局，且由于中药制剂易被孕产妇接受，广泛地应用于产科临床，以突出 的临床疗效为医院赢得了良好的社会及经济效益。本发明组合物制备工艺先进，按照本发 明方法制备得到的药物组合物提取物为固体粉末，质量稳定，使用方便，可制备多种口服药 物制剂。并且本发明方法工艺稳定，重现性好。
【具体实施方式】
[0013] 下面结合实施例对本发明再作描述，但不应以此限制本发明的保护范围。
[0014] -种用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物，其原料组分按重量份数计包 括:杜仲5-20份，丹参5-20份，郁金5-20份，茵陈5-20份，制大黄5-20份，栀子5-20份，黄芩5-20份，田基黄5-20份，云茯苓5-20份，白鲜皮5-20份。该中药组合物的制备方法包括以下步 骤：
[0015] a)药液提取:将上述重量组分的杜仲、丹参、郁金、茵陈、制大黄、栀子、黄芩、田基 黄、云茯苓、白鲜皮药材混合均匀，加水煮沸提取三次，水的体积倍数分别为药材质量的10 倍、8倍、8倍，第一次提取3小时，第二次提取2小时，第三次提取2小时，合并三次提取液，过 滤，以每kg生药浓缩至2000-6000ml药液的浓缩比例进行浓缩，再滤取上清液；
[0016] b)提取液上柱吸附及洗脱:将步骤a)所得上清液用大孔吸附树脂柱进行吸附，弃 去流出液，用去离子水洗涤所述大孔吸附树脂柱至流出液为淡黄色，弃去流出液，然后用5-20%的C1-3醇作洗脱剂洗脱至流出液为淡黄色，弃去流出液，再用50-80%的C1-3醇洗脱至 洗脱液为淡黄色，收集洗脱液，将洗脱液减压回收并滤除去C1-3醇，以0.5-2g生药浓缩lml 回收液的浓缩比例进行浓缩，冷却；
[0017] c)提取物的制备:将步骤b)所得浓缩液过滤，浓缩，低温干燥后粉碎得到所需中药 组合物提取物。
[0018] 其中，C1-3醇为甲醇或乙醇，大孔吸附树脂为D101型，HPD-100型，HPD-300型或AB-8型大孔吸附树脂，中药组合物提取物可以制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂、软胶 囊、滴丸、口服液、分散片、泡腾片或咀嚼片。
[0019] 通过实验研究本发明提供的药物对a-异硫氰酸萘酯致肝内胆汁淤积模型大鼠的 作用：
[0020] 实验动物
[0021] SD大鼠，雌性，清洁级，体重180-200g，由浙江省实验动物中心提供，生产许可证 号：SCXK(浙)2014-0001，饲养于南京中医药大学实验动物中心，使用许可证号：SYXK(苏） 2012-0042。饲养环境室温20-25°C，相对湿度40%-70%，自由饮水摄食。
[0022]实验方法
[0023] 1 造模
[0024]称取a-萘异硫氰酸酯1.2g，麻油溶解，定容至30mL，即为4%溶液，造模时灌胃给予 大鼠2 ? 5mL/kg( 100mg/kg)。单次给药，造模时间为48h。
[0025] 2分组和给药
[0026]将大鼠分为6组，分别为正常组、模型组、熊去氧胆酸组(45mg/kg)、本发明药物高 剂量组（18mL/kg)、本发明药物中剂量组(9mL/kg)、本发明药物低剂量组(4.5mL/kg)。各组 大鼠灌胃相应药物，正常组、模型组大鼠灌胃等体积生理盐水。每日给药一次，给药周期5d。 于第3d，将禁食12h的大鼠按1.3项方法造模。末次给药后lh，收集样本，进行检测。
[0027] 3检测指标
[0028] 3.1胆汁流量
[0029]末次给药后lh，麻醉大鼠（10%水合氯醛，3mL/kg)，仰位固定，沿腹中线切开，于十 二指肠处定位胆管并剥离周围组织，备线，胆管切口，插入聚乙烯管(PR0TEX，0.58mm ID， 0.96mm 0D)，止血钳夹闭伤口，覆盖生理盐水湿润的纱布，收集2h胆汁。用预先称重并编号 的EP管，按规定时间间隔收集2h内胆汁，胆汁量用差重法求得:胆汁量(g) = (含胆汁EP管质 量(g)_预先称重空白EP管质量(g))X1000。
[0030] 3.1生化指标检测
[0031]末次给药lh的大鼠，水合氯醛麻醉，于胆管插管前，眼眶取血，置于EP管中轻摇，4 °C过夜，1000g离心20分钟，收集上层血清，以全自动生化分析仪（7100,日立)检测血清中 TB、TBA、ALT、AST 及 ALP 的水平。
[0032] 3.3病理学分析
[0033]胆汁收集完成，处死大鼠，切取肝脏左外侧叶，甲醛（10%)固定，苏木精-伊红染色 (H-E染色），光镜下观察组织病理学变化，并评分统计。
[0034] 4统计学分析
[0035]实验数据采用SPSS 15.0软件统计分析，以单因素方差分析(AN0VA)进行多组间比 较，数据以均数土标准差(；±s:d：)表示。
[0036]实验结果
[0037] 1本发明药物对胆汁流量的影响
