用于预防或治疗卒中或神经变性疾病的包含作为活性成分的葛根和黄芩的复合提取物的 ...的利记博彩app
【专利摘要】本发明的组合物、健康功能食品或治疗方法具有显著的颅神经细胞保护作用，并且同时具有感觉运动功能恢复促进作用和体重增加作用。因此，本发明具有预防卒中或神经变性疾病、在疾病发作之后即刻在中期至长期内保护颅神经细胞、促进由卒中和神经变性疾病降低的感觉运动功能的恢复以及增加降低的体重的作用。因此，本发明可以用于有效地预防、治疗或管理卒中和神经变性疾病。
【专利说明】
用于预防或治疗卒中或神经变性疾病的包含作为活性成分的 葛根和黄芩的复合提取物的组合物
技术领域
[0001] 本发明涉及用于预防或治疗卒中或神经变性疾病的药物组合物和健康功能食品。
【背景技术】
[0002] 卒中是迅速发生的部分或全部脑功能病症的维系，并且存在由于脑血管闭塞而发 生的脑梗塞(缺血性卒中），以及当血液由于脑部血管破裂而渗漏入脑组织时发生的脑出血 (出血性卒中）。根据来自美国心脏协会(AHA)和美国卒中协会(ASA)的统计，缺血性卒中占 全球总卒中的约87 %。在国内，其于2000年增加至64.7 %并且于2009年增加至76.1% (Clinical Practice Guidelines for Stroke(修订版，2013. ISBN978-89-94181-14-1), 由Ministry of Health and Welfare指定的Clinical Research Center for Stroke)。
[0003] 缺血性卒中由于氧和营养供给截断而导致神经细胞死亡，因此发生诸如瘫痪、语 言障碍、感官障碍、记忆缺损等症状，这归因于神经细胞在细胞凋亡之前所负责的功能的障 碍或损失。卒中最常见的症状是运动障碍，例如肌肉减弱和受损侧的肢体瘫痪。
[0004] 迄今为止，FDA批准用于缺血性卒中的唯一药物是组织型纤溶酶原激活物(t-PA)， 其是血栓溶解剂。然而，应从卒中发作开始3小时内给药t-PA，因此仅有少数的患者可以得 以给药，而大部分患者由于延迟抵达和脑出血加剧的风险而不能得以给药。
[0005] 神经变性疾病包括其中脑神经细胞数量减少并且发生认知缺损和感觉运动缺损 的所有疾病。痴呆、阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、皮克病和克雅二氏病等是神经变性 疾病的类型。上述疾病由于各种原因和机制而发生，但共同表现出脑细胞的减少以及认知 缺损和感觉运动缺损。
【发明内容】
[0006] 技术问题
[0007] 本发明提供用于预防或治疗卒中或神经变性疾病的药物组合物和健康功能食品， 其同时具有颅神经细胞保护作用、感觉运动功能恢复促进作用和体重增加作用。
[0008] 技术方案
[0009] 本发明提供用于预防或治疗卒中或神经变性疾病的药物组合物，其包含作为活性 成分的葛根和黄芩的复合提取物。
[0010] 野葛（Pueraria lobata(Wi 1 Id . )0hwi )是多年生攀缘植物，并且属于豆科 (Leguminosae)，并且其根（葛根(Puerariae Radix))用于韩国和中国的草药医学。黄苳 (Scutellaria baicalensis)是多年生草本植物，并且属于唇形科(Labiatae)，并且其根 (黄零(Scutellariae Radix))用于韩国和中国的草药医学。
[0011] 在本发明的一些实施方案中，所述葛根和黄芩的复合提取物可以提取自混合物， 所述混合物包含100:1至1:100的重量比的葛根和黄芩。优选地，所述葛根和黄芩的复合提 取物可以提取自包含65重量％至95重量％的葛根和5重量％至35重量％的黄芩的混合物， 更优选地，所述葛根和黄芩的复合提取物可以提取自包含87.91重量％的葛根和12.09重 量％的黄芩的混合物。该组成比例是本发明人所进行的考察的结果，所述考察研究了具有 优异的颅神经细胞保护作用、感觉运动功能恢复促进作用和体重增加作用的组成比例。
[0012] 所述卒中包括缺血性卒中和出血性卒中，优选地，所述卒中涉及缺血性卒中。