[0038]胆汁流量的检测结果表明，a-异硫氰酸萘酯可显著降低大鼠胆汁流量，与空白对 照组比较，其差异具有非常显著统计学意义(p〈〇. 01)。茵黄合剂高（18mL/kg)、中（9mL/kg)、 低(4.5mL/kg)剂量均可显著增加模型大鼠2h内的胆汁流量，与模型组比较，差异具有显著 统计学意义(P〈〇.05)，其作用呈一定剂量依赖性(见表1)。
[0040]表1.本发明药物对胆汁淤积模型大鼠胆汁流量的
[0041 ] 注:与空白对照组比较，##p〈0.01;与模型组比较Zp〈0.05广p〈0.01。
[0042] 2本发明药物对血液生化指标的影响
[0043]对血液生化指标的分析发现，a_异硫氰酸萘酯可显著升高大鼠血液中的ALT、AST、 ALP、TBIL和TBA，与空白对照组比较，差异存在极显著的统计学意义化〈0.01)。给予本发明 药物后，模型大鼠的上述指标均有明显改善，其中高剂量组大鼠的各项指标与模型组
[0044]大鼠相比，差异均有显著统计学意义(p〈0.05);中剂量组大鼠与模型组大鼠比较， 除ALP
[0045]外，ALT、AST、TBIL和TBA的差异存在显著统计学意义(p〈0.05);与模型组比较，低 剂
[0046]量组大鼠的ALT、AST和TBA三项指标的差异存在显著性统计学意义(p〈0.05)(见表 2)〇
[0048] 表2.本发明药物对胆汁淤积模型大鼠血清ALT、AST、ALP、TBIL、TBA的影响
[0049] 注:与空白对照组比较，##p〈0.01;与模型组比较Zp〈0.05广p〈0.01。
[0050] 3本发明药物对肝脏组织病理学的影响
[0051] 病理组织学检查结果发现，模型组大鼠肝脏可见肝细胞轻度脂肪变性、中度炎细 胞浸润及纤维结缔组织轻度增生。本发明药物各给药组大鼠肝脏亦均存在肝细胞轻度脂肪 变性。此外，高剂量组大鼠仅见少量炎细胞浸润，中剂量组大鼠见少量炎细胞浸润和纤维结 缔组织轻度增生，而低剂量组可见中度炎细胞浸润和纤维结缔组织轻度增生，其中中度炎 细胞浸润的例数少于模型组。病理学评分的结果发现，本发明药物各剂量组大鼠肝脏的病 理学评分均低于模型组，其中高、中剂量组与模型组比较，分值差异存在显著统计学意义(P <0.05)〇
[0052]【具体实施方式】：
[0053] 实施例一
[0054] 一种治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物，由以下药物组成:杜仲5份，丹参5 份，郁金5份，茵陈7份，制大黄8份，栀子10份，黄芩10份，田基黄20份，云茯苓5份，白鲜皮5 份。
[0055] -种治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物的制备方法，包括以下步骤:将以 上药材混合均匀，置于提取罐内，加水沸腾提取三次，每次加水体积分别为药材质量的10 倍、8倍、8倍，第一次提取3小时，第二次提取2小时，第三次提取2小时，合并三次提取液，以 筛网过滤，滤液置于减压蒸馏锅中减压浓缩至适量(每kg生药浓缩至2000ml药液），滤取上 清液;上清液以每分钟相当于树脂体积的1%流速上D101型大孔吸附树脂柱(树脂和药材的 质量比为1:1 )，弃去流出液，上柱结束；用去离子水适量洗涤至流出液为淡黄色，弃去流出 液;然后用5 %的乙醇作洗脱剂，弃去流出液;再用50 %的乙醇洗脱至流出液为淡黄色，收集 洗脱液，减压回收除去乙醇，浓缩至lml回收液相当于2g生药，冷却;浓缩液过滤，滤液浓缩 至干，置真空干燥箱中60°C减压干燥成块状，将干燥的块状物粉碎，得茵黄合剂中药组合物 提取物。
[0056] 将上述组合物按常规工艺加糊精等常规药用辅料混匀制颗粒剂。
[0057] 实施例二
[0058] 一种治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物，由以下药物组成:杜仲15份，丹参 15份，郁金15份，茵陈10份，制大黄9份，栀子10份，黄芩10份，田基黄15份，云茯苓10份，白鲜 皮15份。
[0059] -种治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物的制备方法，包括以下步骤:将以 上药材混合均匀，置于提取罐内，加水沸腾提取三次，每次加水体积分别为药材质量的10 倍、8倍、8倍，第一次提取3小时，第二次提取2小时，第三次提取2小时，合并三次提取液，以 筛网过滤，滤液置于减压蒸馏锅中减压浓缩至适量(每kg生药浓缩至2000ml药液），滤取上 清液;上清液以每分钟相当于树脂体积的2%流速上D101型大孔吸附树脂柱(树脂和药材的 质量比为1:1 )，弃去流出液，上柱结束；用去离子水适量洗涤至流出液为淡黄色，弃去流出 液;然后用10 %的乙醇作洗脱剂，弃去流出液;再用60 %的乙醇洗脱至流出液为淡黄色，收 集洗脱液，减压回收除去乙醇，浓缩至lml回收液相当于2g生药，冷却;浓缩液过滤，滤液浓 缩至干，置真空干燥箱中60°C减压干燥成块状，将干燥的块状物粉碎，得茵黄合剂中药组合 物提取物。
[0060] 将上述组合物按常规工艺加淀粉等常规药用辅料混匀制片剂。
[0061 ] 实施例三
[0062] 一种治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物，由以下药物组成：杜仲20份，丹 参20份，郁金20份，茵陈15份，制大黄10份，栀子10份，黄芩15份，田基黄16份，云茯苓16份， 白鲜皮16份。
[0063] -种治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的药物组合物的制备方法，包括以下步骤:将以 上药材混合均匀，置于提取罐内，加水沸腾提取三次，每次加水体积分别为药材质量的10 倍、8倍、8倍，第一次提取3小时，第二次提取2小时，第三次提取2小时，合并三次提取液，以 筛网过滤，滤液置于减压蒸馏锅中减压浓缩至适量(每kg生药浓缩至2000ml药液），滤取上 清液;上清液以每分钟相当于树脂体积的1%流速上D101型大孔吸附树脂柱(树脂和药材的 质量比为1:1 )，弃去流出液，上柱结束；用去离子水适量洗涤至流出液为淡黄色，弃去流出 液;然后用15 %的乙醇作洗脱剂，弃去流出液;再用80 %的乙醇洗脱至流出液为淡黄色，收 集洗脱液，减压回收除去乙醇，浓缩至lml回收液相当于2g生药，冷却;浓缩液过滤，滤液浓 缩至干，置真空干燥箱中60°C减压干燥成块状，将干燥的块状物粉碎，得茵黄合剂中药组合 物提取物。
[0064] 将上述组合物按常规方法加淀粉混匀制成颗粒、再加适量硬脂酸镁按规格制成胶 囊剂。
[0065] 尽管发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运 用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实 现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于 特定的细节和这里示出与描述的配比示例。
【主权项】
1. 一种用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物，其特征在于，其原料组分按重 量份数计包括:杜仲5-20份，丹参5-20份，郁金5-20份，茵陈5-20份，制大黄5-20份，栀子5-20份，黄芩5-20份，田基黄5-20份，云茯苓5-20份，白鲜皮5-20份。2. 如权利要求2所述的用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方法，其 特征在于，包括以下步骤： a) 药液提取:将上述重量组分的杜仲、丹参、郁金、茵陈、制大黄、栀子、黄芩、田基黄、云 茯苓、白鲜皮药材混合均匀，加水煮沸提取三次，水的体积倍数分别为药材质量的10倍、8 倍、8倍，第一次提取3小时，第二次提取2小时，第三次提取2小时，合并三次提取液，过滤，以 每kg生药浓缩至2000-6000ml药液的浓缩比例进行浓缩，再滤取上清液； b) 提取液上柱吸附及洗脱:将步骤a)所得上清液用大孔吸附树脂柱进行吸附，弃去流 出液，用去离子水洗涤所述大孔吸附树脂柱至流出液为淡黄色，弃去流出液，然后用5-20% 的C1-3醇作洗脱剂洗脱至流出液为淡黄色，弃去流出液，再用50-80%的C1-3醇洗脱至洗脱 液为淡黄色，收集洗脱液，将洗脱液减压回收并滤除去C1-3醇，以0.5-2g生药浓缩lml回收 液的浓缩比例进行浓缩，冷却； c) 提取物的制备:将步骤b)中所得浓缩液过滤，浓缩，低温干燥后粉碎得到所需中药组 合物提取物。3. 如权利要求2所述的用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方法，其 特征在于，所述中的C1-3醇为甲醇或乙醇。4. 如权利要求2所述的用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方法，其 特征在于，所述中大孔吸附树脂为D101型，HPD-100型，HPD-300型或AB-8型大孔吸附树脂。5. 如权利要求2所述的用于治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的中药组合物的制备方法，其 特征在于，所述中药组合物提取物制成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂、微丸剂、软胶囊、滴丸、 口服液、分散片、泡腾片或咀嚼片。
【文档编号】A61P1/16GK105853928SQ201610350378
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年5月24日
【发明人】席明名
【申请人】南京市妇幼保健院