[0013] 所述神经变性疾病可以是选自痴呆、阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、皮克病 和克雅二氏病中的至少一种。然而，所述神经变性疾病的类型不局限于以上。所述神经变性 疾病包括可以得益于本发明的组合物的任何疾病。
[0014] 本发明提供用于保护颅神经细胞和促进感觉运动功能恢复的组合物，其包含作为 活性成分的葛根和黄芩的复合提取物。
[0015] 本发明提供用于保护颅神经细胞、促进感觉运动功能恢复和增加体重的组合物， 其包含作为活性成分的葛根和黄芩的复合提取物。患有卒中和神经变性疾病的患者经常表 现出重量减轻。例如，患有卒中的患者由于吞咽困难所造成的经口营养供给不足而倾向于 迅速地减轻他们的重量，并且已经报道在卒中后的重量减轻不利地影响患者并延迟他们的 康复。本发明的葛根和黄芩的复合提取物具有增加由卒中降低的体重的作用，因此其可以 用于患有卒中和神经变性疾病的患者的康复。
[0016] 本发明的组合物具有颅神经细胞保护作用，因此其可以预防卒中和神经变性疾 病，或者在卒中和神经变性疾病发作之后即刻对那些疾病具有治疗作用。此外，所述组合物 还具有促进由卒中和神经变性疾病降低的感觉运动功能的恢复的作用，以及具有在中期至 长期内增加降低的体重的作用。因此，本发明可以用于有效地预防、治疗或管理卒中和神经 变性疾病。
[0017] 本发明的药物组合物包含作为活性成分的葛根和黄芩的复合提取物，并且可以基 于使用目的（即，预防或医学治疗)确定所述活性成分的适当比例。通常，可以基于所述组合 物的总重量，以0.0001重量％至1〇〇重量％的比例添加所述葛根和黄芩的复合提取物。
[0018] 可以经口或胃肠外给药本发明的组合物。优选地，其可以是胃肠外给药，更优选 地，其可以是静脉内给药。当配制时，可以使用诸如填充剂、增量剂、粘合剂、湿润剂、崩解 剂、表面活性剂等的常用稀释剂或者赋形剂。
[0019] 用于胃肠外给药的制剂包括无菌水溶液、非水性溶剂、混悬剂、乳剂、冻干制剂和 栓剂。诸如丙二醇、聚乙二醇、植物油和油酸乙酯的可注射的酯可以用作非水性溶剂和混悬 剂。Witepsol、聚乙二醇、吐温61、可可脂、月桂酸甘油酯、甘油和明胶可以用作栓剂的基质 材料。可以通过皮下注射、静脉注射或肌肉内注射来胃肠外地给药本发明的药物组合物。
[0020] 本发明的药物组合物的剂量可以根据患者的状态、体重、疾病进展、药物形式以及 给药的途径和持续时间而改变。其可以由本领域技术人员适当地选择。然而，为了实现期望 的作用，可以以每天〇·〇〇〇lmg/kg至2000mg/kg、优选每天0 · lmg/kg至1000mg/kg的剂量给药 本发明的组合物。给药可以一天进行一次，或每天分成几次。然而，上文中说明的所述剂量 不限制本发明的范围。
[0021] 本发明的组合物可以单独使用，或与用于预防或治疗卒中或神经变性疾病的手 术、激素疗法、化学疗法和生物应答调节剂疗法联合使用。
[0022] 本发明提供用于预防或改善卒中或神经变性疾病的健康功能食品，其包含作为活 性成分的葛根和黄芩的复合提取物。
[0023] 在本发明的一些实施方案中，所述葛根和黄芩的复合提取物可以提取自混合物， 所述混合物包含以100:1至1:100的重量比的葛根和黄芩。优选地，所述葛根和黄芩的复合 提取物可以提取自包含65重量％至95重量％的葛根和5重量％至35重量％的黄芩的混合 物，更优选地，所述葛根和黄芩的复合提取物可以提取自包含87.91重量％的葛根和12.09 重量％的黄芩的混合物。
[0024] 本发明提供用于保护颅神经细胞、促进感觉运动功能恢复和增加体重的健康功能 食品，其包含作为活性成分的葛根和黄芩的复合提取物。
[0025] 优选通过包括以下步骤的方法(但不限于此方法)来制备本发明的葛根和黄芩的 复合提取物：
[0026] (1)从易根和黄零去除异物，清洗并将其粉碎；
[0027] (2)向经清洗并粉碎的葛根和黄芩的混合物添加提取溶剂，并且对其提取；
[0028] (3)在减压下浓缩提取物；
[0029] (4)过滤浓缩物；以及
[0030] (5)干燥经过滤的提取物。
[0031]优选将步骤(1)中的清洗重复1次至5次。
[0032]步骤(2)中的提取可以是振荡提取、索氏提取(soxhlet extraction)或回流提取， 但不限于此。所述提取溶剂可以是水、Ch醇或其混合物。最优选通过使用乙醇来进行热水 提取。优选基于所制备的葛根和黄芩的总重量，通过添加3至10倍的所述提取溶剂来进行提 取。
[0033] 可以通过加压来进行所述热水提取。压力优选为l.latm至2.0atm，更优选为 1·2atm至1·5atm〇
[0034] 此外，所述热水提取优选使用60°C至100°C、更优选80°C至90°C的水。此外，提取持 续时间优选为2小时至24小时，并且提取重复1次至5次。
[0035] 对于步骤(3)中的浓缩，优选使用真空蒸发器或旋转真空蒸发器。优选将步骤(3) 的提取物浓缩至具有高于40 %的固体含量。
[0036] 步骤(5)中的干燥可以是在减压下干燥、真空干燥、沸腾干燥、喷雾干燥或冷冻干 燥，但不限于此。
[0037] 本发明的健康功能食品包含作为活性成分的葛根和黄芩的复合提取物，并且可以 基于使用目的（即，预防、改善或医学治疗)确定所述活性成分的适当比例。通常，可以基于 所述健康功能食品的总重量，以0.0001重量％至1〇〇重量％的比例添加所述葛根和黄芩的 复合提取物。
[0038] 此外，对所述健康功能食品的类型没有特别的限制。本发明可以以饮料、口香糖、 复合维生素 （vitamin complex)、酒精制剂(drink preparation)等形式应用。其包括所有 类型的常规健康功能食品。
[0039] 当制备饮料形式的本发明的健康功能食品时，其中可以额外地包含各种调味剂或 天然碳水化合物等以作为常规饮料。所述天然碳水化合物可以是:糖，包括诸如葡萄糖、果 糖等的单糖;诸如麦芽糖、蔗糖等的二糖;诸如葡聚糖、环糊精等的多糖；以及诸如木糖醇、 山梨醇、赤藓糖醇等的糖醇。还可以使用其他调味剂，例如糖精、阿司帕坦等。
[0040] 本发明的健康功能食品可以包含各种营养补充剂、维生素、矿物质（电解质）、调味 剂(包括合成调味剂和天然调味剂）、着色剂和增强剂（即，奶酪、巧克力等）、果胶酸及其盐、 藻酸及其盐、有机酸、防护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定剂、防腐剂、甘油、乙醇、用于碳酸 饮料的碳酸化剂(carbonator)等。
[0041] 本发明的健康功能食品可以单独使用，或与用于预防或治疗卒中或神经变性疾病 的手术、激素疗法、化学疗法和生物应答调节剂疗法联合使用。
[0042] 本发明提供预防、改善或治疗卒中或神经变性疾病的方法，其通过向需要治疗的 个体给药治疗有效量的所述葛根和黄芩的复合提取物。
[0043] 本发明提供保护颅神经细胞、促进感觉运动功能恢复和增加体重的方法，其通过 向需要治疗的个体给药治疗有效量的所述葛根和黄芩的复合提取物。
[0044] 在本发明的一些实施方案中，所述葛根和黄芩的复合提取物可以提取自混合物， 所述混合物包含以100:1至1:100的重量比的葛根和黄芩。优选地，所述葛根和黄芩的复合 提取物可以提取自包含65重量％至95重量％的葛根和5重量％至35重量％的黄芩的混合 物，更优选地，所述葛根和黄芩的复合提取物可以提取自包含87.91重量％的葛根和12.09 重量％的黄芩的混合物。
[0045] 术语"需要治疗的个体"是指包括人类在内的哺乳动物，并且术语"给药"是指通过 任何合适的方法向患者提供期望的物质。术语"治疗有效量"是指引起来自动物或人类的生 物或医学应答(其被研究人员、兽医、医生或其他临床医师认为如此）的活性成分或药物组 合物的量。其包括能引起正被治疗的疾病或病症的症状缓解的量。对本领域技术人员显而 易见的是，本发明的活性成分的治疗有效量和给药频率可以根据期望的作用而改变。
[0046] 本发明提供所述葛根和黄芪的复合提取物在制备用于治疗卒中或神经变性疾病 的药物制剂中的用途。本发明的用途可以应用于用于保护颅神经细胞、促进感觉运动功能 恢复和增加体重的药物制剂的制备。
[0047] 在本发明的一些实施方案中，所述葛根和黄芩的复合提取物可以提取自混合物， 所述混合物包含以100:1至1:100的重量比的葛根和黄芩。优选地，所述葛根和黄芩的复合 提取物可以提取自包含65重量％至95重量％的葛根和5重量％至35重量％的黄芩的混合 物，更优选地，所述葛根和黄芩的复合提取物可以提取自包含87.91重量％的葛根和12.09 重量％的黄芩的混合物。
[0048] 所述药物组合物、所述健康功能食品、所述治疗方法以及所述用于制备药物制剂 的用途对脑缺血具有颅神经细胞保护作用，并且同时具有显著的感觉运动功能恢复促进作 用和体重增加作用。换言之，对于由于脑缺血造成的卒中的治疗的时间窗，上述作用还包括 预防在卒中发作之后几天出现的迟发性神经元死亡的颅神经细胞保护作用，并且同时包括 在卒中的急性期之后恢复感觉运动功能和增加体重的作用。促进感觉运动功能恢复和增加 体重的作用具有与颅神经细胞保护作用不同的机制，因此还未开发出同时具有这些作用的 药物。
[0049] 通过大脑中动脉闭塞的大鼠模型证实了所述药物组合物、所述健康功能食品、所 述治疗方法以及所述制备药物制剂的用途的作用。迄今为止，对由脑缺血引发的神经元死 亡有两种广泛已知的机制。一种是刺激性神经元死亡机制(Kang TC等人，J.Neurocytol.， 30:945-955,2001)，其中细胞中钙的过量蓄积(此由脑缺血造成的细胞外过量蓄积的谷氨 酸盐的流入而导致）引起神经元死亡，而另一种是氧化性神经元死亡(Won MH等人，Brain Res.,836:70-78,1999；Sub AY.,Chen YM.J.Biomed.Sci.,5:401-414,1998；Flowers F, Zimmerman JJ.New Horiz.6:169-180,1998)，其中由于体内自由基的增加（由缺血再灌注 时突然的氧供给导致)造成的对DNA和细胞质的损伤引起神经元死亡。所述动物模型足以观 察对由脑缺血导致的神经元死亡的预防或治疗作用，因为氧化性神经元死亡和刺激性神经 元死亡都发生在该模型中。
[0050] 有益效果
[0051] 本发明的组合物、健康功能食品或治疗方法具有显著的颅神经细胞保护作用，并 且同时具有感觉运动功能恢复促进作用和体重增加作用。因此，本发明具有预防卒中或神 经变性疾病、在疾病发作之后即刻在中期至长期内保护颅神经细胞、促进由卒中和神经变 性疾病降低的感觉运动功能的恢复以及增加降低的体重的作用。因此，本发明可以用于有 效地预防、治疗或管理卒中和神经变性疾病。
【附图说明】
[0052] 图1的图示出在对照、葛根提取物给药组、黄芩提取物给药组以及葛根和黄芩的复 合提取物给药组中大鼠的梗塞体积。
[0053]图2的图示出假手术组、对照、葛根和黄芩的复合提取物给药组(30mg/kg)以及葛 根和黄芩的复合提取物给药组(l〇〇mg/kg)的延迟时间（到从旋转棒落下为止的时间）。 [0054]图3的图示出假手术组、对照、葛根和黄芩的复合提取物给药组（100mg/kg)以及葛 根和黄芩的复合提取物给药组(300mg/kg)的神经学分数。
[0055]图4的图示出假手术组、对照、葛根和黄芩的复合提取物给药组(30mg/kg)以及葛 根和黄芩的复合提取物给药组(l〇〇mg/kg)的重量变化。
【具体实施方式】
[0056] 本发明人观察了多种中草药对治疗卒中或神经变性疾病的作用，并且作为该观察 的结果，本发明人通过动物MCAo模型证实了包含作为活性成分的所述葛根和黄芩的复合提 取物的组合物对由于脑缺血而造成的神经细胞损伤具有显著的颅神经细胞保护作用，并且 同时具有优异的感觉运动功能恢复促进作用和体重增加作用，因此完成本发明。
[0057] 在下文将参考所附的实施例来更充分地描述本发明。然而，本发明可以以许多不 同的形式实施，并且不应解释为其限于本文所述的实施方案。
[0058]〈实施例1>葛根和黄芩的复合提取物的制备
[0059]野葛的根(下文称为"葛根"）和黄芩的根(下文称为"黄苳"）购自Yaksudang草药商 店(Dongdaemun-gu，Seoul)。通过混合87 · 91g粉碎的葛根和12 · 09g粉碎的黄苳来制备混合 物。向混合物添加10倍的30%乙醇（1L)。通过在90°C初次热水提取3小时来提取混合物，在 室温下静置2小时至3小时，然后过滤。由此得到的滤液设定为初次提取物。再次向提取器中 添加30%乙醇（1L)，并通过在80°C至90°C下二次热水提取3小时来进行提取。将提取物在室 温下静置2小时至3小时，并过滤。由此得到的滤液设定为二次提取物。将初次提取物和二次 提取物混合并在50°C至60°C下于减压下浓缩，直至其达到20白利糖度(brix)。通过使用预 冷冻箱在-45°C将所得的浓缩物预冷冻20分钟，并且通过使用冷冻干燥器来冻干，制得粉状 浓缩物。
[0060] 〈比较例1>葛根提取物的制备
[0061] 以与实施例1相同的方式通过提取100g葛根来制备葛根提取物。
[0062] 〈比较例2>黄芩提取物的制备
[0063]以与实施例1相同的方式通过提取100g黄芩来制备黄芩提取物。
[0064]在以下表1中描述了实施例1以及比较例1和2中的葛根提取物和黄芩提取物的含 量。
[0067]〈实验例1>动物模型的准备 [0068] 〈1_1>实验动物的准备
[0069] 饲养约300g的雄性8周龄Sprague-Dawley大鼠 （Samtako Inc ·，Republic of Korea)，并且接受足够的饲料和水以适应实验环境。给大鼠约1周以用于适应，然后进行动 物实验。
[0070] 〈1-2>动物模型的准备
[0071] 通过应用Zea Longa等人的方法（Longa EZ,Weinstein PR,Carlson S,Cummins R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.Stroke;a journal of cerebral circulation.l989;20(l):84_91·)来诱导局部脑 出血。通过使用混合气体(70 % N20和30 % 02)和5 %异氟烷将在实验例〈1-1 >中准备的大鼠全 身麻醉，然后通过切开颈部的中心前部皮肤来从周围组织和神经中分离左颈动脉和颈外动 脉(ECA)。将甲状腺上动脉和喉动脉（即，颈外动脉的分支）以及翼腭动脉（即，颈内动脉的分 支）电灼烧。将颈外动脉切开，并且将探针(D 〇CC〇l，RedlandS，CA，USA)通过颈外动脉插入颈 内动脉，但将探针插到距颈总动脉分叉处约18mm至19_处，并用线固定。将切开的皮肤再缝 合上，并且使大鼠休息以从麻醉自然恢复。在诱导60分钟之后以相同方式再次将大鼠麻醉， 并且通过拉回探针进行再灌注。在手术显微镜下进行所有手术操作，同时保持异氟醚为 2%，并且用于保持体温的装置用来保持体温不降至低于37±0.5°C。
[0072 ]〈实施例2>通过使用动物模型比较实施例1和比较例1 -2的颅神经细胞保护作用 [0073]以与〈实验例1>相同的方式对大鼠诱导大脑中动脉闭塞，持续90分钟。将大鼠分成 4组。在诱导后立即分别向第一组一次经口给药100mg/kg的载剂(5%DMS0)，向第二组一次 经口给药1 〇〇mg/kg的比较例1的葛根提取物，向第三组一次经口给药100mg/kg的比较例2的 黄芩提取物，以及向第四组一次经口给药l〇〇mg/kg的实施例1的葛根和黄芩的复合提取物。 在从再灌注开始24小时后出于人道处死大鼠，并且在2分钟内回收脑。通过使用大鼠脑基质 将回收的脑切成2mm厚的6个切片。将脑切片浸入包含2%的2,3,5_三苯基氯化四唑(TTC)溶 液的12孔板中，并且在37°C染色30分钟。通过使用数码相机拍摄染色的脑切片，然后通过使 用Image Pro plus 5.0(其是图像分析软件）来测量梗塞体积。通过下式计算梗塞体积 (%)〇
[0074]梗塞体积（％ ) = (A-B/A) X 100 [0075] A:正常的左半脑体积(mm3)
[0076] B:受损的脑梗塞区域的体积(mm3)
[0077]与对照相比，葛根和黄芩的复合提取物给药组的梗塞体积显著降低了47.9% (p〈 0.05)。然而，与对照相比，葛根给药组和黄芩给药组没有表现出统计学显著的作用（图1)。 在以下表2中描述上述实验的结果。
[0078][表 2]
[0080] *Ρ〈〇·〇5
[0081] 〈实施例3>使用动物模型观察复合提取物对感觉运动功能损伤的功能恢复促进作 用
[0082] 以与〈实验例1>相同的方式对大鼠诱导大脑中动脉闭塞，持续60分钟。将大鼠分成 4组:假手术组、对照、实施例1的葛根和黄芩的复合提取物给药组(30mg/kg)以及实施例1的 葛根和黄芩的复合提取物给药组（l〇〇mg/kg)。在手术后三天，向复合提取物给药组每天一 次经口给药5ml/kg的体积的复合提取物，或者，对于假手术组和对照，每天一次经口给药 5ml/kg的体积的载剂(5%DMS0)，持续14天。
[0083]为了评价大鼠的运动协调和平衡改变，在手术前一天以及手术后1周、2周、3周和4 周，通过应用 Jones BJ 等人的方法（Jones BJ, Roberts DJ.The quantitative measurement of motor inco-ordination in naive mice using an acelerating rotarod.The Journal of pharmacy and pharmacology. 1968;20(4) :302-4.)来进行旋转 棒测试。使用旋转棒的加速版本，其中将旋转棒(B1001，B.S Technolab INC.,R印ublic of Korea)从5rpm至30rpm旋转5分钟。将大鼠放置在棒的中部，同时保持其平衡，并且测量大鼠 从棒落下的延迟时间。每一大鼠进行测试5次。弃去最高和最低值，并且对剩余的三个值求 平均值。
[0084]在手术前一天以及手术后1周、2周、3周和4周进行旋转棒测试，以观察复合提取物 改善感觉运动功能损伤的作用，并且由此获得的结果示于图2中。作为测量手术前每组的延 迟时间的结果，假手术组、对照、葛根和黄芩的复合提取物给药组(30mg/kg)以及葛根和黄 芩的复合提取物给药组（l〇〇mg/kg)分别表现出296.0 ± 2.6秒、283.9 ± 9.7秒、278.9 ± 11.7 秒、284.4 ± 6.6秒的延迟时间。证实在每组之间没有差异。当在大脑中动脉闭塞手术之后1 周测量延迟时间时，对于对照，与假手术组相比，延迟时间迅速降低（137.2±30.3秒对比 253.8± 13.8秒，p〈0.05)。然而，其中给药葛根和黄芩的复合提取物的组的延迟时间与对照 的延迟时间相比相对更长。在2周之后，将葛根和黄芩的复合提取物给药组与对照进行比 较，证实葛根和黄芪的复合提取物给药组的延迟时间与对照的延迟时间相比增加到1.6倍 (210.2±23.6秒对比129.3±20.8秒，口〈0.05)。
[0085]〈实施例4>观察复合提取物对神经学损伤的恢复促进作用 [0086]将大鼠分成5组:假手术组、对照、葛根和黄芩的复合提取物给药组（30mg/kg)、葛 根和黄芩的复合提取物给药组（l〇〇mg/kg)以及葛根和黄芩的复合提取物给药组（300mg/ kg)，并且以与〈实验例1>相同的方式对大鼠诱导大脑中动脉闭塞，持续60分钟。从手术后4 天，每天一次向组经口给药5ml/kg的体积的复合提取物，持续14天。对于假手术组和对照， 以与复合提取物给药组相同的方式给药载剂(5%DMS0)。
[0087] 在手术后的第7天、第14天和第21天进行mNSS(改良的神经学严重性评分 (Neurological Severity Score))测试，通过应用HS Kim的方法（Kim HS.Histological and Functional Changes after Transplantation of Human Mesenchymal Stem Cell in the Ischemic Rat Model.Kor J Cerebrovascular Surgery·2005;7( 1):61-8·)来评 价神经学功能。更高的分数对应于更严重的功能障碍，0意指正常，而7是最高的神经学分 数。
[0088] 在图3中示出在手术后1周、2周和3周进行的mNSS测试的结果。在脑缺血诱导之后1 周测量的对照的mNSS分数与假手术组的mNSS分数相比显著增加 (4.3±0.6对比1.6±0.2，p 〈0.05)。在脑缺血诱导之后2周测量的葛根和黄芩的复合提取物给药组(300mg/kg)的mNSS 分数为3.1±0.5,并且其与对照的分数4.5±0.4相比显著降低(p〈0.05)。在脑缺血诱导之 后3周测量的葛根和黄芩的复合提取物给药组（100mg/kg和300mg/kg)的mNSS分数分别为 3.1 ±0.4和2.9±0.4,并且证实这些与对照的分数4.5±0.5相比是显著降低的分数(在每 一情况下，P〈〇.〇5)。
[0089]〈实施例5>观察复合提取物对重量减轻的改善作用
[0090]将大鼠分成4组:假手术组、对照、葛根和黄芩的复合提取物给药组(30mg/kg)以及 葛根和黄芩的复合提取物给药组（l〇〇mg/kg)，并且以与〈实验例1>相同的方式对大鼠诱导 大脑中动脉闭塞，持续60分钟。从手术后3天，每天一次向组经口给药5ml/kg的体积的复合 提取物，持续14天。对于假手术组和对照，以与复合提取物给药组相同的方式给药载剂(5% DMS0)。
[0091 ]从手术开始日起，每天在相同时间测量体重，直至实验结束，即，在手术后28天。
[0092] 在图4中示出从手术开始日起直至实验结束所测量的每一组的体重变化。在手术 前即刻（第〇天)测量的体重在各组之间无显著性差异。在手术之后，对照的体重迅速降低。 其在第4天为258.3±9.(^，这与初始重量302.7±1.2 8相比是降低14.7%的重量。直至第10 天，在假手术组与对照之间存在体重的显著差异。葛根和黄芩的复合提取物给药组（l〇〇mg/ kg)的体重在给药之后开始增加，并且从第7天至第28天（当结束实验室时）与对照的体重相 比表现出显著的差异。详言之，在诱导的第14天，给予葛根和黄芩的复合提取物给药组 (100mg/kg)的体重为359 · 8 ± 6 · 7g，其与假手术组的体重(359 · 0 ± 13 · 0g)几乎相近。
[0093] 工业实用性
[0094]本发明可以有效地预防、治疗或改善卒中或神经变性疾病。
【主权项】
1. 用于预防或治疗卒中或神经变性疾病的药物组合物，其包含作为活性成分的葛根和 黄芩的复合提取物。2. 如权利要求1所述的药物组合物，其中所述葛根和黄芩的复合提取物提取自包含65 重量％至95重量％的葛根和5重量％至35重量％的黄芩的混合物。3. 如权利要求2所述的药物组合物，其中所述葛根和黄芩的复合提取物提取自包含 87.91重量％的葛根和12.09重量％的黄芩的混合物。4. 如权利要求1所述的药物组合物，其中所述神经变性疾病选自痴呆、阿尔茨海默病、 帕金森病、亨廷顿病、皮克病和克雅二氏病。5. 用于预防或改善卒中或神经变性疾病的健康功能食品，其包含作为活性成分的葛根 和黄芩的复合提取物。6. 如权利要求5所述的健康功能食品，其中所述葛根和黄芩的复合提取物提取自包含 65重量％至95重量％的葛根和5重量％至35重量％的黄芩的混合物。7. 如权利要求6所述的健康功能食品，其中所述葛根和黄芩的复合提取物提取自包含 87.91重量％的葛根和12.09重量％的黄芩的混合物。8. 如权利要求5所述的健康功能食品，其中所述神经变性疾病选自痴呆、阿尔茨海默 病、帕金森病、亨廷顿病、皮克病和克雅二氏病。9. 用于保护神经元和促进感觉运动功能恢复的药物组合物，其包含作为活性成分的葛 根和黄芩的复合提取物。10. 如权利要求9所述的药物组合物，其中所述组合物用于增加体重。11. 用于保护神经元和促进感觉运动功能恢复的健康功能食品，其包含作为活性成分 的葛根和黄芩的复合提取物。12. 如权利要求11所述的健康功能食品，其中所述健康功能食品用于增加体重。
【文档编号】A61P25/00GK105848665SQ201480066796
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2014年10月8日
【发明人】金頀哲, 宋贞彬, 崔真圭
【申请人】庆熙大学校产学协力团